CN113671067A - 小果蔷薇根药材的质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种小果蔷薇根药材的质量控制方法，其包括以下步骤：1)对药材粉末进行显微鉴别；2)对药材水分、总灰分及浸出物进行检测；3)对药材进行薄层色谱鉴别；4)测定药材中刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷的含量；5)建立药材的标准指纹图谱。本发明通过药材的显微鉴别，并结合水分、总灰分、浸出物和薄层色谱法以及药材中刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷含量测定和标准指纹图谱的建立，建立了一种科学、完整、可靠、有效的小果蔷薇根药材的质量控制方法，该方法专属性强，具有良好的重现性，并且本发明的质量控制方法能够有效的评价和控制药材的内在质量和用药品质。

Description

小果蔷薇根药材的质量控制方法

技术领域

本发明属于中药材技术领域。更具体地说，本发明涉及一种小果蔷薇根药材的质量控制方法。

背景技术

金樱根为我国南方地区习用药材，也是我国大宗制药原料，是我国著名中成药三金片、妇科千金片、金鸡胶囊的君药，也是王老吉(广东凉茶颗粒)的主要配伍药材，支撑着我国数十亿元工业产值。金樱根药材为同科同属植物金樱子、小果蔷薇和粉团蔷薇的根，其中小果蔷薇根是蔷薇科植物小果蔷薇Rosa cymosa Trattinnick的干燥根，具有祛风除湿，收敛固脱等功效，用于风湿关节痛，跌打损伤，腹泻，脱肛，子宫脱垂等症。

现代研究表明，小果蔷薇根中三萜、黄酮、多糖为其主要成分，具有提高机体免疫功能、抗氧化、抗炎镇痛、抗肿瘤、抑菌抗病毒以及降血糖、降血脂、保护肾脏等多种生物活性。金樱根市场需求量大，基原复杂，亟待制定国家标准，规范和指导产业合理用药。

金樱根药材标准尚未收载入《中国药典》“药材和饮片”之中，但已收入《中国药典》附录，附录规定金樱根药材为蔷薇科植物金樱子、小果蔷薇和粉团蔷薇的根。目前国内外对小果蔷薇根质量控制的研究亦尚属空白。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种小果蔷薇根药材的质量控制方法，其能够有效的评价和控制药材的内在质量和用药品质。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了小果蔷薇根药材的质量控制方法，其包括以下步骤：

1)对药材粉末进行显微鉴别；

2)对药材水分、总灰分及浸出物进行检测，小果蔷薇根药材水分不超过15.07％，总灰分不超过6.28％，浸出物不少于4.54％；

3)对药材进行薄层色谱鉴别；

4)测定药材中刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷的含量，刺梨苷含量不少于0.22mg/g，阿江榄仁亭含量不少于0.18mg/g，野蔷薇苷含量不少于0.31mg/g；

5)建立药材的标准指纹图谱。

优选的是，步骤1)中，对药材粉末进行显微鉴别具有以下特征：药材粉末呈棕褐色，淀粉粒类圆形或不规则型，直径5～20μm，脐点呈点状；石细胞类圆形，类长方形或类方形，直径10～25μm；具有长梭形的纤维，具有孔纹导管，直径在20～150μm；木栓细胞多角形，棕黄色；具有散在的草酸钙方晶，直径5～25μm，具有油细胞。

优选的是，步骤3)中，药材的薄层色谱与对照品刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷的混合色谱在相应的位置上显示出相同的紫红色和蓝色斑点。

优选的是，薄层色谱鉴别按以下操作进行：取薄层色谱供试品溶液5μL，薄层色谱对照品溶液5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为8-12∶0.8-1.2∶1.5-2.5的氯仿-甲醇-甲酸溶液作为展开剂，展开，取出，晾干；喷以10％硫酸-乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；薄层色谱供试品色谱在薄层色谱对照品相应位置上显相同的紫红色和蓝色斑点。

优选的是，薄层色谱供试品溶液的制备方法如下：取本品粉末2-2.5g，加80％乙醇20-25mL，超声提取2-5次，20-30min/次，滤过，合并滤液，减压浓缩，甲醇定容至10mL容量瓶，摇匀，获得供试品溶液；

薄层色谱对照品溶液的制备方法如下：取刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷3种化合物，加甲醇溶解，混合，获得对照品溶液。

优选的是，采用液相色谱同时测定药材中刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷的含量，色谱条件为：采用色谱柱ACQUITY

Phenyl，色谱柱规格2.1×50mm，粒径1.7μm；柱温：30℃；流动相：甲醇-水；梯度洗脱程序：0～1min，25％甲醇；1～2min，25％～35％甲醇；3～20min，38％～80％甲醇；流速为0.2mL/min；检测波长为210nm；分别吸取液相色谱对照品溶液与液相色谱供试品溶液各3μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

优选的是，液相色谱对照品溶液的制备方法为：取刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷对照品适量，精密称定，加50％甲醇溶液制成浓度0.145mg/mL刺梨苷、0.044mg/mL阿江榄仁亭和0.1296mg/mL野蔷薇苷的混合标准品溶液；

液相色谱供试品溶液的制备方法为：取药材粉末1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入80％乙醇20mL，超声提取2次，30min/次，滤过，合并滤液，减压蒸干，用色谱甲醇转溶至10mL容量瓶中并定容，摇匀，以0.22μm的微孔滤膜过滤即得液相色谱供试品溶液。

优选的是，步骤5)中，采用超高效液相色谱对小果蔷薇根药材进行指纹图谱测定，建立了共有模式，标定共有峰15个，至少含有刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷、蔷薇酸、委陵菜酸5个成分。

优选的是，采用液相色谱仪建立药材的标准指纹图谱，色谱条件为：色谱柱为ACQUITY

Phenyl，色谱柱规格2.1×50mm，粒径1.7μm；柱温：30℃；流动相：甲醇-水；梯度洗脱程序：0～1min，25％甲醇；1～2min，25％～35％甲醇；2～3min，35％～38％甲醇；3～40min，38％～80％甲醇；流速为0.2mL/min；检测波长为210nm；分别吸取指纹图谱对照品溶液与指纹图谱供试品溶液各3μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

优选的是，指纹图谱对照品溶液的制备方法为：取刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷、蔷薇酸、委陵菜酸对照品适量，甲醇溶解，配成混合标准品溶液，过0.22μm微孔滤膜，滤过，即得指纹图谱对照品溶液；

指纹图谱供试品溶液的制备方法为：取药材粉末1.0g，置具塞锥形瓶中，加入95％乙醇10mL，超声处理1h，超声功率为150W，频率为40KHz，滤过，滤液蒸干，残渣用5％乙醇溶解，加在D101型大孔吸附树脂柱上，用30％乙醇500mL洗脱，弃去洗脱液，继用无水乙醇800mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，以0.22μm的微孔滤膜过滤，即得指纹图谱供试品溶液。

本发明至少包括以下有益效果：

第一、本发明通过药材的显微鉴别，并结合水分、总灰分、浸出物和薄层色谱法以及药材中刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷含量测定和标准指纹图谱的建立，建立了一种科学、完整、可靠、有效的小果蔷薇根药材的质量控制方法，该方法专属性强，具有良好的重现性。

第二、本发明采用该方法建立小果蔷薇根药材的质量标准，能够有效的评价和控制药材的内在质量和用药品质。

本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

附图说明

图1为小果蔷薇根药材粉末的显微特征图；其中，1为孔纹导管；2为螺纹导管；3为方晶；4为木栓细胞；5为油细胞；6为石细胞；7为纤维；

图2为小果蔷薇根药材薄层色谱鉴别图，其中：1样品(产地：广西灌阳县文市镇)；2样品(产地：广西来宾市良塘镇)；3样品(产地：广西荔浦县东昌镇)；4样品(产地：广西永福县苏桥镇)；5样品(产地：广西全州县凤凰镇)；6样品(产地：广西桂林市雁山镇)；7样品(产地：广西恭城县西岭乡郭金村)；8样品(产地：广西恭城县嘉会乡西南村)；9样品(产地：广西恭城县栗木镇全会村)；10样品(产地：广西恭城县栗木镇栗木村)；11样品(产地：广西恭城县观音乡水滨村)；标(对照品混合溶液)；12样品(阴性对照)；

图3为小果蔷薇根药材含量测定的UPLC图；其中图3-A、混合对照品UPLC图；图3-B、样品UPLC图；其中：A、刺梨苷B、阿江榄仁亭C、野蔷薇苷；

图4为小果蔷薇根药材的标准指纹图谱；其中S为蔷薇酸；

图5为不同产地11批小果蔷薇根药材的指纹图谱；

图6为对照品的指纹图谱，其中1为刺梨苷；2为阿江榄仁亭；3为野蔷薇苷；4为千花木酸；5为蔷薇酸；6为委陵菜酸。

具体实施方式

下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不排除一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。

需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例

1实验仪器及药材

仪器：

BA310型显微镜(Motic，麦克奥迪实业集团有限公司)；拍摄软件：Motic ImagesAdvanced 3.2；Waters ACQUITY超高效液相色谱仪，PDA(光电二极管矩阵)检测器；KQ-500DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；十万分之一电子天平(MettlerToledo公司)；DHG-9140A电热恒温干燥箱(巩义市予华仪器有限责任公司)；8-10型箱式电阻炉(中国沈阳市节能电炉厂)。

试剂与药物：

11批小果蔷薇根(编号S1-S11)具体信息见表1，经广西壮族自治区民族医药研究院植物分类专家戴斌研究员鉴定为蔷薇科植物小果蔷薇R.cymosa Trattinnick的干燥根。对照品刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷、千花木酸、蔷薇酸、委陵菜酸均为课题组从小果蔷薇根中分离得到的化合物，经过¹H和¹³C NMR鉴定并与文献比较为上述物质，HPLC分析纯度均大于98％。Waters所用乙腈、甲醇、乙醇、甲酸均为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。

表1小果蔷薇根药材样品信息

2粉末显微鉴别

将干燥后的不同批次药材打粉，过60目筛，制作水合氯醛透化片，显微镜下观察，显微成像系统记录粉末显微特征，结果如图1所示，药材粉末呈棕褐色，淀粉粒类圆形或不规则型，直径5～20μm，脐点呈点状；石细胞类圆形，类长方形或类方形，直径10～25μm；纤维多为长梭形，孔纹导管多见，直径在20～150μm；木栓细胞多角形，棕黄色；草酸钙方晶多散在，直径5～25μm，偶见油细胞。

3薄层色谱定性鉴别

精密称取药材粉末2.5g，加80％的乙醇25mL，超声提取2次，30min/次，滤过，合并滤液，减压浓缩，残渣加甲醇溶解至10mL容量瓶中并定容，摇匀，作为供试品溶液。照供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。另取对照品刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷三个化合物，加甲醇制成每1mL各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2020年版四部通则0502)试验，吸取上述溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸(10∶1∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同的紫红色和蓝色斑点，且阴性对照无干扰。见图2。

4药材水分、总灰分、浸出物平均含量测定

参照2020年版《中国药典》四部通则0832、2302、2201，对水分(第二法)、总灰分、浸出物(第一法)进行检测，结果见表2。11批样品水分、总灰分、浸出物平均含量分别为5.15～12.56％，1.67～5.23％，5.68～15.00％。根据测定结果，水分、总灰分浸出物最高测定值分别为12.56％，5.23％，浸出物最低测定值为5.68％，以最高测定值的120％设限，最低测定值的80％设限，为15.07％，6.28％，4.54％，结合药材特性、采收加工及贮藏过程等因素，拟定小果蔷薇根药材水分不超过15.07％，总灰分不超过6.28％，浸出物不少于4.54％，因此，建议收入质量标准正文。

表2水分、总灰分、浸出物测定结果

5.刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷含量测定

5.1对照品溶液的制备

取刺梨苷(A)、阿江榄仁亭(B)、野蔷薇苷(C)对照品适量，精密称定，加50％甲醇水制成每1mL含刺梨苷0.145mg、阿江榄仁亭0.044mg、野蔷薇苷0.1296mg的混合溶液，摇匀，以0.22μm的微孔滤膜过滤即得。

5.2供试品溶液的制备

取药材粉末约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入80％乙醇20mL，密塞，超声处理(150W，40KHz)2次，每次30min，滤过，合并滤液，减压蒸干，残渣加甲醇溶解至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，以0.22μm的微孔滤膜过滤即得。

5.3色谱条件

ACQUITY

Phenyl色谱柱(2.1×50mm，1.7μm)；流速：0.2mL/min；检测波长：210nm；柱温：30℃；流动相：甲醇-水；梯度洗脱程序：0～1min，25％甲醇；1～2min，25％～35％甲醇；3～20min，38％～80％甲醇。进样量：3μL。色谱图见图3。

5.4线性关系考察

精密吸取“5.1”项下将对照品混合溶液0.2，0.5，1，1.5，3，2.5，3μL，按“5.3”项下色谱条件进样测定。以峰面积对进样量进行回归，结果见表3，可知各成分在各自范围内线性关系良好。

表3各成分回归方程和线性范围

5.5精密度试验

精密吸取“5.1”项下将对照品混合溶液，连续测定6次，进样量3μL，记录各对照品峰面积并计算RSD值。对照品A、B、C峰面积RSD分别为1.94％、1.55％、1.71％，表明仪器精密度良好。

5.6重复性试验

取同一供试品(S8)，按“5.2”项下方法平行制备6份供试品溶液，在“5.3”项下色谱条件进样测定，测得化合物A、B、C含量RSD分别为0.82％、1.08％、1.68％，结果表明该方法重复性良好。

5.7稳定性试验

取供试品溶液(S8)，分别于0h，2h，4h，8h，12h，24h在“5.3”项下色谱条件进样测定，测得化合物A、B、C含量RSD分别为1.45％，0.88％，0.45％，表明样品在24h内稳定。

5.8加样回收率实验

精密称取含量已知的供试品药材(S8)6份各1g，精密称定，分别精密加入3种被测成分的混合对照品溶液1mL(含刺梨苷0.401mg/mL、阿江榄仁亭1.452mg/mL、野蔷薇苷0.895mg/mL)，按照“5.2”项下方法制备供试品溶液，在“5.3”项下色谱条件进样测定。结果显示3个指标成分的平均回收率分别为99.53％、99.67％、100.92％，其RSD分别为2.43％、1.42％、2.48％，表明回收率良好。

5.9样品含量测定

按“5.2”项下方法制备11批样品的供试品溶液，在“5.3”项下色谱条件进样测定，计算含量，结果见表4。11个批次小果蔷薇根中所测刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷含量范围分别是0.27～8.92mg/g，0.23～18.58mg/g，0.39～16.20mg/g。以最低测定值的80％设限，结合药材产地、采收季节及炮制加工等因素，暂定本品按干燥品计算，含刺梨苷不少于0.22mg/g，含阿江榄仁亭不少于0.18mg/g，含野蔷薇苷不少于0.31mg/g。

表4 11批小果蔷薇根中指标含量测定结果

6指纹图谱的建立

6.1对照品溶液的配制

精密称取刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷、千花木酸、蔷薇酸、委陵菜酸对照品适量，甲醇溶解，配成混合标准品溶液，过0.22μm微孔滤膜，滤过，即得。

6.2供试品溶液的制备

取药材粉末(过60目筛)1g，置具塞锥形瓶中，精密加入95％乙醇10mL，超声处理(150W，40KHz)1h，滤过，滤液蒸干，残渣用5％乙醇溶解，加在D101型大孔吸附树脂柱上，用30％乙醇500mL洗脱，弃去洗脱液，继用无水乙醇800mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，以0.22μm的微孔滤膜过滤，即得。

6.3色谱条件

ACQUITY

Phenyl色谱柱(2.1×100mm，1.7μm)；流速：0.2mL/min；检测波长：210nm；柱温：30℃；流动相：色谱甲醇(B)-水(A)；梯度洗脱程序：0～1min，25％B；1～2min，25％～35％B；2～3min，35％～38％B；3～40min，38％～80％B；进样量：3μL。

6.4精密度试验

按照“6.2”项下供试品溶液制备方法制备样品(S1)，按照“6.3”项下的色谱条件，连续进样六针，以蔷薇酸为参照峰，以其峰面积和保留时间记为1，计算其他各共有峰的相对峰面积和相对保留时间，结果各色谱峰相对峰面积和保留时间RSD均小于2％，表明该方法精密度良好。

6.5重复性试验

取同一批供试品药材6份(S1)，准确称定，按照“6.2”项下供试品溶液制备方法制备样品，在“6.3”项下的色谱条件下进行UPLC测定，以蔷薇酸为参照峰，以其峰面积和保留时间记为1，计算其他各共有峰的相对峰面积和相对保留时间，结果各色谱峰相对峰面积和保留时间RSD均小于2％，表明该方法重复性良好。

6.6稳定性试验

分别将同一供试品溶液(S1)在0、3、6、9、12、24h分别进样分析，以蔷薇酸为参照峰，以其峰面积和保留时间记为1，计算其他各共有峰的相对峰面积和相对保留时间，结果各色谱峰相对峰面积和保留时间RSD均小于1％，表明该方法稳定性良好。

6.7指纹图谱测定和色谱峰辨认

按照“6.1”项下对照品溶液制备方法制备混合对照品溶液，按照“6.2”项下供试品溶液制备方法制备各批次供试品溶液，按“6.3”项下色谱条件进样分析，记录色谱图。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)》建立了11批小果蔷薇根药材指纹图谱的共有模式，有15个共有色谱峰，见图4。并通过对照品(见图6)对其中5个峰进行了指认，分别为1号峰(刺梨苷)、2号峰(阿江榄仁亭)、3号峰(野蔷薇苷)、6号峰(蔷薇酸)、7号峰(委陵菜酸)。11批样品UPLC指纹图谱叠加图见图5。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。

Claims (10)

1.小果蔷薇根药材的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)对药材粉末进行显微鉴别；

2)对药材水分、总灰分及浸出物进行检测，小果蔷薇根药材水分不超过15.07％，总灰分不超过6.28％，浸出物不少于4.54％；

3)对药材进行薄层色谱鉴别；

4)测定药材中刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷的含量，药材中刺梨苷含量不少于0.22mg/g，阿江榄仁亭含量不少于0.18mg/g，野蔷薇苷含量不少于0.31mg/g；

5)建立药材的标准指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的小果蔷薇根药材的质量控制方法，其特征在于，步骤1)中，对药材粉末进行显微鉴别具有以下特征：药材粉末呈棕褐色，淀粉粒类圆形或不规则型，直径5～20μm，脐点呈点状；石细胞类圆形，类长方形或类方形，直径10～25μm；具有长梭形纤维，具有孔纹导管，直径在20～150μm；木栓细胞多角形，棕黄色；具有散在的草酸钙方晶，直径5～25μm，具有油细胞。

3.根据权利要求1所述的小果蔷薇根药材的质量控制方法，其特征在于，步骤3)中，药材的薄层色谱与对照品刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷的混合色谱在相应的位置上显示出相同的紫红色和蓝色斑点。

4.根据权利要求1所述的小果蔷薇根药材的质量控制方法，其特征在于，薄层色谱鉴别按以下操作进行：取薄层色谱供试品溶液5μL，薄层色谱对照品溶液5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为8-12∶0.8-1.2∶1.5-2.5的氯仿-甲醇-甲酸溶液作为展开剂，展开，取出，晾干；喷以10％硫酸-乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；薄层色谱供试品色谱在薄层色谱对照品相应位置上显相同的紫红色和蓝色斑点。

5.根据权利要求4所述的小果蔷薇根药材的质量控制方法，其特征在于，薄层色谱供试品溶液的制备方法如下：取本品粉末2-2.5g，加80％乙醇20-25mL，超声提取2-5次，20-30min/次，滤过，合并滤液，减压浓缩，甲醇定容至10mL容量瓶，摇匀，获得供试品溶液；

薄层色谱对照品溶液的制备方法如下：取刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷3种化合物，加甲醇溶解，混合，获得对照品溶液。

6.根据权利要求1所述的小果蔷薇根药材的质量控制方法，其特征在于，采用液相色谱同时测定药材中刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷的含量，色谱条件为：采用色谱柱ACQUITY

Phenyl，色谱柱规格2.1×50mm，粒径1.7μm；柱温：30℃；流动相：甲醇-水；梯度洗脱程序：0～1min，25％甲醇；1～2min，25％～35％甲醇；3～20min，38％～80％甲醇；流速为0.2mL/min；检测波长为210nm；分别吸取液相色谱对照品溶液与液相色谱供试品溶液各3μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

7.根据权利要求6所述的小果蔷薇根药材的质量控制方法，其特征在于，液相色谱对照品溶液的制备方法为：取刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷对照品适量，精密称定，加50％甲醇溶液制成浓度0.145mg/mL刺梨苷、0.044mg/mL阿江榄仁亭和0.1296mg/mL野蔷薇苷的混合标准品溶液；

液相色谱供试品溶液的制备方法为：取药材粉末1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入80％的乙醇20mL，超声提取2次，30min/次，滤过，合并滤液，减压蒸干，用色谱甲醇转溶至10mL容量瓶中并定容，摇匀，以0.22μm的微孔滤膜过滤即得液相色谱供试品溶液。

8.根据权利要求1所述的小果蔷薇根药材的质量控制方法，其特征在于，步骤5)中，采用液相色谱对小果蔷薇根药材进行指纹图谱测定，建立了共有模式，标定共有峰15个，至少含有刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷、蔷薇酸、委陵菜酸5个成分。

9.根据权利要求8所述的小果蔷薇根药材的质量控制方法，其特征在于，采用液相色谱仪建立药材的标准指纹图谱，色谱条件为：色谱柱为ACQUITY

Phenyl，色谱柱规格2.1×50mm，粒径1.7μm；柱温：30℃；流动相：甲醇-水；梯度洗脱程序：0～1min，25％甲醇；1～2min，25％～35％甲醇；2～3min，35％～38％甲醇；3～40min，38％～80％甲醇；流速为0.2mL/min；检测波长为210nm；分别吸取指纹图谱对照品溶液与指纹图谱供试品溶液各3μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

10.根据权利要求9所述的小果蔷薇根药材的质量控制方法，其特征在于，指纹图谱对照品溶液的制备方法为：取刺梨苷、阿江榄仁亭、野蔷薇苷、蔷薇酸、委陵菜酸对照品适量，甲醇溶解，配成混合标准品溶液，过0.22μm微孔滤膜，滤过，即得指纹图谱对照品溶液；

指纹图谱供试品溶液的制备方法为：取药材粉末1.0g，置具塞锥形瓶中，加入95％乙醇10mL，超声处理1h，超声功率为150W，频率为40KHz，滤过，滤液蒸干，残渣用5％乙醇溶解，加在D101型大孔吸附树脂柱上，用30％乙醇500mL洗脱，弃去洗脱液，继用无水乙醇800mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，以0.22μm的微孔滤膜过滤，即得指纹图谱供试品溶液。

Images