CN101756957B

CN101756957B - 含有青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂的药物组合物及其应用

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Publication number: CN101756957B
Application number: CN2008101873071A
Authority: CN
Inventors: 赵镭
Original assignee: Dinghong International Investment (Hongkong) Co Ltd
Current assignee: Dinghong International Investment (Hongkong) Co Ltd
Priority date: 2008-12-26
Filing date: 2008-12-26
Publication date: 2012-11-14
Anticipated expiration: 2028-12-26
Also published as: CN101756957A

Abstract

本发明涉及一种含有青蒿素及青蒿素类衍生物与组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂的药物组合物及其在制备治疗肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌或白血病的药物中的应用，本发明药物组合物具有显著的协同效应，提高了药物的疗效，降低了给药剂量，减少了副作用的发生。

Description

含有青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂的药物组合物及其应用

技术领域

本发明涉及一种药物组合物及其在制备治疗癌症的药物中的应用，具体涉及含有青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂的药物组合物及其在制备治疗肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌或白血病的药物中的应用。

背景技术

世界卫生组织调查报告表明，全球癌症状况日益严重，今后20年新患者的人数将由目前的每年1000万增加到1500万，因癌症而死亡的人数也将由每年的600万增加至1000万。其中肺癌为常见的恶性肿瘤之一，源于各级支气管上皮，分为细胞肺癌和非小细胞肺癌；原发性肝癌为发生在肝细胞与肝内胆管上皮细胞的癌变，是人类最常见的恶性肿瘤之一；结肠癌的发病与环境、生活习惯，尤其是饮食方式有关。一般认为高脂肪饮食和纤维素不足是主要发病原因。随着生活水平的提高，饮食结构的改变，结肠癌的发病率呈逐年上升趋势；肾癌的发病率在泌尿外科肿瘤中占第二位，仅次于膀胱肿瘤，估计全世界肾癌的发病率每年增加2％～2.5％，全世界每年死于肾癌者近10万例；前列腺癌是男性泌尿生殖系统肿瘤中最重要的一种，是人类特有的疾病。前列腺癌为老年病，大多在50岁以后发病。随着人类平均寿命的延长、诊断技术的提高，生活方式的改变，前列腺癌的发病率在不断上升；白血病是一类造血干细胞的克隆性恶性疾病，根据白血病细胞的成熟程度和自然病程可分为急性白血病和慢性白血病。我国白血病发病率为2.76/10万。在恶性肿瘤死亡率中，白血病居第6位(男性)和第8位(女性)，在儿童及35岁以下成人中则居第1位；肉瘤是一种来源于间叶组织，包括结缔组织和肌肉的恶性肿瘤，常见的有骨肉瘤、尤文氏肉瘤及软骨肉瘤。肉瘤多发生于皮肤、皮下、骨膜及四肢长骨两端，其中较为常见的是骨肉瘤。骨肉瘤作为一种高度恶性肿瘤，可发生于任何年龄段，尤其好发于青少年，致死率及致残率极高。骨肉瘤的致病因素主要包括遗传因素、良性病恶变、外伤及感染等因素；胰腺癌是恶性程度较高的消化系统肿瘤之一，发病率呈逐年上升趋势。由于起病隐匿，缺乏有效的早期诊断方法，确诊时往往已到晚期或发生转移，晚期患者中位生存期不超过六个月，因此研究胰腺癌的治疗新方法迫在眉睫。

目前已上市的抗肿瘤药物较多，如烷化剂药物、抗代谢药物、抗肿瘤抗生素、免疫调节剂等，但是大多药物由于毒性较大，病人不耐受。随着对肿瘤的发生发展的分子机制研究越来越清楚，分子靶向治疗多种恶性肿瘤受到了广泛的关注和高度重视。分子靶向药物选择性高、广谱有效，其安全性优于细胞毒性化疗药物，是目前肿瘤治疗领域发展的新方向。

青蒿素是含有过氧桥的新型倍半萜内酯，其衍生物有青蒿琥酯、蒿甲醚、蒿乙醚和双氢青蒿素等。青蒿素及青蒿素类衍生物是一类高效、低毒的抗疟药物，随着研究的深入，人们发现青蒿素及青蒿素类化合物还具有其它很多重要的药理活性，如抗血吸虫、免疫调节、抗心律失常、抗肿瘤等，尤其是其抗肿瘤作用，越来越引起研究者们的重视。很多实验研究表明，青蒿素及青蒿素类化合物对多种肿瘤细胞的生长具有显著的抑制作用，而且对正常组织细胞的毒性很低，作用机制可能与肿瘤细胞内自由基的产生及氧化应激，延迟细胞周期，诱导细胞凋亡和抗肿瘤血管生成有关。双氢青蒿素是青蒿素类药物中活性较强的衍生物，青蒿琥酯是青蒿素最重要的衍生物之一，水溶性好，青蒿琥酯抗肿瘤机理与其对肿瘤细胞株有直接杀伤作用、或与诱导细胞凋亡有关，还可能与其抑制肿瘤组织血管生成等有关。青蒿素及青蒿素类药物可以选择性杀伤肿瘤细胞，并且与传统化疗药不存在交叉耐药，能够逆转肿瘤细胞的多药耐药现象。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂具有抑制肿瘤细胞增殖、细胞周期阻滞、诱导细胞分化及促进细胞凋亡的作用。其中SAHA已上市，此外MS-275、LBH589、Trichostatin(TSA)、FK228及西达苯胺等多种组蛋白去乙酰化酶抑制剂进入临床研究。

随着肿瘤分子生物学的研究进展，肿瘤分子靶向治疗已成为肿瘤研究的热点，在多种肿瘤的治疗中发挥了重要的作用。然而，大部分肿瘤的生物学行为并非由单一信号传导通路所支配，而是多个信号传导通路共同起作用的，因此联合用药针对多靶点进行靶向治疗将不仅旨在减少或延缓耐药性的出现、降低毒性，而且通过多种药物对癌细胞杀伤的协同作用取得更好的疗效。

发明内容

针对以上技术缺陷，本发明提供一种药物组合物及其在制备治疗肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌或白血病的药物中的应用，具体为含有青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂的药物组合物及其在制备治疗肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌或白血病的药物中的应用。

本发明含有青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂的药物组合物中，所述青蒿素类衍生物可以为青蒿琥酯、蒿甲醚、蒿乙醚、双氢青蒿素及其相应的衍生物。

本发明药物组合物中的青蒿素类衍生物优选为：青蒿琥酯和双氢青蒿素，其相应的结构式分别为式I和式II。

本发明药物组合物中，所述组分包括但不限于青蒿琥酯和双氢青蒿素药物本身，还可以是其可药用的盐、水合物或衍生物等。

本发明中，所述组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以为任何结构类型的组蛋白去乙酰化酶抑制剂的药物，如羟肟酸类、环肽类、苯甲酰胺类、脂肪酸类等，具体可以为但不限于如，suberoylanilide hydroxamicacid(SAHA)、Trichostatin(TSA)、LBH589、MS-275、depsipeptide(FK228)、apicidin、西达苯胺、丁酸钠、苯基丁酸钠。

本发明药物组合物中组蛋白去乙酰化酶抑制剂优选为SAHA、Trichostatin(TSA)、LBH589和MS-275。

其中SAHA为JMC，38，8，1995，1411-1413和JMC，48，15，2005，5047-5051中所记载的式III的化合物：

其中MS-275为EP0847992中所记载的式IV化合物：

其中LBH-589由Novartis公司研发，商品名为panobinstat，正处于II期临床，其结构式为式V所示：

其中Trichostatin(TSA)的结构式如式VI所示：

本发明药物组合物中，所述组分不限于上述药物本身，还可以是它们的水合物、类似物、衍生物及其它有机或无机的盐。

本发明含有青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂的药物组合物中，青蒿素及青蒿素类衍生物与组蛋白去乙酰化酶抑制剂的摩尔比为0.5-25∶0.003-5.0；进一步优选青蒿素及青蒿素类衍生物与组蛋白去乙酰化酶抑制剂的摩尔比为1.0-15∶0.005-2.5。

本发明含有青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂的药物组合物可以用于制备治疗各种肿瘤的药物，所述肿瘤包括但不限于肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌或白血病。

本发明优选青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂的药物组合物优选用于制备治疗结肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、肉瘤、胰腺癌、前列腺癌及白血病的药物中的应用。

本发明药物组合物在制备治疗肝癌的药物中的应用中，所述青蒿琥酯或双氢青蒿素和SAHA的摩尔比为2.5-10∶0.75-2.0；进一步优选所述青蒿琥酯或双氢青蒿素和SAHA的摩尔比为5.0-10∶1.0-2.0：最佳为所述青蒿琥酯或双氢青蒿素和SAHA的摩尔比为10∶2.0。

本发明药物组合物在制备治疗前列腺癌的药物中的应用中，所述青蒿琥酯和SAHA的摩尔比为2.5-10∶0.75-1.5；进一步优选所述青蒿琥酯和SAHA的摩尔比为5.0-10∶1.0-1.5；最佳优选所述青蒿琥酯和SAHA的摩尔比为10∶1.5；

本发明药物组合物在制备治疗前列腺癌的药物中的应用中，所述青蒿琥酯和LBH589的摩尔比为2.5-10∶0.0075-0.02；进一步优选所述青蒿琥酯和LBH589的摩尔比为5.0-10∶0.01-0.02；最佳优选所述青蒿琥酯和LBH589的摩尔比为10∶0.02。

本发明药物组合物在制备治疗结肠癌的药物的应用中，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与组蛋白去乙酰化酶抑制剂的摩尔比为2.5-10∶0.01-2.5。

其中，在制备治疗结肠癌的药物的应用中，所述青蒿琥酯或双氢青蒿素和LBH589的摩尔比为2.5-10∶0.01-0.025；进一步优选为青蒿琥酯或双氢青蒿素和LBH589的摩尔比为5.0-10∶0.015-0.025；最佳优选为所述青蒿琥酯或双氢青蒿素和LBH589的摩尔比为10∶0.025；

在制备治疗结肠癌的药物的应用中，所述青蒿琥酯和SAHA的摩尔比为2.5-10∶0.5-2.5；进一步优选为所述青蒿琥酯和SAHA的摩尔比为5.0-10∶1.0-2.5；最佳为所述青蒿琥酯和SAHA的摩尔比为10∶2.5或10∶1.5；

在制备治疗结肠癌的药物的应用中，所述青蒿琥酯和TSA的摩尔比为2.5-10∶0.05-0.1；进一步优选为所述青蒿琥酯和TSA的摩尔比为5.0-10∶0.075-0.1；最佳为所述青蒿琥酯和TSA的摩尔比为10∶0.1。

本发明药物组合物在制备治疗肺癌的药物的应用中，所述青蒿素及青蒿素类衍生物与组蛋白去乙酰化酶抑制剂的摩尔比为1.0-5.0∶0.01-2.0。

其中，在制备治疗肺癌的药物的应用中，所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为1.0-5.0∶0.25-2.0；进一步优选为所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为2.0-5.0∶1.0-2.0；最佳为所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为5.0∶2.0。

在制备治疗肺癌的药物的应用中，所述青蒿琥酯与LBH589的摩尔比为1.0-5.0∶0.01-0.025；进一步优选为所述青蒿琥酯与LBH589的摩尔比为2.0-5.0∶0.015-0.025；最佳为所述青蒿琥酯与LBH589的摩尔比为5.0∶0.025。

在制备治疗肺癌的药物的应用中，所述青蒿琥酯与TSA的摩尔比为1.0-5.0∶0.05-0.125；进一步优选为所述青蒿琥酯与TSA的摩尔比为2.0-5.0∶0.075-0.125；最佳为所述青蒿琥酯与TSA的摩尔比为5.0∶0.125。

本发明药物组合物在制备治疗胰腺癌的药物的应用中，所述青蒿琥酯与LBH589的摩尔比为2.5-10∶0.01-0.025；进一步优选所述青蒿琥酯与LBH589的摩尔比为5.0-10∶0.015-0.025；最佳为所述青蒿琥酯与LBH589的摩尔比为10∶0.025；

本发明药物组合物在制备治疗胰腺癌的药物的应用中，所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为2.5-10∶0.5-1.25；进一步优选所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为5.0-10∶0.75-1.25；最佳为所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为10∶1.25。

本发明药物组合物在制备治疗肉瘤的药物的应用中，青蒿琥酯与MS275的摩尔比为3.0-10∶0.25-1.0；进一步优选所述青蒿琥酯与MS275的摩尔比为5.0-10∶0.5-1.0；最佳所述青蒿琥酯与MS275的摩尔比为10∶1.0。

本发明药物组合物在制备治疗肾癌的药物的应用中，青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为5.0-15∶1.5-2.5；进一步优选为所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为10-15∶2.0-2.5；最佳为所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为15∶2.5。

本发明药物组合物在制备治疗白血病的药物的应用中，青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为2.0-10∶0.5-1.5；进一步优选为所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为5.0-10∶1.0-1.5；最佳为所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为10∶1.5。

含有青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂组合物在制备治疗肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌或白血病的药物的应用中，在将本发明组合物制成同时给药的药剂的方案中，青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以含在同一种药物制剂如片剂或胶囊中，也可以将青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂分别做成制剂，如分别做成片剂或胶囊，并采用本领域常规的方式将它们包装或结合在一起，患者然后按照药品说明书的指示同时服用；在将本发明组合物制成先后给药的药剂的方案中，可以将青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂分别做成不同的制剂，并采用本领域常规的方式将它们包装或结合在一起，患者然后按照药品说明书指示的先后顺序进行服用，或将上述组合物中的两种成分制成一种控释的制剂，先释放组合物中的一种成分、然后再释放组合物中的另一种成分，患者只需要服用该控释组合物制剂；在将本发明组合物制备成交叉给药的药剂的方案中，可以将青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂分别做成不同的制剂，并采用本领域常规的方式将它们包装或结合在一起，患者然后按照药品说明书指示的交叉顺序服用，或者将该药物组合物制备成青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂交叉释放的控释制剂。

青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂组合物在制备治疗肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、胃癌、脑瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌或白血病的药物中的应用中，所述组合物中的青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以同时使用或以任何先后的顺序使用，如可以将青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂同时给患者服用；也可以先将青蒿素及青蒿素类衍生物药物给患者服用、然后服用组蛋白去乙酰化酶抑制剂，或先服用组蛋白去乙酰化酶抑制剂、然后服用青蒿素及青蒿素类衍生物药物，对于两者服用的时间间隔没有特别要求，但优选服用两种药物的时间间隔不超过一天；或者两种药物交替给药。

本发明中，可将本发明青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂采用本领域常规的方法制备成适于胃肠道给药或非胃肠道给药的药物制剂，本发明优选将青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂制成胃肠道给药的药物制剂，其制剂形式可以为常规片剂或胶囊、或控释、缓释制剂。在本发明青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂组合物的药物制剂中，根据不同的制剂形式和制剂规格，所述组合物在制剂中的含量可以为质量计为1-99％，优选为10％-90％；制剂使用的辅料可采用本领域常规的辅料，以不和本发明组合物发生反应或不影响本发明药物的疗效为前提；所述制剂的制备方法可采用本领域常规的制备方法进行制备。

本发明中，组合物的制备方法没有什么限制，青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂两者可以进行直接混合然后做成制剂，或分别和/或相应的辅料混合分别做成制剂，然后再按照本领域常规的方式包装在一起，或分别和相应的辅料混合然后再混合做成制剂。

本发明中的药物组合物的给药剂量根据给药对象、给药途径或药物的制剂形式不同可以进行适当的变化，但以保证该药物组合物在哺乳动物体内能够达到有效的血药浓度为前提。

本发明分别进行了青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂组合杀死HepG2(肝癌细胞株)、H460(肺癌细胞株)、DLD1和HCT-116(结肠癌细胞株)、Su86.86(胰腺癌细胞株)、ACHN(肾癌细胞株)、22RV1(前列腺癌细胞株)、U2-OS(肉瘤细胞株)、Jurkat(白血病细胞株)的试验，结果提示，本发明青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂组合治疗结肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、肉瘤、胰腺癌、前列腺癌及白血病具有显著的协同效应，提高了药物的疗效，降低了用药剂量，减少了副作用的发生。

具体实施方式

结合以下实施例对本发明作进一步的阐述，但本发明并不受限于此。

实施例

试剂和方法：

细胞：HepG2(肝癌细胞株)、H460(肺癌细胞株)、DLD1和HCT-116(结肠癌细胞株)、Su86.86(胰腺癌细胞株)、ACHN(肾癌细胞株)、22RV1(前列腺癌细胞株)、U2-OS(肉瘤细胞株)、Jurkat(白血病细胞株)，均购自American Type Culture Collection(ATCC)，Rockville，MD，USA。

药品：以下实施例中所用药物组合物均按下列方法1或方法2所述来制备；青蒿素类衍生物青蒿琥酯和双氢青蒿素均购自Sigma；组蛋白去乙酰化酶抑制剂均按文献合成而得，SAHA的合成参考文献为：J.Med.Chem.，1995，38，1411-1413；MS-275的合成参考文献为：J.Med.Chem.，1999，42，3001-3003；LBH-589的合成参考文献为：WO2002022577；Trichostatin的合成参考文献为：1)Tetrahedron，39(6)，841-846，2)EP331524。

方法1：准确称量相应的药物组合物的各组分，以二甲基亚砜分别溶解，各自配成10mM的贮存液，在-20℃下保存，使用时用新鲜的培养基稀释到合适的浓度，然后各自取1微升的各组分的溶液，混合在一起备用。所有的试验中，二甲基亚砜的最终浓度应≤5g/L，以便不影响细胞的活性。

将所有的细胞于含10％小牛血清、100kU/L青霉素、100mg/L链霉素的RPMI 1640培养基中，37℃、5％CO₂的湿度条件下培养，在加药的前一天，在六孔板上进行细胞接种2×10⁵/孔，然后向细胞中加入按上述方法制备的药物组合物溶液，使各组分达到其工作浓度，具体见表1中第1-27。

药物处理后，通过台盼蓝(Trypan Blue)测定细胞死亡，细胞通过在37℃用胰蛋白酶钠/EDTA进行胰酶化作用10分钟。因为死亡的细胞从培养器上脱落进入培养基中，通过在1200转/分钟下离心收集所有的细胞，然后再用培养基重新悬浮沉淀物，与台盼蓝染料混合。染色之后，用光学显微镜和血细胞计数器进行计数。被染料染成蓝色的计为死亡细胞。随机选取500个细胞进行计数，死亡的细胞以占总计数细胞的百分比来表达。

方法2：准确称量相应的药物组合物的各组分，以二甲基亚砜分别溶解，各自配成10mM的贮存液，在-20℃下保存。使用时用新鲜的培养基稀释到合适的浓度，然后各自取1微升的各组分的溶液备用。所有的试验中，二甲基亚砜的最终浓度应≤5g/L，以便不影响细胞的活性。

将所有的细胞于含10％小牛血清、100kU/L青霉素、100mg/L链霉素的RPMI 1640培养基中，37℃、5％CO₂的湿度条件下培养，在加药的前一天，在六孔板上进行细胞接种2×10⁵/孔，然后以任意次序向细胞中加入按上述方法制备的药物组合物的各组分溶液，使各组分达到其工作浓度，具体见表1中第28-51。

下列表1所示的药物组合中，第1-27的组合按方法1，第28-51的组合按方法2制备。

表1

实施例1不同比例的青蒿琥酯(ART)与SAHA的组合协同增效促进HepG2细胞死亡试验，见表2。

表2

在考察相关化合物导致肝癌细胞株HepG2细胞死亡的试验中，发现当单独使用5.0μM青蒿琥酯或更低浓度、2.0μM SAHA或更低浓度时只有很少量的细胞死亡；即使增加单药的浓度至10.0μM青蒿琥酯时，也只有约20％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(5.0μM青蒿琥酯+1.0μM SAHA)则产生明显的协同作用，导致约50％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+2.0μM SAHA的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致99％的癌细胞死亡。

实施例2不同比例的双氢青蒿素(DHA)与SAHA的组合协同增效促进HepG2细胞死亡试验，见表3。

表3

在考察相关化合物导致肝癌细胞株HepG2细胞死亡的试验中，发现当单独使用2.5μM双氢青蒿素、2.0μM SAHA或更低浓度时只有很少量的细胞死亡；即使增加单药的浓度至10.0μM双氢青蒿素时，也只有约20％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(5.0μM双氢青蒿素+1.0μMSAHA)则产生明显的协同作用，导致约45％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM双氢青蒿素+2.0μM SAHA的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致99％的癌细胞死亡。

实施例3不同比例的青蒿琥酯(ART)与SAHA的组合协同增效促进22RV1细胞死亡试验，见表4。

表4

在考察相关化合物导致前列腺癌细胞株22RV1细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM青蒿琥酯或更低浓度、1.0μM SAHA或更低浓度时只约15％的细胞死亡；即使增加单药的浓度至1.5μM SAHA时，也只有约20％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(5.0μM青蒿琥酯+1.0μM SAHA)则产生明显的协同作用，导致约40％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+1.5μM SAHA的比例合用时，则产生更加明显的协同作用，导致约90％的癌细胞死亡。

实施例4不同比例的青蒿琥酯(ART)与LBH589的组合协同增效促进22RV1细胞死亡试验，见表5。

表5

在考察相关化合物导致前列腺癌细胞株22RV1细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM青蒿琥酯或更低浓度、0.01μM LBH589或更低浓度时只约15％的细胞死亡；即使增加单药的浓度至0.02μM LBH589时，也只有约25％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(5.0μM青蒿琥酯+0.01μM LBH589)则产生明显的协同作用，导致约42％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+0.02μM LBH589的比例合用时，则产生更加明显的协同作用，导致93％的癌细胞死亡。

实施例5不同比例的青蒿琥酯(ART)与SAHA的组合协同增效促进HCT116细胞死亡试验，见表6。

表6

在考察相关化合物导致结肠癌细胞株HCT116细胞死亡的试验中，发现当单独使用5.0μM青蒿琥酯或更低浓度、1.0μM SAHA或更低浓度时只约15％的细胞死亡；即使增加单药的浓度至10.0μM青蒿琥酯或1.5μMSAHA时，也只有约20-25％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(5.0μM青蒿琥酯+1.0μM SAHA)则产生明显的协同作用，导致约55％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+1.5μM SAHA的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致99％的癌细胞死亡。

实施例6不同比例的青蒿琥酯(ART)与LBH589的组合协同增效促进HCT116细胞死亡试验，见表7。

表7

在考察相关化合物导致结肠癌细胞株HCT116细胞死亡的试验中，发现当单独使用5.0μM青蒿琥酯或更低浓度、0.015μM LBH589或更低浓度时只约10-15％的细胞死亡；即使增加单药的浓度至10.0μM青蒿琥酯或0.025μM LBH589时，也只有约25％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(5.0μM青蒿琥酯+0.015μM LBH589)则产生明显的协同作用，导致约70％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+0.025μM LBH589的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致99％的癌细胞死亡。

实施例7不同比例的双氢青蒿素(DHA)与LBH589的组合协同增效促进HCT116细胞死亡试验，见表8。

表8

在考察相关化合物导致结肠癌细胞株HCT116细胞死亡的试验中，发现当单独使用5.0μM双氢青蒿素或更低浓度、0.015μM LBH589或更低浓度时只约10％的细胞死亡；即使增加单药的浓度至10.0μM双氢青蒿素或0.025μM LBH589时，也只有约20-25％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(5.0μM双氢青蒿素+0.015μM LBH589)则产生明显的协同作用，导致约60％的癌细胞死亡；当两者以10.0双μM氢青蒿素+0.025μMLBH589的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致99％的癌细胞死亡。

实施例8不同比例的青蒿琥酯(ART)与SAHA的组合协同增效促进DLD1细胞死亡试验，见表9。

表9

在考察相关化合物导致结肠癌细胞株DLD1细胞死亡的试验中，发现当单独使用5.0μM青蒿琥酯或更低浓度、2.5μM SAHA或更低浓度时只约10-15％的细胞死亡；即使增加单药的浓度至10.0μM青蒿琥酯时，也只有约20-25％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(5.0μM青蒿琥酯+1.5μM SAHA)则产生明显的协同作用，导致约70％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+2.5μM SAHA的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致约92％的癌细胞死亡。

实施例9不同比例的青蒿琥酯(ART)与TSA的组合协同增效促进DLD1细胞死亡试验，见表10。

表10

在考察相关化合物导致结肠癌细胞株DLD1细胞死亡的试验中，发现当单独使用5.0μM青蒿琥酯或更低浓度、0.075μM TSA或更低浓度时只约10％的细胞死亡；即使增加单药的浓度至10.0μM青蒿琥酯或0.1μMTSA时，也只有约20-25％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(5.0μM青蒿琥酯+0.075μM TSA)则产生较明显的协同作用，导致约30％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+0.1μM TSA的比例合用时，则产生更加明显的协同作用，导致约92％的癌细胞死亡。

实施例10不同比例的青蒿琥酯(ART)与SAHA的组合协同增效促进H460细胞死亡试验，见表11。

表11

在考察相关化合物导致肺癌细胞株H460细胞死亡的试验中，发现当单独使用2.0μM青蒿琥酯或更低浓度、1.0μM SAHA或更低浓度时只约15％的细胞死亡；即使增加单药的浓度至5.0μM青蒿琥酯或2.0μM SAHA时，也只有约25％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(2.0μM青蒿琥酯+1.0μM SAHA)则产生明显的协同作用，导致约63％的癌细胞死亡；当两者以5.0μM青蒿琥酯+2.0μM SAHA的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致99％的癌细胞死亡。

实施例11不同比例的青蒿琥酯(ART)与LBH589的组合协同增效促进H460细胞死亡试验，见表12。

表12

在考察相关化合物导致肺癌细胞株H460细胞死亡的试验中，发现当单独使用2.0μM青蒿琥酯或更低浓度、0.015μM LBH589或更低浓度时只约15％的细胞死亡；即使增加单药的浓度至5.0μM青蒿琥酯或0.025μMLBH589时，也只有约25％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(2.0μM青蒿琥酯+0.015μM LBH589)则产生明显的协同作用，导致约42％的癌细胞死亡；当两者以5.0μM青蒿琥酯+0.025μM LBH589的比例合用时，则产生更加明显的协同作用，导致约90％的癌细胞死亡。

实施例12不同比例的青蒿琥酯(ART)与TSA的组合协同增效促进H460细胞死亡试验，见表13。

表13

在考察相关化合物导致肺癌细胞株H460细胞死亡的试验中，发现当单独使用2.0μM青蒿琥酯或更低浓度、0.075μM TSA或更低浓度时只约15％的细胞死亡；即使增加单药的浓度至5.0μM青蒿琥酯或0.125μM TSA时，也只有约20-25％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(2.0μM青蒿琥酯+0.075μM TSA)则产生明显的协同作用，导致约47％的癌细胞死亡；当两者以5.0μM青蒿琥酯+0.125μM TSA的比例合用时，则产生更加明显的协同作用，导致约86％的癌细胞死亡。

实施例13不同比例的青蒿琥酯(ART)与SAHA的组合协同增效促进Su86.86细胞死亡试验，见表14。

表14

在考察相关化合物导致胰腺癌细胞株Su86.86细胞死亡的试验中，发现当单独使用5.0μM青蒿琥酯或更低浓度、0.75μM SAHA或更低浓度时只约15％的细胞死亡；即使增加单药的浓度至10.0μM青蒿琥酯或1.25μM SAHA时，也只有约20-25％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(5.0μM青蒿琥酯+0.75μM SAHA)则产生明显的协同作用，导致约42％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+1.25μM SAHA的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致约90％的癌细胞死亡。

实施例14不同比例的青蒿琥酯(ART)与LBH589的组合协同增效促进Su86.86细胞死亡试验，见表15。

表15

在考察相关化合物导致胰腺癌细胞株Su86.86细胞死亡的试验中，发现当单独使用5.0μM青蒿琥酯或更低浓度、0.015μM LBH589或更低浓度时只约10-15％的细胞死亡；即使增加单药的浓度至10.0μM青蒿琥酯或0.025μM LBH589时，也只有约20％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(5.0μM青蒿琥酯+0.015μM LBH589)则产生明显的协同作用，导致约45％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+0.025μM LBH589的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致约95％的癌细胞死亡。

实施例15不同比例的青蒿琥酯(ART)与MS275的组合协同增效促进U2-OS细胞死亡试验，见表16。

表16

在考察相关化合物导致肉瘤细胞株U2-OS细胞死亡的试验中，发现当单独使用10.0μM青蒿琥酯或更低浓度、0.25μM MS275时只有很少量的细胞死亡；即使增加单药的浓度至1.0μM MS275时，也只有约25％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(5.0μM青蒿琥酯+0.5μM MS275)则产生明显的协同作用，导致约75％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+1.0μM MS275的比例合用时，则产生更加显著的协同作用，导致99％的癌细胞死亡。

实施例16不同比例的青蒿琥酯(ART)与SAHA的组合协同增效促进ACHN细胞死亡试验，见表17。

表17

在考察相关化合物导致肾癌细胞株ACHN细胞死亡的试验中，发现当单独使用15.0μM青蒿琥酯或更低浓度、2.5μM SAHA或更低浓度时只有很少量的细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(10.0μM青蒿琥酯+2.0μM SAHA)则产生明显的协同作用，导致约50％的癌细胞死亡；当两者以15.0μM青蒿琥酯+2.5μM SAHA的比例合用时，则产生更加明显的协同作用，导致约65％的癌细胞死亡。

实施例17不同比例的青蒿琥酯(ART)与SAHA的组合协同增效促进Jurkat细胞死亡试验，见表18。

表18

在考察相关化合物导致白血病细胞株Jurkat细胞死亡的试验中，发现当单独使用5.0μM青蒿琥酯或更低浓度、1.0μM SAHA或更低浓度时只有很少量的细胞死亡；即使增加单药的浓度至10.0μM青蒿琥酯或1.5μMSAHA时，也只有约10％细胞死亡；而当两者在较低浓度下合用时(5.0μM青蒿琥酯+1.0μM SAHA)则产生明显的协同作用，导致约35％的癌细胞死亡；当两者以10.0μM青蒿琥酯+1.5μM SAHA的比例合用时，则产生更加明显的协同作用，导致约82％的癌细胞死亡。

Claims

1.一种用于治疗癌症的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有青蒿素及青蒿素类衍生物与组蛋白去乙酰化酶抑制剂；

所述青蒿素及青蒿素类衍生物与组蛋白去乙酰化酶抑制剂的摩尔比为1.0-15∶0.005-2.5；

所述青蒿素及青蒿素类衍生物为青蒿琥酯或双氢青蒿素；组蛋白去乙酰化酶抑制剂为SAHA、MS275、LBH589或TSA；当所述青蒿素及青蒿素类衍生物为双氢青蒿素时，组蛋白去乙酰化酶抑制剂不为MS275或TSA；

所述癌症为结肠癌、肝癌、肺癌、肾癌、肉瘤、胰腺癌、前列腺癌或白血病。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗肝癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯或双氢青蒿素和SAHA的摩尔比为2.5-10∶0.75-2.0。

3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗肝癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯或双氢青蒿素和SAHA的摩尔比为5.0-10∶1.0-2.0。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗肝癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯或双氢青蒿素和SAHA的摩尔比为10∶2.0。

5.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗前列腺癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯和SAHA的摩尔比为2.5-10∶0.75-1.5；或所述青蒿琥酯和LBH589的摩尔比为2.5-10∶0.0075-0.02。

6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗前列腺癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯和SAHA的摩尔比为5.0-10∶1.0-1.5；或所述青蒿琥酯和LBH589的摩尔比为5.0-10∶0.01-0.02。

7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗前列腺癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯和SAHA的摩尔比为10∶1.5；或所述青蒿琥酯和LBH589的摩尔比为10∶0.02。

8.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗结肠癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯或双氢青蒿素和LBH589的摩尔比为2.5-10∶0.01-0.025；或所述青蒿琥酯和SAHA的摩尔比为2.5-10∶0.5-2.5；或所述青蒿琥酯和TSA的摩尔比为2.5-10∶0.05-0.1。

9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗结肠癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯或双氢青蒿素和LBH589的摩尔比为5.0-10∶0.015-0.025；或所述青蒿琥酯和SAHA的摩尔比为5.0-10∶1.0-2.5；或所述青蒿琥酯和TSA的摩尔比为5.0-10∶0.075-0.1。

10.根据权利要求9所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗结肠癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯或双氢青蒿素和LBH589的摩尔比为10∶0.025；或所述青蒿琥酯和SAHA的摩尔比为10∶2.5或10∶1.5；或所述青蒿琥酯和TSA的摩尔比为10∶0.1。

11.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗肺癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为1.0-5.0∶0.25-2.0；或所述青蒿琥酯与LBH589的摩尔比为1.0-5.0∶0.01-0.025；或所述青蒿琥酯与TSA的摩尔比为1.0-5.0∶0.05-0.125。

12.根据权利要求11所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗肺癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为2.0-5.0∶1.0-2.0；或所述青蒿琥酯与LBH589的摩尔比为2.0-5.0∶0.015-0.025；或所述青蒿琥酯与TSA的摩尔比为2.0-5.0∶0.075-0.125。

13.根据权利要求12所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗肺癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为5.0∶2.0；或所述青蒿琥酯与LBH589的摩尔比为5.0∶0.025；或所述青蒿琥酯与TSA的摩尔比为5.0∶0.125。

14.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗胰腺癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯与LBH589的摩尔比为2.5-10∶0.01-0.025；或所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为2.5-10∶0.5-1.25。

15.根据权利要求14所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗胰腺癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯与LBH589的摩尔比为5.0-10∶0.015-0.025；或所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为5.0-10∶0.75-1.25。

16.根据权利要求15所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗胰腺癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯与LBH589的摩尔比为10∶0.025；或所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为10∶1.25。

17.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗肉瘤的药物组合物中，所述青蒿琥酯与MS275的摩尔比为3.0-10∶0.25-1.0。

18.根据权利要求17所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗肉瘤的药物组合物中，所述青蒿琥酯与MS275的摩尔比为5.0-10∶0.5-1.0。

19.根据权利要求18所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗肉瘤的药物组合物中，所述青蒿琥酯与MS275的摩尔比为10∶1.0。

20.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗肾癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为5.0-15∶1.5-2.5。

21.根据权利要求20所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗肾癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为10-15∶2.0-2.5。

22.根据权利要求21所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗肾癌的药物组合物中，所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为15∶2.5。

23.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗白血病的药物组合物中，所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为2.0-10∶0.5-1.5。

24.根据权利要求23所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗白血病的药物组合物中，所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为5.0-10∶1.0-1.5。

25.根据权利要求24所述的药物组合物，其特征在于，在制备治疗白血病的药物组合物中，所述青蒿琥酯与SAHA的摩尔比为10∶1.5。

26.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物中的青蒿素及青蒿素类衍生物和组蛋白去乙酰化酶抑制剂同时使用或以任何先后的顺序使用。