CN113332219B - 一种调节皮肤内稳态平衡的化妆品组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种调节皮肤内稳态平衡的化妆品组合物及其应用。所述组合物由质量分数为1‑5％的活性成分以及化妆品可接受溶剂，所述活性成分为二裂酵母发酵产物溶胞产物：牛奶提取物：桃花提取物，质量比为(1‑4):(1‑4):(0.2‑0.8)。本发明组合物可以提升自噬体和蛋白酶体的活性，协同增效，达到增强皮肤抗氧化能力、清除皮肤老化废弃物进而达到延缓衰老、美白的功效，可作为功效原料加入到化妆品中应用。

Description

一种调节皮肤内稳态平衡的化妆品组合物及其应用

技术领域

本发明属于化妆品领域，具体涉及一种调节皮肤内稳态平衡的化妆品组合物及其应用。

背景技术

衰老，是指在增龄过程中表现出以形态改变、功能减退及代谢失调为特点的综合状态，是一切生物体必然会发生的过程，是不可逆的。2050年，全世界60岁以上的老年人口将达到21亿。随着社会老龄化的加剧，人们追求的长寿不再是单纯的寿命延长，而是健康的衰老、优雅的衰老。

皮肤的衰老可以分为内在因素引起的内源性衰老(自然衰老)和继发于外在因素导致的外源性衰老。内源性衰老，是由于生物体内在因素引起的皮肤衰老，如年龄老化，生理老化，皮肤中胶原蛋白和弹性蛋白合成能力下降，细胞质和细胞间质流动性降低，具体表现为皮肤干燥，弹性组织退化，皮肤变薄。外源性衰老，主要是指由紫外线、吸烟、风吹、日晒及接触有害化学物质等环境因素导致的衰老，绝大多数的皮肤变化，如皱纹、色素沉着、老年性色素斑等均与皮肤的外源性衰老有关。一般而言，衰老的皮肤中会积累大量有缺陷的、受损的、老化的物质，这种废弃物的积累被认为是衰老的标志之一。

泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system，UPS)和自噬系统(autophagy)是细胞内两种主要的蛋白降解途径，也是保持细胞内稳态的基础，调控细胞周期、DNA转录修复和翻译，降解多余、功能失调和受损的细胞成分，循环利用资源和能量。因此，细胞内各物质的合成与降解之间的平衡是机体进行正常生理功能的必要条件，一旦这个平衡被打破，细胞将由生理性状态向病理性状态转变，最终导致衰老等。

泛素-蛋白酶体系统(UPS)是细胞内蛋白质降解的主要途径，参与细胞内80％以上蛋白质的降解。蛋白质首先被泛素(多肽)标记，然后被蛋白酶体识别和降解，该过程需要消耗能量，细胞以高度特异方式对不需要的蛋白进行降解。细胞自噬(autophagy)一词来自希腊单词auto-，意思是“自己的”，phagein，意思是“吃”，细胞自噬的意思就是“吃掉自己”。一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后，送入溶酶体(动物)或液泡(酵母和植物)中进行降解进行循环利用。

UPS和自噬共同激活细胞的排毒系统，实现废弃物的再利用，二者在细胞内既能各自发挥作用，又能通过互相补偿或协同作用来维持细胞和蛋白质的正常生理功能，在特定的时间和空间范围内，选择正确的交联方式来维持细胞的正常生理功能。

二裂酵母发酵溶胞产物(Bifida Ferment Lysate)是经双歧杆菌培养、灭活及分解得到代谢产物、细胞质片段、细胞壁组分及多糖复合体，包括维他命B群、矿物质、氨基酸等有益护肤的小分子。二裂酵母发酵溶胞产物具有多种功效，主要为：(1)具有很强的抗免疫抑制活性，促进皮肤DNA修复； (2)有效保护皮肤不受紫外线损伤，帮助预防表皮及真皮光老化；(3)加强角质层代谢，有一定的美白效果；(4)具有很强的抗氧化能力，可以捕捉自由基，抑制脂质的过氧化。

牛奶，牛乳的俗称，含有丰富的蛋白质、脂肪、乳糖、维生素和矿物质等营养物质，具有天然保湿效果，易被皮肤所吸收，能防止肌肤干燥，并可修补干纹，牛奶还可以给肌肤补充营养，舒缓皮肤，特别是被太阳晒伤之后，牛奶具有很好护理效果，自古以来国内外都有使用牛奶及奶制品美容的记载。

桃花含有山柰酸、香豆精、三叶豆甙、柚皮素、维生素A、B、C等成分，这些物质中医学认为，桃花味甘、辛，性微温，入心、肺、大肠经，有活血悦肤、峻下利尿、化瘀止痛等功效。现代医学研究表明，桃花含有山柰酸、香豆精、三叶豆甙、柚皮素、维生素A、B、C等成分，能扩张血管，疏通脉络，润泽肌肤，改善血液循环，促进皮肤营养和氧供给，促进脂褐质素排泄，防止黑色素慢性沉积。《神农本草经》提到，桃花有令人好颜色之功效，《千金方》更是描述“桃花三株，空腹饮用，细腰身”。

目前市场上不具备同时满足自噬-溶酶体和泛素-蛋白酶体双系统调节的产品。

发明内容

本发明提供了一种通过提升自噬体和蛋白酶体的活性，协同增效，调节皮肤内稳态平衡的化妆品组合物及其应用，从而增强皮肤抗氧化能力、清除皮肤老化废弃物的效果，达到延缓衰老、美白的功效。

针对现有市场的需要，本发明的目的在于提供一种调节皮肤内稳态平衡的化妆品组合物及其应用。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

本发明提供了一种调节皮肤内稳态平衡的组合物，所述组合物由以下质量百分数的组分组成：

活性成分 1-5％；

化妆品领域可接受的溶剂 余量；

其中，所述活性成分选自二裂酵母发酵产物溶胞产物、牛奶提取物和桃花提取物，质量比为(1-4):(1-4):(0.2-0.8)。

作为优选，所述组合物由以下质量百分数的组分组成：

活性成分 2％；

化妆品领域可接受的溶剂 余量；

所述二裂酵母发酵产物溶胞产物：牛奶提取物：桃花提取物的质量比为 2:1:0.8；

所述化妆品领域可接受的溶剂包括但不限于去离子水、乙醇、丙二醇、丁二醇、二丙二醇。

作为优选，所述二裂酵母发酵产物溶胞产物：牛奶提取物：桃花提取物的质量比为1:3:0.2；

所述化妆品领域可接受的溶剂包括但不限于去离子水、乙醇、丙二醇、丁二醇、二丙二醇。

作为优选，所述二裂酵母发酵产物溶胞产物通过以下方法制备得到：

选用双歧杆菌接种在无菌培养基中，厌氧发酵培养，巴氏灭菌30min，低温离心收集双歧杆菌菌体，加入6倍量去离子水，将双歧杆菌菌体重悬、破壁处理释放出营养物质，过滤得到。

进一步优选，所述所述双歧杆菌的接种量是培养基重量的3-5％，培养温度为35-40℃，时间为15-30h。

作为优选，所述牛奶提取物从牛乳或牛初乳中等电位析出后，分离干燥得到；所述干燥的方法包括但不限于喷雾干燥、冷冻干燥、真空干燥；所述的等电位点范围是4.5-5.5。

更进一步的，取食品级牛奶进行前处理，去除容易引起腐败的物质，然后精滤，浓缩，通过不同等电点析出目标蛋白，分离、干燥，即得牛奶提取物。

进一步优选，所述牛奶提取物包括但不限于乳糖、牛奶蛋白、牛奶脂质、脱脂牛奶、水解牛奶蛋白。

作为优选，所述桃花提取物通过以下方法制备得到：

将新鲜桃花花朵，分拣并清洗干净，低温干燥，加入5-10倍去离子水，进行湿法超微粉碎，离心，取上清液进行减压浓缩，将沉淀物干燥，即得桃花提取物；所述低温干燥的条件为低于50℃的干燥；所述湿法超微粉粹采用胶体磨或均质机进行。

本发明另一方面还提供了一种组合物的制备方法，包括以下步骤：

按比例分别称取二裂酵母发酵产物溶胞产物、牛奶提取物、桃花提取物，加入溶剂，搅拌混合均匀，过滤，即得。

本发明另一方面还提供了所述的组合物在化妆品中的应用，所述化妆品包括但不限于水剂、乳剂、喷雾、膏霜、面膜、粉底液。

与现有技术相比，本发明具有以下优点和有益效果：

(1)来自牛奶的基本营养物，经过内吞作用，与溶酶体融合，使营养物得到消化，为自噬系统提供营养和能量，提升细胞净化解毒能力。

(2)通过自噬-溶酶体和泛素-蛋白酶体双系统对皮肤内稳态进行调节，达到物质合成和降解的平衡，从而增强皮肤抗氧化能力、清除皮肤老化废弃物的效果，达到延缓衰老、美白的功效。

本发明组合物可以提升自噬体和蛋白酶体的活性，协同增效，达到增强皮肤抗氧化能力、清除皮肤老化废弃物进而达到延缓衰老、美白的功效。

附图说明

图1是效果例2中不同组合物对于自噬活性影响的对比图；

图2是效果例3中不同组合物对于蛋白酶体活性影响的对比图；

图3为效果例4中使用含有实施例6组合物的乳液后皮肤光泽度改善率 (％)对比图；

图4为效果例4中使用含有实施例6组合物的乳液后眼角皱纹总体尺寸减小率(％)对比图。

具体实施方式

以下将通过实施例来详细说明本申请的实施方式，借此对本申请如何应用技术手段来解决技术问题并达成技术功效的实现过程能充分理解并据以实施。

本申请中所用原料、设备，若无特别说明，均为本领域的常用原料、设备，均来自市售产品。本申请中所用方法，若无特别说明，均为本领域的常规方法。

本申请还存在其它多种可实施的技术方案，在此不做一一列举，本申请权利要求中要求保护的技术方案都是可以实施的。

实施例：

在本发明下述的实施例及对比例中，具有多靶点抗衰、抗皱功效的组合物采用以下工艺制备：

S1，二裂酵母发酵产物溶胞产物制备：选用接种量5％的双歧杆菌在无菌培养基中，37℃厌氧发酵培养20h，巴氏灭菌30min，低温离心收集双歧杆菌菌体，加入6倍量去离子水，将双歧杆菌菌体重悬、破壁处理释放出营养物质，过滤，得到二裂酵母发酵产物溶胞产物。

S2，牛奶提取物制备：取食品级牛奶进行前处理，去除容易引起腐败的物质，然后精滤，浓缩，通过不同等电点析出目标蛋白，分离、喷雾干燥，即得牛奶提取物；

S3，桃花提取物制备：选用新鲜桃花花朵，分拣并清洗干净，低温干燥，加入5-10倍去离子水，进行湿法超微粉碎，离心，取上清液进行减压浓缩，将沉淀物干燥，即得桃花提取物；

S4，按活性成分的质量百分比为2％，分别称取S1、S2、S3，加入溶剂，搅拌混合均匀，过滤，即得一种调节皮肤内稳态平衡的化妆品组合物。

实施例1-9及对比例1-3，按照表1中的比例采用上述方法制备获得，并进行功效测试。

表1各实施例及对比例组成

效果例1

体外抗氧化试验：

DPPH又称1,1-二苯基-2-三硝基苯肼，是一种很稳定的氮中心的自由基，它的无水乙醇溶液呈紫色，加入自由基清除剂时，自由基数量减少，吸光度变小，溶液颜色变浅，可评价清除自由基的能力。

用移液器分别量取40μl各组合物(含活性成分1％)，再加入160μl的 DPPH乙醇溶液(200μg/ml)进行稀释并混合均匀，混匀后于室温避光条件下反应30min，再于517nm处测吸光度A，每组设置3组平行实验计算平均值，计算方法如下：

清除率％＝[1-(A₁-A₂)/A₀×100

式中：A₀为未加入各组合物的DPPH溶液的吸光度；

A₁为DPPH溶液中加入各组合物且反应后的吸光度；

A₂为DPPH溶液中加入各组合物，混匀后反应前的吸光度。

表2

由上表可知：

1)实施例1-9组合物的DPPH清除率均高于对比例1-3，说明3种单一原料通过一定比例组合后可获得更好的DPPH清除效果；

2)实施例1-9组合物，随着二裂酵母发酵产物溶胞产物、牛奶提取物、桃花提取物的增加，DPPH清除效果呈上升趋势，桃花提取物尤为明显，达到一定量后趋于平缓。

效果例2

自噬活性试验：

细胞废物被自噬体吞噬，然后自噬体与溶酶体融合，实现细胞废物的消化。自噬体的外膜包含独特的LC3B蛋白，是自噬体膜的一种通用标记物，可以用来监测自噬体的产生发育过程。

HaCat细胞以2*10⁴/孔接种至6孔板上，加入2μM氯喹二磷酸盐(自噬诱导剂)，培养24h，然后加入待测样品(含活性成分1％)，培养48h，使用LC3B(D11)

mAb进行LC3B总蛋白的测定，试验结果以空白对照为0基准显示相对值。

由图1可知：

1)实施例1-9组合物的LC3B总蛋白含量均高于对比例1-3，说明3种单一原料通过一定比例组合后可提高LC3B总蛋白含量，促进自噬体活性；

2)实施例1-4组合物的LC3B总蛋白含量随着二裂酵母发酵产物溶胞产物的比例增加而增加，对自噬活性的促进作用不明显；

3)实施例2、5、6组合物的LC3B总蛋白含量随着桃花提取物的比例增加而增加，说明牛奶提取物在一定比例范围内可通过提供营养提升自噬活性；

4)实施例1、7、8、9组合物的LC3B总蛋白含量随着牛奶提取物的比例增加而增加，对自噬活性有明显的促进作用。

基于此，综合考虑组合物的功效、成本和稳定性等因素，优选实施例8 (二裂酵母发酵产物溶胞产物：牛奶提取物：桃花提取物＝1:3:0.2)。

效果例3

蛋白酶体活性试验：

将正常人体表皮细胞(NHEK)播种于96孔细胞培养板，第二天添加试样(含活性成分1％)，再培养2天。培养完成后，用合成基质进行酶基质反应，测定总酶活性。试验结果以空白对照为100基准显示相对值。

由图2可知：

1)实施例1-9组合物的蛋白酶体活性均高于对比例1-3，说明3种单一原料通过一定比例组合后可提高蛋白酶体活性；

2)实施例1-9组合物的蛋白酶体活性随着二裂酵母发酵产物溶胞产物、牛奶提取物、桃花提取物的比例增加而增加，达到一定比例后呈平缓趋势。

基于此，综合考虑组合物的功效、成本和稳定性等因素，优选实施例6 (二裂酵母发酵产物溶胞产物：牛奶提取物：桃花提取物＝2:1:0.8)。

效果例4

筛选健康志愿者30名，年龄在30-45岁。使用实施例6乳液(分别含活性成分1％、2％、5％)，每天早晚各1次，连续使用4周，利用SkinGloss meter测量皮肤光泽度，利用Antera 3D测量皮肤皱纹，结果如图3和图4 所示。图3为使用含有实施例6组合物的乳液后皮肤光泽度改善率(％)对比图；图4为使用含有实施例6组合物的乳液后眼角皱纹总体尺寸减小率(％) 对比图。

本申请说明书中未作详细描述的内容属于本领域技术人员的公知常识。

如在通篇说明书及权利要求当中所提及的“包含”为一开放式用语，故应解释成“包含但不限定于”。“大致”是指在可接收的误差范围内，本领域技术人员能够在一定误差范围内解决所述技术问题，基本达到所述技术效果。

还需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的商品或者系统不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种商品或者系统所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的商品或者系统中还存在另外的相同要素。

上述说明示出并描述了本申请的若干优选实施例，但如前所述，应当理解本申请并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述发明构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离本申请的精神和范围，则都应在本申请所附权利要求的保护范围内。

Claims (6)

1.一种调节皮肤内稳态平衡的组合物，其特征在于，所述组合物由以下质量百分数的组分组成：

活性成分 2%；

化妆品领域可接受的溶剂 余量；

所述活性成分包括二裂酵母发酵产物溶胞产物、牛奶提取物和桃花提取物，二裂酵母发酵产物溶胞产物：牛奶提取物：桃花提取物的质量比为2:1:0.8或1:3:0.2；

所述化妆品领域可接受的溶剂选自去离子水、乙醇、丙二醇、丁二醇、二丙二醇。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述二裂酵母发酵产物溶胞产物通过以下方法制备得到：

选用双歧杆菌接种在无菌培养基中，厌氧发酵培养，巴氏灭菌30min，低温离心收集双歧杆菌菌体，加入6倍量去离子水，将双歧杆菌菌体重悬、破壁处理释放出营养物质，过滤得到；

所述双歧杆菌的接种量是培养基重量的3-5%，培养温度为35-40℃，时间为15-30h。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述牛奶提取物从牛乳或牛初乳中等电位析出后，分离干燥得到；所述干燥的方法选自喷雾干燥、冷冻干燥、真空干燥；所述的等电位点范围是4.5-5.5。

4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述桃花提取物通过以下方法制备得到：

将新鲜桃花花朵，分拣并清洗干净，低温干燥，加入5-10倍去离子水，进行湿法超微粉碎，离心，取上清液进行减压浓缩，将沉淀物干燥，即得桃花提取物；所述低温干燥的条件为低于50℃的干燥；所述湿法超微粉粹采用胶体磨或均质机进行。

5.一种根据权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

按比例分别称取二裂酵母发酵产物溶胞产物、牛奶提取物、桃花提取物，加入溶剂，搅拌混合均匀，过滤，即得。

6.根据权利要求1-4任一所述的组合物在化妆品中的应用，其特征在于，所述化妆品选自水剂、乳剂、喷雾、膏霜、面膜、粉底液。

Images