CN113925867A - 盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶在制备抗肿瘤药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种盐酸决奈达隆联合5‑氟尿嘧啶在制备抗肿瘤药物中的应用，药效学实验证明盐酸决奈达隆联合5‑氟尿嘧啶可以有效抑制人肝癌细胞株HepG2，PLC/PRF/5，Hep3B增殖。单独使用盐酸决奈达隆可有效抑制人肝癌细胞株HepG2，PLC/PRF/5，Hep3B增殖，单独使用盐酸决奈达隆可有效抑制人肺癌细胞系SPC‑A1、A549以及小鼠肺癌细胞系Lewis增殖。此外，盐酸决奈达隆联合5‑氟尿嘧啶可抑制小鼠肝癌移植瘤模型中肿瘤的生长。盐酸决奈达隆联合抗肿瘤药物用于治疗肝癌及肺癌具有安全、有效等特点，可用于制备治疗肝癌及肺癌药物，为临床治疗肝癌和肺癌提供了新的治疗策略。

Description

盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶在制备抗肿瘤药物中的应用

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶在制备治疗肝癌和肺癌药物中的应用。

背景技术

肝癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤，中国的肝癌患者占全球的一半左右。每年大约有84.1万新发肝癌患者，78.2万死亡肝癌患者。中国是肝癌大国，我国肝癌发病率为26.92/10万，死亡率23.72/10万。肝癌的发病率和死亡率在我国恶性肿瘤中分别排列第四位和第二位。肝癌具有早诊困难、进展迅速，预后较差等特征，我国肝癌总体五年生存率仅12.5％，严重威胁我国人民的生命和健康。目前，针对食管癌术后复发的预防以放射治疗和化学疗法为主，但是放射治疗和化学治疗后所带给机体的严重副作用，使得放、化疗在延续患者生命的同时也加重了患者的预后不良情况。并且肝癌患者的5年生存率依旧没有得到显著地提高。肺癌是目前全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，肺癌占男性发病率和死亡率第一位，女性发病率第二位和死亡率第一位。尽管在疾病早期阶段进行手术切除和有效的辅助有不错的治疗效果，但由于患者预后较差且早期诊断率较低，且放射治疗和化学治疗对机体产生严重的副作用，导致肺癌仍是威胁患者生命健康的一大癌症。因此，目前急需发现新的治疗肝癌和肺癌的治疗手段。

盐酸决奈达隆是治疗心律失常的药物，其化学名为N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐。中文名为盐酸决奈达隆，英文名为Dronedarone Hydrochloride，CAS登记号141625-93-6，分子量为593.22。其药理作用于胺碘酮相似，盐酸决奈达隆亦为多通道的抑制剂，对钠、钾、钙离子通道和β受体等均有阻滞作用。盐酸决奈达隆可延长心肌动作电位时程，减慢房室传导速率，减慢窦性心律；同时还具有明显的负性肌力作用，在心输出量不变的情况下可增加左室舒末压，但不会改变左室射血分数或缩短分数。5-氟尿嘧啶临床主要用于治疗消化道肿瘤，或较大剂量氟尿嘧啶治疗绒毛膜上皮癌。同时常用于治疗乳腺癌、卵巢癌、肺癌、宫颈癌、膀胱癌及皮肤癌等。

发明内容

本发明目的在于提供新的联合用药以治疗肝癌和肺癌，盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶在制备抗肿瘤药物中的新应用，为临床治疗肝癌和肺癌提供了新的方案，可以降低盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶的用药量，提升盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶的抗肿瘤作用，减少毒副作用。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是，盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶在制备抗肿瘤药物中的应用，所述抗肿瘤药物为治疗肝癌和/或肺癌的药物。

进一步，所述抗肿瘤药物的剂型包括药剂学上可接受的任意一种剂型。

优选地，所述剂型包括口服剂型和注射剂型。

进一步，所述盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶两种单独的制剂同时施用或两种单独的制剂依次施用。

优选地，所述盐酸决奈达隆用药量为20mg/kg/天～100mg/kg/天，所述5-氟尿嘧啶用药量为20mg/kg/天～100mg/kg/天。

本发明还提供了一种抗肿瘤的联合用药物组合物，包括盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶。所述盐酸决奈达隆与5-氟尿嘧啶的用量比例为1:1-1:5。

本发明盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶可有效抑制人肝癌细胞HepG2、PLC/PRF/5、Hep3B增殖，单独使用盐酸决奈达隆可有效抑制人肝癌细胞株HepG2，PLC/PRF/5，Hep3B增殖，并且单独使用盐酸决奈达隆可有效抑制人肺癌细胞系SPC-A1、A549以及小鼠肺癌细胞系Lewis增殖。盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶用量比1:4，1:3，1:2，1:1抑制人肝癌细胞Huh7和人肺癌细胞A459细胞增殖的效应优于单独使用盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶。以上结果表明盐酸决奈达隆联合抗肿瘤药物对肝癌细胞和肺癌细胞具有抑制作用。此外，联合使用盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶可明显抑制小鼠肝癌移植瘤模型中肿瘤的生长，并抑制小鼠肝癌移植瘤模型中肿瘤生长的效应优于单独使用5-氟尿嘧啶。其中联合应用抗肿瘤药物包括但不限于5-氟尿嘧啶，肿瘤包括但不限于肝癌、肺癌。

盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶，在本发明的用量比例范围内，两者具有明显的协同作用，有效提高疗效，相对于单一组分或两组分简单疗效叠加更显著，提高了对肿瘤细胞的杀伤性。在保证同样治疗效果的情况下，盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶的联合使用可以降低彼此的用药量，从而减少毒副作用。此外，盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶的联合使用还可节约成本，减轻病人的经济负担，本发明为肿瘤的防治提供了一条新途径，在医药学领域的应用前景广阔。

附图说明

图1为盐酸决奈达隆可抑制人肝癌细胞HepG2、PLC/PRF/5、Hep3B增殖，图中各浓度下的柱形条从左到右依次是HepG2、PLC/PRF/5、Hep3B。

图2为盐酸决奈达隆可抑制人肺癌细胞SPC-A1、A549以及小鼠肺癌细胞Lewis增殖，图中各浓度下的柱形条从左到右依次是SPC-A1、A549、Lewis。

图3为盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶可抑制人肝癌细胞HepG2、PLC/PRF/5、Hep3B增殖，图中各浓度下的柱形条从左到右依次是HepG2、PLC/PRF/5、Hep3B。

图4为不同用量比的盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶可抑制人肝癌细胞Huh7增殖。

图5为不同用量比的盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶可抑制人肺癌细胞A549增殖。

图6为联合使用盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶可抑制小鼠肝癌移植瘤模型中肿瘤生长的效应。

具体实施方式

以下通过实验例来进一步阐述本发明药物的有益效果，但是本发明不限于这些具体实施例。

实施例中使用的实验材料和仪器

1.实验材料

1.1主要试剂及药物

盐酸决奈达隆购自于华夏试剂，批号为2016031601，CAS号141625-93-6；5-氟尿嘧啶购自于碧云天公司，货号为ST1060；DMEM高糖培养基，购自于Thermo Fisher公司，货号为11965092；胎牛血清购自于Thermo Fisher公司，货号10099141；DMSO购自于Sigma公司，货号为D2650；CCK-8试剂盒购自于博士德，货号为AR1199。

1.2主要仪器和耗材

Thermo Fisher公司CO₂细胞培养箱(Heracell，160i)，Thermo Fisher公司多功能微孔板读数仪(Varioskan LUX)，细胞培养瓶、96孔细胞培养板购自于无锡耐思生命科技股份有限公司。

实施例1

细胞增殖实验

取对数期生长的人肝癌细胞HepG2、PLC/PRF/5、Hep3B，人肺癌细胞SPC-A1、A549以及小鼠肺癌细胞Lewis，按照5×10³个细胞/孔接种于96孔中培养，每孔100μl含有10％FBS的DMEM高糖培养基，置于5％CO₂，37℃的细胞培养箱中培养过夜。分别加入终浓度为5μM，10μM，20μM的盐酸决奈达隆，100μM的5-氟尿嘧啶，以及10μM的盐酸决奈达隆+100μM的5-氟尿嘧啶，对照组加入等体积的DMSO，每孔100μl DMEM高糖培养基。置于5％CO₂，37℃的细胞培养箱中培养24小时。每孔加入10μl CCK-8溶液。在细胞培养箱中继续孵育0.5小时。在450nm处测定吸光度。计算公式：细胞存活率＝[(实验孔-空白孔)/(对照孔-空白孔)]×100％，实验孔(含有细胞的培养基、CCK-8、待测物质)，对照孔(含有细胞的培养基、CCK-8、没有待测物质)，空白孔(不含细胞和待测物质的培养基、CCK-8)。计算统计各组细胞存活率。结果显示，盐酸决奈达隆浓度在5μM-20μM之间，可抑制人肝癌细胞HepG2、PLC/PRF/5、Hep3B和人肺癌细胞系SPC-A1、A549以及小鼠肺癌细胞系Lewis增殖，如图1和图2所示，并且呈剂量依赖性。盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶抑制肝癌细胞抑制率为HepG2(93.41％)、PLC/PRF/5(97.06％)、Hep3B(98.10％)，如图3所示。说明联合使用盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶能够有效抑制肝癌细胞增殖。

取对数期生长的人肝癌细胞Huh7，人肺癌细胞A549，按照5×10³个细胞/孔接种于96孔中培养，每孔100μl含有10％FBS的DMEM高糖培养基，置于5％CO₂，37℃的细胞培养箱中培养过夜。分别加入终浓度为10μM的盐酸决奈达隆，100μM 5-氟尿嘧啶，10μM盐酸决奈达隆+50μM 5-氟尿嘧啶，10μM盐酸决奈达隆+40μM 5-氟尿嘧啶，10μM盐酸决奈达隆+30μM 5-氟尿嘧啶，10μM盐酸决奈达隆+20μM 5-氟尿嘧啶，10μM盐酸决奈达隆+10μM 5-氟尿嘧啶，对照组加入等体积的DMSO。结果显示，与对照组相比，10μM盐酸决奈达隆+50μM 5-氟尿嘧啶，10μM盐酸决奈达隆+40μM 5-氟尿嘧啶，10μM盐酸决奈达隆+30μM 5-氟尿嘧啶，10μM盐酸决奈达隆+20μM 5-氟尿嘧啶，10μM盐酸决奈达隆+10μM 5-氟尿嘧啶可抑制人肝癌细胞Huh7和人肺癌细胞A459增殖，如图4和图5所示，并且抑制肿瘤细胞增殖效应优于10μM的盐酸决奈达隆以及100μM 5-氟尿嘧啶。盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶用量比优选于1:5，1:4，1:3，1:2，1:1。

实施例2

盐酸决奈达隆治疗肝癌移植瘤小鼠模型

根据前期细胞实验结果，选取盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶用量比1:1.5，在体内水平检测抑制肿瘤增殖能力。取对数期生长的人肝癌细胞Huh7，制成细胞悬液，每微升含1×10⁴个细胞。注入100μl细胞悬液裸鼠背部皮下，待肿瘤长至15mm，将荷瘤小鼠随机分为三组。一组为溶剂对照组(含5％DMSO的生理盐水)，二组为盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶组(20mg/kg盐酸决奈达隆，30mg/kg 5-氟尿嘧啶，盐酸决奈达隆、5-氟尿嘧啶溶于含5％DMSO的生理盐水中)，三组为5-氟尿嘧啶组(30mg/kg，盐酸决奈达隆溶于含5％DMSO的生理盐水中)。按照分组每天腹腔注射药物进行治疗，每隔一天测量瘤体积。瘤体积＝(长径×短径×短径)/2。当对照组小鼠瘤组织达到1000mm³时，终止实验，取出肿瘤组织，称量肿瘤重量并拍照记录。如图6所示。单独使用30mg/kg 5-氟尿嘧啶可抑制肿瘤体积，而联合使用20mg/kg盐酸决奈达隆和30mg/kg 5-氟尿嘧啶能够明显抑制肿瘤体积。说明联合使用盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶可有效抑制瘤体积，发挥抗肿瘤作用。盐酸决奈达隆与5-氟尿嘧啶的用量比例优选1:5-1:1。

Claims (9)

1.盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶在制备抗肿瘤药物中的应用。

2.根据权利要求1所述盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于：所述抗肿瘤药物为治疗肝癌和/或肺癌的药物。

3.根据权利要求1或2所述盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于：所述抗肿瘤药物的剂型包括药剂学上可接受的任意一种剂型。

4.根据权利要求3所述盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于：所述剂型包括口服剂型和注射剂型。

5.根据权利要求1或2所述盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于：所述盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶两种单独的制剂同时施用或两种单独的制剂依次施用。

6.根据权利要求5所述盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于：所述盐酸决奈达隆用药量为20mg/kg/天～100mg/kg/天，所述5-氟尿嘧啶用药量为20mg/kg/天～100mg/kg/天。

7.一种抗肿瘤的联合用药物组合物，其特征在于：包括盐酸决奈达隆和5-氟尿嘧啶。

8.根据权利要求7所述一种抗肿瘤的联合用药物组合物，其特征在于：所述肿瘤包括肝癌和肺癌。

9.根据权利要求7所述一种抗肿瘤的联合用药物组合物，其特征在于：所述盐酸决奈达隆与5-氟尿嘧啶的用量比例为1:1-1:5。

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