CN113912749B - 一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法，该方法将三维多孔氨基石墨烯水凝胶装载到色谱柱制备脱色柱，然后将此脱色柱应用到脱除麻花艽多糖色素的领域中，应用脱除的过程简单，成本经济合适；制备的三维多孔氨基石墨烯脱色柱成功地应用于各种多糖的脱色，脱色率和回收率都很高，脱除过程中的脱色效率高，多糖保留率高。此外，三维多孔氨基石墨烯脱色柱提供了优越的实用功能，超过了许多传统的方法，克服了包括使用有机试剂和难以重复使用等问题。试验验证，通过该方法对麻花艽多糖进行脱色处理，脱色效率大于95％，多糖保留率也在95％之上。

Description

一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法

技术领域

本发明属于植物有效成分精制加工处理方法领域，具体涉及一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法。

背景技术

麻花艽是传统中药材，属于四大正宗秦艽原料。麻花艽生长于西藏、青海、四川等地，在青藏高原流行，藏语称其为“解吉嘎宝”。目前，已有多篇文献报道，麻花艽的根常用来治疗风湿，湿热黄疸等。在韩国，麻花艽就已被记录为功能性食品和制药行业生产中用于改善与年龄相关的骨关节炎的活性物质。由于人口老龄化快速发展，对麻花艽的需求不断增长。之前对麻花艽的研究主要集中在环烯醚萜苷三萜、甾体和生物碱等。一般来说，多糖是中药材的主要活性组分，但是关于麻花艽多糖的资料却很少。因此，为了深入探究麻花艽的信息，首先对麻花艽多糖进行提纯脱色。

目前，实验室广泛应用过氧化氢脱色法、活性炭脱色法、离子交换法和微孔树脂吸附法对多糖进行脱色。但这些方法也存在着脱色率低、多糖保留率低、多糖水解和结构改变等问题。而一种基于氨基石墨烯的多糖脱色方法能够通过可持续和无损吸附有效纯化粗多糖，但是也存在着氨基石墨烯粒径小，在实际应用中难以回收利用的问题。同时，常见的多糖脱色静态测试过程仍存在着效率低下的问题。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的缺点，提供一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法，该方法通过使用三维多孔氨基石墨烯脱色柱对麻花艽多糖进行脱色处理，以解决现有技术中多糖脱色静态测试过程脱色率低，效率低下的问题。该方法操作简单，速度快捷，生产成本低，适用于工业化生产。

为达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法，包括以下步骤：

步骤1，混合氧化石墨烯溶液和乙二胺，制得混合溶液A，混合溶液A超声处理后，在120℃下反应14h后制得三维多孔氨基石墨烯水凝胶，将三维多孔氨基石墨烯水凝胶洗涤后装载到色谱中，获得三维多孔氨基石墨烯脱色柱；

步骤2，将麻花艽溶于水中，得到混合物B，将混合物B超声提取，得到提取液C；混合提取液C和无水乙醇，混合后在4℃下静置处理，得到沉淀物为麻花艽多糖粗提物，将麻花艽多糖粗体物溶解于水中，得到麻花艽多糖粗提物水溶液；

步骤3，将麻花艽多糖粗提物水溶液上样至三维多孔氨基石墨烯脱色柱中进行脱色，脱色过程的pH值为4～7，脱色温度为25～55℃，脱色平衡时间为5min，脱色后收集过滤液；

步骤4，将脱色后收集的过滤液冷冻干燥后，获得脱色后的麻花艽多糖粉末。

本发明的进一步改进在于：

优选的，步骤1中，所述氧化石墨烯溶液的浓度为6mg/mL。

优选的，步骤1中，所述氧化石墨烯溶液中的氧化石墨烯通过Hummers方法制备得到。

优选的，步骤1中，氧化石墨烯溶液和乙二胺的体积比为200:1.2。

优选的，步骤2中，麻花艽溶于水中的料液比为1g：(10～20)mL。

优选的，步骤2中，混合物B超声提取3次后，得到提取液C。

优选的，步骤2中，提取液C和无水乙醇的混合体积比为1:4。

优选的，步骤2中，所述麻花艽多糖粗体物水溶液中麻花艽多糖粗体物的浓度为8mg/mL。

优选的，步骤3后，脱色后的三维多孔氨基石墨烯脱色柱通过去离子水洗涤后，通过NaOH作为洗脱液将脱色柱洗脱至无色，再通过去离子水洗涤后，获得再生的三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

优选的，所述NaOH溶液的浓度为0.1mol/L。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明公开了一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法，该方法将三维多孔氨基石墨烯水凝胶装载到色谱柱制备脱色柱，然后将此脱色柱应用到脱除麻花艽多糖色素的领域中，应用脱除的过程简单，成本经济合适；制备的三维多孔氨基石墨烯脱色柱成功地应用于各种多糖的脱色，脱色率和回收率都很高，脱除过程中的脱色效率高，多糖保留率高。此外，三维多孔氨基石墨烯脱色柱提供了优越的实用功能，超过了许多传统的方法，克服了包括使用有机试剂和难以重复使用等问题。试验验证，通过该方法对麻花艽多糖进行脱色处理，脱色效率大于95％，多糖保留率也在95％之上。

进一步的，通过经典的Hummers法制备得到氧化石墨烯，该方法制备过程安全可靠且通过该方法制得的氧化石墨烯时效性好；用乙二胺与氧化石墨烯反应，对氧化石墨烯进行一步还原和氨基化，通过水热反应形成三维多孔氨基石墨烯水凝胶，经去离子水洗涤后装载到色谱柱中，得到三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

进一步的，将脱色后的脱色柱用去离子水洗涤三次，然后以NaOH作为洗脱液去除色素，再用去离子水洗涤得到再生的脱色柱，该脱色柱回收方式简单、可重复利用，适用于工业化生产。

附图说明

图1是本发明中三维多孔氨基石墨烯脱色柱的使用示意图。

图2是本发明中pH对麻花艽多糖脱色率和保留率的影响图。

图3是本发明中温度对麻花艽多糖脱色率和保留率的影响图。

图4是本发明中脱色柱5次循环对麻花艽多糖脱色率和保留率的影响图。

具体实施方式

下面结合实例与附图对本发明做进一步详细描述，参见图1，本发明提供了一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法及应用，该方法具体包括以下步骤：

步骤1，脱色材料：以天然石墨为材料，通过经典的Hummers方法制备得到氧化石墨烯后，制备浓度为6mg/mL的氧化石墨烯溶液；以体积比计，混合氧化6mg/mL的石墨烯溶液和乙二胺，制得混合溶液A，混合体积比为氧化石墨烯溶液：乙二胺＝200：1.2；将混合溶液A超声10min，然后转移到具有聚四氟乙烯内衬的高压釜中，在120℃下反应14h，得到三维多孔氨基石墨烯水凝胶(NG水凝胶)，用去离子水洗涤NG水凝胶后装载到色谱中，得到三维多孔氨基石墨烯脱色柱(3DD柱)。

步骤2，提取麻花艽多糖溶液：将洗干净的麻花艽，按照料液比1g：(10～20)mL溶解于蒸馏水中，得到混合物B，将混合物B超声提取，超声提取3次，收集并合并3次提取的提取液，得到提取液C，对提取液C进行醇沉处理，具体为按照体积比1：4混合提取液与无水乙醇，混合后在4℃下静置处理，静置时间大于6h，得到沉淀物，收集沉淀物即为麻花艽多糖粗提物，将麻花艽多糖粗提物溶解于水中，制得浓度为8mg/mL的麻花艽多糖粗提物水溶液。

步骤3，麻花艽多糖粗提物的脱色处理：将浓度为8mg/mL麻花艽多糖粗提物水溶液上样到三维多孔氨基石墨烯脱色柱中，其中脱色过程中的pH为4～7，温度为25～55℃，脱色平衡时间为5min。收集过滤液。

步骤4，干燥：将步骤三得到的过滤也在冷冻干燥机冷冻干燥，即得到脱色麻花艽多糖粉末。

步骤5，脱色柱的重复利用：将步骤3中脱色后的脱色柱用去离子水洗涤3次后，用0.1mol/L NaOH作洗脱液将脱色柱洗脱至无色，然后再用去离子水洗涤3次，得到再生的三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

实施例1

步骤1，以天然石墨为材料，通过经典的Hummers方法制备得到氧化石墨烯后，制备浓度为6mg/mL的氧化石墨烯溶液；以体积比计，混合氧化6mg/mL的石墨烯溶液和乙二胺，制得混合溶液A，混合比例为氧化石墨烯溶液：乙二胺＝200:1.2，将混合溶液A超声10min，然后转移到具有聚四氟乙烯内衬的高压釜中，在120℃下反应14h，得到三维多孔氨基石墨烯水凝胶，用去离子水洗涤后装载到色谱中，得到三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

步骤2，将洗干净的麻花艽，按照料液比1g:(10～20)mL溶解于蒸馏水中，得到混合物B，将混合物B超声提取，超声提取3次，收集并合并3次提取的提取液，得到提取液C，对提取液C进行醇沉处理，具体为按照体积比1：4混合提取液与无水乙醇，混合后在4℃下过夜处理，得到沉淀物，收集沉淀物即为麻花艽多糖粗提物，将麻花艽多糖粗提物溶解于水中，制得浓度为8mg/mL的麻花艽多糖粗提物水溶液。

步骤3，将浓度为8mg/mL麻花艽多糖粗提物水溶液上样到三维多孔氨基石墨烯脱色柱中，其中脱色过程中的pH为4，温度为25℃，脱色平衡时间为5min。收集过滤液。

步骤4，苯酚-硫酸法测定植物多糖脱色后的保留率，通过吸光度法测定脱色前后多糖在紫外分光光度计420nm下的吸光值，从而得到脱色率。

步骤5，将步骤3中脱色后的脱色柱用去离子水洗涤3次后，用0.1mol/L NaOH作洗脱液将脱色柱洗脱至无色，然后再用去离子水洗涤3次，得到再生的三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

该实施例中麻花艽多糖的脱色率为95.3％，多糖保留率为92.3％。

实施例2

步骤1，以天然石墨为材料，通过经典的Hummers方法制备得到氧化石墨烯后，制备浓度为6mg/mL的氧化石墨烯溶液；以体积比计，混合氧化6mg/mL的石墨烯溶液和乙二胺，制得混合溶液A，混合比例为氧化石墨烯溶液：乙二胺＝200：1.2，将混合溶液A超声10min，然后转移到具有聚四氟乙烯内衬的高压釜中，在120℃下反应14h，得到三维多孔氨基石墨烯水凝胶，用去离子水洗涤后装载到色谱中，得到三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

步骤2，将洗干净的麻花艽，按照料液比1g:(10～20)mL溶解于蒸馏水中，得到混合物B，将混合物B超声提取，超声提取3次，收集并合并3次提取的提取液，得到提取液C，对提取液C进行醇沉处理，具体为按照体积比1：4混合提取液与无水乙醇，混合后在4℃下过夜处理，得到沉淀物，收集沉淀物即为麻花艽多糖粗提物，将麻花艽多糖粗提物溶解于水中，制得浓度为8mg/mL的麻花艽多糖粗提物水溶液。

步骤3，将浓度为8mg/mL麻花艽多糖粗提物水溶液上样到三维多孔氨基石墨烯脱色柱中，其中脱色过程中的pH为5，温度为25℃，脱色平衡时间为5min。收集过滤液。

步骤4，苯酚-硫酸法测定植物多糖脱色后的保留率，通过吸光度法测定脱色前后多糖在紫外分光光度计420nm下的吸光值，从而得到脱色率。

步骤5，将步骤3中脱色后的脱色柱用去离子水洗涤3次后，用0.1mol/L NaOH作洗脱液将脱色柱洗脱至无色，然后再用去离子水洗涤3次，得到再生的三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

该实施例中麻花艽多糖的脱色率为94.1％，多糖保留率为93.1％。

实施例3

步骤1，以天然石墨为材料，通过经典的Hummers方法制备得到氧化石墨烯后，制备浓度为6mg/mL的氧化石墨烯溶液；以体积比计，混合氧化6mg/mL的石墨烯溶液和乙二胺，制得混合溶液A，混合比例为氧化石墨烯溶液：乙二胺＝200：1.2，将混合溶液A超声10min，然后转移到具有聚四氟乙烯内衬的高压釜中，在120℃下反应14h，得到三维多孔氨基石墨烯水凝胶，用去离子水洗涤后装载到色谱中，得到三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

步骤2，将洗干净的麻花艽，按照料液比1g:(10～20)mL溶解于蒸馏水中，得到混合物B，将混合物B超声提取，超声提取3次，收集并合并3次提取的提取液，得到提取液C，对提取液C进行醇沉处理，具体为按照体积比1：4混合提取液与无水乙醇，混合后在4℃下过夜处理，得到沉淀物，收集沉淀物即为麻花艽多糖粗提物，将麻花艽多糖粗提物溶解于水中，制得浓度为8mg/mL的麻花艽多糖粗提物水溶液。

步骤3，将浓度为8mg/mL麻花艽多糖粗提物水溶液上样到三维多孔氨基石墨烯脱色柱中，其中脱色过程中的pH为6，温度为25℃，脱色平衡时间为5min。收集过滤液。

步骤4，苯酚-硫酸法测定植物多糖脱色后的保留率，通过吸光度法测定脱色前后多糖在紫外分光光度计420nm下的吸光值，从而得到脱色率。

步骤5，将步骤3中脱色后的脱色柱用去离子水洗涤3次后，用0.1mol/L NaOH作洗脱液将脱色柱洗脱至无色，然后再用去离子水洗涤3次，得到再生的三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

该实施例中麻花艽多糖的脱色率为94.6％，多糖保留率为92.8％。

实施例4

步骤1，以天然石墨为材料，通过经典的Hummers方法制备得到氧化石墨烯后，制备浓度为6mg/mL的氧化石墨烯溶液；以体积比计，混合氧化6mg/mL的石墨烯溶液和乙二胺，制得混合溶液A，混合比例为氧化石墨烯溶液：乙二胺＝200：1.2，将混合溶液A超声10min，然后转移到具有聚四氟乙烯内衬的高压釜中，在120℃下反应14h，得到三维多孔氨基石墨烯水凝胶，用去离子水洗涤后装载到色谱中，得到三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

步骤2，将洗干净的麻花艽，按照料液比1g:(10～20)mL溶解于蒸馏水中，得到混合物B，将混合物B超声提取，超声提取3次，收集并合并3次提取的提取液，得到提取液C，对提取液C进行醇沉处理，具体为按照体积比1：4混合提取液与无水乙醇，混合后在4℃下过夜处理，得到沉淀物，收集沉淀物即为麻花艽多糖粗提物，将麻花艽多糖粗提物溶解于水中，制得浓度为8mg/mL的麻花艽多糖粗提物水溶液。

步骤3，将浓度为8mg/mL麻花艽多糖粗提物水溶液上样到三维多孔氨基石墨烯脱色柱中，其中脱色过程中的pH为7，温度为25℃，脱色平衡时间为5min。收集过滤液。

步骤4，苯酚-硫酸法测定植物多糖脱色后的保留率，通过吸光度法测定脱色前后多糖在紫外分光光度计420nm下的吸光值，从而得到脱色率。

步骤5，将步骤3中脱色后的脱色柱用去离子水洗涤3次后，用0.1mol/L NaOH作洗脱液将脱色柱洗脱至无色，然后再用去离子水洗涤3次，得到再生的三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

该实施例中麻花艽多糖的脱色率为94.6％，多糖保留率为91.4％。

实施例5

步骤1，以天然石墨为材料，通过经典的Hummers方法制备得到氧化石墨烯后，制备浓度为6mg/mL的氧化石墨烯溶液；以体积比计，混合氧化6mg/mL的石墨烯溶液和乙二胺，制得混合溶液A，混合比例为氧化石墨烯溶液：乙二胺＝200：1.2，将混合溶液A超声10min，然后转移到具有聚四氟乙烯内衬的高压釜中，在120℃下反应14h，得到三维多孔氨基石墨烯水凝胶，用去离子水洗涤后装载到色谱中，得到三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

步骤2，将洗干净的麻花艽，按照料液比1g:(10～20)mL溶解于蒸馏水中，得到混合物B，将混合物B超声提取，超声提取3次，收集并合并3次提取的提取液，得到提取液C，对提取液C进行醇沉处理，具体为按照体积比1：4混合提取液与无水乙醇，混合后在4℃下过夜处理，得到沉淀物，收集沉淀物即为麻花艽多糖粗提物，将麻花艽多糖粗提物溶解于水中，制得浓度为8mg/mL的麻花艽多糖粗提物水溶液。

步骤3，将浓度为8mg/mL麻花艽多糖粗提物水溶液上样到三维多孔氨基石墨烯脱色柱中，其中脱色过程中的pH为7，温度为35℃，脱色平衡时间为5min。收集过滤液。

步骤4，苯酚-硫酸法测定植物多糖脱色后的保留率，通过吸光度法测定脱色前后多糖在紫外分光光度计420nm下的吸光值，从而得到脱色率。

步骤5，将步骤3中脱色后的脱色柱用去离子水洗涤3次后，用0.1mol/L NaOH作洗脱液将脱色柱洗脱至无色，然后再用去离子水洗涤3次，得到再生的三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

该实施例中麻花艽多糖的脱色率为95.3％，多糖保留率为95.9％。

实施例6

步骤1，以天然石墨为材料，通过经典的Hummers方法制备得到氧化石墨烯后，制备浓度为6mg/mL的氧化石墨烯溶液；以体积比计，混合氧化6mg/mL的石墨烯溶液和乙二胺，制得混合溶液A，混合比例为氧化石墨烯溶液：乙二胺＝200：1.2，将混合溶液A超声10min，然后转移到具有聚四氟乙烯内衬的高压釜中，在120℃下反应14h，得到三维多孔氨基石墨烯水凝胶，用去离子水洗涤后装载到色谱中，得到三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

步骤2，将洗干净的麻花艽，按照料液比1g:(10～20)mL溶解于蒸馏水中，得到混合物B，将混合物B超声提取，超声提取3次，收集并合并3次提取的提取液，得到提取液C，对提取液C进行醇沉处理，具体为按照体积比1：4混合提取液与无水乙醇，混合后在4℃下过夜处理，得到沉淀物，收集沉淀物即为麻花艽多糖粗提物，将麻花艽多糖粗提物溶解于水中，制得浓度为8mg/mL的麻花艽多糖粗提物水溶液。

步骤3，将浓度为8mg/mL麻花艽多糖粗提物水溶液上样到三维多孔氨基石墨烯脱色柱中，其中脱色过程中的pH为7，温度为45℃，脱色平衡时间为5min。收集过滤液。

步骤4，苯酚-硫酸法测定植物多糖脱色后的保留率，通过吸光度法测定脱色前后多糖在紫外分光光度计420nm下的吸光值，从而得到脱色率。

步骤5，将步骤3中脱色后的脱色柱用去离子水洗涤3次后，用0.1mol/L NaOH作洗脱液将脱色柱洗脱至无色，然后再用去离子水洗涤3次，得到再生的三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

该实施例中麻花艽多糖的脱色率为96.4％，多糖保留率为95.3％。

实施例7

步骤1，以天然石墨为材料，通过经典的Hummers方法制备得到氧化石墨烯后，制备浓度为6mg/mL的氧化石墨烯溶液；以体积比计，混合氧化6mg/mL的石墨烯溶液和乙二胺，制得混合溶液A，混合比例为氧化石墨烯溶液：乙二胺＝200：1.2，将混合溶液A超声10min，然后转移到具有聚四氟乙烯内衬的高压釜中，在120℃下反应14h，得到三维多孔氨基石墨烯水凝胶，用去离子水洗涤后装载到色谱中，得到三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

步骤2，将洗干净的麻花艽，按照料液比1g:(10～20)mL溶解于蒸馏水中，得到混合物B，将混合物B超声提取，超声提取3次，收集并合并3次提取的提取液，得到提取液C，对提取液C进行醇沉处理，具体为按照体积比1：4混合提取液与无水乙醇，混合后在4℃下过夜处理，得到沉淀物，收集沉淀物即为麻花艽多糖粗提物，将麻花艽多糖粗提物溶解于水中，制得浓度为8mg/mL的麻花艽多糖粗提物水溶液。

步骤3，将浓度为8mg/mL麻花艽多糖粗提物水溶液上样到三维多孔氨基石墨烯脱色柱中，其中脱色过程中的pH为7，温度为55℃，脱色平衡时间为5min。收集过滤液。

步骤4，苯酚-硫酸法测定植物多糖脱色后的保留率，通过吸光度法测定脱色前后多糖在紫外分光光度计420nm下的吸光值，从而得到脱色率。

步骤5，将步骤3中脱色后的脱色柱用去离子水洗涤3次后，用0.1mol/L NaOH作洗脱液将脱色柱洗脱至无色，然后再用去离子水洗涤3次，得到再生的三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

该实施例中麻花艽多糖的脱色率为91.6％，多糖保留率为97.3％。

实施例8

步骤1，以天然石墨为材料，通过经典的Hummers方法制备得到氧化石墨烯后，制备浓度为6mg/mL的氧化石墨烯溶液；以体积比计，混合氧化6mg/mL的石墨烯溶液和乙二胺，制得混合溶液A，混合比例为氧化石墨烯溶液：乙二胺＝200：1.2，将混合溶液A超声10min，然后转移到具有聚四氟乙烯内衬的高压釜中，在120℃下反应14h，得到三维多孔氨基石墨烯水凝胶，用去离子水洗涤后装载到色谱中，得到三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

步骤2，将洗干净的麻花艽，按照料液比1g:(10～20)mL溶解于蒸馏水中，得到混合物B，将混合物B超声提取，超声提取3次，收集并合并3次提取的提取液，得到提取液C，对提取液C进行醇沉处理，具体为按照体积比1：4混合提取液与无水乙醇，混合后在4℃下过夜处理，得到沉淀物，收集沉淀物即为麻花艽多糖粗提物，将麻花艽多糖粗提物溶解于水中，制得浓度为8mg/mL的麻花艽多糖粗提物水溶液。

步骤3，将浓度为8mg/mL麻花艽多糖粗提物水溶液上样到三维多孔氨基石墨烯脱色柱中，其中脱色过程中的pH为7，温度为25℃，脱色平衡时间为5min。收集过滤液。

步骤4，苯酚-硫酸法测定植物多糖脱色后的保留率，通过吸光度法测定脱色前后多糖在紫外分光光度计420nm下的吸光值，从而得到脱色率。

步骤5，将步骤3中脱色后的脱色柱用去离子水洗涤3次后，用0.1mol/L NaOH作洗脱液将脱色柱洗脱至无色，然后再用去离子水洗涤3次，得到再生的三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

将步骤2，3，4，5循环5次。

该实施例中第1次麻花艽多糖的脱色率为95.3％，多糖保留率为93.7％；

该实施例中第2次麻花艽多糖的脱色率为93.3％，多糖保留率为94.8％；

该实施例中第3次麻花艽多糖的脱色率为92.4％，多糖保留率为95.0％；

该实施例中第4次麻花艽多糖的脱色率为92.0％，多糖保留率为94.4％；

该实施例中第5次麻花艽多糖的脱色率为90.4％，多糖保留率为95.3％。

参见图2为麻花艽多糖粗提液pH对脱色率和保留率的影响图，其中的数字编号为实施例编号，从图中可以看出，在pH 4-7的范围内，脱色率和回收率都保持在较高的范围。

参见图3为脱色过程中温度对麻花艽多糖脱色率和保留率的影响图，从图中可以看出，在25～45℃时，脱色率呈现温度依赖性增加；在55℃时，脱色率略微下降。在25～55℃温度范围内，保留率保持在90％之上。

参见图4为脱色柱经再生后5次循环脱除麻花艽多糖色素后脱色率和保留率的影响图，从图中可以看出，五次循环中麻花艽多糖的脱色率随着次数略微下降，保留率基本不变，但两者都保持再较高的范围内，脱色率大于90％，保留率大于90％。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，混合氧化石墨烯溶液和乙二胺，制得混合溶液A，混合溶液A超声处理后，转移到具有聚四氟乙烯内衬的高压釜中，在120℃下反应14h后制得三维多孔氨基石墨烯水凝胶，将三维多孔氨基石墨烯水凝胶洗涤后装载到色谱中，获得三维多孔氨基石墨烯脱色柱；步骤1中，氧化石墨烯溶液和乙二胺的体积比为200:1.2；

步骤2，将麻花艽溶于水中，得到混合物B，将混合物B超声提取，得到提取液C；混合提取液C和无水乙醇，混合后在4℃下静置处理，得到沉淀物为麻花艽多糖粗提物，将麻花艽多糖粗提物溶解于水中，得到麻花艽多糖粗提物水溶液；步骤2中，所述麻花艽多糖粗提物水溶液中麻花艽多糖粗提物的浓度为8mg/mL；

步骤3，将麻花艽多糖粗提物水溶液上样至三维多孔氨基石墨烯脱色柱中进行脱色，脱色过程的pH值为4~7，脱色温度为25~55℃，脱色平衡时间为5min，脱色后收集过滤液；

步骤4，将脱色后收集的过滤液冷冻干燥后，获得脱色后的麻花艽多糖粉末。

2.根据权利要求1所述的一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法，其特征在于，步骤1中，所述氧化石墨烯溶液的浓度为6mg/mL。

3.根据权利要求1所述的一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法，其特征在于，步骤1中，所述氧化石墨烯溶液中的氧化石墨烯通过Hummers方法制备得到。

4.根据权利要求1所述的一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法，其特征在于，步骤2中，麻花艽溶于水中的料液比为1g：（10~20）mL。

5.根据权利要求1所述的一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法，其特征在于，步骤2中，混合物B超声提取3次后，得到提取液C。

6.根据权利要求1所述的一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法，其特征在于，步骤2中，提取液C和无水乙醇的混合体积比为1:4。

7.根据权利要求1-6任意一项所述的三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法，其特征在于，步骤3后，脱色后的三维多孔氨基石墨烯脱色柱通过去离子水洗涤后，通过NaOH溶液作为洗脱液将脱色柱洗脱至无色，再通过去离子水洗涤后，获得再生的三维多孔氨基石墨烯脱色柱。

8.根据权利要求7所述的一种三维多孔氨基石墨烯脱色柱脱除麻花艽多糖色素的方法，其特征在于，所述NaOH溶液的浓度为0.1mol/L。

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