CN114748386A - 一种具有美白功效的七白中草药发酵原浆的制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于发酵技术领域,尤其涉及一种具有美白功效的七白中草药发酵原浆的制备方法及应用。所述制备方法为将七白组合物、发酵菌液和水混合得到初始体系,对初始体系进行发酵培养,得到七白组合物发酵原浆。所述七白组合物包含如下重量份数的组份:白芷10~20、白术10~20、茯苓10~20、白芍10~20、白芨10~20、白蔹10~20、赤芍10~20。本发明通过对具有修护功效的中药筛选及组分的合理配比,使用现代发酵技术提取出其中有效成分,得到的发酵原浆添加至化妆品中,具有安全美白的功效,有广阔的应用前景和巨大的市场价值。
Description
技术领域
本发明属于发酵技术领域,尤其涉及一种具有美白功效的七白中草药发酵原浆的制备方法及应用。
背景技术
近年来,人们对化妆品中“天然”成分的关注越来越多,不仅追求化妆品的效果,同时也开始关心化妆品的安全性。伴随着消费者的需求,化妆品行业中出现了越来越多的天然草本护肤系列。从天然植物中提取功能性有效物质是目前化妆品成分研究的热点。越来越多的产品也开始追求植物配方。植物提取物作为一种天然的抗氧化剂、美白剂和防腐剂,将会在化妆品领域里具有广阔的开发应用前景。
尽管发酵概念由来已久,但随着大量科研人员的研究显示,发酵技术在化妆品植物功效原料的开发方面在还是具有良好的应用前景。这是因为中草药本身含有丰富的生物成分,例如维生素、氨基酸、矿物质、多糖、黄酮、多酚等具有良好保湿、美白、舒敏及延缓衰老等功效。而利用微生物发酵技术可以富集这些有效成分,降低分子量,使之易于被皮肤吸收,同时通过改构大大降低毒副作用。
不仅如此,采用微生物发酵技术,可以利用微生物细胞或细胞内的酶催化反应体系对植物原料中的活性物进行结构修饰和改造,从而获得有价值的新产物。此外,发酵对于我们的皮肤也是通过如乳酸菌这类益生菌的代谢活动,将碳水化合物和糖分转化成皮肤喜好的酶和氨基酸的过程。比如说酵母菌发酵产物滤液,不添加一滴水,其成分接近皮肤细胞,敏感肌也能接受。因此,生物发酵护肤品与在高温条件下将活性物质和其它成本进行混合的传统护肤品的制造过程不同,发酵制成的护肤品需在干净无氧的环境中经历长达数周的缓慢发酵过程。得到的活性物质含量更高,对我们皮肤微生态的调节效果更佳。
因此,筛选具有修护皮肤功效的天然中药成分,从中草药发酵美白角度去提供一种安全的有效的化妆品是具有开发前景和经济价值的。
发明内容
为解决上述现有技术中存在的问题,本发明提供了一种具有美白功效的七白中草药发酵原浆的制备方法及应用,本发明通过对具有修护功效的中药筛选及组分的合理配比,使用现代发酵技术提取出其中有效成分,得到的发酵原浆添加至化妆品中,具有安全美白的功效,有广阔的应用前景和巨大的市场价值。
为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
本发明的第一个目的在于提供一种具有美白功效的中药七白发酵原浆的制备方法,包括如下步骤:
将七白组合物、发酵菌液和水混合得到初始体系,对初始体系进行发酵培养,得到七白组合物发酵原浆。
优选地,所述七白组合物包含如下重量份数的组份:白芷10~20、白术10~20、茯苓10~20、白芍10~20、白芨10~20、白蔹10~20、赤芍10~20;所述白芷、白术、茯苓、白芍、白芨、白蔹和赤芍各中药原料为其干粉,其粒径为80~200目,具体可为100目。
本发明通过发酵菌液对中药组合物发酵,保留了中药成分的功效和活性,避免传统提取方式造成的活性成分流失,制备工艺简单,条件温和,可实现工业化大规模生产,可为企业带来良好的经济效益,具备广阔的前景。
优选地,所述发酵菌液中,菌种为乳杆菌,更具体为德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus)。该菌种保藏信息为,保藏单位名称:中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC),保藏单位地址:北京市朝阳区酒仙桥24号院6号楼,保藏编号为以下之一:CICC6103,CICC6097,CICC6101,菌种对应保藏日期:2006年12月31日,2007年1月1号,2007年1月1日,对应分类命名:德氏乳杆菌保加利亚亚种Lactobacillus delbrueckiisubsp.bulgaricus。所述菌种均为现有技术中已有的菌种。
优选地,所述发酵菌液中,所述菌液浓度为106~108cfu/ml,pH值调整为6.5~7.5。
优选地,所述初始体系中发酵菌液、七白组合物与水的用量比为10~20mL:20~30g:150~350g。
优选地,所述具有美白功效的中药七白发酵原浆的制备方法,具体包括以下步骤:
(1)备料
将各中药原料除杂、清洗、烘干,粉碎至80~200目;配制浓度为106~108cfu/ml的发酵菌液,pH值调整为6.5~7.5。
(2)发酵
按配比将发酵菌液、七白组合物和水混合,在20~40℃的恒温培养箱中发酵20~50,得发酵液;
(3)提纯
将所得发酵液过滤,滤液在110℃的温度下高压灭菌30min,使菌种失活,将灭菌后的发酵滤液在6000~12000r/mi n、离心半径为9cm的条件下离心10~30min,弃沉淀,收集上清液,即为本发明所述的具有美白功效的中药七白发酵原浆。
优选地,所述菌种需要预处理,预处理步骤为:
菌种活化:挑取菌落一环于液体培养基中,放入摇床中将菌种活化,得到活化后菌液;
菌种纯化:将活化后的菌液梯度稀释铺板,以便获取单菌落,得到纯化后菌种。
菌种扩大培养:将纯化后的菌种接种到YPD培养基,(pH值为7.0)中,在25℃的摇床中培养,当OD值=0.6~1.0时,得到发酵菌菌液,菌种处在对数期,浓度为(106~108CFU/mL)。
本发明的第二个目的在于提供上述所述的具有美白功效的中药七白发酵原浆在化妆品中的应用。
所述化妆品含有所述中药组合物发酵原浆,其用量为5%。
优选地,所述化妆品包括化妆水、乳液、面霜、面膜、洁面乳或BB霜。
七子白美白补水面膜曾是皇宫的不传秘方。因为其奇妙作用,是古往今来追求美丽人员的优选,七子白美白补水面膜是由白术茯苓、白芍、白芨、白蔹、白茯苓、赤芍六种草本粉和珍珠末混和一起做成的美白补水面膜。针对清除皮肤黑斑、清除皮肤脸上痘痘拥有立即见效的实际效果。目前,将中药组合物以发酵的方式提取应用与化妆品中的情况并不多见,将七白组合物发酵原浆用于维持皮肤微生态平衡从而修护皮肤健康的还未有报道。本发明选用七子白古方中具有美白功效的有效种类,以中医中“君臣佐使”的遣方原则合理复配,从而发挥原料的最大功效。利用合适的菌种以现代发酵工艺制得,优化制备工艺,产品天然安全无副作用,反应条件温和,能有效节约生产成本,简化生产步骤,节约生产时间,最大限度的保持原料的功效性。该发酵技术能够实现大规模的工业化生产,并能控制产品质量的稳定性。
有益效果
本发明公开了一种具有美白功效的七白中草药发酵原浆的制备方法,与现有技术相比,本发明具有如下优点:
(1)各中药依照“君臣佐使”遣方原则合理复配,可协同增效,最大发挥原料的美白养颜功效,比单一中药功效更全面。
(2)本发明提供的制备工艺提取率高,使用发酵提取法的优势是能有效简化生产工艺,使反应过程在温和的条件下进行。同时,发酵提取法还可以改变原料成分的分子结构,提升原料功效,降低毒性和刺激性,优化色泽、味道等优势,是一种较理想的中药提取新工艺,有利于推广应用。
(3)将本发明的中药组合物发酵原浆用于化妆品中可有效提亮肤色,具有有效抗氧化功效,具有巨大的市场价值。
具体实施方式
以下,将详细地描述本发明。在进行描述之前,应当理解的是,在本说明书和所附的权利要求书中使用的术语不应解释为限制于一般含义和字典含义,而应当在允许发明人适当定义术语以进行最佳解释的原则的基础上,根据与本发明的技术方面相应的含义和概念进行解释。因此,这里提出的描述仅仅是出于举例说明目的的优选实例,并非意图限制本发明的范围,从而应当理解的是,在不偏离本发明的精神和范围的情况下,可以由其获得其他等价方式或改进方式。
以下实施例仅是作为本发明的实施方案的例子列举,并不对本发明构成任何限制,本领域技术人员可以理解在不偏离本发明的实质和构思的范围内的修改均落入本发明的保护范围。除非特别说明,以下实施例中使用的试剂和仪器均为市售可得产品。
实施例1具有美白功效的中药七白发酵原浆
一种具有美白功效的中药七白发酵原浆的制备方法,包括如下步骤:
(1)备料
将各中药原料除杂、清洗、烘干,粉碎至80~200目;配制浓度为106~108cfu/ml的发酵菌液,pH值调整为6.5~7.5。
(2)发酵
按配比将发酵菌液、七白组合物和水混合,在20~40℃的恒温培养箱中发酵20~50,得发酵液;
(3)提纯
将所得发酵液过滤,滤液在110℃的温度下高压灭菌30min,使菌种失活,将灭菌后的发酵滤液在6000~12000r/min、离心半径为9cm的条件下离心10~30min,弃沉淀,收集上清液,即为本发明所述的具有美白功效的中药七白发酵原浆。
所述七白组合物包含如下重量份数的组份:白芷10、白术10、茯苓10、白芍10、白芨20、白蔹20、赤芍20;所述白芷、白术、茯苓、白芍、白芨、白蔹和赤芍各中药原料为其干粉,其粒径为80~200目,具体可为100目。
本发明通过发酵菌液对中药组合物发酵,保留了中药成分的功效和活性,避免传统提取方式造成的活性成分流失,制备工艺简单,条件温和,可实现工业化大规模生产,可为企业带来良好的经济效益,具备广阔的前景。
所述发酵菌液中,菌种为乳杆菌,更具体为德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus)。
所述发酵菌液中,所述菌液浓度为106~108cfu/ml,pH值调整为6.5~7.5。
所述初始体系中发酵菌液、七白组合物与水的用量比为10mL:20g:350g。
所述菌种需要预处理,预处理步骤为:
菌种活化:挑取菌落一环于液体培养基中,放入摇床中将菌种活化,得到活化后菌液;
菌种纯化:将活化后的菌液梯度稀释铺板,以便获取单菌落,得到纯化后菌种。
菌种扩大培养:将纯化后的菌种接种到YPD培养基,(pH值为7.0)中,在25℃的摇床中培养,当OD值=0.6~1.0时,得到发酵菌菌液,菌种处在对数期,浓度为(106~108CFU/mL)。
实施例2具有美白功效的中药七白发酵原浆
一种具有美白功效的中药七白发酵原浆的制备方法,包括如下步骤:
(1)备料
将各中药原料除杂、清洗、烘干,粉碎至80~200目;配制浓度为106~108cfu/ml的发酵菌液,pH值调整为6.5~7.5。
(2)发酵
按配比将发酵菌液、七白组合物和水混合,在20~40℃的恒温培养箱中发酵20~50,得发酵液;
(3)提纯
将所得发酵液过滤,滤液在110℃的温度下高压灭菌30min,使菌种失活,将灭菌后的发酵滤液在6000~12000r/min、离心半径为9cm的条件下离心10~30min,弃沉淀,收集上清液,即为本发明所述的具有美白功效的中药七白发酵原浆。
所述七白组合物包含如下重量份数的组份:白芷20、白术20、茯苓20、白芍20、白芨10、白蔹10、赤芍10;所述白芷、白术、茯苓、白芍、白芨、白蔹和赤芍各中药原料为其干粉,其粒径为80~200目,具体可为100目。
本发明通过发酵菌液对中药组合物发酵,保留了中药成分的功效和活性,避免传统提取方式造成的活性成分流失,制备工艺简单,条件温和,可实现工业化大规模生产,可为企业带来良好的经济效益,具备广阔的前景。
所述发酵菌液中,菌种为乳杆菌,更具体为德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus)。
所述发酵菌液中,所述菌液浓度为106~108cfu/ml,pH值调整为6.5~7.5。
所述初始体系中发酵菌液、七白组合物与水的用量比为20mL:30g:150g。
实施例3具有美白功效的中药七白发酵原浆
一种具有美白功效的中药七白发酵原浆的制备方法,包括如下步骤:
(1)备料
将各中药原料除杂、清洗、烘干,粉碎至80~200目;配制浓度为106~108cfu/ml的发酵菌液,pH值调整为6.5~7.5。
(2)发酵
按配比将发酵菌液、七白组合物和水混合,在20~40℃的恒温培养箱中发酵20~50,得发酵液;
(3)提纯
将所得发酵液过滤,滤液在110℃的温度下高压灭菌30min,使菌种失活,将灭菌后的发酵滤液在6000~12000r/min、离心半径为9cm的条件下离心10~30min,弃沉淀,收集上清液,即为本发明所述的具有美白功效的中药七白发酵原浆。
所述七白组合物包含如下重量份数的组份:白芷20、白术16、茯苓15、白芍15、白芨18、白蔹10、赤芍16;所述白芷、白术、茯苓、白芍、白芨、白蔹和赤芍各中药原料为其干粉,其粒径为80~200目,具体可为100目。
所述发酵菌液中,菌种为德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckiisubsp.Bulgaricus)。
所述发酵菌液中,所述菌液浓度为106~108cfu/ml,pH值调整为6.5~7.5。
所述初始体系中发酵菌液、七白组合物与水的用量比为15mL:25g:200g。
实施例4中药七白发酵原浆的美白效果和抗氧化效果
实施例1所得的具有美白功效的中药七白发酵原浆的美白效果和抗氧化效果如下表1所示。
表1.德氏乳杆菌七白发酵原浆美白效果和抗氧化效果
由上表1可得,发酵前灭菌的德氏乳杆菌七白发酵原浆美白效果和抗氧化效果均较好,尤其是美白效果,德氏乳杆菌发酵灭菌后的七白中草药,显著提高了七白本身的美白效果,并且与阳性对照相比,和阳性对照0.04mg/ml曲酸的美白效果相当。可见德氏乳杆菌七白发酵原浆极大地改善了七白中草药的美白效果。同时DPPH自由基清除率也高于其余两组,显著高于0.02mg/mlVE的自由基清除效果。可见本发明的德氏乳杆菌七白发酵原浆有显著的美白和抗氧化效果。
自由基(DPPH)清除实验方法:
阳性对照物用95%乙醇溶解稀释成:0.08mg/mL、0.04mg/mL、0.02mg/mL、0.01mg/mL系列浓度梯度用以验证试验系统。
受试物处理:水溶性受试物用水稀释为多级浓度样品,油溶性受试物用95%乙醇稀释为多级浓度样品。
参照表2,使用10mL试管设立样品管(T)、样品本底(T0)、DPPH管(C)和溶剂本底(C0),每一样品的每个受试浓度的样品管(T)需设立3支平行管,同时DPPH管(C)也需设立3支平行管。
在样品管(T)和样品本底(T0)中各加入1mL相同浓度的样品溶液。
在所有试管中(T、T0、C、C)补充溶剂,水溶性样品用水,油溶性样品用95%乙醇,补足3mL,混匀。
在样品管(T)和DPPH管(C)中加入DPPH乙醇溶液1mL,样品本底(T0)和溶剂本底(C0)用95%乙醇代替,轻轻摇匀,室温下静置5分钟。
将各支反应溶液移入1cm比色皿中,在517nm处测定吸光值。
表2样品加液要求
计算DPPH自由基清除率:
酪氨酸酶活性抑制实验方法:
阳性对照物用pH6.8磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液稀释成:1mg/mL、0.2mg/mL、0.04mg/mL、0.008mg/mL系列浓度梯度用以验证试验系统。
受试物处理:受试物用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液稀释为多级浓度样品。
参照表3,使用10mL试管设立样品管(T)、样品本底(T0)、酶反应管(C)和溶剂本底(C0),每一样品的每个受试浓度的样品管(T)需设立3支平行管,同时酶反应管(C)也需设立3支平行管。
在样品管(T)和样品本底(T0)中各加入1mL相同浓度的样品溶液,酶反应管(C)和溶剂本底(C0)则分别加入1mL磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液。
在样品管(T)和酶反应管(C)中各加入0.5mL酪氨酸酶溶液,样品本底(T0)与溶剂本底(C0)以0.5mL磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液代替,将样品和酪氨酸酶充分混匀,置37℃水浴槽孵育10分钟。
依次在各管中加入2mL的左旋多巴溶液,控制每管反应时间为5分钟,即刻将各管反应溶液移入比色皿中,在475nm处测定吸光值。
表3样品加液要求
计算酪氨酸酶抑制率:
实施例5不同菌株及加菌先后顺序对发酵原浆的影响
表4不同细菌发酵的酪氨酸酶抑制率和DPPH自由基清除率
从表4中可以看出,德氏乳杆菌发酵美白效果更好,显著高于其他三组,并且与阳性对照0.2mg/ml曲酸的美白效果相当,可能是由于酸性环境适宜德氏乳杆菌发酵导致的。同时德氏乳杆菌发酵的七白发酵原浆DPPH自由基清除率显著高于0.02mg/ml的VE,可见本发明德氏乳杆菌七白发酵原浆可以显著提高七白中草药的美白效果的同时抗氧化效果也较好。
实施例6添加七白发酵原浆的爽肤水
所述爽肤水包括以下重量份的组分:
所述爽肤水由以下方法制备:
(1)将透明质酸钠在甘油和丁二醇中预先分散,再加水溶解至分散均匀,降温;
(2)预先将尿囊素加部分水加热至60℃溶解;
(3)在体系降温至40℃时投入搅拌溶解至透明,加入β-葡聚糖、预先分散好的透明质酸、尿囊素、Am91、1,2-己二醇、实施例1制得的具有美白功效的中药七白发酵原浆并用剩余水补足,并搅拌至分散完全。
实施例7添加七白发酵原浆的睡眠面膜
所述睡眠面膜包括以下重量份的组分:
所述睡眠面膜由以下方法制备:
(1)将黄原胶和透明质酸钠在甘油中预先分散,然后再加水溶解;
(2)卡波、聚丙烯酸酯交联聚合物-6投入到部分去离子水中,加热至80℃搅拌溶解至分散均匀,降温;降温至65℃时,和(1)一起投入到去离子水中溶解至透明。
(3)预先将对羟基苯乙酮在1,3-丙二醇和1,2-己二醇中加热溶解,在体系降温至55℃时投入搅拌溶解至透明;
(4)预先将牛油果树果脂略加热溶解后与环五聚二甲基硅氧烷和聚二甲基硅氧烷混合均匀,投入体系中,均质速度6000rpm下均质5分钟。
(5)降温至40℃时,加入精氨酸和实施例1制得的具有美白功效的中药七白发酵原浆,均质速度3000rpm下均质3分钟,至分散均匀完全。
实施例8添加七白发酵原浆的美白贴片面膜液
所述美白贴片面膜液包括以下重量份的组分:
所述的七白组合物发酵原浆保湿面膜制备方法如下:
(1)将黄原胶和透明质酸钠在甘油中预先分散,然后再加水溶解。
(2)将尿囊素、泛醇、羟乙基纤维素加部分去离子水,加热至80℃,搅拌溶解至均匀透明,降温;当体系降温到65℃,和(1)一起投入到去离子水中溶解至透明。
(3)预先将对羟基苯乙酮在1,3-丙二醇和1,2-己二醇中加热溶解至透明,在体系降温至55℃时投入搅拌溶解至透明;
(4)降温至40℃时,将实施例3制得的具有美白功效的中药七白发酵原浆投入,搅拌均匀至完全溶解。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其进行限制;尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的普通技术人员来说,依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换;而这些修改或替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。
Claims (10)
1.一种具有美白功效的七白中草药发酵原浆的制备方法,其特征在于,将七白组合物、发酵菌液和水混合得到初始体系,对初始体系进行发酵培养,得到七白组合物发酵原浆;所述七白组合物包含如下重量份数的组份:白芷10~20、白术10~20、茯苓10~20、白芍10~20、白芨10~20、白蔹10~20、赤芍10~20。
2.根据权利要求1所述的具有美白功效的七白中草药发酵原浆的制备方法,其特征在于,所述七白组合物各中药原料为其干粉,其粒径为80~200目。
3.根据权利要求1所述的具有美白功效的七白中草药发酵原浆的制备方法,其特征在于,所述发酵菌液中,菌种为乳杆菌,更具体为德氏乳杆菌保加利亚亚种。
4.根据权利要求3所述的具有美白功效的七白中草药发酵原浆的制备方法,其特征在于,所述发酵菌液中,菌种浓度为106~108cfu/ml,pH值调整为6.5~7.5。
5.根据权利要求1所述的具有美白功效的七白中草药发酵原浆的制备方法,其特征在于,所述初始体系中发酵菌液、七白组合物与水的用量比为10~20mL:20~30g:150~350g。
6.根据权利要求1所述的具有美白功效的七白中草药发酵原浆的制备方法,其特征在于,所述制备方法具体包括以下步骤:
(1)备料
将各中药原料除杂、清洗、烘干,粉碎至80~200目;配制菌种浓度为106~108cfu/ml的发酵菌液,pH值调整为6.5~7.5;
(2)发酵
按配比将发酵菌液、七白组合物和水混合,在20~40℃的恒温培养箱中发酵20~50,得发酵液;
(3)提纯
将所得发酵液过滤,滤液在110℃的温度下高压灭菌30min,使菌种失活,将灭菌后的发酵滤液在6000~12000r/min、离心半径为9cm的条件下离心10~30min,弃沉淀,收集上清液,即为本发明所述的具有美白功效的中药七白发酵原浆。
7.根据权利要求6所述的具有美白功效的七白中草药发酵原浆的制备方法,其特征在于,所述菌种需要预处理,预处理步骤为:
菌种活化:挑取菌落一环于液体培养基中,放入摇床中将菌种活化,得到活化后菌液;
菌种纯化:将活化后的菌液梯度稀释铺板,以便获取单菌落,得到纯化后菌种;
菌种扩大培养:将纯化后的酵母菌接种到YM培养基,(pH值为7.0)中,在25℃的摇床中培养,当OD值=0.6~1.0时,得到发酵菌菌液,菌种处在对数期,浓度为106~108CFU/mL;
菌种扩大培养:将纯化后的乳酸菌接种到MRS培养基(pH值为7.0)中,在37℃的培养箱中静置培养,当OD值=0.6-1.0时,得到发酵菌菌液,菌种处在对数期,浓度为(106-108CFU/mL)。
8.一种具有美白功效的中药七白发酵原浆在化妆品中的应用,其特征在于,所述化妆品中包含权利要求1-7任一所述的具有美白功效的中药七白发酵原浆。
9.根据权利要求8所述的具有美白功效的七白中草药发酵原浆在化妆品中的应用,其特征在于,所述具有美白功效的中药七白发酵原浆在化妆品中的用量为5%。
10.根据权利要求8所述的具有美白功效的七白中草药发酵原浆在化妆品中的应用,其特征在于,所述化妆品包括化妆水、乳液、面霜、面膜、洁面乳或BB霜。
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国家食品药品监督管理总局: "《化妆品安全技术规范》" * |
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