CN113607830B - 一种检测食品中唾液酸含量的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种检测食品中唾液酸含量的方法，所述方法包括样品的前处理，所述前处理包括将样品进行剪切破碎后浸泡的步骤，所述样品含水量在50％以上且含有食用胶。本发明提供了一种检测食品中唾液酸含量的方法，通过将样品进行剪切破碎后浸泡的方法，从而使食用胶吸附的唾液酸游离出来，进而实现含食用胶的食品中唾液酸含量的准确检测。本发明的方法结果准确且通用性高，为果冻、饮料、口服液等各种含食用胶食品的质量控制提供保证。

Description

一种检测食品中唾液酸含量的方法
技术领域
本发明涉及食品检测技术领域，尤其涉及一种检测食品中唾液酸含量的方法。
背景技术
唾液酸(Sialic acid，简称SA)，中文学名N-乙酰基神经氨酸，是一族神经氨酸的氮或氧基取代的衍生物总称，其衍生物均为带负电的九碳糖神经氨酸。唾液酸广泛存在于哺乳动物组织中，是糖蛋白、低聚糖和糖脂的重要组成部分，参与细胞识别、生存、繁衍等作用。有研究表明，唾液酸具有促进神经发育、抗病毒抗炎症和美白抗衰老等功能。
目前，市面上添加唾液酸的食品越来越多，为了得到较好的口感，生产厂商通常会在其产品中添加食用胶，但是添加进去的食用胶会吸附唾液酸导致检测结果明显偏低。因此，为了更好地控制产品质量，建立一种能够准确检测含食用胶产品中唾液酸含量的方法显得尤为重要。
国内标准《燕窝及其制品中唾液酸的测定液相色谱法》(GB/T30636)，《出口燕窝及其制品中唾液酸的测定方法》(SN/T3644)均为针对燕窝中结合态唾液酸的检测，不适用于单体唾液酸的检测，检测步骤中的透析会导致单体唾液酸几乎全部损失，同时处理过程中的短时间水解并不能将食用胶中的唾液酸释放，会导致检测结果明显偏低，甚至造成假阴性；国家药典(2010版)中唾液酸的检测方法原理为糖与间苯二酚结合显色通过紫外分光光度计进行检测，但食品中存在的各种糖类会对检测造成很大的干扰，明显不适用于食品中唾液酸的检测。
针对食用胶吸附唾液酸，有人提出采用酸法、碱法或酶法的手段对胶体进行破坏，使得唾液酸游离出来，但是并非所有胶都能够被酸碱破坏，例如结冷胶，并且较强的酸碱环境会对唾液酸造成不同程度的破坏，导致结果不准确，而酶法需要寻找针对不同胶体的具备特异性的酶，对于开发通用性高的检测分析方法也是不利的。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供一种检测食品中唾液酸含量的方法，以保证果冻、饮料、口服液等含有食用胶的食品中唾液酸含量的准确检测。
本发明采用以下技术方案：
本发明提供一种检测食品中唾液酸含量的方法，所述方法包括样品的前处理，所述前处理包括将样品进行剪切破碎后浸泡的步骤，所述样品含水量在50％以上且含有食用胶。
本发明研究发现，相较于现有的国标、国家药典中的检测方法以及通过酸法、碱法或酶法等手段破坏胶体，采用本发明的方法可以有效使食用胶吸附的唾液酸游离出来，从而实现含食用胶的食品中唾液酸含量的准确检测。本发明的方法广泛适用于果冻、饮料、口服液等食品(此处食品应做广义解释，即可食用的产品，例如包括具有保健功效的保健食品等)，为保证检测结果准确性，当食品中含水量不足50％时，先向食品中添加水以得到含水量在50％以上且含有食用胶的样品，再进行剪切破碎后浸泡。
进一步地，采用均质机进行所述剪切破碎，均质条件为压力：800-1000bar，温度：22-30℃，在该条件下使样品中的食用胶完全被剪切破碎。
进一步地，所述浸泡的条件为采用纯水于20～28℃浸泡16～24h。
本发明研究发现，浸泡条件对最终检测结果影响较大，现有技术中通常会采用高温对含唾液酸的产品进行杀菌，因此本领域技术人员一直认为121℃以内的温度对唾液酸处理均是可行的，但是本发明中，当浸泡温度为20～28℃时结果最佳，将温度提高至32℃则会影响结果的准确性。
进一步地，所述方法还包括将所述前处理得到的含唾液酸的液体进行液相检测。
在本发明一个具体实施方式中，所述方法具体包括：将样品进行剪切破碎后，固液分离，取分离所得液体进行液相检测，分离所得固体采用纯水浸泡，对浸泡液进行液相检测。其中，固液分离可采用离心方式，离心转速优选为10000～15000r/min。另外，为了使得纯水浸泡后的浸泡液更容易实现液相检测的过膜处理，也可根据实际情况再进行固液分离，取液体进行液相检测。
更优选地，在本发明一个具体实施方式中，所述方法具体包括：将样品进行剪切破碎后，离心，取上清液进行液相检测，沉淀加水后于20～28℃浸泡16～24h，离心，再次取上清液进行液相检测。在该方法中，所述食品中唾液酸的含量等于剪切破碎后上清液与沉淀浸泡后上清液中唾液酸含量的测定结果相加。
上述技术方案中，所述液相检测的条件包括：检测器：UV检测器；检测波长：208-212nm；柱温：55-65℃；流速：0.4-0.8mL/min；流动相：0.004-0.006M硫酸。
更进一步地，色谱柱型号：Aminex HPX-87H；检测器：UV检测器；检测波长：210nm；柱温：60℃；流速：0.6mL/min；流动相：0.005M硫酸。
进一步地，本发明所述唾液酸为单体形式，具体的为N-乙酰神经氨酸。
进一步地，所述食用胶包括结冷胶、果胶、黄原胶、阿拉伯胶、卡拉胶、明胶等处理难度各异的食用胶。即本发明的方法是一种结果准确且通用性高的检测分析方法。
本发明提供了一种检测食品中唾液酸含量的方法，通过将样品进行剪切破碎后浸泡的方法，从而使食用胶吸附的唾液酸游离出来，进而实现含食用胶的食品中唾液酸含量的准确检测。本发明的方法结果准确且通用性高，为果冻、饮料、口服液等各种含食用胶食品的质量控制提供保证。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
以下实施例中所用材料若无特别声明，均可以市售购得。
实施例1
本实施例提供一种唾液酸含量的检测方法，具体如下：
将待测样品混匀，取150mL样品均质10min(均质压力800-1000bar，温度22-30℃)，取8mL均质后样品12000r/min离心15min，其中上清过0.22μm滤膜后进液相进行检测，沉淀加入8mL纯水后涡旋，25℃浸泡24h，期间可摇晃促溶，之后以12000r/min离心15min，上清过0.22μm滤膜后进液相进行检测。唾液酸含量检测结果为上清与沉淀浸泡之后上清的检测结果相加。
其中仪器参数如下：
色谱仪型号：SHIMADZU LC-15C；色谱柱型号：Aminex HPX-87H，300mm*7.8mm(catalog#125-0140)；检测器：UV检测器。检测波长：210nm；柱温：60℃；流动相：0.005M硫酸；流速：0.60mL/min；进样体积：20μL。
实施例2
本实施例提供一种唾液酸含量的检测方法，具体如下：
将待测样品混匀，取150mL样品均质10min(均质条件同实施例1)，取8mL均质后样品12000r/min离心15min，其中上清过0.22μm滤膜后进液相进行检测，沉淀加入8mL纯水后涡旋，32℃浸泡18h，期间可摇晃促溶，之后以12000r/min离心15min，上清过0.22μm滤膜后进液相进行检测。唾液酸含量检测结果为上清与沉淀浸泡之后上清的检测结果相加。其中仪器参数同实施例1。
对比例1
以GB/T30636提供的方法对样品中唾液酸含量进行检测。
对比例2
以国家药典(2010版)提供的方法对样品中唾液酸含量进行检测。
对比例3
以SN/T3644提供的方法对样品中唾液酸含量进行检测。
对比例4
本对比例提供一种唾液酸含量的检测方法，具体如下：
将待测样品混匀，取1.5mL样品以12000r/min离心15min，取上清过0.22μm滤膜后进液相进行检测。其中仪器参数同实施例1。
对比例5
本对比例提供一种唾液酸含量的检测方法，具体如下：
将待测样品混匀，取150mL样品均质10min，取8mL均质后样品12000r/min离心15min，其中上清过0.22μm滤膜后进液相进行检测，沉淀加入8mL 0.1mol/L盐酸，25℃浸泡2h，期间可摇晃促溶，之后以12000r/min离心15min，上清过0.22μm滤膜后进液相进行检测。唾液酸含量检测结果为上清与沉淀浸泡之后上清的检测结果相加。其中仪器参数同实施例1。
对样品1-3分别采用实施例1-2和对比例1-5的不同方法进行检测，结果如表1所示(其中结冷胶是最难处理的胶)。
其中，样品1为市面上售卖的含结冷胶的饮料，含水量在50％以上；
样品2为市面上售卖的含卡拉胶-魔芋胶-黄原胶的果冻，含水量在50％以上；
样品3为自制的未高温灭菌的果冻，其制备方法为：
1、原料：果冻粉(明胶、卡拉胶)3.5g/100g、白砂糖8.5g/100g、柠檬酸钠0.5mg/100g、柠檬酸0.5mg/100g、山梨酸钾0.13mg/100g、唾液酸100mg/100g、其余为水。
2、制备步骤(1)称取果冻粉，唾液酸和白砂糖，混合均匀；(2)搅拌分散于冷水中；(3)在电炉上煮沸，保持微沸10min；(4)停止加热，冷却至75℃，加入溶解好的柠檬酸，柠檬酸钠，山梨酸钾；(5)倒入果冻杯，封膜，冷却。
表1含唾液酸样品不同检测方法下的检测结果(单位：mg/100g)
由表1可知，使用对比例1国标方法，由于透析的缘故，检测结果远低于标示值；使用对比例2国家药典方法由于样品中糖类干扰，使得样品显色异常得不到结果；使用对比例3进出口方法结果明显高于产品标示值，可能是由于其中的蛋白与茚三酮产生反应导致结果明显偏高；而使用实施例1的方法结果明显高于对比例4，说明胶体确实会对SA产生吸附；实施例2整体与实施例1相似，但是浸泡的温度略高，导致部分唾液酸分解，测得结果偏低；对比例5的结果对胶体采用酸处理的方式，但是唾液酸在酸溶液下被破坏，导致结果偏低。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (3)

1.一种检测食品中唾液酸含量的方法，其特征在于，包括：将样品在800-1000bar均质压力，22-30℃温度下进行均质，使食用胶完全被剪切破碎，固液分离，取分离所得液体进行液相检测，分离所得固体加水后于20～28℃浸泡16～24h，取浸泡液进行液相检测，进行液相检测前，对其进行固液分离，去除固体杂质，所述食品中唾液酸的含量等于两次液相检测结果相加；所述样品含水量在50％以上且含有食用胶，所述唾液酸为单体形式。
2.根据权利要求1所述的检测食品中唾液酸含量的方法，其特征在于，所述液相检测的条件包括：检测器：UV检测器；检测波长：208-212nm；柱温：55-65℃；流速：0.4-0.8mL/min；流动相：0.004-0.006M硫酸。
3.根据权利要求1所述的检测食品中唾液酸含量的方法，其特征在于，所述食用胶包括结冷胶、果胶、黄原胶、阿拉伯胶、卡拉胶、明胶。
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