JPH06128168A - 抗変異原活性並びにスーパーオキシドジムスターゼ様活性を有 する茶カテキン類 - Google Patents
抗変異原活性並びにスーパーオキシドジムスターゼ様活性を有 する茶カテキン類Info
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- JPH06128168A JPH06128168A JP4319196A JP31919692A JPH06128168A JP H06128168 A JPH06128168 A JP H06128168A JP 4319196 A JP4319196 A JP 4319196A JP 31919692 A JP31919692 A JP 31919692A JP H06128168 A JPH06128168 A JP H06128168A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 茶葉を水、アルコール又はこれらの混合溶液
を抽出溶媒として抽出した茶カテキン類を有効成分とす
る抗変異原剤並びにスーパーオキシドジムスターゼ様活
性食材を提供する。 【構成】 茶葉を水、アルコール又はこれらの混合溶液
を抽出溶媒として抽出した茶カテキン類の中で、エピガ
ロカテキンガレート（（−）ＥＧＣｇ）、エピカテキン
ガレート（（−）ＥＣｇ）及びエピガロカテキン
（（−）ＥＧＣ）は、変異原剤 Ｔｒｐ−Ｐ−１並びに
ＩＱに対する抗変異原活性は極めて強く、又活性酸素フ
リーラジカル消去作用すなわちスーパーオキシドジムス
ターゼ（ＳＯＤ）様活性も極めて強く、毒性も極めて低
く生体に安全である。
を抽出溶媒として抽出した茶カテキン類を有効成分とす
る抗変異原剤並びにスーパーオキシドジムスターゼ様活
性食材を提供する。 【構成】 茶葉を水、アルコール又はこれらの混合溶液
を抽出溶媒として抽出した茶カテキン類の中で、エピガ
ロカテキンガレート（（−）ＥＧＣｇ）、エピカテキン
ガレート（（−）ＥＣｇ）及びエピガロカテキン
（（−）ＥＧＣ）は、変異原剤 Ｔｒｐ−Ｐ−１並びに
ＩＱに対する抗変異原活性は極めて強く、又活性酸素フ
リーラジカル消去作用すなわちスーパーオキシドジムス
ターゼ（ＳＯＤ）様活性も極めて強く、毒性も極めて低
く生体に安全である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、茶葉の水又はアルコー
ル抽出で得られる茶カテキン類を有効成分とする抗変異
原剤並びにスーパーオキシドジムスターゼ様活性食材
ル抽出で得られる茶カテキン類を有効成分とする抗変異
原剤並びにスーパーオキシドジムスターゼ様活性食材
【０００２】
【従来の技術】疫学調査によると、ヒトの発癌因子は、
食物とタバコであり、この二つが環境中の発癌因子の約
７０％を占めているといわれる。突然変異の抑制には、
変異原物質が直接、物理的あるいは化学的に不活性化さ
れたり、生体内で代謝活性される際にその代謝酵素の活
性が阻害され、あるいは代謝産物の活性が阻害され、失
われたりして不活性化される場合がある。さらには、第
２級アミンと亜硝酸との反応で抗変異原が生成する場合
のように、亜硝酸が消費されてＮ−ニトロソ化反応が阻
害されたり、反応によって生成したニトロソ化合物（特
にニトロソアミド型化合物）の化学変化が促進され、結
果として変異が抑制される場合などのあることが知られ
ている。又、変異原物質が、細胞内ＤＮＡに作用した
後、変異が固定されるまでの過程で働き、ＤＮＡの修
復、複製機構を介した抗変異活性を示す場合もある。こ
の機構には、傷害を受けたＤＮＡの除去修復の促進、Ｓ
ＯＳ反応［Ｏｄａ，Ｙ．，Ｎａｋａｍｕｒａ，Ｓ．，Ｏ
ｋｉ，Ｉ．，Ｋａｔｏ，Ｔ．，Ｓｈｉｎａｇａｗａ，
Ｈ．：Ｍｕｔａｔｉｏｎ Ｒｅｓ．，１４７，２１９−
２２９（１９８５）］修復の抑制など様々な現象がから
むものと思われる。一方、老化に伴う病気としては癌を
始め、動脈硬化や本能性高血圧、パーキンソン氏病、ア
ルツハイマー型痴呆、免疫不全等の難病が知られてい
る。多くの生物は酸素がなくては生きてゆけない。一般
に酸素には、動物に必須の酸素（三重頃酸素分子；３Ｏ
２）と、特定の条件あるいは体の不調時に生ずるラジカ
ル（活性酸素）とが存在する。ラジカルは直接又は間接
的（過酸化反応という形で）に細胞膜、細胞内顆粒膜、
あるいはＤＮＡをはじめ種々の細胞成分を変質、損傷さ
せたりする。このラジカルは体内で生成され、その種類
はスーパーオキシドアニオン（−Ｏ２・）、一重頃酸素
（１Ｏ２・）、水酸化ラジカル（・ＯＨ）等が存在す
る。このうちスーパーオキシドアニオン（−Ｏ２・）は
細胞膜の不飽和脂肪酸などに作用して過酸化反応を引き
起こし、脂質に対する酸化力は動物に必須な酸素の数千
倍も高いといわれている。スーパーオキシドジムスター
ゼ（ＳＯＤ；酵素番号 ＥＣ１．１５．１．１）は、１
９６９年にマックコルド等［ＭｃＣｏｒｄ，Ｊ．Ｍ．＆
Ｆｒｉｄｏｖｉｃｈ，Ｉ．：Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅ
ｍ．，２４４，６０４９（１９６９）］によってその作
用が発見された酵素であり、酸素分子が一電子還元され
て生ずるスーパーオキシドアニオン（−Ｏ２・）を不均
化する ２−Ｏ２・＋２Ｈ＋→Ｈ２Ｏ２＋Ｏ２ を触媒する。人体が正常な時には、ＳＯＤが働いてスー
パーオキシドアニオンの発生を抑えている。このＳＯＤ
活性は加齢と共に低下し、すなわち壮年期から老年期に
なると活性が低下し、ＳＯＤ活性の増減は生体の老化、
癌化のバロメーターとも言われている。このようなＳＯ
Ｄ活性が低下するとラジカルの発生は抑えにくくなりＳ
ＯＤを摂取補強するか、又はラジカルを捕捉除去するＳ
ＯＤ様活性物質を有する物質を摂取することが必要とな
ってくる。このような背景のもとに、抗癌、老化防止に
対する特効薬がない今日、環境中から変異原／発癌因子
を取り除いたり不活性化する抗変異原剤、並びに活性酸
素フリーラジカル消去作用を示すスーパーオキシドジム
スターゼ（ＳＯＤ）様活性食材に関する研究や検討が進
められている。しかしながら、多くの抗変異原剤並びに
ＳＯＤ様活性食材は、それ自体生体に有害であったり嗜
好性の面で常時飲用に不適当であるため実用化が困難で
ある。
食物とタバコであり、この二つが環境中の発癌因子の約
７０％を占めているといわれる。突然変異の抑制には、
変異原物質が直接、物理的あるいは化学的に不活性化さ
れたり、生体内で代謝活性される際にその代謝酵素の活
性が阻害され、あるいは代謝産物の活性が阻害され、失
われたりして不活性化される場合がある。さらには、第
２級アミンと亜硝酸との反応で抗変異原が生成する場合
のように、亜硝酸が消費されてＮ−ニトロソ化反応が阻
害されたり、反応によって生成したニトロソ化合物（特
にニトロソアミド型化合物）の化学変化が促進され、結
果として変異が抑制される場合などのあることが知られ
ている。又、変異原物質が、細胞内ＤＮＡに作用した
後、変異が固定されるまでの過程で働き、ＤＮＡの修
復、複製機構を介した抗変異活性を示す場合もある。こ
の機構には、傷害を受けたＤＮＡの除去修復の促進、Ｓ
ＯＳ反応［Ｏｄａ，Ｙ．，Ｎａｋａｍｕｒａ，Ｓ．，Ｏ
ｋｉ，Ｉ．，Ｋａｔｏ，Ｔ．，Ｓｈｉｎａｇａｗａ，
Ｈ．：Ｍｕｔａｔｉｏｎ Ｒｅｓ．，１４７，２１９−
２２９（１９８５）］修復の抑制など様々な現象がから
むものと思われる。一方、老化に伴う病気としては癌を
始め、動脈硬化や本能性高血圧、パーキンソン氏病、ア
ルツハイマー型痴呆、免疫不全等の難病が知られてい
る。多くの生物は酸素がなくては生きてゆけない。一般
に酸素には、動物に必須の酸素（三重頃酸素分子；３Ｏ
２）と、特定の条件あるいは体の不調時に生ずるラジカ
ル（活性酸素）とが存在する。ラジカルは直接又は間接
的（過酸化反応という形で）に細胞膜、細胞内顆粒膜、
あるいはＤＮＡをはじめ種々の細胞成分を変質、損傷さ
せたりする。このラジカルは体内で生成され、その種類
はスーパーオキシドアニオン（−Ｏ２・）、一重頃酸素
（１Ｏ２・）、水酸化ラジカル（・ＯＨ）等が存在す
る。このうちスーパーオキシドアニオン（−Ｏ２・）は
細胞膜の不飽和脂肪酸などに作用して過酸化反応を引き
起こし、脂質に対する酸化力は動物に必須な酸素の数千
倍も高いといわれている。スーパーオキシドジムスター
ゼ（ＳＯＤ；酵素番号 ＥＣ１．１５．１．１）は、１
９６９年にマックコルド等［ＭｃＣｏｒｄ，Ｊ．Ｍ．＆
Ｆｒｉｄｏｖｉｃｈ，Ｉ．：Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅ
ｍ．，２４４，６０４９（１９６９）］によってその作
用が発見された酵素であり、酸素分子が一電子還元され
て生ずるスーパーオキシドアニオン（−Ｏ２・）を不均
化する ２−Ｏ２・＋２Ｈ＋→Ｈ２Ｏ２＋Ｏ２ を触媒する。人体が正常な時には、ＳＯＤが働いてスー
パーオキシドアニオンの発生を抑えている。このＳＯＤ
活性は加齢と共に低下し、すなわち壮年期から老年期に
なると活性が低下し、ＳＯＤ活性の増減は生体の老化、
癌化のバロメーターとも言われている。このようなＳＯ
Ｄ活性が低下するとラジカルの発生は抑えにくくなりＳ
ＯＤを摂取補強するか、又はラジカルを捕捉除去するＳ
ＯＤ様活性物質を有する物質を摂取することが必要とな
ってくる。このような背景のもとに、抗癌、老化防止に
対する特効薬がない今日、環境中から変異原／発癌因子
を取り除いたり不活性化する抗変異原剤、並びに活性酸
素フリーラジカル消去作用を示すスーパーオキシドジム
スターゼ（ＳＯＤ）様活性食材に関する研究や検討が進
められている。しかしながら、多くの抗変異原剤並びに
ＳＯＤ様活性食材は、それ自体生体に有害であったり嗜
好性の面で常時飲用に不適当であるため実用化が困難で
ある。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】前記従来技術におい
て、ヒトが毎日飲用又は肌に塗布しても無害で、環境中
に存在する変異原物質に対して広範囲の活性を有する抗
変異原剤の開発は早急に望まれているものである。又、
前記従来技術において、スーパーオキシドジムスターゼ
（ＳＯＤ）はその製造が困難であり、また原料の入手も
制限があり、ビタミンＥ、ビタミンＣは生体を用いた実
験では活性酸素フリーラジカル消去の作用が十分でない
等の難点があり、更に強力な作用を有する活性酸素フリ
ーラジカル消去作用を持つＳＯＤ様活性食材が要望され
ている。更に、変異原物質を取り除いたりする抗変異原
剤、並びに活性酸素フリーラジカルを強力に消去するＳ
ＯＤ様活性食材の多くは、その殆どが化学合成で製造さ
れたものであり、またたとえ植物や動物からの材料を用
いた天然物由来のものであっても、その製造過程で人体
に害を及ぼす化学物質を用いたり、生成物の一部を化学
物質と反応させて作られた物が多い。一方、茶は古くよ
り保健と延命の妙薬として知られている。茶又は茶の抽
出物を含め、茶の成分を分画して得られる茶カテキン類
に多くの薬理効果がみられることは衆知の事実である。
そこで、本発明者は、天然物由来の安全生の高い茶葉を
原料として、人体に危険な化学薬品を用いることなく、
単に水あるいはアルコールで抽出した茶カテキン類を用
いて、そのｉｎ ｖｉｔｒｏ（試験管内）における薬理
作用について鋭意研究を重ねた結果、茶カテキン類が優
れた抗変異原活性並びにスーパーオキシドジムスターゼ
様活性を有することを見い出した。
て、ヒトが毎日飲用又は肌に塗布しても無害で、環境中
に存在する変異原物質に対して広範囲の活性を有する抗
変異原剤の開発は早急に望まれているものである。又、
前記従来技術において、スーパーオキシドジムスターゼ
（ＳＯＤ）はその製造が困難であり、また原料の入手も
制限があり、ビタミンＥ、ビタミンＣは生体を用いた実
験では活性酸素フリーラジカル消去の作用が十分でない
等の難点があり、更に強力な作用を有する活性酸素フリ
ーラジカル消去作用を持つＳＯＤ様活性食材が要望され
ている。更に、変異原物質を取り除いたりする抗変異原
剤、並びに活性酸素フリーラジカルを強力に消去するＳ
ＯＤ様活性食材の多くは、その殆どが化学合成で製造さ
れたものであり、またたとえ植物や動物からの材料を用
いた天然物由来のものであっても、その製造過程で人体
に害を及ぼす化学物質を用いたり、生成物の一部を化学
物質と反応させて作られた物が多い。一方、茶は古くよ
り保健と延命の妙薬として知られている。茶又は茶の抽
出物を含め、茶の成分を分画して得られる茶カテキン類
に多くの薬理効果がみられることは衆知の事実である。
そこで、本発明者は、天然物由来の安全生の高い茶葉を
原料として、人体に危険な化学薬品を用いることなく、
単に水あるいはアルコールで抽出した茶カテキン類を用
いて、そのｉｎ ｖｉｔｒｏ（試験管内）における薬理
作用について鋭意研究を重ねた結果、茶カテキン類が優
れた抗変異原活性並びにスーパーオキシドジムスターゼ
様活性を有することを見い出した。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明は、上記知見に基
づいてなされたものであって、茶カテキン類を有効成分
として含有することを特徴とする抗変異原剤並びにスー
パーオキシドジムスターゼ様活性食材である。以下、本
発明につき詳細に説明する。
づいてなされたものであって、茶カテキン類を有効成分
として含有することを特徴とする抗変異原剤並びにスー
パーオキシドジムスターゼ様活性食材である。以下、本
発明につき詳細に説明する。
【０００５】茶カテキン類は、ツバキ科の常緑低木Ｔｈ
ｅａ Ｓｉｎｅｓｉｓ Ｌ．の葉を水あるいは人体に無
害なアルコールもしくはこれらの混合溶液で抽出する。
これらは生の葉部を使用してもよく、また葉部を乾燥に
用いてもよく、さらに葉部を発酵させあるいは発酵させ
ることなく蒸成し、揉稔、乾燥を行ったものを用いてよ
い。このようなものとして緑茶、煎茶、はうじ茶、ウー
ロン茶、紅茶等がある。そして、茶カテキン類は（＋）
カテキン（Ｃ），（−）エピカテキン（ＥＣ），（−）
エピガロカテキン（ＥＧＣ）、（−）エピカテキンガレ
ート（ＥＣｇ）及び（−）エピガロカテキンガレート
（ＥＧＣｇ）が好適である。これらの物質は公知であ
る。更に、上記各種茶カテキン類の他、遊離型テアフラ
ビン、テアフラビンモノガレートＡ、テアフラビンモノ
ガレートＢ，テアフラビンジガレート等の茶テアフラビ
ン類をも抗変異原剤並びにスーパーオキシドジムスター
ゼ様活性食材として使用することができる。本発明にお
ける茶カテキン類の抗変異原活性並びにスーパーオキシ
ドジムスター様活性については、第４４回 日本栄養食
糧学会総会（開催会場；川崎医療福祉大学、岡山）講演
演題２Ｄ−４ｐ「大豆蛋白質由来低分子ペプチドのｕｍ
ｕ法によるＴｒｐ−Ｐ−１，ＩＱに対する変異原抑制作
用について」の方法に準拠して行うことができる。以下
に本発明を実施例として具体的に説明するが、本発明は
これらの実施例に限定されるものではない。
ｅａ Ｓｉｎｅｓｉｓ Ｌ．の葉を水あるいは人体に無
害なアルコールもしくはこれらの混合溶液で抽出する。
これらは生の葉部を使用してもよく、また葉部を乾燥に
用いてもよく、さらに葉部を発酵させあるいは発酵させ
ることなく蒸成し、揉稔、乾燥を行ったものを用いてよ
い。このようなものとして緑茶、煎茶、はうじ茶、ウー
ロン茶、紅茶等がある。そして、茶カテキン類は（＋）
カテキン（Ｃ），（−）エピカテキン（ＥＣ），（−）
エピガロカテキン（ＥＧＣ）、（−）エピカテキンガレ
ート（ＥＣｇ）及び（−）エピガロカテキンガレート
（ＥＧＣｇ）が好適である。これらの物質は公知であ
る。更に、上記各種茶カテキン類の他、遊離型テアフラ
ビン、テアフラビンモノガレートＡ、テアフラビンモノ
ガレートＢ，テアフラビンジガレート等の茶テアフラビ
ン類をも抗変異原剤並びにスーパーオキシドジムスター
ゼ様活性食材として使用することができる。本発明にお
ける茶カテキン類の抗変異原活性並びにスーパーオキシ
ドジムスター様活性については、第４４回 日本栄養食
糧学会総会（開催会場；川崎医療福祉大学、岡山）講演
演題２Ｄ−４ｐ「大豆蛋白質由来低分子ペプチドのｕｍ
ｕ法によるＴｒｐ−Ｐ−１，ＩＱに対する変異原抑制作
用について」の方法に準拠して行うことができる。以下
に本発明を実施例として具体的に説明するが、本発明は
これらの実施例に限定されるものではない。
【０００６】
【実施例１】乾燥した茶葉１００重量部に対し、溶媒３
００〜６００重量部を加えて行う。溶媒としては、水、
温湯、熱湯あるいはエタノールもしくはその含水物が用
いられ、乾燥した茶葉を前記溶媒に浸漬するかあるいは
加熱下で２分間〜１２時間抽出を行うことが望ましい。
得られた抽出液は抽出溶剤除去して濃縮する。濃縮は前
記抽出液を茶抽出成分が３５ｗｔ％程度になるまで濃縮
する。なお乾燥した茶１００重量部は生葉約６００重量
部に相当する。また、アルコール抽出液の場合、濃縮す
る前後に、活性炭、酸性白土あるいは硅藻土等を用いて
不必要な成分を吸着、除去し、濃縮液を脱色してもよ
い。さらに、濃縮液を蒸発乾固したりあるいは凍結乾燥
し粉末としてもよい。特に抽出液を活性炭で処理し、凍
結乾燥を行うと得られる製品の保存中の変色を防止する
ことができる。得られた茶カテキン類の濃縮液または粉
末が本発明では抗変異原剤並びにスーパーオキシドジム
スターゼ（ＳＯＤ）様活性食材として用いられる。これ
らはそのまま用いてもよく、あるいはこれらをドリンク
剤、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤等の形として経口
的に投与される。これらの剤の製造は、茶カテキン類濃
縮液あるいは粉末に増量剤、バインダー、崩壊剤、矯味
剤、矯臭剤、着色剤等をその製剤の剤型に応じて加え
て、従来知られている慣用の製剤の製造法を用いて製造
するとよい。投与量は、成人に対し粉末の場合１日約８
００ｍｇ〜１，２００ｍｇを、また濃縮液の場合は２〜
８ｇを一日数回に分けて投与する。この投与量は、通常
茶を飲用するときの数倍に相当する。この茶カテキン類
は常用されている茶葉の成分であるので毒性はなく、従
って上記投与量を越えて投与しても何等支障はない。こ
のようにすると、癌や老化予防することができるばかり
でなく、その治療にも有用である。また、得られた茶カ
テキンの固体を清水に溶かして、食品とともに摂取する
と、癌の予防や老化制御に有用である。なお茶カテキン
類（（＋）Ｃ，（−）ＥＣ，（−）ＥＧＣ，（−）ＥＣ
ｇ，（−）ＥＧＣｇ）の組成を高速液体クロマトグラフ
ィーにより調べた。野村化学製デベロシルＯＤＳ−５カ
ラム（φ４．５×１５ｃｍ）を用い、移動相としてはア
セトニトリル：酢酸エチル：０．０５％リン酸水＝１
２：２：８６ を用いた。流速１．０ｍｌ／ｍｉｎ，カ
ラム温度２５℃とし、検出波長２８０ｎｍで行った結果
を図１に示す。
００〜６００重量部を加えて行う。溶媒としては、水、
温湯、熱湯あるいはエタノールもしくはその含水物が用
いられ、乾燥した茶葉を前記溶媒に浸漬するかあるいは
加熱下で２分間〜１２時間抽出を行うことが望ましい。
得られた抽出液は抽出溶剤除去して濃縮する。濃縮は前
記抽出液を茶抽出成分が３５ｗｔ％程度になるまで濃縮
する。なお乾燥した茶１００重量部は生葉約６００重量
部に相当する。また、アルコール抽出液の場合、濃縮す
る前後に、活性炭、酸性白土あるいは硅藻土等を用いて
不必要な成分を吸着、除去し、濃縮液を脱色してもよ
い。さらに、濃縮液を蒸発乾固したりあるいは凍結乾燥
し粉末としてもよい。特に抽出液を活性炭で処理し、凍
結乾燥を行うと得られる製品の保存中の変色を防止する
ことができる。得られた茶カテキン類の濃縮液または粉
末が本発明では抗変異原剤並びにスーパーオキシドジム
スターゼ（ＳＯＤ）様活性食材として用いられる。これ
らはそのまま用いてもよく、あるいはこれらをドリンク
剤、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤等の形として経口
的に投与される。これらの剤の製造は、茶カテキン類濃
縮液あるいは粉末に増量剤、バインダー、崩壊剤、矯味
剤、矯臭剤、着色剤等をその製剤の剤型に応じて加え
て、従来知られている慣用の製剤の製造法を用いて製造
するとよい。投与量は、成人に対し粉末の場合１日約８
００ｍｇ〜１，２００ｍｇを、また濃縮液の場合は２〜
８ｇを一日数回に分けて投与する。この投与量は、通常
茶を飲用するときの数倍に相当する。この茶カテキン類
は常用されている茶葉の成分であるので毒性はなく、従
って上記投与量を越えて投与しても何等支障はない。こ
のようにすると、癌や老化予防することができるばかり
でなく、その治療にも有用である。また、得られた茶カ
テキンの固体を清水に溶かして、食品とともに摂取する
と、癌の予防や老化制御に有用である。なお茶カテキン
類（（＋）Ｃ，（−）ＥＣ，（−）ＥＧＣ，（−）ＥＣ
ｇ，（−）ＥＧＣｇ）の組成を高速液体クロマトグラフ
ィーにより調べた。野村化学製デベロシルＯＤＳ−５カ
ラム（φ４．５×１５ｃｍ）を用い、移動相としてはア
セトニトリル：酢酸エチル：０．０５％リン酸水＝１
２：２：８６ を用いた。流速１．０ｍｌ／ｍｉｎ，カ
ラム温度２５℃とし、検出波長２８０ｎｍで行った結果
を図１に示す。
【０００７】
【実施例２】変異原製試験の主流として現在用いられて
いるエームス法や癌原性試験の結果とよく相関している
ウム−テスト（ｕｍｕ−Ｔｅｓｔ）を用いた。ＤＮＡへ
の損傷により誘発される一連の遺伝子群（ＳＯＳ遺伝
子）のうち突然変異に直接関与しているｕｍｕ−遺伝子
の発現をβ−ガラクトシダーゼ活性（Ｍｉｌｌｅｒの方
法，１９７２年）を指標として測定した。活性型Ｔｒｐ
−Ｐ−１（３−アミノ−１，４−ジメチル ５Ｈピリド
［４，３−ｂ］インドール）（和光純薬製）によりＳＯ
Ｓに反応を誘発する場合には、９６穴マイクロタイター
プレートの各ウェルにＴＧＡ培地（１％トリプトン，
０．５％塩化ナトリウム，０．２％グルコース，０．０
１％アンピシリン）中に１０％のＳ−９ｍｉｘを含むネ
ズミチフス菌ＴＡ１５３５／ｐｓｋ１００２株培養の菌
液１００μｌに活性型Ｔｒｐ−Ｐ−１を１０μｌ（濃度
３６９，１８４．５，９２．３，４６．１，２３．１，
１１．５，５．８μＭ）加え、被検試料としての茶カテ
キン類（（＋）Ｃ，（−）ＥＣ，（−）ＥＧＣ，（−）
ＥＣｇ，（−）ＥＧＣｇ）を１０μｌ（濃度５μｇ）加
え、３７℃ ２時間反応させた。また、活性型ＩＱ
（２−アミノ−３−メチルイミダゾ［４，５−ｆ］キノ
リン）（和光純薬製）によりＳＯＳに反応を誘発する場
合には、９６穴マイクロタイタープレートの各ウェル
に、ＴＧＡ培地中に１０％のＳ−９ｍｉｘを含むネズミ
チフス菌液１００μｌに活性型ＩＱを１０μｌ（濃度５
０４．５，２５２．３，１２６．１，６３．１，３１．
５，１５．８，７．９μＭ）加え、被検試料としての茶
カテキン類（（＋）Ｃ，（−）ＥＣ，（−）ＥＧＣ，
（−）ＥＣｇ，（−）ＥＧＣｇ）を１０μｌ（濃度５μ
ｇ）加えた。反応液のβガラクトシターゼ活性は各ウェ
ルに基質濃度４ｍｇ／ｍｌの２−ニトロフェニル−β−
Ｄ−ガラクトピラノシド１００μｌを加え３７℃，２時
間酵素反応を行なわせ、１Ｍ炭酸ナトリウム１００μｌ
を加え反応を停止した後、タイタープレート分光光度計
（バイオラッド社製）で吸光度６２０ｎｍを測定した。
変異原剤Ｔｒｐ−Ｐ−１に対する茶カテキン類の抗変異
原活性測定の結果を２図に、また、変異原剤ＩＱに対す
る茶カテキン類の抗変異原活性測定の結果を３図に示
す。結果から、茶カテキン類の中でエピガロカテキンガ
レート（（−）ＥＧＣｇ），エピカテキンガレート
（（−）ＥＣｇ）及びエピガロカテキン（（−）ＥＧ
Ｃ）は、変異原剤Ｔｒｐ−Ｐ−１並びにＩＱに対して極
めて強い抗変異原活性を有する。
いるエームス法や癌原性試験の結果とよく相関している
ウム−テスト（ｕｍｕ−Ｔｅｓｔ）を用いた。ＤＮＡへ
の損傷により誘発される一連の遺伝子群（ＳＯＳ遺伝
子）のうち突然変異に直接関与しているｕｍｕ−遺伝子
の発現をβ−ガラクトシダーゼ活性（Ｍｉｌｌｅｒの方
法，１９７２年）を指標として測定した。活性型Ｔｒｐ
−Ｐ−１（３−アミノ−１，４−ジメチル ５Ｈピリド
［４，３−ｂ］インドール）（和光純薬製）によりＳＯ
Ｓに反応を誘発する場合には、９６穴マイクロタイター
プレートの各ウェルにＴＧＡ培地（１％トリプトン，
０．５％塩化ナトリウム，０．２％グルコース，０．０
１％アンピシリン）中に１０％のＳ−９ｍｉｘを含むネ
ズミチフス菌ＴＡ１５３５／ｐｓｋ１００２株培養の菌
液１００μｌに活性型Ｔｒｐ−Ｐ−１を１０μｌ（濃度
３６９，１８４．５，９２．３，４６．１，２３．１，
１１．５，５．８μＭ）加え、被検試料としての茶カテ
キン類（（＋）Ｃ，（−）ＥＣ，（−）ＥＧＣ，（−）
ＥＣｇ，（−）ＥＧＣｇ）を１０μｌ（濃度５μｇ）加
え、３７℃ ２時間反応させた。また、活性型ＩＱ
（２−アミノ−３−メチルイミダゾ［４，５−ｆ］キノ
リン）（和光純薬製）によりＳＯＳに反応を誘発する場
合には、９６穴マイクロタイタープレートの各ウェル
に、ＴＧＡ培地中に１０％のＳ−９ｍｉｘを含むネズミ
チフス菌液１００μｌに活性型ＩＱを１０μｌ（濃度５
０４．５，２５２．３，１２６．１，６３．１，３１．
５，１５．８，７．９μＭ）加え、被検試料としての茶
カテキン類（（＋）Ｃ，（−）ＥＣ，（−）ＥＧＣ，
（−）ＥＣｇ，（−）ＥＧＣｇ）を１０μｌ（濃度５μ
ｇ）加えた。反応液のβガラクトシターゼ活性は各ウェ
ルに基質濃度４ｍｇ／ｍｌの２−ニトロフェニル−β−
Ｄ−ガラクトピラノシド１００μｌを加え３７℃，２時
間酵素反応を行なわせ、１Ｍ炭酸ナトリウム１００μｌ
を加え反応を停止した後、タイタープレート分光光度計
（バイオラッド社製）で吸光度６２０ｎｍを測定した。
変異原剤Ｔｒｐ−Ｐ−１に対する茶カテキン類の抗変異
原活性測定の結果を２図に、また、変異原剤ＩＱに対す
る茶カテキン類の抗変異原活性測定の結果を３図に示
す。結果から、茶カテキン類の中でエピガロカテキンガ
レート（（−）ＥＧＣｇ），エピカテキンガレート
（（−）ＥＣｇ）及びエピガロカテキン（（−）ＥＧ
Ｃ）は、変異原剤Ｔｒｐ−Ｐ−１並びにＩＱに対して極
めて強い抗変異原活性を有する。
【０００８】
【実施例３】ウミホタルルシフェリン誘導体（ＣＬＡ）
は１Ｏ２・、−Ｏ２・を特異的に検出する有効な化学発
酵試薬であり、発明者ら（Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈ
ｅｍ．，５５巻，１５７−１６０頁，１９９１年）の方
法によりスーパーオキシドジムスターゼ（ＳＯＤ）を消
光剤に用いた消光実験よりＣＬＡと−Ｏ２・との反応速
度が求められる。ウミホタルルシフェリン誘導体ＣＬＡ
（Ｃ１３Ｈ１１ＯＮ３、東京化成製、最終濃度１．３９
ｘ１０−７〜４．６４ｘ１０−８Ｍ）溶液１０μｌ，ア
ルブミン（５０ｍｇ／５０ｍｌ，シグマ化学製）５００
μｌ，キサンチンオキシターゼ（１．４５ｕｎｉｔ／ｍ
ｌ，シグマ化学製）５０μｌを順に円筒型石英セル（内
径１４ｍｍ×高さ６０ｍｍ）に入れ、ルミノメーター
Ａｌｏｋａ ＢＬＲ−１０２Ｂ型（浜松ホトニクス製）
の試料室内に移し、３ｍＭヒポキサンチン溶液２００μ
ｌを注入して、セル底面から化学発光を単一光量子計数
により測定した。消光剤が存在する場合並び存在しない
場合の−Ｏ２・の発光強度の比率（Ｉ０／Ｉ）は Ｉ０／Ｉ＝１＋［ｋ３／（ｋ１＋ｋ２［ＣＬＡ］）］×
［Ｑ］ で表わされる。ここで、［Ｑ］はＳＯＤ様活性物質を、
ｋ１は−Ｏ２・の消失速度定数、ｋ２は−Ｏ２・と［Ｃ
ＬＡ］との反応速度定数、ｋ３は−Ｏ２・と［Ｑ］との
反応速度定数を示す。本発明に係わる、茶カテキン類の
スーパーオキシドジムスターゼ活性（反応速度定数 ｋ
３で表す）は表１のとおりである。
は１Ｏ２・、−Ｏ２・を特異的に検出する有効な化学発
酵試薬であり、発明者ら（Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈ
ｅｍ．，５５巻，１５７−１６０頁，１９９１年）の方
法によりスーパーオキシドジムスターゼ（ＳＯＤ）を消
光剤に用いた消光実験よりＣＬＡと−Ｏ２・との反応速
度が求められる。ウミホタルルシフェリン誘導体ＣＬＡ
（Ｃ１３Ｈ１１ＯＮ３、東京化成製、最終濃度１．３９
ｘ１０−７〜４．６４ｘ１０−８Ｍ）溶液１０μｌ，ア
ルブミン（５０ｍｇ／５０ｍｌ，シグマ化学製）５００
μｌ，キサンチンオキシターゼ（１．４５ｕｎｉｔ／ｍ
ｌ，シグマ化学製）５０μｌを順に円筒型石英セル（内
径１４ｍｍ×高さ６０ｍｍ）に入れ、ルミノメーター
Ａｌｏｋａ ＢＬＲ−１０２Ｂ型（浜松ホトニクス製）
の試料室内に移し、３ｍＭヒポキサンチン溶液２００μ
ｌを注入して、セル底面から化学発光を単一光量子計数
により測定した。消光剤が存在する場合並び存在しない
場合の−Ｏ２・の発光強度の比率（Ｉ０／Ｉ）は Ｉ０／Ｉ＝１＋［ｋ３／（ｋ１＋ｋ２［ＣＬＡ］）］×
［Ｑ］ で表わされる。ここで、［Ｑ］はＳＯＤ様活性物質を、
ｋ１は−Ｏ２・の消失速度定数、ｋ２は−Ｏ２・と［Ｃ
ＬＡ］との反応速度定数、ｋ３は−Ｏ２・と［Ｑ］との
反応速度定数を示す。本発明に係わる、茶カテキン類の
スーパーオキシドジムスターゼ活性（反応速度定数 ｋ
３で表す）は表１のとおりである。
【０００９】
【表１】 茶カテキン類の活性酸素フリーラジカル消去
作用 結果から、茶カテキン類の中で、エピガロカテキンガレ
ート（（−）ＥＧＣｇ）、エピカテキンガレート
（（−）ＥＣｇ）及びエピガロカテキン（（−）ＥＧ
Ｃ）は、極めて強い活性酸素フリーラジカル消去作用す
なわちスーパーオキシドジムスターゼ様活性を有する。
図４は、測定試料を加えない場合の化学発光の強度変化
（積分）を示し、図５は、測定試料を加えた場合の化学
発光の強度変化（積分）を示す。
作用 結果から、茶カテキン類の中で、エピガロカテキンガレ
ート（（−）ＥＧＣｇ）、エピカテキンガレート
（（−）ＥＣｇ）及びエピガロカテキン（（−）ＥＧ
Ｃ）は、極めて強い活性酸素フリーラジカル消去作用す
なわちスーパーオキシドジムスターゼ様活性を有する。
図４は、測定試料を加えない場合の化学発光の強度変化
（積分）を示し、図５は、測定試料を加えた場合の化学
発光の強度変化（積分）を示す。
【００１０】
【発明の効果】本発明は、茶葉から水またはアルコール
を抽出溶媒として抽出した茶カテキン類を有効成分とす
る抗変異原剤並びにスーパーオキシドジムスターゼ様活
性食材を提供するものである。本発明の抗変異原剤並び
にスーパーオキシドジムスターゼ様活性食材は、癌の予
防並びに老化制御に有効であり、生体にとって安全であ
る。したがって本発明の抗変異原剤並びにスーパーオキ
シドジムスターゼ様活性食材は単に強力な抗変異原剤並
びにスーパーオキシドジムスターゼ様活性食材として医
療分野で使用されるにとどまらず、食品、化学薬品類等
の利用も期待できるものである。
を抽出溶媒として抽出した茶カテキン類を有効成分とす
る抗変異原剤並びにスーパーオキシドジムスターゼ様活
性食材を提供するものである。本発明の抗変異原剤並び
にスーパーオキシドジムスターゼ様活性食材は、癌の予
防並びに老化制御に有効であり、生体にとって安全であ
る。したがって本発明の抗変異原剤並びにスーパーオキ
シドジムスターゼ様活性食材は単に強力な抗変異原剤並
びにスーパーオキシドジムスターゼ様活性食材として医
療分野で使用されるにとどまらず、食品、化学薬品類等
の利用も期待できるものである。
【００１１】
【図１】本発明に係わる、茶葉を水、アルコールまたは
これらの混合溶液を抽出溶媒として抽出した茶カテキン
類の高速液体クロマトグラフを示す。
これらの混合溶液を抽出溶媒として抽出した茶カテキン
類の高速液体クロマトグラフを示す。
【図２】本発明に係わる、変異原剤Ｔｒｐ−Ｐ−１各濃
度に対する茶カテキン類（（＋）Ｃ，（−）ＥＣ，
（−）ＥＧＣ，（−）ＥＣｇ，（−）ＥＧＣｇ）の抗変
異原活性を示す。
度に対する茶カテキン類（（＋）Ｃ，（−）ＥＣ，
（−）ＥＧＣ，（−）ＥＣｇ，（−）ＥＧＣｇ）の抗変
異原活性を示す。
【図３】本発明に係わる、変異原剤ＩＱ各濃度に対する
茶カテキン類（（＋）Ｃ，（−）ＥＣ，（−）ＥＧＣ，
（−）ＥＣｇ，（−）ＥＧＣｇ）の抗変異原活性を示
す。
茶カテキン類（（＋）Ｃ，（−）ＥＣ，（−）ＥＧＣ，
（−）ＥＣｇ，（−）ＥＧＣｇ）の抗変異原活性を示
す。
【図４】本発明に係わる、スーパーオキシドジムスター
ゼ様活性測定の際、測定試料を加えない場合の化学発光
の強度変化（積分）を示す。
ゼ様活性測定の際、測定試料を加えない場合の化学発光
の強度変化（積分）を示す。
【図５】本発明に係わる、スーパーオキシドジムスター
ゼ様活性測定の際、測定試料を加えた場合の化学発光の
強度変化（積分）を示す。
ゼ様活性測定の際、測定試料を加えた場合の化学発光の
強度変化（積分）を示す。
Claims (2)
- 【請求項１】 茶葉を水、アルコール又はこれらの混合
溶液を抽出溶媒として抽出した茶カテキン類を含有せし
めてなる抗変異原剤 - 【請求項２】 茶葉を水、アルコール又はこれらの混合
溶液を抽出した茶カテキン類を含有せしめてなるスーパ
ーオキシドジムスターゼ様活性食材
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4319196A JPH06128168A (ja) | 1992-10-14 | 1992-10-14 | 抗変異原活性並びにスーパーオキシドジムスターゼ様活性を有 する茶カテキン類 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4319196A JPH06128168A (ja) | 1992-10-14 | 1992-10-14 | 抗変異原活性並びにスーパーオキシドジムスターゼ様活性を有 する茶カテキン類 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06128168A true JPH06128168A (ja) | 1994-05-10 |
Family
ID=18107490
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4319196A Pending JPH06128168A (ja) | 1992-10-14 | 1992-10-14 | 抗変異原活性並びにスーパーオキシドジムスターゼ様活性を有 する茶カテキン類 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06128168A (ja) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0938897A1 (en) * | 1997-12-26 | 1999-09-01 | Japanese Foundation For Cancer Research | Telomerase inhibitor |
| US6576660B1 (en) | 1997-10-31 | 2003-06-10 | Arch Development Corporation | Methods and compositions for regulation of 5-α-reductase activity |
| JP2003267801A (ja) * | 2002-03-12 | 2003-09-25 | Pharmafoods Kenkyusho:Kk | 保存剤用組成物及び該組成物を含有する動物の細胞または臓器の保存剤 |
| JP2004035550A (ja) * | 2002-05-07 | 2004-02-05 | Access Business Group Internatl Llc | 植物栄養素栄養サプリメント |
| US6696484B2 (en) | 1997-10-31 | 2004-02-24 | University Of Chicago Office Of Technology And Intellectual Property | Method and compositions for regulation of 5-alpha reductase activity |
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| US7883734B2 (en) * | 2002-10-28 | 2011-02-08 | Kao Corporation | Method of removing caffeine from caffeine-containing catechin compound composition |
| CN111432797A (zh) * | 2017-09-29 | 2020-07-17 | 株式会社爱茉莉太平洋 | 含有发酵茶提取物的用于护理由微尘引起的皮肤细胞损伤、增强皮肤屏障及抗氧化、抗老化或抗炎的组合物 |
| CN113633759A (zh) * | 2020-09-29 | 2021-11-12 | 中国农业大学 | 用于提高超氧化物歧化酶的活性和/或热稳定性的制剂及其应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6425726A (en) * | 1987-04-24 | 1989-01-27 | Yuutoku Yakuhin Kogyo Kk | Agent for eliminating active oxygen free radical |
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| JPH0393782A (ja) * | 1989-08-30 | 1991-04-18 | Pacific Chem Ind Co | 活性酸素類から細胞を保護する細胞保護剤 |
-
1992
- 1992-10-14 JP JP4319196A patent/JPH06128168A/ja active Pending
Patent Citations (3)
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