CN113607525A - 一种用于血液消解的真空采血管添加剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用于血液消解的真空采血管添加剂及其制备方法，所述用于血液消解的真空采血管添加剂包括以下质量百分比的原料：2mol/L的盐酸20‑40％、2mol/L的硝酸20‑40％、聚氧乙烯月桂醚355‑15％、曲拉1005‑15％、余量为纯水。所述制备方法包括以下步骤：用纯水润洗锥形瓶2次；将所述原料按重量份称量于锥形瓶中；摇动锥形瓶，使其中的各成分试剂充分混合，然后静置20min后转移至试剂瓶中，得到血液消解液，盖好瓶塞备用，按照20ul血液消解液消解2ml血液的配比将血液消解液添加于玻璃采血管中，然后按照一次性使用真空采血管的生产工艺抽成真空后备用，即得所述用于血液消解的真空采血管添加剂。本发明制备的真空采血管添加剂具有用量小、对血液样本消解彻底的特点。

Description

一种用于血液消解的真空采血管添加剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及医学临床检验领域，具体涉及一种用于血液消解的真空采血管添加剂及其制备方法。
背景技术
科学研究证明，人体是由几十种微量元素组成，每一种都有其特殊的生理机能。在人类维持生命所需的营养物质中，微量元素起着极其重要的作用，它们的摄入过量、不足、不平衡或缺乏都会不同程度的引起人体生理的异常或发生疾病。目前，我国因地理、环境、气候、水质等因素的影响，及饮食结构的改变与饮食习惯的不合理，已造成全国8000多万人体内某些微量元素“先天不足”，“后天失调”也是微量元素缺乏症的重要原因之一，因环境污染的日益严重，如：汽车尾气、家庭装饰材料(油漆、涂料)、工业排放与释放、含铅玩具物品等，直接对儿童与青少年的健康造成威胁。随着现代社会生活节奏的加快、青少年学习压力增大，学生的合理饮食、人体活动与接触环境的健康常常容易被忽略。青少年身体发育的关键阶段，稍不注意，极易造成体内微量元素的失衡，为一生的健康埋下隐患，而盲目的药补，又会带来体内的其他元素的抑制与生理机能的破坏。如何科学准确的检测，并根据每个青少年的情况制定合理有效的解决方案，已成为社会与家长共同关心的问题。当下检测微量元素最常用的仪器主要有：原子吸收分光光度计、(含石墨炉)ICP-MS(电感耦合等离子质谱仪)、电化学分析仪等检测仪。原子吸收分光光度计、ICP-MS具有非常高的准确度，且检测的元素种类较多，但在测全血中的微量元素前都需要对血液样品进行消解处理，有微波消解或化学消解，且消解过程复杂、易污染、容易造成检测结果的误差。而使用电化学分析仪时虽然成本较低但检测速度慢、检测的元素种类有限、准确度低且检测过程用到的汞有剧毒，对人和环境都有害。由此可见在检测前对样品的消解处理格外重要，好的处理不仅能大大提高检测效率和准确度而且还能降低污染，一举三得。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于血液消解的真空采血管添加剂及其制备方法，所述真空采血管添加剂具有用量小、对血液样本消解彻底的特点。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种用于血液消解的真空采血管添加剂，包括以下质量百分比的原料：2mol/L的盐酸20-40％、2mol/L的硝酸20-40％、聚氧乙烯月桂醚355-15％、曲拉1005-15％、余量为纯水。
优选地，所述的一种用于血液消解的真空采血管添加剂，包括以下质量百分比的原料：2mol/L的盐酸30％、2mol/L的硝酸30％，聚氧乙烯月桂醚3510％、曲拉通10010％、纯水20％。
优选地，所述的一种用于血液消解的真空采血管添加剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)用纯水润洗锥形瓶2次；
(2)将所述原料按重量份称量于锥形瓶中；
(3)摇动锥形瓶，使其中的各成分试剂充分混合，然后静置20min后转移至试剂瓶中，得到血液消解液，盖好瓶塞备用，按照20ul血液消解液消解2ml血液的配比将血液消解液添加于玻璃采血管中，然后按照一次性使用真空采血管的生产工艺抽成真空后备用，即得所述用于血液消解的真空采血管添加剂。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
(1)本发明中的血液消解液作为采血管的添加剂预置于采血管内，其添加量为：20ul消解液兑2ml血液。具有用量小，血液消解能力强的特点。在采血完成后振摇采血管30s后静置约5min后待采血管中的样品变为灰棕色后即可直接用于全血微量元素的检测。
(2)本发明的消解液主要用于血液的消解，与传统的检测方法相比具有以下优点：
A.本发明的血液消解液作为添加剂添加于采血管中，制作过程简单。
B.使用含有本发明消解液的采血管采血后的血液样本可直接用于原子吸收光谱仪、ICP-MS等以往需要作血液前处理的设备上作全血微量元素的检测，避免了以往的复杂的血液消解过程，从而降低了因操作过程繁琐造成的误差。
C.本血液消解液在采血管中的添加量与所采集的血液样本的体积比为1:100，对样品几乎无稀释，不会因稀释而降低检测结果的准确度。
D.本发明的血液消解液中的聚氧乙烯月桂醚-35和曲拉通-100与血液接触后能迅速造成白细胞膜的穿孔和红细胞的溶解。随后盐酸和硝酸进入白细胞造成白细胞的彻底溶解，并对溶解后释放的蛋白质进行破坏，使各类金属元素彻底的释放，以便于检测分析，结果可靠。
E.使用含有该消解液的采血管进行微量元素分析时无需再行血液的消解处理，且避免了常规方法检测时所用肝素锂采血管因“锂”元素造成的结果干扰，大大简化了操作流程和提高了检测效率和准确度。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例
一种用于血液消解的真空采血管添加剂及血液消解液，由以下重量份(％)的原料组成：
表1用于血液消解的真空采血管添加剂及血液消解液的组份组成
Figure BDA0003202132950000031
Figure BDA0003202132950000041
所述的一种用于血液消解的真空采血管添加剂的制备方法，包括以下步骤：①用纯水润洗锥形瓶2次。②将上述原料按重量份称量于锥形瓶中。③最后称常温纯水，摇动锥形瓶，使其中的各成分试剂充分混合，然后静置20min后转移至试剂瓶中，盖好瓶塞备用。配置好的血液消解液一般按照20ul血液消解液消解2ml血液的配比将适量血液消解液添加于采血管中，然后按照一次性真空采血管的生产工艺抽成合适的真空，后备用。
对照试验：
实验描述
①本对照实验使用当前最常用和最靠谱的原子吸收光谱仪和电感耦合等离子质谱仪(ICP-MS)测定志愿者全血中的微量元素。主要是对人体影响较大的几种常见的金属元素：锌、铁、钙、镁、铜。
②本对照实验采集20名志愿者的血液样本每人2次进行对比实验，第一次使用本发明的含有血液消解液的真空采血管进行采血，每人2ml。第二次使用常规的肝素锂采血管进行采血，每人2ml。使用本发明的含有血液消解液的采血管采血后样本在采集约20min后无需处理直接用于测试。采用肝素锂采血的样本使用微波和化学消解后再进行测试。
主要仪器设备：元析AA-3600原子吸收分光光度计；元析MWD-500微波消解仪；美析ICP-MS6880电感耦合等离子质谱仪。
试剂、器具：硝酸(68％，国药集团)，过氧化氢(30％，国药集团)，纯水(自制)，锌、铁、钙、镁、铜单元素标准液(国药集团)，2ml的肝素锂真空采血管，2ml的加有血液消解液的真空采血管，经纯水清洗并晾干的移液器具及小容量容器若干。
实验过程
采血：采集20名志愿者的静脉血，每人采血两管。每管2ml，第一管用含有血液消解液的采血管采集，采集后振摇30s后静置约5min后待采血管中的样品变为灰棕色后即可直接用于全血微量元素的检测。用含有血液消解液采血管采样的20个样品称为A组，编号依次是A1,A2......A20。第二管用肝素锂真空采血管采血2ml，振摇后备用。用肝素锂采样的20个样品称为B组，编号依次是：B1,B2.......B20。
绘制标准曲线
将锌、铁、钙、镁、铜标准液用纯水按梯度稀释。然后上机用于制作标准曲线。
样品处理
B组样品采集后，用移液枪量取1ml血液样本置于微波消解仪的消解罐中，然后加入3ml硝酸至罐中，后盖好罐盖放入消解仪中消解10min。消解完成后将罐内液体倒入10ml容量瓶中，并用纯水涮洗净罐子，涮洗液倒入容量瓶中，然后用纯水定容至10ml，稀释10倍。然后依次处理编号B2-B20的样品，分别用AA-3600原子吸收光谱仪和ICP-MS6880测定各编号的微量元素含量。换算后算出各样品浓度，并做好记录。
A组样品用含有消解液的采血管采样，不需要特殊处理，可直接用于上机检测。(若要稀释可直接进行稀释。本实验不稀释，消解后样品直接用于检测)。
实验结果如下所示
表2 A组检测结果
Figure BDA0003202132950000051
Figure BDA0003202132950000061
Figure BDA0003202132950000071
表3 B组检测结果
Figure BDA0003202132950000072
Figure BDA0003202132950000081
Figure BDA0003202132950000091
实验结果分析
在同一仪器检测背景下，分析使用血液消解液采血管进行检测的A组和采用传统的微波消解检测的B组的同一个人两种样本处理方式检测结果的相似度来评价检测结果。即A1对B1的差异，A2对B2的差异........
表4 AA3660仪器检测结果分析
锌 铁 钙 镁 铜
A1-B1 0.541 0.556 3.439 3.395 0.089
A2-B2 2.206 0.989 2.775 2.08 0.223
A3-B3 0.625 0.475 4.485 1.337 0.269
A4-B4 0.469 0.417 2.72 2.609 0.032
A5-B5 0.699 0.712 3.091 4.019 0.219
A6-B6 1.015 0.55 3.481 2.881 0.176
A7-B7 0.995 1.16 5.249 1.255 0.21
A8-B8 0.585 0.87 2.904 1.14 0.143
A9-B9 0.62 0.36 1.84 0.32 0.139
A10-B10 0.56 0.57 3.016 2.281 0.154
A11-B11 0.756 0.789 2.206 1.528 0.058
A12-B12 0.325 0.652 2.14 1.392 0.09
A13-B13 0.879 0.49 0.256 2.66 0.163
A14-B14 0.6 0.86 1.543 3.143 0.264
A15-B15 0.333 0.429 3.677 2.406 0.14
A16-B16 0.806 0.669 2.463 3.173 0.065
A17-B17 0.462 0.6 2.035 0.489 0.083
A18-B18 0.688 0.573 2.245 3.011 0.109
A19-B19 0.51 0.997 3.109 2.898 0.1
A20-B20 0.5g 0.74 3.434 0.668 0.121
Figure BDA0003202132950000101
表5 ICP-MS6880仪器检测结果分析
锌 铁 钙 镁 铜
A1-B1 0.46 1.008 2.637 2.908 0.116
A2-B2 0.451 0.923 3.74 1.005 0.122
A3-B3 0.688 0.681 3.415 1.931 0.099
A4-B4 0.617 0.414 1.975 1.556 0.214
A5-B5 0.157 0.661 3.534 3.433 0.194
A6-B6 0.756 0.795 2.191 1.035 0.147
A7-B7 0.969 2.303 3.328 3.415 0.312
A8-B8 0.65 0.306 2.403 2.132 0.305
A9-B9 0.637 0.68 2.193 1.409 0.089
A10-B10 0.605 0.309 3.212 0.463 0.114
A11-B11 0.46 0.62 3.112 2.972 0.118
A12-B12 0.296 0.668 4.612 2.479 0.079
A13-B13 1.419 0.463 3.075 2.112 0.333
A14-B14 0.66 0.484 1.969 3.416 0.321
A15-B15 0.233 0.008 1.358 4.709 0.114
A16-B16 0.963 0.838 2.767 1.151 0.115
A17-B17 0.747 0.899 3.802 1.197 0.141
A18-B18 0.436 0.846 3.193 2.814 0.326
A19-B19 0.58 0.454 5.602 2.477 0.156
A20-B20 0.405 0.478 1.031 3.126 0.101
Figure BDA0003202132950000121
综述：通过数据分析发现，在使用血液消解液的采血管进行微量元素测定时，与传统的微波消解法进行微量元素检测相比，总平均差异约5％左右，是可接受的。也就是说该种用于血液消解的真空采血管添加剂是有效实用的。
以上内容仅仅是对本发明结构所作的举例和说明，所属本技术领域的技术人员对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，只要不偏离本发明的结构或者超越本权利要求书所定义的范围，均应属于本发明的保护范围。

Claims (3)

1.一种用于血液消解的真空采血管添加剂，其特征在于，包括以下质量百分比的原料：2mol/L的盐酸20-40％、2mol/L的硝酸20-40％、聚氧乙烯月桂醚355-15％、曲拉1005-15％、余量为纯水。
2.根据权利要求1所述的一种用于血液消解的真空采血管添加剂，其特征在于，包括以下质量百分比的原料：2mol/L的盐酸30％、2mol/L的硝酸30％，聚氧乙烯月桂醚3510％、曲拉通10010％、纯水20％。
3.根据权利要求1或2所述的一种用于血液消解的真空采血管添加剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)用纯水润洗锥形瓶2次；
(2)将所述原料按重量份称量于锥形瓶中；
(3)摇动锥形瓶，使其中的各成分试剂充分混合，然后静置20min后转移至试剂瓶中，得到血液消解液，盖好瓶塞备用，按照20ul血液消解液消解2ml血液的配比将血液消解液添加于玻璃采血管中，然后按照一次性使用真空采血管的生产工艺抽成真空后备用，即得所述用于血液消解的真空采血管添加剂。
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