CN1136778A - 与一种精子区带结合蛋白的自身抗原性抗原决定基相对应的精子抗原 - Google Patents

与一种精子区带结合蛋白的自身抗原性抗原决定基相对应的精子抗原 Download PDF

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Abstract

本发明涉及编码一种哺乳动物Sp17蛋白，特别是人类Sp17蛋白，或其抗原性肽链片段的DNA，以及所说的抗原性片段。这些蛋白和肽链作为免疫避孕试剂和(或)用于诊断自身免疫性不孕症有用。此外，本发明还公开了一种能表达抗原性蛋白或肽链，并能作为免疫避孕试剂来使用的无毒性宿主细胞。

Description

与一种精子区带结合蛋白的自身抗 原性抗原决定基相对应的精子抗原
本发明是在国家健康研究中心授权号No.U54 HD29009的政府资助下完成的。政府对本发明具有确定的权利。
                   本发明涉及的领域
本发明涉及一类抗原，以及用这类抗原进行治疗和诊断的方法。这些抗原相关于精子的透明区结合蛋白上的自身抗原性抗原决定基。
                   本发明的背景
自身抗原是一个生物体的组织成分，生物体可以针对这种组织成分产生免疫应答。由这种自身引导的免疫应答产生的疾病就是自身免疫病(或“自身变态反应”)已知精子上的蛋白是有效力的自身抗原，对这些蛋白质的自身免疫已被确信是引起不育症的一个重要原因。
R.Shabanowita和MO’Rand，Ann.NY Acad.Sci 541,621-632(1988)，在图7中描述了各种对人透明区有亲和性的人蛋白质。
M.O’Rand和E.Widgren，U.S.Patent No.5,175,148，公开了一种相关于兔精上膜自身抗原(RSA)的一种自身抗原性表位的精子抗原。RSA现已知是一个蛋白家族，有4种低分子量糖蛋白(RSA-1，2，3，4：14K，16K，17K，18K)，其功能是充当高亲和性区结合蛋白。对兔RSA3(也称“Sp17”)的克隆化在R.Richardson and M.O’Rand，Mol.Biol.Cell.3，15a(1992)中有描述。
                   本发明的概述
本发明的一个方面是分离的编码人Sp17蛋白或抗原性肽的片段的DNA，选自由下列物质组成的组中：(a)能编码人Sp17蛋白的DNA分离物(如SEQ ID No：1的DNA)此Sp17蛋白具有本文给出的SEQ ID No：2的氨基酸序列；(b)能与上面(a)中的DNA分离物杂交，并能编码一种人Sp17蛋白的DNA分离物；(c)由于遗传密码的简并性而在核苷酸序列上不同于上述(a)和(b)的DNA分离物，且它编码一种人Sp17蛋白；(d)前述的能编码抗原性肽的片段(即能与可结合人Sp17蛋白的抗体结合的肽，正如下面将描述的，典型的这种肽长6至25个氨基酸)。这些蛋白和肽有时在下文中就称作“抗原”，它们都可用作免疫避孕制剂和/或用于诊断自身免疫性不育症，就如下文所要讨论的。
本发明的第二个方面是一个重组DNA序列，它包括载体DNA和一个上述的DNA，
本发明的第三个方面是一种宿主细胞，它包含上文给出的一个重组DNA序列，并能表达由此DNA序列编码的Sp17蛋白及其抗原性肽片段。
本发明的第四个方面是抗原性肽(下文也称作“抗原”或“多种抗原”)，可用作免疫避孕试剂或用于诊断自身免疫性不育。这种肽选自由下列物质组成的组中：(1)哺乳动物Sp17蛋白的长为6至25个氨基酸的抗原性片段；(2)其抗原性等同物，所说的抗原性等同物是：(a)一个修饰过的片段，包含经过在其序列上取代一或多个氨基酸而修饰得到的所说的抗原性片段，或(b)插入上述抗原性片段的序列中的一个更长的肽，它具有(i)多达4个另外的氨基酸残基附着在上述序列的C-末端，(ii)多达4个另外的氨基酸残基附着在上述序列的N-末端，或(iii)多达4个另外的氨基酸残基附着在上述序列的C-末端并同时有多达4个氨基酸残基附着在上述序列的N-末端，其中所说的抗原性等同物与结合哺乳动物Sp17蛋白所说的抗原性片段的抗体相结合。哺乳动物Sp17蛋白的抗原性片段选自由下列物质组成的组中：(i)氨基酸4到氨基酸28片段，(ii)氨基酸34到氨基酸49片段，(iii)氨基酸55到氨基酸82片段，(iv)氨基酸117到氨基酸137片段，(v)在(i)至(iv)的片段中长至少有6个氨基酸的片段。
本发明的第五个方面是一种免疫避孕法，它包含给一个受试者(例如，一个女性受试者)服用有效剂量的上述抗原，以减少该受试者的生育力。
本发明的第六个方面是一种免疫避孕疫苗组合物，包含上面所提到的使受试者减少生育力的有效剂量的抗原与一个药用上可接受的载体的组合。
本发明的第七个方面是检查受试者(例如，一个男性受试者)的自身免疫不孕症的方法，包括检测该受试者体内能结合上文提到的抗原的抗体的存在，而这种抗体的存在表明该受试者患有自免疫不孕症。
本发明的第八个方面是一种无毒宿主细胞(例如，一种微生物宿主细胞)，它包含一个能编码上文提到的抗原的重组DNA序列，它还能表达这种编码抗原。
本发明的第九个方面是一种免疫避孕疫苗配方，包含减少受试者的生育力有效量的上述无毒宿主细胞与一种药用上可接受的载体的组合。
前述文中一个较优选的实施方案中，无毒微生物缺乏能编码β-天门冬氨酸半醛脱氢酶(asd)的一种天然功能性染色体基因，却包含能编码一种功能性asd多肽的重组基因。此重组基因与上文提到的编码一个或多个抗原的一个或多个基因相连。此无毒微生物可能还包括一个突变的cya基因，使这种微生物事实上不能产生功能性腺苷酸坏化酶；而且/或者此微生物还有一个突变的Crp基因，使它事实上不能产生功能性环AMP受体蛋白。
在本文附图和下文提供的说明书中更详细地解释本发明。
                   附图的简单描述
图1显示了来自注射了其自身精子的雄兔的抗血清，与具有本文公开的SEQ ID NO：3到SEQ ID NO：49的氨基酸序列的兔Sp17系列十肽的结合。在此图中，每个十肽的SEQ ID NO数均提示在其左和/或右侧。
图2显示了来自4例有高滴度抗精子抗体的切除输精管的男性的血清库，用图1所用的兔Sp17系列十肽进行测试的结合情况。图中所有峰值表示人自身抗原性，B细胞抗原决定基。
图3显示了图1所述的系列十肽与来自用兔Sp17重组抗原免疫的雌兔的免疫血清的结合情况。
图4显示了图1所术的系列十肽与用合成肽G22C免疫的雄兔体内提取的免疫血清的结合情况。
图5显示了图1所示的系列十肽与用合成肽G22C免疫的雌兔体内提取的免疫血清的结合。
图6描绘了用重组Sp17(融合蛋白)免疫小鼠对生育力的影响。六只小鼠接受了人Sp17。佐剂对照(例数为12)只接受了TITERMAXTM佐剂(由Sigma co.，St.Louis提供)。还有6只小鼠未接受注射。可见经人Sp17重组蛋白免疫的小鼠，其怀孕率下降了42％。
图7给出了兔(RABSP17)，小鼠(MUSSP17)，和人(HUMSP17)的Sp17蛋白序列的序列对比。抗原性片段以黑框表示。数字编序是在人的序列编数的基础上从N-未端偏到C-末端，在另外几种哺乳动物的序列中有中断处，是为了使黑框中显示自身抗原性片段的序列对比最大，编数时跳过了这些中断处，使几种物种之间的自身抗原性片段的编数在黑框中有相关性。
                   本发明的详细描述
本文公开的氨基酸序列是从左至右按氨基端到羧基端的方向显示的。但序列中没有显示氨基和羧基的基团。本文中核苷酸序列只以单链形式，按5’-3’方向，从左至右显示。本文中核苷酸和氨基酸，是按IUPAC-IUB生物化学命名委员会建议的方法，或(对氨基酸)是按三字母密码来描述的，与37CFRξ1.822和已建立的用法相一致。例如见Patent In User Manual，99-102(Nov.1990)(U.S.Patent and Trddemark Office，Office of theAssistant Commissioner for Patents，Washington，D.C.，20231)；U.S.Patent No.4,871,670 to Hudson et al.at Col.3 lines 20-43(申请人特别指明，本文以参考文献的形式引用这个所有其他专利说明书以供参考)A、分子生物学
编码人Sp17蛋白的DNA，不管是cDNA还是基因组DNA，都能编码一种以高亲和力，通过结合硫酸化的复合碳水化合物而结合到人透明区的，分子量约17kd(千道尔顿)的蛋白质。这个定义包括了该DNA天然的等位基因变异。
那些能与本文公开的编码人Sp17蛋白的DNA杂交的编码Sp17蛋白的DNA，可能来自任一生物种，包括鼠类(小鼠，大鼠)，兔，猫，猪，人，猴，或狒狒，但优选编码哺乳动物来源的一种Sp17蛋白最优选编码人Sp17蛋白。合成型DNA可依照已知技术制备。
允许其他编码有关Sp17蛋白的表达的DNA序列与本文提到的DNA序列进行杂交的杂交条件，一般是高度严格条件。例如，在一个标准的原位杂交试验中，这种序列与本文公开的DNA(如SEQ ID No：1)的杂交在由0.3M氯化钠，0.03M枸橼酸钠，0.1％ SDS于60℃或甚至70℃下的洗涤严格性提供的条件下进行(见J.Sambrook et al.，Molecular Cloning，A Laboratory Manual(Ld Ed.1989)(Cold Spring Harbor Laboratory))。
通常，编码Sp17蛋白，并能与本文所示编码人Sp17蛋白的DNA序列杂交的DNA序列，至少与本文所公开的编码人Sp17蛋白的DNA序列有70％，75％，80％，85％，90％，或甚至95％或更多的同源性。
一般说来，编码人Sp17蛋白，并能与本文所公开的编码人Sp17蛋白的DNA杂交的DNA序列，与本文所公开的编码人Sp17蛋白的DNA序列有93％，94％，95％，96％，或甚至97％或更多的同源性。
而且，编码与前述序列编码的Sp17蛋白完全相同，但又因遗传密码子的简并性而产生不同的密码子序列的这种DNA序列，也是本发明的一个方面。这种遗传密码子的简并性(能允许不同核苷酸序列编码同一种蛋白或肽)在文献中是熟知的。例如见U.S.Patent No.4,757,006 to Toole et al.，at Col.2，Table 1.
用遗传工程来生产克隆化的基因，重组DNA，载体，转化的宿主细胞，蛋白和蛋白片段已是众所周知。例如见U.S.Patent No.4,761,371 to Bell et al.et Col. 6 line 3 to Col.9 line 65；U.S.PatentNo.4,877,729 to Clark et al.，at Col.4 line 38 to Col.7 line 6；U.S.Patent No.4,912,038 to Schilling at Col.3 line 26 to Col.14 line 12；and U.S.Patent No.4,879,224 to Waallner at Col.6 line 8 to Col.8line 59.
载体是一种可复制的DNA结构。载体在本文中既用来扩增本文提到的编码Sp17蛋白的DNA，也用来表达本文所给的编码Sp17蛋白质的DNA。表达载体是这样一种可复制的DNA结构：其中的编码一个Sp17蛋白的DNA序列有效地连接到一个适当的控制序列上，该控制序列能影响该DNA序列在合适的宿主中的表达。对这种控制序列的要求根据所选择的宿主和所选用的转化方法不同而不同。通常情况下，控制序列包括一个转录启动子，一个控制转录的可任选的操纵子序列，一段编码合适的mRNA核糖体结合位点的序列，以及控制转录和翻译终止的各种序列。典型的载体包括(但不局限于)质粒，病毒，噬菌体，及可整合的DNA片段(即能经重组整合进宿主基因组的片段)。
DNA区在功能上互相相关时，以可操作的方式连接或以可操作的方式相关联。例如如果某个启动子控制编码序列的转录，就把它有效地连到这个编码序列上，如果一个核糖体结合位点的位置使其得以翻译，就把这个位点有效连接到编码序列上。
转化的宿主细胞是那些用包含有本文所公开的一段DNA序列，并以重组DNA技术构建的载体进行了转化或转染的细胞。转化的宿主细胞通常表达相应受体，但那些转化目的是为了克隆或扩增受体DNA的宿主细胞就不必表达受体。
合适的宿主细胞有原核生物，酵母或高等真核生物的细胞(如哺乳动物细胞和昆虫细胞)。来自多细胞生物体的细胞是重组Sp17蛋白合成的特别合适的宿主，而哺乳动物细胞又是特别优选的。这些细胞在细胞培养中的繁殖已成为一个常规的程序(TissueCulture，Academic Press，Kruse and Patterson，editors(1973))。有用的宿主细胞系的例子有VEDRO和Hela细胞，及中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系。用于这些细胞的表达载体一般包括(若是必需)一个复制起点，一个位于编码所需表达的Sp17蛋白的DNA上游并有效相联的启动子，还有一个核糖体结合位点，一个RNA剪位点(如果用的是含内含子的基因组DNA)，一个多聚腺苷酸化的位点，和一个转录终止序列。
转化脊椎动物细胞所用的表达载体上的转录和翻译控制序列往往是病毒来源的。例如，最常用的启动子就是来自多形瘤，腺病毒2，和猴病毒40(SV40)。例如见U.S.Patent No.4,599,308。
复制起点既可以通过构建包括外源性起点，诸如来自SV40或其他病毒(例如多形瘤，腺病毒，VSV或BPV)的起始点来提供也可以由宿主细胞染色体复制机制提供。如果载体整合到宿主细胞染色体上，那么后续步骤就往往是有效的。
除了使用含病毒性复制起点的载体外，可使用用选择性标记和受体DNA共转化的方法转化哺乳动物细胞。适合的可选择标记的例子有二氢叶酸还原酶(DHFR)或胸腺嘧啶脱氧核苷酸激酶。此方法在U.S.Pat.No.4,399,216中有进一步的描述。
在实施本发明时，可使用象昆虫细胞(例如，培养的草地贪夜蛾细胞)这样的宿主细胞，和象杆状病毒表达载体这样的载体。就象U.S.Patents Nos.4,745,051 and 4,879,236 to Smith et al所描述的那样。
原核生物宿主细胞包括革兰氏阴性或革兰氏阳性的生物体，例如大肠杆菌(E.coli)或芽胞杆菌。
真核微生物如酵母菌培养物也可以被带有本文所公开的分离的DNA的载体所转化。例如见U.S.Patent No.4,745,057。在较低等的真核宿主微生物中，最常用的是啤酒糖酵母菌，尽管一般可得到很多其它的菌株。B、肽
本发明作为实例的抗原性片段中的一组(如本文图1所描述)是选自由具有本文所给出的氨基酸序列的肽组成的组中：SEQ ID NO：3，SEQ ID NO：4，SEQ ID NO：5，SEQID NO：6，SEQ ID NO：7，SEQ ID NO：8，SEQ ID NO：9，SEQ ID NO：10，SEQ ID NO：11，SEQ ID NO：14，SEQ ID NO：15，SEQ ID NO：16，SEQ ID NO：17，SEQID NO：20，SEQ ID NO：21，SEQ ID NO：22，SEQ IDNO：23，SEQ ID NO：24，SEQ ID NO：25，SEQ ID NO：26，SEQ ID NO：27，SEQ ID NO：28，SEQ ID NO：29，SEQ ID NO：34，SEQ ID NO：40，SEQ ID NO：41，SEQID NO：43，和其长度至少是6个氨基酸的片段。其中，尤其优选的是选自由含有本文以下给出的氨基酸序列的肽组成的组中的抗原性片段：SEQ ID NO：5，SEQ ID NO：6，SEQ ID NO：8，SEQ IDNO：9，SEQ ID NO：14，SEQ ID NO：15，SEQ.ID NO：16，SEQ ID NO：20，SEQ ID NO：21，SEQ ID NO：22，SEQ ID NO：24，SEQ ID NO：25，SEQ ID NO：26，SEQID NO：27，SEQ ID NO：40，SEQ ID NO：41，SEQ IDNO：43，和其长度也至少有6个氨基酸的片段。
本发明抗原性片段的另一组实例(如本文图2所描述)，是选自由有本文以下所给出的氨基酸序列的肽组成的组中：SEQID NO：3，SEQ ID NO：6，SEQ ID NO：7，SEQ ID NO：8，SEQ ID NO：9，SEQ ID NO：10，SEQ ID NO：11，SEQ ID NO：12，SEQ ID NO：13，SEQ ID NO：14，SEQID NO：15，SEQ ID NO：16，SEQ ID NO：17，SEQ IDNO：20，SEQ ID NO：21，SEQ ID NO：22，SEQ ID NO：23，SEQ ID NO：24，SEQ ID NO：25，SEQ ID NO：26，SEQ ID NO：27，SEQ ID NO：28，SEQ ID NO：29，SEQID NO：30，SEQ ID NO：32，SEQ ID NO：33，SEQ IDNO：34，SEQ ID NO：35，SEQ ID NO：36，SEQ ID NO：38，SEQ ID NO：39，SEQ ID NO：40，SEQ ID NO：43，SEQ ID NO：47，SEQ ID NO：48，SEQ ID NO：49，和其至少有6个氨基酸长的片段。其中，尤其优选的抗原性片段选自由含本文以下所给出的氨基酸序列的肽组成的组中：SEQ ID NO：8，SEQ ID NO：9，SEQ ID NO：14，SEQ IDNO：15，SEQ ID NO：16，SEQ ID NO：21，SEQ ID NO：22，SEQ ID NO：24，SEQ ID NO：25，SEQ ID NO：34，SEQ ID NO：40，SEQ ID NO：43，和其至少有6个氨基酸长的片段。
一般来说，较长的肽优选包括上述抗原性肽的序列，较长的肽使抗原性序列在分子上处于暴露的位置，而不是埋在分子内部使不能结合。较长的肽也最好是在其抗原的N末端和C末端都只附带不超过4个的附加氨基酸，因为这样长度的序列一般不会在较长的肽上提供一个额外的表位，从而也就不会有害于抗原的活性。
实施本发明所用到的肽包括它的类似物。本文中所用的类似物都是化合物，它们不具备与上述肽相同的氨基酸序列，但有相似的三维结构。在与受体相互作用的蛋白分子中，蛋白与受体的相互作用可能在一个稳定的三维分子上的表面易接近部位发生。通过将关键性结合位点的残基安排成一种恰当的构象，这样就根据现有技术设计和合成出了摹仿本发明中肽的基本表面特征的肽。测定肽和它的类似物的三维结构的方法已知，有时这些方法又称作“合理药物设计技术”。例如见U.S.Patent No.4,833,092,to Geysen；U.S.Patent No.4,859,765 to Nestor；U.S.Patent No.4,853,871 to Pantoliano；U.S.Panent No.4,863,857 to Blalock；(申请人特别指出本文所引证的所有美国专利文献，以其全文编入本文以供参考)。也见Waldrop，Science，247，28029(1990)；Rossmann，Nature，333，392-393(1988)；Weis et al.，Nature，333，426-431(1988)。构建并筛选肽序列库，以鉴定出能与所给蛋白特异性结合的肽的技术是已知的。Scott and Smith，Science，249，386-390(1990)；Devlin et al.，Science，249，404-406(1990)。而且，本领域的技术人员可预料到在不对其活性造成过度不利的影响的情况下，可以对本发明中肽的氨基酸序列进行轻微的缺失和替换。因此，包含这种缺失或替换的肽是本发明的另一方面。
在有氨基酸缺失或替换的肽中，一个或更多肽序列中的氨基酸可能会被一个或更多的不影响序列抗原性的其他氨基酸所取代。这种转变可以由已知的氨基酸之间在物质特征诸如电荷密定，疏水性/亲水性，大小和构型上的相似性来指导完成，从而使氨基酸可被有基本上相同的功能特性的其他氨基酸所替代。例如：
丙氨酸可被缬氨酸或丝氨酸取代；
缬氨酸可被丙氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、或异亮氨酸取代，优选是丙氨酸或亮氨酸；
亮氨酸可被丙氨酸、缬氨酸或异亮氨酸取代，最好是缬氨酸或异亮氨酸；
甘氨酸可被脯氨酸或半胱氨酸取代，最好是脯氨酸；
脯氨酸可被甘氨酸，半胱氨酸，丝氨酸或甲硫氨酸取代，首选甘氨酸，半胱氨酸或丝氨酸；
半胱氨酸可被甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸或甲硫氨酸取代，优选脯氨酸或甲硫氨酸；
甲硫氨酸可被脯氨酸或半胱氨酸取代的，优选半胱氨酸；
组氨酸可被苯丙氨酸或谷氨酰胺取代，优选苯丙氨酸；
苯丙氨酸可被组氨酸，酷氨酸或色氨酸取代，优选组氨酸或酷氨酸；
酷氨酸可被组氨酸，苯丙氨酸或色氨酸取代，首选苯丙氨酸或色氨酸；
色氨酸可被苯丙氨酸或酷氨酸取代，首选酷氨酸；
天冬酰胺可被谷氨酰氨或丝氨酸所取代，优选谷氨酰胺；
谷氨酰胺可被组氨酸，赖氨酸，谷氨酸、天冬酰胺或丝氨酸取代，首选天冬酰胺或丝氨酸；或
丝氨酸可被谷氨酰胺，苏氨酸，脯氨酸、半胱氨酸或丙氨酸取代；
苏氨酸可被谷氨酰胺或丝氨酸取代，首选丝氨酸；
赖氨酸可被谷氨酰胺或精氨酸取代；
精氨酸可被赖氨酸、天冬氨酸或谷氨酸取代，首选赖氨酸或天冬氨酸；
天冬氨酸可被赖氨酸、精氨酸或谷氨酸取代，首选精氨酸或谷氨酸；
谷氨酸可被精氨酸或天冬氨酸取代，首选天冬氨酸。
取代一旦完成，就可以按常规筛选变异体来测定这种取代对与可结合该抗原的抗体的抗原性的影响。
本文用到的“抗原性等同物”这个术语，是指与相应抗体结合的蛋白或肽，此抗体与蛋白或肽的结合用于寻找建立的等同物。用于选择这类抗原性等同物的抗体在本文中称作“选择抗体”。抗原性等同物可以经修饰天然序列中的反应部位而形成，也可以经修饰N-末端氨基和/或C-末端羧基形成。这类等同物包括由酸和/或碱形成的各种盐，(特别是生理学上可接受的无机或有机酸和碱)。其他等同物包括抗原上已修饰过的羧基和/或氨基，以产生酯或酰胺，或是氨基酸保护基团如N-叔-丁氧基羰基。
较优选的修饰是那些提供更稳定，更有活性，更不易在体内被酶降解的肽的修饰。C、免疫避孕方法
正如前面提到的，本发明提供了一种免疫避孕方法，它包括对受试动物施用上文描述的抗原，使用的剂量足以使该受试动物减少生育力。生育力的部分下降(即反映在一个受试群体中生育力减少的效应)都可包括在本发明的范围内。
不管是鸟类还是哺乳类动物都可用本发明的免疫避孕法处理。哺乳动物的例子包括小鼠、兔、狗、猫、牛、猪、绵羊、马和人。优选哺乳动物受试者。受试者可以是雄性或雌性。抗原可以以任一适当的方式施用给受试者。例如肌肉注射，皮下注射，静脉注射，腹膜内注射，口服和鼻喷雾。
施用抗原的量取决于诸如用药途径、物种、和应用加强剂量这样的因素。通常用每磅受试体重约0.1到约100μg的剂量，尤其是每磅约1μg。
本发明的免疫避孕法打算在人和兽医中推广，因而本发明的抗原将制备成人和兽医疫苗组合物。本发明的疫苗组合物包括存在于药用上可接受的载体中的抗原。此抗原在载体中有足够有效的量而使处理的受试者减少生育力。药用上可接受的载体最好是液体，尤其是水性的载体，如磷酸钠缓冲的盐水。疫苗配制品可保存在无菌玻璃容器内，用橡皮塞封口，以便用注射器注入液体或抽出配制品。
本发明的疫苗组合物可任选地含有一种或多种佐剂。任何适合佐剂均可使用。例如氢氧化铝，磷酸铝，植物油和动物油，及类似质，佐剂的使用量取决于所使用的某种佐剂的特性。此外，疫苗组合物可能还包含一种或多种稳定剂，例如糖类(诸如山梨醇、甘露醇、淀粉、蔗糖、糊精和葡萄糖)，蛋白质(如白蛋白或酪蛋白)，和缓冲液(如碱金属磷酸盐和类似物)。D、诊断方法
本发明的诊断方法中提供了一种诊断男性和女性受试者的自身免疫性不育症的方法。“自身免疫”这个术语在此是一般意义上的用法，即女性受试者的免疫是针对外来的精子。
任何检测抗体的常规程序均可用于实施本发明的诊断试验，包括凝集和沉淀反应，放射免疫分析，酶免疫分析(例如U.S.Pat.No.3,654,090)诸如酶联免疫吸附试验(ELISA)，多相荧光免疫分析(例如U.S.Pat.Nos.4,201,763；4,171,311；and 3,992,631)和同质(不需分离)免疫分析。一般见Basic and ClinicalImmunology，364-73(J.Fudenberg et al.，eds.3d Ed.1980)，优选ELISA。
在一个优选的实施方案中，将来自人的待测血清与上述抗原相接触，使血清中的抗体能在溶液中与抗原反应。优选抗原结合在一个固相支持物上，但如果是用同质(不经分离)免疫分析法检测抗体，就不需固相支持物。
从一个人身上获取血清常常是用刺手指的办法，这样获得的是全血(血清是其中一个成分)。然而，可处理血液以获得全血中的单纯血清或血浆部分，然后使血清与结合在固相上的抗原接触。从病人那获取血清或血浆的任何方法均可使用，只要其中所含抗体保持与抗原结合的活性。
抗原可用已知技术结合到固相支持物上。如，可用一个双功能有机分子将抗原附着到固相支持物上。固相可由这样的材料制备：诸如塑料(例如微滴板上孔的底面)，玻璃纤维，醋酸纤维素和硝酸纤维(例如圆片)。抗原附着或吸附到固相支持物上之后，如果需要，抗原可交叉联接。
只有完成可检测的抗体与固相载体的接触这一步，才能使可测的抗体与固着在固相载体上的抗原相互作用。可测的抗体是能与病人血清中结合纯化抗原的抗体再结合的抗体，且它又是可以检测的。更具体地说，这种可测抗体可以是一种抗人免疫球蛋白，它能偶联一个酶分子这样的基团，当有底物存在时就可检测出。优选经亲亲和纯化的酶联山羊或兔抗人抗体。通常，偶联到可测的抗体上的可测基团可以是任何一种酶，或是其他为免疫试验形成的可检测的种类。例如，酶，荧光素基团，放射活性基团和其他可用的基团。特别优选的酶是过氧化酶，当过氧化酶作为可测基团偶联上可测抗体时，可使用象3.3’，5.5’-四甲基联苯胺或O-苯二胺这样的物质作底物来检测可测的抗体。
检测与人抗体反应的可测抗体的步骤包括对偶联在可测抗体上的可测基团进行处理，从而测定它的存在。例如，如果一个象过氧化酶这样的酶分子偶联在抗体上，检测步骤就可包括加一种过氧化酶的底物到结合的抗体上，再观察颜色变化，即过氧化酶催化底物转变成一种有颜色的物质。至于其他酶，如碱性磷酸酶和β-D-半乳糖苷酶，可用其他底物。所用的底物应该这样选择：在酶催化底物化学转变形成一种产物之后，能出现实验者可观察到的变化，这样的底物才能用。象3.3’，5.5’-四甲苯联苯胺，P-硝基苯磷酸或3.3’-二氨基-联苯胺这样的物质就可作为底物。其他可检测的基团也可以偶联到抗体上。
可以装配一个试剂盒，它包含要完成检测血清抗体的诊断试验所需要的各种成分。此盒包括一个包装，内有包被在象微滴板小孔底部或硝酸纤维素或醋酸纤维素圆片这样的固相支持物上的纯化抗原；还有一个容器，内有一种可检测的抗体结合物，它能结合来自病人血清中的抗体，而后者又能结合到抗原上。最优选的试剂盒是一种ELISA试验，因为它有助于较易检阳性或阴性诊断。这样一来，试剂盒还应收藏一个容器，其中有能与结合在可测抗体上的酶反应的底物，当此底物与酶反应后就可以很容易地检测出来。诊断试剂盒中所用的抗原优选基本上或必须不含其它蛋白质。E、无毒性载体细胞
如上所说，本发明用到象微生物这样的无毒性载体细胞来施用抗原。这个方法尤其合适，因为适当的载体微生物能刺激针对它们所表达的抗原的SIgA的产生。适合的无毒性载体细胞包括植物载体细胞和微生物戴体细胞，其描述见R.Curtiss，VaccinesObtained from Antigenic Gene Products of Recombinant Genes，U.S.Patent No.4,888,170，R.Curtiss and G.Cardinean，OralImmuvization by Transgenic Plants，PCT Application WO90/02484，及R.Curtiss，Recombinant Avirulent SalmonellaAntifertility Vaccines，PCT Application WO 92/09684，本文引用其说明书以供参考。
通常情况下，带有一个或多个配子特异性抗原的基因的重组质粒可以被导入数个无毒性细菌菌株之一。这种细菌带有基因突变，使它在靶宿主内能长期存活。有用的无毒性微生物包括(但不局限于)沙门氏菌，大肠杆菌与沙门氏菌杂交种的突变衍生物。较优选的微生物是沙门氏菌属中的成员，象鼠伤寒沙门氏菌，伤寒杆菌，副伤寒杆菌，鸡沙门氏菌，鸡瘟沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌，亚利桑那沙门氏菌或都柏林沙门氏菌。鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的无毒性衍生种在很多宿主中广泛应用。鸡沙门氏菌、鸡瘟沙门氏菌和亚利桑那沙门氏菌的无毒性衍生种特别用于免疫鸟类生物，而鼠伤寒沙门氏菌，伤寒杆菌和副伤寒杆菌常是人类应用的优选菌。猪霍乱沙门氏菌较优选用于免疫猪，而都柏林沙门氏菌用于牛。
特殊的应用是用Cya，Crp和asd突变中的一个，两个或全部三个，它们在宿主中不能产生相关的功能性蛋白，从而使生长受挫。不过，本发明中也使用了其他无毒性微生物。它们包括aroA，aroB，galE，phoP，cdt，omoR和htrA突变株。如果用的是Asd突变，那么所感兴趣的抗原是用一个既能编码此抗原，又能编码asd的载体转到载体微生物中去的。这样一来，只有那些包含所希望的配子特异性抗原的载体微生物能存活，并被选择出来作进一步应用。编码所期望的抗原的重组基因的表达取决于连接asd基因的控制序列。这种连接可能是在载体中对两个基因的定向作用所致，以使两个基因都处在同一控制因素的控制之下，即有相同的启动子和操纵子。
cya突变株和/或crp突变株可被进一步突变，优选经缺失而突变，位置在crp基因邻近的主管沙门氏菌毒力的一个基因中。这个cdt基因的突变，减小了细菌在深部组织如脾脏中有效繁殖的能力。当一个带crp+基因的质粒被放入Δ(crp-cdt)的菌株中时，它将保持其无毒性和免疫原性，因而具有与cya和crp突变株相似的类型。有Δ(crp-cdt)突变并在质粒上带有crp+基因的突变株保持了在肠道和GALT中繁殖的正常能力，但在更深部组织中繁殖的能力减弱。
为刺激更好的免疫应答，优选将微生物或基因产物直接等入消化道或支气管，如经口服，鼻内用药，胃插管或气雾剂形式，以及气本接种(只用于鸟)，和气管内接种。其他合适的方法包括经结膜至副泪腺途径的用药和乳房内接种。使用疫苗的其他方法，诸如静脉内，肌肉内，或皮下注射也是可能的，并主要用于刺激再次免疫应答，就象下文要进一步描述的那样。
一般情况下，当表达抗原的载体微生物用于人或其他哺乳动物时，它们应存在于一个药用上可接受的载体上。如，载体微生物可以是包有肠溶衣的，也可以是用适当的明胶样物质包裹的，就如本领域所熟知的那样(Cryzand Glück，1990，in G.Woodrow and Mr.Leuine，New generation Vaccines，MarcelDekker，New York，pp.921-932)
一旦载体微生物出现在动物体内，抗原对动物的免疫系统应变得可得到。这可以通过载体微生物的死亡导致抗原分子的释放来完成。当然，使无毒性突变株发生“渗漏”而释放胞质中的成分，但并不裂解细胞，这也是有可能的，作为选择，可选择一个基因来控制抗原的产生，使载体细胞能在它死亡之前就有效地产生抗原到胞外环境中。
抗原也可能以气雾剂形式或经鼻内使用。用于受试病人的鼻内组合物常含有载体，使它既不刺激鼻粘膜，又不会明显干扰纤毛的功能。本发明中也采用稀释剂，如水，盐水或其他已知物质。鼻用组合物还要包括保存剂，如氯丁醇和苯甲烃铵氯化物，但不限于此。其中可能还有表面活性剂，来增强上述蛋白对鼻粘膜的吸附。
以前的口服、鼻内、胃或气雾剂免疫还可与配子特异的抗原注射相结合。一旦这种对配子特异性基因产物的分泌性免疫系统被表达配子特异性基因产物的载体微生物的免疫所引发，则这类非肠道免疫可作为一种加强剂增强分泌性免疫应答的表达。这种增强的应答即所谓的次级应答，加强应答或免疫回忆应答，它可导致延长宿主的免疫保护。可以重复多次加强剂量的免疫以产生有利的结果。
当疫苗被制备作注射用时，例如对于加强剂，它们既可以制成液体溶液或悬液；注射前存在于以液体为媒介物的溶液中或悬浮液中的适当的固态形式也是允许的。该制品还可以乳化，或将活性成分包在脂质体媒介中。活性免疫成分常与含有药用上可接受的，且与活性成分相配伍的赋形剂的载体混合。例如合适的载体是，水、盐水、葡聚糖、甘油、乙醇、或类似的物质，及其组合。此外，若是有要求，载体可以含有小量的辅助物质，如湿剂或乳化剂，pH缓冲剂，或能增强疫苗效力的佐剂。佐剂包括诸如胞壁酰二肽，avridine，氢氧化铝，油，皂素和其它本领域已知的物质。这种剂量形式制备的实际方法对本领域的技术人员而言是已知的或显而易见的。例如见Remington’s PharmaceuticalSciences，Mack Pubishing c ompany，Easton，PA，15th ed.，1975。无论怎样，所施用的组合物或配制品含有足以在受治疗的病人体内达到预期的免疫状态剂量的蛋白质。
抗原的用量取决于接受治疗的病人，其免疫系统合成抗体的能力，以及预期达到的保护程度。有效剂量可由本领域的普通技术人员通过建立剂量反应曲线的常规试验易于确立。病人用某一特殊抗原，或其片段，或其类似物至少免疫一次。使用载体微生物时，典型的剂量大约是1×106-1×1010重组无毒性细菌/每个免疫的病人。对受试病人可能会增加用药量或采用多剂量免疫，以达到所要求的对配子特异性抗原的免疫状态的维持。
同时或连续施用不止一种抗原也是可取的。要完成它，可以是施用一种无毒性载体，而其基因可编码不止一种的配子特异性抗原，也可以是施用不同的载体生物。
在以下非限制性实施例中对本发明作了解释。
          实施例1：对人类精子区带结合蛋白
               Sp17的克隆和测序
我们以前已报道了兔Sp17的克隆和测序资料(Richardsnand Rand，Mol.Biol.Cell 3，15a(1992))。这种蛋白已知是兔睾丸/精子自身抗原中兔精子抗原(RSA)家族的一员，而且在小鼠中也表达。对人类中这种蛋白相似物的进一步研究是始于用兔Sp17基因的蛋白编码区作为探针来筛选一个人类睾丸cDNA文库。有一个克隆有1287个碱基对(1287bp)其中在核苷酸水平上与兔Sp17基因有71％完全相同，包括一个455bp的开放性阅读框架，另还有本文给出的SEQ ID No：1序列。此克隆能编码一个有151个氨基酸的蛋白，具有本文所给的SEQ ID NO：2序列，其蛋白分子量约17，534 Da，与兔Sp17有76.7％相同，与小鼠Sp17蛋白序列有76.8％相同。尤其是开始44个氨基酸在小鼠、兔和人的序列中完全相同，并与依赖人睾丸cAMP的IIα型蛋白激酶调节亚单位二聚体相互作用位点有43％同一性。有趣的是，将兔、鼠、人的氨基酸序列进行比较显示出人Sp17在其分子中心部位缺失一个半胱氨酸残基，而其他两类的序列都有这个基因。对鼠、狒狒和人组织的系列作Northen印迹分析显示出睾丸内的基因表达有一个高度限制模式。此外，Northern分析还揭示出在人类睾丸中有大小约1.3kb和0.9kb的两个完全不同的转录本。针对Sp17重组蛋白(rSp17)的抗血清已产生，并用于人精子细胞溶解产物的Western印迹中，以显示29KDa的非主要免疫反应性蛋白。此抗原用抗-rSp17经免疫荧光在人精子上进行了定位。在ELISA中，rSp17显示出对岩藻多糖的结合有饱和的动力。来自有抗精子抗体滴度的切除输精管的男性的血清也显示对rSp17有反应性，这暗示人sp17是一种人精子自身抗原。
              实施例2：系列十肽的产生
                 和免疫分析程序
一个系列的47个N-末端乙酰化的系列十肽，(是相关于兔Sp17蛋白片段的)，已依照已知技术合成出来了；本文以SEQ IDNo：3到SEQ ID No：49公开了这些十肽。
依照已知程序(例如见MO’Rard et al.Dev.Biol.129，231(1988))根据厂家的说明书改成MULTIPINTM系统进行了酶联免疫吸附试验(ELISA)，(Chiron Mimotopes Pty.Ltd.，Clayton，Victoria，3168 Australia)。在下文显示的ELISA数据中，已按标准技术从实验组O.D值中减去了来自正常对照组受试者的IgG的对照O.D.值。
         实施例3：针对肽G22C的抗体的生产
肽G22C，是相关于兔Sp17从氨基酸61到氨基酸82的片段(并有GAKVDDRFYNNHAFQEHESEKC序列)，它已在SalkInstitute按与NIH的合同N01-HD-O-2906，根据标准技术合成出来了。
雄兔和雌兔用其C-末端半胱氨酸上偶联了钥孔血蓝素
(KLH)的G22C肽进行免疫。偶联是用Ellman’s试剂，得自Pieree Scientific的5，5’-二硫-二-〔2-硝基苯甲酸〕以IMJECT免疫原偶联试剂盒的形式进行的。每只兔子接受300μg溶于完全福氏佐剂的连接物的皮下注射，3周后再注射200μg溶于不守全福氏佐剂的连接物，再过3周，最后注射100μg溶于不完全福氏佐剂中的连接物。连接物是在100μl水中用佐剂作1∶1稀释而成的。
            实施例4：兔自身免疫性血清对
              兔Sp17系列十肽的结合
一只雄兔用它自己的精子注射，使它产生自身免疫性抗血清。具体地说，2mg精子用PBS洗三次，重新悬浮于0.5ml PBS，用福氏完全佐剂按体积比作1∶1稀释，再进行皮下注射。一个月后加强注射一次，再过两周作第二次加强注射，再过两周第三次加强注射，此后三个月后第四次加强注射。免疫血清用上述ELISA方法，以上述系列十肽进行筛选。结果如图1所示。请注意一组潜在性自身抗原性表位。
                     实施例5：
      混合人自身免疫血清对兔Sp17系列十肽的结合
图2显示了来自4个切除输精管的男性的血清等体积混合后的结合，如上文所述，经ELISA测试其中针对连续十肽的抗精子抗体滴度很高。请注意图2中所有的峰均代表人自身抗原性B细胞表位。
                     实施例6：
               用Sp17免疫过的兔血清对
            兔Sp17连续十肽的结合
来自一个经重组兔Sp17融合蛋白免疫的雌兔血清对系列十肽的结合，如图3所示。
这个重组融合蛋白是用以下引物经PCR产生的：正链是5’-CGCGGATCCATGTCGATTCCATTTTCC-3’，内有Bam HI位点，负链是5’-CGGGGTACCGCCAGTGCC-CTCAATTGT-3，内有KpnI位点。PCR产物直接克隆进PQE-30的多接头区，测序以证实插入部分的完整，并按Oiagen Inc.(Chatsworth，CA)提供的程序进行细菌性表达。应用这个系统，重组兔Sp17蛋白就可表达，但它去掉了N-末端的头11个氨基酸没有表达，却在N-末端带上一个精氨酸-甘氨酸-丝氨酸序列，后面再跟6个组氨酸和1个甘氨酸，这全都位于Sp17的氨基酸之前。融合蛋白是细菌性溶胞产物以金属螯合物吸附剂nickel-NTA-agarose(Qiagen，Inc.)经亲和层析纯化而得。此融合蛋白用8M尿素，0.1M磷酸钠(-元碱)，0.01M Tris洗脱pH调至5.9，在PBS中透析三次。皮下注射时用的是200μg蛋白溶于0.5mlPBS，再加入1mg ADJUPRIMETM佐剂的混合物(PierceChemical Co.，Rockford，Illinois，USA)。3周后同样体积里的200μg蛋白用于第一次加强注射。
                  实施例7
     G22C免疫的兔血清对兔Sp17连续十肽的结合
用实施例3所描述的合成肽G22C免疫的雄兔取其免疫血清与上述十肽用上述ELISA法结合，结果如图4所示。取自G22C合成肽(实施例3)免疫的雌兔的免疫血清与十肽的结合如图5所示。
                 实施例8
   人Sp17兔免疫血清对兔Sp17连续十肽的结合
图7表明了小鼠经重组人Sp17(融合蛋白)免疫接种后对其生育力产生的影响。6只小鼠只接受了鼠Sp17的免疫接种，另6只先接受了鼠的，右又接受了兔Sp17，还有6只只接受了人Sp17。佐剂对照组(例数为12)只接受了TITERMAXTM佐剂(由Sigma公司提供，St.Louis)。最后还有6只鼠未接种任何上述物质。受人Sp17重组蛋白免疫的鼠显示受孕率下降了42％。
重组人Sp17是作为一种融合蛋白制备出的，制备方法与上述重组兔Sp17的基本相同，只是终产物中并未去掉N-末端的氨基酸。约5μg的融合蛋白溶于水中，用福氏完全佐剂1∶1稀释后，去免疫Balb/c小鼠。4周后，每隔两周加强注射一次溶于不完全福氏佐剂中的融合蛋白。
                 实施例9
        哺乳动物的各种Sp17的序列对比：
图7给出了兔(RABSP17)，鼠(MUSSP17)，和人(HUMSP17)Sp17蛋白序列的序列对比。自身抗原性片段都在黑框中表示。数字编号是从N末端到C末端，是基于人的序列的编号，其中其他哺乳动物的序列中有中断；那是为了使在黑框中显示的自身抗原片段的对比序列最多，编号时数字跳过了这些中断处，从而使几个物种间在黑框中显示的自身抗原片段相对应。
                 实施例10
         重组Sp17对人透明区的结合
在ELISA中显示生物素标记的人重组Sp17可与人透明区结合。这是首次证实任何重组哺乳动物Sp17与任意哺乳动物透明区的结合。
前面的实施例是用以说明本发明的，并不构成对其范围的限制。本发明以下列权利要求进行限定，这些权利要求的等价物也包含在其范围内。
                       序列表(1)一般资料：(i)申请人O′Rand.Michael G.
       Widgren，Esther E.
       Richardson，Richard T
       Lea，Isabel(ii)发明的题目：与一种精子区带结合蛋白的自身抗原性抗原决定基相对应的精子抗原(iii)序列数：49(iv)通讯地址
 (A)收信人：Kenneth D.Sibley
 (B)街：P.O.Box 34009
 (C)城市：Charlotte
 (D)洲：North Carolina
 (E)国家：USA
 (F)邮编：28234(v)计算机可读形式：
 (A)介质类型：软盘
 (B)计算机：IBM PC compatible
 (C)操作系统：PC-DOS/MS-DOS
 (D)软件：PatentIn Release #1.0，Version #1.25(vi)最近申请资料：
  (A)申请号：
  (B)申请日：
  (C)分类：(viii)代理人/代理商资料：
  (A)名称：Sibley，Kenneth D.
  (B)登记号：31,655
  (C)参考号/卷号：5470/73(ix)电信资料：
  (A)电话：919-881-3140
  (B)传真：919-881-3175(2)SEQ ID NO：1的资料：(i)序列特征
  (A)长度：854bp
  (B)型别：核酸
  (C)链型：单链
  (D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：cDNA(iii)假拟：否(iv)反义：否(ix)特征
  (A)名称/关键词：CDS
  (B)定位：32...487(xi)序列描述：SEQ ID NO：1GGAGGTTCCA TAGGCAGTTC TTACCAAGAA G ATG TCG ATT CCA TTC TCC AAC        52
                               Met Ser Ile Pro Phe Ser Asn
                                 1               5ACC CAC TAC CGA ATT CCA CAA GGA TTT GGG AAT CTT CTT GAA GGG CTG      100Thr His Tyr Arg Ile Pro Gln Gly Phe Gly Asn Leu Leu Glu Gly Leu
     10                  15                  20ACA CGC GAG ATT CTG AGA GAG CAA CCG GAC AAT ATA CCA GCT TTT GCA      148Thr Arg Glu Ile Leu Arg Glu Gln Pro Asp Asn Ile Pro Ala Phe Ala
 25                  30                  35GCA GCC TAT TTT GAG AGC CTT CTA GAG AAA AGA GAG AAA ACC AAC TTT      196Ala Ala Tyr Phe Glu Ser Leu Leu Glu Lys Arg Glu Lys Thr Asn Phe40                  45                  50                  55GAT CCA GCA GAA TGG GGG AGT AAG GTA GAA GAC CGC TTC TAT AAC AAT      244Asp Pro Ala Glu Trp Gly Ser Lys Val Glu Asp Arg Phe Tyr Asn Asn
             60                  65                  70CAT GCA TTC GAG GAG CAA GAA CCA CCT GAG AAA AGT GAT CCT AAA CAA      292His Ala Phe Glu Glu Gln Glu Pro Pro Glu Lys Ser Asp Pro Lys Gln
             75              80                  85GAA GAG TCT CAG ATA TCT GGG AAG GAG GAA GAG ACA TCA GTC ACC ATC      340Glu Glu Ser Gln Ile Ser Gly Lys Glu Glu Glu Thr Ser Val Thr Ile
     90                  95                 100TTA GAC TCT TCT GAG GAA GAT AAG GAA AAA GAA GAG GTT GCT GCT GTC      388Leu Asp Ser Ser Glu Glu Asp Lys Glu Lys Glu Glu Val Ala Ala Val
105                 110                 115AAA ATC CAA GCT GCC TTC CGG GGA CAC ATA GCC AGA GAG GAG GCA AAG      436Lys Ile Gln Ala Ala Phe Arg Gly His Ile Ala Arg Glu Glu Ala Lys120                 125                 130                 135AAA ATG AAA ACA AAT AGT CTT CAA AAT GAG GAA AAA GAG GAA AAC AAG      484Lys Met Lys Thr Asn Ser Leu Gln Asn Glu Glu Lys Glu Glu Asn Lys
            140                 145                 150TGAGGACACT GGTTTTACCT CCAGGAAACA TGAAAAATAA TCCAAATCCA TCCATCAACC    544TTCTTATTAA TGTCATTTCT CCTTGAGGAA GGAAGATTTG ATGTTGTGAA ATAACATTCG     604TTACTGTTGT GAAAATCTGT CATGAGCATT TGTTTAATAA GCATACCATT GAAACATGCC     664ACTTGAAGAT TTCTCTGAGA TCATGAGTTT GTTTACACTT GTCTCAAGCC TATCTATAGA     724GACCCTTGGA TTTAGAATTA TAGAACTAAA GTATCTGAGA TTACAGAGAT CTCAGAGGTT     784ATGTGTTCTA ACTATTATCA AATGAATAAA TCCTCTCTAT CACATCCCCC AAAAAAAAAA     844AAAAAAAAAA                                                            854(2)SEQ ID NO：2的资料：(i)序列特征：
(A)长度：151氨基酸
(B)型别：氨基酸
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：蛋白质(xi)序列描述：SEQ ID NO：2Met Ser Ile Pro Phe Ser Asn Thr His Tyr Arg Ile Pro Gln Gly Phe1               5                  10                  15Gly Asn Leu Leu Glu Gly Leu Thr Arg Glu Ile Leu Arg Glu Gln Pro
         20                  25                  30Asp Asn Ile Pro Ala Phe Ala Ala Ala Tyr Phe Glu Ser Leu Leu Glu
     35              40                      45Lys Arg Glu Lys Thr Asn Phe Asp Pro Ala Glu Trp Gly Ser Lys Val
 50                  55                  60Glu Asp Arg Phe Tyr Asn Asn His Ala Phe Glu Glu Gln Glu Pro Pro65                  70                  75                  80Glu Lys Ser Asp Pro Lys Gln Glu Glu Ser Gln Ile Ser Gly Lys Glu
             85                  90                  95Glu Glu Thr Ser Val Thr Ile Leu Asp Ser Ser Glu Glu Asp Lys Glu
        100                 105                 110Lys Glu Glu Val Ala Ala Val Lys Ile Gln Ala Ala Phe Arg Gly His
     115                120                 125Ile Ala Arg Glu Glu Ala Lys Lys Met Lys Thr Asn Ser Leu Gln Asn
130                 135                 140Glu Glu Lys Glu Glu Asn Lys145                 150(2)SEQ ID NO：3的资料：(i)序列特征：
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(iii)假拟：否(xi)序列描述：SEQ ID NO：3Met Ser Ile Pro Phe Ser Asn Thr His Tyr1               5                   10(2)SEQ ID NO：4的资料：(i)序列特征：
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(iii)假拟：否(xi)序列描述：SEQ ID NO：4Pro Phe Ser Asn Thr His Tyr Arg Ile Pro1               5                   10(2)SEQ ID NO：5的资料：(i)序列特征：
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(iii)假拟：否(xi)序列描述：SEQ ID NO：5Asn Thr His Tyr Arg Ile Pro Gln Gly Phe1               5                   10(2)SEQ ID NO：6的资料：(i)序列特征：
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
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(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：32Ser Gln Ser Val Thr Glu Glu Glu Thr Pro1               5                   10(2)SEQ ID NO：33的资料：(i)序列特征：
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
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(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：35Pro Val Leu Thr Ile Asp Ser Glu Asp Asp1               5                   10(2)SEQ ID NO：36的资料：(i)序列特征
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：36Thr Ile Asp Ser Glu Asp Asp Lys Asp Lys1               5                   10(2)SEQ ID NO：37的资料：(i)序列特征
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：37Ser Glu Asp Asp Lys Asp Lys Glu Glu Met1               5                   10(2)SEQ ID NO：38的资料：(i)序列特征
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：38Asp Lys Asp Lys Glu Glu Met Ala Ala Leu1               5                   10(2)SEQ ID NO：39的资料：(i)序列特征
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：39Lys Glu Glu Met Ala Ala Leu Lys Ile Gln1               5                   10(2)SEQ ID NO：40的资料：(i)序列特征
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：40Met Ala Ala Leu Lys Ile Gln Ala Ala Phe1               5                   10(2)SEQ ID NO：41的资料：(i)序列特征
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：41Leu Lys Ile Gln Ala Ala Phe Arg Gly His1               5                   10(2)SEQ ID NO：42的资料：(i)序列特征
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：42Gln Ala Ala Phe Arg Gly His Leu Ala Arg1               5                   10(2)SEQ ID NO：43的资料：(i)序列特征：
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：43Phe Arg Gly His Leu Ala Arg Glu Asp Val1               5                   10(2)SEQ ID NO：44的资料：(i)序列特征
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：44His Leu Ala Arg Glu Asp Val Lys Lys Ile1               5                   10(2)SEQ ID NO：45的资料：(i)序列特征
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：45Arg Glu Asp Val Lys Lys Ile Arg Thr Asn1               5                   10(2)SEQ ID NO：46的资料：(i)序列特征
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：46Val Lys Lys Ile Arg Thr Asn Lys Ala Glu1               5                   10(2)SEQ ID NO：47的资料：(i)序列特征
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：47Ile Arg Thr Asn Lys Ala Glu Glu Glu Thr1               5                   10(2)SEQ ID NO：48的资料：(i)序列特征
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：48Asn Lys Ala Glu Glu Glu Thr Glu Glu Asn1               5                   10(2)SEQ ID NO：49的资料：(i)序列特征
(A)长度：10个氨基酸
(B)型别：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓朴结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：49Lys Ala Glu Glu Glu Thr Glu Glu Asn Asn1               5                   10

Claims (28)

1.编码一种Sp17蛋白的分离的DNA选自由以下物质组成的组中
(a)分离的DNA基本上由编码具有本文以SEQ ID NO：2给出的氨基酸序列的人Sp17蛋白的DNA组成；
(b)分离的DNA，在0.3M NaCl，0.03M柠檬酸钠和0.1％ SDS在60℃的严格洗涤的条件下可与上面(a)中分离的DNA杂交，并能编码一种人Sp17蛋白；
(c)分离的DNA，因遗传密码的简并性而在核苷酸序列上不同于上述(a)和(b)的分离的DNA，并能编码一种人Sp17蛋白；
(d)前面的能编码抗原性肽的片段，该抗原性肽能与可结合人Sp17蛋白的抗体结合。
2.根据权利要求1分离的DNA，基本上由编码本文以SEQ IDNO：2给出的人Sp17蛋白的DNA组成。
3.根据权利要求1分离的DNA，基本上由具有本文以SEQ IDNO：1给出的序列的分离的DNA组成。
4.一种重组DNA序列，包括载体DNA和根据权利要求1的一段DNA。
5.一种宿主细胞，包含一个如权利要求4的重组DNA序列并能表达编码的蛋白或肽。
6.一种免疫避孕的方法，包括给受试者施用有效量的由根据权利要求1的DNA编码的蛋白或肽以减少该受试者的生育力。
7.根据权利要求6的一种免疫避孕方法如，其中该受试者为一个女性受试者。
8.一种免疫避孕疫苗配方，包括减小受试者的生育力有效剂量的由根据权利要求1的DNA编码的蛋白或肽，与一个药用上可接受的载体的组合。
9.一种检查受试病人的自身免疫性不育症的方法，包括：
检测所说的的受试病人中结合由根据权利要求1的DNA编码的蛋白或肽的抗体的存在，所说的抗体的存在指示该病人患有自身免疫不育症。
10.根据权利要求9的方法，其中所说的受试病人为男性。
11.根据权利要求9的方法，其中所说的检测步骤包括检测所说的受试病人体内能结合具有本文以SEQ ID NO：2给出的序列的蛋白的抗体的存在。
12.一种无毒性宿主细胞，包含根据权利要求4的重组DNA序列，并能表达它所编码的蛋白或肽。
13.根据权利要求12的无毒性宿主细胞，其中这个宿主细胞是一种微生物主细胞。
14.一种免疫避孕疫苗配方包括减少受试者生育力有效量的根据权利要求12的无毒性宿主细胞，与药用上可接受的载体的组合。
15.一种抗原性肽，对作为一种免疫避孕试剂或在诊断自身免疫不育症中有用，它选自由下列物质组成的组中：
有6到25个氨基酸长的，哺乳动物Sp17蛋白的抗原性片段及其抗原性等价物。所说的抗原性等价物是：
(a)一个修饰过的片段，包含对所说的抗原性片段经取代其序列上的一个或多个氨基酸修饰而成；或是
(b)一段更长的肽，它插入了所说的十肽的序列或所说的修饰过的十肽的序列，并具有(i)多达4个额外的氨基酸残基附着在该序列的C末端，(ii)多达4个额外的氨基酸残基附着在该序列的N末端，或(iii)多达4个额外的氨基酸残基附着在所说序列的C末端并且多达4个额外的氨基酸残基附于该序列的N末端；
其中所说的抗原性等价物与抗体结合，该抗体与结合了，哺乳动物Sp17蛋白的所说的抗原性片段的抗体结合；
且其中哺乳动物Sp17蛋白的所说的抗原性片段选自由下列物质组成的组中(i)第4号氨基酸到第28号氨基酸的片段，(ii)第39号氨基酸到第49号氨基酸的片段，(iii)第55号氨基酸到第82号氨基酸的片段，(iv)第117号氨基酸到第137号氨基酸的片段，(v)从片段(i)到片段(iv)的片段，它至少有6个氨基酸长。
16.根据权利要求15的抗原性肽，其中所说的哺乳动物Sp17蛋白选自由兔、鼠、人、狒狒和猴的Sp17蛋白组成的组中。
17.根据权利要求15的抗原性肽，其中所说的原性片段选自由具有本文所给的如下氨基酸序列的肽组成的组中：SEQ ID NO：3，SEQ ID NO：4，SEQ ID NO：5，SEQ IDNO：6，SEQ ID NO：7，SEQ ID NO：8，SEQ ID NO：9，SEQ ID NO：10，SEQ ID NO：11，SEQ ID NO：14，SEQ ID NO：15，SEQ ID NO：16，SEQ ID NO：17，SEQID NO：20，SEQ ID NO：21，SEQ ID NO：22，SEQ IDNO：23，SEQ ID NO：24，SEQ ID NO：25，SEQ ID NO：26，SEQ ID NO：27，SEQ ID NO：28，SEQ ID NO：29，SEQ ID NO：34，SEQ ID NO：40，SEQ ID NO：41，SEQ1D NO：43，
还有它的至少有6个氨基酸长的片段。
18.根据权利要求15的抗原性肽，其中所说的原性片段选自由具有本文所给的如下氨基酸序列的肽组成的组中：SEQ ID NO：5，SEQ ID NO：6，SEQ ID NO：8，SEQ IDNO：9，SEQ ID NO：14，SEQ ID NO：15，SEQ ID NO：16，SEQ ID NO：20，SEQ ID NO：21，SEQ ID NO：22，SEQ ID NO：24，SEQ ID NO：25，SEQ ID NO：26，SEQID NO：27，SEQ ID NO：40，SEQ ID NO：41，SEQ IDNO：43，
还有它的至少长6个氨基酸的片段。
19.根据权利要求15的抗原性肽，其中所说的抗原性片段选自由具有本文所给出的以下氨基酸序列的肽组成的组中：SEQ ID NO：3，SEQ ID NO：6，SEQ ID NO：7，SEQ IDNO：8，SEQ ID NO：9，SEQ ID NO：10，SEQ ID NO：11，SEQ ID NO：12，SEQ ID NO：13，SEQ ID NO：14，SEQ ID NO：15，SEQ ID NO：16，SEQ ID NO：17，SEQID NO：20，SEQ ID NO：21，SEQ ID NO：22，SEQ IDNO：23，SEQ ID NO：24，SEQ ID NO：25，SEQ ID NO：26，SEQ ID NO：27，SEQ ID NO：28，SEQ ID NO：29，SEQ ID NO：30，SEQ ID NO：32，SEQ ID NO：33，SEQID NO：34，SEQ ID NO：35，SEQ ID NO：36，SEQ IDNO：38，SEQ ID NO：39，SEQ ID NO：40，SEQ ID NO：43，SEQ ID NO：47，SEQ ID NO：48，SEQ ID NO：49，
还有它的至少长6个氨基酸的片段。
20.根据权利要求15的抗原性肽，其中所说的抗原性片段选自由具有本文所给的如下氨基酸序列的肽组成的组中：SEQ ID NO：8，SEQ ID NO：9，SEQ ID NO：14，SEQ IDNO：15，SEQ ID NO：16，SEQ ID NO：21，SEQ ID NO：22，SEQ ID NO：24，SEQ ID NO：25，SEQ ID NO：34，SEQ ID NO：40，SEQ ID NO：43，
还有它的至少长6个氨基酸的片段。
21.一种免疫避孕方法，包括给受试者服用有效量的根据权利要求12的肽以减小所说的受试者的生育力。
22.根据权利要求21的免疫避孕方法，其中所说的受试者是一个女性受试者。
23.一种免疫避孕疫苗配方，包括减少受试者的生育力有效量的根据权利要求15的肽与药用上可接受的载体的组合。
24.一种检查受试者自身免疫性不育症的方法，包括：
检测在所说的受试者体内能结合根据权利要求15的肽的抗体的存在，该抗体的存在指示该受试者患有自身免疫不育症。
25.根据权利要求24的方法，其中所说的受试者是一个男性受试者。
26.一种无毒性宿主细胞，含有能表达根据权利要求15的肽的重组DNA序列。
27.根据权利要求26的无毒性宿主细胞，该宿主细胞是一种微生物宿主细胞。
28.一种免疫避孕疫苗配方，包含减小受试者的生育力有效量的根据权利要求26的无毒性宿主细胞与一种药用上可接受的载体的组合。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103743910A (zh) * 2013-12-27 2014-04-23 上海市计划生育科学研究所 Ctbs蛋白作为精卵结合受体的靶点在筛选精卵结合抑制剂中的应用
CN105675890A (zh) * 2015-12-31 2016-06-15 湖南农业大学 一种检测实验鼠怀孕的装置及方法
CN108593941A (zh) * 2018-04-26 2018-09-28 北京丹大生物技术有限公司 一种NT-proBNP免疫法测定试剂制备和检测方法

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5641487A (en) * 1989-06-12 1997-06-24 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Contraceptive vaccine based on alloimmunization with zona pellucida polypeptides
WO1997039020A2 (en) * 1996-04-15 1997-10-23 The University Of North Carolina At Chapel Hill Antigenic sequences of a sperm protein and immunocontraceptive methods
US6576636B2 (en) * 1996-05-22 2003-06-10 Protarga, Inc. Method of treating a liver disorder with fatty acid-antiviral agent conjugates
US5795909A (en) 1996-05-22 1998-08-18 Neuromedica, Inc. DHA-pharmaceutical agent conjugates of taxanes
US6465016B2 (en) * 1996-08-22 2002-10-15 Research Triangle Pharmaceuticals Cyclosporiine particles
US6159707A (en) * 1996-09-16 2000-12-12 Johns Hopkins University School Of Medicine Sperm receptors
US5798218A (en) * 1996-09-24 1998-08-25 University Of British Columbia Innovation And Development Corporation Compositions and methods for the specific detection of thy-1 antigen
AU6664798A (en) * 1997-02-18 1998-09-08 Reprogen, Inc. Nucleic acids encoding sperm antigens and reprosa-i polypeptides
DE19720761A1 (de) * 1997-05-07 1998-11-12 Schering Ag Verfahren zur Synthese und Sekretion von zur Kontrazeption geeigneter Proteine oder Proteinfragmente durch attenuierte Salmonellen oder einen anderen Gram-negativen attenuierten Impfstamm zur Erzeugung einer oralen Vakzinierung
US6225444B1 (en) * 1998-02-10 2001-05-01 Protarga, Inc. Neuroprotective peptides and uses thereof
US7235583B1 (en) * 1999-03-09 2007-06-26 Luitpold Pharmaceuticals, Inc., Fatty acid-anticancer conjugates and uses thereof
US6912528B2 (en) * 2000-01-18 2005-06-28 Gregg S. Homer Rechargeable media distribution and play system
US7405077B2 (en) * 2001-02-26 2008-07-29 Albany Medical College Sperm protein 17 for the diagnosis and treatment of cancer
WO2002076404A2 (en) * 2001-03-23 2002-10-03 Protarga, Inc. Fatty alcohol drug conjugates
JP2005500988A (ja) 2001-03-23 2005-01-13 ルイトポルド・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド 脂肪族アミン薬物複合体
JP3977162B2 (ja) * 2002-06-21 2007-09-19 株式会社バンダイナムコゲームス キャラクタ情報管理装置、プログラム及び情報記憶媒体
US20050009188A1 (en) * 2002-09-19 2005-01-13 Kitto G. Barrie Animal immunocontraceptives expressed in plants and uses thereof
US7217526B2 (en) * 2003-01-24 2007-05-15 University Of Massachusetts Medical School Identification of gene sequences and proteins involved in vaccinia virus dominant T cell epitopes
US8067535B2 (en) 2003-01-24 2011-11-29 The University Of Massachusetts Identification of gene sequences and proteins involved in vaccinia virus dominant T cell epitopes
US6950034B2 (en) * 2003-08-29 2005-09-27 Schlumberger Technology Corporation Method and apparatus for performing diagnostics on a downhole communication system
WO2005093043A1 (en) * 2004-02-27 2005-10-06 Research Development Foundation Dna immunocontraceptive vaccines and uses thereof
US7460545B1 (en) * 2004-06-14 2008-12-02 Intel Corporation Enhanced SDRAM bandwidth usage and memory management for TDM traffic
US20100260787A1 (en) * 2009-04-09 2010-10-14 Kiromic Inc. Human sperm fibrous sheath (FS) proteins: new target antigens for use in therapeutic cancer vaccines and diagnostic screening and Methods of Using Same
WO2017013231A1 (en) * 2015-07-21 2017-01-26 Xiang Sue D T and b cell epitopes in sperm surface protein sp17 as anti-cancer vaccines and antibody targets

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5175148A (en) * 1989-11-24 1992-12-29 The University Of North Carolina At Chapel Hill Sperm antigen corresponding to a sperm autoantigenic epitope and methods of using the same
CA2096529C (en) * 1990-11-21 2003-01-21 Roy Curtiss, Iii Recombinant avirulent salmonella antifertility vaccines

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103743910A (zh) * 2013-12-27 2014-04-23 上海市计划生育科学研究所 Ctbs蛋白作为精卵结合受体的靶点在筛选精卵结合抑制剂中的应用
CN103743910B (zh) * 2013-12-27 2015-11-18 上海市计划生育科学研究所 Ctbs蛋白作为精卵结合受体的靶点在筛选精卵结合抑制剂中的应用
CN105675890A (zh) * 2015-12-31 2016-06-15 湖南农业大学 一种检测实验鼠怀孕的装置及方法
CN108593941A (zh) * 2018-04-26 2018-09-28 北京丹大生物技术有限公司 一种NT-proBNP免疫法测定试剂制备和检测方法

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Publication number Publication date
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