CN113633759A - 用于提高超氧化物歧化酶的活性和/或热稳定性的制剂及其应用 - Google Patents
用于提高超氧化物歧化酶的活性和/或热稳定性的制剂及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提出了用于提高超氧化物歧化酶的活性和/或热稳定性的制剂及其应用，所述制剂包括下列至少之一：儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸。本发明制剂中含有的槲皮素、杨梅素和/或山奈素可以有效地提高超氧化物歧化酶的活性和热稳定性，赋予超氧化物歧化酶较为广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及生物领域。具体地，本发明涉及用于提高超氧化物歧化酶的活性和/或热稳定性的制剂及其应用。
背景技术
超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)是一类氧化还原金属酶，能清除体内超氧自由基阴离子，有效地预防超氧自由基阴离子对机体的损害作用，是机体内氧自由基的头号杀手，是生命健康之本。SOD酶广泛分布于各种生物体内，如动物、植物、微生物等。然而，SOD本身存在着活性低、热稳定性差的缺点，阻碍其推广应用。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。为此，本发明提出了用于提高超氧化物歧化酶的活性和/或热稳定性的制剂、制剂在提高超氧化物歧化酶活性、热稳定性中的用途、组合物、提高超氧化物歧化酶活性和热稳定性的方法、食品、药品、保健品或试剂盒，该制剂含有的儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸可以有效地提高超氧化物歧化酶的活性和热稳定性，赋予超氧化物歧化酶较为广泛的应用前景。
在本发明的一个方面，本发明提出了一种用于提高超氧化物歧化酶的活性和/或热稳定性的制剂。根据本发明的实施例，所述制剂包括下列至少之一：儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸。发明人发现，儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸可以有效地提高超氧化物歧化酶的活性和热稳定性，赋予超氧化物歧化酶较为广泛的应用前景。
在本发明的又一方面，本发明提出了前面所述制剂在提高超氧化物歧化酶活性中的用途。发明人发现，儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸可以有效地提高超氧化物歧化酶的活性，赋予超氧化物歧化酶较为广泛的应用前景。
在本发明的又一方面，本发明提出了前面所述制剂在提高超氧化物歧化酶热稳定性中的用途。发明人发现，儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸可以有效地提高超氧化物歧化酶的热稳定性，赋予超氧化物歧化酶较为广泛的应用前景。
在本发明的又一方面，本发明提出了一种组合物。根据本发明的实施例，所述组合物包括：超氧化物歧化酶；前面所述制剂。该组合物中通过添加上述制剂，可以提高超氧化物歧化酶的活性和热稳定性，提高了超氧化物歧化酶的应用效果。
根据本发明的实施例，所述儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸与所述超氧化物歧化酶的浓度比(摩尔比)分别独立地为1：(1～10)。发明人发现，儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸分别以上述配比与超氧化物歧化酶制成组合物，可以较好的提高超氧化物歧化酶的活性和热稳定性。
在本发明的又一方面，本发明提出了一种提高超氧化物歧化酶活性的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：使超氧化物歧化酶与前面所述制剂接触。发明人发现，儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸可以有效地提高超氧化物歧化酶的活性。
根据本发明的实施例，所述儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸与所述超氧化物歧化酶的浓度比(摩尔比)分别独立地为1：(1～10)。发明人发现，儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸分别以上述配比与超氧化物歧化酶接触，可以较好的提高超氧化物歧化酶的活性。
在本发明的又一方面，本发明提出了一种提高超氧化物歧化酶热稳定性的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：使超氧化物歧化酶与前面所述制剂接触。发明人发现，儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸可以有效地提高超氧化物歧化酶的热稳定性。
根据本发明的实施例，所述儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸与所述超氧化物歧化酶的浓度比(摩尔比)分别独立地为1：(1～10)。发明人发现，儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸分别以上述配比与超氧化物歧化酶接触，可以较好的提高超氧化物歧化酶的热稳定性。
在本发明的又一方面，本发明提出了一种食品、药品、保健品或试剂盒。根据本发明的实施例，所述食品、药品、保健品或试剂盒包括：前面所述组合物。根据本发明实施例的食品、药品、保健品或试剂盒中具有活性和热稳定性较高的超氧化物歧化酶，使其具有较好的应用效果。
需要说明的是，本发明对于儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸的来源不做严格限定，可以来源于食品(例如刺梨、猕猴桃、苹果)、微生物或化学合成。针对食品、药品或保健品，优选食品来源，以提高使用安全性。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
附图说明
本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
图1显示了根据本发明一个实施例的80℃下不同小分子物质对SOD热稳定性影响分析示意图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1
在该实施例中，研究不同小分子物质对超氧化物歧化酶的作用效果。
1、试剂
儿茶素溶液：称取2.9mg儿茶素溶于10mL的乙醇中，得到C儿茶素＝1×10-3mol/L的储备溶液
槲皮素溶液：称取3.0mg槲皮素溶于10mL的乙醇中，得到C槲皮素＝1×10-3mol/L的储备溶液
杨梅素溶液：称取3.2mg杨梅素溶于10mL的乙醇中，得到C杨梅素＝1×10-3mol/L的储备溶液
山奈酚溶液：称取2.9mg山奈酚溶于10mL的乙醇中，得到C山奈素＝1×10-3mol/L的储备溶液
鞣花酸溶液：称取3.0mg鞣花酸溶于10mL的乙醇中，得到C鞣花酸＝1×10-3mol/L的储备溶液
阿魏酸溶液：称取1.9mg阿魏酸溶于10mL的乙醇中，得到C阿魏酸＝1×10-3mol/L的储备溶液
VB1溶液：称取3.4mg维生素B1溶于10mL的水中，得到Cvb1＝1×10-3mol/L的储备溶液。
SOD溶液：Mr(SOD)＝37.8kDa，称取37.8mg SOD溶解于10mL磷酸盐缓冲液中，得到CSOD＝1×10-4mol/L的储备溶液。
2、步骤
实验组1：各取100μL的SOD溶液，分别加入到5个10mL的离心管中，然后再分别向离心管中各加入100μL的儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸溶液，另取100μL的SOD溶液作为空白对照，放入80℃水浴锅中，孵育4个小时，每隔20min检测一次酶活性。
实验组2：各取100μL的SOD溶液，分别加入到5个10mL的离心管中，然后再分别向离心管中加入70μL的儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸溶液，另取100μL的SOD溶液作为空白对照，放入80℃水浴锅中，孵育4个小时，每隔20min检测一次酶活性。
实验组3：各取100μL的SOD溶液，分别加入到5个10mL的离心管中，然后再分别向离心管中加入50μL的儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸溶液，另取100μL的SOD溶液作为空白对照，放入80℃水浴锅中，孵育4个小时，每隔20min检测一次酶活性。
实验组1～3的结果相近，下面仅以实验组1的实验数据为例进行分析。结果如图1所示，可以看出，添加儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸均可以提高SOD活性，并显著提高SOD的热稳定性，而Vb1不能提高SOD酶的活性和热稳定性(与对照组SOD的曲线几乎贴合，图中未显示)。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (10)
1.一种用于提高超氧化物歧化酶的活性和/或热稳定性的制剂，其特征在于，包括下列至少之一：儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸。
2.权利要求1所述制剂在提高超氧化物歧化酶活性中的用途。
3.权利要求1所述制剂在提高超氧化物歧化酶热稳定性中的用途。
4.一种组合物，其特征在于，包括：
超氧化物歧化酶；
权利要求1所述制剂。
5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸与所述超氧化物歧化酶的浓度比分别独立地为1：(1～10)。
6.一种提高超氧化物歧化酶活性的方法，其特征在于，包括：
使超氧化物歧化酶与权利要求1所述制剂接触。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸与所述超氧化物歧化酶的浓度比分别独立地为1：(1～10)。
8.一种提高超氧化物歧化酶热稳定性的方法，其特征在于，包括：
使超氧化物歧化酶与权利要求1所述制剂接触。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述儿茶素、槲皮素、杨梅素、山奈酚、鞣花酸和阿魏酸与所述超氧化物歧化酶的浓度比分别独立地为1：(1～10)。
10.一种食品、药品、保健品或试剂盒，其特征在于，包括：权利要求4或5所述组合物。
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