CN113825765A - 用于制备抗il12/il23抗体组合物的制造方法 - Google Patents
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Abstract
用于在CHO中制备抗IL‑12/IL‑23p40抗体(例如,抗IL‑12/IL‑23p40抗体优特克单抗)的制造方法以及所述抗体的特定药物组合物可用于治疗各种疾病。
Description
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技术领域
本发明涉及用于制备抗IL-12/IL-23p40抗体(例如,抗IL-12/IL-23p40抗体优特克单抗)的制造方法以及所述抗体的特定药物组合物。
背景技术
白介素(IL)-12是分泌的异二聚体细胞因子,其由2个二硫键连接的糖基化蛋白质亚基组成,根据它们的近似分子量被命名为p35和p40。IL-12主要由抗原呈递细胞产生,并且通过与在T细胞或自然杀伤(NK)细胞的表面上表达的双链受体复合物结合来驱动细胞介导的免疫。IL-12受体β-1(IL-12Rβ1)链结合到IL-12的p40亚基,从而提供IL-12与其受体之间的主要相互作用。然而,是第二受体链IL-12Rβ2的IL-12p35连接赋予了细胞内信号传导(例如STAT4磷酸化)和对受体承载细胞的激活(Presky等人,1996)。与抗原呈递同时发生的IL-12信号传导被认为引起T细胞向T辅助细胞1(Th1)表型分化,其特征在于产生干扰素γ(IFN-γ)(Trinchieri,2003)。据信,Th1细胞促进对一些细胞内病原体的免疫、产生补体固定抗体同种型,并且有助于肿瘤免疫监视。因此,IL-12被认为是宿主防御免疫机制的重要组成部分。
据发现,IL-12的p40蛋白质亚基也可以与被命名为p19的单独的蛋白质亚基缔合,以形成新的细胞因子IL-23(Oppman等人,2000)。IL-23还通过双链受体复合物发出信号。由于p40亚基在IL-12与IL-23之间共享,因此IL-12Rβ1链也在IL-12与IL-23之间共享。然而,是IL-23受体复合物的第二组分IL-23R的IL-23p19连接赋予了IL-23特异性细胞内信号传导(例如,STAT3磷酸化)以及后续的由T细胞产生IL-17(Parham等人,2002;Aggarwal等人,2003)。最近的研究已证实,IL-23的生物学功能不同于IL-12的生物学功能,尽管这两种细胞因子之间具有结构相似性(Langrish等人,2005)。
IL-12细胞群和Th1细胞群的异常调节一直与许多免疫介导的疾病相关联,因为用抗体中和IL-12能够有效地治疗银屑病、多发性硬化症(MS)、类风湿性关节炎、炎性肠病、胰岛素依赖型(1型)糖尿病和葡萄膜炎的动物模型(Leonard等人,1995;Hong等人,1999;Malfait等人,1998;Davidson等人,1998)。在两个独立的系统性红斑狼疮小鼠模型中,IL-12也被证明在SLE的发病机制中起关键作用(Kikawada等人,2003;Dai等人,2007)。
系统性红斑狼疮(SLE)是一种复杂的慢性异质自身免疫疾病,其病因未知,可以影响几乎任何器官系统,并且其遵循盛衰疾病过程。系统性红斑狼疮在女性中比在男性中更常发生,在一些研究中其频率高达9倍,并且经常在15至45岁的育龄期出现。这种疾病在非洲裔加勒比人、亚洲人和西班牙人群体中更为普遍。在SLE中,免疫系统攻击身体的细胞和组织,导致炎症和组织损伤,这可损害心脏、关节、皮肤、肺、血管、肝脏、肾脏和神经系统。大约一半被诊断为SLE的受试者患有危及器官的疾病,但诊断未患有器官受累的受试者可能需要数年时间。新诊断的狼疮患者的一些主要症状是关节痛(62%)和皮肤症状(新的光敏性;20%),其次是持续发烧和不舒服。估计的狼疮的年发病率为每100,000人1.8至7.6例,而全球患病率为每100,000人14至172例。轻症患者大部分为皮疹和关节痛,并且需要不那么激进的疗法;方案包括非甾体抗炎药(NSAID)、抗疟疾药(例如羟氯喹、氯喹或奎纳克林)和/或低剂量皮质类固醇。对于更严重的疾病,取决于所涉及的器官系统,患者可能经历多种严重的病症,包括具有潜在肾衰竭的狼疮肾炎、心内膜炎或心肌炎、肺炎、妊娠并发症、中风、神经并发症、血管炎和具有出血或感染的相关风险的血细胞减少症。更严重的疾病的常见治疗包括免疫调节剂,诸如甲氨蝶呤(MTX)、硫唑嘌呤、环磷酰胺、环孢菌素、高剂量皮质类固醇、生物B细胞细胞毒性剂或B细胞调节剂以及其他免疫调节剂。严重SLE患者的预期寿命会缩短10至30年,这主要是由于该疾病、标准护理疗法和/或加速的动脉粥样硬化的并发症。另外,SLE对生活质量、工作效率和医疗保健支出具有显著影响。现有的SLE疗法通常具有细胞毒性或免疫调节性,并且可能有明显的安全风险。较新的SLE治疗仅提供了优于标准护理疗法的适度益处。因此,对于可以在该疾病中提供显著益处而不招致高安全风险的新替代治疗存在尚未满足的很大需求。
发明内容
本发明的实施方案分别由本文所附的独立权利要求和从属权利要求限定,为了简洁起见,这些权利要求以引用方式并入本文。根据下面结合附图的详细描述,本发明的各个方面的其他实施方案、特征和优点是显而易见的。
在某些实施方案中,本发明提供了在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中表达的抗IL-12/IL-23p40抗体。由本发明定义的″抗IL-12/IL-23p40抗体″包括在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中表达的具有选自由以下项组成的组的氨基酸序列的抗体:(i)包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的重链(HC)和包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列的轻链(LC);(ii)SEQ IDNO:7的重链可变结构域氨基酸序列和SEQ ID NO:8的轻链可变结构域氨基酸序列;以及(iii)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3的重链CDR氨基酸序列以及SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的轻链CDR氨基酸序列。
在某些实施方案中,该抗IL-12/IL-23p40抗体的低聚糖谱包含>99.0%的总中性低聚糖种类和<1.0%的总带电低聚糖种类。在其他实施方案中,(i)该抗IL-12/IL-23p40抗体的低聚糖谱包含>99.0%的总中性低聚糖种类、<1.0%的总带电低聚糖种类以及>70.0%的单个中性低聚糖种类G0F、<20.0%的G1F和<5.0%的G2F;(ii)该低聚糖谱包含>99.0%的总中性低聚糖种类和<1.0%的总带电低聚糖种类,并且该抗IL-12/IL-23p40抗体的毛细管等电聚焦(cIEF)电泳图的峰3面积%>70.0%;(iii)该抗IL-12/IL-23p40抗体不具有二唾液酸化聚糖种类,如通过高效液相色谱(HPLC)或减少质量分析(RMA)所确定;(iv)与在Sp2/0细胞中表达的抗IL-12/IL-23p40抗体相比,该抗IL-12/IL-23p40抗体具有更长的半衰期;并且/或者(v)该抗IL-12/IL-23p40抗体是优特克单抗(由JanssenBiotech,Inc.以销售)的后续生物制剂(依赖于优特克单抗和/或用优特克单抗产生的数据的监管批准的抗体)。
在某些实施方案中,本发明提供了一种用于制备抗IL-12/IL-23p40抗体的制造方法,该制造方法包括:a.培养中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞);b.在CHO细胞中表达抗IL-12/IL-23p40抗体;以及c.纯化抗IL-12/IL-23p40抗体,其中(i)该抗IL-12/IL-23p40抗体的低聚糖谱包含>99.0%的总中性低聚糖种类和<1.0%的总带电低聚糖种类;(ii)该抗IL-12/IL-23p40抗体的低聚糖谱包含>99.0%的总中性低聚糖种类、<1.0%的总带电低聚糖种类以及>70.0%的单个中性低聚糖种类G0F、<20.0%的G1F和<5.0%的G2F;(iii)该低聚糖谱包含>99.0%的总中性低聚糖种类和<1.0%的总带电低聚糖种类,并且该抗IL-12/IL-23p40抗体的毛细管等电聚焦(cIEF)电泳图的峰3面积%>70.0%;(iv)该抗IL-12/IL-23p40抗体不具有二唾液酸化聚糖种类,如通过高效液相色谱(HPLC)或减少质量分析(RMA)所确定;(v)与在Sp2/0细胞中表达的抗IL-12/IL-23p40抗体相比,该抗IL-12/IL-23p40抗体具有更长的半衰期;并且/或者(vi)该抗IL-12/IL-23p40抗体是优特克单抗的后续生物制剂。
在某些实施方案中,本发明提供了一种组合物,该组合物包含抗IL-12/IL-23p40抗体,其中(i)该抗IL-12/IL-23p40抗体的低聚糖谱包含>99.0%的总中性低聚糖种类和<1.0%的总带电低聚糖种类;(ii)该抗IL-12/IL-23p40抗体的低聚糖谱包含>99.0%的总中性低聚糖种类、<1.0%的总带电低聚糖种类以及>70.0%的单个中性低聚糖种类G0F、<20.0%的G1F和<5.0%的G2F;(iii)该低聚糖谱包含>99.0%的总中性低聚糖种类和<1.0%的总带电低聚糖种类,并且该抗IL-12/IL-23p40抗体的毛细管等电聚焦(cIEF)电泳图的峰3面积%>70.0%;(iv)该抗IL-12/IL-23p40抗体不具有二唾液酸化聚糖种类,如通过高效液相色谱(HPLC)或减少质量分析(RMA)所确定;(v)与在Sp2/0细胞中表达的抗IL-12/IL-23p40抗体相比,该抗IL-12/IL-23p40抗体具有更长的半衰期;并且/或者(vi)该抗IL-12/IL-23p40抗体是优特克单抗的后续生物制剂。
附图说明
图1示出了优特克单抗制造过程的10个阶段的概述。
图2示出了预培养和扩增步骤(包括过程中控制和过程监测测试)的第1阶段制造过程的流程图。
图3示出了第2阶段制造过程步骤(包括过程中控制和过程监测测试)的流程图。
图4示出了在Sp2/0细胞中产生的优特克单抗的低聚糖分析的代表性HPLC色谱图。
图5示出了在Sp2/0细胞中产生的优特克单抗的IRMA分析的代表性解卷积质谱。
图6示出了在Sp2/0细胞中表达的优特克单抗的代表性cIEF电泳图谱。还示出了表示cIEF峰与减少负电荷/唾液酸化度之间的一般关系的图形,并且标记了峰A、B、1、2、3和C。
图7示出了优特克单抗IgG中一些主要N连接的低聚糖种类的图解概述。还示出了一些酶在糖基化成熟过程中的作用以及一些二价阳离子(例如,作为辅因子的Mn2+和作为GalTI抑制剂的Cu2+)的作用(参见例如Biotechnol Bioeng.2007年2月15日;96(3):538-49;Curr Drug Targets.2008年4月;9(4):292-309;J Biochem Mol Biol.2002年5月31日;35(3):330-6)。需注意,具有末端唾液酸的物质(S1和S2)是带电物质,而缺乏末端唾液酸的物质(G0F、G1F和G2F)是中性物质,但带电物质的生成取决于G1F和G2F中通过GalT1酶添加的半乳糖的存在。
图8示出了在CHO细胞中产生的优特克单抗的低聚糖分析的代表性HPLC色谱图。散列标记表示由分析软件确定的高于基线的所有峰,并且带标签的括号表示代表总中性低聚糖种类、总带电低聚糖种类和单唾液酸化低聚糖种类的峰组。
图9示出了在CHO细胞中表达的优特克单抗的代表性cIEF电泳图谱。还示出了表示cIEF峰与减少负电荷/唾液酸化度之间的一般关系的图形,并且标记了峰1、2、3和C。
具体实施方式
如本文所用,″抗IL-12抗体″、″抗IL-23抗体″、″抗IL-12/23p40抗体″、″抗IL-12/IL-23p40抗体″、″IL-12/23p40抗体″、″IL-12/IL-23p40抗体″、″抗体部分″或″抗体片段″和/或″抗体变体″等包括含有下述分子的任何蛋白质或肽:该分子包含免疫球蛋白分子的至少一部分,诸如但不限于重链或轻链的至少一个互补决定区(CDR)或其配体结合部分、重链或轻链可变区、重链或轻链恒定区、框架区或其任何部分,或者IL-12和/或IL-23受体或结合蛋白质的可以结合到本发明的抗体中的至少一个部分。这种抗体任选地还影响特异性配体,诸如但不限于这种抗体在体外、在原位和/或在体内调节、降低、提高、拮抗、激动、缓和、减轻、阻断、抑制、消除和/或干扰至少一种IL-12/23活性或结合或者IL-12/23受体活性或结合的情况。作为一个非限制性示例,本发明的合适的抗IL-12/23p40抗体、指定部分或变体可以结合至少一个IL-12/23分子或者其指定部分、变体或结构域。合适的抗IL-12/23p40抗体、指定部分或变体还可以任选地影响IL-12/23活性或功能中的至少一者,诸如但不限于RNA、DNA或蛋白质合成、IL-12/23释放、IL-12/23受体信号传导、膜IL-12/23切割、IL-12/23活性、IL-12/23产生和/或合成。
如本文所用,术语″抗体″或″多种抗体″包括根据2009年的生物制品价格竞争和创新法案(BPCI Act)和全球类似法律法规批准的生物仿制抗体分子。根据BPCI Act,如果数据显示,抗体与参考产品″高度相似″,但是临床非活性组分具有微小差异,并且在安全性、纯度和效能方面″预期″产生与参考产品相同的临床结果,则可证实抗体是生物仿制的(内分泌实践:2018年2月,第24卷,第2期,第195页至第204页)。为这些生物仿制药抗体分子提供了简化的批准途径,从而使申请人能够依靠创新药参考产品的临床数据来确保监管批准。与基于成功临床试验被FDA批准的原始创新药参考抗体相比,生物仿制药抗体分子在本文中称为″后续生物制剂″。如本文所示,(优特克单抗)是基于成功临床试验批准的原始创新药参考抗IL-12/23p40抗体。优特克单抗自2009年以来已在美国销售。
术语″抗体″还旨在涵盖抗体、其消化片段、特定部分和变体,包括抗体模拟物或包含模拟抗体或其特定片段或部分的结构和/或功能的抗体部分,包括单链抗体及其片段。功能片段包括结合哺乳动物IL-12/23的抗原结合片段。例如,本发明涵盖能够结合IL-12/23或其部分的抗体片段,包括但不限于Fab片段(如通过木瓜蛋白酶消化得到)、Fab′片段(如通过胃蛋白酶消化和部分还原得到)和F(ab′)2片段(如通过胃蛋白酶消化得到)、facb片段(如通过纤溶酶消化得到)、pFc′片段(如通过胃蛋白酶或纤溶酶消化得到)、Fd片段(如通过胃蛋白酶消化、部分还原以及重聚集得到)、Fv或scFv片段(如通过分子生物学技术得到)(参见例如Colligan,Immunology,出处同上)。
此类片段可通过酶促切割、合成或重组技术产生,如本领域公知的和/或如本文所述的。还可使用其中已在天然终止位点的上游引入一个或多个终止密码子的抗体基因以多种截短形式产生抗体。例如,可以将编码F(ab′)2重链部分的组合基因设计成包括编码重链的CH1结构域和/或铰链区的DNA序列。抗体的各个部分可通过常规技术用化学方法连接在一起,或可使用遗传工程技术制备为连续蛋白质。
如本文所用的,术语″人抗体″指其中基本上蛋白质的每个部分(如CDR、构架区、CL结构域、CH结构域(例如CH1、CH2、CH3)、铰链区(VL、VH))在人类中基本上为无免疫原性的,仅具有小的序列改变或变化。″人抗体″也可以为来源于人类生殖系免疫球蛋白序列或与之紧密匹配的抗体。人抗体可以包括不由种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如,在体外通过随机诱变或位点特异性诱变引入的突变,或者在体内通过体细胞突变引入的突变)。通常,这意味着人抗体在人中为基本上无免疫性的。人抗体已根据它们的氨基酸序列相似性被分类成组。因此,使用序列相似性搜索,可选择具有类似线性序列的抗体作为模板以产生人抗体。类似地,指明属灵长类(猴、狒狒、黑猩猩等)、啮齿类(小鼠、大鼠、兔、豚鼠、仓鼠等)和其他哺乳动物的抗体表示这些种、亚属、属、亚科、科的特异抗体。此外,嵌合抗体可包括上述抗体的任何组合。此类改变或变异任选且优选地相对于未经修饰的抗体而言保持或减少在人或其他物种中的免疫原性。因此,人抗体不同于嵌合抗体或人源化抗体。
应当指出的是,人抗体可由能够表达功能性重排的人免疫球蛋白(例如,重链和/或轻链)基因的非人动物或原核或真核细胞产生。此外,当人抗体是单链抗体时,它可包含在天然人抗体中不存在的连接肽。例如,Fv可包含连接重链可变区和轻链可变区的连接肽,诸如二至约八个甘氨酸或其他氨基酸残基。此类连接肽被认为是人源的。
可用于本发明的方法和组合物中的抗IL-12/23p40抗体(也称作IL-12/23p40抗体)(或IL-23抗体)可以任选地以与IL-12/23p40(或IL-23)高亲和力结合、并且任选地且优选地具有低毒性为特征。具体地,本发明的抗体、特定片段或变体(其中各个成分,诸如可变区、恒定区和构架区单独和/或共同地任选且优选地具有低免疫原性)可用于本发明中。可用于本发明的抗体的特征任选地在于它们能长期用于治疗患者,可测量地减轻症状并具有低毒性和/或可接受的毒性。低的或可接受的免疫原性和/或高亲和力以及其他合适的特性,可有助于实现治疗结果。″低免疫原性″在本文中被定义为在少于约75%、或优选地少于约50%的受治疗的患者中产生显著的HAHA、HACA或HAMA响应,并且/或者在受治疗的患者中引起低滴度(用双抗原酶免疫测定法测量,小于约300,优选地小于约100)(Elliott等人,Lancet 344:1125-1127(1994),其全文以引用方式并入本文)。″低免疫原性″也可以被定义为在治疗期期间,在用抗IL-12抗体治疗的患者中抗体对抗IL-12抗体的可滴定水平的发生率出现在少于25%的用推荐的疗法过程的推荐剂量治疗的患者中,优选地出现在少于10%的用推荐的疗法过程的推荐剂量治疗的患者中。
如本文所用,术语″人抗体″指其中基本上蛋白质的每个部分(例如CDR、框架、CL结构域、CH结构域(例如CH1、CH2和CH3)、铰链(VL、VH))在人类中基本上为无免疫原性的,仅具有小的序列改变或变化。类似地,指明属灵长类(猴、狒狒、黑猩猩等)、啮齿类(小鼠、大鼠、兔、豚鼠、仓鼠等)和其他哺乳动物的抗体表示此类种、亚属、属、亚科、科的特异抗体。此外,嵌合抗体包括上述的任何组合。此类改变或变异任选且优选地相对于未经修饰的抗体而言保持或减少在人或其他物种中的免疫原性。因此,人抗体不同于嵌合抗体或人源化抗体。应当指出的是,人抗体可由能够表达功能性重排的人免疫球蛋白(例如,重链和/或轻链)基因的非人动物或原核或真核细胞产生。此外,当人抗体是单链抗体时,它可包含在天然人抗体中不存在的连接肽。例如,Fv可包含连接重链可变区和轻链可变区的连接肽,诸如二至约八个甘氨酸或其他氨基酸残基。此类连接肽被认为是人源的。
还可以使用双特异性抗体(例如)、异种特异性抗体、异种缀合抗体或类似抗体,它们是对至少两种不同抗原具有结合特异性的单克隆的、优选人或人源化的抗体。制备双特异性抗体的方法是本领域已知的。通常,双特异性抗体的重组产生是基于两个免疫球蛋白重链-轻链对的共表达,其中两条重链具有不同的特异性(Milstein andCuello,Nature 305:537(1983))。由于免疫球蛋白重链和轻链的随机分配,这些杂交瘤(四源杂交瘤(quadroma))产生可能的10种不同抗体分子的混合物,其中仅一种具有正确的双特异性结构。通常通过亲和色谱步骤进行的正确分子的纯化可能由于低产物收率而效率低下,并且已经开发出不同策略来促进双特异性抗体产生。
全长双特异性抗体可以例如使用两个单特异性二价抗体之间的Fab臂交换(或半分子交换)通过下列方式产生:在每个半分子中的重链CH3交界处引入置换以促成两个在体外无细胞环境中或使用共表达而具有不同特异性的抗体半分子的异源二聚体形成。Fab臂交换反应是二硫键异构化反应和CH3结构域解离-缔合的结果。亲本单特异性抗体的铰链区中的重链二硫键被还原。亲本单特异性抗体之一的所得游离半胱氨酸与第二亲本单特异性抗体分子的半胱氨酸残基形成重链间二硫键,同时亲本抗体的CH3域通过解离-缔合而释放和重新形成。可将Fab臂的CH3结构域改造成促成异源二聚化而非同源二聚化。所得产物是具有两个Fab臂或半分子的双特异性抗体,这两个Fab臂或半分子各自结合不同的表位。
如本文所用,″同源二聚化″是指具有相同CH3氨基酸序列的两条重链的相互作用。如本文所用,″同源二聚体″是指具有含有相同CH3氨基酸序列的两条重链的抗体。
如本文所用,″异源二聚化″是指具有不同CH3氨基酸序列的两条重链的相互作用。如本文所用,″异源二聚体″是指具有含有不同CH3氨基酸序列的两条重链的抗体。
″钮扣(knob-in-hole)″策略(参见例如PCT国际公布WO 2006/028936)可用于产生全长双特异性抗体。简而言之,在人IgG中形成CH3结构域的交界的选定氨基酸可在影响CH3结构域相互作用的位置处突变,从而促进异源二聚体形成。将具有小侧链(扣)的氨基酸引入特异性地结合第一抗原的抗体的重链中,并将具有大侧链(钮)的氨基酸引入特异性地结合第二抗原的抗体的重链中。在两种抗体共表达后,由于具有″扣″的重链与具有″钮″的重链的优先相互作用而形成异源二聚体。形成钮和扣的示例性CH3置换对(表示为第一重链的第一CH3域中的修饰位置/第二重链的第二CH3域中的修饰位置)是:T366Y/F405A、T366W/F405W、F405W/Y407A、T394W/Y407T、T394S/Y407A、T366W/T394S、F405W/T394S和T366W/T366S_L368A_Y407V。
还可使用其他策略,诸如通过在一个CH3表面置换带正电荷的残基并在第二CH3表面置换带负电荷的残基使用静电相互作用促进重链异源二聚化,如美国专利公布US2010/0015133;美国专利公布US2009/0182127;美国专利公布US2010/028637或美国专利公布US2011/0123532中所述。在其他策略中,可通过下面的置换(表示为第一重链的第一CH3域中的修饰位置/第二重链的第二CH3域中的修饰位置)促进异源二聚化:L351Y_F405A_Y407V/T394W、T366I_K392M_T394W/F405A_Y407V、T366L_K392M_T394W/F405A_Y407V、L351Y_Y407A/T366A_K409F、L351Y_Y407A/T366V_K409F、Y407A/T366A_K409F、或T350V_L351Y_F405A_Y407V/T350V_T366L_K392L_T394W,如美国专利公布US2012/0149876或美国专利公布US2013/0195849中所述。
除上述方法之外,双特异性抗体还可在体外无细胞环境中通过下列方式产生:在两种单特异性同源二聚抗体的CH3区中引入不对称突变,并且在还原条件下由两种亲本单特异性同源二聚抗体形成双特异性异源二聚抗体,从而根据国际专利公布WO2011/131746中所述的方法允许二硫键异构化。在所述方法中,将第一单特异性二价抗体和第二单特异性二价抗体工程化为在CH3域处具有促进异源二聚体稳定性的某些置换;将这些抗体在足以使铰链区中的半胱氨酸发生二硫键异构化的还原条件下一起温育;从而通过Fab臂交换产生双特异性抗体。温育条件最理想地可恢复到非还原条件。可使用的示例性还原剂为2-巯基乙胺(2-MEA)、二硫苏糖醇(DTT)、二硫赤藓糖醇(DTE)、谷胱甘肽、三(2-羧乙基)膦(TCEP)、L-半胱氨酸和β-巯基乙醇,优选为选自2-巯基乙胺、二硫苏糖醇和三(2-羧乙基)膦的还原剂。例如,可使用如下条件:在至少25mM 2-MEA的存在下或至少0.5mM二硫苏糖醇的存在下,在5-8的pH例如pH7.0或pH7.4,至少20℃的温度下,温育至少90分钟。
如本文所用,在剂量、剂量方案、治疗或方法的语境中,术语″功效″和″有效″是指特定的剂量、剂量方案或治疗方案的有效性。功效可基于病程响应于本发明的药剂而发生的变化进行测量。例如,将本发明的抗IL12/23p40或抗IL23抗体(例如,抗IL12/23p40抗体优特克单抗)以足以诱导至少一种反映所治疗疾病的严重程度的指标的改善、优选持续改善的量和时间施用于患者。可评估反映受试者的病、疾病或病症程度的各种指标,以确定治疗的量和时间是否足够。此类指标包括例如临床上公认的疾病严重程度、症状或所考虑病症的表现的指标。改善程度通常由医师确定,该医师可以基于病征、症状、活检或其他测试结果进行该确定,并且还可以采用施用于受试者的调查问卷(诸如针对给定疾病开发的生活质量调查问卷)进行该确定。
术语″安全″在其涉及用本发明的抗IL12/23p40或抗IL23抗体(例如,抗IL12/23p40抗体优特克单抗)进行的剂量、剂量方案、治疗或方法时,是指与护理标准或另一个比较物相比具有治疗期间出现的不良事件(称为AE或TEAE)的可接受的频率和/或可接受的严重程度的有利风险:效益比。不良事件是在施用药品的患者中发生的不良医学事件。具体地讲,″安全″在其涉及用本发明的抗IL12/23p40或抗IL23抗体进行的剂量、剂量方案或治疗时,是指如果认为归因可能、很可能或非常可能是由于使用抗IL12/23p40或抗IL23抗体则与施用该抗体相关联的不良事件具有可接受频率和/或可接受严重程度。
实用性
本发明的分离核酸可以用于产生至少一种抗IL-12/23p40(或抗IL-23)抗体或其指定变体,其可以用于在细胞、组织、器官或动物(包括哺乳动物和人)中测量或实现,以诊断、监测、调节、治疗、减轻、帮助预防至少一种IL-12/23病症的发生或减少其症状,该病症选自但不限于免疫障碍或疾病、心血管障碍或疾病、感染性、恶性和/或神经性障碍或疾病或者其他已知或指定IL-12/23相关病症中的至少一者。
这种方法可以包括将有效量的包含至少一种抗IL-12/23p40(或抗IL-23)抗体的组合物或药物组合物施用于需要对症状、效果或机制进行这种调节、治疗、减轻、预防或减少的细胞、组织、器官、动物或患者。该有效量可以包括每单次施用(例如,推注)、多次施用或连续施用约0.001mg/kg至500mg/kg的量,或者每单次施用、多次施用或连续施用实现0.01μg/ml至5000μg/ml的血清浓度的量,或者其中的任何有效范围或值,该有效量使用如本文所述的或相关领域中已知的已知方法进行施用和测定。
引用
本文引用的所有出版物或专利,无论是否明确指明,都以引用方式全部并入本文,因为它们显示了本发明之际的技术发展水平,并且/或者提供了本发明的描述和实现。出版物是指任何科学出版物或专利公布、或可以任何媒体格式获得的任何其他信息,该媒体格式包括所有记录格式、电子格式或印刷格式。以下参考以引用方式全文并入本文:Ausubel等人编辑,Current Protocols in Molecular Biology,John Wiley&Sons,Inc.,NY,NY(1987-2001);Sambrook等人,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,第2版,ColdSpring Harbor,NY,1989年;Harlow和Lane,antibodies,a Laboratory Manual,ColdSpring Harbor,NY(1989);Colligan等人编辑,Current Protocols in Immunology,JohnWiley&Sons,Inc.,NY(1994-2001);Colligan等人,Current Protocols in ProteinScience,John Wiley&Sons,NY,NY,(1997-2001)。
本发明的抗体一制备和产生
如本领域公知的,本发明的方法中使用的至少一种抗IL-12/23p40(或抗IL-23)可以任选通过细胞系、混合细胞系、无限增殖化细胞或无限增殖化细胞的克隆群体来制备。参见例如Ausubel等人编辑,Current Protocols in Molecular Biology,John Wiley&Sons,Inc.,NY,NY(1987-2001);Sambrook等人,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,第2版,Cold Spring Harbor,NY(1989);Harlow和Lane,antibodies,a Laboratory Manual,Cold Spring Harbor,NY(1989);Colligan等人编辑,Current Protocols in Immunology,John Wiley&Sons,Inc.,NY(1994-2001);Colligan等人,Current Protocols in ProteinScience,John Wiley&Sons,NY,NY,(1997-2001),各自以引用方式全文并入本文。
优选的抗IL-12/23p40抗体是优特克单抗其具有SEQ ID NO:7的重链可变区氨基酸序列和SEQ ID NO:8的轻链可变区氨基酸序列,并且具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3的重链CDR氨基酸序列;以及SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的轻链CDR氨基酸序列。优选的抗IL-23抗体是古塞库单抗(也称为CNTO1959)。其他抗IL-23抗体具有本文列出的序列,并且描述于美国专利7,935,344中,该专利的全部内容以引用方式并入本文。
可针对合适的免疫原性抗原产生对人IL-12/23p40或IL-23蛋白或其片段特异的人抗体,诸如分离的IL-12/23p40蛋白、IL-23蛋白和/或其部分(包括合成分子,如合成肽)。可以类似地产生其他特异或一般性的哺乳动物抗体。使用任何合适的技术可执行免疫原性抗原的制备和单克隆抗体的产生。
在一种方法中,杂交瘤是通过融合合适的永生细胞系(例如,骨髓瘤细胞系,诸如但不限于Sp2/0、Sp2/0-AG14、NSO、NS1、NS2、AE-1、L.5、L243、P3X63Ag8.653、Sp2 SA3、Sp2MAI、Sp2 SS1、Sp2 SA5、U937、MLA 144、ACT IV、MOLT4、DA-1、JURKAT、WEHI、K-562、COS、RAJI、NIH 3T3、HL-60、MLA 144、NAMALWA、NEURO 2A等,或异骨髓瘤、其融合产品,或自其衍生的任何细胞或融合细胞,或本领域公知的任何其他适合的细胞系)(参见,例如www.atcc.org,www.lifetech.com.等)和产抗体细胞产生,该产抗体细胞诸如但不限于分离的或克隆的脾、外周血、淋巴,扁桃体或其他含免疫或B细胞的细胞,或表达重链或轻链恒定或可变或框架或CDR序列的任何其他细胞,作为内源或异源核酸,如重组或内源、病毒、细菌、藻类、原核、两栖动物、昆虫、爬行动物、鱼、哺乳动物、啮齿动物、马、绵羊、山羊、羊、灵长类动物、真核生物、基因组DNA、cDNA、rDNA、线粒体DNA或RNA、叶绿体DNA或RNA、hnRNA、mRNA、tRNA、单链、双链或三链,杂交体等或其任何组合。参见,例如以引用方式全文并入本文的Ausubel,出处同上,和Colligan,Immunology,出处同上,第2章。
产抗体细胞还可从人或已用所关注的抗原免疫过的其他合适动物的外周血,或优选脾或淋巴结获得。任何其他合适的宿主细胞也可用于表达编码本发明的抗体、其特定片段或变体的异源或内源核酸。融合细胞(杂交瘤)或重组细胞可使用选择性培养条件或其他合适的已知方法进行分离,并且可通过有限稀释或细胞分选或其他已知方法进行克隆。产生具有所需特异性的抗体的细胞可通过合适的测定法(例如ELISA)进行选择。
可以使用产生或分离具有必需特异性的抗体的其他合适方法,包括但不限于,从以下肽或蛋白质文库选择重组抗体的方法(例如,但不限于,噬菌体、核糖体、寡核苷酸、RNA、cDNA等展示文库;例如,购自Cambridge antibody Technologies,Cambridgeshire,UK;MorphoSys,Martinsreid/Planegg,DE;Biovation,Aberdeen,Scotland,UK;BioInvent,Lund,Sweden;Dyax,Enzon,Affymax/Biosite;Xoma,Berkeley,CA;Ixsys。参见例如EP 368,684、PCT/GB91/01134;PCT/GB92/01755;PCT/GB92/002240;PCT/GB92/00883;PCT/GB93/00605;US 08/350260(5/12/94);PCT/GB94/01422;PCT/GB94/02662;PCT/GB97/01835;(CAT/MRC);WO90/14443;WO90/14424;WO90/14430;PCT/US94/1234;WO92/18619;WO96/07754;(Scripps);WO96/13583、WO97/08320(MorphoSys);WO95/16027(BioInvent);WO88/06630;WO90/3809(Dyax);US 4,704,692(Enzon);PCT/US91/02989(Affymax);WO89/06283;EP 371998;EP 550 400;(Xoma);EP 229 046;PCT/US91/07149(Ixsys);或随机生成的肽或蛋白质一US 5723323、5763192、5814476、5817483、5824514、5976862、WO 86/05803、EP 590689(Ixsys,predecessor of Applied Molecular Evolution(AME),各自以引用的方式全部并入本文))或者依赖于转基因动物的免疫(例如SCID小鼠,Nguyen等人,Microbiol.Immunol.41:901-907(1997);Sandhu等人,Crit.Rev.Biotechnol.16:95-118(1996);Eren等人,Immunol.93:154-161(1998),各自以引用方式以及相关专利和申请全文并入本文)能够产生人类抗体的全部功能,如本领域已知和/或如本文所述。此类技术包括但不限于核糖体展示(Hanes等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,94:4937-4942(1997年5月);Hanes等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,95:14130-14135(1998年11月));单细胞抗体产生技术(例如,选择的淋巴细胞抗体方法(″SLAM″)(美国专利5,627,052,Wen等人,J.Immunol.17:887-892(1987);Babcook等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 93:7843-7848(1996));凝胶微滴和流式细胞术(Powell等人,Biotechnol.8:333-337(1990);One CellSystems,Cambridge,MA;Gray等人,J.Imm.Meth.182:155-163(1995);Kenny等人,Bio/Technol.13:787-790(1995));B细胞选择(Steenbakkers等人,Molec.Biol.Reports 19:125-134(1994);Jonak等人,Progress Biotech,第5卷,In Vitro Immunization inHybridoma Technology,Borrebaeck编辑,Elsevier Science Publishers B.V.,Amsterdam,Netherlands(1988))。
还可使用用于将非人或人抗体进行工程化或人源化的方法,这些方法是本领域所熟知的。一般来讲,人源化或工程化的抗体具有来自非人来源的一个或多个氨基酸残基,所述非人来源例如但不限于小鼠、大鼠、兔、非人灵长类动物或其他哺乳动物。它们一般取自已知人序列的″输入″可变结构域、恒定结构域或其他结构域。这些非人氨基酸残基被通常称为″输入″残基的残基取代,所述残基通常取自公知人序列的″输入″变化、恒定或其他结构域。
已知的人Ig序列是公开的,例如:
www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi;
www.ncbi.nih.gov/igblast;
www.atcc.org/phage/hdb.html;
www.mrc-cpe.cam.ac.uk/ALIGNMENTS.php;
www.kabatdatabase.com/top.html;ftp.ncbi.nih.gov/repository/kabat;
www.sciquest.com;
www.abcam.com;
www.antibodyresource.com/onlinecomp.html;
www.public.iastate.edu/~pedro/research_tools.html;
www.whfreeman.com/immunology/CH05/kuby05.htm;
www.hhmi.org/grants/lectures/1996/vlab;
www.path.cam.ac.uk/~mrc7/mikeimages.html;
www.mcb.harvard.edu/BioLinks/Immunology.html;
www.immunologylink.com;pathbox.wustl.edu/~hcenter/index.html;
www.appliedbiosystems.com;
www.nal.usda.gov/awic/pubs/antibody;
www.m.ehime-u.ac.jp/~yasuhito/Elisa.html;
www.biodesign.com;
www.cancerresearchuk.org;
www.biotech.ufl.edu;
www.isac-net.org;baserv.uci.kun.nl/~jraats/links1.html;
www.recab.uni-hd.de/immuno.bme.nwu.edu;
www.mrc-cpe.cam.ac.uk;
www.ibt.unam.mx/vir/V_mice.html;http://
www.bioinf.org.uk/abs;antibody.bath.ac.uk;
www.unizh.ch;
www.cryst.bbk.ac.uk/~ubcg07s;
www.nimr.mrc.ac.uk/CC/ccaewg/ccaewg.html;
www.path.cam.ac.uk/~mrc7/humanisation/TAHHP.html;
www.ibt.unam.mx/vir/structure/stat_aim.html;
www.biosci.missouri.edu/smithgp/index.html;
www.jerini.de;
Kabat等人,″Sequences of Proteins of Immunological Interest″,U.S.Dept.Health,1983年,各自以引用方式全文并入本文。
此类输入序列可用于降低免疫原性或降低、增强或修饰结合、亲和力、结合率、解离率、亲合力、特异性、半衰期或任何其他合适的特征,如本领域已知的。通常,CDR残基直接且基本上大多数涉及影响抗原结合。因此,保留非人CDR序列或人CDR序列的部分或全部,而可变区和恒定区的非人序列可以用人氨基酸或其他氨基酸替换。
抗体还可以任选地为被设计成被保留对抗原的高亲和力和其他有利的生物学特性的人源化的或人抗体。为了达到这个目标,人源化(或人)抗体还可以任选使用亲本和人源化序列的三维模型通过亲本序列和各种概念上的人源化产物的分析过程进行制备。三维免疫球蛋白模型通常是可用的并且是为本领域的技术人员所熟悉的。举例说明且显示所选候选免疫球蛋白序列的可能三维构象结构的计算机程序是可用的。这些展示的检测使得能分析在候选免疫球蛋白序列的功能发挥中残基的可能作用,即分析影响候选免疫球蛋白与其抗原结合的能力的残基。以这种方式,可以从共有和输入序列中选择和组合框架(FR)残基,从而能实现所需抗体特征,诸如对靶抗原的增加的亲和力。
另外,本发明的方法中使用的人抗IL-12/23p40(或抗IL-23)特异性抗体可包括人类生殖系轻链框架。在具体实施方案中,该轻链生殖系序列选自人VK的序列包括但不限于A1、A10、A11、A14、A17、A18、A19、A2、A20、A23、A26、A27、A3、A30、A5、A7、B2、B3、L1、L10、L11、L12、L14、L15、L16、L18、L19、L2、L20、L22、L23、L24、L25、L4/18a、L5、L6、L8、L9、O1、O11、O12、O14、O18、O2、O4和O8。在某些实施方案中,该轻链人类生殖系框架选自:V1-11、V1-13、V1-16、V1-17、V1-18、V1-19、V1-2、V1-20、V1-22、V1-3、V1-4、V1-5、V1-7、V1-9、V2-1、V2-11、V2-13、V2-14、V2-15、V2-17、V2-19、V2-6、V2-7、V2-8、V3-2、V3-3、V3-4、V4-1、V4-2、V4-3、V4-4、V4-6、V5-1、V5-2、V5-4和V5-6。
在其他实施方案中,本发明的方法中使用的人抗IL-12/23p40(或抗IL-23)特异性抗体可包括人类生殖系重链框架。在具体实施方案中,该重链人类生殖系框架选自VH1-18、VH1-2、VH1-24、VH1-3、VH1-45、VH1-46、VH1-58、VH1-69、VH1-8、VH2-26、VH2-5、VH2-70、VH3-11、VH3-13、VH3-15、VH3-16、VH3-20、VH3-21、VH3-23、VH3-30、VH3-33、VH3-35、VH3-38、VH3-43、VH3-48、VH3-49、VH3-53、VH3-64、VH3-66、VH3-7、VH3-72、VH3-73、VH3-74、VH3-9、VH4-28、VH4-31、VH4-34、VH4-39、VH4-4、VH4-59、VH4-61、VH5-51、VH6-1和VH7-81。
在特定实施方案中,轻链可变区和/或重链可变区包括框架区域或框架区域的至少一部分(例如,包含2个或3个子区域,诸如FR2和FR3)。在某些实施方案中,至少FRL1、FRL2、FRL3或FRL4为完全人类的。在其他实施方案中,至少FRH1、FRH2、FRH3或FRH4为完全人类的。在一些实施方案中,至少FRL1、FRL2、FRL3或FRL4为生殖系序列(例如,人类生殖系)或包含特定框架的人类共有序列(可容易地在上述公知人Ig序列的来源处获得)。在其他实施方案中,至少FRH1、FRH2、FRH3或FRH4为生殖系序列(例如,人类生殖系)或包含特定框架的人类共有序列。在优选实施方案中,该框架区为一个完全的人类框架区。
本发明抗体的人源化或工程化可使用任何已知方法执行,诸如但不限于以下中所描述的那些,Winter(Jones等人,Nature 321:522(1986);Riechmann等人,Nature 332:323(1988);Verhoeyen等人,Science 239:1534(1988);Sims等人,J.Immunol.151:2296(1993);Chothia和Lesk,J.Mol.Biol.196:901(1987);Carter等人,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.89:4285(1992);Presta等人,J.Immunol.151:2623(1993),美国专利:5723323、5976862、5824514、5817483、5814476、5763192、5723323、5,766886、5714352、6204023、6180370、5693762、5530101、5585089、5225539、4816567、PCT/US98/16280、US96/18978、US91/09630、US91/05939、US94/01234、GB89/01334、GB9I/01134、GB92/01755、WO90/14443、WO90/14424、WO90/14430、EP 229246,各自以引用方式全文并入本文,包括其中引用的参考文献。
在某些实施方案中,抗体包含改变的(例如,突变的)Fc区。例如,在一些实施方案中,已经改变Fc区以降低或增强抗体的效应功能。在一些实施方案中,Fc区为选自IgM、IgA、IgG、IgE的同型或其他同型。另选地或除此之外,将氨基酸修饰与改变IL-23结合分子的Fc区的C1q结合和/或补体依赖性细胞毒性功能的一个或多个其他氨基酸修饰组合可能是有用的。特定目的起始多肽可以为结合至C1q并且显示补体依赖性细胞毒性(CDC)的多肽。可以修饰具有预先存在的C1q结合活性、任选地还具有介导CDC的能力的多肽,使得这些活性中的一者或两者得到增强。改变C1q和/或修饰其补体依赖性细胞毒性功能的氨基酸修饰描述于例如WO0042072中,其通过引用方式并入本文。
如上所述,可以设计具有改变的效应功能的本发明的人抗IL-12/23p40(或抗IL-23)特异性抗体的Fc区,例如通过修饰C1q结合和/或FcγR结合,从而改变补体依赖性细胞毒性(CDC))活性和/或抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)活性。″效应功能″负责激活或减少生物活性(例如,在受试者中)。效应功能的示例包括但不限于:C1q结合、CDC、Fc受体结合、ADCC、吞噬作用、细胞表面受体的向下调节(例如,B细胞受体;BCR)等。此类效应功能可能需要Fc区与结合结构域(例如,抗体可变结构域)组合,并且可以使用各种测定法(例如,Fc结合测定法、ADCC测定法、CDC测定法等)进行评估。
例如,人们可以产生人抗IL-12/23p40(或抗IL-23)抗体的变体Fc区,其具有改善的C1q结合和改善的FcγRIII结合(例如,具有改善的ADCC活性和改善的CDC活性两者)。任选地,如果期望降低或消除效应功能,可以设计具有降低的CDC活性和/或降低的ADCC活性的变体Fc区。在其他实施方案中,仅这些活性中的一者可以增加,并且任选地,还可以减少其他活性(例如,以产生具有改善的ADCC活性但降低的CDC活性(反之亦然)的Fc区变体)。
还可以在设计中引入Fc突变以改变它们与新生Fc受体(FcRn)的相互作用并且改善它们的药动学特性。已经描述了具有改善的与FcRn结合的人Fc变体的集合(Shields等人,2001)。还描述了人IgG1上FcγRI、FcγRII、FcγRIII和FcRn的结合位点的高分辨率定位和具有改善的与FcγR的结合的IgG1变体的设计(J.Biol.Chem.276:6591-6604)。
另一种类型的氨基酸置换用于改变人抗IL-12/23p40(或抗IL-23)特异性抗体的Fc区的糖基化模式。Fc区的糖基化通常为N-连接的或O-连接的。N-连接是指碳水化合物部分连接到天冬酰胺残基的侧链。O-连接的糖基化是指糖N-乙酰半乳糖胺、半乳糖或木糖中的一种连接到羟基氨基酸,最常见的为丝氨酸或苏氨酸,但是也可以使用5-羟基脯氨酸或5-羟基赖氨酸。用于将碳水化合物部分酶促连接到天冬酰胺侧链肽序列的识别序列为天冬酰胺-X-丝氨酸和天冬酰胺-X-苏氨酸,其中X为除脯氨酸外的任何氨基酸。因此,多肽中这些肽序列中任一个的存在产生了潜在的糖基化位点。
可以改变糖基化模式,例如,通过缺失多肽中发现的一个或多个糖基化位点,以及/或者添加多肽中不存在的一个或多个糖基化位点。向人IL-23特异性抗体的Fc区添加糖基化位点可方便地通过改变氨基酸序列以使其含有一个或多个上述三肽序列来实现(对于N-连接的糖基化位点)。示例性糖基化变体具有重链残基Asn 297的氨基酸取代。也可以通过将一个或多个丝氨酸残基或苏氨酸残基添加或置换到原始多肽的序列来进行改变(对于O-连接的糖基化位点)。另外,可以去除一个糖基化位点将Asn 297改变为Ala。
在某些实施方案中,本发明的人抗IL-12/23p40(或抗IL-23)特异性抗体在表达β(1,4)-N-乙酰基葡糖胺转移酶III(GnT III)的细胞中表达,使得GnT III将GlcNAc添加到人抗IL-12/23p40(或抗IL-23)抗体中。以这种方式产生抗体的方法提供于WO/9954342、WO/03011878、专利公开20030003097A1和Umana等人,Nature Biotechnology,第17卷,第176-180页,1999年2月;所有这些的全文以引用方式并入本文中。
如本文所述和/或本领域公知的,还可以通过对能产生全套人抗体的转基因动物(如小鼠、大鼠、仓鼠、非人灵长类动物等)进行免疫来任选地产生人抗IL-12/23p40(或抗IL-23)抗体。可使用合适的方法,例如本文描述的方法,从这些动物分离产生人抗IL-12/23p40(或抗IL-23)抗体的细胞,并使其无限增殖化。
可以产生与人抗原结合的全套人抗体的转基因小鼠可以通过已知方法产生(例如但不限于美国专利号:5,770,428、5,569,825、5,545,806、5,625,126、5,625,825、5,633,425、5,661,016和5,789,650,授予Lonberg等人;Jakobovits等人,WO 98/50433,Jakobovits等人,WO 98/24893,Lonberg等人,WO 98/24884,Lonberg等人,WO 97/13852,Lonberg等人,WO 94/25585,Kucherlapate等人,WO 96/34096,Kucherlapate等人,EP 0463151 B1,Kucherlapate等人,EP 0710 719 A1,Surani等人,美国专利5,545,807,Bruggemann等人,WO 90/04036,Bruggemann等人,EP 0438 474 B1,Lonberg等人,EP 0814259 A2,Lonberg等人,GB 2 272 440 A,Lonberg等人,Nature 368:856-859(1994),Taylor等人,Int.Immunol.6(4)579-591(1994),Green等人,Nature Genetics 7:13-21(1994),Mendez等人,Nature Genetics 15:146-156(1997),Taylor等人,Nucleic Acids Research20(23):6287-6295(1992),Tuaillon等人,Proc Natl Acad Sci USA 90(8)3720-3724(1993),Lonberg等人,Int Rev Immunol 13(1):65-93(1995)和Fishwald等人,NatBiotechnol 14(7):845-851(1996),其各自以引用方式全文并入本文)。一般来讲,这些小鼠包含至少一种包含来自至少一个发生了功能性重排或可经历功能性重排的人免疫球蛋白基因座的DNA的转基因。此类小鼠中的内源免疫球蛋白基因座可以被破坏或缺失,以消除动物产生由内源基因编码的抗体的能力。
可使用肽展示文库方便地实现对与相似蛋白质或片段特异性结合的抗体的筛选。这个方法涉及从一大批肽中筛选具有期望的功能或结构的个体成员。肽展示文库的抗体筛选为本领域公知的。所展示的肽序列的长度可以为3至5000个或更多个氨基酸,常常长为5-100个氨基酸,通常长为约8至25个氨基酸。除了用于产生肽文库的直接化学合成方法之外,有几种重组DNA方法也已得到描述。一种类型涉及在噬菌体或细胞表面上展示肽序列。每个噬菌体或细胞均含有编码具体展示的肽序列的核苷酸序列。这类方法描述于PCT专利公布91/17271、91/18980、91/19818和93/08278。
用于产生肽文库的其他系统同时具有体外化学合成方法和重组方法的各方面。参见PCT专利公布92/05258、92/14843和96/19256。还可参见美国专利5,658,754;和5,643,768。肽展示文库、载体和筛选试剂盒可从诸如Invitrogen(Carlsbad,CA)和Cambridgeantibody Technologies(Cambridgeshire,UK)的供应商商购获得。参见例如美国专利4704692、4939666、4946778、5260203、5455030、5518889、5534621、5656730、5763733、5767260、5856456,转让给Enzon;5223409、5403484、5571698、5837500,转让给Dyax,5427908、5580717,转让给Affymax;5885793,转让给Cambridge antibody Technologies;5750373,转让给Genentech,5618920、5595898、5576195、5698435、5693493、5698417,转让给Xoma,Colligan,出处同上;Ausubel,出处同上;或Sambrook,出处同上,以上专利和出版物中的每一者以引用方式全文并入本文。
使用至少一种抗IL-12/23p40(或抗IL-23)抗体编码核酸来提供转基因动物或哺乳动物,诸如山羊、奶牛、马、绵羊、兔子等,也可以制备本发明的方法中使用的抗体,所述转基因动物或哺乳动物能够在它们的奶中产生此类抗体。此类动物可使用已知的方法提供。参见例如但不限于美国专利5,827,690、5,849,992、4,873,316、5,849,992、5,994,616、5,565,362、5,304,489等,这些专利中的每一篇以引用方式全文并入本文。
使用至少一种抗IL-12/23p40(或抗IL-23)抗体编码核酸来提供转基因植物和培养的植物细胞(例如但不限于烟草和玉米),也可以制备本发明的方法中使用的抗体,所述转基因植物和培养的植物细胞在其植物部分或从植物部分培养得到的细胞中产生这种抗体、其特定部分或变体。作为非限制性示例,表达重组蛋白质的转基因烟草叶已成功地用于提供大量重组蛋白质,例如使用诱导型启动子。参见,例如Cramer等人,Curr.Top.Microbol.Immunol.240:95-118(1999),以及其中引用的参考文献。同样,转基因玉米也已用于以商业生产规模表达哺乳动物蛋白质,其生物活性等同于在其他重组系统中生产或从天然来源纯化的那些哺乳动物蛋白质。参见,例如Hood等人,Adv.Exp.Med.Biol.464:127-147(1999),以及其中引用的参考文献。也可由转基因植物种子(包括烟草种子和马铃薯块茎)大量生产抗体,包括抗体片段,诸如单链抗体(scFv)。参见,例如Conrad等人,Plant Mol.Biol.38:101-109(1998),以及其中引用的参考文献。因此,本发明的抗体还可使用转基因植物根据公知方法进行生产。还可参见,例如Fischer等人,Biotechnol.Appl.Biochem.30:99-108(Oct.,1999);Ma等人,Trends Biotechnol.13:522-7(1995);Ma等人,Plant Physiol.109:341-6(1995);Whitelam等人,Biochem.Soc.Trans.22:940-944(1994);以及其中引用的参考文献。以上参考文献中的每一篇以引用方式全文并入本文。
本发明的方法中使用的抗体可以宽泛的亲和力(KD)结合人IL-12/IL-23p40或IL-23。在一个优选的实施方案中,人mAb可任选地以高亲和力结合人IL-12/IL-23p40或IL-23。例如,人mAb可以等于或小于约10-7M(诸如但不限于0.1-9.9(或者其中的任何范围或值)×10-7、10-8、10-9、10-10、10-11、10-12、10-13或者其中的任何范围或值)的KD结合人IL-12/IL-23p40或IL-23。
抗体对抗原的亲和力或亲合力可以使用任何合适的方法通过实验确定。(参见例如Berzofsky等人,″Antibody-Antigen Interactions″,Fundamental Immunology,Paul,W.E编辑,Raven Press:New York,NY(1984);Kuby,Janis Immunology,W.H.Freeman andCompany:New York,NY(1992);以及本文所述的方法)。如果在不同的条件(例如,盐浓度、pH)下测量,则测得的特定抗体-抗原相互作用的亲和力会不同。因此,亲和力和其他抗原结合参数(例如KD、Ka、Kd)的测量优选地用抗体和抗原的标准溶液以及标准缓冲液(诸如本文所述的缓冲液)来进行。
核酸分子
使用本文提供的信息,例如,编码本文所述的轻链或重链可变区或CDR区中的至少一者的连续氨基酸的至少70%至100%的核苷酸序列,以及本文所公开的其他序列,其指定的片段、变体或共有序列,或者包含这些序列中的至少一者的保藏载体,编码至少一种IL-12/IL-23p40或IL-23抗体的本发明的核酸分子可以使用本文所述或如本领域中已知的方法获得。
本发明的核酸分子可以是RNA的形式,诸如mRNA、hnRNA、tRNA或任何其他形式,或者为DNA的形式,包括但不限于,通过克隆或合成产生的cDNA和基因组DNA,或它们的任何组合。DNA可以为三链的、双链的或单链的或它们的任何组合。DNA或RNA的至少一条链的任何部分可以是编码链,也称为有义链,或其可以是非编码链,也称作反义链。
本发明的方法中使用的分离的核酸分子可以包括下述核酸分子:包含开放阅读框(ORF)的核酸分子,该ORF任选地具有一个或多个内含子,例如但不限于,至少一个CDR的至少一个指定部分,诸如至少一条重链或轻链的CDR1、CDR2和/或CDR3;包含抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体或可变区的编码序列的核酸分子;以及包含与上述那些显著不同的核苷酸序列,但由于遗传密码的简并性,仍然编码至少一种如本文所述和/或如本领域中已知的抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体的核酸分子。当然,遗传密码是本领域熟知的。因此,对于本领域技术人员而言,将按常规产生编码本发明的方法中使用的抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体的此类简并核酸变体。参见,例如Ausubel等人,出处同上,并且此类核酸变体包括在本发明中。分离的核酸分子的非限制性示例包括分别编码HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3、LCCDR1、LC CDR2和LC CDR3的核酸。
如本文所指出的,包含编码抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体的核酸的核酸分子可以包括但不限于:单独编码抗体片段的氨基酸序列的那些;整个抗体或其部分的编码序列;抗体、片段或部分的编码序列,以及附加序列,诸如具有或不具有前述附加编码序列的至少一种信号前导肽或融合肽的编码序列,诸如至少一个内含子,连同附加的非编码序列,包括但不限于非编码5’序列和3’序列,诸如在转录、mRNA加工(包括剪接和聚腺苷化信号(例如mRNA的核糖体结合和稳定))中发挥作用的转录的非翻译序列;编码附加氨基酸,诸如提供附加功能的那些氨基酸的附加编码序列。因此,编码抗体的序列可以与标记序列诸如编码肽的序列融合,所述肽可促进包含抗体片段或部分的融合抗体纯化。
与如本文所述的多核苷酸选择性杂交的多核苷酸
本发明的方法使用在选择性杂交条件下与本文所公开的多核苷酸杂交的分离的核酸。因此,本实施方案的多核苷酸可用于分离、检测和/或定量包含此类多核苷酸的核酸。例如,本发明的多核苷酸可用于鉴定、分离或扩增寄存文库中的部分或全长克隆。在一些实施方案中,多核苷酸是分离的基因组序列或cDNA序列,或与来自人或哺乳动物核酸文库的cDNA互补。
优选地,cDNA文库包含至少80%的全长序列,优选地至少85%或90%的全长序列,并且更优选地至少95%的全长序列。cDNA文库可以进行标准化以增加罕见序列的表现。低或中等严格杂交条件一般但不是唯一地用于相对于互补序列具有减少的序列同一性的序列。中等和高严格条件可以任选地用于同一性更大的序列。低严格条件允许具有约70%序列同一性的序列进行选择性杂交,并且可用于鉴定直系同源或旁系同源序列。
任选地,多核苷酸将编码抗体的至少一部分。所述多核苷酸包含可以用于与编码本发明抗体的多核苷酸选择性杂交的核酸序列。参见例如Ausubel(出处同上);Colligan(出处同上),各自以引用方式全文并入本文。
核酸的构建
可以使用如本领域中众所周知的(a)重组方法、(b)合成技术、(c)纯化技术和/或(d)它们的组合来制备分离的核酸。
所述核酸可方便地包含除了本发明的多核苷酸之外的序列。例如,可以将包含一个或多个内切核酸酶限制位点的多克隆位点插入核酸中以帮助该多核苷酸的分离。此外,可以插入可翻译序列以帮助分离翻译出的本发明多核苷酸。例如,六组氨酸标记序列为纯化本发明的蛋白质提供了便利手段。本发明的核酸(编码序列除外)任选地为用于克隆和/或表达本发明的多核苷酸的载体、衔接子或接头。
可将附加序列添加此类克隆和/或表达序列来优化它们在克隆和/或表达中的功能,以帮助分离所述多核苷酸,或改善该多核苷酸向细胞中的导入。克隆载体、表达载体、衔接子和接头的使用是本领域熟知的。(参见例如Ausubel,出处同上;或Sambrook,出处同上)
用于构建核酸的重组方法
所述分离的核酸组合物(诸如RNA、cDNA、基因组DNA或它们的任何组合)可以使用本领域技术人员已知的多种克隆方法从生物学来源获得。在一些实施方案中,将在严格条件下与本发明多核苷酸选择性杂交的寡核苷酸探针用于在cDNA或基因组DNA文库中鉴定所需序列。RNA的分离,以及cDNA和基因组文库的构建是本领域的普通技术人员众所周知的。(参见例如Ausubel,出处同上;或Sambrook,出处同上)
核酸筛选和分离方法
cDNA或基因组文库可以使用基于本发明的方法中使用的多核苷酸(诸如本文所公开的那些)的序列的探针进行筛选。探针可用于与基因组DNA或cDNA序列杂交以分离相同或不同生物体中的同源基因。本领域的技术人员将会知道,在测定中可以采用各种严格性程度的杂交;并且杂交或洗涤介质可以是严格的。随着用于杂交的条件变得更严格,在探针和靶之间必须存在更高程度的互补性才能使双链体形成得以发生。严格性的程度可以由温度、离子强度、pH和部分变性溶剂(诸如甲酰胺)的存在中的一者或多者来控制。例如,通过例如在0%至50%的范围内操纵甲酰胺的浓度使反应物溶液的极性变化,从而方便地改变杂交的严格性。对于可检测结合所需的互补性程度(序列同一性)将根据杂交介质和/或洗涤介质的严格性而变化。互补性程度将最佳为100%或70%-100%或其中的任何范围或值。然而应当理解,探针和引物中较小的序列变异可以通过减少杂交和/或洗涤介质的严格性进行补偿。
扩增RNA或DNA的方法是本领域熟知的,并且基于本文呈现的教导和指导,无需过度实验即可根据本发明使用。
已知的DNA或RNA扩增方法包括但不限于聚合酶链反应(PCR)和相关的扩增方法(参见例如授予Mullis等人的美国专利4,683,195、4,683,202、4,800,159、4,965,188;授予Tabor等人的4,795,699和4,921,794;授予Innis的5,142,033;授予Wilson等人的5,122,464;授予Innis的5,091,310;授予Gyllensten等人的5,066,584;授予Gelfand等人的4,889,818;授予Silver等人的4,994,370;授予Biswas的4,766,067;授予Ringold的4,656,134)以及使用靶序列的反义RNA作为双链DNA合成模板的RNA介导的扩增(授予Malek等人的美国专利号5,130,238,其商品名为NASBA),这些参考文献的全部内容以引用方式并入本文。(参见例如Ausubel,出处同上;或Sambrook,出处同上。)
例如,可以使用聚合酶链反应(PCR)技术直接从基因组DNA或cDNA文库扩增本发明的方法中使用的多核苷酸和相关基因的序列。例如PCR和其他体外扩增方法也可用于克隆编码待表达的蛋白质的核酸序列、制备核酸以用作探针来检测样品中所需mRNA的存在,用于核酸测序,或用于其他目的。足以在整个体外扩增方法中指导技术人员的技术的示例可见于Berger(出处同上)、Sambrook(出处同上)和Ausubel(出处同上),以及Mullis等人的美国专利4,683,202(1987);以及Innis等人,PCR Protocols A Guide to Methods andApplications,Eds.,Academic Press Inc.,San Diego,CA(1990)。用于基因组PCR扩增的可商购获得的试剂盒是本领域已知的。参见例如,Advantage-GC Genomic PCR Kit(Clontech)。此外,例如,T4基因32蛋白质(Boehringer Mannheim)可用于提高长PCR产物的得率。
用于构建核酸的合成方法
本发明的方法中使用的分离的核酸还可以通过已知方法,通过直接化学合成进行制备(参见例如Ausubel等人,出处同上)。化学合成一般会产生单链寡核苷酸,其可以通过与互补序列杂交,或通过使用该单链作为模板用DNA聚合酶进行聚合而转变成双链DNA。本领域技术人员将认识到,虽然DNA的化学合成可能限制于约100个或更多个碱基的序列,但较长的序列可以通过连接较短序列来获得。
重组表达盒
本发明使用包含核酸的重组表达盒。核酸序列,例如编码本发明的方法中使用的抗体的cDNA或基因组序列,可用于构建可导入到至少一种所需宿主细胞中的重组表达盒。重组表达盒通常会包含与转录起始调节序列可操作地连接的多核苷酸,所述转录起始调节序列会引导所述多核苷酸在预定的宿主细胞中的转录。异源和非异源(即内源)启动子两者均可用于引导核酸的表达。
在一些实施方案中,可在非异源形式的本发明多核苷酸的适当位置(上游、下游或内含子中)引入作为启动子、增强子或其他元件的分离核酸,以便上调或下调多核苷酸的表达。例如,可通过突变、缺失和/或置换在体内或体外改变内源启动子。
载体和宿主细胞
本发明还涉及包含分离的核酸分子的载体、用重组载体进行遗传工程改造的宿主细胞以及通过本领域熟知的重组技术制备至少一种抗IL-23抗体。参见例如Sambrook等人(出处同上);Ausubel等人(出处同上),各自全文以引用方式并入本文。
可将所述多核苷酸任选地与包括可选择标记的载体连接,以在宿主中增殖。一般来讲,质粒载体在沉淀物诸如磷酸钙沉淀物中,或在与带电脂质的复合物中被导入。如果载体是病毒,那么它可以使用适当的包装细胞系在体外进行包装并且然后转导进宿主细胞内。
应将DNA插入物与适当的启动子可操作地连接。表达构建体还会含有转录起始位点、终止位点以及在转录区中含有用于翻译的核糖体结合位点。该构建体表达的成熟转录物的编码部分将优选地包括在待翻译的mRNA开始处的翻译起始和在该mRNA末端适当位置的终止密码子(例如,UAA、UGA或UAG),对于哺乳动物或真核细胞表达优选UAA和UAG。
表达载体将优选但任选地包括至少一个可选择标记。此类标记物包括例如但不限于:对于真核细胞培养物,为甲氨喋呤(MTX)、二氢叶酸还原酶(DHFR,美国专利4,399,216;4,634,665;4,656,134;4,956,288;5,149,636;5,179,017)、氨苄青霉素、新霉素(G418)、霉酚酸或谷氨酰胺合成酶(GS)(美国专利5,122,464;5,770,359;5,827,739)抗性基因;以及对于在大肠杆菌(E.coli)和其他细菌或原核生物中的培养,为四环素或氨苄青霉素抗性基因(以上专利据此全文以引用方式并入)。用于上述宿主细胞的适当的培养基和条件是本领域已知的。合适的载体对于技术人员来说将是显而易见的。载体构建体导入宿主细胞可受到磷酸钙转染、DEAE-葡聚糖介导的转染、阳离子脂质介导的转染、电穿孔、转导、感染或其他已知方法的影响。此类方法已在本领域中有所描述,诸如Sambrook(出处同上),第1-4章和第16-18章;Ausubel(出处同上),第1、9、13、15、16章。
本发明的方法中使用的至少一种抗体可以修饰形式(诸如融合蛋白质)表达,并且可不仅包括分泌信号,而且还可包括附加异源功能区。例如,可将附加氨基酸(尤其是带电氨基酸)的区域添加至抗体的N-端,以改善纯化期间或随后的处理和储存期间在宿主细胞中的稳定性和持久性。同样,可将肽部分添加至本发明的抗体以帮助纯化。此类区域可在抗体或其至少一个片段的最终制备前去除。此类方法在许多标准实验室手册中有所描述,诸如Sambrook(出处同上),第17.29-17.42章和第18.1-18.74章;Ausubel(出处同上),第16、17和18章。
本领域技术人员可认识到许多表达系统可用于表达编码本发明的方法中使用的蛋白质的核酸。另选地,核酸可在含有编码抗体的内源DNA的宿主细胞中通过开启(通过操纵)而在宿主细胞中表达。此类方法是本领域熟知的,例如,如美国专利5,580,734、5,641,670、5,733,746和5,733,761(这些专利以引用方式全文并入本文)中所述。
可用于产生抗体、其特定部分或变体的细胞包括哺乳动物细胞。哺乳动物细胞系统通常将以细胞单层的形式培养,但细胞也可适于在悬浮液中生长,例如在摇瓶或生物反应器中生长。在本领域中已经开发了许多能够表达完整糖基化蛋白质的合适宿主细胞系,并且该宿主细胞系包括例如COS-1(例如,CRL1650)、COS-7(例如,CRL-1651)、HEK293、BHK21(例如,CCL-10)、BSC-1(例如,CCL-26)、中国仓鼠卵巢(CHO)、Hep G2、P3X63Ag8.653、Sp2/0-Ag14、HeLa等,它们可容易地从例如美国典型培养物保藏中心(Manassas,Va(www.atcc.org))获得。在某些实施方案中,宿主细胞包括CHO细胞和淋巴来源的细胞,诸如骨髓瘤和淋巴瘤细胞,例如CHO-K1细胞、P3X63Ag8.653细胞(CRL-1580)和Sp2/0-Ag14细胞(CRL-1581)。
这些细胞的表达载体可包括以下的表达控制序列中的一者或多者,诸如但不限于:复制起点;启动子(例如,晚期或早期SV40启动子、CMV启动子(美国专利5,168,062;5,385,839)、HSV tk启动子、pgk(磷酸甘油酸激酶)启动子、EF-1α启动子(美国专利5,266,491)、至少一种人免疫球蛋白启动子;增强子和/或加工信息位点诸如核糖体结合位点、RNA剪接位点、聚腺苷酸化位点(例如SV40大T Ag聚A添加位点)和转录终止子序列。参见例如Ausubel等人(出处同上);Sambrook等人(出处同上)。可用于产生本发明的核酸或蛋白质的其他细胞也是已知的和/或可例如从美国典型培养物保藏中心细胞系和杂交瘤目录(www.atcc.org)或其他已知的来源或商业来源得到。
当使用真核宿主细胞时,通常会将多腺苷酸化或转录终止序列并入载体内。终止序列的示例是来自牛生长激素基因的多腺苷酸化序列。还可包括用于准确剪接转录物的序列。剪接序列的示例是来自SV40的VP1内含子(Sprague等人,J.Virol.45:773-781(1983))。此外,如本领域已知,可将控制在宿主细胞中的复制的基因序列并入载体内。
CHO细胞系
尽管有若干种其他哺乳动物细胞系可用,但如今产生的大多数重组治疗蛋白质都在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中制备(Jayapal KP等人,Recombinant protein therapeuticsfrom CHO cells-20years and counting.Chem Eng Prog.2007;103:40-47;Kunert R、Reinhart D.,Advances in recombinant antibody manufacturing.Appl MicrobiolBiotechnol.2016;100(8):3451-61)。它们的优势包括例如作为贴壁细胞或在悬浮液中的稳健生长、对无血清和化学成分确定的培养基的适应性、高产率以及确立的对于治疗重组蛋白制备的监管批准史。它们还非常易于进行基因修饰,并且用于细胞转染、重组蛋白表达和克隆选择的方法都得到很好的表征。CHO细胞还可提供人相容的翻译后修饰。如本文所用,″CHO细胞″包括但不限于例如CHO-DG44、CHO-Kl、CHO-M、CHO-S、CHO GS敲除以及它们的修饰和衍生物。
在CHO细胞中的克隆和表达。
一种常用于在CHO细胞中表达的载体是pC4。质粒pC4是质粒pSV2-dhfr(37146)的衍生物。该质粒含有在SV40早期启动子控制下的小鼠DHFR基因。用这些质粒转染的缺乏二氢叶酸活性的中国仓鼠卵巢细胞或其他细胞,可通过使细胞在补充有化学治疗剂甲氨蝶呤的选择培养基(例如lpha minus MEM,Life Technologies,Gaithersburg,MD)中生长进行选择。DHFR基因在对甲氨蝶呤(MTX)具有抗性的细胞中的扩增已得到充分记载(参见例如F.W.Alt等人,J.Biol.Chem.253:1357-1370(1978);J.LHamlin和C.Ma,Biochem.etBiophys.Acta 1097:107-143(1990);以及M.J.Page和M.A.Sydenham,Biotechnology 9:64-68(1991))。在浓度渐增的MTX中生长的细胞由于DHFR基因扩增造成超量产生靶酶DHFR而发展出对药物的抗性。如果第二基因与DHFR基因连接,那么它通常被共扩增和过表达。本领域已知的是,该方法可用于开发携带超过1,000个拷贝的扩增基因的细胞系。随后,当甲氨蝶呤被取出时,获得含有整合进宿主细胞的一个或多个染色体内的扩增基因的细胞系。
为了表达感兴趣的基因,质粒pC4含有Rous肉瘤病毒长末端重复序列(LTR)的强启动子(Cullen等人,Molec.Cell.Biol.5:438-447(1985))和从人巨细胞病毒(CMV)即刻早期基因的增强子分离的片段(Boshart等人,Cell 41:521-530(1985))。启动子的下游是允许基因整合的BamHI、XbaI和Asp718限制性内切酶切割位点。在这些克隆位点之后,该质粒含有大鼠前胰岛素原基因的3′内含子和多腺苷酸化位点。其他高效率的启动子也可以用于表达,例如人β-肌动蛋白启动子、SV40早期或晚期启动子或来自其他逆转录病毒例如HIV和HTLVI的长末端重复序列。Clontech的Tet-Off和Tet-On基因表达系统和类似系统也可以用于在哺乳动物细胞中以受调控的方式表达蛋白质(M.Gossen和H.Bujard,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89:5547-5551(1992))。对于mRNA的多腺苷酸化,也可以使用例如来自人生长激素或珠蛋白基因的其他信号。携带整合进染色体中的感兴趣的基因的稳定细胞系也可以在与选择标记诸如gpt、G418或潮霉素共转染时进行选择。有利的是在开始时使用不止一种选择标记,例如,G418加上甲氨蝶呤。
抗体的纯化
抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体可通过公知的方法从重组细胞培养物中回收和纯化,该方法包括但不限于蛋白质A纯化、硫酸铵或乙醇沉淀、酸提取、阴离子或阳离子交换色谱、磷酸纤维素色谱、疏水相互作用色谱、亲和色谱、羟基磷灰石色谱和凝集素色谱。高效液相色谱(″HPLC″)也可以用于纯化。参见,例如Colligan,Current Protocols inImmunology或Current Protocols in Protein Science,John Wiley&Sons,NY,NY,(1997-2001),例如第1、4、6、8、9、10章,各自以引用方式全文并入本文。
本发明的方法中使用的抗体包括天然纯化的产物、化学合成操作的产物和通过重组技术从真核宿主产生的产物,所述真核宿主包括例如酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞。根据重组生产方法中所采用的宿主,抗体可以为糖基化的或可以为非糖基化的,糖基化的为优选的。此类方法在许多标准实验室手册中有所描述,诸如Sambrook,出处同上,第17.37-17.42部分;Ausubel,出处同上,第10、12、13、16、18和20章,Colligan,ProteinScience,出处同上,第12-14章,所有均以引用方式全文并入本文。
抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体
根据本发明的抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体包括含有免疫球蛋白分子的至少一部分的任何含蛋白质或肽的分子,所述至少一部分可以结合到抗体中,诸如但不限于至少一个配体结合部分(LBP),诸如但不限于重链或轻链的互补决定区(CDR)或其配体结合部分、重链或轻链可变区、框架区(例如,FR1、FR2、FR3、FR4或其片段,还任选地包含至少一个置换、插入或缺失)、重链或轻链恒定区(例如,包含至少一个CH1、铰链1、铰链2、铰链3、铰链4、CH2或CH3或其片段,还任选地包含至少一个置换、插入或缺失),或其任何部分。抗体可包括或来源于任何哺乳动物,诸如但不限于人、小鼠、兔、大鼠、啮齿类动物、灵长类动物或它们的任何组合等。
本发明的方法中使用的分离的抗体包含本文所公开的由任何合适的多核苷酸编码的抗体氨基酸序列,或者任何分离的或制备的抗体。优选地,人抗体或抗原结合片段结合人IL-12/IL-23p40或IL-23,从而部分或基本上中和该蛋白质的至少一种生物学活性。部分或优选基本上中和至少一种IL-12/IL-23p40或IL-23蛋白或片段的至少一种生物学活性的抗体或其特定部分或变体可结合该蛋白质或片段,从而抑制通过IL-12/IL-23p40或IL-23与IL-12和/或IL-23受体的结合或通过其他IL-12/IL-23p40或IL-23依赖性的或介导的机制所介导的活性。本文所用的术语″中和抗体″指取决于测定法,可以使IL-12/IL-23p40或IL-23依赖性活性被抑制约20-120%的抗体,优选至少约10、20、30、40、50、55、60、65、70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100%或更多。抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体抑制IL-12/IL-23p40或IL-23依赖性活性的能力,优选通过至少一种本文所述的和/或本领域公知的合适的IL-12/IL-23p40或IL-23蛋白或受体测定法来进行评估。人抗体可以为任何类型(IgG、IgA、IgM、IgE、IgD等)或同种型,并且可包含K或λ轻链。在一个实施方案中,人抗体包含IgG重链或限定的片段,例如,同种型IgG1、IgG2、IgG3或IgG4中的至少一者(例如,γ1、γ2、γ3、γ4)。这种类型的抗体可以如本文所述的和/或如本领域公知的通过使用转基因小鼠或其他转基因非人哺乳动物来制备,所述动物包含至少一种人轻链(例如IgG、IgA和IgM)转基因。在另一个实施方案中,抗IL-23人抗体包含IgG1重链和IgG1轻链。
抗体结合至少一种特定表位,该表位对至少一种IL-12/IL-23p40或IL-23蛋白、亚基、片段、部分或它们的任何组合为特异性的。该至少一个表位可包含至少一个抗体结合区,该抗体结合区包含蛋白质的至少一部分,该表位优选地由蛋白质的至少一个细胞外的、可溶性的、亲水的、外部的或胞质的部分构成。
一般来讲,人抗体或抗原结合片段将包含这样的抗原结合区,该抗原结合区包含至少一个人互补决定区(CDR1、CDR2和CDR3)或至少一个重链可变区的变体以及至少一个人互补决定区(CDR1、CDR2和CDR3)或至少一个轻链可变区的变体。CDR序列可以来源于人类生殖系序列或与这些生殖系序列紧密匹配。例如,可使用来源于原始非人类CDRs的合成文库的CDRs。这些CDR可以通过掺入来自原始非人序列的保守置换而形成。在另一具体实施方案中,抗体或抗原结合部分或变体可以具有抗原结合区,所述抗原结合区包含具有相应CDR1、CDR2和/或CDR3的氨基酸序列的至少一个轻链CDR(即CDR1、CDR2和/或CDR3)的至少一部分。
此类抗体可通过以下方法制备:使用常规技术将抗体的各个部分(例如CDR、框架)化学连接在一起,使用重组DNA技术的常规技术或通过使用任何其他合适的方法制备并表达编码该抗体的(即一种或多种)核酸分子。
抗IL-12/IL-23p40或抗IL-23特异性抗体可包含具有确定氨基酸序列的重链或轻链可变区中的至少一者。例如,在一个优选的实施方案中,抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体包括具有包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列的重链可变区和包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的轻链可变区的抗IL-12/IL-23p40抗体。抗IL-12/IL-23p40或抗IL-23特异性抗体还可包含具有确定氨基酸序列的重链或轻链中的至少一者。在另一个优选的实施方案中,抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体包括具有包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的重链和包含SEQ IDNO:11的氨基酸序列的轻链的抗IL-12/IL-23p40抗体。与人IL-12/IL-23p40或IL-23结合并且包含限定的重链或轻链可变区的抗体可以如本领域已知和/或如本文所述的合适方法诸如噬菌体展示(Katsube,Y.等人,Int J Mol.Med,1(5):863-868(1998))或采用转基因动物的方法来制备。例如,可以用人IL-12/IL-23p40或IL-23或其片段,对包含功能性重排的人免疫球蛋白重链转基因和包含来自可经历功能性重排的人免疫球蛋白轻链基因座的DNA的转基因的转基因小鼠进行免疫,以引发抗体的产生。如果需要,可以对产生抗体的细胞进行分离,并且可以如本文所述和/或如本领域已知制备杂交瘤或其他无限增殖化的产生抗体的细胞。另选地,可以使用编码核酸或其部分在合适的宿主细胞中表达抗体、特定部分或变体。
本发明还涉及其包含的氨基酸序列基本上与本文所述的氨基酸序列相同的抗体、抗原结合片段、免疫球蛋白链和CDR。优选地,此类抗体或抗原结合片段和包含此类链或CDR的抗体可以高的亲和力(例如,小于或等于约10-9M的KD)结合人IL-12/IL-23p40或IL-23。与本文所述序列基本上相同的氨基酸序列包括具有保守氨基酸置换以及氨基酸缺失和/或插入的序列。保守氨基酸置换指用第二种氨基酸置换第一种氨基酸,所述第二种氨基酸具有的化学和/或物理性质(例如电荷、结构、极性、疏水性/亲水性)与第一种氨基酸相似。保守取代包括但不限于在下列组中用一种氨基酸替换另一种氨基酸:赖氨酸(K)、精氨酸(R)和组氨酸(H);天冬氨酸(D)和谷氨酸(E);天冬酰胺(N)、谷氨酰胺(Q)、丝氨酸(S)、苏氨酸(T)、酪氨酸(Y)、K、R、H、D和E;丙氨酸(A)、缬氨酸(V)、亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)、脯氨酸(P)、苯丙氨酸(F)、色氨酸(W)、甲硫氨酸(M)、半胱氨酸(C)和甘氨酸(G);F、W和Y;C、S和T。
氨基酸代码
构成本发明的抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体的氨基酸通常采用缩写。可以通过氨基酸的单字母代码、三字母代码、名称或者三核苷酸密码子来表示氨基酸,由此指示氨基酸名称,这是本领域中众所周知的(参见Alberts,B.等人,Molecular Biology of TheCell,第三版,Garland Publishing,Inc.,New York,1994):
单字母代码 | 三字母代码 | 名称 | 三核苷酸密码子 |
A | Ala | 丙氨酸 | GCA,GCC,GCG,GCU |
C | Cys | 半胱氨酸 | UGC,UGU |
D | Asp | 天冬氨酸 | GAC,GAU |
E | Glu | 谷氨酸 | GAA,GAG |
F | Phe | 苯丙氨酸 | UUC,UUU |
G | Gly | 甘氨酸 | GGA,GGC,GGG,GGU |
H | His | 组氨酸 | CAC,CAU |
I | Ile | 异亮氨酸 | AUA,AUC,AUU |
K | Lys | 赖氨酸 | AAA,AAG |
L | Leu | 亮氨酸 | UUA,UUG,CUA,CUC,CUG,CUU |
M | Met | 甲硫氨酸 | AUG |
N | Asn | 天冬酰胺 | AAC,AAU |
P | Pro | 脯氨酸 | CCA,CCC,CCG,CCU |
Q | Gln | 谷氨酰胺 | CAA,CAG |
R | Arg | 精氨酸 | AGA,AGG,CGA,CGC,CGG,CGU |
S | Ser | 丝氨酸 | AGC,AGU,UCA,UCC,UCG,UCU |
T | Thr | 苏氨酸 | ACA,ACC,ACG,ACU |
V | Val | 缬氨酸 | GUA,GUC,GUG,GUU |
W | Trp | 色氨酸 | UGG |
Y | Tyr | 酪氨酸 | UAC,UAU |
序列
抗IL-12/IL-23p40抗体互补决定区重链1的氨基酸序列(CDRH1):(SEQ ID NO:1)
TYWLG
抗IL-12/IL-23p40抗体互补决定区重链2的氨基酸序列(CDRH2):(SEQ ID NO:2)
IMSPVDSDIRYSPSFQG
抗IL-12/IL-23p40抗体互补决定区重链3的氨基酸序列(CDRH3):(SEQ ID NO:3)
RRPGQGYFDF
抗IL-12/IL-23p40抗体互补决定区轻链1的氨基酸序列(CDRL1):(SEQ ID NO:4)
RASQGISSWLA
抗IL-12/IL-23p40抗体互补决定区轻链2的氨基酸序列(CDRL2):(SEQ ID NO:5)
AASSLQS
抗IL-12/IL-23p40抗体互补决定区轻链3的氨基酸序列(CDRL3):(SEQ ID NO:6)
QQYNIYPYT
抗IL-12/IL-23p40抗体可变重链区(CDR带下划线)的氨基酸序列:(SEQ ID NO:7)
抗IL-12/IL-23p40抗体可变轻链区(CDR带下划线)的氨基酸序列:(SEQ ID NO:8)
抗IL-12/IL-23p40抗体重链(CDR带下划线)的氨基酸序列:(SEQID NO:10)
抗IL-12/IL-23p40抗体轻链(CDR带下划线)的氨基酸序列:(SEQ ID NO:11)
氨基酸序列IL-12
具有α和β亚基的人白介素(IL)-12的氨基酸序列:(SEQ ID NO:9)
如文中说明的,本发明的方法中使用的抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体可包括一个或多个来自天然突变或得自人工操纵的氨基酸置换、缺失或添加。
技术人员可进行的氨基酸置换数目取决于许多因素,包括上文所述的那些。如文中说明的,一般来讲,任何给定的抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体、片段或变体的氨基酸置换、插入或缺失数目将不超过40个、30个、20个、19个、18个、17个、16个、15个、14个、13个、12个、11个、10个、9个、8个、7个、6个、5个、4个、3个、2个、1个,诸如1个至30个或其中的任何范围或数值。
抗IL-12/IL-23p40或IL-23特异性抗体中对功能必需的氨基酸可通过本领域公知的方法鉴定,例如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(例如Ausubel,出处同上,第8、15章,Cunningham和Wells,Science 244:1081-1085(1989))。后一程序在分子的每个残基处引入单个丙氨酸突变。随后测试所得突变分子的生物活性,诸如但不限于至少一种IL-12/IL-23p40或IL-23中和活性。抗体结合至关重要的位点也可以通过结构分析进行鉴定,例如结晶、核磁共振或光亲和标记(Smith等人,J.Mol.Biol.224:899-904(1992)以及de Vos等人,Science 255:306-312(1992))。
抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体可包括但不限于选自SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、10或11中至少一者的5个至全部邻接氨基酸的至少一个部分、序列或组合。
IL-12/IL-23p40或IL-23抗体或特定部分或变体可包括但不限于选自以下的至少一个部分、序列或组合:上述SEQ ID NO中的至少3个至5个邻接氨基酸;上述SEQ ID NO中的5个至17个连续氨基酸、上述SEQ ID NO中的5个至10个连续氨基酸、上述SEQ ID NO中的5个至11个连续氨基酸、上述SEQ ID NO中的5个至7个连续氨基酸;上述SEQ ID NO中的5个至9连续氨基。
抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体还可任选地包含上述SEQ ID NO的5个、17个、10个、11个、7个、9个、119个、108个、449个或214个邻接氨基酸中的至少一者的70%-100%的多肽。在一个实施方案中,免疫球蛋白链或其部分(如可变区、CDR)的氨基酸序列与上述SEQID NO中至少一者的相应链的氨基酸序列具有约70%-100%的同一性(例如70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100或其中的任何范围或值)。例如,轻链可变区的氨基酸序列可以与上述SEQ ID NO的序列进行比较,或者重链CDR3的氨基酸序列可以与上述SEQ ID NO进行比较。优选地,使用如本领域已知的合适计算机算法确定出70%-100%氨基酸同一性(即90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100或者其中的任何范围或值)。
如本领域公知的,″同一性″为介于两个或更多个多肽序列或两个或更多个多核苷酸序列之间的关系,如通过比较该序列所确定的那样。在本领域中,″同一性″还意指多肽或多核苷酸序列之间的序列相关性程度,如由此类序列的字符串之间的匹配所确定的。″同一性″和″相似性″可通过公知的方法容易地计算,包括但不限于以下中描述的那些:Computational Molecular Biology,Lesk,A.M.编辑,Oxford University Press,NewYork,1988年;Biocomputing:Informatics and Genome Projects,Smith,D.W.编辑,Academic Press,New York,1993年;Computer Analysis of Sequence Data,第I部分,Griffin,A.M.和Griffin,H.G.编辑,Humana Press,New Jersey,1994年;SequenceAnalysis in Molecular Biology,von Heinje,G.,Academic Press,1987年;以及Sequence Analysis Primer,Gribskov,M.和Devereux,J.编辑,M Stockton Press,NewYork,1991年;以及Carillo,H.和Lipman,D.,Siam J.Applied Math.,第48卷,第1073页,1988年。另外,同一性百分比的数值可从用Vector NTI Suite 8.0(Informax,Frederick,MD)的AlignX组件的缺省设置生成的氨基酸和核苷酸序列对比获得。
设计确定同一性的优选方法以给出测试序列之间的最大匹配。确定同一性和相似性的方法在公开可用的计算机程序中编纂。优选的计算机程序方法来确定两个序列之间相似的包括但不限于负责把程序包(Devereux,J.等人,Nucleic Acids Research,第12卷,第1期,第387页,1984年),BLASTP、BLASTN和FASTA(Atschul,S.F.等人,J.Molec.Biol.215:403-410(1990))。BLAST X程序可购自NCBI和其他来源(BLAST Manual,Altschul,S.等人,NCBINLM NIH Bethesda,Md.20894:Altschul,S.等人,J.Mol.Biol.215:403-410(1990)。众所周知的Smith Waterman算法也可以用于确定同一性。
用于多肽序列比较的优选参数包括以下参数:
(1)算法:Needleman和Wunsch,J.Mol Biol.48:443-453(1970)比较矩阵:BLOSSUM62,来自Hentikoff和Hentikoff,Proc.Natl.Acad.Sci,USA.89:10915-10919(1992)
空位罚分:12
空位长度罚分:4
可与这些参数一起使用的程序是可作为来自Genetics Computer Group,MadisonWis的″gap″程序为公众获得的。前述参数是肽序列比较的默认参数(连同没有末端空位罚分)。
用于多核苷酸比较的优选参数包括以下参数:
(1)算法:Needleman和Wunsch,J.Mol Biol.48:443-453(1970)
比较矩阵:匹配=+10,不匹配=0
空位罚分:50
空位长度罚分:3
可作为来自Genetics Computer Group,Madison Wis的″gap″程序获得。这些参数是用于核酸序列比较的默认参数。
以举例的方式,多核苷酸序列可以与另一序列相同,即100%相同,或者其与参考序列相比可以包括多达某一整数数目的核苷酸改变。此类改变选自由至少一个核苷酸缺失、置换(包括转换和颠换)或插入组成的组,并且其中所述改变可以发生在参考核苷酸序列的5′或3′末端位置或者这些末端位置之间的任何位置处、单独地散布在参考序列的核苷酸中或者散布在参考序列内的一个或多个连续组中。核苷酸改变的数目通过将序列中核苷酸的总数乘以相应百分比同一性的数字百分比(除以100)并且从序列中核苷酸的总数减去该乘积来确定,或者:
n.sub.n.ltorsim.x.sub.n-(x.sub.n.y),
其中n.sub.n是核苷酸改变的数目,x.sub.n是序列中核苷酸的总数,并且y是例如0.70(对于70%)、0.80(对于80%)、0.85(对于85%)、0.90(对于90%)、0.95(对于95%)等,并且其中x.sub.n和y的任何非整数乘积在从x.sub.n中减去之前四舍五入至最接近的整数。
编码上述SEQ ID NO的多核苷酸序列的改变可以在该编码序列中产生无义突变、错义突变或移码突变,从而在此类改变之后改变由所述多核苷酸编码的多肽。类似地,多肽序列可以与上述SEQ ID NO的参考序列相同,即100%相同,或者其与参考序列相比可以包括多达某一整数数目的氨基酸改变,使得百分比同一性小于100%。此类改变选自由至少一个氨基酸缺失、置换(包括保守性置换和非保守性置换)或插入组成的组,并且其中所述改变可以发生在参考多肽序列的氨基末端位置或羧基末端位置或者这些末端位置之间的任何位置处、单独地散布在参考序列的氨基酸中或者散布在参考序列内的一个或多个连续组中。通过以下方式来确定给定百分比同一性的氨基酸改变数量:将上述SEQ ID NO中的氨基酸总数乘以相应百分比同一性的数字百分比(除以100),然后从上述SEQ ID NO中的氨基酸总数中减去该乘积,或:n.sub.a.ltorsim.x.sub.a-(x.sub.a.y),其中n.sub.a为氨基酸改变数量,x.sub.a为上述SEQ ID NO中的氨基酸总数,y为例如0.70(对于70%)、0.80(对于80%)、0.85(对于85%)等,并且其中x.sub.a和y的任何非整数乘积向下舍入到最接近的整数,然后从x.sub.a中减去该乘积。
在上述SEQ ID NO中提供了示例性重链和轻链可变区序列及其部分。本发明的抗体,或其特定变体可包含任何数目的来自本发明抗体的邻接氨基酸残基,其中该数目选自抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体中邻接残基数目的10%-100%的整数。任选地,该邻接氨基酸亚序列长度为至少约10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250或更多个氨基酸,或其中的任何范围或数值。此外,所述亚序列的数目可以为选自1至20的任何整数,诸如至少2、3、4或5。
技术人员将会知道,本发明包括本发明的至少一种生物活性抗体。生物活性抗体的比活性为天然(非合成)的、内源性或相关的和公知的抗体比活性的至少20%、30%或40%,并且优选为至少50%、60%或70%,并且最优选为至少80%、90%或95%-100%或更多(包括但不限于,大于其比活性的10倍)。测定和定量酶促活性和底物特异性的量度的方法为本领域技术人员公知的。
在另一方面,本发明涉及通过共价连接有机部分进行修饰的、如本文所述的人抗体和抗原结合片段。此类修饰可以产生具有改善的药代动力学特性(例如增加的体内血清半衰期)的抗体或抗原结合片段。有机部分可以是线性或支化的亲水性聚合基团、脂肪酸基团或脂肪酸酯基团。在一个具体实施方案中,亲水性聚合物基团可以具有约800至约120,000道尔顿的分子量,并且可以是聚链烷二醇(例如聚乙二醇(PEG)、聚丙二醇(PPG))、碳水化合物聚合物、氨基酸聚合物或聚乙烯吡咯烷酮,并且脂肪酸或脂肪酸酯基团可包含约8至约40个碳原子。
如本文所定义,术语″半衰期″表示药物(例如治疗性抗IL-12/IL-23p40抗体优特克单抗)的血浆浓度在一个消除半衰期后减半。因此,在每个随后的半衰期中,消除较少的药物。一个半衰期后,药物在体内的残留量为50%,两个半衰期后为25%,依此类推。药物的半衰期取决于其清除率和分布体积。消除半衰期被认为与体内药物的量无关。
经修饰的抗体和抗原结合片段可包含一个或多个与抗体直接或间接共价键合的有机部分。与本发明的抗体或抗原结合片段键合的每个有机部分可独立地是亲水性聚合物基团、脂肪酸基团或脂肪酸酯基团。如本文所用,术语″脂肪酸″涵盖单羧酸和二羧酸。″亲水性聚合物基团″,该术语在本文中使用时是指在水中比在辛烷中更易溶的有机聚合物。例如,聚赖氨酸在水中比在辛烷中更易溶。因此,通过共价连接聚赖氨酸来修饰的抗体包括在本发明内。适用于修饰本发明抗体的亲水性聚合物可以是直链或支链的,并且包括例如聚链烷二醇(例如PEG、单甲氧基-聚乙二醇(mPEG)、PPG等)、碳水化合物(例如葡聚糖、纤维素、寡糖、多糖等)、亲水性氨基酸聚合物(例如聚赖氨酸、聚精氨酸、聚天冬氨酸等)、聚环氧链烷(例如,聚环氧乙烷、聚环氧丙烷等)和聚乙烯吡咯烷酮。优选地,修饰本发明抗体的亲水性聚合物作为单独的分子实体具有约800至约150,000道尔顿的分子量。例如,可以使用PEG5000和PEG20,000,其中下标是聚合物的平均分子量(单位为道尔顿)。亲水性聚合物基团可用1至约6个烷基、脂肪酸或脂肪酸酯基团取代。用脂肪酸或脂肪酸酯基团取代的亲水性聚合物可通过采用合适的方法制备。例如,可将包含胺基团的聚合物与脂肪酸或脂肪酸酯的羧酸根偶联,且可将脂肪酸或脂肪酸酯上的活化羧酸根(例如用N,N-羰基二咪唑活化)与聚合物上的羟基偶联。
适用于修饰本发明抗体的脂肪酸和脂肪酸酯可以是饱和的或可含有一个或多个不饱和单位。适用于修饰本发明抗体的脂肪酸包括例如正十二烷酸酯(C12,月桂酸酯)、正十四烷酸酯(C14,肉豆蔻酸酯)、正十八烷酸酯(C18,硬脂酸酯)、正二十烷酸酯(C20,花生酸酯)、正二十二烷酸酯(C22,山嵛酸酯)、正三十烷酸酯(C30)、正四十烷酸酯(C40)、顺式-Δ9-十八烷酸酯(C18,油酸酯)、全顺式-Δ5,8,11,14-二十烷酸酯(C20,花生四烯酸酯)、辛二酸、十四烷二酸、十八烷二酸、二十二烷二酸等。合适的脂肪酸酯包括包含直链或支链的低级烷基的二羧酸的单酯。低级烷基可包含一个至约十二个,优选地一个至约六个碳原子。
修饰的人抗体和抗原结合片段可使用合适的方法制备,诸如通过与一种或多种修饰剂反应来制备。如本文所用的术语″修饰剂″是指包含活化基团的合适有机基团(例如亲水性聚合物、脂肪酸、脂肪酸酯)。″活化基团″是化学部分或官能团,它们可在适当的条件下与第二化学基团反应,由此在修饰剂和第二化学基团之间形成共价键。例如,胺反应性活化基团包括亲电子基团,诸如甲苯磺酸酯、甲磺酸酯、卤素(氯、溴、氟、碘)、N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS)等。可以与硫醇反应的活化基团包括例如马来酰亚胺、碘代乙酰基、丙烯酰基、吡啶基二硫化物、5-硫醇-2-硝基苯甲酸硫醇(TNB-硫醇)等。可将醛官能团与含胺或酰肼的分子偶联,并且可将叠氮基团与三价磷基团反应以形成磷酰胺酯或磷酰亚胺键。将活化基团引入分子的合适方法是本领域已知的(参见例如Hermanson,G.T.,BioconjugateTechniques,Academic Press:San Diego,CA(1996))。可以将活化基团直接键合到该有机基团(例如,亲水性聚合物、脂肪酸、脂肪酸酯),或者通过接头部分来键合,该接头部分例如二价C1-C12基团,其中一个或多个碳原子可以被杂原子(诸如氧、氮或硫)替代。合适的接头部分包括例如四乙烯乙二醇、-(CH2)3-、-NH-(CH2)6-NH-、-(CH2)2-NH-和-CH2-O-CH2-CH2-O-CH2-CH2-O-CH-NH-。包含连接部分的修饰剂可例如通过以下产生:在存在1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺(EDC)的情况下,使单-Boc-烷基二胺(例如单-Boc-乙二胺、单-Boc-二氨基己烷)与脂肪酸反应,以在游离胺和脂肪酸羧酸根之间形成酰胺键。可通过用三氟乙酸(TFA)处理从产物除去Boc保护基以暴露出伯胺,后者可偶联到另一羧酸酯(如所描述),或者可与马来酸酐反应并且所得的产物环化以产生脂肪酸的活化马来酰亚胺基衍生物。(参见例如Thompson等人的WO 92/16221,该专利的全部教导内容以引用方式并入本文。)
经修饰抗体可通过使人抗体或抗原结合片段与修饰剂反应来产生。例如,有机部分可以通过使用胺反应性改性剂(例如PEG的NHS酯)以非位点特异性方式结合至抗体。经修饰的人抗体或抗原结合片段还可通过使抗体或抗原结合片段的二硫键(例如链内二硫键)还原来制备。还原的抗体或抗原结合片段随后可与硫醇反应性修饰剂反应,以产生本发明的经修饰抗体。包含与本发明抗体特定位点键合的有机部分的修饰的人抗体和抗原结合片段可使用合适的方法制备,所述方法诸如为逆向蛋白水解作用(Fisch等人,BioconjugateChem.,3:147-153(1992);Werlen等人,Bioconjugate Chem.,5:411-417(1994);Kumaran等人,Protein Sci.6(10):2233-2241(1997);Itoh等人,Bioorg.Chem.,24(1):59-68(1996);Capellas等人,Biotechnol.Bioeng.,56(4):456-463(1997)),以及在Hermanson,G.T.,Bioconjugate Techniques,Academic Press:San Diego,CA(1996)中所描述的方法。
本发明的方法也使用抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体组合物,该组合物包含至少一种、至少两种、至少三种、至少四种、至少五种、至少六种或更多种其抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体,它们如本文所述和/或本领域公知的以非天然存在的组合物、混合物或形式提供。这些组合物包含非天然存在的组合物,所述非天然存在的组合物包含抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体氨基酸序列的至少一个或两个全长序列、C-端和/或N-端缺失的变体、结构域、片段或特定变体,所述抗淀粉样蛋白抗体氨基酸序列选自上述SEQ ID NO的70%-100%的邻接氨基酸或其特定片段、结构域或变体。优选的抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体组合物包含至少一个或两个全长、片段、结构域或变体作为至少一个含有本文所述抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体序列部分的CDR或LBP,例如,70%-100%的上述SEQ ID NO,或其特定的片段、结构域或变体。更优选的组合物包含,例如,上述SEQ ID NO的70%-100%或其特定片段、结构域或变体中的至少一者的40%-99%。此类组合物百分数按照液体或无水溶液、混合物、悬浮液、乳液、颗粒、粉末或胶体的重量、体积、浓度、摩尔浓度或重量摩尔浓度计算,如本领域公知或如本文所述。
包含另外的治疗活性成分的抗体组合物
本发明的方法中使用的抗体组合物可以任选地还包含有效量的至少一种选自以下至少一者的化合物或蛋白质:抗感染药物、心血管(CV)系统药物、中枢神经系统(CNS)药物、自主神经系统(ANS)药物、呼吸道药物、胃肠(GI)道药物、激素药物、用于体液或电解质平衡的药物、血液学药物、抗肿瘤药、免疫调节药物、眼用药物、耳用药物或鼻用药物、局部用药物、营养药物等。此类药物是本领域中众所周知的,包括本文所提供的每种药物的制剂、适应症、定量给药和施用(参见例如Nursing 2001 Handbook of Drugs,第21版,Springhouse Corp.,Springhouse,PA,2001;Health Professional′s Drug Guide 2001版,Shannon,Wilson,Stang,Prentice Hall,Inc,Upper Saddle River,NJ;Pharmcotherapy Handbook,Wells等人编辑,Appleton&Lange,Stamford,CT,各自以引用方式全文并入本文)。
作为可以与用于本发明的方法的抗体组合的药物的示例,抗感染药物可以为选自以下的至少一种:抗阿米巴药或者抗原虫药、抗蠕虫药、抗真菌药、抗疟药、抗结核药或者至少一种抗麻风药、氨基糖苷、青霉素、头孢菌素、四环素类、磺胺药物、氟喹诺、抗病毒素、大环内酯抗感染药和其他抗感染药。激素药物可以为选自以下的至少一种:皮质类固醇、雄激素或者至少一种合成代谢类固醇、雌激素或者至少一种孕酮、促性腺激素、抗糖尿病药物或者至少一种胰高血糖素、甲状腺激素、甲状腺激素拮抗剂、垂体激素和甲状旁腺激素样药物。该至少一种头孢菌素可以为选自以下的至少一种:头孢克洛、头孢羟氨苄、头孢唑啉钠、头孢地尼、盐酸头孢吡肟、头孢克肟、头孢美唑钠、头孢尼西钠、头孢哌酮钠、头孢噻肟钠、头孢替坦二钠、头孢西丁钠、头孢泊肟酯、头孢丙烯、头孢他啶、头孢布烯、头孢唑肟钠、头孢曲松钠、头孢呋辛酯、头孢呋辛钠、盐酸头孢氨苄、头孢氨苄一水合物、头孢拉定和氯碳头孢。
该至少一种皮质类固醇可以为选自以下的至少一种:倍他米松、醋酸倍他米松或倍他米松磷酸钠、倍他米松磷酸钠、醋酸可的松、地塞米松、醋酸地塞米松、地塞米松磷酸钠、醋酸氟氢可的松、氢化可的松、醋酸氢化可的松、环戊丙酸氢化可的松、氢化可的松磷酸钠、氢化可的松琥珀酸钠、甲基泼尼松龙、醋酸甲基泼尼松龙、甲基泼尼松龙琥珀酸钠、泼尼松龙、醋酸泼尼松龙、泼尼松龙磷酸钠、泼尼松龙叔丁乙酯、泼尼松、曲安西龙、曲安萘德和二醋酸曲安西龙。该至少一种雄激素或合成代谢类固醇可以为选自以下的至少一种:达那唑、氟甲睾酮、甲基睾酮、癸酸诺龙、苯丙酸诺龙、睾酮、环戊丙酸睾酮、庚酸睾酮、丙酸睾酮和睾酮透皮系统。
该至少一种免疫抑制剂可以为选自以下的至少一种:硫唑嘌呤、巴利昔单抗、环孢霉素、达克珠单抗、淋巴细胞免疫球蛋白、莫罗单抗-CD3、麦考酚酸莫酯、盐酸麦考酚酸莫酯、西罗莫司、6-巯嘌呤、甲氨蝶呤、咪唑立宾和他克莫司。
该至少一种局部抗感染剂可以为选自以下的至少一种:阿昔洛韦、两性霉素B、壬二酸霜、杆菌肽、硝酸布康唑、磷酸克林霉素、克霉唑、硝酸益康唑、红霉素、硫酸庆大霉素、酮康唑、醋酸磺胺米隆、甲硝唑(局部用)、硝酸咪康唑、莫匹罗星、盐酸萘替芬、硫酸新霉素、呋喃西林、制霉菌素、磺胺嘧啶银、盐酸特比萘芬、特康唑、盐酸四环素、噻康唑和托萘酯。该至少一种杀疥剂或杀虱剂可以为选自以下的至少一种:克罗他米通、林丹、扑灭司林和除虫菊酯。该至少一种局部用皮质类固醇可为选自以下的至少一种:二丙酸倍他米松、戊酸倍他米松、丙酸氯倍他索、地索奈德、去羟米松、地塞米松、地塞米松磷酸钠、醋酸双氟拉松、醋酸氟轻松、氟轻松、氟氢缩松、丙酸氟替卡松、哈西奈德、氢化可的松、醋酸氢化可的松、丁酸氢化可的松、戊酸氢化可的松、糠酸莫米松和曲安奈德。(参见例如,Nursing 2001DrugHandbook的第1098至1136页。)
抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体组合物可以还包含任何合适和有效量的组合物或药物组合物中的至少一种,该组合物或药物组合物包含至少一种与需要这种调节、治疗或疗法的细胞、组织、器官、动物或患者接触或者施用于需要这种调节、治疗或疗法的细胞、组织、器官、动物或患者的抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体,任选地还包含选自至少一种TNF拮抗剂(例如但不限于TNF化学拮抗剂或蛋白质拮抗剂、TNF单克隆或多克隆抗体或片段、可溶性TNF受体(例如,p55、p70或p85)或其片段、融合多肽,或者小分子TNF拮抗剂,例如,TNF结合蛋白I或II(TBP-1或TBP-II)、内雷门玛、英夫利昔单抗、依坦西普、CDP-571、CDP-870、阿非莫单抗、来那西普等)、抗风湿剂(例如,甲氨蝶呤、金诺芬、硫代葡萄糖金、硫唑嘌呤、依那西普、硫代苹果酸金钠、羟基氯喹硫酸盐、来氟米特、柳氮磺胺吡啶)、免疫、免疫球蛋白、免疫抑制剂(例如,巴利昔单抗、环孢霉素、达克珠单抗)、细胞因子或细胞因子拮抗剂中的至少一种。此类细胞因子的非限制性示例包括但不限于IL-1至IL-23等中的任一者。(例如IL-1、IL-2等)。合适的剂量是本领域众所周知的。参见例如Wells等人编辑,PharmacotherapyHandbook,第二版,Appleton and Lange,Stamford,CT(2000);PDR Pharmacopoeia,Tarascon Pocket Pharmacopoeia 2000,Deluxe编辑,Tarascon Publishing,Loma Linda,CA(2000),上述参考文献中的每一篇以引用方式全文并入本文。
本发明的方法中使用的抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体混合物、组合物或组合还可包含任何合适辅助剂中的至少一种,诸如但不限于稀释剂、粘结剂、稳定剂、缓冲剂、盐、亲脂性溶剂、防腐剂、辅剂等。可药用辅助剂是优选的。制备此类无菌溶液的非限制性示例和方法是本领域公知的,诸如但不限于Gennaro编辑,Remington′s PharmaceuticalSciences,第18版,Mack Publishing Co.(Easton,PA)1990。可以按常规方式选择适合于抗IL-23抗体、片段或变体组合物的施用方式、溶解性和/或稳定性的药学上可接受的载剂,如本领域中众所周知或如本文所述的。
用于本发明组合物的药物赋形剂和添加剂包括但不限于:蛋白质、肽、氨基酸、脂质和碳水化合物(例如糖,包括单糖、二糖、三糖、四糖和低聚糖;衍生糖,诸如糖醇、醛糖酸、酯化糖等;以及多糖或糖聚合物),药物赋形剂和添加剂可以单独或组合的方式存在,其单独或组合具有1-99.99重量%或体积%。示例性蛋白质赋形剂包括血清白蛋白,诸如人血清白蛋白(HSA)、重组人白蛋白(rHA)、明胶、酪蛋白等。还可以在缓冲能力方面起作用的代表性氨基酸/抗体成分包括丙氨酸、甘氨酸、精氨酸、甜菜碱、组氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、阿斯巴甜等。一种优选的氨基酸是甘氨酸。
适用于本发明的碳水化合物赋形剂包括例如单糖,诸如果糖、麦芽糖、半乳糖、葡萄糖、D-甘露糖、山梨糖等;二糖,诸如乳糖、蔗糖、海藻糖、纤维二糖等;多糖,诸如棉子糖、松三糖、麦芽糖糊精、葡聚糖、淀粉等;以及糖醇,诸如甘露糖醇、木糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、木糖醇、山梨糖醇(葡糖醇)、肌醇等。用于在本发明中使用的优选碳水化合物赋形剂是甘露糖醇、海藻糖和棉子糖。
抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体组合物还可包含缓冲剂或pH调节剂;通常,缓冲剂是从有机酸或碱制备的盐。代表性缓冲剂包括有机酸盐,诸如柠檬酸、抗坏血酸、葡糖酸、碳酸、酒石酸、琥珀酸、乙酸或邻苯二甲酸的盐;盐酸三羟甲基氨基甲烷或磷酸盐缓冲剂。用于本发明组合物的优选缓冲剂为有机酸盐,诸如柠檬酸盐。
另外,抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体组合物可包括聚合赋形剂/添加剂,例如聚乙烯吡咯烷酮、聚蔗糖(聚合糖)、葡萄糖结合剂(例如环糊精,例如2-羟丙基-β-环糊精)、聚乙二醇、调味剂、抗微生物剂、增甜剂、抗氧化剂、抗静电剂、表面活性剂(例如聚山梨醇酯,例如″TWEEN 20″和″TWEEN 80″)、脂质(例如磷脂、脂肪酸)、类固醇(例如胆固醇)和螯合剂(例如EDTA)。
适合在根据本发明的抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体、部分或变体组合物中使用的这些和附加的已知药物赋形剂和/或添加剂是本领域中已知的,例如,如在以下文献中列出的:″Remington:The Science&Practice of Pharmacy″,第19版,Williams&Williams,(1995),以及″Physician′s Desk Reference″,第52版,Medical Economics,Montvale,NJ(1998),所述参考文献的公开内容以引用方式全文并入本文。优选的载体或赋形剂材料是碳水化合物(例如糖和醛醇)和缓冲剂(例如柠檬酸盐)或聚合物试剂。示例性载剂分子为粘多糖透明质酸,其可以用于关节内递送。
制剂
如上所指出的,本发明提供优选包含具有盐水或选定的盐的磷酸盐缓冲剂的稳定制剂,以及含有防腐剂的防腐溶液和制剂,以及适合于医药用途或兽医用途的多用途防腐制剂,这些制剂包含至少一种在可药用的配方中的抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体。防腐制剂包括至少一种已知的防腐剂或任选地选自至少一种溶于含水稀释剂的苯酚、间甲酚、对甲酚、邻甲酚、氯甲酚、苄醇、亚硝酸苯汞、苯氧基乙醇、甲醛、氯代丁醇、氯化镁(例如六水合物)、烷基苯甲酸酯(甲基、乙基、丙基、丁基等)、苯扎氯铵、苄索氯铵、脱氢乙酸钠和硫柳汞或它们的混合物。可以使用本领域公知的任何合适的浓度或混合物,例如0.001%-5%或其中的任何范围或值,诸如但不限于:0.001、0.003、0.005、0.009、0.01、0.02、0.03、0.05、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.3、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9或其中的任何范围或值。非限制性示例包括:无防腐剂、0.1%-2%间甲酚(例如0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.9%、1.0%)、0.1%-3%苄醇(例如0.5%、0.9%、1.1%、1.5%、1.9%、2.0%、2.5%)、0.001%-0.5%硫柳汞(例如0.005%、0.01%)、0.001%-2.0%苯酚(例如0.05%、0.25%、0.28%、0.5%、0.9%、1.0%)、0.0005%-1.0%对羟基苯甲酸烷基酯(例如0.00075%、0.0009%、0.001%、0.002%、0.005%、0.0075%、0.009%、0.01%、0.02%、0.05%、0.075%、0.09%、0.1%、0.2%、0.3%、0.5%、0.75%、0.9%、1.0%)等。
如上文指出的,本发明的方法使用包括包装材料和至少一个小瓶的制品,所述小瓶包含至少一种抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体与规定的缓冲剂和/或防腐剂的溶液(任选溶于水性稀释剂中),其中所述包装材料包括标签,该标明此类溶液可以在1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、9小时、12小时、18小时、20小时、24小时、30小时、36小时、40小时、48小时、54小时、60小时、66小时、72小时或更长时间段内保存。本发明还使用包括包装材料、第一小瓶和第二小瓶的制品,其中第一小瓶包含冻干的抗IL-12/IL-23p40或IL-23特异性抗体,第二小瓶包含规定的缓冲剂或防腐剂的水性稀释剂,其中所述包装材料包括标签,该标签指导患者在水性稀释剂中复溶抗IL-12/IL-23p40或IL-23特异性抗体,以形成可以在二十四小时或更长的时段内保存的溶液。
根据本发明使用的抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体可以通过重组手段制备,包括从哺乳动物细胞或转基因制品制备,或者可以从其他生物来源纯化,如本文所描述的或如本领域公知的。
如果在湿润/干燥系统中,那么本发明产品中的至少一种抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体的范围包括重构后产生约1.0μg/ml至约1000mg/ml的浓度的量,但是更低和更高的浓度为可行的并且取决于计划的递送载体,例如溶液制剂将不同于经皮贴剂、肺、跨粘膜或渗透或微量泵方法。
优选地,水性稀释剂还任选地包含可药用防腐剂。优选的防腐剂包括选自以下的那些:苯酚、间甲酚、对甲酚、邻甲酚、氯甲酚、苄醇、对羟基苯甲酸烷基酯(甲基酯、乙基酯、丙基酯、丁基酯等)、苯扎氯铵、苄索氯铵、脱氢乙酸钠和硫柳汞或它们的混合物。在制剂中使用的防腐剂的浓度是足以产生抗微生物作用的浓度。该浓度取决于所选防腐剂且容易由技术人员确定。
其他赋形剂例如等渗剂、缓冲剂、抗氧化剂和防腐增强剂可任选且优选地添加到稀释剂中。等渗剂诸如甘油常常以已知的浓度使用。优选地添加生理学耐受的缓冲剂以提供改善的pH控制。制剂可以覆盖宽的pH范围,诸如约pH 4至约pH 10,优选的范围是约pH 5至约pH 9,最优选的范围是约6.0至约8.0。优选地本发明的制剂具有介于约6.8和约7.8之间的pH。优选的缓冲剂包括磷酸盐缓冲剂,最优选地磷酸钠,特别是磷酸盐缓冲盐水(PBS)。
其他的添加剂,诸如可药用的增溶剂,如Tween 20(聚氧乙烯(20)脱水山梨糖醇单月桂酸酯)、Tween 40(聚氧乙烯(20)脱水山梨糖醇单棕榈酸酯)、Tween 80(聚氧乙烯(20)脱水山梨糖醇单油酸酯)、Pluronic F68(聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物)和PEG(聚乙二醇)或者非离子型表面活性剂如聚山梨醇酯20或80或者泊洛沙姆184或188、polyls、其他嵌段共聚物,以及螯合物如EDTA和EGTA,可任选地添加到配方或组合物中以减少聚集现象。如果使用泵或塑料容器来施用制剂,则这些添加剂是特别有用的。可药用表面活性剂的存在减轻了蛋白质聚集的倾向。
该制剂可通过这样一种方法来制备,该方法包括将至少一种抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体和防腐剂在水性稀释剂中混合,所述防腐剂选自苯酚、间甲酚、对甲酚、邻甲酚、氯甲酚、苄醇、对羟基苯甲酸烷基酯、(甲基酯、乙基酯、丙基酯、丁基酯等)、苯扎氯铵,氯化苄乙氧铵、脱氢醋酸钠和硫柳汞或它们的混合物。用常规溶解和混合方法将该至少一种抗IL-12/IL-23p40或IL-23特异性抗体和防腐剂在水性稀释剂中混合。为了制备适宜的制剂,例如,将缓冲液中的测定量的至少一种抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体与所需的防腐剂在缓冲液中以一定量组合,所述量足以提供所需浓度的蛋白质和防腐剂。该方法的变型形式会是本领域普通技术人员认识到的。例如,成分添加的顺序、是否使用附加添加剂、制剂制备时的温度和pH都是可以为所用的施用浓度和方式进行最优化的因素。
该制剂可以澄清溶液或双小瓶的形式提供给患者,所述双小瓶包括一小瓶冻干的抗IL-12/IL-23p40或抗IL-23特异性抗体,所述抗体用第二小瓶在水性稀释剂中重构,所述第二小瓶装有水、防腐剂和/或赋形剂,优选磷酸盐缓冲液和/或盐水和所选的盐。单个溶液小瓶或需要重构的双小瓶都可以多次再使用,并且可以满足患者治疗的单个或多个周期,并且因此可以提供比目前可用的治疗方案更方便的治疗方案。
本发明制品可用于从立即到二十四小时或更长的时间里进行施用。因此,本发明受权利要求书保护的制品提供了对于患者而言明显的优点。本发明的制剂可以任选地安全地储存于约2℃至约40℃的温度下,并且在长的时间内保持蛋白质的生物活性,从而允许包装标签标明溶液可在6、12、18、24、36、48、72或96小时或更长的时间段内保持和/或使用。如果使用防腐稀释剂,则此类标签可包括长达1-12个月、半年、一年半和/或2年的使用期。
抗IL-12/IL-23p40或IL-23特异性抗体的溶液可通过包括将至少一种抗体在水性稀释剂中混合的方法来制备。混合是使用常规溶解和混合程序来进行。为了制备合适的稀释液,例如,将水或缓冲液中的测定量的至少一种抗体以一定量合并,所述量足以提供蛋白质和任选的防腐剂或缓冲剂成所需的浓度。该方法的变型形式会是本领域普通技术人员认识到的。例如,成分添加的顺序、是否使用附加添加剂、制剂制备时的温度和pH都是可以为所用的施用浓度和方式进行最优化的因素。
受权利要求保护的产品可以澄清溶液或双小瓶子的形式提供给患者,所述双小瓶包括一小瓶冻干的至少一种抗IL-12/IL-23p40或IL-23特异性抗体,其用装有水性稀释剂的第二瓶子进行重构。单个溶液小瓶或需要重构的双小瓶都可以多次再使用,并且可以满足患者治疗的单个或多个周期,并且因此提供比目前可用的治疗方案更方便的治疗方案。
受权利要求书保护的产品可以通过提供给药房、门诊或其他此类协会和机构澄清的溶液剂或双小瓶来间接地提供给患者,所述双小瓶包含一小瓶冷干的至少一种抗IL-12/IL-23p40或IL-23特异性抗体,所述抗体用包含水性稀释剂的第二个小瓶重构。在这种情况下澄清溶液剂的容积尺寸可以最多为一升或甚至更大,从而提供大的贮存库,从中可以一次或多次取出较小部分的至少一种抗体溶液用于转移到较小的小瓶中,且通过药房或门诊提供给它们的顾客和/或患者。
包含单个小瓶系统的识别装置包括用于递送溶液的笔注射器装置,诸如BD Pens、BD和Reco-RoferonJ-tip Needle-Free 例如,如由Becton Dickensen(Franklin Lakes,NJ,www.bectondickenson.com)、Disetronic(Burgdorf,Switzerland,www.disetronic.com)、Bioject,Portland,Oregon(www.bioject.com)、National MedicalProducts,Weston Medical(Peterborough,UK,www.weston-medical.com)、Medi-JectCorp(Minneapolis,MN,www.mediject.com)制造或开发的,以及类似的合适装置。包括双小瓶系统的公认装置包括用于在筒中将冻干药物复溶的那些笔式注射器系统,而该筒用于递送复溶的溶液,诸如其他合适的装置的示例包括预填充注射器、自动注射器、无针注射器和无针IV输注器。
这些产品可以包括包装材料。包装材料除了提供管理机构要求的信息之外,还提供本产品可得以使用的条件。对于双小瓶、湿润/干燥产品,本发明的包装材料提供指导患者,视情况而定,在水性稀释剂中重构至少一种抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体以形成溶液,以及在2-24小时或更长时间段内使用溶液的说明书。对于单个小瓶、溶液产品、预填充注射器或自动注射器,标签表明这种溶液可以在2-24小时或更长时间内使用。产品可用于人药物产品用途。
本发明的方法中使用的制剂可以通过下述方法制备:该方法包括将抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体和所选择的缓冲剂混合,该缓冲剂优选地为含有盐水或选择的盐的磷酸盐缓冲剂。使用常规的溶解和混合程序将抗IL-23抗体和缓冲剂在水性稀释剂中混合。例如,为了制备合适的制剂,将水或缓冲液中的测定量的至少一种抗体与所需缓冲剂在一定量的水中混合,所述量足以提供所述蛋白质和缓冲剂成所需浓度。该方法的变型形式会是本领域普通技术人员认识到的。例如,成分添加的顺序、是否使用附加添加剂、制剂制备时的温度和pH都是可以为所用的施用浓度和方式进行最优化的因素。
本发明的方法提供了药物组合物,这些药物组合物包括对于向人或动物患者施用有用和可接受的各种制剂。使用″标准状态″的水作为稀释剂和本领域普通技术人员公知的常规方法制备这样的药物组合物。例如,可以首先提供缓冲组分(诸如组氨酸和组氨酸单盐酸盐水合物),之后在″标准状态″下添加适当的非最终体积的水稀释剂、蔗糖和聚山梨醇酯80。然后可以添加分离的抗体。最后,使用水作为稀释剂,在″标准状态″条件下将药物组合物的体积调节至所需的最终体积。本领域技术人员将认识到许多适用于制备药物组合物的其他方法。
这些药物组合物可以为水性溶液或悬浮液,其在″标准状态″下包含每单位水体积指定质量的每种成分或具有指定pH。如本文所用,术语″标准状态″是指25℃+/-2℃的温度和1大气压的压力。术语″标准状态″在本领域中不是用于表示单个本领域公认的温度或压力,但是相反是参考状态,其指定用于描述在参考″标准状态″条件下具有特定组成的溶液或悬浮液的温度和压力。这是因为溶液的体积部分为温度和压力的函数。本领域技术人员将认识到,与本文公开的那些相当的药物组合物可以在其他温度和压力下生产。此类药物组合物是否与这里公开的那些相同,应当在上文定义的″标准状态″条件(例如25℃+/-2℃和1个大气压的压力)下测定。
重要的是,此类药物组合物可以含有每单位体积药物组合物″约″一定值(例如″约0.53mg L-组氨酸″)的组分质量或具有约一定值的pH值。如果药物组合物中存在的分离的抗体能够结合肽链,而分离的抗体存在于药物组合物中或在分离的抗体已从药物组合物中除去(例如,通过稀释)之后,则药物组合物中存在的组分质量或pH值为″约″给定的数值。换句话说,当将分离的抗体置于药物组合物中后分离的抗体的结合活性保持并且可检测时,诸如组分质量值或pH值的值为″约″给定的数值。
进行竞争结合分析以确定IL-12/IL-23p40或IL-23特异性mAb是否与相似或不同的表位结合和/或彼此竞争。将Abs单独涂覆在ELISA板上。添加竞争mAb,然后加入生物素化的hrIL-12或IL-23。对于阳性对照,可以使用相同mAb来涂布作为竞争性mAb(″自我竞争″)。使用链霉抗生物素蛋白检测IL-12/IL-23p40或IL-23结合。这些结果证明mAb是否识别IL-12/IL-23p40或IL-23上相似或部分重叠的表位。
本发明方法的一个方面向患者施用药物组合物,该药物组合物包含:
在药物组合物的一个实施方案中,分离的抗体浓度为每毫升药物组合物约77mg至约104mg。在药物组合物的另一实施方案中,pH为约5.5至约6.5。
可以将稳定的或防腐的制剂作为澄清溶液或作为双小瓶提供给患者,所述双小瓶包括一小瓶冻干的至少一种抗IL-23抗体,该抗体用第二小瓶进行复溶,该第二小瓶在水性稀释剂中含有防腐剂或缓冲剂和赋形剂。单个溶液小瓶或需要重构的双小瓶都可以多次再使用,并且可以满足患者治疗的单个或多个周期,并且因此提供比目前可用的治疗方案更方便的治疗方案。
其他使抗IL-23抗体稳定的制剂或方法可以导致产生包含该抗体的冻干粉末的非澄清溶液。这种非澄清溶液包括包含颗粒悬浮液的制剂,所述颗粒为在尺寸不同的各称为微球体、微粒、纳米颗粒、纳米球体或脂质体的结构中含有抗IL-23抗体的组合物。通过使包含活性剂和聚合物的水相与非水相接触,然后蒸发非水相以使颗粒从水相中聚结,可形成此类包含活性剂的相对均匀、基本上球形的颗粒制剂,如美国专利4,589,330教导的。多孔微粒可使用包含分散于连续溶剂中的活性剂和聚合物的第一相,并通过冷冻干燥或稀释-提取-沉淀从悬浮液中移除所述溶剂来制备,如美国专利4,818,542教导的。用于此类制备的优选聚合物为天然或合成的共聚物或聚合物,所述天然或合成的共聚物或聚合物选自由以下项组成的组:明胶琼脂、淀粉、阿拉伯半乳聚糖、白蛋白、胶原、聚乙醇酸、聚乳酸、乙交酯-L(-)丙交酯、聚(ε-己内酯)、聚(ε-己内酯-CO-乳酸)、聚(ε-己内酯-CO-乙醇酸)、聚(β-羟基丁酸)、聚环氧乙烷、聚乙烯、聚(2-氰基丙烯酸烷基酯)、聚(甲基丙烯酸羟乙酯)、聚酰胺、聚(氨基酸)、聚(2-羟乙基DL-天冬酰胺)、聚(酯脲)、聚(L-苯丙氨酸/乙二醇/1,6-二异氰酸根合己烷)和聚(甲基丙烯酸甲酯)。特别优选的聚合物为聚酯,诸如聚乙醇酸、聚乳酸、乙交酯-L(-)丙交酯、聚(ε-己内酯)、聚(ε-己内酯-CO-乳酸)和聚(ε-己内酯-CO-乙醇酸)。可用于溶解聚合物和/或活性物的溶剂包括:水、六氟异丙醇、二氯甲烷、四氢呋喃、己烷、苯或六氟丙酮倍半水合物。将含有活性物质的相用第二相分散的方法可以包括施加压力迫使所述第一相穿过喷嘴中的孔口而实现小滴形成。
干粉制剂可以由除冻干之外的方法产生,诸如通过喷雾干燥或借助蒸发的溶剂提取,或者通过结晶组合物的沉淀,之后进行一个或多个步骤以除去水性或非水性溶剂。喷雾干燥的抗体制品的制备在美国专利6,019,968中有教导。基于抗体的干粉组合物可以通过在提供可吸入干粉的条件下喷雾干燥抗体和任选的赋形剂在溶剂中的溶液或浆液来制备。溶剂可以包括可以易于干燥的极性化合物,诸如水和乙醇。可以通过在不存在氧的情况下进行喷雾干燥程序,诸如在氮气层下或通过使用氮作为干燥气体进行喷雾干燥程序,而使抗体的稳定性得到增强。另一种相对干燥的制剂为分散在悬浮介质中的多个穿孔微结构的分散体,所述悬浮介质通常包含氢氟烷推进剂,如WO9916419教导的。可以使用定量吸入器将稳定化的分散体施用于患者的肺。可用于喷雾干燥药物的商业制备中的设备由BuchiLtd.或Niro Corp制造。
在本文所述的稳定的或防腐的制剂或溶液中的抗IL-23抗体可以根据本发明经由多种递送方法施用于患者,所述递送方法包括SC或IM注射;经皮、肺部、经粘膜、植入物、渗透泵、药液筒、微型泵或其他技术人员知道的工具,如本领域众所周知的。
治疗应用
本发明还提供了使用本发明的至少一种IL-23抗体来调节或治疗细胞、组织、器官、动物或患者中的本领域公知或本文所述的狼疮的方法,例如用治疗有效量的IL-12/IL-23p40或IL-23特异性抗体施用或接触该细胞、组织、器官、动物或患者。
本发明的任何方法都可以包括将有效量的包含抗IL-23抗体的组合物或药物组合物施用于需要这种调节、治疗或疗法的细胞、组织、器官、动物或患者。这种方法可以任选地还包括用于治疗此类疾病或障碍的共同施用或联合疗法,其中施用所述至少一种抗IL-23抗体、其指定的部分或变体还包括在这之前、与此同时和/或在这之后施用至少一种选自以下的药剂:至少一种TNF拮抗剂(例如但不限于TNF化学拮抗剂或蛋白质拮抗剂、TNF单克隆或多克隆抗体或片段、可溶性TNF受体(例如p55、p70或p85)或其片段、融合多肽,或者小分子TNF拮抗剂例如TNF结合蛋白I或II(TBP-1或TBP-II)、奈瑞莫单抗、英夫利昔单抗、依那西普(EnbrelTM)、阿达木单抗(HumiraTM)、CDP-571、CDP-870、阿非莫单抗、来那西普等)、抗风湿药物(例如甲氨蝶呤、金诺芬、硫代葡萄糖金、硫唑嘌呤、硫代苹果酸金钠、硫酸羟氯喹、来氟米特、柳氮磺吡啶)、肌肉放松剂、麻醉剂(narcotic)、非甾类抗炎药物(NSAID)、止痛药、麻醉剂(anesthetic)、镇静剂、局部麻醉剂、神经肌肉阻断剂、抗微生物剂(例如氨基糖苷、抗真菌剂、抗寄生虫剂、抗病毒、碳青霉烯类、头孢菌素、氟喹诺酮、大环内酯、青霉素、磺胺药物、四环素、别的抗微生物剂)、抗银屑病剂、皮质类固醇、合成代谢类固醇、糖尿病相关药剂、矿物质、营养剂、甲状腺剂、维生素、钙相关激素、止泻剂、镇咳剂、止吐剂、抗溃疡剂、轻泻剂、抗凝剂、促红细胞生成素(例如红细胞生成素α)、非格司亭(例如G-CSF、Neupogen)、沙格司亭(GM-CSF、Leukine)、免疫接种剂、免疫球蛋白、免疫抑制剂(例如巴利昔单抗、环孢霉素、达克珠单抗)、生长激素、激素替代药物、雌激素受体调节剂、散瞳剂、睫状肌麻痹剂、烷基化剂、抗代谢物、有丝分裂抑制剂、放射性药物、抗抑郁药、抗躁狂剂、抗精神病药物、抗焦虑药物、催眠剂、拟交感神经药物、兴奋剂、多奈哌齐、他克林、哮喘药物、β激动剂、吸入类固醇、白三烯抑制剂、甲基黄嘌呤、色甘酸、肾上腺素或类似物、阿法链道酶(Pulmozyme)、细胞因子或细胞因子拮抗剂。合适的剂量是本领域众所周知的。参见例如Wells等人编辑,Pharmacotherapy Handbook,第二版,Appleton and Lange,Stamford,CT(2000);PDRPharmacopoeia,Tarascon Pocket Pharmacopoeia 2000,豪华版,Tarascon Publishing,Loma Linda,CA,2000年;Nursing 2001Handbook of Drugs,第21版,SpringhouseCorp.,Springhouse,PA,2001;Health Professional’s Drug Guide 2001,Shannon、Wilson、Stang编辑,Prentice-Hall,Inc,Upper Saddle River,NJ,这些参考文献各自以引用方式全文并入本文。
医疗性治疗
通常,狼疮的治疗受到施用有效量或剂量的抗IL-12/23p40或抗IL-23抗体组合物的影响,该组合物总计平均为从每剂量每千克患者至少约0.01毫克至500毫克的抗IL-12/23p40或抗IL-23抗体开始的范围,并且优选地为从每单次或多次施用至少约0.1毫克至100毫克抗体/千克患者开始的范围,取决于该组合物中所含活性剂的比活性。另选地,有效血清浓度可包括0.1-5000μg/ml血清浓度/单次或多次施用。合适的剂量是医学从业者已知的,当然要取决于具体疾病状态、待施用组合物的比活性,以及经历治疗的具体患者。在一些情况下,为了实现所需治疗量,可能有必要提供重复施用,即重复单独施用特定的监测剂量或计量剂量,其中单独施用可以重复直至实现所需日剂量或效果。
优选的剂量可以任选地包括0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99和/或100至500mg/kg/施用,或者它们的任何范围、数值或分数,或者用于实现以下血清浓度:0.1、0.5、0.9、1.0、1.1、1.2、1.5、1.9、2.0、2.5、2.9、3.0、3.5、3.9、4.0、4.5、4.9、5.0、5.5、5.9、6.0、6.5、6.9、7.0、7.5、7.9、8.0、8.5、8.9、9.0、9.5、9.9、10、10.5、10.9、11、11.5、11.9、20、12.5、12.9、13.0、13.5、13.9、14.0、14.5、4.9、5.0、5.5、5.9、6.0、6.5、6.9、7.0、7.5、7.9、8.0、8.5、8.9、9.0、9.5、9.9、10、10.5、10.9、11、11.5、11.9、12、12.5、12.9、13.0、13.5、13.9、14、14.5、15、15.5、15.9、16、16.5、16.9、17、17.5、17.9、18、18.5、18.9、19、19.5、19.9、20、20.5、20.9、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、96、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500和/或5000μg/ml血清浓度/单次或多次施用,或者它们的任何范围、数值或分数。
另选地,施用的剂量可根据已知的因素而变化,诸如特定试剂的药效特性及其施用方式和途径;接受者的年龄、健康和体重;症状的性质和程度、同时治疗的种类、治疗的频率以及期望的效果。通常活性成分的剂量可以是约0.1至100毫克/千克体重。通常,每次施用或以缓释形式施用0.1毫克/千克至50毫克/千克,优选地0.1毫克/千克至10毫克/千克,能够有效地获得期望的结果。
作为一个非限制性示例,人或动物的治疗可以在第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40天中的至少一天,或者另选地或除此之外,在第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51或52周中的至少一周,或者另选地或除此之外,在第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20年中的至少一年,或它们的任何组合,使用单个剂量、输注剂量或重复剂量,以每天0.1mg/kg至100mg/kg(诸如0.5、0.9、1.0、1.1、1.5、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、40、45、50、60、70、80、90或100mg/kg)本发明的至少一种抗体的一次性剂量或周期性剂量提供。
适合于内部给予的剂型(组合物),每单位或容器一般包含约0.001毫克至约500毫克的活性成分。在这些药物组合物中,基于组合物总重量,活性成分一般会以约0.5重量%至99.999重量%的量存在。
对于肠胃外给予,抗体可以配制成溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、粉剂或冻干粉剂,它们与可药用肠胃外用介质联合或分开提供。此类介质的示例是水、盐水、林格溶液、葡萄糖溶液和1%-10%的人血清白蛋白。也可以使用脂质体和非水性介质,诸如固定油。介质或冻干粉剂可含有维持等渗性(例如氯化钠、甘露糖醇)和化学稳定性(例如缓冲剂和防腐剂)的添加剂。可通过已知的或合适的技术对制剂进行灭菌。
合适的药用载体在Remington′s Pharmaceutical Sciences,A.Osol的最近版本(该领域的标准参考文本)中有描述。
替代性的施用
许多已知和开发的方式根据本发明可以用于施用药物有效量的抗IL-23抗体。尽管在下文描述中使用的是经肺施用,但其他施用方式也可根据本发明使用,得到合适的结果。本发明的IL-12/IL-23p40或IL-23抗体可以使用适用于经由本文所述或本领域公知吸入方式或其他方式施用的多种装置和方法中的任何一种,在载体中作为溶液剂、乳剂、胶体或混悬剂递送或作为干粉剂递送。
肠胃外用制剂及施用
用于肠胃外施用的制剂可含有作为普通赋形剂的无菌水或盐水、聚亚烷基二醇诸如聚乙二醇、植物来源的油、氢化萘等。注射用水性或油性混悬剂可通过使用适当的乳化剂或湿润剂和悬浮剂根据已知方法来制备。注射用药剂可以为无毒的、非经口施用的稀释剂,诸如溶于溶剂的水溶液剂、无菌注射液或混悬剂。作为可用的介质或溶剂,允许使用水、林格氏溶液、等渗盐水等;作为普通溶剂或悬浮溶剂,可以使用无菌不挥发油。为了这些目的,可以使用任何种类的不挥发性油和脂肪酸,包括天然的或合成的或半合成的脂肪油或脂肪酸;天然的或合成的或半合成的甘油单酯或甘油二酯或甘油三酯。胃肠外施用是本领域已知的,包括但不限于常规形式的注射、如美国专利5,851,198中所述的气压式无针注射装置和如美国专利5,839,446中所述的激光穿孔器装置,全文以引用方式并入本文。
另选的递送
本发明还涉及通过下列方式给予至少一种抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体:肠胃外、皮下、肌内、静脉内、关节内、支气管内、腹内、囊内、软骨内、腔内、体腔内、小脑内、脑室内、结肠内、颈内、胃内、肝内、心肌内、骨内、骨盆内、心包内、腹膜内、胸膜内、前列腺内、肺内、直肠内、肾内、视网膜内、脊柱内、滑膜内、胸内、子宫内、膀胱内、病灶内、快速浓注、阴道、直肠、口腔、舌下、鼻内或透皮方式。可以制备抗IL-12/IL-23p40或IL-23抗体组合物用于肠胃外(皮下、肌肉内或静脉内)或任何其他施用,特别是以液体溶液或悬浮液的形式;用于阴道或直肠施用,特别是半固体形态,诸如但不限于乳膏和栓剂;用于口腔或舌下施用,诸如但不限于片剂或胶囊剂形式;或鼻内,诸如但不限于粉末、滴鼻剂或气溶胶或某些药剂的形式;或透皮,诸如不限于凝胶、软膏、乳液、悬浮液或贴剂递送系统,该贴剂递送系统含有化学增强剂如二甲基亚砜以改变皮肤结构或增加透皮贴剂中的药物浓度(Junginger等人,″Drug Permeation Enhancement″,Hsieh,D.S.编辑,第59-90页,(Marcel Dekker,Inc.New York,1994年,以引用方式全文并入本文中),或含有氧化剂,其使得包含蛋白质和肽的制剂能够应用于皮肤上(WO 98/53847),或应用电场以产生瞬间转运途径,例如电穿孔,或增加带电药物通过皮肤的移动性,例如离子电渗疗法,或应用超声,例如透皮吸收超声波(美国专利4,309,989和4,767,402)(上述出版物和专利以引用方式全文并入本文)。
已总体地描述了本发明,通过参考下面的实例将更容易理解本发明,所述实例仅以示例的方式给出并且无意于作为限制。通过以下非限制性实例说明本发明的进一步细节。说明书中所有引文的公开内容以引用方式明确地并入本文。
背景技术
(优特克单抗)是全人G1κ单克隆抗体,其以高亲和力和特异性结合人白介素(IL)-12和IL-23细胞因子的共用p40亚基。优特克单抗包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的重链和SEQ ID NO:11的氨基酸序列的轻链;SEQ ID NO:7的重链可变结构域氨基酸序列和SEQ ID NO:8的轻链可变结构域氨基酸序列;SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ IDNO:3的重链CDR氨基酸序列;以及SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的轻链CDR氨基酸序列。优特克单抗与IL-12/23p40亚基的结合阻断IL-12或IL-23与自然杀伤细胞和CD4+T细胞表面上的IL-12Rβ1受体的结合,从而抑制IL-12和IL-23特异性细胞内信号传导以及随后的活化和细胞因子产生。IL-12和IL-23的异常调节与多种免疫介导的疾病相关联。
迄今为止,优特克单抗在全球范围内(包括北美、欧洲、南美和亚太地区的国家)已获得上市许可,用于治疗成年患者,包括患有慢性中度至重度斑块状银屑病和/或活动性银屑病性关节炎、克罗恩氏病(CD)和溃疡性结肠炎(UC)的那些患者。优特克单抗也正在用于治疗活动期系统性红斑狼疮(SLE)的3期研究中被评估。
制造过程概述
如本文所用,术语″培养物″、″培养″、″培养的″和″细胞培养物″是指在适于细胞群存活和/或生长的条件下悬浮在培养基中的细胞群。如本领域普通技术人员从上下文将清楚的是,如本文所用的这些术语也指包含细胞群体和细胞群悬浮于其中的培养基的组合。细胞培养物包括例如通过分批、分批补料或灌注细胞培养方法等生长的细胞。在某些实施方案中,细胞培养物是哺乳动物细胞培养物。
用于本发明的细胞系包括哺乳动物细胞系,包括但不限于中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)、人胚肾细胞(HEK细胞)、幼仓鼠肾细胞(BHK细胞)、小鼠骨髓瘤细胞(例如,NS0细胞和Sp2/0细胞)和人视网膜细胞(例如,PER.C6细胞)。
如本文所用,术语″化学成分确定的培养基″、″多个化学成分确定的培养基″、″化学成分确定的杂交瘤培养基″或″多个化学成分确定的杂交瘤培养基″是指其中所有组分的种类和浓度是已知的合成生长培养基。化学成分确定的培养基不合细菌、酵母、动物或植物提取物、动物血清或血浆,但它们可包括或可不包括单个植物或动物来源的组分(例如,蛋白质、多肽等)。化学成分确定的培养基可包含支持生长所需的无机盐,诸如磷酸盐、硫酸盐等。碳源是确定的,并且通常为糖诸如葡萄糖、乳糖、半乳糖等,或其他化合物诸如甘油、乳酸酯、乙酸酯等。虽然某些化学成分确定的培养基还使用磷酸盐作为缓冲剂,但也可使用其他缓冲剂,诸如柠檬酸盐、三乙醇胺等。可商购获得的化学成分确定的培养基的示例包括但不限于ThermoFisher的CD杂交瘤培养基和CD杂交瘤AGTTM培养基、各种Dulbecco′sModified Eagle′s(DME)培养基(Sigma-Aldrich Co;SAFC Biosciences,Inc),Ham′s营养物混合物(Sigma-Aldrich Co;SAFC Biosciences,Inc),它们的组合等。制备化学成分确定的培养基的方法是本领域已知的,例如在美国专利6,171,825和6,936,441、WO 2007/077217以及美国专利申请公布2008/0009040和2007/0212770中。
如本文所用,术语″生物反应器″是指可用于细胞培养物生长的任何容器。生物反应器可为任何尺寸,只要其可用于培养的细胞。在某些实施方案中,此类细胞是哺乳动物细胞。通常,生物反应器将为至少1升并且可为10升、100升、250升、500升、1,000升、2,500升、5,000升、8,000升、10,000升、12,000升或更大,或其间的任何体积。在培养周期期间任选地控制生物反应器的内部条件,包括但不限于pH和温度。生物反应器可由适于保持悬浮在本发明培养条件下的培养基中的哺乳动物细胞培养物的任何材料构成,包括玻璃、塑料或金属。如本文所用,术语″制备生物反应器″是指用于制备感兴趣的多肽或糖蛋白的最终生物反应器。制备生物反应器的体积通常为至少500升,并且可为1,000升、2,500升、5,000升、8,000升、10,000升、12,000升或更大,或其间的任何体积。本领域的普通技术人员将意识到并且将能够选择用于实施本发明的合适的生物反应器。
在第1阶段和第2阶段执行优特克单抗的预培养、扩增和制备。在第1阶段,从表达优特克单抗的HC和LC序列的转染的Sp2/0细胞的一个或多个工作细胞库小瓶引发预培养,并且在培养瓶、一次性培养袋和100L种子生物反应器中扩增。培养细胞直至获得接种500L制备生物反应器所需的细胞密度和体积。在第2阶段中,使用交替切向流(ATF)中空纤维过滤器细胞保留系统在500L制备生物反应器中灌注细胞培养物。从ATF系统收集细胞培养渗透物(收获物),同时将细胞保留在生物反应器内,并且用新鲜培养基补充培养物。来自一个或多个500L制备生物反应器的收获物可在第3阶段中组合。使用MabSelect蛋白质A树脂亲和色谱纯化收获物。将所得的直接产物捕获(DPC)洗脱物冷冻直到进一步处理。
在第4阶段至第8阶段中,通过离子交换色谱步骤以及灭活或去除潜在病毒污染的步骤(溶剂/洗涤剂[S/D]处理和病毒去除过滤)执行优特克单抗从DPC的纯化。将DPC洗脱物在第4阶段中解冻、合并并过滤,并且在第5阶段中用磷酸三正丁酯(TNBP)和聚山梨酸酯80S/D处理温育以使存在的任何脂质包膜病毒失活。使用琼脂糖阳离子交换树脂色谱,在第6阶段中从优特克单抗中去除TNBP和聚山梨酸酯80试剂、聚集体和杂质。在第7阶段中使用琼脂糖阴离子交换树脂色谱进一步纯化优特克单抗以去除DNA、病毒和杂质。在第8阶段中,将纯化的优特克单抗稀释并通过病毒保留型过滤器过滤。
在第9阶段和第10阶段中分别执行优特克单抗预配制本体(PFB)和配制本体(FB)的制备。在第9阶段中,超滤步骤浓缩优特克单抗,并且渗滤步骤添加制剂赋形剂并去除过程中缓冲盐。在第10阶段中将聚山梨酸酯80添加到优特克单抗PFB中以获得FB。将FB过滤到聚碳酸酯容器中用于冷冻储存。将冷冻的FB包装在具有干冰的隔热容器中,以运输到药品制造场所。
大规模制造过程中细胞培养的详细描述
第1阶段
预培养和扩增
优特克单抗制备的第一阶段是从表达优特克单抗的HC和LC序列的转染Sp2/0细胞的工作细胞库(WCB)小瓶引发预培养,并且在培养瓶、一次性培养袋和100L种子生物反应器中扩增。培养细胞直至获得接种500L制备生物反应器所需的细胞密度和体积。图2中提供了描绘预培养和扩增过程的流程图。
制造程序
将WCB的一个或多个冷冻保存的小瓶解冻并用补充有6mM L-谷氨酰胺、0.5mg/L霉酚酸、2.5mg/L次黄嘌呤和50mg/L黄嘌呤(CDH-A)的CD(化学成分确定的)杂交瘤培养基稀释。培养物活性必须≥45%。在培养瓶中用CDH-A将细胞进一步稀释到0.2×106至0.5×106个活细胞(VC)/mL的接种密度。将预培养物保持在潮湿的CO2温育箱中,其中将温度、CO2浓度和搅拌控制在批次记录中限定的范围内。将预培养物温育≤3天,直到获得≥0.6×106VC/mL的最小细胞密度和≥50%的培养物活性。将预培养物在一系列培养瓶中顺序地扩增,并且然后将培养袋作为扩大以接种100L种子生物反应器的机构。在培养物扩增阶段期间,每个温育步骤花费≤3天来实现传代条件,这需要≥0.6×106VC/mL的细胞密度和≥80%的培养物活性。每次传代的接种密度在培养瓶中为0.2至0.5×106VC/mL,并且在培养袋中为0.2至0.6×106VC/mL。针对活细胞密度(VCD)、培养物活性和显微镜检查对每次传代取样。在接种100L种子生物反应器之前,针对生物负荷对预培养物取样。
预培养物扩增可在解冻后保持最多30天。丢弃在30天内未使用的预培养物。可维持如上所述进行扩增,并经受与初级预培养物相同的过程中监测、对照测试和过程参数的备用预培养物,并根据需要将其用于接种另一个100L种子生物反应器。
当预培养物满足接种标准时,将培养袋的内容物转移到包含CDH-A的100L种子生物反应器中以达到≥0.3×106VC/mL的接种密度。将种子生物反应器培养物的pH、温度和溶解氧浓度控制在批次记录中限定的范围内。将培养物扩增,直到获得≥1.5×106VC/mL的细胞密度和≥80%的培养物活性。在整个种子生物反应器过程中,针对VCD、培养物活性和显微镜检查对培养物取样。在接种500L制备生物反应器之前,针对生物负荷对培养物取样。
当种子生物反应器培养物的VCD达到≥1.5×106VC/mL时,可将培养物用于接种500L制备生物反应器。另选地,可将培养物的一部分从100L种子生物反应器中抽出,并将剩余的培养物用新鲜培养基稀释。在该″抽出和填充″过程之后,允许培养物扩增至足够的细胞密度以接种500L制备生物反应器。100L种子生物反应器培养物的最大持续时间是接种后9天。
第2阶段
生物反应器制备
在第2阶段中,使用交替切向流中空纤维过滤器细胞保留系统(ATF系统)在500L制备生物反应器中连续灌注细胞培养物。从ATF系统收集细胞培养渗透物(收获物),同时将细胞返回到生物反应器,并且用新鲜培养基补充培养物。图3中提供了描绘生物反应器制备过程的流程图。
制造程序
通过将100L种子生物反应器的内容物转移到包含CD(化学成分确定的)杂交瘤培养基的500L制备生物反应器中来执行500L制备生物反应器的接种,该CD杂交瘤培养基补充有6mM L谷氨酰胺、0.5mg/L霉酚酸、2.5mg/L次黄嘌呤和50mg/L黄嘌呤(CDH-A)。转移的体积必须足以达到≥0.3×106个活细胞(VC)/mL的接种密度。将培养物维持在34℃至38℃的温度、6.8至7.6的pH和1%至100%的溶解氧(DO)浓度下。
开始连续灌注,并将培养物从500L生物反应器抽入到ATF系统中以将细胞与渗透物分离。渗透物通过0.2μm ATF过滤器过滤并作为收获物收集在生物过程容器(BPC)中。将细胞返回到生物反应器中,并且提供新鲜的CDH-A以维持恒定的培养物体积。在制备运行期间监测活细胞密度(VCD)、培养物活性、pH、DO、温度和免疫球蛋白G(IgG)含量。灌注速率与VCD成比例逐渐增加,直到达到每天大约一个生物反应器体积的目标速率。灌注速率被控制为不超过每天1.20个生物反应器体积。在过滤器上的IgG保留超过50%之前,监测ATF系统的保留以有利于ATF过滤器的关闭。
当500L生物反应器内的VCD达到8.0×106VC/mL时或在第10天(以先发生者为准),pH目标从7.2降低至7.1。生物质去除在第20天或当达到12.0×106VC/mL的VCD时开始,以先发生者为准。以每天至多20%生物反应器体积的速率,将生物质从500L制备生物反应器中去除到BPC中。针对生物负荷对每次收获物取样。
在500L制备生物反应器中的连续灌注细胞培养操作在接种后持续至多46天。在制备结束时,针对支原体和外来病毒测试对培养物取样。在从生物反应器断开后,可将收获物在2℃至8℃下储存≤30天。
在CHO细胞中表达的优特克单抗的小规模制备的描述
表达优特克单抗的CHO细胞的产生
CHO细胞系最初由T.T.Puck从成年中国仓鼠的卵巢中产生。CHO-K1(CCL-61)是缺少脯氨酸合成基因的亲本CHO细胞系的亚克隆。CHO-K1也保藏在欧洲细胞培养物保藏中心CHO-K1(ECACC 85051005)。Celltech Biologics(现为Lonza Biologics)建立了CHO-K1的主细胞库(MCB)即024M,用于使CHO-K1适应悬浮培养和无血清培养基。适应的细胞系称为CHOK1SV。使CHOK1SV细胞系在无蛋白质培养基中进一步适应,以产生称为269-M的细胞MCB。如下所述转染来源于269-M MCB的细胞,以产生表达优特克单抗的CHO细胞系。
使用细胞培养板和摇瓶在37℃和5%CO2的加湿培养箱中生成、扩增和维持细胞系。摇瓶中的常规接种密度为3×105个活细胞/mL(vc/mL)。所有摇瓶培养物保持在130转/分钟(rpm),轨道为25mm,深孔个数为96(DW,Thermo Scientific,Waltham,MA,目录号278743),培养物保持在800rpm,轨道为3mm。
使用标识为MACH-1(一种用于CHO细胞培养的内部开发的化学成分确定的培养基)的培养基产生表达优特克单抗的CHO克隆。用于CHO宿主细胞系常规传代的基础培养基是补充有6mM L-谷氨酰胺(Invitrogen,Carlsbad,CA,目录号25030-081)的MACH-1。除非另有说明,否则使用谷氨酰胺合成酶(GS)基因转染的CHO细胞在MACH-1+MSX(补充有25μM L-甲硫氨酸亚砜亚胺(MSX,Sigma,St.Louis,MO,目录号M5379-1G)的MACH-1,以抑制谷氨酰胺合成酶的功能)中生长。对于大剂量分批补料摇瓶和生物反应器实验,在MACH-1+F8(补充有8g/kg F8(专有生长增强剂的补充剂)的MACH-1,以进一步支持细胞生长和抗体产生)中培养细胞。专有进料培养基用于摇瓶和生物反应器实验。
将编码感兴趣的基因的DNA克隆到谷氨酰胺合成酶(GS)双基因表达质粒(LonzaBiologics)中。重链(HC)和轻链(LC)基因的表达由单独的人巨细胞病毒(hCMV-MIE)启动子驱动。由猿猴病毒SV40启动子驱动的GS基因选择标记允许在存在MSX的情况下在无谷氨酰胺的培养基中选择转染的细胞。
在每次转染之前,通过限制酶消化来线性化含有优特克单抗的HC和LC编码区两者的质粒DNA的1个等分试样。使用BTX ECM 830细胞融合仪(Harvard Apparatus,Holliston,MA)将线性化的15μg DNA等分试样转染到1×107个细胞等分试样中。将细胞在4mm间隙比色皿中以15毫秒脉冲长度和5秒脉冲间隔在250伏特下电穿孔3次。将经转染的细胞转移至处于摇瓶中的MACH-1+L-谷氨酰胺中并温育1天。将转染物离心,然后重悬于MACH-1+25uM MSX中进行选择,并转移到摇瓶中温育6天。
在化学选择后,将细胞接种在达尔伯克氏改良伊格尔培养基(DMEM)基础培养基中的含有2.5%(w/v)甲基纤维素的定制无谷氨酰胺的Methocult培养基(Methocult,StemCell Technologies,Inc.,Vancouver,BC,目录号03899)中的单细胞悬浮液中。工作溶液还含有30%(v/v)经γ射线辐照的透析胎牛血清(dFBS.IR,Hyclone,Logan,UT,目录号SH30079.03)、1x GS补充剂(SAFC,St.Louis,MO,目录号58672-100M)、1.5mg无动物组分的蛋白G Alexa Fluor 488缀合物(蛋白G,Invitrogen,Carlsbad,CA,目录号C47010)、25μMMSX、具有F12的达尔伯克氏改良伊格尔培养基(DMEM/F12,Gibco/Invitrogen,Carlsbad,CA,目录号21331-020)和细胞悬浮液。
蛋白G识别人单克隆抗体并与细胞分泌的IgG结合。蛋白G与荧光标记Alexa Fluor488缀合,使得分泌最多抗体的细胞集落将显示最高水平的荧光。温育12至18天后,使用ClonePix FL集落选取仪(Molecular Devices,Sunnyvale,CA)将具有最高荧光水平的集落选取到96孔板中的100μL含酚红的MACH-1+MSX中,并在不摇动的情况下温育5-7天。5-7天后,通过向96DW板(Thermo Scientific,Waltham,MA,目录号278743)中的50-100μL含酚红的MACH-1+MSX中添加来扩增来自96孔板的细胞,并以800rpm摇动,轨道为3mm。对96DW平板补料,并在96DW接种后7天经由Octet(ForteBio,Menlo Park,CA)进行滴定。将对应于最高批次96DW过度生长滴度的前10个培养物扩大到MACH-1+MSX中的摇瓶中,并用悬浮在含有10%DMSO的MACH-1+MSX培养基中的细胞创建冷冻细胞库。
用于小规模制备的细胞培养
如在Sp2/0细胞中表达的优特克单抗的大规模制备中那样,在第1阶段和第2阶段中执行预培养、细胞扩增和细胞制备,以用于在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中表达的优特克单抗的小规模制备。在第1阶段中,从表达优特克单抗HC和LC序列的转染CHO细胞的单个细胞库小瓶开始预培养,然后在培养瓶中扩增细胞。培养细胞直至获得接种10L制备生物反应器所需的细胞密度和体积。在第2阶段中,细胞培养物在10L制备生物反应器中以分批补料模式运行。在15天生物反应器运行的持续时间内,根据需要用基于浓缩葡萄糖和基于氨基酸的进料来对培养物补料。在制备生物反应器运行完成时,澄清细胞培养收获物以去除生物质并过滤以进行进一步加工。
小规模制备的纯化
用于小规模制备优特克单抗的纯化步骤与大规模制造过程相同,不同的是小规模制备省略了第8阶段病毒过滤步骤。简而言之,对于小规模制备,在第3阶段至第7阶段中通过亲和和离子交换色谱步骤以及灭活或去除潜在病毒污染的步骤(溶剂/洗涤剂处理和病毒去除)的组合执行从细胞培养物收获物中纯化优特克单抗。在第3阶段中,使用蛋白质A亲和色谱来澄清和纯化收获物和/或合并的收获物。将所得的直接产物捕获(DPC)洗脱物冷冻直到进一步处理。将DPC洗脱物过滤并在解冻后的第4阶段中合并,并且随后在第5阶段中用磷酸三正丁酯(TNBP)和聚山梨酸酯80(PS 80)处理以使可能存在的任何脂质包膜病毒失活。
在第6阶段中,使用阳离子交换色谱从优特克单抗产物中去除TNBP和PS 80试剂以及杂质。在第7阶段中使用阴离子交换色谱进一步纯化优特克单抗产物以去除DNA、可能存在的病毒和杂质。如上所述,从CHO来源的优特克单抗产物纯化过程中省略了通过病毒截留过滤器的第8阶段过滤。
分别在第9阶段和第10阶段中执行优特克单抗预配制本体(PFB)和配制本体(FB)的最终制备(参考大规模阶段)。在第9阶段中,超滤步骤浓缩优特克单抗产物,并且渗滤步骤添加制剂赋形剂并去除过程中缓冲盐。在第10阶段中将聚山梨酸酯80添加到优特克单抗PFB中以获得FB,并且将FB过滤到聚碳酸酯容器中用于冷冻储存。
方法
用于测定活细胞密度(VCD)和活性%的方法
通常使用制造商提供的方案、软件和试剂,用Beckman Coulter Vi-CELL-XR细胞活性分析仪来测定总细胞/ml、活细胞/ml(VCD)和活性%。另选地,还使用了CEDEX自动化细胞计数系统。然而,还应当注意,用于测定VCD和活性%的其他方法是本领域技术人员熟知的,例如使用血细胞计数器和台盼蓝排除法。
生物活性测定
通过IL-12反应性人自然杀伤细胞系NK-92MI(CRL-2408)中和IL-12诱导的干扰素-γ(IFN-γ)产生来测定优特克单抗的生物活性。优特克单抗结合IL-12的p40亚基并阻碍与NK细胞的细胞表面上的IL-12Rβ1相互作用。这导致阻断IL-12介导的IFN-γ产生(Aggeletopoulou I等人,Interleukin 12/interleukin 23pathway:Biological basisand therapeutic effect in patients with Crohn′s disease.World JGastroenterol.2018;24(36):4093-4103)。简而言之,该测定方法涉及将NK-92MI细胞与重组人IL-12(rhIL-12)一起温育,并比较在存在或不存在优特克单抗的情况下细胞分泌的IFN-γ水平。使用抗IFN-γ抗体通过酶联免疫吸附测定(ELISA)来量化IFN-γ的水平(参见例如Jayanthi S等人,Modulation of Interleukin-12 activity in the presenceofheparin.Sci Rep.2017;7(1):5360)。
用于测定低聚糖组成的方法
通过HPLC测定低聚糖组成
使用具有Chemstation/Chemstore软件的Agilent 1100/1200系列HPLC系统,通过具有荧光检测的正相阴离子交换HPLC方法测定优特克单抗的N连接的低聚糖组成。为了对聚糖的相对量进行定量,首先使用N-聚糖酶(PNGase F)从还原且变性的测试制品裂解N连接的低聚糖。将所释放的聚糖使用邻氨基苯甲酸进行标记,使用0.45μm尼龙过滤器通过过滤进行纯化,并且通过具有荧光检测的HPLC进行分析。HPLC色谱图充当可用于对样品中存在的N连接的低聚糖的相对量进行鉴定和定量的分布图。通过与低聚糖标准品共洗脱并根据广泛表征的历史结果通过保留时间来鉴定聚糖。图4中示出了优特克单抗的代表性HPLC色谱图。
每种聚糖的量均通过峰面积积分来定量并且表示为总聚糖峰面积的百分比(峰面积%)。报告了G0F、G1F、G2F、总中性物质和总带电聚糖的结果。其他中性物质是17分钟至35分钟之间所有积分峰的总和,不包括对应于G0F、G1F和G2F的峰。总中性聚糖是G0F、G1F、G2F和其他中性物质的总和。总带电聚糖是在42分钟至55分钟之间洗脱的所有单唾液酸化聚糖峰以及在78分钟至90分钟之间洗脱的所有双唾液酸化聚糖峰的总和。
将低聚糖标准品(G0F、G2F、G2F+N-乙酰神经氨酸(NANA)和G2F+2NANA)的混合物作为标记反应的阳性对照、作为峰鉴定的标准品以及作为系统适用性的量度来并行分析。购自Prozyme的重构的低聚糖G0F(目录号GKC-004301)、G2F(目录号GKC-024301)、SA1F(目录号GKC-124301)和SA2F(目录号GKC-224301)或等同物用作参考标准品。出于系统适用性目的,还运行方法空白阴性对照和预标记的G0F标准品。在执行低聚糖作图程序期间,应用以下系统适用性和测定(测试制品)接受标准,以产生有效的结果:
系统适用性标准:
·低聚糖标准品中G0F峰与G2F峰之间的分辨率(USP)必须≥3.0。
·低聚糖标准品中G0F峰的理论塔板数(切线法)必须≥5000。
·优特克单抗参考标准品的总聚糖峰面积必须≥预标记的G0F的主聚糖峰面积的1.5倍。
·如果任何参考标准品聚糖峰超出标度,则将参考标准品以较小的进样体积重新进样。
·优特克单抗参考标准品中G0F峰的保留时间必须在低聚糖标准品中G0F保留时间的0.4分钟内。
测定接受标准:
·方法空白必须没有与优特克单抗中指定的低聚糖峰共洗脱的可检测峰。
·每个测试制品的总聚糖峰面积必须≥预标记的G0F标准品的主聚糖峰面积的1.5倍。
·如果任何样品聚糖峰超出标度,则将该样品连同正常体积的预标记的G0F、低聚糖标准品、方法空白和参考标准品一起以较小的进样体积重新进样。
·每个测试制品中G0F峰的保留时间必须在低聚糖标准品中G0F峰的保留时间的0.4分钟内。
·如果测定未能满足任何接受标准,则测定无效。
通过IRMA测定低聚糖组成
IdeS-RMA(IRMA)方法允许在用(酿脓链球菌(Streptococcuspyogenes)的IgG降解酶(IdeS),购自Genovis AB(SKU:A0-FR1-050))酶促处理免疫球蛋白G(IgG)之后通过减少质量分析(RMA)区分主要糖型。还可参见例如美国专利7,666,582。减少质量分析(RMA)涉及抗体的二硫键还原,之后是抗体的重链及其附接的聚糖部分的完整质量分析。由于存在N末端修饰(诸如焦谷氨酸盐形成和羧化),一些抗体显示出很大程度的异质性。因此,二硫化物还原和重链质量测量会产生复杂解卷积峰模式。因此,在一些应用中,与使用还原剂诸如二硫苏糖醇(DTT)生成轻链和重链相比,更期望蛋白水解生成抗体片段。传统上,使用木瓜蛋白酶和胃蛋白酶来生成抗体片段,所有这些过程都很费力。用胃蛋白酶裂解IgG需要广泛优化,并且其在低酸性pH下进行。木瓜蛋白酶需要激活剂,并且F(ab’)2和Fab均可取决于反应条件获得,从而产生异质的片段库。这些缺点可以通过使用新型酶来避免。裂解过程非常快速、简单,重要的是不需要优化。其在中性pH下进行,从而生成精确的F(ab’)2和Fc片段。没有观察到通常与其他蛋白水解酶如胃蛋白酶或木瓜蛋白酶相关的进一步降解或过度消化。重要的是,由于仅裂解重链中二硫桥的C末端,因此不需要还原步骤,并且获得完整F(ab′)2和两个残余的Fc片段。
定义
·H:己糖(甘露糖、葡萄糖和半乳糖)
·Man5:甘露糖5
·N:N-乙酰基己糖胺(N-乙酰基葡糖胺和N-乙酰基半乳糖胺)
·F:岩藻糖
·S:唾液酸(N-乙酰神经氨酸(NANA)和N-羟乙酰神经氨酸(NGNA))
·G0:无唾液酸-无半乳糖-无岩藻糖基化双触角低聚糖
·G0F:无唾液酸-无半乳糖-岩藻糖基化双触角低聚糖
·G1:无唾液酸-单半乳糖基化-无岩藻糖基化双触角低聚糖
·G1F:无唾液酸-单半乳糖基化-岩藻糖基化双触角低聚糖
·G2:无唾液酸-二半乳糖基化-无岩藻糖基化双触角低聚糖
·G2F:无唾液酸-二半乳糖基化-岩藻糖基化双触角低聚糖
·GlcNAc:N-乙酰基-D-葡糖胺
·Lys:赖氨酸
·-Lys:截短的重链(不存在C末端赖氨酸残基)
·+Lys:含有C末端赖氨酸的重链
·ppm:每一百万份中的份数
设备
·Thermo Scientific Q Exactive(Plus)质谱仪
·Agilent 1200 HPLC系统
·Applied Biosystems POROS R2/10 2.1mm D×100mm L柱
·Thermo Scientific Q Exactive Tune软件
·Thermo Scientific蛋白质解卷积软件
·能够称量0.01mg的分析天平
·涡旋混合器,任何合适的型号
·水浴或加热块,任何合适的型号
·校准的温度计-10℃至110℃,任何合适的型号
·校准的移液管
·微型离心机,任何合适的型号
程序
样品的IdeS消化
·样品(等于50μg IgG)。
·将1μl(50单位)IdeS酶添加到50μg IgG中,短暂涡旋,快速离心,并在37℃下温育30分钟(储备酶为5000单位/100μl,1单位的酶在37℃下在30分钟内完全消化1μg IgG)
·将样品快速离心并转移到LC-MS小瓶中,并将样品小瓶加载到Agilent 1200自动取样机中
LC-MS方法
溶液制备
·移动相A(0.1%甲酸(FA)的超纯水溶液)-将999mL超纯水添加到1L HPLC移动相瓶中,添加1mL FA并搅拌。该溶液可以在室温下保存2个月。
·移动相B(0.1%FA,99.9%乙腈)-将999mL乙腈添加到1L HPLC移动相瓶中,添加1mL FA并搅拌。该溶液可以在室温下保存2个月。
LC方法
·柱:Applied Biosystems POROS R2/10 2.1mm D×100mm L
·柱温:60℃
·自动取样机温度:4℃
·流速:300μL/min
·进样体积:5μL
·移动相A:0.1%FA的超纯水溶液
·移动相B:0.1%FA的乙腈溶液
表1:LC梯度表
MS方法
扫描参数:
·扫描类型:全MS
·扫描范围:700至3500m/z
·碎片化:源内CID 35.0eV
·分辨率:17500
·极性:正
·锁定质量:开,m/z 445.12002
·AGC目标:3e6
·最大进样时间:250
HESI源:
·鞘气流速:32
·辅助气流速:7
·吹扫气流速:0
·喷雾电压(|kV|):4.20
·毛细管温度(℃):280
·S-透镜RF电平:55.0
·加热器温度(℃):80
数据分析
基于解卷积质谱的分析记录每种检测到的聚糖种类的相对含量。图5示出了在Sp2/0细胞中产生的优特克单抗的IRMA分析的代表性解卷积质谱。通过IRMA分析确定的主要结构包括例如G0(H3N4)、G0F(H3N4F1)、G1F-GlcNAc(H4N3F1)、H5N3、G1(H4N4)、H5N3F1、G1F(H4N4F1)、G2(H5N4)、G2F(H5N4F1)、G1FS(H4N4F1S1)、H6N4F1、G2FS(H5N4F1S1)、H7N4F1、H6N4F1S1、G2FS2(H5N4F1S2)。监测这些结构中的每一个的百分比。测量的峰强度表示归一化后每个结构的百分比(占分配总数的百分比)。观察到的质量在100ppm质量偏差阈值之外的聚糖不包括在计算中,例如(*G1F-GlcNAc-Lys、*H5N3-Lys、*G1-Lys、*H5N3F1-Lys和*G2-Lys)。如所指出的那样,这些用星号(″*″)表示。而且,Man5-Lys并不总是在光谱中检测到,因为它具有非常低的强度,但它在存在时会考虑并包括在计算中。如在具有和不具有末端赖氨酸的Fc片段的两种同种型上检测到的,计算聚糖的百分比,例如G0F百分比为(%G0F-Lys+%G0F+Lys)。仅在重链同种型中的一种上检测到的结构用双星号(″**″)表示,例如**G1F-GlcNAc-Lys、**H5N3-Lys、**H5N4-Lys和**H5N3F1+Lys。大多数这些结构是低丰度的,无法从具有较高强度的相邻峰中分辨出来,或者低于该方法的检测能力。
*注意:HPLC与IRMA方法之间的差异(例如,参见下表2)可能是由在HPLC中共洗脱多个种类以及IRMA低估一些唾液酸化种类而引起的,因为一些强度非常接近IRMA方法的检测能力的极限。
表2:在Sp2/0细胞中产生的代表性优特克单抗样品的IRMA和HPLC的聚糖丰度比较
毛细管等电聚焦
毛细管等电聚焦(cIEF)基于总电荷或等电点(pI)分离蛋白质。该方法用于监测优特克单抗中基于电荷的同种型的分布。与基于凝胶的IEF程序不同,cIEF提供了对存在的带电物质的定量测量。另外,与基于凝胶的方法相比,cIEF显示出增加的分辨率、灵敏度和重现性。该测定在可商购获得的成像cIEF分析仪上进行,该分析仪配备有能够在≤30℃的周围环境中保持样品温度≤10.5℃的自动取样机,诸如Alcott自动取样机(GP Instruments,Inc.)。该分析采用不具有外壁聚酰亚胺涂层的内壁涂覆的二氧化硅毛细管,以允许整个柱检测。另外,使用稀磷酸和甲基纤维素的阳极电解液、氢氧化钠和甲基纤维素的阴极电解液以及宽范围(pH 3-10)和窄范围(pH 8-10.5)两性电解质的限定混合物。该测定用羧肽酶B(CPB)对测试制品和参考标准品(RS)两者进行预处理,该羧肽酶B去除重链C末端赖氨酸并消除由于存在多个C末端变体而引起的模糊度。图6中示出了在Sp2/0细胞中表达的优特克单抗的代表性cIEF电泳图,并且图9中示出了在CHO细胞中表达的优特克单抗的代表性cIEF电泳图。
在每次分析之前,将自动取样机温度设定点设定为4℃,将自动取样机预冷至少30分钟,并且将实验室的周围室温保持≤30℃。在开始样品制备之前,将预处理的测试制品和RS、样品小瓶、小瓶插件、测定中所用的试剂(包括纯化水)、含有N,N,N′,N′-四甲基乙二胺(TEMED)的母液(其优化毛细管内的聚焦)、两性电解质、用于内部标准品的pI 7.6和9.5标志物以及甲基纤维素(MC)在冰上保持至少30分钟。在冰上制备样品,记录添加母液的时间并控制对TEMED的暴露。该测定必须在该添加后180分钟内完成。按照下表(表3)的顺序进样系统适用性对照一次,并且进样测试制品和RS两次:
表3:样品运行顺序
样品名称 | 样品小瓶位置 | 进样次数 |
系统适用性 | 1 | 1 |
空白 | 2 | 1 |
CPB对照 | 3 | 1 |
CPB处理的RS | 4 | 2 |
CPB处理的样品1 | 5 | 2 |
CPB处理的RS | 6 | 2 |
在通过注射器泵将样品进样毛细管中之后,在毛细管上施加电场(3kV)8分钟,形成pH梯度,并根据等电点(pI)分离优特克单抗的基于电荷的同种型。通过在280nm下对整个毛细管成像来检测毛细管中的蛋白质同种型,并且数据以作为pI值与A280的函数的电泳图形式呈现。使用仪器软件通过与内部pI标准(pI 7.6和9.5)比较来指定pI值,并且使用标准数据采集软件根据电泳图确定峰面积。报告所有峰≥LOD一式两份进样的平均pI和平均峰面积百分比、与参考标准相比的ΔpI值以及峰面积百分比。
对制造控制策略的介绍
在大规模商业生产期间,开发了制造控制策略以保持治疗性蛋白质(例如,治疗性抗体如优特克单抗)在低聚糖谱、生物活性(效能)和/或药物物质(DS)和药物产品(DP)的其他特征方面的一致DS和DP特征(例如,参见表4和表5中确定的特性)。例如,在制造过程的第10阶段,作为配制本体(FB)的过程中控制监测优特克单抗糖基化,对于平均总中性低聚糖%、总带电低聚糖%和单个中性低聚糖种类%G0F、G1F和G2F具有适当的上限和下限规格。如本文所用,术语″药物物质″(缩写为″DS″)和″药物产品″(缩写为″DP″)是指用作商业药物的组合物,例如用于临床试验或作为市售药物。DS是旨在在疾病的诊断、治愈、缓和、治疗或预防中提供药理活性或其他直接作用或者影响人体的结构或任何功能的活性成分。在制造过程中产生的配制本体(FB)是药物物质(DS)。DP(也称为药学产品、药品、药物或药剂)是用于疾病的诊断、治愈、缓和、治疗或预防或者用于影响人体结构或任何功能的药物。DP是已被制备为用于销售和/或施用于患者的药学产品的DS。
如表4所示,在Sp2/0细胞和CHO细胞中产生的优特克单抗的单体%、纯度%和生物活性%仅有非常小的差异。然而,cIEF谱存在显著差异,这主要是由在Sp2/0细胞和CHO细胞中产生的优特克单抗的低聚糖谱差异引起的。对于在Sp2/0细胞和CHO细胞中产生的优特克单抗的cIEF谱的比较,还可以参见例如图6和图9。
表4:在Sp2/0细胞和CHO细胞中表达的所选优特克单抗特性的代表性比较
优特克单抗的低聚糖谱
优特克单抗在每条重链上的单个位点处即在天冬酰胺299上被N-糖基化。这些N连接的低聚糖结构可以是通过天冬酰胺残基的伯胺与蛋白质连接的一组双触角低聚糖结构中的任何一个,但在优特克单抗上,它们主要由双触角核心-岩藻糖基化种类组成,具有半乳糖和唾液酸异质性。主要的单个低聚糖种类包括例如″G0F″(无唾液酸、无半乳糖核心-岩藻糖基化双触角聚糖)、″G1F″(无唾液酸、单半乳糖核心-岩藻糖基化双触角聚糖)和″G2F″(无唾液酸、二半乳糖核心-岩藻糖基化双触角聚糖)。图7中示出了优特克单抗IgG中一些主要N连接的低聚糖种类的图解概述铟。还示出了一些酶在糖基化成熟过程中的作用,包括一些二价阳离子(例如,Mn2+和Cu2+)在这些酶促过程中的作用。
HPLC是一种用于在制造过程中分析优特克单抗的糖基化的分析程序。为了通过HPLC进行分析,首先将聚糖从重链中酶促裂解,然后用荧光标记进行标记以允许检测。在该方法中,可以区分G0F、G1F和G2F的不带电峰,以及较小中性峰的子集。此外,还可以观察到差异唾液酸化材料的峰(图4)。用于低聚糖分析的另一种方法是IRMA,这是一种使用酿脓链球菌(IdeS)的免疫球蛋白G(IgG)降解酶的减少质量分析(RMA)方法,其允许在酶促处理IgG后区分主要糖型。图5示出了在Sp2/0细胞中产生的优特克单抗的IRMA分析的代表性解卷积质谱。对于优特克单抗,低聚糖结构上的唾液酸化度与电荷异质性之间也存在直接关系,如通过cIEF、IRMA或HPLC所测定(参见例如图4、图5、图6、图8和图9)。
控制低聚糖谱
控制低聚糖谱很关键,因为重组单克隆抗体的低聚糖谱的改变可显著影响抗体生物学功能。例如,生物学研究已表明,不同糖型在Fc区上的分布可显著影响抗体功效、稳定性和效应子功能(J.Biosci.Bioeng.2014 117(5):639-644;Bio-Process Int.2011,9(6):48-53;Nat.Rev.Immunol.2010,10(5):345-352)。具体地讲,无岩藻糖基化(J.Mol.Biol.368:767-779)和半乳糖基化(Biotechnol.Prog.21:1644-1652)可在抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)和补体依赖性细胞毒性(CDC)(抗体通过免疫功能介导杀伤靶细胞的两种重要机制)中发挥巨大作用。另外,已证明高甘露糖水平通过增加抗体的清除而不利地影响功效(Glycobiology.2011,21(7):949-959),并且唾液酸含量可影响抗炎活性(Antibodies.20132(3):392-414)。由于低聚糖谱的变化具有这些生物学后果,监管机构需要控制抗体糖基化模式,以确保遵守一致、安全和有效产品的批次发布规范。
低聚糖谱一在不同细胞中表达的影响
用于重组表达抗体的两种常用啮齿动物宿主细胞系是中国仓鼠卵巢细胞(CHO)和小鼠骨髓瘤细胞(例如,Sp2/0细胞)。CHO细胞表达可以几乎不合唾液酸聚糖的重组抗体,并且聚糖的岩藻糖基化率可以高达99%。相比之下,小鼠骨髓瘤细胞表达可以含有高达50%唾液酸并且通常具有较少岩藻糖的重组抗体。这些差异可能对体内抗体活性具有显著影响,例如,已表明此类差异可以影响分子的Fc部分的结构,从而改变抗体效应子功能,诸如抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和补体依赖性细胞毒性(CDC)(参见例如美国专利US8975040)。例如,已经注意到随着唾液酸化(带电)Fc聚糖增加,ADCC活性降低(Scallon等人,MolImmunol 2007;44:1524-34),并且已经报道了缺乏岩藻糖的抗体的ADCC活性增加(Shields等人,J Biol Chem.2002;277:26733-26740;Shinkawa等人,J Biol Chem.2003;278:3466-3473)。
另外,在CHO和Sp2/0细胞中产生的抗体可以在两个聚糖表位(半乳糖-α-1,3-半乳糖(a-gal)和唾液酸化N-聚糖Neu5Gc-α-2-6-半乳糖(Neu5Gc))的水平上具有显著差异。例如,已表明CHO细胞可以表达具有不可检测水平或仅痕量水平的a-Gal和Neu5Gc的抗体,而Sp2/0细胞可以表达高得多水平的两种聚糖结构(Yu等人,Sci Rep.2016年1月29日;7:20029)。相比之下,人类在用于生物合成a-gal的基因上存在遗传缺陷,并且负责产生Neu5Gc的基因在所有人类中都发生了不可逆的突变。因此,α-Gal和Neu5Gc不在人类中产生。此外,在治疗性抗体上存在这些非人类聚糖表位可能会在某些人群中引起不良的免疫反应,因为预先存在的抗α-Gal和Neu5Gc抗体的水平较高。例如,已经报道了西妥昔单抗的抗α-gal IgE介导的过敏反应(Chung,C.H.等人,NEngl J Med.2008年3月13日;358(11):1109-17),并且据报道循环抗Neu5Gc抗体的存在可促进西妥昔单抗的清除(Ghaderi等人,Nat Biotechnol.2010年8月;28(8):863-7)。
据报道,与许多其他抗体相比,在Sp2/0细胞中表达的优特克单抗含有更高水平的Neu5Gc。蛋白质印迹分析显示,Neu5Gc高度单特异性的抗Neu5Gc抗体制剂与优特克单抗结合,但不与用PNGase F处理(去除近100%的N-聚糖)的优特克单抗结合(Yu等人,SciRep.2016年1月29日;7:20029)。进一步分析还显示,抗Neu5Gc抗体制剂不能结合仅具有一个Neu5Gc(在一个Fc区上单唾液酸化)的优特克单抗,但可以结合具有两个至四个Neu5Gc的抗体。未确定抗Neu5Gc抗体是否可以结合位于同一抗体的两个不同Fc区上的两个Neu5Gc(在两个Fc区上单唾液酸化)或仅与抗体的一个Fc区上的二唾液酸化N-聚糖结合,但不管它们的分布如何,已确定需要至少两个Fc Neu5Gc残基才能与抗Neu5Gc抗体结合。
在Sp2/0细胞和CHO细胞中表达的优特克单抗的低聚糖谱
来自优特克单抗的多个商业生产运行的汇编HPLC数据表明,在Sp2/0细胞中产生的DS或DP包含≥64.8%至≤85.4%的总中性低聚糖种类、≥14.4%至≤35.6%的总带电低聚糖种类以及≥11.5%至≤40.2%的单个中性低聚糖种类G0F、≥29.9%至≤40.6%的G1F和≥4.1%至≤11.3%的G2F。此外,在Sp2/0细胞中产生的优特克单抗的毛细管等电聚焦(cIEF)电泳图的峰3面积%≥39.8%至≤64.4%。如表5和表6所示,基于IRMA或HPLC分析,与在Sp2/0细胞中产生的优特克单抗相比,在CHO细胞中产生的优特克单抗具有非常不同的总中性低聚糖种类、总带电低聚糖种类和单个中性低聚糖种类G0F、G1F和G2F的低聚糖谱。这些差异在Sp2/0细胞和CHO细胞中产生的优特克单抗的代表性HPLC色谱图中很明显,分别如图4和图8所示。与在Sp2/0细胞中产生的优特克单抗相比,在CHO细胞中产生的优特克单抗的低聚糖谱偏向极低水平的带电聚糖和更高水平的中性聚糖,主要是G0F。在CHO细胞中产生的优特克单抗的低聚糖谱包含>99.0%的总中性低聚糖种类、<1.0%的总带电低聚糖种类以及>70.0%的单个中性低聚糖种类G0F、<20.0%的G1F和<5.0%的G2F。在CHO细胞中产生的优特克单抗的毛细管等电聚焦(cIEF)电泳图的峰3面积%>70.0%。此外,对于在CHO细胞中产生的优特克单抗,通过IRMA或HPLC未检测到二唾液酸化聚糖种类,基于HPLC分析,单唾液酸化聚糖种类处于极低的水平,无法通过IRMA分析检测到(参见例如表5和图8)。
表5:在Sp2/0细胞和CHO细胞中产生的优特克单抗的总中性低聚糖种类、总带电低
聚糖种类和其他所选低聚糖种类的IRMA和HPLC分析的代表性结果
表6:在Sp2/0细胞和CHO细胞中产生的优特克单抗的单个低聚糖种类的IRMA分析
的代表性结果
结论
因此,如上所述,开发了制造控制策略以保持治疗性蛋白质在低聚糖谱和/或药物物质(DS)或药物产品(DP)(例如,包含治疗性抗体优特克单抗的DS和/或DP)的其他特征方面的一致DS和DP特征。具体地讲,控制治疗性抗体的低聚糖谱是关键的,因为低聚糖谱的变化可以显著影响抗体生物学功能。治疗性抗体的低聚糖谱的控制点是选择用于表达治疗性抗体的细胞宿主。如本文所示,在Sp2/0细胞中表达的优特克单抗包括抗IL-12/IL-23p40抗体,其具有包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的重链(HC)和包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列的轻链(LC);SEQ ID NO:7的重链可变结构域氨基酸序列和SEQ ID NO:8的轻链可变结构域氨基酸序列;SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3的重链CDR氨基酸序列;以及SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的轻链CDR氨基酸序列;其中该抗IL-12/IL-23p40抗体的低聚糖谱包含≥64.8%至≤85.4%的总中性低聚糖种类、≥14.4%至≤35.6%的总带电低聚糖种类以及≥11.5%至≤40.2%的单个中性低聚糖种类G0F、≥29.9%至≤40.6%的G1F和≥4.1%至≤11.3%的G2F。此外,在Sp2/0细胞中产生的抗IL-12/IL-23p40抗体的毛细管等电聚焦(cIEF)电泳图的峰3面积%≥39.8%至≤64.4%。
相比之下,对于在CHO细胞中产生的优特克单抗,低聚糖谱偏向极低水平的带电聚糖和更高水平的中性聚糖,主要是G0F。在CHO细胞中产生的优特克单抗的低聚糖谱包含抗IL-12/IL-23p40抗体,其具有包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的重链(HC)和包含SEQ IDNO:11的氨基酸序列的轻链(LC);SEQ ID NO:7的重链可变结构域氨基酸序列和SEQ ID NO:8的轻链可变结构域氨基酸序列;SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ IDNO:3的重链CDR氨基酸序列以及SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ IDNO:6的轻链CDR氨基酸序列;其中该抗IL-12/IL-23p40抗体的低聚糖谱包含>99.0%的总中性低聚糖种类、<1.0%的总带电低聚糖种类以及>70.0%的单个中性低聚糖种类G0F、<20.0%的G1F和<5.0%的G2F。在CHO细胞中产生的优特克单抗的毛细管等电聚焦(cIEF)电泳图的峰3面积%>70.0%。此外,对于在CHO细胞中产生的优特克单抗,通过IRMA或HPLC未检测到二唾液酸化聚糖种类,基于HPLC分析,单唾液酸化聚糖种类处于极低的水平,并且无法通过IRMA分析检测到。通常,唾液酸化种类的减少和在CHO细胞中产生的优特克单抗的特异性Neu5Gc的减少可通过在施用于人类时减少不良的免疫原性反应来提供益处。例如,降低水平的Neu5Gc可以减少清除,使得与在Sp2/0细胞中表达的抗IL-12/23p40抗体相比,在CHO细胞中产生的抗IL-12/23p40抗体将具有更长的半衰期,特别是对于具有较高水平的抗Neu5Gc抗体的患者群体而言。
Claims (21)
1.一种分离的抗IL-12/IL-23p40抗体,所述分离的抗IL-12/IL-23p40抗体包含选自由以下项组成的组的氨基酸序列:(i)包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的重链(HC)和包含SEQID NO:11的氨基酸序列的轻链(LC);(ii)SEQ ID NO:7的重链可变结构域氨基酸序列和SEQID NO:8的轻链可变结构域氨基酸序列;以及(iii)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ IDNO:3的重链CDR氨基酸序列以及SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的轻链CDR氨基酸序列,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中表达。
2.根据权利要求1所述的抗IL-12/IL-23p40抗体,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体的低聚糖谱包含>99.0%的总中性低聚糖种类和<1.0%的总带电低聚糖种类。
3.根据权利要求2所述的抗IL-12/IL-23p40抗体,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体的低聚糖谱还包含>70.0%的单个中性低聚糖种类G0F、<20.0%的G1F和<5.0%的G2F。
4.根据权利要求2所述的抗IL-12/IL-23p40抗体,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体的毛细管等电聚焦(cIEF)电泳图的峰3面积%>70.0%。
5.根据权利要求2所述的抗IL-12/IL-23p40抗体,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体不具有二唾液酸化聚糖种类,如通过高效液相色谱(HPLC)或减少质量分析(RMA)所确定。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的抗IL-12/IL-23p40抗体,其中与在Sp2/0细胞中表达的具有相同氨基酸重链和轻链序列的抗IL-12/IL-23p40抗体相比,所述抗IL-12/IL-23p40抗体具有更长的半衰期。
7.根据权利要求1-5中任一项所述的抗IL-12/IL-23p40抗体,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体包括后续生物制剂。
8.一种用于制备抗IL-12/IL-23p40抗体的制造方法,所述抗IL-12/IL-23p40抗体包含选自由以下项组成的组的氨基酸序列:(i)包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的重链(HC)和包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列的轻链(LC);(ii)SEQ ID NO:7的重链可变结构域氨基酸序列和SEQ ID NO:8的轻链可变结构域氨基酸序列;以及(iii)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3的重链CDR氨基酸序列以及SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的轻链CDR氨基酸序列,所述制造方法包括以下步骤:
a.培养具有编码抗IL-12/IL-23p40抗体的核苷酸的中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞);
b.在所述CHO细胞中表达所述抗IL-12/IL-23p40抗体;以及,
c.纯化所述抗IL-12/IL-23p40抗体。
9.根据权利要求8所述的制造方法,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体的低聚糖谱包含>99.0%的总中性低聚糖种类和<1.0%的总带电低聚糖种类,以及。
10.根据权利要求9所述的制造方法,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体的低聚糖谱还包含>70.0%的单个中性低聚糖种类G0F、<20.0%的G1F和<5.0%的G2F。
11.根据权利要求9所述的制造方法,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体的毛细管等电聚焦(cIEF)电泳图的峰3面积%>70.0%。
12.根据权利要求9所述的制造方法,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体不具有二唾液酸化聚糖种类,如通过高效液相色谱(HPLC)或减少质量分析(RMA)所确定。
13.根据权利要求8-12中任一项所述的制造方法,其中与在Sp2/0细胞中表达的具有相同氨基酸重链和轻链序列的抗IL-12/IL-23p40抗体相比,所述抗IL-12/IL-23p40抗体具有更长的半衰期。
14.根据权利要求8-12中任一项所述的制造方法,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体是后续生物制剂。
15.一种组合物,所述组合物包含抗IL-12/IL-23p40抗体,所述抗IL-12/IL-23p40抗体包含选自由以下项组成的组的氨基酸序列:(i)包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的重链(HC)和包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列的轻链(LC);(ii)SEQ ID NO:7的重链可变结构域氨基酸序列和SEQ ID NO:8的轻链可变结构域氨基酸序列;以及(iii)SEQ ID NO:1、SEQ IDNO:2和SEQ ID NO:3的重链CDR氨基酸序列以及SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的轻链CDR氨基酸序列,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中表达。
16.根据权利要求15所述的组合物,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体的低聚糖谱包含>99.0%的总中性低聚糖种类和<1.0%的总带电低聚糖种类。
17.根据权利要求16所述的组合物,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体的低聚糖谱还包含>70.0%的单个中性低聚糖种类G0F、<20.0%的G1F和<5.0%的G2F。
18.根据权利要求16所述的组合物,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体的毛细管等电聚焦(cIEF)电泳图的峰3面积%>70.0%。
19.根据权利要求16所述的组合物,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体不具有二唾液酸化聚糖种类,如通过高效液相色谱(HPLC)所确定。
20.根据权利要求15-19中任一项所述的组合物,其中与在Sp2/0细胞中表达的具有相同氨基酸重链和轻链序列的抗IL-12/IL-23p40抗体相比,所述抗IL-12/IL-23p40抗体具有更长的半衰期。
21.根据权利要求15-19中任一项所述的组合物,其中所述抗IL-12/IL-23p40抗体是后续生物制剂。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111471655A (zh) * | 2020-03-19 | 2020-07-31 | 浙江正熙生物医药有限公司 | 抗人il12/23稳转细胞株及其构建方法和应用 |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112852743B (zh) * | 2021-01-25 | 2021-11-02 | 江苏荃信生物医药有限公司 | 用于生产乌司奴单抗的生物类似药的细胞株及生产方法 |
CN114395041B (zh) * | 2021-02-09 | 2023-12-01 | 甘李药业股份有限公司 | 一种制备抗il-12和/或il-23单克隆抗体的方法 |
IL309987A (en) * | 2021-07-09 | 2024-03-01 | Janssen Biotech Inc | Production methods for the production of anti-IL12/IL23 antibody compositions |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101052726A (zh) * | 2003-05-09 | 2007-10-10 | 森托科尔公司 | IL-23p40特异性免疫球蛋白衍生蛋白、组合物、方法和用途 |
WO2013009535A1 (en) * | 2011-07-08 | 2013-01-17 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Il-23 antagonists for treatment or prevention of skin rash associated with treatment with p13k/akt pathway inhibitors |
WO2018024770A1 (en) * | 2016-08-03 | 2018-02-08 | Formycon Ag | Production of biosimilar ustekinumab in cho cells |
Family Cites Families (124)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4309989A (en) | 1976-02-09 | 1982-01-12 | The Curators Of The University Of Missouri | Topical application of medication by ultrasound with coupling agent |
US4634665A (en) | 1980-02-25 | 1987-01-06 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US4399216A (en) | 1980-02-25 | 1983-08-16 | The Trustees Of Columbia University | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US5179017A (en) | 1980-02-25 | 1993-01-12 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
GB2097032B (en) | 1981-04-22 | 1984-09-19 | Teron International Urban Dev | A combined ceiling air and services distribution system mechanical chasse and structural roof member |
US4656134A (en) | 1982-01-11 | 1987-04-07 | Board Of Trustees Of Leland Stanford Jr. University | Gene amplification in eukaryotic cells |
US5149636A (en) | 1982-03-15 | 1992-09-22 | Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Method for introducing cloned, amplifiable genes into eucaryotic cells and for producing proteinaceous products |
US4818542A (en) | 1983-11-14 | 1989-04-04 | The University Of Kentucky Research Foundation | Porous microspheres for drug delivery and methods for making same |
US5168062A (en) | 1985-01-30 | 1992-12-01 | University Of Iowa Research Foundation | Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence |
US4683195A (en) | 1986-01-30 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences |
US4965188A (en) | 1986-08-22 | 1990-10-23 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences using a thermostable enzyme |
US6492107B1 (en) | 1986-11-20 | 2002-12-10 | Stuart Kauffman | Process for obtaining DNA, RNA, peptides, polypeptides, or protein, by recombinant DNA technique |
GB2183661B (en) | 1985-03-30 | 1989-06-28 | Marc Ballivet | Method for obtaining dna, rna, peptides, polypeptides or proteins by means of a dna recombinant technique |
US4766067A (en) | 1985-05-31 | 1988-08-23 | President And Fellows Of Harvard College | Gene amplification |
US5576195A (en) | 1985-11-01 | 1996-11-19 | Xoma Corporation | Vectors with pectate lyase signal sequence |
US5618920A (en) | 1985-11-01 | 1997-04-08 | Xoma Corporation | Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use |
DE3600905A1 (de) | 1986-01-15 | 1987-07-16 | Ant Nachrichtentech | Verfahren zum dekodieren von binaersignalen sowie viterbi-dekoder und anwendungen |
GB8601597D0 (en) | 1986-01-23 | 1986-02-26 | Wilson R H | Nucleotide sequences |
US4800159A (en) | 1986-02-07 | 1989-01-24 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences |
US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
US4767402A (en) | 1986-07-08 | 1988-08-30 | Massachusetts Institute Of Technology | Ultrasound enhancement of transdermal drug delivery |
US4889818A (en) | 1986-08-22 | 1989-12-26 | Cetus Corporation | Purified thermostable enzyme |
US5260203A (en) | 1986-09-02 | 1993-11-09 | Enzon, Inc. | Single polypeptide chain binding molecules |
US4946778A (en) | 1987-09-21 | 1990-08-07 | Genex Corporation | Single polypeptide chain binding molecules |
US4704692A (en) | 1986-09-02 | 1987-11-03 | Ladner Robert C | Computer based system and method for determining and displaying possible chemical structures for converting double- or multiple-chain polypeptides to single-chain polypeptides |
US4795699A (en) | 1987-01-14 | 1989-01-03 | President And Fellows Of Harvard College | T7 DNA polymerase |
US4921794A (en) | 1987-01-14 | 1990-05-01 | President And Fellows Of Harvard College | T7 DNA polymerase |
EP0279582A3 (en) | 1987-02-17 | 1989-10-18 | Pharming B.V. | Dna sequences to target proteins to the mammary gland for efficient secretion |
ATE114723T1 (de) | 1987-03-02 | 1994-12-15 | Enzon Lab Inc | Organismus als träger für ''single chain antibody domain (scad)''. |
US4873316A (en) | 1987-06-23 | 1989-10-10 | Biogen, Inc. | Isolation of exogenous recombinant proteins from the milk of transgenic mammals |
CA1341235C (en) | 1987-07-24 | 2001-05-22 | Randy R. Robinson | Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use |
US4939666A (en) | 1987-09-02 | 1990-07-03 | Genex Corporation | Incremental macromolecule construction methods |
EP0396612B1 (en) | 1988-01-11 | 1996-07-24 | Xoma Corporation | Novel plasmid vector with pectate lyase signal sequence |
US4956288A (en) | 1988-04-22 | 1990-09-11 | Biogen, Inc. | Method for producing cells containing stably integrated foreign DNA at a high copy number, the cells produced by this method, and the use of these cells to produce the polypeptides coded for by the foreign DNA |
US5130238A (en) | 1988-06-24 | 1992-07-14 | Cangene Corporation | Enhanced nucleic acid amplification process |
US5223409A (en) | 1988-09-02 | 1993-06-29 | Protein Engineering Corp. | Directed evolution of novel binding proteins |
US5091310A (en) | 1988-09-23 | 1992-02-25 | Cetus Corporation | Structure-independent dna amplification by the polymerase chain reaction |
US5142033A (en) | 1988-09-23 | 1992-08-25 | Hoffmann-La Roche Inc. | Structure-independent DNA amplification by the polymerase chain reaction |
US5066584A (en) | 1988-09-23 | 1991-11-19 | Cetus Corporation | Methods for generating single stranded dna by the polymerase chain reaction |
GB8823869D0 (en) | 1988-10-12 | 1988-11-16 | Medical Res Council | Production of antibodies |
US4987893A (en) | 1988-10-12 | 1991-01-29 | Rochal Industries, Inc. | Conformable bandage and coating material |
JP2919890B2 (ja) | 1988-11-11 | 1999-07-19 | メディカル リサーチ カウンスル | 単一ドメインリガンド、そのリガンドからなる受容体、その製造方法、ならびにそのリガンドおよび受容体の使用 |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US4994370A (en) | 1989-01-03 | 1991-02-19 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | DNA amplification technique |
US5266491A (en) | 1989-03-14 | 1993-11-30 | Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. | DNA fragment and expression plasmid containing the DNA fragment |
AU652539B2 (en) | 1989-05-16 | 1994-09-01 | Medical Research Council | Co-expression of heteromeric receptors |
CA2016842A1 (en) | 1989-05-16 | 1990-11-16 | Richard A. Lerner | Method for tapping the immunological repertoire |
CA2016841C (en) | 1989-05-16 | 1999-09-21 | William D. Huse | A method for producing polymers having a preselected activity |
AU638762B2 (en) | 1989-10-05 | 1993-07-08 | Optein Inc | Cell-free synthesis and isolation of novel genes and polypeptides |
DE69133566T2 (de) | 1990-01-12 | 2007-12-06 | Amgen Fremont Inc. | Bildung von xenogenen Antikörpern |
US5427908A (en) | 1990-05-01 | 1995-06-27 | Affymax Technologies N.V. | Recombinant library screening methods |
ATE185601T1 (de) | 1990-07-10 | 1999-10-15 | Cambridge Antibody Tech | Verfahren zur herstellung von spezifischen bindungspaargliedern |
GB9015198D0 (en) | 1990-07-10 | 1990-08-29 | Brien Caroline J O | Binding substance |
US5580734A (en) | 1990-07-13 | 1996-12-03 | Transkaryotic Therapies, Inc. | Method of producing a physical map contigous DNA sequences |
WO1992002551A1 (en) | 1990-08-02 | 1992-02-20 | B.R. Centre Limited | Methods for the production of proteins with a desired function |
CA2089362C (en) | 1990-08-24 | 2000-11-21 | William D. Huse | Methods of synthesizing oligonucleotides with random codons |
US5770429A (en) | 1990-08-29 | 1998-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
DK0814159T3 (da) | 1990-08-29 | 2005-10-24 | Genpharm Int | Transgene, ikke-humane dyr, der er i stand til at danne heterologe antistoffer |
US5633425A (en) | 1990-08-29 | 1997-05-27 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5789650A (en) | 1990-08-29 | 1998-08-04 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5661016A (en) | 1990-08-29 | 1997-08-26 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US6300129B1 (en) | 1990-08-29 | 2001-10-09 | Genpharm International | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5625126A (en) | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
IL99552A0 (en) | 1990-09-28 | 1992-08-18 | Ixsys Inc | Compositions containing procaryotic cells,a kit for the preparation of vectors useful for the coexpression of two or more dna sequences and methods for the use thereof |
WO1992009690A2 (en) | 1990-12-03 | 1992-06-11 | Genentech, Inc. | Enrichment method for variant proteins with altered binding properties |
NZ241119A (en) | 1990-12-20 | 1993-06-25 | Ixsys Inc | Manipulating nucleic acid to optimize the binding characteristics of the encoded binding protein |
EP0575545B1 (en) | 1991-03-15 | 2003-05-21 | Amgen Inc. | Pegylation of polypeptides |
DK1471142T3 (da) | 1991-04-10 | 2009-03-09 | Scripps Research Inst | Heterodimere receptor-biblioteker under anvendelse af fagemider |
US5962255A (en) | 1992-03-24 | 1999-10-05 | Cambridge Antibody Technology Limited | Methods for producing recombinant vectors |
DK0605522T3 (da) | 1991-09-23 | 2000-01-17 | Medical Res Council | Fremgangsmåde til fremstilling af humaniserede antistoffer |
US5733761A (en) | 1991-11-05 | 1998-03-31 | Transkaryotic Therapies, Inc. | Protein production and protein delivery |
US5641670A (en) | 1991-11-05 | 1997-06-24 | Transkaryotic Therapies, Inc. | Protein production and protein delivery |
ATE463573T1 (de) | 1991-12-02 | 2010-04-15 | Medimmune Ltd | Herstellung von autoantikörpern auf phagenoberflächen ausgehend von antikörpersegmentbibliotheken |
CA2103887C (en) | 1991-12-13 | 2005-08-30 | Gary M. Studnicka | Methods and materials for preparation of modified antibody variable domains and therapeutic uses thereof |
US5667988A (en) | 1992-01-27 | 1997-09-16 | The Scripps Research Institute | Methods for producing antibody libraries using universal or randomized immunoglobulin light chains |
CA2131151A1 (en) | 1992-03-24 | 1994-09-30 | Kevin S. Johnson | Methods for producing members of specific binding pairs |
US5643252A (en) | 1992-10-28 | 1997-07-01 | Venisect, Inc. | Laser perforator |
AU5670194A (en) | 1992-11-20 | 1994-06-22 | Enzon, Inc. | Linker for linked fusion polypeptides |
AU6132994A (en) | 1993-02-02 | 1994-08-29 | Scripps Research Institute, The | Methods for producing antibody libraries using universal or randomized immunoglobulin light chains |
US5770428A (en) | 1993-02-17 | 1998-06-23 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Chimeric retrovial expression vectors and particles containing a simple retroviral long terminal repeat, BLV or HIV coding regions and cis-acting regulatory sequences, and an RNA translational enhancer with internal ribsome entry site |
EP0754225A4 (en) | 1993-04-26 | 2001-01-31 | Genpharm Int | HETEROLOGIC ANTIBODY-PRODUCING TRANSGENIC NON-HUMAN ANIMALS |
GB9313509D0 (en) | 1993-06-30 | 1993-08-11 | Medical Res Council | Chemisynthetic libraries |
US5625825A (en) | 1993-10-21 | 1997-04-29 | Lsi Logic Corporation | Random number generating apparatus for an interface unit of a carrier sense with multiple access and collision detect (CSMA/CD) ethernet data network |
WO1995015388A1 (en) | 1993-12-03 | 1995-06-08 | Medical Research Council | Recombinant binding proteins and peptides |
SE9304060D0 (sv) | 1993-12-06 | 1993-12-06 | Bioinvent Int Ab | Sätt att selektera specifika bakteriofager |
US5827690A (en) | 1993-12-20 | 1998-10-27 | Genzyme Transgenics Corporatiion | Transgenic production of antibodies in milk |
US5763733A (en) | 1994-10-13 | 1998-06-09 | Enzon, Inc. | Antigen-binding fusion proteins |
WO1996013583A2 (en) | 1994-10-20 | 1996-05-09 | Morphosys Gesellschaft Für Proteinoptimierung Mbh | Targeted hetero-association of recombinant proteins to multi-functional complexes |
US5656730A (en) | 1995-04-07 | 1997-08-12 | Enzon, Inc. | Stabilized monomeric protein compositions |
US6019968A (en) | 1995-04-14 | 2000-02-01 | Inhale Therapeutic Systems, Inc. | Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use |
AU2466895A (en) | 1995-04-28 | 1996-11-18 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US5730723A (en) | 1995-10-10 | 1998-03-24 | Visionary Medical Products Corporation, Inc. | Gas pressured needle-less injection device and method |
AU725609C (en) | 1995-08-18 | 2002-01-03 | Morphosys Ag | Protein/(poly)peptide libraries |
US6331431B1 (en) | 1995-11-28 | 2001-12-18 | Ixsys, Inc. | Vacuum device and method for isolating periplasmic fraction from cells |
US5714352A (en) | 1996-03-20 | 1998-02-03 | Xenotech Incorporated | Directed switch-mediated DNA recombination |
DE19624387C2 (de) | 1996-06-19 | 1999-08-19 | Hatz Motoren | Kaltstartvorrichtung |
GB9712818D0 (en) | 1996-07-08 | 1997-08-20 | Cambridge Antibody Tech | Labelling and selection of specific binding molecules |
CA2722378C (en) | 1996-12-03 | 2015-02-03 | Amgen Fremont Inc. | Human antibodies that bind tnf.alpha. |
US5804420A (en) | 1997-04-18 | 1998-09-08 | Bayer Corporation | Preparation of recombinant Factor VIII in a protein free medium |
US6235883B1 (en) | 1997-05-05 | 2001-05-22 | Abgenix, Inc. | Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor |
IL120943A (en) | 1997-05-29 | 2004-03-28 | Univ Ben Gurion | A system for administering drugs through the skin |
US6475725B1 (en) | 1997-06-20 | 2002-11-05 | Baxter Aktiengesellschaft | Recombinant cell clones having increased stability and methods of making and using the same |
WO1999006834A2 (en) | 1997-08-04 | 1999-02-11 | Ixsys, Incorporated | Methods for identifying ligand specific binding molecules |
JP2001516567A (ja) * | 1997-09-19 | 2001-10-02 | セレックス, インコーポレイテッド | 抗原の免疫原性および抗体の特異性を改善する方法 |
AU757153B2 (en) | 1997-09-29 | 2003-02-06 | Novartis Ag | Stabilized preparations for use in metered dose inhalers |
EP2261229A3 (en) | 1998-04-20 | 2011-03-23 | GlycArt Biotechnology AG | Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity |
NZ539776A (en) | 1999-01-15 | 2006-12-22 | Genentech Inc | Polypeptide variants with altered effector function |
CN1555411A (zh) | 2001-08-03 | 2004-12-15 | ���迨�����\���ɷݹ�˾ | 抗体-依赖性细胞毒性增大的抗体糖基化变体 |
GB0130228D0 (en) | 2001-12-18 | 2002-02-06 | Hansa Medica Ab | Protein |
AU2005282700A1 (en) | 2004-09-02 | 2006-03-16 | Genentech, Inc. | Heteromultimeric molecules |
US20060094104A1 (en) | 2004-10-29 | 2006-05-04 | Leopold Grillberger | Animal protein-free media for cultivation of cells |
AU2006232287B2 (en) | 2005-03-31 | 2011-10-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for producing polypeptides by regulating polypeptide association |
DE102005028778A1 (de) | 2005-06-22 | 2006-12-28 | SUNJÜT Deutschland GmbH | Mehrlagige Folie mit einer Barriere- und einer antistatischen Lage |
DK3219328T3 (da) | 2005-12-29 | 2020-07-13 | Janssen Biotech Inc | Humane anti-il-23-antistoffer, sammensætninger, fremgangsmåder og anvendelser |
US20070212770A1 (en) | 2006-01-04 | 2007-09-13 | Baxter International Inc. | Oligopeptide-free cell culture media |
JP2009541275A (ja) | 2006-06-22 | 2009-11-26 | ノボ・ノルデイスク・エー/エス | 二重特異性抗体の生産 |
RU2466189C2 (ru) | 2006-12-28 | 2012-11-10 | Сентокор Орто Байотек Инк. | ВЕКТОР ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ ПОЛИПЕПТИДОВ С СИАЛИДАЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, СПОСОБ ОБЕСПЕЧЕНИЯ СИАЛИДАЗНОЙ АКТИВНОСТИ В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК И СПОСОБ РЕГУЛИРОВАНИЯ СВОЙСТВ Fc-СОДЕРЖАЩИХ МОЛЕКУЛ, ЭКСПРЕССИРУЕМЫХ В ЛИНИИ КЛЕТОК |
CN102459346B (zh) | 2009-04-27 | 2016-10-26 | 昂考梅德药品有限公司 | 制造异源多聚体分子的方法 |
EA201201435A1 (ru) | 2010-04-20 | 2013-04-30 | Генмаб А/С | ГЕТЕРОДИМЕРНЫЕ АНТИТЕЛО-Fc-СОДЕРЖАЩИЕ БЕЛКИ И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ |
MX352929B (es) | 2010-11-05 | 2017-12-13 | Zymeworks Inc | DISEÑO DE ANTICUERPOS HETERODIMÉRICOS ESTABLES CON MUTACIONES EN EL DOMINIO Fc. |
DK2773671T3 (da) | 2011-11-04 | 2021-11-15 | Zymeworks Inc | Udformning af stabilt heterodimert antistof med mutationer i fc-domænet |
CN105658799A (zh) | 2013-10-07 | 2016-06-08 | 普雷斯蒂奇生物制药私人有限公司 | 用于抗体表达的双顺反子表达载体以及用其生产抗体的方法 |
AU2017241776A1 (en) * | 2016-03-29 | 2018-10-11 | Janssen Biotech, Inc. | Treating psoriasis with increased interval dosing of anti-IL12 and/or -23 antibody |
-
2020
- 2020-03-12 CN CN202080035648.6A patent/CN113825765A/zh active Pending
- 2020-03-12 JP JP2021555211A patent/JP2022525145A/ja active Pending
- 2020-03-12 WO PCT/IB2020/052247 patent/WO2020183418A1/en unknown
- 2020-03-12 CA CA3133395A patent/CA3133395A1/en active Pending
- 2020-03-12 EP EP20769073.6A patent/EP3938384A4/en active Pending
- 2020-03-12 KR KR1020217032815A patent/KR20210141990A/ko unknown
- 2020-03-12 US US16/816,814 patent/US20200291107A1/en active Pending
-
2021
- 2021-09-12 IL IL286314A patent/IL286314A/en unknown
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101052726A (zh) * | 2003-05-09 | 2007-10-10 | 森托科尔公司 | IL-23p40特异性免疫球蛋白衍生蛋白、组合物、方法和用途 |
WO2013009535A1 (en) * | 2011-07-08 | 2013-01-17 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Il-23 antagonists for treatment or prevention of skin rash associated with treatment with p13k/akt pathway inhibitors |
WO2018024770A1 (en) * | 2016-08-03 | 2018-02-08 | Formycon Ag | Production of biosimilar ustekinumab in cho cells |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
CHUANFEI YU 等: ""At least two Fc Neu5Gc residues of monoclonal antibodies are required for binding to anti-Neu5Gc antibody"", 《SCIENTIFIC REPORTS》, vol. 6, pages 1 - 10 * |
赵冬丽 等: ""IL-12家族与自身免疫性甲状腺疾病"", 《现代医学》, vol. 45, no. 8, pages 1171 - 1175 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111471655A (zh) * | 2020-03-19 | 2020-07-31 | 浙江正熙生物医药有限公司 | 抗人il12/23稳转细胞株及其构建方法和应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2022525145A (ja) | 2022-05-11 |
IL286314A (en) | 2021-10-31 |
EP3938384A1 (en) | 2022-01-19 |
KR20210141990A (ko) | 2021-11-23 |
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WO2020183418A1 (en) | 2020-09-17 |
EP3938384A4 (en) | 2022-12-28 |
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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