CN113884561A - 一种用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法 - Google Patents

一种用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法 Download PDF

Info

Publication number
CN113884561A
CN113884561A CN202111488273.1A CN202111488273A CN113884561A CN 113884561 A CN113884561 A CN 113884561A CN 202111488273 A CN202111488273 A CN 202111488273A CN 113884561 A CN113884561 A CN 113884561A
Authority
CN
China
Prior art keywords
reductive alkylation
efficiency
sample
peptide fragments
quality control
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202111488273.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113884561B (zh
Inventor
陈亮宇
闫豪杰
宋雷
李捷
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Protein T Tianjin Biotech Co ltd
Original Assignee
Protein T Tianjin Biotech Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Protein T Tianjin Biotech Co ltd filed Critical Protein T Tianjin Biotech Co ltd
Publication of CN113884561A publication Critical patent/CN113884561A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113884561B publication Critical patent/CN113884561B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
    • G01N33/6848—Methods of protein analysis involving mass spectrometry

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本发明公开了一种用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法，包括以下步骤：（1）还原烷基化之前的任一步骤，在样品中加入含有至少两个半胱氨酸的多肽或蛋白标品，然后进行后续的操作至上机检测；（2）原始数据经软件分析后得到可鉴定肽段，分别找出该标品含有半胱氨酸的肽段以及不含半胱氨酸的肽段，标品还原烷基化率=（含半胱氨酸的肽段峰面积/不含半胱氨酸的肽段峰面积）*100%；（3）根据不同样品中标品还原烷基化率的差异，评估样品的还原烷基化效率。本发明方法可有效的对还原烷基化效率进行计算并标准化此步骤的质控方式，用于评估同批次不同样本间以及不同批次间还原烷基化的效率，进而辅助评判蛋白质组学的鉴定结果及数据分析。

Description

一种用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体地，涉及一种用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法。
背景技术
蛋白质组学研究的意义重大，包括对疾病进行早筛分类、对预后进行预判、筛选药物靶点等。然而蛋白质组提取作为蛋白质组学研究中的关键一步，其提取的质量直接影响整个研究过程。
蛋白质组提取步骤包括样本裂解、提取蛋白、还原烷基化、酶解、除盐等，每个步骤对最终获得的肽段质量都至关重要，尤其还原烷基化如果不够充分，直接影响酶解效率，影响最终肽段的鉴定及定量。目前对于还原烷基化效率的判断依赖于对整体还原烷基化效率进行计算，计算方式为鉴定到的含有半胱氨酸的肽段种类数除以总肽段种类数，最终的结果不能反应含有半胱氨酸的肽段被还原烷基化的比例，因此不能区分整体烷基化效率的差异是样本本身属性还是实验操作所致。目前还没有成熟的系统和标准对还原烷基化实验操作进行质控。
发明内容
发明目的：为解决上述技术问题，本发明提供了一种用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法，可有效的对还原烷基化的效率进行评估。
技术方案：一种用于评估在质谱分析过程中蛋白质组还原烷基化效率的质控方法，包括以下步骤：
（1）还原烷基化之前的任一步骤，在样品中加入含有至少两个半胱氨酸的多肽或蛋白标品，然后进行后续的操作至上机检测；
（2）质谱原始数据经软件分析后得到可鉴定肽段，分别找出该标品含有半胱氨酸的肽段以及不含半胱氨酸的肽段，标品还原烷基化率=（含半胱氨酸的肽段峰面积/不含半胱氨酸的肽段峰面积）*100%；
（3）根据样品中标品还原烷基化率，评估样品的还原烷基化效率。
优选的，步骤（1）中，所述多肽或蛋白标品为合成的标准品，酶切后的肽段与样本内源性肽段没有重复。
优选的，步骤（1）中，所述多肽或蛋白标品可被特定蛋白酶酶切为至少两个肽段，其中一个至少含有两个半胱氨酸，一个不含有半胱氨酸。
优选的，步骤（1）中，所述后续的操作包括酶解、除盐和/或分离等。
优选的，步骤（2）中，所述软件为蛋白质组分析软件，例如选自Spectronaut软件。
优选的，步骤（3）中，所述评估样品的还原烷基化效率，可以评估同批次不同样本间或者不同批次间还原烷基化的效率。
有益效果：相对于现有技术，本发明提供一种用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法，可有效的对还原烷基化效率进行计算，通过在还原烷基化前加入含有至少两个半胱氨酸（Cysteine）的多肽或蛋白标品用于评估同批次不同样本间以及不同批次间还原烷基化的效率，进而辅助评判蛋白质组学的鉴定结果及数据分析。
具体实施方式
以下对本发明方案进行全面的描述，所述的实施案例是本发明中最优选实施方式，但本发明并不限于以下实施例。
实施例1
1、三个不同的细胞样本，如样本1、样本2、样本3，各分为一样的两份，作为组1和组2。
2、两组分别加入适量裂解液提取蛋白，组1使用商品化液相级纯度的水配置裂解液，组2使用Millipore设备制备的双蒸水配置裂解液。
3、向每个样本中加入等量的多肽标品，如MCGAYCDLKSPFQYNTVG，然后加入适量浓度TCEP和CAA分别进行还原烷基化及酶解，使用SDB柱进行肽段除盐，洗脱肽段后，等量上机使用DIA方法进行检测。
4、原始数据经Spectronaut软件分析后，得到最终鉴定到的肽段/蛋白及对应的相对表达量，对三个样本各自整体的还原烷基化率进行计算，结果见表1：
表1 整体还原烷基化效率
Figure DEST_PATH_IMAGE001
。
5、根据可鉴定肽段及蛋白的相对表达量，从中找到加入的含半胱氨酸（C）肽段标品1，如MCGAYCDLK的表达量，不含C肽段标品2，如SPFQYNTVG的表达量，可计算样本间的还原烷基化率为：含C肽段表达量/不含C肽段表达量，结果见下表2：
表2 标品还原烷基化效率
Figure 232220DEST_PATH_IMAGE002
*相对含量：为相对于组1的样本1中相应的标品肽段含量倍数。
6、随机抽取样本中含有半胱氨酸的肽段定量数据，如表3。
7、以组1的样本1为基准，计算出每个肽段相对于组1样本1的相对含量，设第一组样品1的肽段还原烷基化率都为92.91%，则其他每个样品中的肽段还原烷基化率可估算：肽段相对含量/标品2相对含量*92.91%，如表3。
表3 样品中含C肽段检测强度及还原烷基化率
Figure DEST_PATH_IMAGE003
*相对含量：为相对于组1的样本1中相应的肽段含量倍数；
#还原烷基化率：以第一组样品1为基准，其肽段还原烷基化率都设为92.91%，以估算其他样品各肽段还原烷基化率。
结果分析：
1.根据表1结果可以看出，2组6个样本还原烷基化率大多在10-12%，只有1组的样本1为18.8%，无法判断各样本是否还原烷基化成功；
2.从表2结果来看，组1的样品1、2中，标品的还原烷基化率都在90%以上，说明还原烷基化成功，但这两个样本整体还原烷基化率差异较大分别为18.8%和11.8%，说明为样本间性质差异；
3. 从表2结果来看，样品3的标品还原烷基化率只有46%，说明还原烷基化不充分造成整体还原烷基化率低，可能为实验操作失误造成；
4. 从表2结果来看，在组2中的标品还原烷基化率差别相近，且都在30-40%附近，说明还原烷基化率低，而组2与组1的区别在于实验用水不同，后续实验证明，组1用的商业液相纯度水的pH为7，而Milipore设备制备的双蒸水的pH为6.2，造成相同配方配置的缓冲液pH分别为8.0和7.2，由于TCEP+CAA体系在pH为8.0时效率最高，接近中性时效率降低，造成了还原烷基化效率的降低；
5. 从表3结果来看，抽检的含有C的肽段来自不同蛋白，信号强度也不同，但这些肽段相对于组1样品1中相应肽段的相对强度比例都与标品的相对强度比例近似，且相应估算出的还原烷基化效率也与标品的还原烷基化效率近似，因此，标品可以反映样品中不同蛋白来源的含C肽段的还原烷基化效率。
实施例2
针对纯化蛋白样本进行评估还原烷基化效率，以牛血清白蛋白为例，该蛋白存在17对二硫键，当还原烷基化不充分的情况下，会较大影响蛋白质的定性定量。
1.取牛血清白蛋白作为示例，分别3份样品，分别为组1、组2、组3。
2. 3组分别加入适量1%脱氧胆酸钠缓冲液，组1、组3使用商品化液相级纯度的水配制，组2使用Millipore设备制备的双蒸水配制。
3. 向每个样本中加入等量的多肽标品，如MCGAYCDLKSPFQYNTVG。
4.组1及组2加入适量浓度TCEP和CAA，组3只加TCEP，不加CAA作为对照，分别进行还原烷基化。
5.使用胰蛋白酶酶解后，使用SDB柱进行肽段除盐，洗脱肽段后，等量上机检测。
6.使用DDA方法进行检测，获得肽段数据，原始数据经Maxquant软件分析后，得到各样品中各肽段的定量结果，结果见表1，牛血清白蛋白肽段数较多，列取按序列排序前6个可检测到肽段及酶解片段序号为23的片段作为数据展示：
表1 样品中肽段鉴定强度
Figure 319999DEST_PATH_IMAGE004
。
结果分析：
1.由于BSA蛋白酶解后，有很多肽段小于最小检测长度7个氨基酸，我们选取了酶解后序号1-12中能够检测到的片段序号，并增加了一个前后肽段不含有C的肽段23作为补充，肽段信息见表1；
2.如表1定量信息所示，组1来自与BSA的肽段定量水平接近，其波动主要由于不同肽段的响应信号差异；
3.如表1定量信息所示，组2与组1比较可以看出，组2中标品1、2的定量数都减半，BSA来源的肽段，前后不接有含C肽段的肽段，如2、23，都具有与组1差不多的定量值，但是含C肽段及与其相邻的肽段，定量值都显著下降，说明缓冲液影响了还原烷基化效率，同时影响了含C肽段附近的酶解效率，但未影响其他位置的效率；
4.如表1定量信息所示，组3与组1比较可以看出，不含C片段定量值基本一样，但是含C片段都未检测到，其原因是未加烷基化试剂，C只被还原而没有被烷基化固定，不能被有效检测。

Claims (7)

1.一种用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）还原烷基化之前的任一步骤，在样品中加入含有至少两个半胱氨酸的多肽或蛋白标品，然后进行后续的操作至上机检测；
（2）质谱原始数据经软件分析后得到可鉴定肽段，分别找出该标品含有半胱氨酸的肽段以及不含半胱氨酸的肽段，标品还原烷基化率=（含半胱氨酸的肽段峰面积/不含半胱氨酸的肽段峰面积）*100%；
（3）根据样品中标品还原烷基化率，评估样品的还原烷基化效率。
2.根据权利要求1所述的用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法，其特征在于，步骤（1）中，所述多肽或蛋白标品为合成的标准品，酶切后的肽段与样本内源性肽段没有重复。
3.根据权利要求1所述的用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法，其特征在于，步骤（1）中，所述多肽或蛋白标品可被特定蛋白酶酶切为至少两个肽段，其中一个至少含有两个半胱氨酸，一个不含有半胱氨酸。
4.根据权利要求1所述的用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法，其特征在于，步骤（1）中，所述后续的操作包括酶解、除盐和/或分离。
5.根据权利要求1所述的用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法，其特征在于，步骤（2）中，所述软件为蛋白质组分析软件。
6.根据权利要求1所述的用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法，其特征在于，步骤（2）中，所述软件选自Spectronaut软件。
7.根据权利要求1所述的用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法，其特征在于，步骤（3）中，所述评估样品的还原烷基化效率，可以评估同批次不同样本间或者不同批次间还原烷基化的效率。
CN202111488273.1A 2021-05-14 2021-12-08 一种用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法 Active CN113884561B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110526474.XA CN113267554A (zh) 2021-05-14 2021-05-14 一种用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法
CN202110526474X 2021-05-14

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113884561A true CN113884561A (zh) 2022-01-04
CN113884561B CN113884561B (zh) 2022-02-22

Family

ID=77230932

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110526474.XA Pending CN113267554A (zh) 2021-05-14 2021-05-14 一种用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法
CN202111488273.1A Active CN113884561B (zh) 2021-05-14 2021-12-08 一种用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110526474.XA Pending CN113267554A (zh) 2021-05-14 2021-05-14 一种用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法

Country Status (1)

Country Link
CN (2) CN113267554A (zh)

Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2002241732A1 (en) * 2000-10-23 2002-08-22 Genetics Institute, Llc Isotope-coded ionization-enhancing reagents (ICIER) for high-throughput protein identification and quantitation using matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry
US20020164809A1 (en) * 2000-10-23 2002-11-07 Genetics Institute, Inc. Acid-labile isotope-coded extractant (ALICE) and its use in quantitative mass spectrometric analysis of protein mixtures
WO2004097427A1 (en) * 2003-05-02 2004-11-11 Ludwig Institute For Cancer Research Methods for peptide analysis using mass spectrometry
US20070099304A1 (en) * 2005-10-17 2007-05-03 Puente Aniel S Method for the selective isolation of multiply-charged peptides applicable in the quantitative proteomics
JP2007292523A (ja) * 2006-04-24 2007-11-08 Shimadzu Corp 硫黄含有ペプチドの処理法及び硫黄原子含有ペプチドの解析法
US20080305495A1 (en) * 2005-11-22 2008-12-11 The University Of Western Australia Proteomics International Pty Ltd. Methods for determining the redox status of proteins
CN107402269A (zh) * 2017-07-31 2017-11-28 南方科技大学 基于scx/sax混合填料的集成化蛋白质组学样品前处理平台及其应用
CN109061013A (zh) * 2018-10-19 2018-12-21 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 一种利用lc-ms/ms检测食品中甲壳动物原肌球蛋白的方法
CN109142561A (zh) * 2018-07-17 2019-01-04 上海师范大学 同时定量蛋白质丰度与半胱氨酸氧化水平的方法及其应用
CN109580814A (zh) * 2018-12-06 2019-04-05 复旦大学 基于n-烷基化法的多种氨基代谢物同步定量分析方法
CN110161155A (zh) * 2018-02-12 2019-08-23 深圳华大生命科学研究院 从微量样品中提取和消化蛋白质的方法、定量检测及应用
CN110687297A (zh) * 2018-07-06 2020-01-14 复旦大学 基于稳定同位素半胱氨酸代谢标记的棕榈酰化修饰蛋白质定量分析方法
CN112129870A (zh) * 2020-09-02 2020-12-25 南岳生物制药有限公司 一种单克隆抗体药物的药代动力学质谱分析方法
US20210041449A1 (en) * 2018-03-28 2021-02-11 Two-Tag Holdings Pty Ltd Methods for Measuring Relative Oxidation Levels of a Protein

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2002241732B2 (en) * 2000-10-23 2007-07-12 Genetics Institute, Llc Isotope-coded ionization-enhancing reagents (ICIER) for high-throughput protein identification and quantitation using matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry

Patent Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2002241732A1 (en) * 2000-10-23 2002-08-22 Genetics Institute, Llc Isotope-coded ionization-enhancing reagents (ICIER) for high-throughput protein identification and quantitation using matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry
US20020164809A1 (en) * 2000-10-23 2002-11-07 Genetics Institute, Inc. Acid-labile isotope-coded extractant (ALICE) and its use in quantitative mass spectrometric analysis of protein mixtures
WO2004097427A1 (en) * 2003-05-02 2004-11-11 Ludwig Institute For Cancer Research Methods for peptide analysis using mass spectrometry
US20070099304A1 (en) * 2005-10-17 2007-05-03 Puente Aniel S Method for the selective isolation of multiply-charged peptides applicable in the quantitative proteomics
US20080305495A1 (en) * 2005-11-22 2008-12-11 The University Of Western Australia Proteomics International Pty Ltd. Methods for determining the redox status of proteins
JP2007292523A (ja) * 2006-04-24 2007-11-08 Shimadzu Corp 硫黄含有ペプチドの処理法及び硫黄原子含有ペプチドの解析法
CN107402269A (zh) * 2017-07-31 2017-11-28 南方科技大学 基于scx/sax混合填料的集成化蛋白质组学样品前处理平台及其应用
CN110161155A (zh) * 2018-02-12 2019-08-23 深圳华大生命科学研究院 从微量样品中提取和消化蛋白质的方法、定量检测及应用
US20210041449A1 (en) * 2018-03-28 2021-02-11 Two-Tag Holdings Pty Ltd Methods for Measuring Relative Oxidation Levels of a Protein
CN110687297A (zh) * 2018-07-06 2020-01-14 复旦大学 基于稳定同位素半胱氨酸代谢标记的棕榈酰化修饰蛋白质定量分析方法
CN109142561A (zh) * 2018-07-17 2019-01-04 上海师范大学 同时定量蛋白质丰度与半胱氨酸氧化水平的方法及其应用
CN109061013A (zh) * 2018-10-19 2018-12-21 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 一种利用lc-ms/ms检测食品中甲壳动物原肌球蛋白的方法
CN109580814A (zh) * 2018-12-06 2019-04-05 复旦大学 基于n-烷基化法的多种氨基代谢物同步定量分析方法
CN112129870A (zh) * 2020-09-02 2020-12-25 南岳生物制药有限公司 一种单克隆抗体药物的药代动力学质谱分析方法

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
卢庄 等: ""还原烷基化反应对肽段质谱鉴定影响的初步研究"", 《中国蛋白质组学第三届学术大会论文摘要》 *
张平: "HPLC MALDI-TOF质谱法检测IFN-α2b二硫键结构", 《海峡药学》 *
李卿等: "液相色谱串联质谱法检测血清载脂蛋白C的酶解效率", 《临床检验杂志》 *
桑志红等: "红细胞生长刺激蛋白二硫键定位连接方式的测定", 《生物技术通讯》 *
王继峰等: "酶切过程中肽段过烷基化对蛋白质定性和定量分析的影响", 《色谱》 *
黄竞男等: "蛋白质组学样品消化条件的优化", 《基因组学与应用生物学》 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN113884561B (zh) 2022-02-22
CN113267554A (zh) 2021-08-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Speicher et al. Systematic analysis of peptide recoveries from in-gel digestions for protein identifications in proteome studies
Schrader et al. Historical perspective of peptidomics
Lilley et al. All about DIGE: quantification technology for differential-display 2D-gel proteomics
US7501286B2 (en) Absolute quantification of proteins and modified forms thereof by multistage mass spectrometry
US20060094039A1 (en) Diagnosis of fetal aneuploidy
CN110799841B (zh) 用于检测大肠癌的生物标志物
CN110850099B (zh) 一种非疾病诊断目的的血清中c反应蛋白的定值方法
Pesciotta et al. A label-free proteome analysis strategy for identifying quantitative changes in erythrocyte membranes induced by red cell disorders
WO2003016861A2 (en) Absolute quantification of proteins and modified forms thereof by multistage mass spectrometry
EP1346229B1 (en) Inverse labeling method for the rapid identification of marker/target proteins
Zhan et al. Revival of 2DE-LC/MS in proteomics and its potential for large-scale study of human proteoforms
Regnier et al. Multidimensional chromatography and the signature peptide approach to proteomics
CN114705849A (zh) 一种基于silac进行血清胱抑素c绝对定量的质谱方法
CN113884561B (zh) 一种用于评估蛋白质组还原烷基化效率的质控方法
KR101527283B1 (ko) 당단백질의 탈당화 검출을 통한 암 마커 스크리닝 방법 및 간세포암 마커
CN113429474B (zh) 一种基于特征性肽段标签鉴别植物蛋白肉样品掺假情况的方法
US20060014210A1 (en) Serial derivatization of peptides for de novo sequencing using tandem mass spectrometry
Dowling DIGE analysis software and protein identification approaches
Cho et al. Statistical identification of differentially labeled peptides from liquid chromatography tandem mass spectrometry
US20240110921A1 (en) Analysis of protein termini
WO2021244001A1 (zh) 一种基于肽段的靶向蛋白质组精确定量方法
WO2005015239A2 (en) Method for n-terminal labeling of proteins
CN113311165A (zh) 与唐氏综合征相关的母血标志物及应用
CN116908473A (zh) 一种蛋白-细胞偶联物中的蛋白的检测试剂盒及其检测方法
Sun et al. Quantitative Methods for N-Glycosite Containing Peptides in N-Glycoproteomics

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant