CN102552908A - 含青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂的药物组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种含有青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的药物组合物及其在制备治疗结肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌或前列腺癌的药物中的应用，本发明药物组合物具有显著的协同效应，提高了药物的疗效，降低了给药剂量，减少了副作用的发生。
Description
技术领域
本发明涉及一种药物组合物及其在制备治疗癌症的药物中的应用，具体涉及含有青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂的药物组合物及其在制备治疗结肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌或前列腺癌的药物中的应用。
背景技术
世界卫生组织调查报告表明，全球癌症状况日益严重，今后20年新患者的人数将由目前的每年1000万增加到1500万，因癌症而死亡的人数也将由每年的600万增加至1000万。原发性肝癌为发生在肝细胞与肝内胆管上皮细胞的癌变，是人类最常见的恶性肿瘤之一；结肠癌的发病与环境、生活习惯，尤其是饮食方式有关，一般认为高脂肪饮食和纤维素不足是主要发病原因。随着生活水平的提高，饮食结构的改变，结肠癌的发病率呈逐年上升趋势；胰腺癌多发生于胰头部，90％来源于胰管上皮细胞，其余来自胰腺腺泡，为消化系统常见的恶性肿瘤；肉瘤属恶性肿瘤，肉瘤来源于间叶组织，可发生于任何组织器官，多发生于年轻人，恶性程度高，愈后差。目前手术是主要治疗方法，仅横纹肌肉瘤、尤文氏瘤、部分骨肉瘤等极少数肉瘤有较好疗效外，其余肉瘤疗效均不理想；肾癌全称为肾细胞癌，是泌尿生殖系常见恶性肿瘤之一，约占成人恶性肿瘤的3％左右，占癌症死亡的2％，在人体12大实体恶性肿瘤中排在第十位。肾癌是泌尿系致死率最高的肿瘤，约40％的肾癌患者会因癌死亡；乳腺癌跟人体内的雌性激素有关。乳腺癌的发病，与患者的遗传基因、生活习惯、常用食物、生育状况等紧密相关，不同人种、地域的乳腺癌 发病率有着明显的区别。乳腺癌已经成为全球女性发病率最高的恶性肿瘤，随着国民经济发展和人民生活水平提高，中国乳腺癌的发病率和死亡率都呈迅猛上升态势。
目前已上市的抗肿瘤药物较多，如烷化剂药物、抗代谢药物、抗肿瘤抗生素、免疫调节剂等，但是大多药物由于毒性较大，病人不耐受。大量的临床实践证明，中药或中西医结合能有效治疗恶性肿瘤，同时能减轻放化疗的毒副作用。运用现代医学手段，发现一些活性天然产物能有效抑制肿瘤细胞的生长，有诱导细胞凋亡的作用。目前使用的众多抗生素和抗肿瘤药物或直接来源于天然产物，或经其结构改造而得。因此，安全性高的活性天然产物运用于临床以治疗癌症将具有广阔的前景。随着对肿瘤的发生发展的分子机制研究越来越清楚，分子靶向治疗多种恶性肿瘤受到了广泛的关注和高度重视。分子靶向药物选择性高、广谱有效，其安全性优于细胞毒性化疗药物，是目前肿瘤治疗领域发展的新方向。
青蒿素是含有过氧桥的新型倍半萜内酯，其衍生物有青蒿琥酯、蒿甲醚和双氢青蒿素等。青蒿素及其衍生物是一类高效、低毒的抗疟药物，随着研究的深入，人们发现青蒿素及青蒿素类化合物还具有其它很多重要的药理活性，如抗血吸虫、免疫调节、抗心律失常、抗肿瘤等，尤其是其抗肿瘤作用，越来越引起研究者们的重视。很多实验研究表明，青蒿素及青蒿素类化合物对多种肿瘤细胞的生长具有显著的抑制作用，而且对正常组织细胞的毒性很低，作用机制可能与肿瘤细胞内自由基的产生及氧化应激，延迟细胞周期，诱导细胞凋亡和抗肿瘤血管生成有关。双氢青蒿素是青蒿素类药物中活性较强的衍生物，青蒿琥酯是青蒿素最重要的衍生物之一，具有水溶性好，青蒿琥酯抗肿瘤机理与其对肿瘤细胞株有直接杀伤作用、或与诱导细胞凋亡有关，还可能与其抑制肿瘤组织血管生成等有关。青蒿素及青蒿素类药物可以选择性杀伤肿瘤细胞，并且与传统化疗药不存在交叉耐药，能够逆转肿瘤细胞的多药耐药现象。
细胞凋亡(程序细胞死亡)是机体清除异常或不需要的细胞的自然途径，若其受到影响则可能导致各种疾病如癌症的发生。Bcl-2家族蛋白 是凋亡的重要调节剂，其中Bcl-2和Bcl-xL在多种类型的肿瘤中过量表达，被认为可能与肿瘤的发生、发展及耐药性产生有关，故针对Bcl-2和Bcl-xL抗凋亡蛋白的药物开发成为近年来抗肿瘤治疗的研究热点。ABT-263和ABT-737是由美国雅培(Abbott)制药开发的小分子Bcl-2抑制剂，对多种肿瘤作用显著，且可口服使用，具有良好的应用前景。
随着肿瘤分子生物学的研究进展，肿瘤分子靶向治疗已成为肿瘤研究的热点，在多种肿瘤的治疗中发挥了重要的作用。然而，大部分肿瘤的生物学行为并非由单一信号传导通路所支配，而是多个信号传导通路共同起作用的，中医药以其多基因多靶点的作用优势正日益受到关注。因此合理的联合用药，有单用药物不可比拟的优越性，联合用药针对多靶点进行靶向治疗将不仅旨在减少或延缓耐药性的出现、降低毒性，而且通过多种药物对癌细胞杀伤的协同作用取得更好的疗效。
发明内容
针对以上技术缺陷，本发明提供一种药物组合物及其在制备治疗结肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌或前列腺癌的药物中的应用，具体为含有青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂的药物组合物及其在制备治疗结肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌或前列腺癌的药物中的应用。
本发明含有青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂的药物组合物中，所述青蒿素及青蒿素类衍生物可以为青蒿素、青蒿琥酯、双氢青蒿素、蒿甲醚或蒿乙醚；Bcl-2抑制剂可以为ABT-263或ABT-737，或两者相应的结构类似物、衍生物。
本发明药物组合物中的青蒿素及青蒿素类衍生物优选为青蒿琥酯、双氢青蒿素，其相应的结构式分别如式I、式II所示。
本发明药物组合物中，所述组分不限于青蒿琥酯和双氢青蒿素药物本身，还可以是其可药用的盐、水合物或衍生物等。
本发明中，所述Bcl-2抑制剂可以为任何结构类型的Bcl-2抑制剂的药物，优选为ABT-263或ABT-737。
其中ABT-263为US 2007027135中所记载的式III所示的化合物：
其中ABT-737为WO2005049594和WO2005049593中所记载的式IV所示的化合物：
本发明药物组合物中，所述组分不限于上述ABT-263和ABT-737本身，还可以是它们的水合物、类似物、衍生物及其它有机或无机的盐。
本发明含有青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂的药物组合物中，青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂的摩尔比为2.5-25.0∶0.25-10.0；进一步优选青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为5.0-12.5∶0.5-5.0。
本发明含有青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂的药物组合物可以用于治疗各种肿瘤，所述肿瘤包括但不限于结肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌或前列腺癌。
本发明优选青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂的药物组合物用于制备治疗肝癌、肉瘤、结肠癌、胰腺癌、肾癌及乳腺癌的药物中的应用。
本发明药物组合物在制备治疗肝癌或肉瘤的药物中的应用中，青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为5.0-10.0∶0.75-2.0；优选青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为7.5-10.0∶1.5-2.0；更进一步优选青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为10.0∶2.0。
本发明药物组合物在制备治疗结肠癌的药物中的应用中，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为5.0-12.5∶0.5-5.0。其中，在制备治疗HCT-116类型结肠癌的药物的应用中，所述Bcl-2抑制 剂为ABT-263时，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为5.0-10.0∶0.75-1.5；进一步优选所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为7.5-10.0∶1.0-1.5；最佳为所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为10.0∶1.5；所述Bcl-2抑制剂为ABT-737时，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-737的摩尔比为5.0-10.0∶1.0-5.0；进一步优选所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-737的摩尔比为7.5-10.0∶3.0-5.0；最佳为所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-737的摩尔比为10.0∶5.0。在制备治疗DLD1类型结肠癌的药物的应用中，所述Bcl-2抑制剂为ABT-263时，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为5.0-12.5∶0.5-1.25；进一步优选所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为7.5-12.5∶0.75-1.25；最佳为所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为12.5∶1.25。
本发明药物组合物在制备治疗胰腺癌的药物中的应用中，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为5.0-10.0∶0.5-5.0。其中，在制备治疗Panc-1类型胰腺癌的药物的应用中，所述Bcl-2抑制剂为ABT-263时，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为5.0-10.0∶0.75-1.5；进一步优选所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为7.5-10.0∶1.0-1.5；最佳为所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为10.0∶1.5；所述Bcl-2抑制剂为ABT-737时，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-737的摩尔比为5.0-10.0∶2.0-5.0；进一步优选所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-737的摩尔比为7.5-10.0∶3.0-5.0；最佳为所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-737的摩尔比为10.0∶5.0。在制备治疗Panc-10.05类型胰腺癌的药物的应用中，所述Bcl-2抑制剂为ABT-263时，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为5.0-10.0∶0.5-1.5；进一步优选所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为7.5-10.0∶1.0-1.5；最佳为所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为10.0∶1.5。
本发明药物组合物在制备治疗肾癌的药物中的应用中，青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为5.0-10.0∶0.5-1.25；优选青 蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为7.5-10.0∶0.75-1.25；更进一步优选青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为10.0∶1.25。
本发明药物组合物在制备治疗乳腺癌的药物中的应用中，青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为5.0-10.0∶0.75-1.5；优选青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为7.5-10.0∶1.0-1.5；更进一步优选青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为10.0∶1.5。
含有青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂组合物在制备治疗结肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌或前列腺癌的药物的应用中，在将本发明组合物制成同时给药的药剂的方案中，青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂可以含在同一种药物制剂如片剂或胶囊中，也可以将青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂分别做成制剂，如分别做成片剂或胶囊，并采用本领域常规的方式将它们包装或结合在一起，患者然后按照药品说明书的指示同时服用；在将本发明组合物制成先后给药的药剂的方案中，可以将青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂分别做成不同的制剂，并采用本领域常规的方式将它们包装或结合在一起，患者然后按照药品说明书指示的先后顺序进行服用，或将上述组合物中的两种成分制成一种控释的制剂，先释放组合物中的一种成分、然后再释放组合物中的另一种成分，患者只需要服用该控释组合物制剂；在将本发明组合物制备成交叉给药的药剂的方案中，可以将青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂分别做成不同的制剂，并采用本领域常规的方式将它们包装或结合在一起，患者然后按照药品说明书指示的交叉顺序服用，或者将该药物组合物制备成青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂交叉释放的控释制剂。
青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂组合物在制备治疗结肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌或前列腺癌的药物中的应用中，所述组合物中的青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂可以同时使用或以任何先后的顺序使用，如可以将青蒿素及 青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂同时给患者服用；也可以先将青蒿素及青蒿素类衍生物药物给患者服用、然后服用Bcl-2抑制剂，或先服用Bcl-2抑制剂、然后服用青蒿素及青蒿素类衍生物药物，对于两者服用的时间间隔没有特别要求，但优选服用两种药物的时间间隔不超过一天；或者两种药物交替给药。
本发明中，可将本发明青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂采用本领域常规的方法制备成适于胃肠道给药或非胃肠道给药的药物制剂，本发明优选将青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂制成胃肠道给药的药物制剂，其制剂形式可以为常规片剂或胶囊、或控释、缓释制剂。在本发明青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂组合物的药物制剂中，根据不同的制剂形式和制剂规格，所述组合物在制剂中的含量可以为质量计为1-99％，优选为10％-90％；制剂使用的辅料可采用本领域常规的辅料，以不和本发明组合物发生反应或不影响本发明药物的疗效为前提；所述制剂的制备方法可采用本领域常规的制备方法进行制备。
本发明中，组合物的制备方法没有特别限制，青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂两者可以进行直接混合然后做成制剂，或分别和/或相应的辅料混合分别做成制剂，然后再按照本领域常规的方式包装在一起，或分别和相应的辅料混合然后再混合做成制剂。
本发明中的药物组合物的给药剂量根据给药对象、给药途径或药物的制剂形式不同可以进行适当的变化，但以保证该药物组合物在哺乳动物体内能够达到有效的血药浓度为前提。
本发明分别进行了青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂组合杀死Hep3B(肝癌细胞株)、U2-OS(肉瘤细胞株)、HCT-116、DLD1(结肠癌细胞株)、Panc-1、Panc-10.05(胰腺癌细胞株)、ACHN(肾癌细胞株)和T47D(乳腺癌细胞株)的试验，结果表明，本发明青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂组合治疗肝癌、肉瘤、结肠癌、胰腺癌、肾癌及乳腺癌具有显著的协同效应，提高了药物的疗效，降低了用药剂量，减少了副作用的发生。
具体实施方式
结合以下实施例对本发明作进一步的阐述，但本发明并不受限于此。
实施例
试剂和方法：
细胞：Hep3B(肝癌细胞株)、U2-OS(肉瘤细胞株)、HCT-116、DLD1(结肠癌细胞株)、Panc-1、Panc-10.05(胰腺癌细胞株)、ACHN(肾癌细胞株)和T47D(乳腺癌细胞株)，均购自American Type Culture Collection(ATCC)，Rockville，MD，USA。
药品：以下实施例中所用药物组合物均按下列方法1或方法2所述来制备；青蒿素及青蒿素类衍生物购自Sigma；Bcl-2抑制剂均按文献合成而得，ABT-263和ABT-737合成参考文献为：Synthesis，15，2398-2404，WO2005049594，WO2005049593和US2007027135。
方法1：准确称量相应的药物组合物的各组分，以二甲基亚砜分别溶解，各自配成10mM的贮存液，在-20℃下保存，使用时用新鲜的培养基稀释到合适的浓度，然后各自取1微升的各组分的溶液，混合在一起备用。所有的试验中，二甲基亚砜的最终浓度应≤5g/L，以便不影响细胞的活性。
将所有的细胞于含10％小牛血清、100kU/L青霉素、100mg/L链霉素的RPMI 1640培养基中，37℃、5％CO2的湿度条件下培养，在加药的前一天，在六孔板上进行细胞接种2×105/孔，然后向细胞中加入按上述方法制备的药物组合物溶液，使各组分达到其工作浓度，具体见表1中第1-30。
药物处理后，通过台盼蓝(Trypan Blue)测定细胞死亡，细胞通过在37℃用胰蛋白酶钠/EDTA进行胰酶化作用10分钟。因为死亡的细胞从培养器上脱落进入培养基中，通过在1200转/分钟下离心收集所有的细胞，然后再用培养基重新悬浮沉淀物，与台盼蓝染料混合。染色之后，用光学显微镜和血细胞计数器进行计数。被染料染成蓝色的计为死亡细胞。随机选取500个细胞进行计数，死亡的细胞以占总计数细胞的百分比来表达。
方法2：准确称量相应的药物组合物的各组分，以二甲基亚砜分别溶解，各自配成10mM的贮存液，在-20℃下保存。使用时用新鲜的培养基稀释到合适的浓度，然后各自取1微升的各组分的溶液备用。所有的试验中，二甲基亚砜的最终浓度应≤5g/L，以便不影响细胞的活性。
将所有的细胞于含10％小牛血清、100kU/L青霉素、100mg/L链霉素的RPMI 1640培养基中，37℃、5％CO2的湿度条件下培养，在加药的前一天，在六孔板上进行细胞接种2×105/孔，然后以任意次序向细胞中加入按上述方法制备的药物组合物的各组分溶液，使各组分达到其工作浓度，具体见表1中第31-60。
药物处理后，通过台盼蓝(Trypan Blue)测定细胞死亡，细胞通过在37℃用胰蛋白酶钠/EDTA进行胰酶化作用10分钟。因为死亡的细胞从培养器上脱落进入培养基中，通过在1200转/分钟下离心收集所有的细胞，然后再用培养基重新悬浮沉淀物，与台盼蓝染料混合。染色之后，用光学显微镜和血细胞计数器进行计数。被染料染成蓝色的计为死亡细胞。随机选取500个细胞进行计数，死亡的细胞以占总计数细胞的百分比来表达。
下列表1所示的药物组合中，第1-30的组合按方法1制备，第31-60的组合按方法2制备。
表1
实施例1不同比例的青蒿琥酯与ABT-263的组合协同增效促进Hep3B细胞死亡试验，见表2。
表2
在考察相关化合物导致肝癌细胞株Hep3B细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM青蒿琥酯或更低浓度、2.0μM ABT-263或更低浓度时只有约10％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM青蒿琥酯+1.5μM ABT-263)则产生明显的协同作用，导致39％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+2.0μM ABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致59％的癌细胞死亡。
实施例2不同比例的双氢青蒿素与ABT-263的组合协同增效促进Hep3B细胞死亡试验，见表3。
表3
在考察相关化合物导致肝癌细胞株Hep3B细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM双氢青蒿素或更低浓度、2.0μM ABT-263或更低浓度时只有约13％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM双氢青蒿素+1.5μM ABT-263)则产生明显的协同作用，导致42％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM双氢青蒿素+2.0μM ABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致63％的癌细胞死亡。
实施例3不同比例的青蒿琥酯与ABT-263的组合协同增效促进U2-OS细胞死亡试验，见表4。
表4
在考察相关化合物导致肉瘤细胞株U2-OS细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM青蒿琥酯只有约20％的细胞死亡，单独使用2.0μMABT-263或更低浓度时只有很少量的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM青蒿琥酯+1.5μM ABT-263)则产生明显的协同作用，导致44％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+2.0μM ABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致76％的癌细胞死亡。
实施例4不同比例的双氢青蒿素与ABT-263的组合协同增效促进U2-OS细胞死亡试验，见表5。
表5
在考察相关化合物导致肉瘤细胞株U2-OS细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM双氢青蒿素只有约20％的细胞死亡，单独使用2.0μMABT-263或更低浓度时只有很少量的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM双氢青蒿素+1.5μMABT-263)则产生明显的协同作用，导致48％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM双氢青蒿素+2.0μMABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致81％的癌细胞死亡。
实施例5不同比例的青蒿琥酯与ABT-263的组合协同增效促进HCT-116细胞死亡试验，见表6。
表6
在考察相关化合物导致结肠癌细胞株HCT-116细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM青蒿琥酯或1.5μMABT-263时只有约20％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM青蒿琥酯+1.0μMABT-263)则产生明显的协同作用，导致63％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+1.5μMABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致92％的癌细胞死亡。
实施例6不同比例的双氢青蒿素与ABT-263的组合协同增效促进HCT-116细胞死亡试验，见表7。
表7
在考察相关化合物导致结肠癌细胞株HCT-116细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM双氢青蒿素或1.5μM ABT-263时只有约20％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM双氢青蒿素+1.0μMABT-263)则产生明显的协同作用，导致56％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM双氢青蒿素+1.5μM ABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致94％的癌细胞死亡。
实施例7不同比例的青蒿琥酯与ABT-737的组合协同增效促进HCT-116细胞死亡试验，见表8。
表8
在考察相关化合物导致结肠癌细胞株HCT-116细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM青蒿琥酯或5.0μMABT-737时只有约20％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM青蒿琥酯+3.0μMABT-737)则产生明显的协同作用，导致51％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+5.0μM ABT-737的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致85％的癌细胞死亡。
实施例8不同比例的双氢青蒿素与ABT-737的组合协同增效促进HCT-116细胞死亡试验，见表9。
表9
在考察相关化合物导致结肠癌细胞株HCT-116细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM双氢青蒿素或5.0μM ABT-737时只有约20％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM双氢青蒿素+3.0μMABT-737)则产生明显的协同作用，导致54％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM双氢青蒿素+5.0μMABT-737的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致91％的癌细胞死亡。
实施例9不同比例的青蒿琥酯与ABT-263的组合协同增效促进DLD1细胞死亡试验，见表10。
表10
在考察相关化合物导致结肠癌细胞株DLD1细胞死亡的试验中，发现当单独使用12.5μM青蒿琥酯时只有很少量的细胞死亡，单独使用1.25μMABT-263时也只有约20％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM青蒿琥酯+0.75μM ABT-263)则产生明显的协同作用，导致51％的癌细胞死亡；当两者以12.5μM青蒿琥酯+1.25μM ABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致84％的癌细胞死亡。
实施例10不同比例的双氢青蒿素与ABT-263的组合协同增效促进DLD1细胞死亡试验，见表11。
表11
在考察相关化合物导致结肠癌细胞株DLD1细胞死亡的试验中，发现当单独使用12.5μM双氢青蒿素时只有约10％的细胞死亡，单独使用1.25μM ABT-263时也只有约20％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM双氢青蒿素+0.75μMABT-263)则产生明显的协同作用，导致56％的癌细胞死亡；当两者以12.5μM双氢青蒿素+1.25μM ABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致87％的癌细胞死亡。
实施例11不同比例的青蒿琥酯与ABT-263的组合协同增效促进Panc-1细胞死亡试验，见表12。
表12
在考察相关化合物导致胰腺癌细胞株Panc-1细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM青蒿琥酯或1.5μM ABT-263时也只有约15％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM青蒿琥酯+1.0μM ABT-263)则产生明显的协同作用，导致54％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+1.5μM ABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致81％的癌细胞死亡。
实施例12不同比例的双氢青蒿素与ABT-263的组合协同增效促进Panc-1细胞死亡试验，见表13。
表13
在考察相关化合物导致胰腺癌细胞株Panc-1细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM双氢青蒿素或1.5μM ABT-263时只有约15％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM双氢青蒿素+1.0μMABT-263)则产生明显的协同作用，导致49％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM双氢青蒿素+1.5μMABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致84％的癌细胞死亡。
实施例13不同比例的青蒿琥酯与ABT-737的组合协同增效促进Panc-1细胞死亡试验，见表14。
表14
在考察相关化合物导致胰腺癌细胞株Panc-1细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM青蒿琥酯时只有约15％的细胞死亡，单独使用5.0μMABT-737时也只有约10％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM青蒿琥酯+3.0μM ABT-737)则产生明显的协同作用，导致42％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+5.0μM ABT-737的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致79％的癌细胞死亡。
实施例14不同比例的双氢青蒿素与ABT-737的组合协同增效促进Panc-1细胞死亡试验，见表15。
表15
在考察相关化合物导致胰腺癌细胞株Panc-1细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM双氢青蒿素时只有约20％的细胞死亡，单独使用5.0μM ABT-737时也只有约10％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM双氢青蒿素+3.0μM ABT-737)则产生明显的协同作用，导致52％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM双氢青蒿素+5.0μM ABT-737的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致86％的癌细胞死亡。
实施例15不同比例的青蒿琥酯与ABT-263的组合协同增效促进Panc-10.05细胞死亡试验，见表16。
表16
在考察相关化合物导致胰腺癌细胞株Panc-10.05细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM青蒿琥酯或1.5μM ABT-263时只有约25％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM青蒿琥酯+1.0μMABT-263)则产生明显的协同作用，导致49％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+1.5μM ABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致78％的癌细胞死亡。
实施例16不同比例的双氢青蒿素与ABT-263的组合协同增效促进Panc-10.05细胞死亡试验，见表17。
表17
在考察相关化合物导致胰腺癌细胞株Panc-10.05细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM双氢青蒿素或1.5μM ABT-263时只有约25％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM双氢青蒿素+1.0μMABT-263)则产生明显的协同作用，导致52％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM双氢青蒿素+1.5μMABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致77％的癌细胞死亡。
实施例17不同比例的青蒿琥酯与ABT-263的组合协同增效促进ACHN细胞死亡试验，见表18。
表18
在考察相关化合物导致肾癌细胞株ACHN细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM青蒿琥酯或1.25μMABT-263时只有约20％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM青蒿琥酯+0.75μM ABT-263)则产生明显的协同作用，导致47％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+1.25μM ABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致71％的癌细胞死亡。
实施例18不同比例的双氢青蒿素与ABT-263的组合协同增效促进ACHN细胞死亡试验，见表19。
表19
在考察相关化合物导致肾癌细胞株ACHN细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM双氢青蒿素或1.25μMABT-263时只有约20％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM双氢青蒿素+0.75μM ABT-263)则产生明显的协同作用，导致52％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM双氢青蒿素+1.25μM ABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致75％的癌细胞死亡。
实施例19不同比例的青蒿琥酯与ABT-263的组合协同增效促进T47D细胞死亡试验，见表20。
表20
在考察相关化合物导致乳腺癌细胞株T47D细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM青蒿琥酯时只有约20％的细胞死亡，单独使用1.5μMABT-263时只有约10％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM青蒿琥酯+1.0μMABT-263)则产生明显的协同作用，导致51％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+1.5μMABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致84％的癌细胞死亡。
实施例20不同比例的双氢青蒿素与ABT-263的组合协同增效促进T47D细胞死亡试验，见表21。
表21
在考察相关化合物导致乳腺癌细胞株T47D细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM双氢青蒿素时只有约20％的细胞死亡，单独使用1.5μMABT-263时也只有约10％的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(7.5μM双氢青蒿素+1.0μMABT-263)则产生明显的协同作用，导致57％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+1.5μM ABT-263的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致80％的癌细胞死亡。
尽管上述实施例已经对本发明的技术方案进行了详细地描述，但是本发明的技术方案并不限于以上实施例，在不脱离本发明的思想和宗旨的情况下，对本发明的技术方案所做的任何改动都将落入本发明的权利要求书所限定的范围。
Claims (14)
1.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为2.5-25.0∶0.25-10.0，优选所述青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为5.0-12.5∶0.5-5.0。
3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述青蒿素及青蒿素类衍生物为青蒿素、青蒿琥酯、双氢青蒿素、蒿甲醚或蒿乙醚；所述Bcl-2抑制剂为ABT-263或ABT-737。
4.权利要求1-3任一所述的药物组合物在制备治疗结肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌或前列腺癌的药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在制备治疗肝癌、肉瘤的药物中的应用中，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为5.0-10.0∶0.75-2.0，优选所述青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为7.5-10.0∶1.5-2.0。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在制备治疗结肠癌的药物中的应用中，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为5.0-12.5∶0.5-5.0。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述结肠癌为HCT-116类型结肠癌，在所述Bcl-2抑制剂为ABT-263时，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为7.5-10.0∶1.0-1.5；在所述Bcl-2抑制剂为ABT-737时，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-737的摩尔比为7.5-10.0∶3.0-5.0。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述结肠癌为DLD1类型结肠癌，所述Bcl-2抑制剂为ABT-263，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为7.5-12.5∶0.75-1.25。
9.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在制备治疗胰腺癌的药物的应用中，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为5.0-10.0∶0.5-5.0。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述胰腺癌为Panc-1类型胰腺癌，在所述Bcl-2抑制剂为ABT-263时，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为7.5-10.0∶1.0-1.5；在所述Bcl-2抑制剂为ABT-737时，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-737的摩尔比为7.5-10.0∶3.0-5.0。
11.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述胰腺癌为Panc-10.05类型胰腺癌，所述Bcl-2抑制剂为ABT-263时，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与ABT-263的摩尔比为7.5-10.0∶1.0-1.5。
12.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在制备治疗肾癌的药物的应用中，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为5.0-10.0∶0.5-1.25，优选所述青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为7.5-10.0∶0.75-1.25。
13.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在制备治疗乳腺癌的药物的应用中，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为5.0-10.0∶0.75-1.5，优选所述青蒿素及青蒿素类衍生物与Bcl-2抑制剂的摩尔比为7.5-10.0∶1.0-1.5。
14.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述药物组合物中的青蒿素及青蒿素类衍生物和Bcl-2抑制剂同时使用或以任何先后的顺序使用。
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