CN113884593B - 一种判别六安瓜片茶叶等级的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种判别六安瓜片茶叶等级的方法,属于食品评定技术领域。本发明基于代谢组学从近千种化合物中筛选出儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸这四种化合物在五个不同等级的六安瓜片茶叶中的含量存在显著差异,以儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸作为联合鉴别指标,能够正确判别五个不同等级的六安瓜片茶叶,且采用现代化的检测手段超高效液相色谱(UPLC)测定六安瓜片茶叶中儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量,代入Fisher判别函数,即可正确判断出该六安瓜片茶叶样品的等级。本发明的方法克服了六安瓜片茶叶等级人工判别的主观因素,更科学客观,区分准确率高,实操性更强,更易于推广。
Description
技术领域
本发明涉及食品评定技术领域,尤其涉及一种判别六安瓜片茶叶等级的方法。
背景技术
茶是世界上最受欢迎的饮料之一,具有很多潜在的健康功效。六安瓜片茶叶是中国十大名茶之一,产自安徽省六安市大别山区,是世界上唯一一种无芽无梗全用茶树叶子制成的茶叶。农业部根据六安瓜片茶叶的外形和内质将其分为五个级别(NY/T 781-2004):特一级(FP)、特二级(SP)、一级(FG)、二级(SG)和三级(TG),其中特一级和特二级原料由芽下一至二叶制成。所有等级的六安瓜片茶叶均采用相同的加工工艺制作而成。
长期以来,六安瓜片茶叶等级的评定主要依靠专业审评员的感官审评,这种审评方式对审评员的专业技术要求高,并且不可避免地会存在个人主观性。消费者在购买茶叶的过程中,倾向于购买高等级的茶叶。高等级的茶叶口感更好,具有更高的商品价值。所以,对六安瓜片茶叶的科学分级具有重要的经济属性。但是消费者、相关的监管机构很难凭借其理解对市场上销售的六安瓜片茶叶的等级进行评判。
发明内容
本发明的目的在于提供一种判别六安瓜片茶叶等级的方法,该方法更科学客观,区分准确率高,实操性更强,更易于推广。
为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
本发明提供了一种判别六安瓜片茶叶等级的方法,包括以下步骤:
采用超高效液相色谱法分别检测特一级FP、特二级SP、一级FG、二级SG和三级TG五个已知等级六安瓜片茶叶中儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量;
以儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量数值为解释变量,分别以六安瓜片茶叶五个等级为应变量,构建Fisher判别模型,得到FP、SP、FG、SG和TG五个等级的Fisher判别函数分别为:
FP=-2.928*儿茶素含量数值+145.169*没食子儿茶素含量数值-12.430*水杨酸含量数值+1028.462*没食子酸含量数值-2190.08;
SP=-1.120*儿茶素含量数值+177.288*没食子儿茶素含量数值-8.064*水杨酸含量数值+876.862*没食子酸含量数值-1971.08;
FG=1.020*儿茶素含量数值+225.710*没食子儿茶素含量数值+3.486*水杨酸含量数值+632.590*没食子酸含量数值-1730.575;
SG=1.936*儿茶素含量数值+255.639*没食子儿茶素含量数值+7.988*水杨酸含量数值+620.284*没食子酸含量数值-1985.248;
TG=4.717*儿茶素含量数值+285.599*没食子儿茶素含量数值+18.434*水杨酸含量数值+334.851*没食子酸含量数值-1687.314;
采用超高效液相色谱法检测未知等级的六安瓜片茶叶样品中儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量,将所得未知等级的六安瓜片茶叶样品的儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量数值分别代入所述五个等级的Fisher判别函数中,所得数值中最大值所对应的等级为未知等级的六安瓜片茶叶样品的等级。
优选的,采用超高效液相色谱法检测已知等级的六安瓜片茶叶中儿茶素和没食子儿茶素的含量的过程包括以下步骤:
将已知等级的六安瓜片茶叶与甲醇水溶液混合,进行超声辅助萃取,得到提取液;
将所述提取液进行高效液相色谱检测,得到已知等级的六安瓜片茶叶中儿茶素和没食子儿茶素的含量。
优选的,所述已知等级的六安瓜片茶叶与甲醇水溶液的用量比为(100~500)mg:5mL;所述甲醇水溶液的质量浓度为70%;所述超声辅助萃取的温度为60~70℃,功率为500W,时间为10~20min。
优选的,所述高效液相色谱检测的条件包括:流动相:A相为乙腈、乙酸和乙二胺四乙酸的混合水溶液;所述乙腈在A相中的质量浓度为9%、所述乙酸在A相中的质量浓度为2%,所述乙二胺四乙酸在A相中的质量浓度为0.2%;B相为乙腈、乙酸和乙二胺四乙酸的混合水溶液;所述乙腈在B相中的质量浓度为80%、所述乙酸在B相中的质量浓度为2%,所述乙二胺四乙酸在B相中的质量浓度为0.2%;梯度洗脱程序:0~10min,100%A;10~15min,100~68%A;15~25min,68%A;25~30min,68~100%A。
优选的,所述高效液相色谱检测的条件还包括:液相色谱柱C18;流动相流速:1mL/min;柱温35℃;紫外线检测器λ=278nm;进样量10μL。
优选的,采用超高效液相色谱法检测已知等级的六安瓜片茶叶中水杨酸和没食子酸的含量的过程包括以下步骤:
将已知等级的六安瓜片茶叶与甲酸-甲醇混合液混合,进行浸提,得到提取液;
将所述提取液进行高效液相色谱检测,得到已知等级的六安瓜片茶叶中水杨酸和没食子酸的含量。
优选的,所述已知等级的六安瓜片茶叶与甲酸-甲醇混合液的用量比为(100~500)mg:9mL;所述甲酸-甲醇混合液中甲酸和甲醇的体积比为5:95。
优选的,所述浸提的温度为50~65℃,时间为60~75min。
优选的,所述高效液相色谱检测的条件包括:色谱柱:ACQUITY UPLC HSS T3柱;流动相:A相为乙腈水溶液,所述乙腈水溶液中乙腈与水的体积比为5:95;B相为含0.1%甲酸的乙腈水溶液,所述含0.1%甲酸的乙腈水溶液中水与乙腈的体积比为5:95;梯度洗脱程序为0~1min,98%A;1~2min,98~85%A;2~8min,85~74%A;8~9min,74~0%A;9~10min,0%A;10~11min,0~98%A;11~12min,98%A。
优选的,所述高效液相色谱检测的条件还包括:流速0.4mL/min;柱温:30℃,样品盘温度:20℃,进样量:2μL,紫外检测波长280nm。
本发明提供了一种判别六安瓜片茶叶等级的方法,本发明基于化合物儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸在五个不同等级的六安瓜片茶叶中的含量存在显著差异,以这四种化合物(儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸)作为联合鉴别指标,能够正确判别五个不同等级的六安瓜片茶叶,且采用现代化的检测手段UPLC即可测定六安瓜片茶叶中四种化合物儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量,将所得含量数值代入Fisher判别函数,即可判断出该六安瓜片茶叶样品的等级。本发明的方法更科学客观,区分准确率高,实操性更强,更易于推广。
附图说明
图1为FP、SP、FG、SG和TG五个已知等级的六安瓜片茶叶的儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量趋势图。
具体实施方式
本发明提供了一种判别六安瓜片茶叶等级的方法,包括以下步骤:
采用超高效液相色谱法分别检测特一级FP、特二级SP、一级FG、二级SG和三级TG五个已知等级六安瓜片茶叶中儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量;
以儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量数值为解释变量,分别以六安瓜片茶叶五个等级为应变量,构建Fisher判别模型,得到FP、SP、FG、SG和TG五个等级的Fisher判别函数分别为:
FP=-2.928*儿茶素含量数值+145.169*没食子儿茶素含量数值-12.430*水杨酸含量数值+1028.462*没食子酸含量数值-2190.08;
SP=-1.120*儿茶素含量数值+177.288*没食子儿茶素含量数值-8.064*水杨酸含量数值+876.862*没食子酸含量数值-1971.08;
FG=1.020*儿茶素含量数值+225.710*没食子儿茶素含量数值+3.486*水杨酸含量数值+632.590*没食子酸含量数值-1730.575;
SG=1.936*儿茶素含量数值+255.639*没食子儿茶素含量数值+7.988*水杨酸含量数值+620.284*没食子酸含量数值-1985.248;
TG=4.717*儿茶素含量数值+285.599*没食子儿茶素含量数值+18.434*水杨酸含量数值+334.851*没食子酸含量数值-1687.314;
采用超高效液相色谱法检测未知等级的六安瓜片茶叶样品中儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量,将所得未知等级的六安瓜片茶叶样品的儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量数值分别代入所述五个等级的Fisher判别函数中,所得数值中最大值所对应的等级为未知等级的六安瓜片茶叶样品的等级。
在本发明中,若无特殊说明,所需原料或试剂均为本领域技术人员熟知的市售商品。
本发明采用超高效液相色谱法分别检测特一级FP、特二级SP、一级FG、二级SG和三级TG五个已知等级六安瓜片茶叶中儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量。
在本发明中,所述特一级FP、特二级SP、一级FG、二级SG和三级TG五个已知等级的六安瓜片茶叶即为农业部NY/T 781-2004规定的:特一级(FP)、特二级(SP)、一级(FG)、二级(SG)和三级(TG)。
在本发明中,采用超高效液相色谱法检测已知等级的六安瓜片茶叶中儿茶素和没食子儿茶素的含量的过程优选包括以下步骤:
将已知等级的六安瓜片茶叶与甲醇水溶液混合,进行超声辅助萃取,得到提取液;
将所述提取液进行高效液相色谱检测,得到已知等级的六安瓜片茶叶中儿茶素和没食子儿茶素的含量。
在本发明中,所述已知等级的六安瓜片茶叶与甲醇水溶液的用量比优选为(100~500)mg:5mL,更优选为(200~300)mg:5mL;所述甲醇水溶液的质量浓度优选为70%;本发明对所述混合的过程没有特殊的限定,按照本领域熟知的过程将物料混合即可。
在本发明中,所述超声辅助萃取的温度优选为60~70℃,更优选为65~70℃,功率优选为500W;时间优选为10~20min,更优选为15min。本发明通过超声辅助萃取将已知等级的六安瓜片茶叶中儿茶素和没食子儿茶素提取出来。
完成所述超声辅助萃取后,本发明优选将所得物料进行离心,取上清液,重复两次离心过程,混合所得上清液,过0.22μm滤膜,得到提取液,置于-20℃冰箱;所述离心的转速为3000~4500r/min,时间为10~20min。
在本发明中,所述高效液相色谱检测的条件优选包括:流动相:A相为乙腈、乙酸和乙二胺四乙酸的混合水溶液;所述乙腈在A相中的质量浓度为9%、所述乙酸在A相中的质量浓度为2%,所述乙二胺四乙酸在A相中的质量浓度为0.2%;B相为乙腈、乙酸和乙二胺四乙酸的混合水溶液;所述乙腈在B相中的质量浓度为80%、所述乙酸在B相中的质量浓度为2%,所述乙二胺四乙酸在B相中的质量浓度为0.2%;梯度洗脱程序:0~10min,100%A;10~15min,100~68%A;15~25min,68%A;25~30min,68~100%A;液相色谱柱C18;流动相流速:1mL/min;柱温35℃;紫外线检测器λ=278nm;进样量10μL。
本发明优选以各样品中目标检测峰面积表示其儿茶素和没食子儿茶素的含量。
在本发明中,采用超高效液相色谱法检测已知等级的六安瓜片茶叶中水杨酸和没食子酸的含量的过程优选包括以下步骤:
将已知等级的六安瓜片茶叶与甲酸-甲醇混合液混合,进行浸提,得到提取液;
将所述提取液进行高效液相色谱检测,得到已知等级的六安瓜片茶叶中水杨酸和没食子酸的含量。
在本发明中,所述已知等级的六安瓜片茶叶优选粉碎后再与甲酸-甲醇混合液混合;本发明对所述粉碎的过程及粉碎后粒径没有特殊的限定,能够充分溶解即可。在本发明中,所述已知等级的六安瓜片茶叶与甲酸-甲醇混合液的用量比优选为(100~500)mg:9mL,更优选为(200~300)mg:9mL;所述甲酸-甲醇混合液中甲酸和甲醇的体积比优选为5:95。本发明对所述已知等级的六安瓜片茶叶与甲酸-甲醇混合液混合的过程没有特殊的限定,按照本领域熟知的过程投料混合即可。
在本发明中,所述浸提优选在水浴条件下进行;所述浸提的温度优选为50~65℃,更优选为55~60℃;时间优选为60~75min,更优选为65~70min。本发明通过浸提将已知等级的六安瓜片茶叶中水杨酸和没食子酸提取出来。
在本发明中,所述高效液相色谱检测的条件优选包括:色谱柱:ACQUITY UPLC HSST3柱;流动相:A相为乙腈水溶液,所述乙腈水溶液中乙腈与水的体积比为5:95;B相为含0.1%甲酸的乙腈水溶液,所述含0.1%甲酸的乙腈水溶液中水与乙腈的体积比为5:95;梯度洗脱程序为0~1min,98%A;1~2min,98~85%A;2~8min,85~74%A;8~9min,74~0%A;9~10min,0%A;10~11min,0~98%A;11~12min,98%A;流速0.4mL/min;柱温:30℃,样品盘温度:20℃,进样量:2μL,紫外检测波长280nm。
本发明优选以各样品中目标检测峰面积表示其水杨酸和没食子酸含量。
得到FP、SP、FG、SG和TG五个已知等级的六安瓜片茶叶中儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量后,本发明以儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量数值为解释变量,分别以六安瓜片茶叶五个等级为应变量,构建Fisher判别模型。本发明对所述构建Fisher判别模型的过程没有特殊的限定,采用本领域熟知的软件SPSS 25.0中所对应的公式制作Fisher判别模型即可。
在本发明中,采用软件SPSS 25.0制作Fisher判别模型的分类函数系数见表1:
表1Fisher(费希尔)判别模型的分类函数系数
表1中对应的FP、SP、FG、SG和TG五个等级的Fisher判别函数分别为:
FP=-2.928*儿茶素含量数值+145.169*没食子儿茶素含量数值-12.430*水杨酸含量数值+1028.462*没食子酸含量数值-2190.08;
SP=-1.120*儿茶素含量数值+177.288*没食子儿茶素含量数值-8.064*水杨酸含量数值+876.862*没食子酸含量数值-1971.08;
FG=1.020*儿茶素含量数值+225.710*没食子儿茶素含量数值+3.486*水杨酸含量数值+632.590*没食子酸含量数值-1730.575;
SG=1.936*儿茶素含量数值+255.639*没食子儿茶素含量数值+7.988*水杨酸含量数值+620.284*没食子酸含量数值-1985.248;
TG=4.717*儿茶素含量数值+285.599*没食子儿茶素含量数值+18.434*水杨酸含量数值+334.851*没食子酸含量数值-1687.314。
得到FP、SP、FG、SG和TG五个等级的Fisher判别函数后,本发明采用超高效液相色谱法检测未知等级的六安瓜片茶叶样品中儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量,将所得未知等级的六安瓜片茶叶样品的儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量数值分别代入所述五个等级的Fisher判别函数中,所得数值中最大值所对应的等级为未知等级的六安瓜片茶叶样品的等级。在本发明中,所述采用超高效液相色谱法检测未知等级的六安瓜片茶叶样品中儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量的过程优选与上述采用超高效液相色谱法分别检测FP、SP、FG、SG和TG五个已知等级的六安瓜片茶叶中儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量的过程相同,在此不再赘述。
本发明对将所得未知等级的六安瓜片茶叶样品的儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量数值分别代入所述五个等级的Fisher判别函数中的过程没有特殊的限定,按照本领域熟知的过程进行即可。
下面将结合本发明中的实施例,对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然,所描述的实施例仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1
分别检测FP、SP、FG、SG和TG五个已知等级的六安瓜片茶叶中儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量:
儿茶素和没食子儿茶素含量的检测:
准确称取200mg已知等级的六安瓜片茶叶样品,加5mL质量浓度为70%的甲醇水溶液,70℃超声15分钟,功率为500W,之后3500转/分钟下离心10分钟,取上清液,重复两次,混合上清液定容至10mL,过0.22μm滤膜,得到提取液,置于温度为负20℃冰箱;
超高效液相色谱(UPLC)测定六安瓜片茶叶样品中儿茶素和没食子儿茶素的含量:
色谱检测条件:流动相:A相为乙腈、乙酸和乙二胺四乙酸的混合水溶液;所述乙腈在A相中的质量浓度为9%、所述乙酸在A相中的质量浓度为2%,所述乙二胺四乙酸在A相中的质量浓度为0.2%;B相为乙腈、乙酸和乙二胺四乙酸的混合水溶液;所述乙腈在B相中的质量浓度为80%、所述乙酸在B相中的质量浓度为2%,所述乙二胺四乙酸在B相中的质量浓度为0.2%;梯度洗脱程序:0~10min,100%A;10~15min,100%A至68%A;15~25min,68%A;25~30min,68%A至100%A;液相色谱柱C18;流动相流速:1mL/min;柱温35℃;紫外线检测器λ=278nm;进样量10μL;
以各已知等级的六安瓜片茶叶样品中目标检测峰面积表示其儿茶素和没食子儿茶素的含量,采用Prism软件作图,所得结果如图1所示;
水杨酸和没食子酸含量的检测方法:
精确称取200mg粉碎后已知等级的六安瓜片茶叶茶粉于15mL EP管中,加入9mL甲酸:甲醇(5:95,V/V)提取液,于50℃水浴65min,浸提结束后于3500r/min,室温离心10min,取上清于10mL容量瓶中,定容至10mL,经0.2μm水膜过滤,得到提取液,用于色谱分析;
色谱检测条件:色谱柱:ACQUITY UPLC HSS T3柱;流动相:A相为乙腈水溶液,所述乙腈水溶液中乙腈与水的体积比为5:95;B相为含0.1%甲酸的乙腈水溶液,所述含0.1%甲酸的乙腈水溶液中水与乙腈的体积比为5:95;梯度洗脱程序为:0~1min,98%A;1~2min,98%A至85%A;2~8min,85%A至74%A;8~9min,74%A至0%A;9~10min,0%A;10~11min,0%A至98%A;11~12min,98%A;流速0.4mL/min;柱温:30℃,样品盘温度:20℃,进样量:2μL,紫外检测波长280nm;
以各已知等级的六安瓜片茶叶样品中目标检测峰面积表示其水杨酸和没食子酸的含量,采用Prism软件作图,所得结果如图1所示;
图1为FP、SP、FG、SG和TG五个已知等级的六安瓜片茶叶中的儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量;a、b、c、d和e分别表示与其他组相比有显著性差异,显著性p<0.05。如图1所示,FP的儿茶素含量最低,随着等级的逐渐减少,儿茶素的含量逐渐增加,在TG中儿茶素的含量最高;没食子儿茶素和水杨酸的在五个等级中的含量与儿茶素相似。而没食子酸的含量在FP中含量最高,TG中含量最低,随等级增加,水杨酸的含量逐渐减少。
以所得儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量数值为解释变量,分别以六安瓜片茶叶五个等级为应变量,构建Fisher判别模型,得到FP、SP、FG、SG和TG五个等级的Fisher判别函数分别为:
FP=-2.928*儿茶素含量数值+145.169*没食子儿茶素含量数值-12.430*水杨酸含量数值+1028.462*没食子酸含量数值-2190.08;
SP=-1.120*儿茶素含量数值+177.288*没食子儿茶素含量数值-8.064*水杨酸含量数值+876.862*没食子酸含量数值-1971.08;
FG=1.020*儿茶素含量数值+225.710*没食子儿茶素含量数值+3.486*水杨酸含量数值+632.590*没食子酸含量数值-1730.575;
SG=1.936*儿茶素含量数值+255.639*没食子儿茶素含量数值+7.988*水杨酸含量数值+620.284*没食子酸含量数值-1985.248;
TG=4.717*儿茶素含量数值+285.599*没食子儿茶素含量数值+18.434*水杨酸含量数值+334.851*没食子酸含量数值-1687.314;
分别以市售六安瓜片茶叶样品(其标注等级分别为特一级(FP)、特二级(SP),一级(FG)和三级(TG))作为待测样品,按照上述过程采用超高效液相色谱法分别检测其儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸含量,所得含量见表2:
表2不同等级市售六安瓜片茶叶中儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸含量(mg/g)
等级 | 儿茶素 | 没食子儿茶素 | 水杨酸 | 没食子酸 |
特一级 | 8.3 | 9.52 | 2.54 | 5.12 |
特二级 | 9.32 | 7.5 | 2.73 | 3.01 |
一级 | 9.78 | 8.24 | 5.21 | 2.61 |
三级 | 11.52 | 8.7 | 7.98 | 2.05 |
将表2中所得儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量数值分别代入上述五个等级的Fisher判别函数中,结果如表3所示:
表3各不同等级市售六安瓜片茶叶的Fisher判别值
等级 | FP | SP | FG | SG | TG |
特一 | 4401.78 | 4176.457 | 3674.365 | 3660.648 | 2831.999 |
特二 | 1933.135 | 1965.482 | 1885.369 | 1838.95 | 1556.867 |
一级 | 1597.002 | 1725.416 | 1808.473 | 1800.71 | 1682.156 |
三级 | 1048.315 | 1291.64 | 1569.48 | 1596.44 | 1685.285 |
根据表3进行比较可知,特一级市售六安瓜片茶叶与FP相比较的数值最大(4401.78);特二级市售六安瓜片茶叶与SP相比较的数值最大(1965.482);一级市售六安瓜片茶叶与FG相比较的数值最大(1808.473);三级市售六安瓜片茶叶与TG相比较的数值最大(1685.285);均与其各自市售六安瓜片所标注的等级一致,证明该Fisher判别函数可信。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (6)
1.一种判别六安瓜片茶叶等级的方法,其特征在于,包括以下步骤:
采用超高效液相色谱法分别检测特一级FP、特二级SP、一级FG、二级SG和三级TG五个已知等级六安瓜片茶叶中儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量;
以儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量数值为解释变量,分别以六安瓜片茶叶五个等级为应变量,构建Fisher判别模型,得到FP、SP、FG、SG和TG五个等级的Fisher判别函数分别为:
FP=-2.928*儿茶素含量数值+145.169*没食子儿茶素含量数值-12.430*水杨酸含量数值+1028.462*没食子酸含量数值-2190.08;
SP=-1.120*儿茶素含量数值+177.288*没食子儿茶素含量数值-8.064*水杨酸含量数值+876.862*没食子酸含量数值-1971.08;
FG=1.020*儿茶素含量数值+225.710*没食子儿茶素含量数值+3.486*水杨酸含量数值+632.590*没食子酸含量数值-1730.575;
SG=1.936*儿茶素含量数值+255.639*没食子儿茶素含量数值+7.988*水杨酸含量数值+620.284*没食子酸含量数值-1985.248;
TG=4.717*儿茶素含量数值+285.599*没食子儿茶素含量数值+18.434*水杨酸含量数值+334.851*没食子酸含量数值-1687.314;
采用超高效液相色谱法检测未知等级的六安瓜片茶叶样品中儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量,将所得未知等级的六安瓜片茶叶样品的儿茶素、没食子儿茶素、水杨酸和没食子酸的含量数值分别代入所述五个等级的Fisher判别函数中,所得数值中最大值所对应的等级为未知等级的六安瓜片茶叶样品的等级;
采用超高效液相色谱法检测已知等级的六安瓜片茶叶中儿茶素和没食子儿茶素的含量的过程包括以下步骤:
将已知等级的六安瓜片茶叶与甲醇水溶液混合,进行超声辅助萃取,得到提取液;
将所述提取液进行高效液相色谱检测,得到已知等级的六安瓜片茶叶中儿茶素和没食子儿茶素的含量;所述高效液相色谱检测的条件包括:流动相:A相为乙腈、乙酸和乙二胺四乙酸的混合水溶液;所述乙腈在A相中的质量浓度为9%、所述乙酸在A相中的质量浓度为2%,所述乙二胺四乙酸在A相中的质量浓度为0.2%;B相为乙腈、乙酸和乙二胺四乙酸的混合水溶液;所述乙腈在B相中的质量浓度为80%、所述乙酸在B相中的质量浓度为2%,所述乙二胺四乙酸在B相中的质量浓度为0.2%;梯度洗脱程序:0~10min,100%A;10~15min,100~68%A;15~25min,68%A;25~30min,68~100%A;
采用超高效液相色谱法检测已知等级的六安瓜片茶叶中水杨酸和没食子酸的含量的过程包括以下步骤:
将已知等级的六安瓜片茶叶与甲酸-甲醇混合液混合,进行浸提,得到提取液;
将所述提取液进行高效液相色谱检测,得到已知等级的六安瓜片茶叶中水杨酸和没食子酸的含量;所述高效液相色谱检测的条件包括:色谱柱:ACQUITY UPLC HSS T3柱;流动相:A相为乙腈水溶液,所述乙腈水溶液中乙腈与水的体积比为5:95;B相为含0.1%甲酸的乙腈水溶液,所述含0.1%甲酸的乙腈水溶液中水与乙腈的体积比为5:95;梯度洗脱程序为0~1min,98%A;1~2min,98~85%A;2~8min,85~74%A;8~9min,74~0%A;9~10min,0%A;10~11min,0~98%A;11~12min,98%A。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述已知等级的六安瓜片茶叶与甲醇水溶液的用量比为(100~500)mg:5mL;所述甲醇水溶液的质量浓度为70%;所述超声辅助萃取的温度为60~70℃,功率为500W,时间为10~20min。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述高效液相色谱检测的条件还包括:液相色谱柱C18;流动相流速:1mL/min;柱温35℃;紫外线检测器λ=278nm;进样量10μL。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述已知等级的六安瓜片茶叶与甲酸-甲醇混合液的用量比为(100~500)mg:9mL;所述甲酸-甲醇混合液中甲酸和甲醇的体积比为5:95。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述浸提的温度为50~65℃,时间为60~75min。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述高效液相色谱检测的条件还包括:流速0.4mL/min;柱温:30℃,样品盘温度:20℃,进样量:2μL,紫外检测波长280nm。
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