TW201726923A - 高純度半乳寡糖組合物及其製備方法與用途 - Google Patents
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Abstract
本發明提供一種製備高純度半乳寡糖組合物的方法，係利用乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585對一低純度半乳寡糖混合物進行發酵反應。該高純度半乳寡糖組合物包含至少99%選自於由半乳三糖、半乳四糖、五糖以上之半乳寡糖、及其任意組合所組成的群組，及低於1%之單糖及雙糖。本發明亦提供一種高純度半乳寡糖組合物，及其用於製備可調節血糖或改善腸道菌相之組合物之用途。例如，本發明高純度半乳寡糖組合物可用於製備適合糖尿病或乳糖不耐症病人或寵物使用之食品、飲品、保健食品、營養補充品、及醫藥組合物。
Description
本發明係關於一種半乳寡糖組合物及其製備方法與應用，特別係關於一種高純度半乳寡糖組合物及其製備方法，與其用於製備調節血糖與改善腸道菌相之組合物之用途。
半乳寡糖(galactooligosaccharides，GOS)屬於不可消化寡糖(non-digestible oligosaccharides，NDOs)，是由二至十個半乳糖單元與一個末端葡萄糖單元所組成的寡糖分子，依其所含單糖單元個數，又分為半乳二糖、半乳三糖、半乳四糖、及五糖以上之半乳寡糖。市面上販售的半乳寡糖產品皆為上述不同分子量半乳寡糖之混合物，然其組成各異，且因為製程差異，尚包含含量不一的乳醣、蔗糖、葡萄糖、及半乳糖。半乳寡糖產品在產業上有相當廣泛的應用，包含食品添加物及醫藥組成物，其應用範圍取決於產品的糖分組成。例如，適合乳糖不耐症患者使用的半乳寡糖產品在理想情況下應完全不含乳糖，而以減低熱量為目標的半乳寡糖產品應儘量減少單糖含量。
目前已知製備半乳寡糖的方法大致分為酵素轉化或微生物發酵，然該些方法所製得的半乳寡糖粗產物皆含有殘留的單糖，如葡萄糖，以及雙糖，如乳糖。為因應市場需求，相關領域研究開始著重於改進半乳寡糖製程以降低產品中單糖及雙糖的含量。現行策略包括利用層析法(chromatography)或超濾(ultrafiltration)與奈米過濾(nanofiltration)等膜過濾法直接移除半乳寡糖粗產物中的單糖與雙糖，或者藉由酵素氧化法使單糖與雙糖氧化為糖酸，再以離子交換層析法移除該糖酸，抑或藉由微生物發酵消耗單糖與雙糖。然而，使用層析法或膜過濾法移除乳糖的效率不佳；使用酵素氧化法需耗費高成本，且難以
放大其規模至工業量產；微生物發酵則需要二種以上細菌或真菌菌株方能有效移除單糖與雙糖，增加製程上的複雜性。
因此，開發一種成本低廉、製程簡化、且可應用於工業量產高純度半乳寡糖組合物的方法，以提供一種不含單糖及雙糖的半乳寡糖組合物，實有其必要。
緣此，本發明之一目的在提供一種製備高純度半乳寡糖組合物的方法，包含如下步驟：(1)提供一反應液，係包含一低純度半乳寡糖混合物，以及(2)添加一乳酸克魯維酵母菌(Kluyveromyces lactis)至該反應液而進行一發酵反應，以獲得一高純度半乳寡糖組合物，其中該乳酸克魯維酵母菌係為乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585，且該高純度半乳寡糖組合物包含至少99% w/w選自於由半乳三糖、半乳四糖、五糖以上之半乳寡糖、及其任意組合所組成的群組，及低於1% w/w之單糖及雙糖。
在本發明之一實施例中，該低純度半乳寡糖混合物之純度為55-60%；該反應液之白利(Brix)糖度為30-35；該乳酸克魯維酵母菌之添加量為該低純度半乳寡糖混合物乾重的至少約0.8%；該發酵反應係在30-40℃下持續24-72小時；且該高純度半乳寡糖組合物係為100%選自於由半乳三糖、半乳四糖、五糖以上之半乳寡糖、及其任意組合所組成的群組。
本發明之另一目的在提供一種高純度半乳寡糖組合物，包含至少99% w/w選自於由半乳三糖、半乳四糖、五糖以上之半乳寡糖、及其任意組合所組成的群組，且低於1% w/w之單糖及雙糖。
在本發明之一實施例中，該高純度半乳寡糖組合物係由一乳酸克魯維酵母菌(Kluyveromyces lactis)發酵製得，其中該乳酸克魯維酵母菌係為乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585。同時，該高純度半乳寡糖組合物包含48-57% w/w之半乳三糖，25-32% w/w之半乳四糖，15-22% w/w之五糖以上之半乳寡糖。
本發明之又一目的在提供一種高純度半乳寡糖組合物用於製備一調節個體血糖之組合物之用途，其中該高純度半乳寡糖組合物包含至少99% w/w選自於由半乳三糖、半乳四糖、五糖以上之半乳寡糖、及其任意組合所組成的群組，及低於1% w/w之單糖及雙糖。
本發明之又一目的在提供一種高純度半乳寡糖組合物用於製備一改善個體腸道菌相之組合物之用途，其中該高純度半乳寡糖組合物包含至少99% w/w選自於由半乳三糖、半乳四糖、五糖以上之半乳寡糖、及其任意組合所組成的群組，及低於1% w/w之單糖及雙糖。
在本發明之一實施例中，該高純度半乳寡糖組合物包含48-57% w/w之半乳三糖，25-32% w/w之半乳四糖，及15-22% w/w之五糖以上之半乳寡糖，且其人體每日劑量為至少0.16g/kg體重，相當於60公斤成人每日至少攝取9.7克；該個體患有糖尿病；且該組合物為食品、飲品、保健食品、營養補充品、或醫藥組合物。
本發明製備高純度半乳寡糖組合物之方法係利用單一酵母菌株，即乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585，進行發酵反應即製得純度99%以上之高純度半乳寡糖組合物，甚至製得純度100%之高純度半乳寡糖組合物。因此，本發明之方法係以相較於習知技術更加簡化的高純度半乳寡糖製程去製備不含單糖及雙糖的半乳寡糖產品，且能應用於大規模量產。本發明高純度半乳寡糖組合物因其組成，能有效降低糖尿病患者的血糖，亦能改善腸道菌相而維持腸道健康，因此可用於製備調節血糖或改善腸道菌相之組合物。例如，本發明高純度半乳寡糖組合物可用於製備適合糖尿病或乳糖不耐症病人或寵物使用之食品、飲品、保健食品、營養補充品、及醫藥組合物。
以下將配合圖式進一步說明本發明的實施方式，下述所列舉的實施例係用以闡明本發明之發明特點及應用，而非以限定本發明之範圍，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可做些許更動與潤飾，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
圖1係顯示本發明純度100%之高純度半乳寡糖組合物降低糖尿病大鼠之空腹血糖上升率。
圖2係顯示本發明純度100%之高純度半乳寡糖組合物促進糖尿病大鼠之腸道益生菌生長及抑制有害菌生長；*表示p<0.1，**表示p<0.05。
本文中所使用數值為近似值，所有實驗數據皆在20%的範圍內變動，較佳為在10%的範圍內，最佳為在5%的範圍內。因此，本文中用語「約」係表示一數值或範圍之20%的範圍內，較佳為在10%的範圍內，最佳為在5%的範圍內。
本文中所述「有效劑量」係用以表示能降低動物及人類空腹葡萄糖值或改善其腸道菌相之高純度半乳寡糖組合物劑量。適當的有效劑量依施予生物體或個體的不同而有所差異，但可以包含劑量遞增之研究方式的各種實驗技術決定有效劑量。
本文中所謂半乳寡糖的「純度」，係依據高效液相層析(high performance liquid chromatography，以下簡稱HPLC)的圖譜中，半乳三糖、半乳四糖、及五糖以上半乳寡糖之訊號加總相對於總糖訊號的面積比。
本發明提供一種製備高純度半乳寡糖組合物及其製備方法。進行製備時，以純度為約55-60%的低純度半乳寡糖混合物為原料，經蒸餾水稀釋為白利(Brix)糖度約30-35之反應液後，添加1%酵母菌萃取物及0.3-0.8%乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585至該反應液，於30-40℃下進行發酵反應24-72小時。在本發明一實施例中，該發酵反應係於30噸發酵槽中以20噸發酵液進行，通氣量3-5L/min，轉速150rpm，發酵pH值為5.0-5.6。當發酵液中單糖與雙糖含量達到1% w/w以下且半乳寡糖產物之純度已達至少99%，加熱發酵液至90-95℃終止發酵反應，便可獲得本發明高純度半乳寡糖組合物的初產品。
其後，為去除雜質以獲得可供食用之高純度半乳寡糖組合物，以離心方式沉澱發酵液中酵母菌及酵母萃取物並利用珍珠岩過濾器(Perlite filter)移除該沉澱。在本發明一實施例中，該離心步驟係在6-10℃下以15000rpm進行5-10小時。其後，發酵液進一步經過活性碳脫色去除色素，再經過陽離子交換樹脂及陰離子交換樹脂去除其中礦物質，最後以蒸汽濃縮法去除水分，即可獲得本發明高純度半乳寡糖組合物的終產品。其糖分組成為單糖及雙糖占比低於1% w/w、半乳三糖約占48-57% w/w、半乳四糖約占25-32% w/w、及五糖以之上半乳寡糖約占15-22% w/w。
乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585(BCRC 21716)由生物資源保存及研究中心(新竹市)購得。酵母萃取物可由安琪酵母公司(中國)購得，但不在此限。磺化苯乙烯-二乙烯基苯共聚物(sulfonated styrene-divinylbenzene copolymer)之陽離子交換樹脂以及帶有三級胺基團之苯乙烯-二乙烯基苯共聚物(styrene-divinylbenzene copolymer with tertiary amine groups)之陰離子交換樹脂由Sigma-Aldrich公司(美國)購得。
本發明用於製備高純度半乳寡糖組合物之低純度半乳寡糖混合物原料，可直接向雲浮市新金山生物科技股份有限公司(中國)購買，或可由環狀芽孢桿菌(Bacillus circulans)的β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)轉化乳糖所製備，該低純度半乳寡糖混合物的純度為約55-60%，以57%為最佳。乳糖轉化係在30-50℃下進行48-72小時，乳糖初始濃度為40-60%(w/w)。
發酵液之糖分組成分析係利用高效液相層析儀裝配鈣型陽離子交換管柱(CARBOSep CHO-620，Transgennomic公司，美國)。將發酵液樣品加水稀釋至2%，並以折射率偵測器(refractive index detector)偵測沖提液中糖類之訊號，紀錄分離出的各種糖類的波峰滯留時間及訊號強度。對照糖類標準品的訊號做成定性分析，並以層析圖譜中各種糖類訊號的波鋒面積計算各種糖類在總糖中的占比。
將約1g大鼠盲腸內容物加入含9mL無菌厭氧稀釋液(0.5g半胱胺酸，4.5g磷酸二氫鉀，6g磷酸氫二鈉，1g聚山梨醇酯20，2g明膠，溶於1L去離子水)與5粒玻璃珠之試管中，以試管震盪器混合二者以形成均質液。於厭氧狀況下，以厭氧稀釋液對該均質液進行十倍連續稀釋。將適當稀釋倍數之均質液0.1mL塗布於比菲德氏菌(Bifidobacterium)BIM-25培養基(51g強化梭菌洋菜培養基，0.02g耐啶酸，0.0085g硫酸多黏菌素B，0.05g硫酸卡納黴素，0.0025g碘乙酸，0.025g氯化三苯四氮唑，溶於1L去離子水)或乳酸桿菌(Lactobacillus)選擇性MRS培養基(55g乳酸桿菌MRS肉湯(Difco)，20g洋菜，1.2mL醋酸，3g苯乙醇，0.04g溴甲酚綠，溶於1L去離子水)，置於厭氧操作箱中於37℃培養16小時，計算比菲德氏菌或乳酸桿菌的菌落數。產氣莢膜梭菌(Clostridium)之計數，係將
適當稀釋倍數之上述均質液0.1mL塗布於添加蛋黃液之TSC培養基(15g胰蛋白腖，5g酵母萃取物，5g大豆蛋白腖，1g檸檬酸鐵銨，1g偏亞硫酸鈉，20g洋菜，溶於1L去離子水)，待乾燥後，再倒入約5-10mL不含蛋黃液之TSC培養基，置於厭氧操作箱中於37℃培養24小時，計算產氣莢膜梭的菌落數。腸道菌數依下列公式計算：
為評估反應液糖度對半乳寡糖產物純度的影響，將純度57%的低純度半乳寡糖混合物以蒸餾水稀釋為白利糖度30、35、或40的反應液，分別命名為A、B、C三組，並調整反應液pH值至5.0-5.6。其次，加入重量比1%的酵母萃取物(以低純度半乳寡糖混合物乾重為基準)並加熱至其溶解，使反應液降溫至30-40℃，再加入重量比0.5%的乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585(以低純度半乳寡糖混合物乾重為基準)。通氣攪拌發酵24小時及48小時，自發酵液取樣以HPLC進行成分分析。
不同糖度反應液之發酵結果如表1所示。經成分分析，A、B、C三組在持續發酵24小時後，其三糖以上之半乳寡糖占發酵液總糖之比例分別為79.3% w/w、82.6% w/w、及67.9% w/w。在持續發酵48小時後，A、B、C三組的三糖以上之半乳寡糖占發酵液總糖之比例分別增加為92.3% w/w、95.4% w/w、及80.5% w/w。此結果顯示乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585於反應液之白利糖度為35時具有最佳的單糖及雙糖消耗能力。
為評估酵母菌添加量對半乳寡糖產物純度的影響，將純度57%的低純度半乳寡糖混合物以蒸餾水稀釋為白利糖度35的反應液，並調整反應液pH值至5.0-5.6。其次，加入重量比1%的酵母萃取物(以低純度半乳寡糖混合物乾重為基準)並加熱至其溶解，使反應液降溫至30-40℃，再加入重量比0.3%、0.5%、或0.8%的乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585(以低純度半乳寡糖混合物乾重為基準)，所得三種反應液分別命名為D、E、F三組。通氣攪拌發酵24小時及48小時，自發酵液取樣以HPLC進行成分分析。
不同酵母菌添加量之反應液之發酵結果如表2所示。經成分分析，D、E、F三組在持續發酵24小時後，其三糖以上之半乳寡糖占發酵液總糖之比例分別為76.4% w/w、82.0% w/w、及90.2% w/w。在持續發酵48小時後，D、E、F三組的三糖以上之半乳寡糖占發酵液總糖之比例分別增加為87.8% w/w、95.7% w/w、及100% w/w。此結果顯示當乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585的添加量為0.5%，可獲得純度95%以上之三糖以上之半乳寡糖產物；當該菌的添加量為0.8%，可獲得純度高達100%之三糖以上之半乳寡糖產物。
依據上述實施例1-2，將單一菌株之乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585加入低純度半乳寡糖進行發酵反應，可使發酵液中的單糖及雙糖被完全消耗，因此獲得不含單糖及雙糖的本發明高純度半乳寡糖組合物的初產品。
為進行更精確的分析，本實施例先移除前述高純度半乳寡糖組合物的初產品中的不可食用雜質及水分，再以HPLC測定本發明高純度半乳寡糖組合物的糖分組成。首先，將純度57%的低純度半乳寡糖混合物以蒸餾水稀釋為白利糖度35的反應液，並調整反應液pH值至5.0-5.6。其次，加入重量比1%的酵母萃取物(以低純度半乳寡糖混合物乾重為基準)並加熱至其溶解，使反應液降溫至30-40℃，再加入重量比0.8%的乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585(以低純度半乳寡糖混合物乾重為基準)。通氣攪拌發酵48-72小時，當發酵液中三糖以上之半乳寡糖占總糖之比例達100%時，加熱至90-95℃終止發酵反應。將此高純度半乳寡糖發酵液經過離心沉澱其中酵母菌及酵母萃取物，以珍珠岩過濾器移除該沉澱，再經活性碳脫色去除發酵過程產生的色素，並經陽離子交換樹脂與陰離子交換樹脂去除礦物質，最終以蒸氣濃縮得到高純度半乳寡糖糖漿，再經乾燥即可得到高純度半乳寡糖糖粉。
表3顯示三批次所得高純度半乳寡糖糖粉之糖分組成。綜合而言，本發明高純度半乳寡糖組合物包含1% w/w以下單糖及雙糖，較佳為不含單糖及雙糖，約48-57% w/w半乳三糖，約25-32% w/w半乳四糖，以及約15-22% w/w五糖以上之半乳寡糖。
本實施例以誘發糖尿病的Sprague Dawley大鼠(簡稱SD大鼠)為模型，比較本發明純度100%之高純度半乳寡糖組合物相對於純度95%之半乳寡糖組合物的降血糖效果。首先，將經過2週適應期的40隻SD大鼠依每組10隻隨機分配為四組，分別為健康組、糖尿病組、100% GOS組、及95% GOS組，適應期間餵食標準飼糧(AIN-93)。除了健康組，其他三組皆以腹腔注射鏈佐黴素(streptozotocin，STZ)65mg/kg及菸鹼醯胺(nicotinamide)230mg/kg以誘發糖尿
病，至該三組大鼠的空腹血糖值達糖尿病標準之230±10mg/dL以上。其後，健康組與糖尿病組繼續餵食標準飼糧，95% GOS組及100% GOS組則以管灌方式分別餵食溶於生理食鹽水的純度95%之半乳寡糖組合物與本發明純度100%之高純度半乳寡糖組合物。該二種半乳寡糖組合物的給予劑量各為1g/kg體重/天。本實施例所使用純度95%之半乳寡糖組合物與本發明純度100%之高純度半乳寡糖組合物，其糖分組成如表4所示。經過2週餵食，利用六碳糖激醃法(hexokinase assay)的商業套組(Quick Auto Neo GLU-HK)配合生化分析儀(HITACHI 7080，Japan)，測定大鼠於餵食前後的空腹血糖值(禁食24小時之血糖值)並計算其值變化。
大鼠的空腹血糖值變化與空腹血糖上升率分別如表5與圖1所示。相對於健康組，糖尿病組的空腹血糖值明顯增加。然而，95% GOS組與100% GOS組的空腹血糖值相對於半乳寡糖餵食前顯著下降，且以100% GOS組的空腹血糖值下降最多，達到25%。此結果顯示本發明高純度半乳寡糖組合物因為降低單糖及雙糖含量，以及增加半乳三糖及半乳四糖占比，具有大幅降低血糖的功效。本實施例中施用於大鼠的本發明高純度半乳寡糖組合物的劑量為1g/kg體重/天，按照2005年美國食品藥物管理局所公告之實驗初期估算方法換算，其用於人類個體的每日劑量為約0.16g/kg體重。
本實施例以誘發糖尿病的SD大鼠為模型，比較本發明純度100%之高純度半乳寡糖組合物相對於純度95%之半乳寡糖組合物，在改善個體腸道菌相的效果。類同實施例4之說明，將40隻SD大鼠依每組10隻隨機分配為四組，分別為健康組、糖尿病組、95% GOS組、及100% GOS組。經過誘發糖尿病處理後，健康組與糖尿病組餵食標準飼糧，95% GOS組及100% GOS組則以管灌方式分別餵食溶於生理食鹽水的純度95%之半乳寡糖組合物與本發明純度100%之高純度半乳寡糖組合物。該二種半乳寡糖組合物的給予劑量各為1g/kg體重/天。本實施例所用純度95%之半乳寡糖組合物與本發明純度100%之高純度半乳寡糖組合物，其糖分組成如表4所示。經過2週餵食，分析大鼠於餵食前後的腸道菌相。
圖2顯示益生菌，如乳酸桿菌及比菲德氏菌，與有害菌，如產氣莢膜梭菌，在大鼠腸道之估計菌數。相對於糖尿病組，100% GOS組的腸道內比菲德氏菌數量明顯增加，但產氣莢膜梭菌數量減少。相對而言，在95% GOS組並未觀察到腸道內比菲德氏菌數量增加，但卻有較多的產氣莢膜梭菌生長。此結果顯示本發明高純度半乳寡糖組合物能有效促進腸道益生菌生長，並因此抑制有害菌生長，導致有效改善腸道菌相。本實施例中施用於大鼠的本發明高純度半乳寡糖組合物的劑量為1g/kg體重/天，按照2005年美國食品藥物管理局所公告之實驗初期估算方法換算，其用於人類個體的每日劑量為約0.16g/kg體重。
綜上所述，本發明製備高純度半乳寡糖組合物之方法係利用單一酵母菌株，即乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585，進行發酵反應即製得純度99%以上之高純度半乳寡糖組合物，其包含至少99% w/w選自於由半乳三糖、半乳四糖、五糖以上之半乳寡糖、及其任意組合所組成的群組，及低於1% w/w之單糖及雙糖，最佳為100%選自於由半乳三糖、半乳四糖、五糖以上之半乳寡糖、及其任意組合所組成的群組。本發明高純度半乳寡糖組合物較純度95%之半乳寡糖組合物更有效降低糖尿病患者的血糖，亦能顯著改善腸道菌相而維持腸道健康，因此可用於製備調節血糖或改善腸道菌相之組合物。例如，本發明高純度半乳寡糖組合物可用於製備適合糖尿病或乳糖不耐症病人或寵物使用之食品、飲品、保健食品、營養補充品、及醫藥組合物等產品，該些產品可為粉末、液體、或即可使用(ready-to-use)，且該些產品可以進一步包含選自由一食材成分及一保健
食品成分所組成的群組。前述食材成份可為蔬果或肉類等，前述保健食品成份可為牛磺酸、維生素、菸鹼酸或其他有益健康之成分，但不在此限。
Claims (19)
- 一種製備高純度半乳寡糖組合物的方法，包含如下步驟：(1)提供一反應液，係包含一低純度半乳寡糖混合物；以及(2)添加一乳酸克魯維酵母菌(Kluyveromyces lactis)至該反應液而進行一發酵反應，以獲得一高純度半乳寡糖組合物；其中該乳酸克魯維酵母菌係為乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585，且該高純度半乳寡糖組合物包含至少99% w/w選自於由半乳三糖、半乳四糖、五糖以上之半乳寡糖、及其任意組合所組成的群組，及低於1% w/w之單糖及雙糖。
- 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該低純度半乳寡糖混合物之純度為55-60%。
- 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該反應液之白利(Brix)糖度為30-35。
- 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該乳酸克魯維酵母菌之添加量為該低純度半乳寡糖混合物乾重的至少約0.8%。
- 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該發酵反應係在30-40℃下持續24-72小時。
- 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該高純度半乳寡糖組合物係為100%選自於由半乳三糖、半乳四糖、五糖以上之半乳寡糖、及其任意組合所組成的群組。
- 一種高純度半乳寡糖組合物，包含至少99% w/w選自於由半乳三糖、半乳四糖、五糖以上之半乳寡糖、及其任意組合所組成的群組，及低於1% w/w之單糖及雙糖。
- 如申請專利範圍第7項所述之高純度半乳寡糖組合物，其係包含48-57% w/w之半乳三糖，25-32% w/w之半乳四糖，及15-22% w/w之五糖以上之半乳寡糖。
- 如申請專利範圍第7項所述之高純度半乳寡糖組合物，其係由一乳酸克魯維酵母菌(Kluyveromyces lactis)發酵製得，其中該乳酸克魯維酵母菌係為乳酸克魯維酵母菌ATCC 8585。
- 一種高純度半乳寡糖組合物用於製備一調節個體血糖之組合物之用途，其中該高純度半乳寡糖組合物包含至少99% w/w選自於由半乳三糖、半乳四糖、五糖以上之半乳寡糖、及其任意組合所組成的群組，及低於1% w/w之單糖及雙糖。
- 如申請專利範圍第10項所述之用途，其中該高純度半乳寡糖組合物包含48-57% w/w之半乳三糖，25-32% w/w之半乳四糖，及15-22% w/w之五糖以上之半乳寡糖。
- 如申請專利範圍第10項所述之用途，其中該高純度半乳寡糖組合物之人體每日劑量為至少0.16g/kg體重。
- 如申請專利範圍第10項所述之用途，其中該個體患有糖尿病。
- 如申請專利範圍第10項所述之用途，其中該組合物係為食品、飲品、保健食品、營養補充品、或醫藥組合物。
- 一種高純度半乳寡糖組合物用於製備一改善個體腸道菌相之組合物之用途，其中該高純度半乳寡糖組合物包含至少99% w/w選自於由半乳三糖、半乳四糖、五糖以上之半乳寡糖、及其任意組合所組成的群組，及低於1% w/w之單糖及雙糖。
- 如申請專利範圍第15項所述之用途，其中該高純度半乳寡糖組合物包含48-57% w/w之半乳三糖，25-32% w/w之半乳四糖，及15-22% w/w之五糖以上之半乳寡糖。
- 如申請專利範圍第15項所述之用途，其中該高純度半乳寡糖組合物之人體每日劑量為至少0.16g/kg體重。
- 如申請專利範圍第15項所述之用途，其中該個體患有糖尿病。
- 如申請專利範圍第15項所述之用途，其中該組合物係為食品、飲品、保健食品、營養補充品、或醫藥組合物。
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