CN113897420A - 基于扩增子测序的大片段重排检测的引物组合物、试剂盒和检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了基于扩增子测序的大片段缺失检测的引物组合物、试剂盒和检测方法。本发明的引物组合物包括：分别针对不同核酸序列的双向扩增引物组和单向扩增引物组，双向扩增引物组至少覆盖全部外显子核酸序列，并可选择覆盖内含子连接外显子两侧的连接区核酸序列、UTR区核酸序列等；单向引物组与所述双向引物组不重合的覆盖全部靶向区域。本发明引物组合物可用于识别受检样本中可能存在的大片段缺失突变。本发明尤其提高了内含子区域的大片段缺失突变的检测能力，可以检测更大范围的大片段缺失突变，且可以在拷贝数变异分析的基础上，还可以断点的识别来佐证大片段缺失突变的判别，分析结果更加精确可靠。
Description
技术领域
本发明涉及一种基于扩增子测序的大片段重排检测的引物组合物、试剂盒和检测方法。
背景技术
大片段重排(large genomic rearrangement,LGR)，是指基因组中出现的大片段DNA断裂重组现象，会导致重排区域基因的功能变化，包括外显子的缺失(deletion)和扩增(duplication)。LGR是一类重要的致病性突变，其准确检测对于临床实践至关重要。
目前用于进行LGR(主要为大片段缺失)检测技术主要有Long Range PCR，NGS，Souther Blot，qPCR以及MLPA，其中以多重连接探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification，MLPA)最为常用，一般和Sanger测序一起用于检测结果的对比验证。NGS(二代测序)技术的发展，极大地提高了检测的通量并降低了检测成本，通过设计扩增引物对靶向区域进行扩增，测序仪对靶向序列进行测序后的结果经过生物信息分析后得出检测结果。通过NGS的方法，大多数突变均可被检测，包括SNV、小片段插入，但是目前尚未有商业化的NGS技术可有效检测大片段重排。
BRCA1/2基因与乳腺癌和卵巢癌高度相关，存在BRCA1/2基因突变的患者可从特定的靶向治疗药物中获益，检测BRCA1/2基因具有重要的临床意义。BRCA1/2基因的突变类型有SNV(点突变)、indel(插入缺失)、LGR(大片段基因重排，主要有大片段缺失、插入和重复)，其中SNV和indel占比最高，LGR中以大片段缺失类型占比最高。在这些突变类型当中，以LGR类型的检测难度最高。
目前市场上可用于同时检测BRCA1/2基因所有SNV、Indel以及大片段缺失的方法几乎没有，国内市场主要为艾德BRCA检测试剂盒(可检测SNV\Indel)，国外有Devyser BRCANGS(可检测SNV\Indel\大片段缺失及重复)检测试剂盒。两者均只能检测外显子区、外显子与内含子连接处20bp左右的序列以及启动子区域。其均在上述区域设计特异性扩增引物进行第一步PCR扩增，在第一步PCR靶向扩增产物的基础上进行第二步Index PCR扩增，即在靶向扩增产物上加上测序Index序列用于上机测序。
上述现有技术的特点为仅能覆盖BRCA1/2基因的外显子区、外显子和内含子连接处20bp的序列以及启动子区域，其余的大量的内含子序列无法覆盖，而这些内含子序列中也存在相当数量的各种突变类型比如大片段缺失。因此本领域急需新的基因大片段缺失检测技术。
发明内容
为解决现有技术存在的问题，本发明提供基于扩增子测序的大片段缺失检测的引物组合物、核酸扩增方法、试剂盒以及检测方法。本发明所设计的引物组合物，可以覆盖靶基因的所有外显子及内含子区域，具有对外显子及内含子区域的大片段缺失突变的检测能力。
本发明第一方面提供一种基于扩增子测序的大片段缺失检测的引物组合物，所述引物组合物包括：
双向扩增引物组和单向扩增引物组，所述双向扩增引物组包括多个上下游引物对，所述单向扩增引物组包括全部均为正向或反向的一条或多条引物；所述双向扩增引物组靶向双向区段的核酸序列，所述单向扩增引物组靶向单向区段的核酸序列，所述双向区段和所述单向区段互不重叠。
进一步的，所述双向区段至少包括靶向区域内的全部外显子序列，所述单向区段至少包括与一条或多条所述外显子序列连接的内含子序列的一部分；所述靶向区域由双向区段和单向区段构成。
其中，所述单向区段不存在大片段缺失的情况下，所述单向引物组无法通过扩增反应产生可检测的扩增子。
其中，所述单向区段存在大片段缺失的情况下，所述单向引物组通过扩增反应产生可检测的扩增子。
其中，所述双向区段存在大片段缺失的情况下，以所述大片段为模板进行扩增产生的扩增子拷贝数减小。
其中，所述双向区段和所述单向区段连接处存在大片段缺失的情况下，以所述大片段在所述双向区段的部分为模板进行扩增产生的扩增子拷贝数减小，且所述单向引物组通过扩增反应产生可检测的扩增子。
进一步的，所述双向区段还包括内含子连接外显子两侧的连接区核酸序列，所述连接区核酸序列长度为10～2000bp。
其中，所述上下游引物分别特异性结合至目标序列的上游和下游，用于通过扩增反应产生扩增子。
进一步的，所述双向区段还包括UTR区核酸序列。
进一步的，所述双向扩增引物组和/或单向扩增引物组中所包含引物的长度区间为60～220bp。优选的，所述双向扩增引物组和/或单向扩增引物组中各引物的长度为90～150bp；更优选的，所述各引物的长度为150bp。
进一步的，所述双向扩增引物组和/或所述单向扩增引物组中至少包含部分rhPCR引物(RNase H-Dependent PCR，见美国专利申请号US12433896，公开号US20090325169A1)。优选的，所述双向扩增引物组和/或所述单向扩增引物组中全部引物为rhPCR引物。
进一步的，所述靶向区域没有具体限制，优选可能或经验证存在大片段缺失的基因或基因片段，更优选具有临床意义的靶基因或基因片段，例如为BRCA1/2基因或BRCA1/2基因片段。
进一步的，所述双向扩增引物组的引物序列如SEQ ID NO:1～273和SEQ ID NO:276～542所示；所述单向扩增引物组的引物序列如SEQ ID NO:274和275所示。
本发明第二方面提供一种核酸扩增方法，包括：
在核酸扩增反应体系中利用双向扩增引物组和单向扩增引物组进行靶向扩增，所述双向扩增引物组包括多个上下游引物对，所述单向扩增引物组包括全部均为正向或反向的一条或多条引物；所述双向扩增引物组靶向双向区段的核酸序列，所述单向扩增引物组靶向单向区段的核酸序列，所述双向区段和所述单向区段互不重叠。
进一步的，所述双向区段至少包括靶向区域内的全部外显子序列，所述单向区段至少包括与一条或多条所述外显子序列连接的内含子序列的一部分；所述靶向区域由双向区段和单向区段构成。
其中，所述单向区段不存在大片段缺失的情况下，所述单向引物组无法通过扩增反应产生可检测的扩增子。
其中，所述单向区段存在大片段缺失的情况下，所述单向引物组通过扩增反应产生可检测的扩增子。
其中，所述双向区段存在大片段缺失的情况下，以所述大片段为模板进行扩增产生的扩增子拷贝数减小。
其中，所述双向区段和所述单向区段连接处存在大片段缺失的情况下，以所述大片段在所述双向区段的部分为模板进行扩增产生的扩增子拷贝数减小，且所述单向引物组通过扩增反应产生可检测的扩增子。
进一步的，所述双向区段还包括内含子连接外显子两侧的连接区序列，所述连接区序列长度为10～2000bp。
进一步的，所述双向区段还包括所述靶向区域内的UTR区。
进一步的，所述双向扩增引物组和/或单向扩增引物组中各引物的长度为60～220bp。优选的，所述双向扩增引物组和/或单向扩增引物组中各引物的长度为90～150bp；更优选的，所述各引物的长度为150bp。
进一步的，所述双向扩增引物组和/或所述单向扩增引物组中至少部分引物为rhPCR引物。
本发明第三方面提供一种大片段缺失的检测方法，其特征在于，包括步骤：
(1)在包括样本核酸的核酸扩增反应体系中利用双向扩增引物组和单向扩增引物组对所述样本核酸进行靶向扩增得到扩增产物，所述双向扩增引物组包括多个上下游引物对，所述单向扩增引物组包括全部均为正向或反向的一条或多条引物；所述双向扩增引物组靶向双向区段的核酸序列，所述单向扩增引物组靶向单向区段的核酸序列，所述双向区段和所述单向区段互不重叠。
(2)所述扩增产物纯化后，进行Index PCR扩增得到Index PCR扩增产物；
(3)所述Index PCR扩增产物纯化后，形成最终待测序检测文库产物，并上机测序；
(4)生物信息分析测序结果。
进一步的，所述生物信息分析包括通过断点识别和/或拷贝数变异(copy numbervariation,CNV)来检测大片段缺失。
本发明第四方面提供一种基于二代测序平台检测大片段缺失的试剂盒，包括本发明第一方面所述的引物组合物。
本发明第五方面提供一种本发明第一方面所述引物组合物在制备按照如下方法检测大片段缺失的试剂盒中的应用，所述方法包括以下步骤：
S1、样本核酸抽提；
S2、构建测序文库并上机测序；
S3、生物信息分析测序结果。
本发明第六方面提供一种适用于本发明第五方面所述应用中生物信息分析的算法，所述算法包括使用断点识别和/或拷贝数变异检测的方法对大片段缺失进行检测。
本发明的有益效果为：
本发明采用双向扩增引物与单向扩增引物结合使用的方法，双向扩增引物除覆盖外显子外，可选择的覆盖内含子连接外显子两侧的连接区、UTR区等；单向扩增引物可覆盖其他未被双向扩增引物覆盖的内含子区域，从而使靶向扩增区域覆盖更广，可覆盖全部的外显子和内含子区域。
单向引物覆盖的内含子区域以单向扩增引物逐段覆盖的独特方式进行大片段缺失检测，可以通过形成的独特扩增产物进行大片段缺失断点的识别；同时单向扩增引物的使用减少了引物数量，减少了引物间相互干扰，可适应于更大区域的检测，提高了检测的灵敏性和特异性
rhPCR引物的使用，可有效避免引物间的相互作用及干扰，增加了可同时使用的引物数量，可以适用于更大区域的检测。
本发明的检测试剂结合思路迪自动化建库测序仪系统(ANDiS 400)进行建库，全部流程自动化，极大的节省了人力和时间的投入。
本发明可以同时检测点突变和小片段插入缺失突变，以及大片段缺失突变，检测范围更大，且可以在CNV分析的基础上，还可以断点的识别来佐证大片段缺失突变的判别，是分析结果更加精确可靠。
附图说明
图1.本发明技术原理示意图。
图2.本发明测序结果进行数据分析的流程示意图。
图3.NCI-H2066样本的文库片段分布示意图。
图4.HCC1599样本的文库片段分布示意图。
图5.HCC1428样本的文库片段分布示意图。
图6.国家参考品25样本的文库片段分布示意图。
图7.NCI-H2066样本的数据分析图。
图8.HCC1599样本的数据分析图。
图9.HCC1428样本的数据分析图。
图10.国家参考品25样本的数据分析图。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为具体公开了该范围的上限和下限以及它们之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。
本发明的引物组合物包括双向扩增引物组和单向扩增引物组，所述双向扩增引物组和单向扩增引物组分别针对靶向区域的不同核酸序列，通过双向扩增引物和单向扩增引物相结合，可以覆盖全部的外显子和内含子区域。一方面减少了引物数量，降低了引物间相互干扰；另一方面可以通过拷贝数变异检测，以及断点识别来进行大片段缺失的检测，使得检测结果更加精准可靠。本发明所述的“覆盖”，是指按照目标区域的核酸序列来设计双向引物组或单向引物组时，并不要求前后引物一定按照完全的首尾相接的方式来设计，可以选择有一定的重叠，或者前后引物间也可以存在一定的间隔，首尾相接的方式只是引物设计的可选方式之一，也可以采用上述不同设计方式的结合。
双向引物所覆盖的双向区段的范围可根据实际情况，比如不同的靶基因或基因片段以及临床需求来界定。一般应包括全部外显子区域，除此以外，也可选择的包括内含子与外显子的连接区(即内含子序列中与外显子连接的部分序列)，UTR区等。以BRCA1/2为例，双向区段可以包括：全部外显子，内含子与外显子的连接区10bp～2000bp，UTR区及用于辅助CNV检测的区域。单向区段为所述靶向区域内除双向区段之外的核酸序列(主要为内含子序列)。
其中，当单向区段不存在大片段缺失的情况下，单向引物组无法通过扩增反应产生可检测的扩增子。当单向区段存在大片段缺失的情况下，单向引物组可通过扩增反应产生可检测的扩增子，此时可以通过断点识别来检测大片段缺失的存在。
其中，当双向区段不存在大片段缺失的情况下，正反向引物扩增产生正常的扩增子；当双向区段存在大片段缺失的情况下，以所述大片段为模板进行扩增产生的扩增子拷贝数减小，并依据拷贝数变异来检测大片段缺失。
其中，所述双向区段和所述单向区段连接处存在大片段缺失的情况下，以所述大片段在所述双向区段的部分为模板进行扩增产生的扩增子拷贝数减小，且所述单向引物组通过扩增反应产生可检测的扩增子。
本发明的“可检测”是指可通过上机进行测序，并可通过生物信息分析方法检测到相关序列及序列突变信息(比如拷贝数变异、大片段重排、indel等)。
为了能够检测BRCA1/2基因外显子及内含子区域的大片段缺失突变，本发明的实施例在BRCA1/2基因的所有外显子及外显子两侧的部分内含子区域设计了双向扩增引物，可形成正常的扩增子；对于双向扩增引物不能覆盖的区段，使用单项扩增引物来覆盖。当检测样本不存在大片段缺失时，这些正反单项扩增引物由于距离太远无法进行扩增，无法检测到相应的测序数据。当检测样本出现大片段缺失时，如果在双向引物扩增区域可能导致原本正常情况应该被扩增的区段由于缺失的原因而无法被检测到，在最终测序数据中会出现拷贝数显著降低的现象(拷贝数变异检测)；如果在单向引物扩增区域则正反单项扩增引物覆盖区段由于缺失而被截短，原本相聚很远的正反向引物距离变得接近，可以进行扩增而被检测到(断点检测)。上述的断点检测和拷贝数变异检测一起分析判断样本是否存在大片段缺失突变。
相关原理示意图如图1所示。如图1A所示，外显子区段由正反向引物(双向引物)同时覆盖，形成扩增子；外显子两侧与内含子连接的一定范围内由正反向引物同时覆盖，形成扩增子；在双向引物覆盖区域以外由单向引物区域逐步覆盖，这一类单向引物也可以称为walking primer。如图2所示，当存在大片段缺失的情况下，双向扩增区域出现缺失，本该存在的扩增子无法检测到，可以通过拷贝数变异来检测大片段缺失；单向引物区的单向引物由于大片段缺失而与反向引物靠近，形成正常情况下(没有大片段缺失)不存在的扩增产物，可以通过断点识别来检测大片段缺失。
应理解，本发明的引物扩增方法可普遍适应于不同基因片段、基因或基因组合的大片段重排的检测，而不仅限于某种特定的基因，更不限于实施例中的示例基因，实施例仅用于示例性说明本发明，并不限定本发明的适用范围。
实施例中使用的试剂及仪器如表1所示：
表1：实施例使用的试剂及仪器
实施例
1引物及index配制：
引物信息如表2所示(字母F代表正向引物，R代表反向引物)，购买自IDT公司，以BRCA1/2基因的部分序列作为靶向区域(包括BRCA1/2基因的部分外显子和内含子)。根据每管引物及index标签标示的量，添加适当体积IDTE缓冲液(PH7.5)，充分溶解并短暂离心，配制成浓度为100μM引物溶液，例如引物总量为8nmoL，则添加80μL IDTE(PH7.5)配制。所有的引物使用的是封闭-可切割的rhPCR引物(来自Integrated DNA Technologies，IDT公司)，序列中的rA、rG、rC、rU各代表一个RNA碱基，每一序列的3’端连接有3SpC3，作为3’端核酸封闭(Blocker)的一种方式。
表2：引物名称及序列
根据上表引物信息中的扩增pool信息，将所有的标示为pool1的引物，各取2uL混合，并标注为“pool_1primer mix”；将所有的标示为pool2的引物，各取2uL混合，并标注为“pool_2primer mix”。
取部分配制好的100μM index(包含预计使用的i5及i7)稀释至5μM备用，每个样本使用2μL稀释后的i5及i7 index。
2测试样本信息：
NCI-H2066、HCC1599、HCC1428为从ATCC上购买的细胞，经过培养后获得的细胞系；国家参考品25为从中国食品药品检定研究院购买的国家参考品。各个样本中含有已知的大片段缺失突变。
3PCR1靶向扩增：
3.1每一个测试样本，根据如下表格，配制PCR1_pool1扩增反应液：
| 试剂 | 体积(μL) |
| 4x rhAmpSeq Library Mix 1 | 5 |
| pool_1primer mix | 0.6 |
| 测试样本DNA | 2.5 |
| H2O | 11.9 |
| total | 20 |
3.2每一个测试样本，根据如下表格，配制PCR1_pool2扩增反应液：
| 试剂 | 体积(μL) |
| 4x rhAmpSeq Library Mix 1 | 5 |
| pool_2primer mix | 0.6 |
| 测试样本DNA | 2.5 |
| H2O | 11.9 |
| total | 20 |
3.3分别将所有配制好的PCR1_pool1扩增反应液及PCR1_pool2扩增反应液涡旋混匀并短暂离心，于PCR仪中运行如下程序：
4PCR1产物合并及纯化：
4.1提前将AMpure Beads(即agencourt ampure XP-PCR purification beads)从4℃冰箱取出，室温平衡30min。
4.2PCR程序结束后，将同一个测试样本的PCR1_pool1扩增反应液和PCR1_pool2扩增反应液取出，并于同一个1.5mL离心管中混匀。
4.3将平衡室温后的AMpure Beads涡旋混匀，取60μL AMpure Beads(1.5X)至上一步40μL PCR产物中。
4.4将PCR产物与磁珠吹打或涡旋混匀，室温静置孵育10min。
4.5孵育完成后，将反应管置于磁力架上静置5min，待溶液完全澄清后，小心移除并丢弃上清液，保留管内磁珠，切忌接触磁珠。
4.6将反应管留在磁力架上，向反应管中加入新鲜配置的80％乙醇200μL，静置1min后，吸弃乙醇。
4.7重复上一步骤，二次清洗磁珠。
4.8将反应管短暂离心，重新置于磁力架上，用10μL移液器将残留酒精丢弃干净，晾干3min至酒精完全挥发且磁珠仍保持光泽。
4.9将反应管从磁力架上取下，加入15μL IDTE(pH 8.0)，吹打、漩涡混匀，室温孵育3min。
4.10孵育完成后，将反应管置于磁力架上，静置3min或直至管内溶液完全澄清，移取11μL溶液至新的0.2mL离心管中，做好标记。
5PCR2 indexing扩增：
5.1按照如下表格，向上述吸取出的纯化后的PCR1扩增产物中添加试剂，配制PCR2扩增反应液：
四个样本所使用的Indexing PCR primer i5(i5 primer)和Indexing PCRprimer i7(i7 primer)如下表所示，标签(index)序列下划线表示：
5.2将所有配制好PCR2扩增反应液涡旋混匀并短暂离心，于PCR仪中运行如下程序：
6PCR2产物纯化及质控：
6.1PCR程序结束后，将平衡室温后的AMpure Beads涡旋混匀，取20μL AMpureBeads(1X)至每个测试样本的PCR2产物中。
6.2将PCR产物与磁珠吹打或涡旋混匀，室温静置孵育10min。
6.3孵育完成后，将反应管置于磁力架上静置5min，待溶液完全澄清后，小心移除并丢弃上清液，保留管内磁珠，切忌接触磁珠。
6.4将反应管留在磁力架上，向反应管中加入新鲜配置的80％乙醇200μL，静置1min后，吸弃乙醇。
6.5重复上一步骤，二次清洗磁珠。
6.6将反应管短暂离心，重新置于磁力架上，用10μL移液器将残留酒精丢弃干净，晾干3min至酒精完全挥发且磁珠仍保持光泽。
6.7将反应管从磁力架上取下，加入22μL IDTE(pH 8.0)，吹打/漩涡混匀，室温孵育3min。
6.8孵育完成后，将反应管置于磁力架上，静置3min或直至管内溶液完全澄清，移取20μL溶液至新的0.2mL离心管中，做好标记。
6.9使用Qubit 3.0及配套试剂，按照产品说明书完成样本浓度测定。
6.10使用Labchip GX Touch及配套试剂，按照产品说明书完成样本片段分布分析。
7测序及数据分析：
7.1选择illumina测序平台(诸如Miseq，NextSeq，Novaseq)进行测序反应，选择PE150或者PE100测序试剂。
7.2按照测序反应通用试剂盒(测序法)说明书要求在适用机型上进行上机检测。
7.3对测序结果进行数据分析，流程示意图如图2所示。
BCL数据拆分：将四个样本混合上机测序的数据通过i5,i7 index拆分出单个样本的测序数据。
去除接头：使用adapterRemovalV2软件去除测序数据中5’端可能存在的接头序列。
比对到人基因组：使用BWA mem软件将原始序列比对到人基因组。
LGR检测(Chimeric reads)：从比对的原始BAM文件中提取chimeric reads(嵌合形式reads)，抓取chimeric reads包含的断点信息。若一对reads同时支持一组断点，计算一次。统计每组断点support chimeric fragment(支持嵌合型片段)的数量。在每组断点处统计wild-type fragment(野生型片段)的数量，定义为跨断点，不为chimeric read，为primary read。每个LGR VAF(变异频率)计算为support chimeric fragment/(supportchimeric fragment+wild-type fragment)。VAF>0.2的判定为LGR。
LGR检测(CNV)：从比对的原始BAM文件中计算每对primer pair(扩增子)的片段(fragment)数量。计算每个扩增子(amplicon)的均一化后覆盖度，定义为扩增子测序深度除以样本平均扩增子测序深度。每个扩增子均一化覆盖度再除以对照(control)样本中此扩增子中位覆盖比例。计算每个外显子对应所有扩增子均一化覆盖度的总值。使用CBS方法对exon level(外显子水平)覆盖比例进行分段。对每段进行1000次permutation test，即首先计算此段所有外显子的总值，作为CNV score。再从此样本所有外显子中随机抽取和此段内外显子数目相同的外显子组(exons)，计算其总均一化后覆盖度比例作为CNV score。若真实CNV score低于所有permutation CNV scores(P<0.001)，则判定为LGR。
实验结果：
1.文库浓度记录：
| 样本 | 文库浓度(ng/uL) | 体积(uL) |
| NCI-H2066 | 15.3 | 20 |
| HCC1599 | 15 | 20 |
| HCC1428 | 11.4 | 20 |
| 国家参考品25 | 22.2 | 20 |
2.文库片段大小分布：
NCI-H2066，HCC1599，HCC1428，国家参考品25的文库片段大小分布分别如图3、图4、图5、图6所示。
3.LGR检测结果汇总：
NCI-H2066，HCC1599，HCC1428，国家参考品25四个样本的大片段缺失检测结果分别如图7、图8、图9、图10及下表所示。
可见，本发明的技术方案对于大片段缺失的检测结果与标准结果一致，并可以通过断点检测和拷贝数变异检测一起分析判断样本是否存在大片段缺失突变。
以上所述仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换等都应涵盖在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 上海思路迪生物医学科技有限公司
<120> 基于扩增子测序的大片段重排检测的引物组合物、试剂盒和检测方法
<130> LT1912094F
<160> 550
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 54
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctgcgtg tcgcgtcacg gcgt 54
<210> 2
<211> 57
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgtgaggg gacagatttg tgaccgg 57
<210> 3
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcattgga ggaatatcgt aggtaaaaat 60
gcctat 66
<210> 4
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctactttct tcagaagctc caccctata 59
<210> 5
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctatattca aagagcaagg gctgactctg 60
<210> 6
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgtgaaaa ctaaaatgga tcaagcagat 60
gat 63
<210> 7
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgtcctgt tgttctacaa tgtacacatg 60
taa 63
<210> 8
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctccttaat gatcagggca tttctataaa 60
aaataaac 68
<210> 9
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 9
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttttgcat tctagtgata atatacaata 60
cacataaa 68
<210> 10
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 10
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgctattt ttccaatcat gatgaaagtc 60
tgaag 65
<210> 11
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 11
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttatcgct tctgtgacag acagtgaaa 59
<210> 12
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 12
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctactgttt ctatgagaaa ggttgtgaga 60
at 62
<210> 13
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 13
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctatgtcct agaagatgaa gtatatgaaa 60
cagttgta 68
<210> 14
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 14
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttactcat ttgtatctga agtggaacca 60
aa 62
<210> 15
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 15
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgaatgg tctcaactaa ccctttcagg 60
tc 62
<210> 16
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 16
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcttcaga gaattctttg ccacgtattt 60
ct 62
<210> 17
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 17
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaagagaa tcacctaaag agactttcaa 60
tgc 63
<210> 18
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 18
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctcctta tgtccaaatt taattgataa 60
tggaagct 68
<210> 19
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 19
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaaaatca gaactaatta actgttcagc 60
ccagt 65
<210> 20
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 20
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagaacca actttgtcct taactagctc 60
ttt 63
<210> 21
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 21
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcagaagc tgattctctg tcatgcctgc 60
<210> 22
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 22
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgaataca gtgatactga ctttcaatcc 60
caga 64
<210> 23
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 23
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttctagag gcaaagaatc atacaaaatg 60
tcaga 65
<210> 24
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 24
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgccacct gaaaaataca tgagagtagc 60
a 61
<210> 25
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 25
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctttgtctt ccaagtagct aatgaaagga 60
ata 63
<210> 26
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 26
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgataaac aagcaaccca agtgtcaatt 60
a 61
<210> 27
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 27
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaataatg attacatgaa caaatgggca 60
ggac 64
<210> 28
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 28
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcttcaaa gatattgaag aacaatatcc 60
tactagt 67
<210> 29
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 29
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttctgatt gtaaaaatag tcatataacc 60
cctcaga 67
<210> 30
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 30
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctccaagct acatattgca gaagagtaca 60
t 61
<210> 31
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 31
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttagacag cagcaagcaa tttgaaggta 60
<210> 32
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 32
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcacaaaa ctgaatgttt ctactgaagc 60
tctgc 65
<210> 33
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 33
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgttgtt tcaatgttta agatagaaaa 60
tcataatg 68
<210> 34
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 34
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgaagat aacaaatata ctgctgccag 60
tagaa 65
<210> 35
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 35
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgtcttaa attatctggc cagtttatga 60
aggag 65
<210> 36
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 36
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctggagcaa aatataaaag attttgagac 60
ttctg 65
<210> 37
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 37
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctacattct gacataagaa agaacaaaat 60
ggacat 66
<210> 38
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 38
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcccgaac gtgatgaaaa gatcaaaga 59
<210> 39
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 39
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcaaagac cctaaagtac agagaggcct 60
gt 62
<210> 40
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 40
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagctctt aagtgataat ttatgtagac 60
aaactga 67
<210> 41
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 41
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagctttt tacacaagtt gtagtagaaa 60
aacttctg 68
<210> 42
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 42
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttcaaaca gtactatagc tgaaaatgac 60
aaaaat 66
<210> 43
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 43
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagccagt attgaagaat gttgaagatc 60
aaaaa 65
<210> 44
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 44
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttccatat ctaatagtaa taattttgag 60
gtagggcc 68
<210> 45
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 45
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaacgaaa attatggcag gttgttacga 60
gg 62
<210> 46
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 46
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttcagagt gaagaaattt tacaacataa 60
ccaaaata 68
<210> 47
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 47
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcagtctc atctgcaaat acttgtggga 60
tt 62
<210> 48
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 48
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagatagt accaagcaag tcttttccaa 60
agt 63
<210> 49
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 49
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctttctc tggatttagt acagcaagtg 60
gaa 63
<210> 50
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 50
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaaaatac ttcctcgtgt tgataagaga 60
aacc 64
<210> 51
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 51
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgaaccaa agtgtcactt gttgagaaca 60
<210> 52
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 52
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgaagttt gttctactta ctccaaagat 60
tca 63
<210> 53
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 53
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgaaaatg aggaaatggt tttgtcaaat 60
tca 63
<210> 54
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 54
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagaaccc tcaatcaaaa gaaacttatt 60
aaatga 66
<210> 55
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 55
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaattgtt tcctaggcac aataaaagat 60
cga 63
<210> 56
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 56
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgtcaaga gatacagaat ccaaatttta 60
ccgcac 66
<210> 57
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 57
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgagacac ttgattacta caggcagacc 60
aa 62
<210> 58
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 58
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgagatt catcagttta acaaaaacaa 60
ctcca 65
<210> 59
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 59
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaattaca agtcttcaga atgccagaga 60
ta 62
<210> 60
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 60
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctattgtgt gatacatgtt tactttaaat 60
tgttttt 67
<210> 61
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 61
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagtttca cactgaagat tattttggta 60
aggaaag 67
<210> 62
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 62
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctggtgtgg atccaaagct tatttctaga 60
a 61
<210> 63
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 63
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgaattct agagtcacac ttcctaaaat 60
atgcattt 68
<210> 64
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 64
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgcagata cccaaaaagt ggccattat 59
<210> 65
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 65
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagattat tcttcatgga gcagaactgg 60
tg 62
<210> 66
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 66
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgtccag atttctgcta acagtactcg 60
gc 62
<210> 67
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 67
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcctggcc tgatacaatt aacttgaatg 60
t 61
<210> 68
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 68
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagttgct tttgaattta cagtttagtg 60
aatta 65
<210> 69
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 69
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctttttgtt ctgattgctt tttattccaa 60
tatc 64
<210> 70
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 70
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcaaaagg aacaaggttt atcaagggat 60
gtc 63
<210> 71
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 71
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctggcgtcc atcatcagat ttatattctc 60
tgt 63
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<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 72
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgttagt ttatggaatc tccatatgtt 60
gaattttt 68
<210> 73
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 73
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctccatctt gttctgaggt ggacctaat 59
<210> 74
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 74
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctggcaa taaagttttg gatagacctt 60
aat 63
<210> 75
<211> 57
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 75
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaagtcgg ctggcctaag tctcaag 57
<210> 76
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 76
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaagacct agtccttcca acagctataa 60
<210> 77
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 77
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcctggtg ggatctgtca ttttatagat 60
atgaaata 68
<210> 78
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 78
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaccggtt cttgaaaatc ttctgctgtt 60
<210> 79
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 79
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctacataat cgatcccaag cactctcctt 60
<210> 80
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 80
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgccaaca acagcctgaa tagaaagaat 60
a 61
<210> 81
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 81
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagcagaa aatctttaag ggacccttgc 60
a 61
<210> 82
<211> 56
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 82
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctggtcctg tggctctgta cctgtg 56
<210> 83
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 83
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaaaggac cccatatagc acaggtaca 59
<210> 84
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 84
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttggaaac ataaatatgt gggtttgcaa 60
ttt 63
<210> 85
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 85
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctaaaga ctgtacttca gggccgtaca 60
<210> 86
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 86
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaaaagga agtctgtttc cacacctgtc 60
<210> 87
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 87
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctgttag tcccatttgt acatttgttt 60
ctccgg 66
<210> 88
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 88
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctgacga agaacttgca ttgataaata 60
cccaag 66
<210> 89
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 89
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgaaacg acgttgtact acatctctga 60
tc 62
<210> 90
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 90
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctactggaa tataatttca aaccacacat 60
tagtactt 68
<210> 91
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 91
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttggaatg aggtctctta gtacagttat 60
t 61
<210> 92
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 92
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctccagtgt gatctctgaa attaaattac 60
ttcaacta 68
<210> 93
<211> 56
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 93
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctggtgc tggaactctg gggttc 56
<210> 94
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 94
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcctttct gtcctgggat tctcttgct 59
<210> 95
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 95
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaaaatgc aattctgagg tgttaaaggg 60
ag 62
<210> 96
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 96
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctcatgt ggttttatgc agcagatgca 60
<210> 97
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 97
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgttgtt aagtcttagt cattagggag 60
ataca 65
<210> 98
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 98
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctttctccc tgctcacact ttcttcca 58
<210> 99
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 99
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgtcttc agaaggatca gattcagggt 60
ca 62
<210> 100
<211> 57
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 100
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctttgctcc tccacatcaa caacctt 57
<210> 101
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 101
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagatgtc agataccaca gcatctttac 60
<210> 102
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 102
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgatttcg caggtcctca agggcaga 58
<210> 103
<211> 55
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 103
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcaccaca cacacgcatg tgcac 55
<210> 104
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 104
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgtaaaa tgtgctcccc aaaagcata 59
<210> 105
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 105
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctccgttcc tctttcttca tcatctgaaa 60
<210> 106
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 106
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctttgtatt tgcagtcaag tcttccaatt 60
ca 62
<210> 107
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 107
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctctgtg ttcttagaca gacactcggt 60
ag 62
<210> 108
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 108
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcaaatgt gtatgggtga aagggctagg 60
a 61
<210> 109
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 109
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctccatcat ctaacaggtc atcaggtgtc 60
t 61
<210> 110
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 110
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttcaggat gcttacaatt acttccagga 60
agac 64
<210> 111
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 111
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctatttcat taatactgga gcccacttca 60
ttag 64
<210> 112
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 112
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttctttca ggtgacattg aatgttcctc 60
aa 62
<210> 113
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 113
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaatgagt ccagtttcgt tgcctctga 59
<210> 114
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 114
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctccttgat tttcttcctt ttgttcacat 60
tca 63
<210> 115
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 115
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgtattc tgcaaatact gagcatcaag 60
tt 62
<210> 116
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 116
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctccatgaa ttagtccctt ggggttttc 59
<210> 117
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 117
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctctaca gatctttcag tttgcaaaac 60
ccttt 65
<210> 118
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 118
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaggctag gattgacaaa ttctttaagt 60
tcac 64
<210> 119
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 119
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcttccat gagttgtagg tttctgctgt 60
g 61
<210> 120
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 120
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctatatgcc tggtagaaga cttcctcctc 60
ag 62
<210> 121
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 121
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgattcta ttgggttagg atttttctca 60
ttctgaat 68
<210> 122
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 122
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctatctgct ttcttgataa aatcctcagg 60
atg 63
<210> 123
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 123
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctccgatag gttttcccaa atattttgtc 60
ttcaa 65
<210> 124
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 124
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctactttgg catttgattc agactcccca 60
t 61
<210> 125
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 125
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctggattct ctgagcatgg cagtttct 58
<210> 126
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 126
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctttcagcc ttttctacat tcattctgtc 60
ttt 63
<210> 127
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 127
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttggtgtt caaatcatta ttactgggtt 60
gat 63
<210> 128
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 128
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaactctg ccaagagatt ttgtgggttg 60
<210> 129
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 129
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctactaaat aggaaaatac cagcttcata 60
gacaaa 66
<210> 130
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 130
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttttgagg ttgtatccgc tgctttgt 58
<210> 131
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 131
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttttacca aggaaggatt ttcgggttca 60
c 61
<210> 132
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 132
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgacagca cttgagtgtc attcttggg 59
<210> 133
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 133
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttttccta ctgtggttgc ttccaacct 59
<210> 134
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 134
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgacaaaa acaaaagcta ataatggagc 60
cacat 65
<210> 135
<211> 55
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 135
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagcagt gccacagcgg ctccg 55
<210> 136
<211> 55
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 136
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgaagac gcgctcgtcc caacc 55
<210> 137
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 137
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtctgc aaaacagaag accaaaatgc 60
a 61
<210> 138
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 138
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgaaaac actttctcgg tgtaatttat 60
aaagttat 68
<210> 139
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 139
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttctgcat agcattaatg acattttgta 60
cttctt 66
<210> 140
<211> 55
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 140
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcctgtcc ctttcccggg actct 55
<210> 141
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 141
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctgtaat tcccgcgctt ttccgttg 58
<210> 142
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 142
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgagttg aagccagctg attataagat 60
g 61
<210> 143
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 143
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagtttg tagttctccc cagtctacca 60
<210> 144
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 144
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagcata aaaatcagat tcatctttat 60
agaacaaa 68
<210> 145
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 145
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgtatg aaacaaactc ccacatacca 60
ctgg 64
<210> 146
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 146
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagctaa agaacttgac caagacatat 60
caggat 66
<210> 147
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 147
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctattgtt agcaatttca acagtctaat 60
caat 64
<210> 148
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 148
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcaacta aacagaggac ttaccatgac 60
ttg 63
<210> 149
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 149
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggcatt gactttccaa tgtggtcttt 60
<210> 150
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 150
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctttagat ttttcacatt catcagcgtt 60
tgcttcat 68
<210> 151
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 151
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcaaaga cggtacaact tccttggaga 60
t 61
<210> 152
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 152
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgttct ctgtgtctaa taggtctttt 60
tctgaaa 67
<210> 153
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 153
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagttcc agatattgcc tgctttactg 60
ca 62
<210> 154
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 154
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctcctt ctgtgagcaa acagtatgta 60
ttt 63
<210> 155
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 155
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagatgt ttcatcatgt atagcataaa 60
taaacttat 69
<210> 156
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 156
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgaagga atcgtcatct ataaaactat 60
atgtacta 68
<210> 157
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 157
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgggtaa taaataactg tagtttttcc 60
ttattaca 68
<210> 158
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 158
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttttgaa tgttgtactg ggtgacatgc 60
t 61
<210> 159
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 159
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttctaga aatcatgact aggtttgaca 60
gaaca 65
<210> 160
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 160
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgcaaca gctcaacgtt tttataattt 60
tcattta 67
<210> 161
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 161
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtctga gaaaagttct tcagagtctg 60
gat 63
<210> 162
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 162
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctccat ataaaaccat ggtagagttc 60
ttgaa 65
<210> 163
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 163
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgtccg attttaaatc ttgacctaga 60
gtcat 65
<210> 164
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 164
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttttgct cttcttaatg ttatgttcag 60
agagc 65
<210> 165
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 165
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctgtaa atgtgcagat acagtattaa 60
ttgactga 68
<210> 166
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 166
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaactga cttcctgatt cttctaatat 60
agtagaa 67
<210> 167
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 167
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgggcat tcattatgac atgaagatca 60
g 61
<210> 168
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 168
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagaata aaagccccta aaccccactt 60
c 61
<210> 169
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 169
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaacatt gaaacaacag aatcatgaca 60
tttac 65
<210> 170
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 170
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagtatt tctcttgtaa ttttcagtaa 60
tttcttcaa 69
<210> 171
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 171
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgacata tgttgtgctg atcagtaaat 60
agca 64
<210> 172
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 172
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagtagc agttaactgt tctttatttg 60
aagtatt 67
<210> 173
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 173
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttatgca attcttctgg tttctgatca 60
aagaa 65
<210> 174
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 174
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgaaggt cactagttga tttccagtac 60
ca 62
<210> 175
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 175
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctggtg atttcactag taccttgctc 60
tt 62
<210> 176
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 176
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcaccac agtctcaata gaaacaaggt 60
ttt 63
<210> 177
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 177
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggctga attttcaatg actgaataag 60
gggact 66
<210> 178
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 178
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcctaca taatctgcag tatttattct 60
ttctggtt 68
<210> 179
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 179
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgagata tcctgaatca ttatatacct 60
catcagaat 69
<210> 180
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 180
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttttatt tttgcagggt gaagagctag 60
tcaca 65
<210> 181
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 181
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctattact ttactgaaac tgtctgtaaa 60
tatgtcttt 69
<210> 182
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 182
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctgaat gtcagcaaaa accttatgtg 60
aatgc 65
<210> 183
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 183
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgactga cttatgaagc ttccctatac 60
tacattta 68
<210> 184
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 184
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgcttg gtactatctt ctatttcaga 60
aaaca 65
<210> 185
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 185
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctatccag agaaagcaga tgaatttacc 60
acat 64
<210> 186
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 186
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgaaga ctatgctcag ttctgattaa 60
atca 64
<210> 187
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 187
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctttgaga gagatatgga gaaactttaa 60
tagagtga 68
<210> 188
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 188
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttttgtt ttcacaggaa catcagaaaa 60
ag 62
<210> 189
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 189
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggacat gtaaaaagag aatgtgtggc 60
atga 64
<210> 190
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 190
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcacttt aaaaatagtg attggcaaca 60
cgaaag 66
<210> 191
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 191
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctccatac ctatagaggg agaacagata 60
taaataa 67
<210> 192
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 192
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaaaacg agacttttct catactgtat 60
taga 64
<210> 193
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 193
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgtagc agaaacttga taaaatggat 60
gtcctg 66
<210> 194
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 194
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctactatc atcagagcca tgtccatcaa 60
tgt 63
<210> 195
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 195
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctaact gaaaggcaaa aattcatcac 60
acaaa 65
<210> 196
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 196
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctactg ctgctttcag agagattcga 60
ggc 63
<210> 197
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 197
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaactga aaagactctg catttttgct 60
gtt 63
<210> 198
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 198
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgatgag ggaatacata aaagttaaca 60
cacaatct 68
<210> 199
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 199
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctttct gggcttaggc atctattagc 60
<210> 200
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 200
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaatgaa attatgtcag aaacacagag 60
aacaagtg 68
<210> 201
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 201
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctccaact gtcagtctgc cattctttaa 60
<210> 202
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 202
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgctctt tgaataatta catcaacaca 60
accaacat 68
<210> 203
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 203
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctccac atattttgct gcttcctttt 60
c 61
<210> 204
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 204
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcataaa gctctgcacc atcttgcaaa 60
g 61
<210> 205
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 205
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctggat ctgagcttgt ttcttatcat 60
tca 63
<210> 206
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 206
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttggatt tataatcatt ttgttagtaa 60
ggtcatttt 69
<210> 207
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 207
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttttgtc gctgctaact gtatgttagc 60
<210> 208
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 208
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaagtct ggatctaaaa atttgctgaa 60
gtgaaggg 68
<210> 209
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 209
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctactggt agctccaact aatcataaga 60
ga 62
<210> 210
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 210
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctcttt tggactagca gaaaacacag 60
aaa 63
<210> 211
<211> 57
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 211
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagtgtg caagggcagt gaagact 57
<210> 212
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 212
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctttgctc cctgttgctg aaaccatac 59
<210> 213
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 213
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttccaaa gacagtcttc taattcctca 60
ttagt 65
<210> 214
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 214
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctttggcc tcaagagaat agctggtttc 60
<210> 215
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 215
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgcttga agtctccctt ggaaatctgc 60
<210> 216
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 216
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctccaaga atgagcttac aaagtggcct 60
ttc 63
<210> 217
<211> 56
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 217
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctacctgt ggtgacccga gagtgg 56
<210> 218
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 218
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtccta ctttgacact ttgaatgctc 60
tttcc 65
<210> 219
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 219
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcacttg ggatcatttg catgcagtat 60
<210> 220
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 220
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctacgatg gcctccatat atacttctta 60
taata 65
<210> 221
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 221
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgaggta aaggcagtct actcaagaaa 60
<210> 222
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 222
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttggagt catctgagga gaattcagtt 60
ctt 63
<210> 223
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 223
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttcgttt cagtctgaga taatcttctg 60
aactgg 66
<210> 224
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 224
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctactgga aaggttaagc gtcaataatt 60
ta 62
<210> 225
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 225
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctacattt agttttaaga tatgcaactg 60
aagcaaaa 68
<210> 226
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 226
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgagacc tcattccatt taatgacaca 60
atct 64
<210> 227
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 227
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcaggat ggaactatag cagaaccaac 60
at 62
<210> 228
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 228
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtgcca atttgaaagc aagatatttt 60
ctcaag 66
<210> 229
<211> 56
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 229
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctccattc ccctgtccct ctctct 56
<210> 230
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 230
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagcttc tctttctctt atcctgatgg 60
gttgt 65
<210> 231
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 231
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtgaac ggacactgaa atattttcta 60
ggaat 65
<210> 232
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 232
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgccaga aaacaccaca tcactttaac 60
taat 64
<210> 233
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 233
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgaattg acagcttcaa cagaaagggt 60
caa 63
<210> 234
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 234
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagagtc agctcgtgtt ggcaacat 58
<210> 235
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 235
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctttcaac attcatcgtt gtgtaaatta 60
aacttc 66
<210> 236
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 236
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgcccat cattagatga taggtggtac 60
at 62
<210> 237
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 237
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctttct gctgacaagt ttgaggtgtc 60
t 61
<210> 238
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 238
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgcaaca taacctgata aagctccagc 60
ag 62
<210> 239
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 239
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtgaaa caagcgtctc tgaagactgc 60
<210> 240
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 240
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagcaaa gcatggattc aaacttagg 59
<210> 241
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 241
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcccagg atcctttctt gattggttct 60
t 61
<210> 242
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 242
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctatagct taaatgactg cagtaaccag 60
gtaat 65
<210> 243
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 243
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgccaag aaattagagt cctcagaaga 60
ga 62
<210> 244
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 244
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggtgaa ataaaggaag atactagttt 60
tgctgaa 67
<210> 245
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 245
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagactg ttaatacaga tttctctcca 60
tatct 65
<210> 246
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 246
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggttcc agtgatgaaa acattcaagc 60
agaa 64
<210> 247
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 247
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagaaat gggaaatgag aacattccaa 60
gtac 64
<210> 248
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 248
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaacatg gacttttaca aaacccatat 60
cgta 64
<210> 249
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 249
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaatatc actgcaggct ttcctgtgg 59
<210> 250
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 250
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtcatt tgctccgttt tcaaatccag 60
gaa 63
<210> 251
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 251
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgataat agaaatgaca cagaaggctt 60
taagtat 67
<210> 252
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 252
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggtact gattatggca ctcaggaaag 60
t 61
<210> 253
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 253
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgccttc caagagaaga aaaagaagag 60
aaact 65
<210> 254
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 254
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaagcca aatgaacaga caagtaaaag 60
acatg 65
<210> 255
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 255
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttaagcc cacctaattg tactgaattg 60
caaat 65
<210> 256
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 256
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcactcg aaaaagaatc tgctttcaaa 60
acga 64
<210> 257
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 257
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaagcca tgtaactgaa aatctaatta 60
tagga 65
<210> 258
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 258
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgaggt agatgaatat tctggttctt 60
cagaga 66
<210> 259
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 259
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcttgga taacactaaa tagcagcatt 60
cag 63
<210> 260
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 260
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgagcca acataacaga tgggctggaa 60
<210> 261
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 261
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgaggca tccagaaaag tatcagggta 60
g 61
<210> 262
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 262
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgacaa ttcagttttt gagtaccttg 60
ttatt 65
<210> 263
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 263
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgaaat cagtttggat tctgcaaaaa 60
agg 63
<210> 264
<211> 70
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 264
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaccctt ttaattaaga aaacttttat 60
tgatttattt 70
<210> 265
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 265
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggccaa caattgcttg actgttctt 59
<210> 266
<211> 57
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 266
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgaaacc gtgccaaaag acttcta 57
<210> 267
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 267
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaggaaa ataactctcc tgaacatcta 60
aaaga 65
<210> 268
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 268
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgaaagt acgagattta gtcaacttgt 60
tgaa 64
<210> 269
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 269
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcttctc aaccagaaga aagggccttc 60
<210> 270
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 270
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttattga gcctcattta ttttcttttt 60
ctcccc 66
<210> 271
<211> 70
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 271
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgaagt tgtcatttta taaacctttt 60
aaaaagatat 70
<210> 272
<211> 57
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 272
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgctcgc tgagacttcc tggacgg 57
<210> 273
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 273
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagagac gcttggctct ttctgtcc 58
<210> 274
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 274
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctattgag acccttaaaa catgatttct 60
tggt 64
<210> 275
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 275
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgtctta acatgttaca ttctttgtgg 60
atagg 65
<210> 276
<211> 57
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 276
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgcttctg aaactaggcg gcagagg 57
<210> 277
<211> 57
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 277
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgcatcc ctgtgtaagt gcatttt 57
<210> 278
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 278
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctacaaagc aggtattgac aaattttata 60
taacttta 68
<210> 279
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 279
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctgtcac tggttaaaac taaggtggga 60
tt 62
<210> 280
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 280
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctccaaacc tatttaaaac tccacaaagg 60
aaac 64
<210> 281
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 281
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaatccag agtatataca ttctcactga 60
atta 64
<210> 282
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 282
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttttaaaa ataagataaa ctagtttttg 60
ccagtttt 68
<210> 283
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 283
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaacaatg ctttttattc ttagaatact 60
agaaatgt 68
<210> 284
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 284
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctatttctg aaagtctagg agctgaggtg 60
g 61
<210> 285
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 285
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgtgcat tgagagtttt tatactagtg 60
atttta 66
<210> 286
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 286
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctacatcag ggaattcatt taaagtaaat 60
agctgc 66
<210> 287
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 287
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagtaaga actagcaaga ctaggaaaaa 60
aatttt 66
<210> 288
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 288
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgcccttt gagagtggaa gtgacaaa 58
<210> 289
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 289
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctccctatt gcatatttct tcatgtgacc 60
aaaat 65
<210> 290
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 290
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgcatctt gaatctcata cagactgcat 60
tct 63
<210> 291
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 291
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaactgaa gcctctgaaa gtggactgg 59
<210> 292
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 292
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgcaggtt taatatccac tttgaaaaag 60
aaaacaa 67
<210> 293
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 293
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcttacat ttgcaaatgc tgattcaggt 60
acc 63
<210> 294
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 294
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgtgatt gatggtactt taattttgtc 60
actttgt 67
<210> 295
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 295
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttctctca ggatcttgat tataaagaag 60
caaaa 65
<210> 296
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 296
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagtttca gatataaaag aagaggtctt 60
ggctgc 66
<210> 297
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 297
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagcactc ttattttaac tcctacttcc 60
aagga 65
<210> 298
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 298
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcccatgg aaaagaatca agatgtatgt 60
gctt 64
<210> 299
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 299
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagaagaa actacttcaa tttcaaaaat 60
aactgtca 68
<210> 300
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 300
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctacagact tgacttgtgt aaacgaaccc 60
att 63
<210> 301
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 301
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgcagagg agaacaaaaa tagtgtaaag 60
cag 63
<210> 302
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 302
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgcttcag aacagcttca aataaggaaa 60
tcaa 64
<210> 303
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 303
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctggcatta gataatcaaa agaaactgag 60
caagcc 66
<210> 304
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 304
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctagcca aaaggcagaa attacagaac 60
t 61
<210> 305
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 305
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaccactt ctgaggaatg cagagatg 58
<210> 306
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 306
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaaaagtg cttctggtta tttaacagat 60
gaaaat 66
<210> 307
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 307
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgcagag gtacatccaa taagtttatc 60
ttcaa 65
<210> 308
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 308
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgactac tggcactttt gttgaagaaa 60
tt 62
<210> 309
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 309
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgatactg tttgtattca taaagatgaa 60
acggact 67
<210> 310
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 310
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcgaaagc tcaagaagca tgtcatggt 59
<210> 311
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 311
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgtcgcc aaagagtcat ttaataaaat 60
tgtaaat 67
<210> 312
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 312
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcacaaaa tactgaaaga aagtgtccca 60
gt 62
<210> 313
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 313
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttggacaa agtgaaaaac ctttttgatg 60
aaa 63
<210> 314
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 314
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgtaaag aaatgcagaa ttctctcaat 60
aatgata 67
<210> 315
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 315
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagtcctg caacttgtta cacaaatc 58
<210> 316
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 316
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaaaatgg cttagagaag gaatatttga 60
tggtc 65
<210> 317
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 317
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcagtagc atgtctaaca gctattccta 60
cc 62
<210> 318
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 318
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctactgtaa atgaagatat ttgcgttgag 60
gaact 65
<210> 319
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 319
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttcgtttg tgtttcacat gaaacaatta 60
aaaaagtg 68
<210> 320
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 320
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttcttcat aactctctag ataatgatga 60
atgtagca 68
<210> 321
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 321
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcaccttg tgatgttagt ttggaaactt 60
cag 63
<210> 322
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 322
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagatgct tcattacaaa acgcaagaca 60
ag 62
<210> 323
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 323
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgctatac gtactccaga acatttaata 60
tccca 65
<210> 324
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 324
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcacaaag ttaagggagt gttagaggaa 60
tt 62
<210> 325
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 325
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgttgaa ggtggttctt cagaaaataa 60
<210> 326
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 326
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaaacgta aaaatggaaa ttggtaaaac 60
tgaaa 65
<210> 327
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 327
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgatgaa ctgacagatt ctaaactgcc 60
aag 63
<210> 328
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 328
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgagaaa taaaactgat attatttgcc 60
ttaaaaac 68
<210> 329
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 329
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgtgtat ttacagtaac atggatattc 60
tcttaga 67
<210> 330
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 330
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaggcata ttcctaaata tttatatgtg 60
tactagtc 68
<210> 331
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 331
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctactttgg aaaaatcttc aagcaattta 60
gcagttt 67
<210> 332
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 332
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttaacttg gaggaaaaca gacaaaagca 60
aa 62
<210> 333
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 333
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgggttgt gctttttaaa tttcaatttt 60
atttttgct 69
<210> 334
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 334
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcagtctg tatcttgcaa aaacatccac 60
tct 63
<210> 335
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 335
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcgtatgg cgtttctaaa cattgcataa 60
aaatt 65
<210> 336
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 336
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcagtatc atcctatgtg gtttttatga 60
taatattc 68
<210> 337
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 337
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctatgga atgtgccttt cctaaggaat 60
tt 62
<210> 338
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 338
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgaaaggg atgacacagc tgcaaaaa 58
<210> 339
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 339
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaaggcag ttctagaaga atgaaaactc 60
ttatg 65
<210> 340
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 340
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctccttatc atcgcttttc agtgatggag 60
gaa 63
<210> 341
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 341
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctggatt atacatattt cgcaatgaaa 60
gagaggaa 68
<210> 342
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 342
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgtgcact aacaagacag caagttcgt 59
<210> 343
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 343
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagccttg aataatcaca ggcaaatgt 59
<210> 344
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 344
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgataat cacttcttcc attgcatctt 60
tct 63
<210> 345
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 345
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctttgcaac ttcaaaatct aaaagtaaat 60
ctgaaaga 68
<210> 346
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 346
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttatttca gatttaccag ccacgggagc 60
<210> 347
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 347
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttcttgca tcttaaaatt catctaacac 60
atctataa 68
<210> 348
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 348
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaggcctt cttactttat ttgctggaga 60
tt 62
<210> 349
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 349
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagcacaa catttacaaa acgtattttg 60
tacaatca 68
<210> 350
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 350
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttccttca gcaagcaaaa ttatttatga 60
agct 64
<210> 351
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 351
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttaccaga gctacaacaa taaacatttt 60
acttatt 67
<210> 352
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 352
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctgcctc agaatttcct ccccaatg 58
<210> 353
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 353
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctacacagg gttttagaga agtaaactta 60
gg 62
<210> 354
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 354
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctcaggt gaaaaattac cataattttg 60
tgctcatg 68
<210> 355
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 355
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctgaaga gtgagaggag ctcccagg 58
<210> 356
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 356
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctactggta gagtgctaca ctgtccaaca 60
c 61
<210> 357
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 357
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgaatatt gtgtcctccc tctctgacag 60
g 61
<210> 358
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 358
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcaatgaa gcagaaaaca agcttatgca 60
t 61
<210> 359
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 359
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctatgttac tacataatta tgataggcta 60
cgttt 65
<210> 360
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 360
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagaactg caaaaagaga agagccttgg 60
a 61
<210> 361
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 361
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcaccaaa tacgaaacac ccataaagaa 60
aa 62
<210> 362
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 362
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttcagtga atccactagg actgctccca 60
<210> 363
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 363
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaatatat ctaagcattt gcaaaggcga 60
caa 63
<210> 364
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 364
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttttgccc gattccgtat tggtatac 58
<210> 365
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 365
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctaatca agaaaaacat ctttggctga 60
gctc 64
<210> 366
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 366
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctttcaaca aaatggtcat ccaaactcaa 60
a 61
<210> 367
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 367
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgggagtg gaatacagag tggtgggg 58
<210> 368
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 368
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgactga atgaatatct ctggttagtt 60
tgt 63
<210> 369
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 369
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgaaatag ctaactaccc attttcctcc 60
cgca 64
<210> 370
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 370
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcataaca acatgagtag tctcttcagt 60
aattag 66
<210> 371
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 371
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagacacc accatggaca ttcttttg 58
<210> 372
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 372
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctactttca atgcagaggt tgaagatggt 60
<210> 373
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 373
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcagagta aaatcaaagt gtttgttcca 60
atacag 66
<210> 374
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 374
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttattctg aagactccca gagcaactgt 60
gc 62
<210> 375
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 375
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctggttc tttattttta ctggtagaac 60
tatctgc 67
<210> 376
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 376
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgaaagaa ttttgcttaa gatatcagtg 60
tttgg 65
<210> 377
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 377
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctttctaac acagcttcta gttcagccat 60
tt 62
<210> 378
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 378
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctttaaaat gtcactctga gaggatagcc 60
ctga 64
<210> 379
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 379
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctggcaaac acaaaaacct ggttccaata 60
<210> 380
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 380
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttttcaga ctgatgcctc atttgtttgg 60
<210> 381
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 381
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgatgttc ctgagatgcc tttgccaat 59
<210> 382
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 382
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgaagctc ttcatcctca ctagataagt 60
<210> 383
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 383
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgctaaa aacagcagaa ctttccttaa 60
tgtc 64
<210> 384
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 384
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcccatag gctgttctaa gttatctgaa 60
atc 63
<210> 385
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 385
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcaatttt ggccctctgt ttctacctag 60
<210> 386
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 386
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttctctaa tgttattacg gctaattgtg 60
ctcact 66
<210> 387
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 387
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcaaatga cttgatggga aaaagtggtg 60
gta 63
<210> 388
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 388
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgcattat caactggctt atctttctga 60
ccaa 64
<210> 389
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 389
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgagaatg ttgcacattc ctcttctgca 60
t 61
<210> 390
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 390
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctactgtgg ttaacttcat gtcccaatgg 60
<210> 391
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 391
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcctagag tgctaacttc cagtaacgag 60
at 62
<210> 392
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 392
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttcttcag cattattaga cactttaact 60
gtttct 66
<210> 393
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 393
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcttcagc tctgggaaag tatcgctgt 59
<210> 394
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 394
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttctttat ctcttcactg ctagaacaac 60
tatca 65
<210> 395
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 395
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgcttata ctgctgctta taggttcagc 60
tt 62
<210> 396
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 396
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctcattctg ctccgtttgg ttagttccc 59
<210> 397
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 397
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgtatta tctgtggctc agtaacaaat 60
gc 62
<210> 398
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 398
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaggatca ctggccagta agtctattt 59
<210> 399
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 399
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctatcactt ctggaaaacc actcattaac 60
ttt 63
<210> 400
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 400
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgtccgcc tatcattaca tgtttcctta 60
c 61
<210> 401
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 401
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctgctccac atgcaagttt gaaacagaa 59
<210> 402
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 402
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctctctt ttcagtgcct gttaagttgg 60
<210> 403
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 403
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctggcaaaa ctataagata aggaatccag 60
caatt 65
<210> 404
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 404
acactctttc cctacacgac gctcttccga tcttgtagcc catactttgg atgatagaaa 60
cttca 65
<210> 405
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 405
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctagctgaa aagcacaaat gattttcaat 60
agct 64
<210> 406
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 406
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctttggtta tatcattctt acataaagga 60
cactgt 66
<210> 407
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 407
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctccggag taagctgaca aaaaccgcg 59
<210> 408
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 408
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaaaatg ttggcctctc tttggatcca 60
<210> 409
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 409
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctaggagat aatcatagga atcccaaatt 60
aatacac 67
<210> 410
<211> 55
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 410
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctctctcag gttccgcccc taccc 55
<210> 411
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 411
acactctttc cctacacgac gctcttccga tctttatctg agaaacccca cagcctgtcc 60
<210> 412
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 412
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgttcag attcttctgc aggttcagaa 60
t 61
<210> 413
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 413
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctatctaa ttcttttaca ggagattggt 60
acagcgg 67
<210> 414
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 414
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaagaca agaatttaga agtggacagg 60
aaac 64
<210> 415
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 415
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgttttt aatcatacct gacttatctc 60
tttgtggtg 69
<210> 416
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 416
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgctatt gtcaaattct caattactaa 60
gtcataaaa 69
<210> 417
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 417
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctattatc aacctcatct gctctttctt 60
gta 63
<210> 418
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 418
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctgtca cagaagcgat aaatctatca 60
ttttt 65
<210> 419
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 419
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaacata atgaaaaact atcttcttca 60
gaggtatc 68
<210> 420
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 420
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgctac atttgaatct aatggatcag 60
tatca 65
<210> 421
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 421
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggtatt ttctccatct gggctccatt 60
ta 62
<210> 422
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 422
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctcatt taatggcttc tctgattttg 60
gtaggc 66
<210> 423
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 423
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtttgg atcagtcata tgacctgaaa 60
aactt 65
<210> 424
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 424
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgaattc tgtgtggtgg tggctggcc 59
<210> 425
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 425
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttaagtg gtgcttcaaa agcatttgct 60
tcaa 64
<210> 426
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 426
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctatgtat acagatgatg cctaagatta 60
aatataaga 69
<210> 427
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 427
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttcattt ctagaacatt tcctcagaat 60
tgtccca 67
<210> 428
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 428
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctttggat cattttcaca ctgtccttcc 60
t 61
<210> 429
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 429
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgctgg cattttcatg atcatataaa 60
agacttt 67
<210> 430
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 430
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaacatc agattcataa ttgttacctt 60
tgagctt 67
<210> 431
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 431
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctttggtt gaattgtacc tttcttgaag 60
gtga 64
<210> 432
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 432
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttcatga agttccttag tatttcctaa 60
agcaagat 68
<210> 433
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 433
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttcctct gcaagaacat aaaccaaatc 60
ttttt 65
<210> 434
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 434
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctccaaaa ctgtgatttg aaattggacc 60
taaga 65
<210> 435
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 435
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgccaag gtatttacaa tttcaacaca 60
agctaa 66
<210> 436
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 436
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggtttg aattaaaatc ctgcttggaa 60
aataaca 67
<210> 437
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 437
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttagtca tctggttttc aggcacttca 60
a 61
<210> 438
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 438
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctccagca aacttccgtt taatttcaac 60
tg 62
<210> 439
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 439
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttctcaa tatcactaaa cagtttcaca 60
gcttttt 67
<210> 440
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 440
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaaaagt gccagtagtc atttcaatat 60
tattttg 67
<210> 441
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 441
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcactgc catcaaattc taagttatga 60
gaattt 66
<210> 442
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 442
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctgaca aatcttcttt aatctgagtg 60
tttcc 65
<210> 443
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 443
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttcccac ttgcagtctg aaaaaatgta 60
t 61
<210> 444
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 444
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtgttt aactatgtct gtttcctcat 60
aacttaga 68
<210> 445
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 445
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctagct gtatgaaaac ccaatagagt 60
aggt 64
<210> 446
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 446
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttggtct cacatgctaa ttcaaggtct 60
tt 62
<210> 447
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 447
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctactttc aaaaagatac tttttgatgt 60
tttgagatt 69
<210> 448
<211> 62
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 448
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttttgct tcaagtaatg aagtctgact 60
ca 62
<210> 449
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 449
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctacttaa ataagtatct tgtttttcgg 60
agagatg 67
<210> 450
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 450
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctacattg gatattactt tggaaaaact 60
agtgtt 66
<210> 451
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 451
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgatttt accactggct atcctaaatg 60
caggt 65
<210> 452
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 452
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagagtt atgaagaata tcctctgaat 60
catccaatg 69
<210> 453
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 453
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggtgat attttagaaa ctttctccaa 60
tccagaca 68
<210> 454
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 454
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgacaga ttttccactt gctgtgctaa 60
a 61
<210> 455
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 455
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagtatt ttcttctctt gtgagctggt 60
ctga 64
<210> 456
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 456
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgtgta aggaactttc taaaatggaa 60
acttgct 67
<210> 457
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 457
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctttccat ttctgagttt acacagtgct 60
ctg 63
<210> 458
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 458
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaagcct gttcttttcc caaaacatga 60
a 61
<210> 459
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 459
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctttctac tgcttctgtt tcaaagtagt 60
tttc 64
<210> 460
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 460
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggctct cctcttcttt ttccaattct 60
<210> 461
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 461
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaggatt tttcttgatt ttctattatc 60
ctgtcaaa 68
<210> 462
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 462
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggctct aaagaaacat gatgcataaa 60
caa 63
<210> 463
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 463
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttacaaa tgagatttag acagaaattc 60
ttgaccag 68
<210> 464
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 464
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgattta gttttaaaag gtggaacaaa 60
gactttgg 68
<210> 465
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 465
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctttgt gaaagttaca gctactgctt 60
gat 63
<210> 466
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 466
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcctttg tttcttctta attcgcatat 60
cctgta 66
<210> 467
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 467
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctattaca ctctgtcata aaagccatca 60
gtat 64
<210> 468
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 468
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctccaact gtattccttt tccagtccat 60
aaa 63
<210> 469
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 469
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctccatat gatccatcta tagtgattat 60
aaacccaaa 69
<210> 470
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 470
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaccata ctgccgtata tgattacgta 60
atgta 65
<210> 471
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 471
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagcata ccacccatct gtaagttca 59
<210> 472
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 472
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagaggt gtacaggcat caggagagc 59
<210> 473
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 473
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgaatcc aagtttggta taccagcgag 60
cag 63
<210> 474
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 474
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctttgtat caaaagaaag aaatatatgg 60
taagtttca 69
<210> 475
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 475
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctttgt tctcatatta gaaataacaa 60
tgtgtacca 69
<210> 476
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 476
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttctcac cttgaataat catcaagcct 60
catt 64
<210> 477
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 477
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttacaat acgcaacttc cacacggttg 60
t 61
<210> 478
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 478
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctactaac aagcacttat caaaactgaa 60
aaattaca 68
<210> 479
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 479
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttttttc acaacagaaa cgacaaatcc 60
t 61
<210> 480
<211> 68
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 480
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcagcaa ttaacatatg aggcttaata 60
atgtcctc 68
<210> 481
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 481
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagaaaa ataccaaaat gtgtggtgat 60
gctg 64
<210> 482
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 482
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtgttt ttcataaacc cattatccag 60
gactgt 66
<210> 483
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 483
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctttcctc ttaaaatata agacctctgg 60
catgaa 66
<210> 484
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 484
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgatata tttgctagat ttctaaagaa 60
tgtgttcta 69
<210> 485
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 485
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggcagt tctcaaatgt tggagtggaa 60
<210> 486
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 486
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgcagag agtcagaccc ttcaatgg 58
<210> 487
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 487
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagcaag atgctgattc attatttatc 60
agccc 65
<210> 488
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 488
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctactgtc ctggctacta aatattttat 60
gtacatcag 69
<210> 489
<211> 56
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 489
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagccac tactgactgc agccag 56
<210> 490
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 490
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaggaga atgaattgac actaatctct 60
gcttgt 66
<210> 491
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 491
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgcaga ttactgcagt gattttacat 60
cta 63
<210> 492
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 492
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtttcc tgtaccagga atgatttgag 60
cag 63
<210> 493
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 493
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttttaca agactttgaa gtcatctggg 60
ctga 64
<210> 494
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 494
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtggct gaaatgcctt ctgtgcag 58
<210> 495
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 495
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttttctc ctgttgaacc agacaaaaga 60
g 61
<210> 496
<211> 57
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 496
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtactg gcctgggaac tctcctg 57
<210> 497
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 497
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgaaac taatttcttt tctcattgtg 60
caacat 66
<210> 498
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 498
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaaagat tttcttttcc cctttttttt 60
ttcttt 66
<210> 499
<211> 57
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 499
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcatagg ctctgggtcc tgtgata 57
<210> 500
<211> 59
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 500
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgaagaa accaccaagg tccaaagcg 59
<210> 501
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 501
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctttcttc tgctgtatgt aacctgtctt 60
ttc 63
<210> 502
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 502
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttcctga ttttgttttc aacttctaat 60
cctttga 67
<210> 503
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 503
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctagta ttctgagctg tgtgctagag 60
gtaac 65
<210> 504
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 504
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctactact gatactgctg ggtataatgc 60
a 61
<210> 505
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 505
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgaatct ggaatcagcc tcttctctga 60
<210> 506
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 506
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctatagaa actacccatc tcaagaggag 60
ctcatt 66
<210> 507
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 507
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcaattg gtggcgatgg ttttctcctt 60
<210> 508
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 508
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcactat cagaacaaag cagtaaagta 60
gatttg 66
<210> 509
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 509
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagctac ccttccatca taagtgactc 60
t 61
<210> 510
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 510
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggaaag cttctcaaag tatttcattt 60
tcttggt 67
<210> 511
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 511
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtttat agtctgcttt tacatctgaa 60
cctctgt 67
<210> 512
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 512
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagttgg tctgagtgac aaggaattgg 60
<210> 513
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 513
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgctag cttgttttct tcacagtgca 60
g 61
<210> 514
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 514
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctcagt ctactaggca tagcaccgtt 60
g 61
<210> 515
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 515
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtccag aaaggagagc ttagcaggag 60
<210> 516
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 516
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgaagta gtcatgcatc tcaggtttgt 60
tctg 64
<210> 517
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 517
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggtttt gcaacctgag gtctataaac 60
aaa 63
<210> 518
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 518
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctcaag caatattaat gaagtaggtt 60
ccagta 66
<210> 519
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 519
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctaaat gtaagaaaaa tctgctagag 60
gaaaact 67
<210> 520
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 520
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaggctc taggttttgt ctatcatctc 60
agt 63
<210> 521
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 521
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtcctt aaagaaacaa agtccaaaag 60
tcacttt 67
<210> 522
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 522
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgggaaa caagcataga aatggaagaa 60
agt 63
<210> 523
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 523
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctataaat gtgtgagtca gtgtgcagca 60
ttt 63
<210> 524
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 524
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagaccc caaagatctc atgttaagtg 60
gag 63
<210> 525
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 525
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcctggt tcttttacta agtgttcaaa 60
tacca 65
<210> 526
<211> 60
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 526
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctaaaagt acaaccaaat gccagtcagg 60
<210> 527
<211> 65
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 527
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctccacaa ttcaaaagca cctaaaaaga 60
atagg 65
<210> 528
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 528
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgtggtc atgagaataa aacaaaaggt 60
gattct 66
<210> 529
<211> 61
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 529
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcgtaaa aggagaccta catcaggcct 60
t 61
<210> 530
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 530
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagttca ctccaaatca gtagagagta 60
ata 63
<210> 531
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 531
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttgaact gttaggttct gatgactcac 60
atg 63
<210> 532
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 532
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcctgtg tgagagaaaa gaatggaata 60
agc 63
<210> 533
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 533
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagcatg agaacagcag tttattactc 60
act 63
<210> 534
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 534
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atcttctgag acggatgtaa caaatactga 60
acat 64
<210> 535
<211> 66
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 535
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctacatgt aactagtgtt tcttattagg 60
actctg 66
<210> 536
<211> 63
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 536
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctctaacc ttggaactgt gagaactctg 60
agg 63
<210> 537
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 537
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctcataca tttttctcta actgcaaaca 60
taatgtt 67
<210> 538
<211> 64
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 538
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggttga taatcacttg ctgagtgtgt 60
ttct 64
<210> 539
<211> 69
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 539
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctttctac aaaaggaagt aaattaaatt 60
gttctttct 69
<210> 540
<211> 67
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 540
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctagaaag aaatggattt atctgctctt 60
cgcgttg 67
<210> 541
<211> 58
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 541
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctccctct gctctgggta aaggtagt 58
<210> 542
<211> 56
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 542
gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctggtagc cccttggttt ccgtgg 56
<210> 543
<211> 53
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 543
caagcagaag acggcatacg agatacggac ttgtgactgg agttcagacg tgt 53
<210> 544
<211> 57
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 544
aatgatacgg cgaccaccga gatctacaca ggtgtacaca ctctttccct acacgac 57
<210> 545
<211> 53
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 545
caagcagaag acggcatacg agatgctaca acgtgactgg agttcagacg tgt 53
<210> 546
<211> 57
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 546
aatgatacgg cgaccaccga gatctacact cttgacgaca ctctttccct acacgac 57
<210> 547
<211> 53
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 547
caagcagaag acggcatacg agatcctaac aggtgactgg agttcagacg tgt 53
<210> 548
<211> 57
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 548
aatgatacgg cgaccaccga gatctacacg tccacataca ctctttccct acacgac 57
<210> 549
<211> 53
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 549
caagcagaag acggcatacg agataaccga acgtgactgg agttcagacg tgt 53
<210> 550
<211> 57
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 550
aatgatacgg cgaccaccga gatctacaca aggcgttaca ctctttccct acacgac 57
Claims (19)
1.一种基于扩增子测序的大片段缺失检测的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物包括：
双向扩增引物组和单向扩增引物组，所述双向扩增引物组包括多个上下游引物对，所述单向扩增引物组包括全部均为正向或反向的一条或多条引物；
所述双向扩增引物组靶向双向区段的核酸序列，所述单向扩增引物组靶向单向区段的核酸序列，所述双向区段和所述单向区段互不重叠。
2.如权利要求1所述的引物组合物，其特征在于，所述双向区段至少包括靶向区域内的全部外显子序列，所述单向区段至少包括与一条或多条所述外显子序列连接的内含子序列的一部分；所述靶向区域由双向区段和单向区段构成。
3.如权利要求2所述的引物组合物，其特征在于，所述双向区段还包括内含子连接外显子两侧的连接区核酸序列，所述连接区核酸序列长度为10～2000bp。
4.如权利要求1所述的引物组合物，其特征在于，所述上下游引物分别特异性结合至目标序列的上游和下游，用于通过扩增反应产生扩增子。
5.如权利要求3所述的引物组合物，其特征在于，所述双向区段还包括UTR区核酸序列。
6.如权利要求3所述的引物组合物，其特征在于，所述双向扩增引物组和/或单向扩增引物组中所包含引物的长度区间为60～220bp。
7.如权利要求3所述的引物组合物，其特征在于，所述双向扩增引物组和/或所述单向扩增引物组中至少包含部分rhPCR引物。
8.如权利要求3所述的引物组合物，其特征在于，所述靶向区域为BRCA1/2基因或BRCA1/2基因片段。
9.如权利要求8所述的引物组合物，其特征在于，所述双向扩增引物组的引物序列如SEQ ID NO:1～273和SEQ ID NO:276～542所示；所述单向扩增引物组的引物序列如SEQ IDNO:274和275所示。
10.一种核酸扩增方法，其特征在于，包括：
在核酸扩增反应体系中利用双向扩增引物组和单向扩增引物组进行靶向扩增，所述双向扩增引物组包括多个上下游引物对，所述单向扩增引物组包括全部均为正向或反向的一条或多条引物；
所述双向扩增引物组靶向双向区段的核酸序列，所述单向扩增引物组靶向单向区段的核酸序列，所述双向区段和所述单向区段互不重叠。
11.如权利要求10所述的核酸扩增方法，其特征在于，所述双向区段至少包括靶向区域内的全部外显子序列，所述单向区段至少包括与一条或多条所述外显子序列连接的内含子序列的一部分；所述靶向区域由双向区段和单向区段构成。
12.如权利要求10或11所述的核酸扩增方法，其特征在于，所述单向区段存在大片段缺失的情况下，所述单向扩增引物组通过扩增反应产生可检测的扩增子。
13.如权利要求10或11所述的核酸扩增方法，其特征在于，所述双向区段存在大片段缺失的情况下，以所述大片段为模板进行扩增产生的扩增子拷贝数减小。
14.如权利要求10或11所述的核酸扩增方法，其特征在于，所述双向区段和所述单向区段连接处存在大片段缺失的情况下，以所述大片段在所述双向区段的部分为模板进行扩增产生的扩增子拷贝数减小，且所述单向引物组通过扩增反应产生可检测的扩增子。
15.一种大片段缺失的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)在包括样本核酸的核酸扩增反应体系中利用双向扩增引物组和单向扩增引物组对所述样本核酸进行靶向扩增得到扩增产物，所述双向扩增引物组包括多个上下游引物对，所述单向扩增引物组包括全部均为正向或反向的一条或多条引物；所述双向扩增引物组靶向双向区段的核酸序列，所述单向扩增引物组靶向单向区段的核酸序列，所述双向区段和所述单向区段互不重叠。
(2)所述扩增产物纯化后，进行Index PCR扩增得到Index PCR扩增产物；
(3)所述Index PCR扩增产物纯化后，形成最终待测序检测文库产物，并上机测序；
(4)生物信息分析测序结果。
16.如权利要求15所述的检测方法，其特征在于，所述生物信息分析包括通过断点识别和/或拷贝数变异来检测大片段缺失。
17.一种基于二代测序平台检测大片段缺失的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1～9中任意一项所述的引物组合物。
18.一种权利要求1～9中任一项所述引物组合物在制备按照如下方法检测大片段缺失的试剂盒中的应用，其特征在于，包括以下步骤：
S1、样本核酸抽提；
S2、构建测序文库并上机测序；
S3、生物信息分析测序结果。
19.一种适用于如权利要求18中所述应用中生物信息分析的算法，其特征在于，所述算法包括使用断点识别和/或拷贝数变异检测的方法对大片段缺失进行检测。
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Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20090325169A1 (en) * | 2008-04-30 | 2009-12-31 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Rnase h-based assays utilizing modified rna monomers |
| CN108060228A (zh) * | 2016-12-29 | 2018-05-22 | 北京明谛生物医药科技有限公司 | 一种检测brca1和brca2基因变异的检测引物、试剂盒及方法 |
| CN110392739A (zh) * | 2017-03-20 | 2019-10-29 | 南洋理工大学 | 检测dna突变的测序方法 |
| CN110997944A (zh) * | 2017-05-26 | 2020-04-10 | 生命科技股份有限公司 | 用于检测brca1/2中的大片段重排方法和系统 |
-
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Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20090325169A1 (en) * | 2008-04-30 | 2009-12-31 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Rnase h-based assays utilizing modified rna monomers |
| CN108060228A (zh) * | 2016-12-29 | 2018-05-22 | 北京明谛生物医药科技有限公司 | 一种检测brca1和brca2基因变异的检测引物、试剂盒及方法 |
| CN110392739A (zh) * | 2017-03-20 | 2019-10-29 | 南洋理工大学 | 检测dna突变的测序方法 |
| CN110997944A (zh) * | 2017-05-26 | 2020-04-10 | 生命科技股份有限公司 | 用于检测brca1/2中的大片段重排方法和系统 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 李丹;吴永和;闵大六;汪朝晖;郑俊峰;孙大光;马旭;: "变性高效液相色谱-测序技术在检测乳腺癌BRCA1基因突变中的临床诊断价值", 中华检验医学杂志, no. 07 * |
| 王亚平, 朱明, 孙孟红, 李金田, 张军妮, 张晓梅, 刘晓蓉: "定量多重PCR-高效液相色谱分析错配修复基因大片段缺失", 中华医学遗传学杂志, no. 06 * |
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