CN113797137B - 一种具有滋养强韧眉毛功能的何首乌提取物及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有滋养强韧眉毛功能的何首乌提取物,该提取物中的总二苯乙烯类化合物的含量大于等于85%;同时公开了该提取物的制备方法,包括以下步骤:将何首乌粉碎过筛后加入乙醇并得到提取液,然后依次对提取液进行减压浓缩和干燥后置入酶反应器中与复合酶进行酶解反应和钝化处理;再对处理物接种短乳杆菌并发酵得到固体成分;再对该固体成分进行提取和减压干燥,然后用水溶解并静置过滤,再用AB‑8大孔树脂对滤液进行吸附;再对AB‑8大孔树脂进行洗脱,取洗脱液进行减压浓缩和干燥,得成品。本发明能够对何首乌中的总二苯乙烯类化合物进行提取,使其能够直接添加至化妆品内并实现使用者的日常养护,具有依从性好和便于携带的特点。
Description
技术领域
本发明涉及一种何首乌的提取方法,特别是一种具有滋养强韧眉毛功能的何首乌提取物及制备方法。
背景技术
眉毛稀少指眉毛不能完全覆盖眉毛生长区域的皮肤,通常伴有眉毛的枯槁、易折断、易脱落、瘙痒等症状。中医认为,导致眉毛稀少的病因病机有气血亏虚、瘀血阻络、血热生风、血燥生风、肝血不足、肝经火旺、肾精亏虚、肺气不足等,气血脏腑经络失调从而产生的虚、风、热、瘀皆可致眉毛失养而脱落。
目前对斑状脱眉病例的处理方法是使用秃发洗剂,氯柳酊,有瘙痒者予激素霜外涂。内服维生素类、养血生发胶囊等。同时解除患者顾虑,避免劳累,紧张,减少屏幕接触时间,患者可于2~6周内痊愈。而经医药研究表明,何首乌具有补肝肾、益精血等功效,是生发养发内服外用的常用药物。但上述药物在使用时存在多种缺陷:其一是各类药物的组方复杂,需要由专业医生进行开方治疗,不能实现日常的个人养护;其二是内服药物由于需要定期口服,且口感较差,从而降低了使用者的依从性,且药物服用后也会存在一定的副作用,对使用者的健康造成隐患;其三是使用者在外出时需要特别携带上述药物,从而降低其便捷度。
因此,现有利用何首乌对眉毛稀少患者的处理方法存在日常使用困难、依从性差和不便于携带的问题。
发明内容
本发明的目的在于,提供一种具有滋养强韧眉毛功能的何首乌提取物及制备方法。它能够对何首乌中的总二苯乙烯类化合物进行提取,使其能够直接添加至化妆品内并实现使用者的日常养护,具有依从性好和便于携带的特点。
本发明的技术方案:一种具有滋养强韧眉毛功能的何首乌提取物,该提取物中的总二苯乙烯类化合物的含量大于等于85%。
基于前述的一种具有滋养强韧眉毛的何首乌提取物的制备方法,包括以下步骤:
①将何首乌粉碎过筛后加入10倍量的70%浓度乙醇,然后超声提取3次后合并提取液,得A品;
②依次对A品进行减压浓缩和干燥后,得B品;
③将B品置入酶反应器中加入2~5倍的水进行稀释,然后加入复合酶后在6.0pH值、60℃环境下搅拌,得C品;
④将C品酶解反应24小时,然后在80℃环境下钝化处理30分钟,得D品;
⑤将短乳杆菌接种到MRS培养基,然后置入厌氧培养箱中在37℃环境下培养24h,再在相同条件下进行二次扩大培养,得e1品,再对e1品在4000rmp条件下离心8分钟收集菌体,再用生理盐水悬浮该菌体,调制成短乳杆菌浓度为108cfu/mL的接种液,得E品;
⑥将E品接种于D品,然后在25℃下发酵48h,然后依次进行过滤、减压浓缩和干燥,得F品;
⑦将F品用水溶解后,依次用等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次,然后将各正丁醇萃取液合并后得到g1品;然后对g1 品进行减压干燥,得G品;
⑧将G品用水溶解后静置、过滤,然后用AB-8大孔树脂对滤液进行吸附,得h1品;然后依次用4~10倍体积的水、30%浓度乙醇、 50%浓度乙醇和70%浓度乙醇对h1品进行洗脱,再将50%浓度和70%浓度的乙醇洗脱液合并后进行减压浓缩和干燥,得成品。
前述的制备方法中,所述步骤③中的复合酶由果胶酶、纤维素酶和蛋白酶按2.5:1.8:1的重量比配制而成,B品和复合酶按10~30:1 的重量比进行混合。
前述的制备方法中,所述步骤⑧中的成品在使用时,添加在化妆品中并涂抹于眉毛处。
前述的制备方法中,所述步骤⑥中E品按5~10%体积比的接种量接种于D品。
与现有技术相比,本发明通过微生物发酵技术将何首乌中的天然产物进行转化,从而对何首乌中的总二苯乙烯类化合物进行有效提取,使其能够作为原料添加在化妆品中;总二苯乙烯类化合物则具有滋养强韧眉毛和减少眉毛脱落的功效,从而使使用者在日常化妆时能够实现对眉毛的养护,相比现有的药物处理能够有效提高本发明的使用便利度;并能够降低服用药物带来的副作用。所以,本发明能够对何首乌中的减少眉毛脱落的成分进行提取,使其能够直接添加至化妆品内并实现使用者的日常养护,具有依从性好和便于携带的特点。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明,但并不作为对本发明限制的依据。
实施例。一种具有滋养强韧眉毛功能的何首乌提取物,该提取物中的总二苯乙烯类化合物的重量百分比含量≥85%。
基于所述的一种具有滋养强韧眉毛的何首乌提取物的制备方法,包括以下步骤:
①将何首乌粉碎过筛后加入10倍量的70%浓度乙醇,然后超声提取3次后合并提取液,得A品;
②依次对A品进行减压浓缩和干燥后,得B品;
③将B品置入酶反应器中加入4倍的水进行稀释,然后加入复合酶后在6.0pH值、60℃环境下搅拌,得C品;
④将C品酶解反应24小时,然后在80℃环境下钝化处理30分钟,得D品;
⑤将短乳杆菌接种到MRS培养基,然后置入厌氧培养箱中在37℃环境下培养24h,经镜检无杂菌后再在相同条件下进行二次扩大培养,得e1品,再对e1品在4000rmp条件下离心8分钟收集菌体,再用生理盐水悬浮该菌体,调制成短乳杆菌浓度为108cfu/mL的接种液,得E品;
⑥将E品接种于D品,然后在25℃下发酵48h,然后依次进行过滤、减压浓缩和干燥,得F品;
⑦将F品用水溶解后,依次用等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次,然后将各正丁醇萃取液合并后得到g1品;然后对g1 品进行减压干燥,得G品;
⑧将G品用水溶解后静置、过滤,然后用AB-8大孔树脂对滤液进行吸附,得h1品;然后依次用4倍体积的水、30%浓度乙醇、50%浓度乙醇和70%浓度乙醇对h1品进行洗脱,再将50%浓度和70%浓度的乙醇洗脱液合并后进行减压浓缩和干燥,得成品。
所述步骤③中的复合酶由果胶酶、纤维素酶和蛋白酶按 2.5:1.8:1的重量比配制而成,B品和复合酶按20:1的重量比进行混合。
所述步骤⑧中的成品在使用时,添加在化妆品中并涂抹于眉毛处。
所述步骤⑥中E品按6%(v/v)的接种量接种于D品。
本发明的工作原理:本发明通过对提取工艺的优化,使其能够从何首乌中提取出具有滋养强韧眉毛和减少眉毛掉落功能的总二苯乙烯类化合物,使得该有效成分能够添加于化妆品中,相比现有采用含有何首乌的药物处理的方式有效提高了该有效成分的应用范围和使用效果。使得使用者在能够通过日常化妆实现对眉毛的护养,降低了对眉毛的护养难度并提高了其便利度和依从性。
实验例1:设置样品组和空白对照组,其中样品组取本实施例制备得到的最终产物溶解于去离子水,加入适量防腐剂,配制成为质量分数1%的水溶液,每日两次涂抹于眉部,使用六周。空白对照组不做处理。
然后采用眉毛密度测量方法对两组对比例进行检测,具体为:使用毛囊分析仪,镜头平放于眉峰处,使镜头的中心点与眉峰处眉毛宽度的中点正好重叠,左右眉毛均重复拍摄三次,共六张图片。放大倍数75倍,在图片上标记出每根眉毛,通过系统自动计算出眉峰处1cm2所含眉毛的根数,即为眉毛密度,取六次拍摄的平均值。检测结果如表1所示:
表1:眉毛密度的比较
通过检测结果可知,涂抹样品前,样品组和空白对照组的眉毛密度无统计学差异(P>0.05);涂抹样品后,样品组相比空白对照组的眉毛密度增加(P<0.05)。涂抹样品后,样品组的眉毛密度相比涂抹样品前增加(P<0.05);而空白组在涂抹样品前后无变化(P>0.05)。
实验例2:以白藜芦醇为对照品,采用一阶导数光谱法在330nm 波长处对本发明制备得到的何首乌提取物进行测定,测定结果为提取物中的总二苯乙烯类化合物含量在85%以上。
Claims (3)
1.一种具有滋养强韧眉毛功能的何首乌提取物的制备方法,其特征在于:该提取物中的总二苯乙烯类化合物的含量大于等于85%,所述制备方法包括以下步骤:
①将何首乌粉碎过筛后加入10倍量的70%浓度乙醇,然后超声提取3次后合并提取液,得A品;
②依次对A品进行减压浓缩和干燥后,得B品;
③将B品置入酶反应器中加入2~5倍的水进行稀释,然后加入复合酶后在6.0pH值、60℃环境下搅拌,得C品;
④将C品酶解反应24小时,然后在80℃环境下钝化处理30分钟,得D品;
⑤将短乳杆菌接种到MRS培养基,然后置入厌氧培养箱中在37℃环境下培养24h,再在相同条件下进行二次扩大培养,得e1品,再对e1品在4000rmp条件下离心8分钟收集菌体,再用生理盐水悬浮该菌体,调制成短乳杆菌浓度为108cfu/mL的接种液,得E品;
⑥将E品接种于D品,然后在25℃下发酵48h,然后依次进行过滤、减压浓缩和干燥,得F品;
⑦将F品用水溶解后,依次用等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次,然后将各正丁醇萃取液合并后得到g1品;然后对g1品进行减压干燥,得G品;
⑧将G品用水溶解后静置、过滤,然后用AB-8大孔树脂对滤液进行吸附,得h1品;然后依次用4~10倍体积的水、30%浓度乙醇、50%浓度乙醇和70%浓度乙醇对h1品进行洗脱,再将50%浓度和70%浓度的乙醇洗脱液合并后进行减压浓缩和干燥,得成品;
所述步骤③中的复合酶由果胶酶、纤维素酶和蛋白酶按2.5:1.8:1的重量比配制而成,B品和复合酶按10~30:1的重量比进行混合。
2.根据权利要求1所述的一种具有滋养强韧眉毛功能的何首乌提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤⑧中的成品在使用时,添加在化妆品中并涂抹于眉毛处。
3.根据权利要求1所述的一种具有滋养强韧眉毛功能的何首乌提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤⑥中E品按5~10%体积比的接种量接种于D品。
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