CN1135758A

CN1135758A - 含寡糖的14-氨基甾类化合物及非对映选择性氨基甾类化合物的制造方法

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Publication number: CN1135758A
Application number: CN94194217A
Authority: CN
Inventors: P·M·戴巴斯; R·N·约翰逊; R·S·穆特; S·刘; D·E·波特洛克
Original assignee: Procter and Gamble Co
Current assignee: Procter and Gamble Co
Priority date: 1993-09-24
Filing date: 1994-09-23
Publication date: 1996-11-13
Also published as: RU2153503C2; DK0721459T3; AU7841494A; US5849889A; HUT74623A; HU9600734D0; EP0863149A1; EP0721459B1; GR3034028T3; ATE193538T1; WO1995008557A1; NO961170D0; AU692187B2; CA2182530A1; CZ86696A3; ES2146665T3; BR9407612A; KR960704914A; DE69424794D1; JPH09502982A

Abstract

本发明涉及通式(I)所示的含寡糖的14-氨基甾类化合物及其药学上可接受的酸式盐或酯，其中：a)R₁为(i)COOR₅，其中R₅为H；C_1-6烷基；氨基取代的C_1-6低级烷基；芳烷基或杂芳基烷基或碳环；(ii)CHR₆OH，其中R₆为氢原子或C_1-6低级烷基；或(iii)COR′″，其中R′″为H；C_1-6低级烷基；氨基取代的C_1-6低级烷基；氨基或二烷氨基；b)R₂为-NR₇R₈，其中R₇和R₈可相同或不同，为氢原子或C_1-6低级烷基c)R₃为(i)具有结构的式(II)寡糖残基其中R₉为H、甲基、羟基、羰基、乙酸基、芳烷氧基、杂芳基烷氧基或苯甲酸基；R₁₀为H、甲基、羰基、乙酸基、芳烷氧基、杂芳基烷氧基、苯甲酸基或羟基；R₁₁为O，当R₁₁为末端单糖糖基上的取代基时，则为OH、甲基、乙酸基、杂芳基烷氧基、芳烷氧基，R₁₂为H、甲基、甲基羟基甲基或乙酸基甲基；或具有结构式(III)的单糖残基：其中R₁₄和R₁₅可相同或不同,为H、C_1-6低级烷基、芳烷基、杂芳基烷基、杂芳基或芳基;R₁₇可为H、羟基、乙酸基或苯甲酸基;R₁₈和R₁₉为羟基、乙酸基或苯甲酸基；或(iii)具有结构式(IV)的寡糖残基其中R₁₄或R₁₅可相同或不同,为H、C_1-6低级烷基、杂芳基烷基、芳烷基或芳基;R_14a为O,当R_14a为末端单糖残基上的取代基时,则为羟基、甲基、乙酸基、芳烷氧基或杂芳基烷氧基;d)R₄为(i)OH,或(ii)H,或(iii)OR₁₃,其中R₁₃为单糖残基、乙酸基、苯甲酸基、芳烷基或杂芳基烷基e)Z为(i)-CH-,其中a和b为单键,或(ii)=C,其中a和b为双键。本发明还涉及在甾核14位上引入氨基的方法,其中所述氨基是通过包括如下步骤的碘代异氰酸盐加成反应非对映选择性地引到甾核14位上的:a)将异氰酸盐加成到甾核14-15位双键上;b)脱卤;c)异氰酸基转化为甾核14位上的氨基。

Description

含寡糖的14-氨基甾类化合物及非对映选择性氨基甾类化合物的制造方法

发明背景

本发明涉及新颖的含寡糖的14-氨基甾类化合物。本发明也涉及这些新颖化合物的药物组合物及用本发明化合物治疗充血性心力衰竭(CHF)的方法。本发明还涉及在甾核14位上引入氨基的新颖方法。

CHF是心脏日益不能提供足够的心输出量(CO)，所谓心输出是心脏在一段时间内泵出的血容量，以输送氧合血到外周组织中。当心脏开始衰竭时，机体的其它部分代偿丧失的CO，这种代偿机制最终导致称作CHF的综合征。当CHF发展时，出现结构和血液动力学损害。这种结构损害宏观上表现为心室心肌肥大，微观上表现为间质、血管周和心室壁替代纤维化，心肌毛细管密度减少，及心肌细胞死亡。当出现心肌组织纤维化时，使心脏功能受损，因为剩下的存活心肌细胞工作负荷更大。

在血液动力学方面，衰竭心脏在收缩期(心动周期中心室射血的时相)产生力的能力降低。因此，需要较大的舒张末期容量(在舒张期出现心室充盈)以进行任何给定水平的外部作功。在心力衰竭情况下，作功能力和负荷的不适配引起的射血减少导致舒张末期压力和肺毛细压力增大。随后往往发生肺郁血和外周水肿。从患者的预后来看，在CHF发展过程中，患者发生进行性恶化的疲劳和呼吸困难综合征。

如果可能的话，CHF的有效治疗需要确定病因，因为某些CHF病因有其独特的治疗方式。CHF有各种病因，包括心脏疾病，如冠状动脉疾病或心肌炎；瓣膜疾病，如二尖瓣脱出或主动脉狭窄；心包疾病；先天性心脏病；肺部疾病；心律失常；高血压和糖尿病。例如，如果CHF的病因是心肌炎或心律失常。则分别用抗微生物或抗心律失常治疗病人，可恢复正常的心功能。

但是，一旦排除不对其它治疗起反应的病因，则介绍用如下三种疗法中的一种或一种以上进行治疗：1)投予强心药，如洋地黄，以改善心脏的泵功能；2)休息和/或给以血管舒张剂如卡托普利以减轻心脏的工作负荷；3)采用低钠饮良或给予利尿剂如氯噻嗪控制水钠潴留。根据患者的症状和对某些药物的耐受程度，CHF的治疗是剂量个体化的。例如，某些患者可能有较强的发生洋地黄毒性的倾向，而其它症状较微的患者可得益于利尿剂，该类药物有较高的治疗指数。另外，有识之士建议，利尿剂为合适的一线CHF治疗药，利尿治疗应继以血管扩张剂和洋地黄。人们还注意到，洋地黄对于患严重CHF的病人是最有效的。参见：Braunwald，Heart disease：A Text-book of Cardiovascular Medicine，Vol.(3rb de.1988)，Chung，E.K.，Quick Reference to Cardiovascular Disease，Chapter 27(2ded.1983)and Fowler，N.O.，Cardiac Diagnosis and Treatment，Chapter 12(2d ed.1976)。

洋地黄对于伴有血液动力学问题、以严重CHF为特征的症状的改善是有用的，但实际上其治疗指数低，限制了其治疗应用。参见：Braunwald，Heart disease：A Textbook of CardiovascularMedicine，Vol.(3rb de.1988)，Chung，E.K.，Quick Referenceto Cardiovascular Disease，Chapter 27(2d ed.1983) and Fowler，N.O.，Cardiac Diagnosis and Treatment，Chapter 12(2d ed.1976)and Goodman and Gilman，The Pharmacolpgical Basis ofTherapentics，Chappter 34(8th ed.，1990)。

洋地黄所伴有的毒性问题促使研究者力求开发较安全的心脏活性化合物。如下专利中描述了含甾核的心脏活性化合物：出版于1987年7月16日的世界专利出版物WO 87/04167(Chiodini等)描述了3位上被氨基糖残基取代、14位上被乙缩醛键取代的氨基糖苷甾族衍生物。该出版物阐述了这些化合物治疗高血压有效。出版于1990年8月17日、授予Guina的法国专利2,642,973描述了洋地黄样化合物2，3-二氧甲基-6-甲基-3-β-D-葡萄糖-羊角拗定，它含有在3位上有葡萄糖基取代，17位上有内酯基取代、14位上有羟基取代的甾核。该专利阐述该化合物用于预防心功能不全所致病理状态(这种病状是开洋地黄处方的)和预防因动脉钙化所致高血压引起的病理状态。Guina的化合物还被说成是正性肌力剂、外周血管扩张剂和抗心律失常剂。1987年7月16日世界专利出版物WO 87/04168(Chiodini等)公开了在3位上具有烷基取代的氨基糖(如2-氨基或2-烷氨基-2-脱氧-己吡喃糖基、3-氨基或3-烷氨基-3-脱氧-己吡喃糖基、3-氨基或3-烷氨基-3，6-二脱氧-己吡喃糖基、3-氨基或3-烷氨基2，3，6-三脱氧-己吡喃糖基、4-氨基或4-烷氨基2，4，6-三脱氧-己吡喃糖残基)，以及在17位上具有环酰胺(内酰胺)的氨基糖苷甾类化合物。14位被H取代。该化合物据说用于抗高血压。出版于1991年11月14日的世界专利出版物WO 91/17176(Kenny等)揭示了一种用作加压剂的甾类糖苷，其3位上具有糖基团如戊糖、己糖或兼而有之，17位上有内酯环，14位被OH、H或F、Cl、Br或NH₂取代。1991年12月5日授权的DD 296,502 A5公开了用于治疗心功能不全的甾类酰胺，其3位被磺酰氨基取代，17位被5元或6元内酯环取代，14位被OH取代。1992年9月1日授予LaBella的U.S.5,144,017公开了据说作为心脏刺激剂有用的甾类化合物，其3位被糖苷残基(如β-D-葡萄糖苷、α-L-鼠季糖苷、三毛地黄毒糖化物)取代，17位被乙酸基或氨基取代，14位上有OH基。1992年12月29日授予Nc-Call的U.S.5,175,281公开了用于治疗脊柱损伤、头外伤和继发性脑血管痉挛，预防心肺复苏和心肌梗塞后的损伤的嘧啶基哌嗪基甾类化合物，其中3位为OH、CH₃O、COOH或苯甲酸基，14位为H，17位为杂环胺。1988年4月27日授予Wunderwald等的DD 256，134A1公开了一种制备心脏活性甾类化合物的方法，其中甾体分子的3位被吗啡代甲酸基残基取代，甾核的17位被内酯环取代，14位被OH、H或烯烃取代。所述化合物据称对增加心脏收缩力有用。1992年10月15日公开的Ichikawa的JP 4-290899公开了一种强心甾类化合物，其中甾核的3位被寡糖取代，所述寡糖可由3个吡喃葡萄糖基组成，14位被OH基取代，17位被内酯环取代。Temple-ton，et al.，J.Med.Chem.36，43-45(1993)公开了14-羟基-21-去甲-5β，14β-孕烷和5β，14β-孕烷C-3 α-L-鼠李糖苷及三-β-D-毛地黄毒苷衍生物的合成。所述化合物据报告是有效的强心剂。具有C-17βCOCH₂OH，CH₂OH，CO₂H，CO₂Me，CH₂NH₂，或CH₂NO₂基的这些化合物结合在心肌的洋地黄受体识别部位。Templeton，etal.，1 J.Chem.Sci.Perkin.Trans.，2503-2517(1992)公开了14位羟基-5β，14β-孕烷的20α-和20β乙酰氨基-、氨基、硝基-和羟基-3β苷(α-L-鼠李吡喃糖苷和三-β-D-毛地黄素苷)和酰基衍生物及C-20肟、腙和脒基腙的合成。这些化合物据称是有效的强心剂。

此外，血管紧张肽转化酶抑制剂(ACEI)被证明降低CHF病人的死亡率。见Nicklas，J.M.and Pitt，B.，et al.(The SOLVD In-vestigatirs)，“Effect of Enalapril on survival in Patients with Re-duced Left Ventricular Ejection Fractions and Congestive HeartFailure”，N.Engl.J.Med.325(5)：293(1991)。

目前，4百万人仍罹患CHF。诊断为CHF后五年死亡率男性为60％，女性为45％。这清楚地表明需要针对处理CHF的较好治疗措施。见Parmley，W.W.，“Pathophysiology and Current Therapyof Congestive Heart Failure”，J.Am.Col.Cardiol.13：771-785(1989)；Francis，G.S.et al.，“Congestive Heart Failure：Patho-physiology and Therapy，”Cardiovascular Pharmacology，3rd Edi-tion(1990)。

14氨基化合物被证明通过增加心脏收缩力而在治疗CHF上是有用的。这些化合物提供心脏收缩力增强的治疗效益，而无洋地黄的副效应。这些14-氨基甾类化合物及其制备方法在下面四个专利中加以描述，本文均引为参考：U.S.4,325,879，Jarreau，et al.1982年4月20日颁布(U.S.′879)(相应于法国专利申请2,464,270)；U.S.4,552,868，Jarreau，et al.，1985年11月12日颁布(U.S.′868)；U.S.4,584,289，Jarreau，et al.，1986年4月22日颁布(U.S.′289)和U.S.4,885,280，Jarreau，et al.，1989年12月5日颁布(U.S.′280)。这四个专利描述了具有强心活性的14-氨基甾类化合物及其制备方法，U.S.′879；′868；′289和′280均揭示用叠氮酸在14位上形成叠氮化物衍生物，再还原为氨基。Adeoti，S.B.，etal.，“Introduction of A 14β-Nitrated Function，Into The SteroidRing To Prepare The Cardioactive Molecule，14β-Amino-5β-Pergnane-3β(，20β-Diol，from Progesterone and DeoxycholicAcid，”45(12)Tetrahedron Letters，3717-3730(1989)公开了将14β氨基官能团引入甾类分子，涉及1)在N₃H、BF₃·Et₂O或氨存在下的环化反应或2)用N₃H、BF₃·Et₂O处理甾核。所述方法可制备心脏活性14β-氨基-5β-孕烷-3β，20β二醇。Naidoo，B.K.，et al.，“Cardiotonic Steroids I：Importance of 14β-Hydroxy Group in Dig-itoxigenin，”63(9)Jnl Pharm Sci.，1391-1394(1974)公开了用异氰酸盐制备14β-氨基甾类化合物的实验设想。但是，研究者们并未成功地利用异氰酸盐化学在甾核14位上引入氨基。异氰酸盐化学应用于甾类化合物的合成在如下文献中笼统地进行了描述。Ponsold，K.，et al.，“Gekoppelt Additionsreaktionen an 14，15-ungesat-tigten Androstanen EinfluB des positiven Halogens auf die Re-gioselektivitat，”Journal f.prakt.Chemie，Band 325，Heft 1，1983，S.123-132；Ponsold，K.，et al.“Synthese und Reaktivitatvon Estra-1，3，5(10)-trienen mit heterocyclischen Vierringen in14，15-Stellung”，Journal f.prakt.Chemie，Band 328，Heft 5/6，1986，S.673-681；and Bohl，M.，et al”，“Quantitative structure-activity relationships of estrogenic steroids substituted at C14，C15”，Steroid Biochem.Vol.26 No.5，pp.589-597，1987。

本发明者发现，本发明的14-氨基甾类化合物，其3位被寡糖基取代，更有效地影响心肌收缩力。所述含寡糖14-氨基甾类化合物更耐受代谢，因而比现有技术的14-氨基甾类化合物提供较长时间的变力性活性。本发明者还发现，可通过利用异氰酸盐化学的方法在甾核14位上引入氨基，这是比现有技术方法更安全更有效的方法。

发明的概述

如下通式所示的含寡糖的14-氨基甾类化合物及其药学上可接受的酸式盐或酯

其中a)R₁为

(i)COOR₅，其中R₅为H；C_1-6烷基；氨基取代的C_1-6低级烷基；芳烷基或杂芳基烷基或碳环；

(ii)CHR₆OH，其中R₆为氢原子或C_1-6低级烷基；或

(iii)COR，其中R为H；C_1-6低级烷基；氨基取代的C_1-6低级烷基；氨基或二烷氨基；b)R₂为-NR₇R₈，其中R₇和R₈可相同或不同，为氢原子或C_1-6低级烷基c)R₃为

(i)具有如下结构的寡糖残基

其中R₉为H、甲基、羟基、羰基、乙酸基、芳烷氧基、杂芳基烷氧基或苯甲酸基；R₁₀为H、甲基、羰基、乙酸基、芳烷氧基、杂芳基烷氧基、苯甲酸基或羟基；R₁₁为O，当R₁₁为末端单糖糖基上的取代基时，则为OH、甲基、乙酸基、杂芳基烷氧基、芳烷氧基，R₁₂为H、甲基、甲基羟基甲基或乙酸基甲基；或(ii)具有如下结构的单糖残基：

其中R₁₄和R₁₅可相同或不同，为H、C_1-6低级烷基、芳烷基、杂芳基烷基、杂芳基或芳基；R₁₇可为H、羟基、乙酸基或苯甲酸基；R₁₈和R₁₉为羟基、乙酸基或苯甲酸基；或

(iii)具有如下结构的寡糖残基

其中R₁₄或R₁₅可相同或不同，为H、C_1-6低级烷基、杂芳基烷基、芳烷基或芳基；R_14a为O，当R_14a为末端单糖残基上的取代基时，则为羟基、甲基、乙酸基、芳烷氧基或杂芳基烷氧基；d)R₄为

(i)OH，或

(ii)H，或

(iii)OR₁₃，其中R₁₃为单糖残基、乙酸基、苯甲酸基、芳烷基或杂芳基烷基e)Z为

(i)-CH-，其中a和b为单键，或

(ii)＝C，其中a和b为双键。

本发明还包括在甾核14位上引入氨基的方法，其中所述氨基是通过包括如下步骤的碘代异氰酸盐加成反应非对映选择性地引到甾核14位上的：

a)将异氰酸盐加成到甾核14-15位双键上；

b)脱卤；

c)异氰酸基转化为甾核14位上的氨基。术语的定义和使用

下面是本文所用术语的定义表。

“氨基甾类”是甾核上具有氨基的甾环化合物。

“烷基”是具有1-8个碳原子、除非另有指明，最好具有1-4个碳原子的未取代或取代的直链、环状或支链饱和烃链。较佳的烷基包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基和丁基；来自脂肪烃除去1个H的一价基团，如甲基。低级烷基含1-6个碳原子。

本文所用“杂烷基”是具有3-8个碳原子、包含碳原子和1个或2个杂原子的未取代或取代的饱和链。

“烯基”是具有2-8个碳原子、最好具有2-4个碳原子、并具有至少1个烯烃双键的未取代或取代的直链或支链烃链。

“炔基”是具有2-8个碳原子、最好具有2-4个碳原子、并具有至少1个三键的未取代或取代的直链或支链烃链。

“乙酸盐”：含CH₃COO-基团的乙酸的盐。

“乙酸基”：乙酰氧基CH₃COO-。

“乙酰基”：酰基CH₃CO-。

“糖苷配基”：糖苷的组分，例如植物颜料，不是糖。

本文所用的“碳环”是一般含有3-8个碳原子、最好含有5-7个碳原子的未取代或取代的饱和、不饱和或芳族烃环。

本文所用的“杂环”是环上含碳原子和一个或一个以上杂原子的未取代或取代的饱和、不饱和或芳香族的环。杂环一般含有3-8个碳原子、最好含有5-7个碳原子。除非另有指明，杂原子可各自选自N、S和O。

“芳基”是芳香族碳环。芳基包括，但不限于，苯基、甲苯基、二甲苯基、异丙苯基和萘基；从芳香烃除去一个氢原子得到的有机基团，例如从苯得到的苯基。

“杂芳基”是芳族杂环。较佳的杂芳基包括，但不限于，噻吩基、吡咯基、吡啶基、吡嗪基、噁唑基、噻唑基、喹啉基、嘧啶基和四唑基。

“烷氧基”是具有烃链取代基的氧原子，其中烃链是烷基或烯基(如-O-烷基或-O-烯基)；“烷氧基”是通过氧连接于分子其余部分的烷基，如甲氧基。较佳的烷氧基包括，但不限于，甲氧基、乙氧基、丙氧基等。

“羟烷基”是具有羟基取代基(如-OH)并可具有其它取代基的取代烃链。较佳的羟烷基包括，但不限于，羟乙基、羟丙基、苯基羟烷基。

“羧烷基”是具有羧基取代基(如-COOH)并可具有其它取代基的取代烃链。较佳的羧烷基包括，但不限于，羧甲基、羧乙基及其酸和酯。

“氨基烷基”是由氨基取代烃链(如烷基)而成的基(如-NH-烷基-)，例如二甲氨基烷基。

“烷氨基”是具有一个或两个烷基取代基(如-N-烷基)的氨基。

“烯氨基”是具有一个或两个烯基取代基(如-N-烯基)的氨基。

“炔氨基”是具有一个或两个炔基取代基(如-N-炔基)的氨基。

“烷基亚氨基”是具有一个或两个烷基取代基(如-N-烷基)的亚氨基。

“芳烷基氧基”是具有一个芳烷基取代基的氧原子，如苯氧甲基、苯亚甲氧基。

“杂芳基烷氧基”是具有杂芳烷基取代基的氧原子，如

“芳烷基”是被芳基取代的烷基。较佳的芳烷基包括苄基和苯乙基。

“杂芳烷基”是被杂芳基取代的烷基。

“芳氨基”是被芳基取代的氨基(如-NH-芳基)。

“芳氧基”是具有芳基取代基的氧原子(如-O-芳基)。

“酰基”或“羰基”是从羧酸除去羟基而形成的基团(如R-C(＝O)-)。较佳的烷酰基包括，但不限于，乙酰基、丙酰基和丁酰基。

“酰氧基”是具有酰基取代基的氧原子(如-O-酰基)，例如-O-C(＝O)-烷基。

“酰氨基”是具有酰基取代基的氨基(如-N-酰基)，例如-NH-(C＝O)-烷基。

“苯甲酰氧基”：苯甲酰基氧基。

“苯甲酰基”：来自苯甲酸的芳基C₆H₅CO-。

“苯甲酰基氧基”：苯甲酰氧基。来自苯甲酸的芳基C₆H₅COO-。

“氨基甲酸盐(酯)”：氨基甲酸的盐；含-NCO₂-基团，在本专业中也称作脲烷。

“羧基”：表示羧基基团的词头。

“酯”：从醇(碱)和有机酸消除水而形成的有机盐；羧酸的官能团衍生物是通过简单的水解反应能转化为羧酸的那些化合物。最普通的这种衍生物是羟基被烷氧基取代的酯，例如

“糖苷”：糖和另一物质所成的天然化合物，它水解出糖和一种要素(例如，松柏苷水解得到葡萄糖和作为要素的松柏醇；葡萄糖苷水解得到葡萄糖，果糖苷水解得到果糖，半乳糖苷水解得到半乳糖，等)；糖类的环状缩醛。

“卤”、“卤素”或“卤根”是氯、溴、氟或碘原子基团。氯、溴和氟是较佳的卤根。

“内酯”：羟基羧酸从酸的羟基和羧基失去一分子水形成的各类内酯，其特征在于环上的羰基氧基-OCO-，并按母酸的羟基位置定位；环状酯。

“药学上可接受的”盐是在任何酸性基团(如羧基)上形成的阳离子盐或在任何碱性基团上(如氨基)形成的阴离子盐。很多这样的盐是现有技术中已知的，如1987年9月11日公开的Johnston等的世界专利申请87/05297中所述，现结合于此作为参考。较佳的阳离子盐包括碱金属盐(如钠和钾)和碱土金属盐(如镁和钙)。较佳的阴离子盐包括卤化物(如氯化物)盐。

“盐”：酸和碱反应产生的物质；金属(阳性)基团和非金属(阴性)基团的化合物：。

“甾核”：一类脂类化合物的统称，包括类固醇、胆酸、强心苷、皂草苷和性激素。

“取代基”：取代母体化合物的氢原子的任何原子或基团。

“取代”：由取代基替代化合物中的一个元素或基团。

“取代的”：指已经过取代反应的化合物。

“取代反应”：一个分子(通常为有机分子)中的一个原子或原子团被另一个原子或原子团替换的反应。

取代基本身也可被取代。这样的取代作用可取代上一个或一个以上取代基。这种取代基包括，但不限于，C.Hansch & A.Leo，Substituent Constants for Correlation Analysis in Chemistry andBiology(1979)所列出的那些取代基，现结合于此作为参考。较佳的取代基包括，但不限于，烷基、烯基、烷氧基、羟基、氧代、氨基、氨基烷基(例如氨甲基等)、氰基、卤、羧基、烷氧乙酰基(例如羰基乙氧基等)、巯基、芳基、环烷基、杂芳基、杂环烷基(如吡啶基、吗啉基、吡嗪基、吡咯烷基等)、亚氨基、硫代、羟烷基、芳氧基、芳烷基以及它们的结合。

“单糖”是一个单一的糖基团；例如己糖、2-脱氧葡萄糖、6-脱氧己糖、2，6-二脱氧己糖等、鼠李糖、葡萄糖、阿拉伯糖、毛地黄毒素糖、果糖、半乳糖、鼠李吡喃糖、吡喃己糖、6-脱氧葡萄糖、4，6-二脱氧吡喃葡糖苷、甘露糖、磁麻糖、木糖、来苏糖、核糖、毛地黄糖、4-氨基-2，4，6-三脱氧来苏吡喃己糖、4-氨基-4，6-二脱氧吡喃葡萄糖、2，3-二脱氧鼠李吡喃糖、4-甲氧基-4，6-二脱氧鼠李吡喃糖。

“寡糖”是具有2-8个(较佳为2-3个)单糖残基的糖。寡糖的最后一个单糖残基被称作“末端”单糖残基。组成寡糖的单糖残基可以是相同或不同的。所述单糖残基通过一个单糖残基的OH基与其它单糖残基的异头碳相连接。

“单糖”或“寡糖”残基可以环式或椅式构型表示。例如，葡萄糖(单糖)可表示为：

发明的详述

本发明包括某些含寡糖的14-氨基甾类化合物、其药物组合物，以及用所述新型化合物及其组合物治疗人或其它哺乳动物充血性心力衰竭的治疗方法。因此，本发明所用的具体化合物和组合物必须是药学上可接受的。如本文中所用的，这种“药学上可接受的”成分是适用于人和/或哺乳动物而无过度不良反应(例如毒性、刺激性和变态反应)、具有相当合理的利益/危险比的成分。

活性物质

如下通式所示含寡糖的14-氨基甾类化合物及其药学上可接受的酸式盐或酯

其中a)R₁为

(ii)CHR₆OH，其中R₆为氢原子或C_1-6低级烷基；或

(1)具有如下结构的寡糖残基

其中R₉为H、甲基、羟基、羧基、乙酸基、芳烷氧基、杂芳基烷氧基或苄氧基；R₁₀为H、甲基、羧基、乙酸基、芳烷氧基、杂芳基烷氧基、苄氧基或羟基；R₁₁为O，当R₁₁为末端单糖糖基上的取代基时，则为OH、甲基、乙酸基、杂芳基烷氧基、芳烷氧基，R₁₂为H、甲基、甲基羟基甲基或乙酸基甲基；或

(ii)具有如下结构的单糖残基：

其中R₁₄和R₁₅可相同或不同，为H、C_1-6低级烷基、芳烷基、杂芳基烷基、杂芳基或芳基；R₁₇可为H、羟基、乙酸基或苄氧基；R₁₈和R₁₉为羟基、乙酸基或苄氧基；或(iii)具有如下结构的寡糖残基

其中R₁₄或R₁₅可相同或不同，为H、C_1-6低级烷基、杂芳基烷基、芳烷基或芳基；R_14a为O，当R_14a为末端单糖残基上的取代基时，则必须为羟基、甲基、乙酸基、芳烷氧基或杂芳基烷氧基；d)R₄为

(i)OH，或

(ii)H，或

(iii)OR₁₃，其中R₁₃为单糖残基、乙酸基、苄氧基、芳烷基或杂芳基烷基e)Z为

(i)-CH-，其中a和b为单键，或

(ii)＝C，其中a和b为双键。

本文中所用的“～”符号表示立体化学未定，甾核上的取代基可以是α或β构型的。甾核上的取代基以β构型为较佳。而且，包括寡糖残基的单糖单位既可以是α构型也可以是β构型的。糖化学领域的技术人员明白，在某个给定的糖残基上的取代基的构型可由具体命名的糖来表明。

本发明还包括在甾核的14位上引入氨基的方法，其中所述氨基通过包括如下步骤的碘代异氰酸酯加成反应非对映选择性地被引到甾核14位上：

a)将异氰酸酯加成到甾核14-15位双键上；

b)脱卤；

c)甾核14位上异氰酸酯转化为氨基。

本发明的含寡糖的14-氨基甾类化合物

甾核

本发明的新颖的含寡糖的14-氨基甾类化合物包括一个甾核，所述甾核被各种取代基取代。

甾核上的取代基

R₁取代基

R₁取代基是甾核17位上的取代基。有三种可能的R₁取代基。R₁可能是羧酸酯，COOR₅，其中R₅为H、C_1-6低级烷基、被氨基取代的C_1-6低级烷基、芳烷基或杂芳基烷基或碳环。较佳的R₅取代基为C_1-6低级烷基、芳烷基或碳环，最佳的R₅为甲基；因此，R₁为COOCH₃(羧甲酯)。

R₁可为CHR₆OH，其中R₆为氢原子或含1-6个碳原子的低级烷基；较佳的R₆为H或CH₃；因此，R₁为CH₂OH或CH(CH₃)OH。

最后，R₁可为COR″，其中R为H、C_1-6低级烷基、甲氨基、氨基或二烷氨基。较佳的R为氨基或甲氨基。最佳的R为氨基；因此，R₁为CONH₂。

甾核上最佳的R₁取代基为羧酸酯，COOR₅，其中R₅为甲基(COOCH₃)。

R₂取代基

R₂取代基在甾核的14位上。有一个R₂取代基。R₂为-NR₇R₈，其中R₇和R₈可相同或不同，为氢原子或含1-6个碳原子的低级烷基。R₇和R₈最好为H：因此，R₂为NH₂。

R₃取代基

R₃取代基在甾核的3位上。有三种R₃取代基。R₃可为具有如下结构的含寡糖的残基：

其中，R₉为H、甲基、羟基、羧基、乙酸基、芳烷氧基或苯甲酸基；R₁₀为H、甲基、羧基、乙酸基、芳烷氧基、杂芳烷氧基、苯甲酸基或羟基；R₁₁为O、芳烷氧基、杂芳烷氧基；R₁₂为H、甲基、甲基羟甲基或乙酸基甲基。在本发明的化合物中，当R₁₁为O时，所述_O通过苷键连接单糖残基。

寡糖残基可包含2或3个单糖单位。所述单糖单位可以是相同或不同的。较佳的单糖单位为二脱氧吡喃核己糖和吡喃鼠李糖。

较佳的R₉取代基为H、甲基和羟基。最佳的R₉为H。较佳的R₁₀取代基为H、甲基和羟基。最佳的R₉为羟基。除了R₁₁为寡糖残基的末端单糖残基上的取代基外，R₁₁为O。末端单糖残基上的较佳R₁₁取代基为羟基。

较佳的R₁₂取代基为H和甲基。最佳的R₁₂取代基为甲基。

R₃也是具有如下结构的含寡糖的残基：

其中，R₁₄和R₁₅可以相同或不同，为H、C_1-6低级烷基、芳烷基、杂芳烷基、杂芳基或芳基；R₁₇可为H、羟基、乙酸基或苯甲酸基；R₁₈为羟基、乙酸基或苯甲酸基。

寡糖残基可包含2或3个单糖单位，以3个单糖单位为佳。所述单糖单位可以是相同或不同的。较佳的单糖单位为二脱氧吡喃核己糖和吡喃鼠李糖。

较佳的R₁₄取代基为H和C_1-6低级烷基，更佳的R₁₄取代基为C_1-6低级烷基，最佳的R₁₄取代基为甲基。较佳的R₁₅取代基为H和C_1-6低级烷基，更佳的R₁₅取代基为C_1-6低级烷基，最佳的R₁₅取代基为甲基。较佳的R₁₇取代基为H、乙酸基和羟基，最佳的R₁₇取代基为H。

较佳的R₁₈取代基为羟基和乙酸基，最佳的R₁₈取代基为羟基。较佳的R₁₉取代基为羟基和乙酸基，最佳的R₁₉取代基为羟基。

最后，R₃是具有如下结构的寡糖残基：

其中，R₁₄和R₁₅可以相同或不同，为H、C_1-6低级烷基、芳烷基、杂芳烷基、杂芳基或芳基；

R_14a为O，当R_14a为末端单糖残基上的取代基时，则必须为羟基、甲基、乙酸基、芳烷氧基或杂芳基烷氧基。在本发明的化合物中，当R_14a为O时，所述O以糖苷键连接单糖残基。

较佳的R₁₄和R₁₅为C_1-6低级烷基，最佳的R₁₄和R₁₅为甲基。当R_14a为末端单糖残基上的取代基时，较佳的R_14a为羟基。

R₄取代基

R₄取代基在甾核的12位上。当R₁₃为单糖糖基、乙酸基、苄氧基、芳烷基或杂芳基烷基时，R₄可为OH、H或OR₁₃。所述单糖残基选自己糖、2-脱氧葡萄糖、6-脱氧己糖、2，6-二脱氧己糖、鼠李糖、葡萄糖和阿拉伯糖、毛地黄毒素糖、果糖、半乳糖、鼠李吡喃糖、己吡喃糖、6-脱氧葡萄糖、4，6-二脱氧吡喃葡糖苷、甘露糖、磁麻糖、木糖、来苏糖、核糖、毛地黄糖、葡糖胺、4-氨基-2，4，6-三脱氧来苏己吡喃糖、4-氨基-4，6-二脱氧吡喃葡糖苷、2，3-二脱氧鼠李吡喃糖、4-甲氧基-4，6-二脱氧鼠李吡喃糖。以它们的β-D或α-L异头物为佳。

最佳的R₄取代基为H。

Z为-CH-，其中a和b为单键；或＝C，其中a和b均为双键。较佳的Z为-CH-，其中a和b为单键。

较佳的本发明的含寡糖的14-氨基甾族化合物为：

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-N-甲基雄烷-17-甲酰胺

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-6-脱氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-α-L-吡喃甘露糖基〕氧〕雄烷-17-羧酸甲酯

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄烷-17-甲酰胺

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄烷-17-羧酸甲酯

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄烷-17-羧酸甲酯

14β-氨基-3β-〔α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯

14β-氨基-3β-〔α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯

14β-氨基-3β-〔2″，3″-O-异亚丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-异亚丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯

14β-氨基-3β-〔2″，3″，4″-O-乙酰基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-异亚丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯

14β-氨基-3β-〔4″-O-乙酰基-2″，3″-O-异亚丙基-β-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-异亚丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-α-L-甘露吡喃糖基)-氧〕-雄烷-17-羧酸甲酯

本发明的含寡糖的14-氨基甾类化合物的制备

本发明还包括在甾核14位上引入氨基的方法。按U.S.4,325,879；U.S.4,552,868；U.S.4,584,289和U.S.4,885,280(本文引作参考)的现有化学技术利用叠氮酸在甾核的14位引入叠氮基。然后将叠氮基还原成甾核14位上的氨基。涉及利用碘代异氰酸盐的本发明方法是对本领域的技术改进，因为它消除了有害的叠氮酸，更易适用于大规模制备操作，提供了更好的14-氨基甾类化合物的得率，并在甾核上存在其它对酸敏感的官能度时使14位氨基能被引入。甾核3位上的寡糖残基是对酸敏感的基团，特别易被叠氮酸所断裂。因此，碘代异氰酸盐的使用消除了寡糖残基从甾核上断裂下来的问题。

本发明方法通过将碘代异氰酸盐加成到甾核的14-15位双键上，然后脱卤，并将异氰酸基转化为氨基，而非对映选择性地在甾核14位上引入氨基。在将碘代异氰酸盐加成到甾核的14-15位双键上后，经脱卤反应除去碘基，然后将异氰酸基转化为氨基。

本发明方法具体包括以下步骤：

a)在合适的溶剂中，用(最好，但不限于)氰酸银和碘就地生成异氰酸盐。所述溶剂包括，但不限于，诸如乙酸乙酯或乙酸丙酯的酯类，诸如乙腈或丙腈的腈类，诸如二氯甲烷、氯仿或二氯乙烷的卤代烃类、诸如四氢呋喃或叔丁基甲基醚的醚类，或它们的混合物。较佳的溶剂包括腈类(更佳为乙腈)与酯类或醚类(最佳为乙酸乙酯或叔丁基甲基醚)的混合物。异氰酸盐加成反应的温度可从-30℃-100℃，最佳为-10℃-5℃。异氰酸盐加成反应的反应时间可从1-6小时，较佳为1-3小时。试剂可以任何次序、任何速度一起加入，最好是将碘放在溶剂中，加到甾类及氰酸银在溶剂中的混合物中，历时30-60分钟；

b)脱卤反应的进行以在合适的溶剂中用有机锡氢化物试剂和自由基引发剂为佳。有机锡氢化物试剂包括但不限于氢化三正丁基锡之类烷基锡氢化物或氢化二苯基锡或氢化三苯基锡之类芳基锡氢化物。自由基引发剂包括但不限于2，2′-偶氮二异丁氰(AIBN)或过氧化苯甲酰或过氧化三月桂酰之类过氧化物。所述溶剂包括，但不限于，诸如乙酸乙酯、乙酸异丙酯或乙酸丙酯的酯类，诸如乙腈或丙腈的腈类，诸如二氯甲烷、氯仿或二氯乙烷的卤代烃类、诸如乙醚、四氢呋喃或叔丁基甲基醚的醚类，诸如己烷或庚烷的烃类，诸如苯或甲苯的芳烃类，或它们的混合物。较佳的溶剂包括芳香烃类(更佳的为甲苯)和卤代烃类(最佳的为二氯甲烷)。脱卤反应的反应温度可在0℃-100℃，最佳为15℃-30℃。反应时间可为1-6小时，最佳为2-4小时；

c)异氰酸盐水解成氨基采用强酸(包括但不限于盐酸、硫酸、氢溴酸或三氟乙酸)，或采用碱(包括但不限于氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸锂、碳酸钠、碳酸钾或其它能在水介质中产生氢氧根离子的碱，如三乙胺或吡啶。合适的水解反应助溶剂包括，但不限于，可与水混溶的腈类如乙腈或丙腈，可与水混溶的醚类如四氢呋喃、二甲氧乙烷或二噁烷，或其它可与水混溶的溶剂，如N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜，或它们的混合物。较佳的溶剂包括可与水混溶的腈类，更佳的为乙腈，以及可与水混溶的醚类，最佳的为四氢呋喃、二甲氧乙烷或二噁烷。水解反应的温度，对于酸催化的水解来说，可从0℃-60℃，最佳为15℃-30℃，对于碱催化的水解来说，可从室温到100℃。酸催化水解的反应时间可从4-72小时，最佳为12-36小时，碱催化水解的反应时间可从32-48小时，最佳为2-12小时。

下面列举非限制性的实施例以说明在甾核的14位上引入氨基的异氰酸盐方法。

实施例1

A.(3β，5β)-3-〔(O-3，4-二-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-14-羟基-卡-20(22)-烯内酯

将毛地黄毒苷(2.0克，0.0026摩尔)溶于无水吡啶(50毫升)。加入乙酐(25毫升)，将溶液加热到80℃，3小时。冷却到室温后，将反应液倾入冰/水(500毫升)，形成琥珀色固体。合并有机层，用饱和碳酸氢钠水溶液(2×100毫升)、饱和氯化钠水溶液(1×100毫升)洗涤，干燥(硫酸镁)，用活性炭处理并过滤。将滤液减压浓缩成固体。用二氯甲烷(2×100ml)抽提混合物。通过与甲苯(2×20毫升)、然后与甲醇(2×20毫升)共沸蒸馏除去痕量吡啶，得到1.8克(74％)1，为白色固体。

B.(3β，5β，14β，17β)-3-〔(O-3，4-二-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-14，21-二羟基-孕-20-酮

将化合物1(0.93克，0.001摩尔)溶于二氯甲烷(100毫升)并冷却至-78℃。用臭氧处理该冷却的溶液8分钟，产生持久的蓝色。这时，臭氧加成不再进行，将反应液再搅拌0.5小时。然后，以中等速度通入氧气气泡15分钟。再通入氮气直至蓝色消失。使反应液达到室温，加入饱和碳酸钾水溶液(50毫升)，将所得的反应液搅拌20小时。两相分离，有机层用水(1×50毫升)、饱和氯化钠水溶液(1×50毫升)洗涤，干燥(硫酸镁)并过滤。滤液减压浓缩，得到白色泡沫状固体。将此固体进行硅胶层析(230-400目)，用97∶3二氯甲烷∶甲醇作为洗脱剂。合并含纯产品的流出分，减压浓缩并真空干燥24小时，得到0.6克(62％)2，为白色固体。NMR和质谱和结构一致。此化合物继续进行下一步。

C.(3β，5β，14β，17β)-3-〔(O-3，4-二-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-14-羟基雄烷-17-羧酸

向化合物2(17克，0.187摩尔)的丙酮(200毫升)溶液中加入碳酸钾(3.88克，0.028摩尔)水(25毫升)溶液，再加入高碘酸钠(12克，0.056摩尔)水(50毫升)溶液。将所得的混合物于室温下搅拌24小时。用水(250毫升)稀释反应液，然后用1N盐酸将其酸化为pH1。溶液酸化后很快用二氯甲烷提取(2×300毫升)。合并有机层，用5％盐酸水溶液(1×200毫升)、水(1×200毫升)洗涤，干燥(硫酸镁)和过滤。滤液减压浓缩得一白色固体。将此固体进行硅胶层析，用97.5∶2.5二氯甲烷∶甲醇为洗脱剂。合并含纯产品的流出分，减压浓缩，得16.2克(97％)3，为一白色固体。此化合物继续进行下一步。

D.(3β，5β，14β，17β)-3-〔(O-3，4-二-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-14-羟基雄烷-17-羧酸甲酯

向化合物3(15克，0.017摩尔)的无水乙腈(100毫升)溶液中加入1，8-二氮杂二环〔5.4.0〕十一碳-7-烯(DBU，2.4毫升，2.89克，0.019摩尔)，再加入碘甲烷(1.18毫升，2.7克，0.019摩尔)。将所得的溶液于室温下搅拌20小时。反应液用水(1升)稀释，并用二氯甲烷(5×200毫升)提取。合并提取液，用饱和氯化钠水溶液(2×200毫升)洗涤，干燥(硫酸镁)并过滤。滤液减压浓缩成一固体。将此固体进行硅胶(230-400目)层析，用99∶1二氯甲烷∶甲醇为洗脱剂。将含纯产品的流出分减压浓缩，得一固体，真空干燥得13.68克(90％)4，为一白色固体。此化合物继续进行下一步。

E.(3β，5β，17β)-3-〔(O-3，4-二-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-雄-14-烯-17-羧酸甲酯

将化合物4(4.02克，0.0044摩尔)溶于无水吡啶(20毫升)，溶液在冰/甲醇浴上冷却至-5℃。经25分钟时间滴加亚硫酰氯(5毫升)的无水吡啶(5毫升)溶液。然后将反应液倾入冰水(400毫升)直至冰熔化(10分钟)。所得的混合物用乙酸乙酯(3×150毫升)提取。合并提取液，依次用1N盐酸(1×100毫升)、水(2×100毫升)、饱和碳酸氢钠水溶液(2×100毫升)、饱和氯化钠水溶液(1×100毫升)洗涤，干燥(硫酸镁)并过滤。滤液减压浓缩成一泡沫状固体。将此固体进行硅胶(230-400目)层析，用30∶70乙酸乙酯∶己烷为洗脱剂。合并含纯产品的流出分，减压浓缩，得得3.26克(83％)5，为一白色固体。此化合物继续进行下一步。

F.(3β，5β，14β，17β)-3-〔(O-3，4-二-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-15-碘-14-异氰酸根雄烷-17-羧酸甲酯

将化合物5(0.27克，0.3毫摩尔)溶于乙酸乙酯(1.35毫升)和乙腈(2.7毫升)，溶液在冰/甲醇浴上冷却至1℃。加入氰酸银(0.054克，0.36毫摩尔)，再滴加碘(0.081克，0.32毫摩尔)在乙酸乙酯(4毫升)中的溶液。加碘完毕后(20分钟)再继续搅拌1.5小时。然后，用乙酸乙酯(20毫升)稀释反应液，经硅藻土过滤，滤液用1％亚硫酸钠水溶液(1×10毫升)洗涤，然后将有机层减压浓缩，得0.32克(99％)6，为一泡沫状固体。此化合物再进行下一步。

G.(3β，5β，14β，17β)-3-〔(O-3，4-二-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-14-异氰酸根-雄烷-17-羧酸甲酯

在用火焰干燥过的仪器中，在氮气氛围下，将6(0.32克，0.3毫摩尔)溶于无水二氯甲烷(10毫升)中。向此溶液中加入催化剂2，2′-偶氮二异丁氰(AIBN，0.003克)。将所得溶液在室温下搅拌1小时，然后减压浓缩成一油状物。将此油状物与己烷一起研磨，得一白色固体。滤集此白色固体，空气干燥，得0.25克(89％)。此化合物继续进行下一步。

H.(3β，5β，14β，17β)-3-〔(O-3，4-二-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-14-氨基雄烷-17-羧酸甲酯

向化合物7(0.3克，0.32毫摩尔)的乙腈(15毫升)溶液中，加入碳酸钾(0.66克，4.8毫摩尔，15当量)水(10毫升)溶液。反应液在回流温度下搅拌4小时。冷却至室温后，将反应液减压浓缩除去乙腈。向留下的水性残留物中加入水(20毫升)，用1N盐酸将混合物酸化为pH1，然后用浓氢氧化铵迅速调至碱性(pH9)。用二氯甲烷(2×30毫升)提取水性混合物，合并有机层并干燥(硫酸镁)和过滤。滤液减压浓缩成固体，此固体真空干燥得0.23克(79％)粗品8。此化合物直接用于下一步。

I.(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-雄烷-17-羧酸甲酯

在用火焰干燥过的仪器中，在氮气氛围下，将化合物8(0.23克，0.3毫摩尔)溶于无水甲醇(9毫升)中。加入甲醇钠(0.063克，1.2毫摩尔，4当量)的无水甲醇(2毫升)溶液。将反应液在室温下搅拌3小时，再减压浓缩反应液，得到白色残渣。将此残渣溶于水(30毫升)并冷却于冰/水浴中。用1N盐酸将溶液酸化为pH1，然后用浓氢氧化铵迅速调至碱性(pH9)。用二氯甲烷(2×30毫升)提取水性混合物，合并有机层并干燥(硫酸镁)和过滤。滤液减压浓缩成固体，此固体经硅胶(230-400目)层析，用二氯甲烷∶含0.5％浓氢氧化铵的甲醇(9∶1)作为洗脱剂。合并含纯产品的流出分，减压浓缩成固体，将此固体真空干燥得终产品(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄烷-17-羧酸甲酯。

实施例2

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄烷-17-羧酸甲酯

A.(3β，5β，17β)-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄-14-烯-17-羧酸甲酯

为制备(3β，5β，17β)-3-〔(O-3，4-二-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-雄-14-烯-17-羧酸甲酯，参考以上之实施例2的制备。

在用火焰干燥过的仪器中，在氮气氛围下，将(3β，5β，17β)-3-〔(O-3，4-二-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-雄-14-烯-17-羧酸甲酯(2.29克，0.0025摩尔)溶于无水甲醇(50毫升)中。加入甲醇钠(0.72克，0.014摩尔)的无水甲醇(10毫升)溶液，将溶液在室温下搅拌3小时。减压浓缩反应液，得一固体。将此固体溶于水(50毫升)。用1N盐酸将溶液酸化为pH1，然后用浓氢氧化铵迅速调至碱性(pH9)。用二氯甲烷(2×50毫升)提取所得的混合物，合并提取物并干燥(硫酸镁)和过滤。滤液减压浓缩成固体，该固体真空干燥得到1.9克(100％)1。NMR和质谱与结构一致。该化合物继续进行下一步。

B.(3β，5β，17β)-3-〔(O-2，6-二脱氧-4-O-〔1-(1-甲基-2-氧乙基)-3-氧丙基〕-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄-14-烯-17-羧酸甲酯

向化合物1(1.9克，0.0012摩尔)的95∶5乙醇∶水(100毫升)溶液中加入高碘酸钠(1.9克，0.009摩尔)的水溶液(20毫升)。将反应液于室温下搅拌20小时。将反应液过滤，滤液减压浓缩得一固体。将此固体溶于水(100毫升)，用二氯甲烷(3×50毫升)提取。合并提取液，用1％硫酸氢钠水溶液(1×50毫升)、水(2×50毫升)洗涤，干燥(硫酸镁)并过滤。滤液减压浓缩成泡沫状白色固体，此固体真空干燥得1.81克(96％)2。此化合物继续进行下一步。

C.(3β，5β，17β)-3-〔(O-2，6-二脱氧-4-O-〔3-羟丙基-1-(2-羟基-1-甲基乙氧基)〕-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄-14-烯-17-羧酸甲酯-向化合物2(1.81克，0.0025摩尔)的95∶5甲醇∶水(100毫升)溶液中加入硼氢化钠(0.94克，0.025摩尔)。将溶液于室温下搅拌1小时。滴加乙酸到反应液中，使pH为7。将反应液减压浓缩得一固体。将此固体溶于水(30毫升)，用二氯甲烷(3×25毫升)提取，干燥(硫酸镁)并过滤。滤液减压浓缩成固体，此固体真空干燥得1.31克(72％)3。此化合物继续进行下一步。

D.(3β，5β，17β)-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄-14-烯-17-羧酸甲酯

向化合物3(1.3克，0.0018摩尔)的甲醇(100毫升)溶液中加入0.05N盐酸(22.1毫升)。将反应液于室温下搅拌3小时。然后用饱和碳酸氢钠水溶液中和反应液，减压浓缩得一固体。将此固体溶于水(50毫升)，用二氯甲烷(3×25毫升)提取，合并提取液并干燥(硫酸镁)和过滤。滤液减压浓缩成泡沫状固体，此固体真空干燥得1.0克(94％)4。此化合物继续进行下一步。

E.(3β，5β，17β)-3-〔(O-3，4-二-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄-14-烯-17-羧酸甲酯

将化合物4(1.0g，0.0017摩尔)溶于无水吡啶(15毫升)中。加入乙酐(15毫升)，将反应液在80℃搅拌3小时。然后将反应液逐渐冷却至室温并搅拌18小时。将反应液倾入水(200毫升)中并搅拌10分钟。用二氯甲烷(2×75毫升)提取水混合物。合并提取物，用饱和碳酸氢钠水溶液(3×100毫升)、水(1×100毫升)洗涤，干燥(硫酸镁)和过滤。滤液减压浓缩成泡沫状固体，此固体真空干燥得0.78克(64％)5。此化合物继续进行下一步。

F.(3β，5β，14β，17β)-3-〔(O-3，4-二-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-15-碘-14-异氰酸根合-雄烷-17-羧酸甲酯

将化合物5(0.76克，0.001摩尔)溶于乙酸乙酯(4.5毫升)和乙腈(9毫升)，将溶液在冰/甲醇浴上冷却至1℃。加入氰酸银(0.19克，0.0013摩尔)，再滴加碘(0.30克，0.0012摩尔)的乙酸乙酯(13.5毫升)溶液。加碘完毕(20分钟)后再继续搅拌1小时。然后，用乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，经硅藻土过滤，滤液。用1％亚硫酸钠水溶液(1×50毫升)洗涤，然后将有机层减压浓缩，得0.9克(96％)6，为一泡沫状固体。此化合物再进行下一步。

G.(3β，5β，14β，17β)-3-〔(O-3，4-二-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-14-异氰酸根-雄烷-17-羧酸甲酯

在用火焰干燥过的仪器中，在氮气氛围下，将6(0.9克，0.001摩尔)溶于无水二氯甲烷(18毫升)中。向此溶液中加入催化剂2，2′-偶氮二异丁氰(AIBN，0.001克)，再加入三丁基氢化锡(0.3毫升，0.32克，0.001摩尔)。将所得溶液在室温下搅拌3小时，然后减压浓缩成一油状物。将此油状物与己烷一起研磨，得一白色固体。滤集此白色固体，空气干燥，得0.65克(84％)7。此化合物继续进行下一步。

H.(3β，5β，14β，17β)-3-〔(O-3，4-二-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-3-O-乙酰基-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-14-氨基-雄烷-17-羧酸甲酯

向化合物7(0.65克，0.00085摩尔)的乙腈(25毫升)悬浮液中，加入碳酸钾(1.8克，0.013摩尔，15当量)水(10毫升)溶液。反应液在回流温度下搅拌3小时。冷却至室温后，将反应液减压浓缩除去乙腈。向留下的水性残留物中加入水(10毫升)，用1N盐酸将混合物酸化为pH1，然后用浓氢氧化铵迅速调至碱性(pH9)。用二氯甲烷(2×50毫升)提取水混合物，合并有机层并干燥(硫酸镁)和过滤。滤液减压浓缩成固体，此固体真空干燥得0.6克(96％)粗品8。此化合物直接用于下一步。

I.(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-雄烷-17-羧酸甲酯

在火焰干燥过的仪器中，在氮气氛围下，将化合物8(0.60克，0.0082摩尔)溶于无水甲醇(25亳升)中。加入甲醇钠(0.35克，0.007摩尔)的无水甲醇(10毫升)溶液。将反应液在室温下搅拌1小时，再减压浓缩反应液，得到白色残渣。将此残渣溶于水(50毫升)并冷却于冰/水浴中。用1N盐酸将溶液酸化为pH1，然后用浓氢氧化铵迅速调至碱性(pH9)。用二氯甲烷(3×25毫升)提取水性混合物，合并提取物并干燥(硫酸镁)和过滤。滤液减压浓缩成固体，此固体经硅胶(230-400目)层析，用二氯甲烷∶含0.5％浓氢氧化铵的甲醇(9∶1)作为洗脱剂。合并含纯产品的流出分，减压浓缩成固体，将此固体真空干燥得终产品(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄烷-17-羧酸甲酯。

实施例3

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-羟基-雄烷-17-羧酸甲酯

A.(3β，5β，14β，17β)-3-乙酸基-15-碘-14-异氰酸根-雄烷-17-羧酸甲酯

(3β，5β，14β，17β)-3-乙酸基-雄-14-烯-17-羧酸甲酯的制备在U.S.4,855,280；U.S.4,584,289；U.S.4,325,879中有描述，现结合于此作为参考。

将(3β，5β，17β)-3-乙酸基-雄-14-烯-17-羧酸甲酯(50克，0.134摩尔)溶于乙酸乙酯(160毫升)和乙腈(320毫升)，将溶液在冰/甲醇浴上冷却至1℃。加入氰酸银(23.7克，0.158摩尔)，再滴加碘(37.2克，0.147摩尔)的乙酸乙酯(480毫升)溶液。加碘完毕(20分钟)后再将反应液继续搅拌1小时。然后，将反应液过滤，滤液用1％亚硫酸钠水溶液(1×500毫升)洗涤，然后将有机层减压浓缩，得70克(96％)1，为一油状物。此化合物再进行下一步。

B.(3β，5β，14β，17β)-3-乙酸基-14-异氰酸根合-雄烷-17-羧酸甲酯

将化合物2(65克，0.121摩尔)溶于二氯甲烷(325毫升)中。向此溶液中加入催化剂2，2′-偶氮二异丁氰(AIBN，0.005克)，再加入三丁基氢化锡(33.3毫升，36克，0.126摩尔)。将所得溶液在29℃下搅拌2.5小时，然后减压浓缩成一油状物。将此油状物与己烷一起研磨，得一白色固体。滤集此白色固体，空气干燥，得38.3克(77％)。此化合物继续进行下一步。

C.(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-羟基-雄烷-17-羧酸甲酯

将化合物2与乙腈(247毫升)和浓盐酸(133毫升)合并在一起并搅拌。3小时后，加水(133毫升)并使反应液在室温下继续搅拌48小时。然后将反应液冷却于冰/水浴中，滴加浓氢氧化铵使溶液为碱性(pH9)而反应液温度维持于25℃以下。然后，用二氯甲烷提取所得的混合物(4×200毫升)，合并提取液并有水洗涤(1×250毫升)，干燥(硫酸镁)，减压浓缩，得终产物(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-羟基-雄烷-17-羧酸甲酯。

进一步可将实施例1、2和3中所述按碘代异氰酸盐化学所制得的17位羧酸酯化合物转化为实施例4、5、6和7所述的17位甲酰胺衍生物。

实施例4

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-N-甲基-雄烷-17-甲酰胺

终产物

在不锈钢高压气体储罐中，将A，(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-雄烷-17-羧酸甲酯，(0.61克，0.001摩尔)溶于甲醇(15毫升)中，将溶液冷却于冰/水浴中。然后通入甲胺气体以饱和该溶液(15分钟)，密封反应罐，90℃加热10天。冷却至室温后，打开反应罐，将内容物减压浓缩成固体。此固体经硅胶层析提纯，用80∶20二氯甲烷∶含1％浓氢氧化铵的甲醇作为洗脱剂。合并含纯产品的流出分，减压浓缩并真空干燥得纯产物。

实施例5

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-雄烷-17-甲酰胺

终产物

在不锈钢高压气体储罐中，将A，(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-雄烷-17-羧酸甲酯(0.61克，0.001摩尔)溶于甲醇(15毫升)中，将溶液冷却于冰/水浴中。然后通入氨气以饱和该溶液(15分钟)，密封反应罐，90℃加热10天。冷却至室温后，打开反应罐，将内容物减压浓缩成固体。此固体经硅胶层析提纯，用75∶25二氯甲烷∶含1％浓氢氧化铵的甲醇作为洗脱剂。合并含纯产品的流分，减压浓缩并真空干燥得纯的终产物。

实施例6

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-雄烷-17-甲酰胺

终产物

在不锈钢高压气体储罐中，加入298毫克(0.0004摩尔)1，(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-雄烷-17-羧酸甲酯和10毫升MeOH，然后，在冰/水浴冷却下通入NH₃气体直至饱和(15分钟)。将此澄清的溶液密封于高压气体储罐中，90℃加热10天。根据TLC结果，若反应完成，则在旋转蒸发器上减压浓缩此淡黄色反应混合物，得一米色固体残渣。用快速色谱法提纯该物质，用25％MeOH/CH₂Cl₂+NH₄OH作为移动相。收集各流出分，用TLC检测。根据TLC，合并在TLC上显示R_f0.23斑点的流出分(43-81)，在旋转蒸发器上减压浓缩，得一米色固体。将此固体55℃真空干燥过夜，得到纯的终产物。

实施例7

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-N-甲基雄烷-17-甲酰胺

终产物

在不锈钢高压气体储罐中，加入298毫克(0.0004摩尔)1，(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-雄烷-17-羧酸甲酯和10毫升MeOH，然后，在冰/水浴冷却下通入甲胺气泡直至饱和(15分钟)。将此澄清的溶液密封于高压气体储罐中，90℃加热10天。

从烘箱中取出高压罐，冷却，打开并用TLC检测。如果TLC显示无起始物质，则在旋转蒸发器上减压浓缩此淡黄色反应混合物，得一半固体残渣。用快速色谱法提纯该半固体残渣，用20％ MeOH/CH₂Cl₂+NH₄OH作为移动相(初始比：20/80/0.9；最终比：20/80/1.8)。根据TLC检测结果，合并在TLC上显示R_f0.43斑点的流出分(20％ MeOH/CH₂Cl₂+NH₄OH)，在旋转蒸发器上减压浓缩，得一米色固体。将此固体与冷乙醚一起研磨，过滤收集得到米色固体终产物，将其55℃真空干燥48小时，得到纯的终产物。

本发明的新化合物还可按现有技术U.S.4,325,879；U.S.4,552,868；U.S.4,552,868；U.S.4,584,289；和U.S.4,885,280所描述的化学方法进行制备，在此均引作参考。下面的非限制性实施例列举了本发明的化合物可如何按现有技术进行制备。

实施例8

终产物

向1.125克(2.1毫摩尔)A，(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(6-脱氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-α-L-吡喃甘露糖基〕氧〕雄烷-17-羧酸甲酯(按U.S.4,885,280所述方法制备的，结合于此作为参考)和1.250克(2.1毫摩尔)2，6-二脱氧-1，3，4-D-(4-硝基苯甲酰基)-D-己吡喃核糖苷在60毫升CH₂Cl₂中的混合物中，加入3.0克分子筛，4埃，8-12目。将混合物室温搅拌15分钟，然后冷却在干冰/丙酮浴中；再滴加2.0毫升三氟甲磺酸三甲基甲硅烷酯(Lancaster公司)的10.0毫升CH₂Cl₂溶液。混合物在约-80℃搅拌6小时后，加8.0毫升三乙胺于冷混合物中，继续搅拌10分钟。将混合物放在冰箱中缓温过夜。

真空除去溶剂，残渣作硅胶层析。将沾污的物质用CH₂Cl₂洗脱，然后用EtOAc/CH₂Cl₂(1∶4)洗脱需要的流分，得到1.98克。

在400毫克(0.415毫摩尔)上述对硝基苯甲酰化双糖的1.0毫升无水甲醇(Aldrich，无水)溶液中，经注射器加入NaOCH₃的无水甲醇(Alreich)液7.2毫升，0.1217mM。混合物于0℃搅拌6小时，所得产物从反应混合物中沉淀出来，得到终产物(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-6-脱氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-α-L-吡喃甘露糖基〕氧〕雄烷-17-羧酸甲酯。

实施例9

14β-氨基-3β-〔α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯

将260毫克14β-叠氮基-3β-〔2′，3′-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯(按U.S.4,885,280和U.S.4,325,879所述方法制备，结合于此作为参考)溶于12毫升乙腈，在分子筛(130毫克，3埃)和325毫克三-O-乙酰基-鼠李糖基溴存在下，将溶液搅拌15分钟。加入232毫克氰化汞，将反应混合物在室温下搅拌3小时。

加入饱和碳酸氢钠溶液后，过滤，用甲苯提取，在压力(500mb)下经硅胶柱层析提纯，用乙酸乙酯/己烷混合物(1∶2)洗脱，得14β-叠氮基-3β-〔三-2″，3″，4″-O-乙酰基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-(1→4)-2′，3′-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯。

此二-鼠李糖基-14-叠氮基衍生物可在乙醚/石油醚混合物中结晶。

将含250毫克上述二-鼠李糖基-14-叠氮基衍生物的8.5毫升用氩脱氧的无水乙醇、99.5毫克碲粉和74毫克硼氢化钠的混合物在室温下搅拌24小时。

在硅藻土上过滤后，蒸发，用乙酸乙酯提取并用水洗，残渣在压力下在硅胶柱上层析提纯，用氯仿/乙醇/氢氧化铵(89∶10∶1)混合物洗脱，得到14β-氨基-3β-〔α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯。

实施例10

14β-氨基-3β-〔三-2″，3″，4″-O-乙酰基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯

将5.8克如实施例8所示得到的三-羟基衍生物溶于37毫升二氯甲烷，溶液冷却于冰浴上。将乙酸酐(2.4毫升)和二甲基氨基吡啶(313毫克)加到溶液中，将反应混合物于室温搅拌过夜。

将氢氧化钠水溶液倾入反应混合物中，继续搅拌5分钟，接着用二氯乙烷提取。

有机层用H₂O+NH₄OH洗涤，用硫酸钠干燥，并蒸发至干。将这样得到的粗三乙酰化产物用快速硅胶柱层析提纯，用二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵混合物(97∶2.7∶0.27)洗脱，得到14β-氨基-3β-〔三-2″，3″，4″-O-乙酰基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯。

实施例11

14β-氨基-3β-〔2″，3″-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯

向如实施例8所述获得的11.2克三-羟基衍生物的77毫升丙酮溶液中，加入97毫升二甲氧基丙烷和3.5克对甲苯磺酸·H₂O。将反应混合物室温搅拌1小时，将氢氧化钠水溶液在搅拌下经数分钟倾入反应混合物中，然后用二氯甲烷/甲醇混合物提取。有机层用H₂O+NH₄OH洗涤，用硫酸钠干燥，并蒸发至干。将这样得到的粗产物用异丙醚结晶提纯，得到14β-氨基-3β-〔2″，3″-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯。

实施例12

14β-氨基-3β-〔α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯

在0.2毫升三氟乙酸和一些水(1％)存在下，将如实施例8所述得到的三-羟基衍生物(103毫克)溶于2毫升氯仿中。反应在室温下进行1小时。

用二氯甲烷/甲醇混合物(85∶15)提取后，用饱和碳酸氢盐溶液、水洗涤，蒸发至干，将残渣用加压硅胶柱层析提纯，用二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵混合物(85∶15∶1)洗脱，得到14β-氨基-3β-〔α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯。

药理活性评价

有人假设，强心甾类化合物的正性变力性效应是由于对心肌细胞肌浆网Na⁺、K⁺泵的作用。具体地说，强心甾类抑制Na⁺、K⁺-激活的三磷酸腺苷酶，继而导致细胞内Ca⁺⁺的增加。从而，有更多的Ca⁺⁺激活收缩机制。参见Goodman and Gilman，The Pharmacolog-ical Nasis of Therapeutics，Chapter 34(8th，Ed.，1990)。

在离体心脏组织和整体动物模型上对一新的化学实体的正性变力性活性进行了评价。离体组织提供化合物变力性潜能的直接测量，因为系统实际上不受代谢、神经激素的吸收的干扰，这些因素可影响组织反应。体内试验则提供考虑在离体组织试验中所缺乏的生理参数的一种评价。

在变力性活性试验中，利用从豚鼠心脏取下的乳头肌条。虽然乳头肌与瓣膜功能更为有关，但这种肌肉所显示的基本收缩反应却与心室肌相似。这种试验是将从豚鼠心脏切下的乳头肌片段悬浮于器官浴中，该器官浴给组织提供控制的温度、含细胞功能所需底物的水环境。将压力传感器接在肌条游离端使肌肉悬于固定基点和传感器中间，施加电刺激，即可测定对各种浓度受试化合物的缩短或收缩反应。在典型的条件下，正性变力性定义为由未知药物引起的收缩力的增加，数据通常表示了引起收缩力从基线增加50％所需的药物浓度(EC₅₀)。

体内正性变力性评价按两种方法进行。第一种是和在体外方法中所述很相似的测定，即将一种测量器缝合到心脏外面以测定收缩力。第二种方案是将压力传感器插入左心室以检测压力变化。心肌收缩力与左心室内压力增长速率相关，表示为+dp/dt。这两种情况下，按获得一定水平的活性，如收缩力或+dp/dt增加30％，所需的药物量(即ED₃₀)报告数据，并表示为mg药物/动物的kg体重。

药物组合物

本发明的新颖的含寡糖14-氨基甾类化合物可从各种途径投予人或其他哺乳动物，包括但不限于口服剂型和注射(静脉、肌肉、腹腔和皮下)。本领域技术人员利用如下所述赋形剂可容易地将本发明的新颖的含寡糖的14-氨基甾类化合物制成制剂。考虑到病人易接受，通常最好的是口服剂型。

本说明书所用的术语“药物组合物”指安全有效量的含寡糖的14-氨基甾类化合物活性成分或其混合物和药学上可接受的赋形剂的组合。

本说明书所用的术语“安全有效量”指在正确的医学判断范围内，化合物或组合物的量大到足以显著改善症状和/或治疗的病情，但小到足以避免严重的副反应(合理的利益/危险比)。用于本发明方法的药物组合物中所用的活性成分的安全有效量根据接受治疗的特定病情，患者的年龄、生理状况、病情的严重程度、疗程、合并治疗和种类、采用的特定活性成分、特定的药学上可接受的赋形剂等因素，可在医生的知识、技能的范围内进行变动。

本说明书所用的术语“药学上可接受的赋形剂”包括本领域技术人员知道的任何生理学上惰性的、药理学上无活性的物质，它与选用的特定含寡糖的14-氨基甾类化合物的理化性质相适合。药学上可接受的赋形剂包括，但不限于，聚合物、树脂、增塑剂、填充剂、粘合剂、润滑剂、助流剂、崩解剂、溶剂、助溶剂、缓冲系统、表面活性剂、防腐剂、增甜剂、调味剂、药品级染料或色素及粘滞剂。

本说明书所用的术语“口服剂型”指经个体的口将所述组合物输送到个体的胃肠道而全身给药的任何药物组合物。为本发明的目的，给药形式可以是片剂，包衣或不包衣的；溶液剂；混悬剂；或胶囊，包衣或不包衣的。

本说明书所用的术语“注射剂”指为了用静脉内、肌内、腹腔内或皮下注射将溶液剂或乳剂输送到个体循环中而通过针刺所述个体的皮肤输送含活性成分的溶液剂或乳剂，给人或其它哺乳动物全身给药的任何药物组合物。

本领域技术人员可通过控制以下任何一个或几个因素，满意地控制全身给药的速率：

(a)活性成分本身；

(b)药学上可接受的赋形剂；只要其变异体不干扰选定的活性成分和活性；

(c)赋形剂的类型；所述赋形剂所伴随的合乎需要的厚度和渗透性(膨胀性)；

(d)赋形剂本身和/或在赋形剂中时间依赖性的情况；

(e)颗粒性活性成分的颗粒大小；

(f)赋形剂的pH依赖性情况。

如上文所述，药学上可接受的赋形剂包括，但不限于，树脂、填充剂、粘合剂、润滑剂、溶剂、助流剂、崩解剂、助溶剂、表面活性剂、防腐剂、增甜剂、调味剂、缓冲系统、药品级染料或色素及粘滞剂。

较佳的溶剂为水。

此处有用的赋形剂中的调味剂包括Remington′s Pharmaceuti-cal Sciences，18th Edition，Mack Publishing Company，1990，pp.1288-1300中所述的那些，结合于本文中作为参考。此处适用的药物组合物通常含0-2％调味剂。

此处有用的赋形剂中的染料或色素包括Handbook of Pharma-ceutical Excipients，pp.81-90，1986 by the American Pharma-ceutical Association & the Pharmaceutical Soeiety of Great Britain中所述的那些，结合于本文中作为参考。此处适用的药物组合物通常含0-2％染料或色素。

较佳的助溶剂包括，但不限于，乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇。本发明的药物组合物包括0-50％助溶剂。

较佳的缓冲系统包括，但不限于，乙酸、硼酸、碳酸、磷酸、琥珀酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、乙酸、苯甲酸、乳酸、甘油酸、葡糖酸、戊二酸和谷氨酸及它们的钠、钾和铵盐。特佳的为磷酸、酒石酸、柠檬酸和乙酸及它们的盐。本发明的药物组合物通常包含0-5％缓冲系统。

较佳的表面活性剂包括，但不限于，聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯一烷基醚、蔗糖单酯和羊毛脂醇酯和醚类、硫酸烷酯盐、脂肪酸钠、钾和铵盐。本发明的药物组合物包括0-2％表面活性剂。

较佳的防腐剂包括，但不限于，苯酚、对羟基苯甲酸烷酯、O-苯基苯酚、苯甲酸及其盐、硼酸及其盐、山梨酸及其盐、氯代丁醇、苄醇、乙基汞硫代水杨酸钠、乙酸苯汞和硝酸苯汞、硝甲酚汞、氯化烷基苄基二甲铵、氯化十六烷基吡啶鎓、羟苯甲酸甲酯和羟苯甲酸丙酯。特佳的是苯甲酸盐、氯化十六烷基吡啶鎓、羟苯甲酸甲酯和羟苯甲酸丙酯。本发明的组合物一般包含0-2％防腐剂。

较佳的增甜剂包括，但不限于，蔗糖、葡萄糖、糖精、山梨醇、甘露醇和天冬酰苯丙氨酸甲酯。特佳的为蔗糖和糖精。本发明的药物组合物包含0-5％增甜剂。

较佳的粘滞剂包括，但不限于，甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、藻酸钠、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、金合欢、瓜耳胶、黄原胶和黄蓍胶。特佳的为甲基纤维素、卡波姆、黄原胶、瓜耳胶、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠，以及硅酸镁铝。本发明的组合物包含0-5％粘滞剂。

较佳的填充剂包括，但不限于，乳糖、甘露糖、山梨糖、三价磷酸钙、二价磷酸钙、可压缩糖、淀糖、硫酸钙、右旋糖和微晶纤维素。本发明的组合物包含0-75％填充剂。

较佳的润滑剂包括，但不限于，硬脂酸镁、硬脂酸和滑石。本发明的药物组合物包含0.5-2％润滑剂。

较佳的助流剂包括，但不限于，滑石和胶体二氧化硅。本发明的组合物包含1-5％助流剂。

较佳的崩解剂包括，但不限于，淀粉、淀粉羟基乙酸钠、交联聚乙烯吡咯烷酮(Crospovidone)、交联羧甲醚纤维素钠(croscarmelosesodium)和微晶纤维素。本发明的药物组合物包含4-15％崩解剂。

较佳的粘合剂包括，但不限于，金合欢、黄蓍胶、预胶凝淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素，糖溶液，如蔗糖和山梨醇，及乙基纤维素。本发明组合物包含1-10％粘合剂。

本发明化合物可构成本发明组合物重量的约0.1％至约99.9％，较佳的是本发明化合物构成本发明组合物重量的约20％至约80％。

本发明的药物组合物包含：15-95％含寡糖的14-氨基甾类化合物活性成分或其混合物；0-2％调味剂；0-50％助溶剂；0-5％缓冲系统；0-2％表面活性剂；0-2％防腐剂；0-5％增粘剂；0-5％粘滞剂；0-75％填充剂；0.5-2％润滑剂；1-5％助流剂；4-155崩解剂和1-10％粘合剂。

此处描述的合适的药物组合物。在本领域技术人员的能力之内可改变此处描述的非限制性实施例以获得宽范围的药物组合物。

与本发明的含寡糖的14-氨基甾类化合物的药学上可接受的赋形剂的选择基本上根据化合物给药方式而定。如果化合物是注射的，则较佳药物载体为灭菌生理盐水，其pH已调节为约7.4。局部施用所用的药学上可接受的载体包括适用于乳油、凝胶、胶带等的载体。

本发明的含寡糖的14-氨基甾类化合物的较佳给药方式为口服。因此，较佳单位剂量形式(剂型)为包含安全有效量的含寡糖的14-氨基甾类化合物的片剂、胶囊剂等。适于制备口服给药剂型的药学上可接受的载体在本领域是熟知的。它们的选择依赖于第二考虑，如味道、成本和货架稳定性，它们对于本发明的目的来说不是很严格，本领域技术人员可并无困难地进行。

可以使用各种口服剂型，包括固体形式，如片剂、胶囊剂、颗粒剂和松粉剂。这些口服剂型包含安全有效量，较佳为0.25-5.0mg，含寡糖的14-氨基甾类化合物。更佳的是这些口服剂型包含0.5-1mg含寡糖的14-氨基甾类化合物。片剂可以压制，片剂研制，包肠衣、包糖衣、薄膜包衣或多层包衣，含合适的粘合剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂、着色剂、调味剂、助流剂和熔融剂。液体口服剂型包括水溶液，乳剂，混悬液，从非泡腾颗粒重建的溶液和/或混悬液，及从含合适的溶剂、防腐剂、乳化剂、混悬剂、稀释剂、增甜剂、熔融剂、着色剂和调味剂的泡腾颗粒重建的泡腾制剂。较佳的口服给药用载体包括明胶、丙二醇、棉子油和芝麻油。

本发明的组合物也可局部给予受试者，即通过直接放在或涂布在受试者皮肤或上皮组织上而给药。这样的组合物包括，例如，洗液、乳油、溶液、凝胶和固体。这些局部用组合物包含安全有效量，较佳为约0.5-2.0mg含寡糖的14-氨基甾类化合物。这些组合物更佳地包含1.0mg含寡糖的14-氨基甾类化合物。局部给药的合适载体较好为以连续薄膜保留在皮肤上，并能抵抗因出汗或浸水而脱落，一般而言，载体的本质是有机物质，其中能分散或溶解含寡糖的14-氨基甾类化合物。载体可包括药学上可接受的润滑剂、乳化剂、增稠剂和溶剂。

本发明的组合物还可经吸入途径给药。这种组合物在包含溶剂(如水或1，2-乙二醇)、防腐剂(如羟苯甲酸甲酯或羟苯甲酸乙酯)和气雾基质(如氮气或二氧化碳)的基质中制成。

此外，本发明的组合物可经硅氧烷弹性体、乙烯乙酸乙烯酯共聚物或乳酸-乙醇酸共聚物形成的皮下移植物给药。

为了阐述如何制备含本发明的新颖化合物的药物组合物，提供如下非限制性药物组合物。

药物组合物实施例

实施例1

含(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-N-甲基雄烷-17-甲酰胺的快释口服剂型(片剂)具有如组成：

活性成分量

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基- 1.0mg

3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核

糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-

2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡

喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧

-β-D-核糖-己吡喃糖基)

氧〕-N-甲基雄烷-17-甲酰胺

赋形剂

微晶纤维素 28.5mg

乳糖(水合) 67.2mg

交联聚乙烯基吡咯烷酮 3.0mg

硬脂酸镁 0.3mg

制备说明(供制10,000片)

(1)在Patterson-Kelley(PK)或其他合适的混合器中，将10.0g药物、285.0g微晶纤维素、672.0g乳糖和30.0g交联聚乙烯基吡咯烷酮混合，

(2)在PK或合适的混合器中，将上述混合物与3.0g硬脂酸镁混合，

(3)将上述最终混合物在合适的压片机上压成100.0mg的片剂。

实施例2

含(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-6-脱氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-α-L-吡喃甘露糖基〕氧〕雄烷-17-羧酸甲酯适用于静脉(i.v.)注射的非胃肠道剂型具有如下组成：

活性成分量

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基- 1.0mg

3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核

糖-己吡喃糖基-(1→4)-6-

脱氧-2，3-O-(1-甲基亚乙

基)-α-L-吡喃甘露糖基〕

氧〕雄烷-17-羧酸甲酯

赋形剂

甘露醇 200mg

柠檬酸/柠檬酸钠足以使

pH调节

至5.5-

6.5的量

制备说明(供制1000管(瓶))

(1)将1.0g药物，200.0g甘露醇和足量柠檬酸钠和柠檬酸溶于2200.0ml注射用灭菌去离子水，

(2)上述溶液经0.22μ灭菌滤膜过滤，

(3)将上述灭菌溶液2.2ml注入I型玻璃管(瓶)，然后在合适的冷冻干燥器中冷却干燥，

(4)冷却干燥后，用溴丁基或其它合适的塞子塞住管(瓶)并密封。临用时用2.0ml灭菌注射用水重配冻干产品。

实施例3

含(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄烷-17-甲酰胺的缓释口服剂型(片剂)具有如下组成：

活性成分量

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基- 5.0mg

3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核

糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-

2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡

喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧

-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕

雄烷-17-甲酰胺

赋形剂

羟丙基甲基纤维素 120.0mg

乳糖(水合) 120.0mg

硬脂酸镁 12.0mg

胶体二氧化硅 4.0mg

制备说明(供制10,000片)

(1)在双套Patterson-Kelley或合适的混合器中，紧密地混合50.0g药物、1.2kg羟丙基甲基纤维素和1.2kg乳糖，

(2)向上述混合物中加入120g硬脂酸镁和40g胶体二氧化硅，在一混合器中将其轻轻混合，

(3)在合适的压片机上将上述混合物压成重261.0mg的片剂。

其它实施例

除了上述三个实施例外，将药物活性成分配制成很多不同的剂型：

1)含溶剂(如水、乙二醇类)、防腐剂(羟基甲酸甲酯或丙酯)和气雾剂基质(氮气、二氧化碳)或其它合适的赋形剂的药物气溶胶，

2)含可可油或聚乙二醇的直肠栓剂，

3)含硅氧烷弹性体、乙烯乙酸乙烯酯共聚物或乳酸-乙醇酸共聚物和水凝胶或其它合适的聚合物的皮下移植物，

4)市售可移植装置，

5)借助或不借助离子电渗疗法转运药物的在乙烯乙酸乙烯酯共聚物膜上或其它合适的成分上的含硅氧烷液的经皮系统，

6)含水胶体聚合物(羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、聚乙烯基吡咯烷酮)和其它合适的聚合物的颊粘膜贴片。

治疗方法

本说明书所用的术语“充血性心力衰竭”(“CHF”)指一种进行性疾病，其血液动力学能力及心脏本身的结构完整进行性地、不可逆地遭致损害。CHF的进程按患者症状，根据纽约心脏协会(NYHA)的功能分类可分为四种。

纽约心脏协会功能分级

分级

I.患者有心脏病，但不导致对体力活动的限制。正常体力活动不引起过度疲劳、心悸、呼吸困难或心绞痛。

II.患者的心脏病导致体力活动轻度受限。休息时舒服，正常体力活动导致疲劳、心悸、呼吸困难或心绞痛。

III.患者的心脏病导致体力活动明显受限。休息时舒服，低于正常的体力活动就引起疲劳、心悸、呼吸困难或心绞痛。

IV.患者的心脏病导致不能无不舒服地进行任何体力活动。即使休息时也存在心功能不全或心绞痛症状。进行任何体力活动时，不适加剧。

NYHA第III、IV类也被归属于明显的充血性心力衰竭，常通过给予显示正性变力性效应而增加心收缩力的化合物来进行治疗。增加心收缩力的参比化合物为口服地高辛。通过给予强心药增加CO以满足机体代谢需要的明显CHF的症状治疗对CHF患者可改善其生命的质量，因为心脏可较好地供应机体的代谢需要。但常识表明，强心药(如洋地黄)可能增加死亡率，因为变力性作用对心脏来说产生了额外的工作负荷。此外，洋地黄的治疗/毒性剂量比窄，在早于NYHA功能分类III类时使用洋地黄可能不是慎重的。

此外，联吡啶强心药米力农已证明会加重室性心律不齐，可能增加死亡率。见DiBianco，R.，et al.“A Comparison of Oral Milri-none，Digoxinm，and Their Combination in the Treatment of Pa-tients with Chronic Heart Failure”，N.Engl.J.Med.320：677(1989)。

本说明书所用的术语“血液动力学”指心脏的力学能力。心力衰竭的初始血液动力学意义是搏出量减少，这是每次心脏搏动射血量的量度。然后，心脏代偿性增加CO以维持生命器官的血流。当心力衰竭加剧时，心脏内灌注压及肺和静脉压力升高。心脏日益不能提供所需的CO。

本说明书所用的术语“结构损害”指CHF患者心脏的微观和宏观的变化。在微观水平，结构上出现如下变化：心脏肥大早期的形态特征是肌原纤维体积增大，以及线粒体和核扩大。肌细胞大于正常细胞，但细胞组织大量保持。肥大再发展时，特殊细胞器如线粒体的大小或数目大大增加，以及细胞局部区域新的收缩单元不规则增加，导致细胞组织和外形微细的异常。邻近细胞在其扩大程度上可有变化。

长期肥大的细胞在细胞组织上呈现更明显的紊乱，例如显著扩大的核和高度分成小叶的膜，它们取代了邻近的肌原纤维，引起正常Z线记录受损。早期线粒体的大量增加被肌原纤维体积优势所替代。肥大后期的特征是细胞死亡，失去收缩单元和明显的Z线受损，肌节的正常平行排列严重破坏、T管膨胀及弯曲增加，收缩单元被纤维化组织替代。见Braunwald，Heart Disease：A Textbook of Cardio-vascular Medicine，Vol.1(3rd ed.1988)。这些微观的变化在宏观上表现为心脏肥大或心脏扩大。在患者经历每一NYHA功能分类期过程中，由于产生收缩单元缺失和纤维沉积的微观变化，肥大的心脏效能变小，患者的临床症状恶化。

本发明的化合物增加心脏收缩力。剂量范围由床位医生根据给药方式、CHF的严重程度和疗程确定，可在0.001-5mg/kg/天之间。

为了阐述这些新颖的含寡糖的14-氨基甾类化合物对于治疗CHF的特殊应用，给出下面的非限制性临床实例。

临床实例

实例1

一65岁肥胖白人女性患者，有20年非胰岛素依赖性糖尿病和高血压史，两年前心肌梗塞。在急性低位心肌梗塞症状发生12小时后收入冠状监护单元。在其住院过程中并发急性肺水肿，症状为休息时严重呼吸困难、端坐呼吸、颈静脉扩张、双侧罗音至肩胛中部；在CXR上见心脏扩大和双侧浸润。其肺毛细管楔压为35mmHg。用吗啡、氧气、静脉内硝酸甘油、环状利尿剂治疗，及0.25g(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-N-甲基雄烷-17-甲酰胺每4小时静脉给药一次，共三天，然后口服0.25mg(3β，5β，14β，17β)-1 4-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-N-甲基雄烷-17-甲酰胺，每天一次。用这种疗法，她的病情改善，10天后出院，在轻度用力时有呼吸困难(轻度充血性心力衰竭，NYHA II级)，作为门诊病人，服用利尿剂、ACE抑制剂、硝酸甘油，及每天口服0.25mg(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-N-甲基雄烷-17-甲酰胺。

实例2

一44岁黑人男性患者，有长时间未控制的高血压史和一年中度(NYHA III级)充血压心力衰竭史，前两周中数次发作晕厥前兆。穿衣时也有疲劳和呼吸困难。药物包括地高辛(0.25mg/天)、lasix和ACE抑制剂。他有S3奔马律，踝部凹陷性水肿、左心室肥大，ECG上偶见PVCs。在Holter监测上显示频繁的多位点室性异位节律和非持续性的一系列室性心动过速，用放射性核素心室造影术测得射血分数为30％，血清地高辛水平为2.2ng/ml。猜测心律失常和晕厥前兆是洋地黄毒性的结果，故停药。每天以口服剂量0.25mg投予(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-6-脱氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-α-L-吡喃甘露糖基〕氧〕雄烷-17-羧酸甲酯。因为疲劳和呼吸困难持续，故在以后6周中剂量增至每天1mg，不再有晕厥前兆发生，重复Holter，PVs减少，未见非持续性室性心动过速，射血分数增至38％。其自我护理活动如穿衣时的呼吸困难不再出现，能在自己的花园中工作仅偶见轻度呼吸困难(NYHA II级)。一年随访，其病情无变化。

实例3

一24岁以往健康的华人女性患者，有两个月用力时呼吸困难史。无心脏病家史；不吸烟，不饮酒。除了心动过速和最大冲动点侧移外，体力测验正常。ECG上见心率为105和非特异性T波低平，CXR显示心脏扩大。心电图显示两心室扩大，总的运动机能减退，射血分数为40％。瓣膜正常。症状限制性踏旋器运动试验显示无心肌缺血证据。作出自发性扩张性心肌病，NYHA I级，的诊断。起初用ACE抑制剂治疗，产生不可耐受性咳嗽，故停药。以后一个月内以1mg剂量，每天两次口服给予(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄烷-17-甲酰胺，耐运动试验能力改善。射血分数(根据ECG)也增至55％，在踏旋器运动试验中运动时间增加200秒。

实例4

一55岁的白人男性患者，既往有两次心肌梗塞史，其父50岁时猝死，该患者用硝酸异山梨酯和β-阻断剂维持治疗两年，仍有稳定的用力时心绞痛。然而，前一个月，在步行一段楼梯时发生呼吸困难，晚上踝部肿胀，偶有突发性夜间呼吸困难。

心率90，踝部凹陷性水肿+，S3奔马律，心脏扩大和CXR见Kerly B线。诊断为因缺血性心脏病所致轻度(NYHA II级)充血性心力衰竭。通过逐渐减量而停用β-阻断剂，加用ACE抑制剂和利尿剂，但用此新方案，充血性心力衰竭加剧。以4mg剂量，每天一次，给予(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄烷-17-羧酸甲酯。呼吸困难和水肿消失(NYHA I级)，心率降低为75，S3消失，心脏大小减小，CXR充血消失。1个月后进行的踏旋器运动试验，运动时间增加170秒。以后两年内未见进一步恶化。

实例5

一60岁黑人女性患者，有三次心肌梗塞史，导致严重的(NY-HA IV级)充血性心力衰竭，在前六周内入院四次，用最大耐受量(asix、硝酸异山梨酯、地高辛和ACE抑制剂对代偿失调作治疗。其症状包括水肿、休息时呼吸困难、需垫三个枕头的端坐呼吸、明显的疲劳和精神紊乱。决定停用地高辛，用(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄烷-17-羧酸甲酯进行治疗。(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄烷-17-羧酸甲酯的起始剂量为0.5mg，一天一次，口服给药，但经2个月时间递增至2mg，一天三次，以充分地控制症状。2个月末时，她的端坐呼吸、紊乱和水肿消失，进行日常生活的能力改善，例如自己穿衣而无呼吸困难(NYHA III级，中度充血性心力衰竭)。其射血分数也从20％改善为35％。在以后的三个月内保持稳定。

实例6

一个最近(2个月)饮酒节制的60岁白人男性嗜酒者，有30年吸烟史，入院时有三个月进行性运动时用力呼吸困难加重、疲劳、端坐呼吸、水肿和突发性夜间呼吸困难，刷牙时有呼吸困难。体检结果为恶病质男性，有中度痛苦状，呼吸频率30次/分，心率110bpm，血压90/50，S3奔马律，膝部凹陷性水肿++，颈静脉扩张，肝大，腹水，双侧基底部罗音，及心脏扩大。广泛的评价提供如下诊断：慢性酒精中毒性肝炎、慢性阻塞性肺部疾患和因中毒(酒精)性心肌病所致中度(NYHA III级)充血性心力衰竭。开始用氢氯噻嗪、ACE抑制剂和14β-氨基-3β-〔α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯(每天口服剂量0.25mg)进行治疗。患者症状迅速改善，一周后出院。体重减轻20磅后，他能走到邮筒处，仅轻度呼吸困难(NYHA II级)。呼吸频率20，心率90，不再听到S3，水肿和罗音消失。肝大保持不变，但腹水略有减少。射血分数从32％增至45％，心脏大小减小。

实例7

一70岁惯于久坐的白人女性患者，在选择性白内障手术前进行的OXR上发现心脏扩大。患者否认任何胸痛、呼吸困难史或任何高血压、糖尿病或心脏疾病史。其ECG显示非特异性ST-T波改变，标准临床实验室评价为正常。因疲劳而终止踏旋器运动试验，无冠状动脉疾病的证据。ECG显示两心室扩大，瓣膜正常，射血分数为30％。给予患者每天口服0.25mg14β-氨基-3β-〔α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯的预防性疗程，其射血分数增至40％。在五年后进行第二次白内障手术住院时患者无症状。

Claims

1.如下通式所示的含寡糖的14-氨基甾类化合物及其药学上可接受的酸式盐或酯

其中a)R₁为

(i)COOR₅，其中R₅为H；C_1-6烷基；氨基取代的C_1-6低级烷基；芳烷基或杂芳基烷基或碳环；以C_1-6低级烷基为佳；或

(ii)CHR₆OH，其中R₆为氢原子或C_1-6低级烷基；或

(i)具有如下结构的寡糖残基其中R₉为H、甲基、羟基、羰基、乙酸基、芳烷氧基、杂芳基烷氧基或苯甲酸基；R₁₀为H、甲基、羧基、乙酸基、芳烷氧基、杂芳基烷氧基、苯甲酸基或羟基；R₁₁为O，当R₁₁为末端单糖残基上的取代基时，则为OH、甲基、乙酸基、杂芳基烷氧基、芳烷氧基，R₁₂为H、甲基、甲基羟基甲基或乙酸基甲基；或

(ii)具有如下结构的单糖残基：

(iii)具有如下结构的寡糖残基

(i)OH，或

(ii)H，或

(i)-CH-，其中a和b为单键，或

(ii)＝C，其中a和b为双键。

2.按权利要求1所述的化合物，其中R₁为COOR₅，而R₅为C_1-6低级烷基；R₂为氨基；R₃为寡糖残基：

其中R₉为氢、甲基、羟基、羧基、乙酸基、杂芳烷氧基、芳烷氧基或苯甲酸基；R₁₀为羟基、甲基、羧基、乙酸基、芳烷氧基、杂芳烷氧基、苯甲酸基或羟基；R₁₁为氧；当R₁₁为末端单糖糖基上的取代基时，则为OH、甲基、乙酸基、芳烷氧基；R₁₂为氢、甲基、甲基羟基甲基或乙酸基甲基。

3.按上述权利要求之一所述的化合物，其中R₁为COOR₅，而R₅为C_1-6低级烷基；R₂为NH₂；R₃为寡糖残基：其中R₁₄和R₁₅可相同或不同，为H、C_1-6低级烷基、芳烷基、杂芳基烷基、杂芳基或芳基；R₁₇可为H、羟基、乙酸基或苯甲酸基；R₁₈和R₁₉为羟基、乙酸基或苯甲酸基。

4.按上述权利要求之一所述的化合物，其中R₁为COOR₅，而R₅为C_1-6低级烷基；R₂为NH₂；R₃为寡糖残基：

其中R₁₄和R₁₅可相同或不同，为H、C_1-6低级烷基、芳烷基或芳基；R_14a为O，当R_14a为末端单糖残基上的取代基时，则为羟基、甲基、乙酸基、芳烷氧基或杂芳基烷氧基。

5.按上述权利要求之一所述的化合物，其中R₁为COR，而R为甲氨基、氨基或二烷氨基。

6.按上述权利要求之一所述的化合物，它们选自如下化合物组成的组：

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕-N-甲基雄烷-17-甲酰胺；

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-6-脱氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-α-L-吡喃甘露糖基〕氧〕雄烷-17-羧酸甲酯；

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄烷-17-甲酰胺；

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄烷-17-羧酸甲酯；

(3β，5β，14β，17β)-14-氨基-3-〔(O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基-(1→4)-2，6-二脱氧-β-D-核糖-己吡喃糖基)氧〕雄烷-17-羧酸甲酯；

14β-氨基-3β-〔α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯；

14β-氨基-3β-〔α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯；

14β-氨基-3β-〔2″，3″-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯；

14β-氨基-3β-〔2″，3″，4″-三-O-乙酰基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯；

14β-氨基-3β-〔4″-O-乙酰基-2″，3″-O-亚异丙基-β-(L)-鼠李吡喃糖基氧-(1→4)-2′，3′-O-亚异丙基-α-(L)-鼠李吡喃糖基氧〕-5β-雄烷-17β-羧酸甲酯。

7.一种药物组合物，由安全有效量15-95％上述权利要求之一化合物或其混合物和5-85％药学上可接受的赋形剂组成，其中所述药学上可接受的赋形剂选自聚合物、树脂、增塑剂、填充物、粘合剂、润滑剂、助流剂、崩解剂、溶剂、助溶剂、缓冲系统、表面活性剂、防腐剂、增甜剂、调味剂、药品级染料或色素，及粘性剂。

8.按权利要求7所述的药物组合物，由如下成分组成：15-95％上述权利要求之一化合物或其混合物；0-2％调味剂；0-50％助溶剂；0-5％缓冲系统；0-2％表面活性剂；0-2％防腐剂；0-5％增甜剂；0-5％粘性剂；0-75％填充物；0.5-2％润滑剂；1-5％助流剂；4-15％崩解剂；及1-10％粘合剂。

9.治疗患充血性心力衰竭的人或其它哺乳动物的方法，其特征在于：对所述人或其它哺乳动物投以含上述任一权利要求所述化合物或其混合物的安全有效量的权利要求7和8药物组合物。

10.在甾核14位上引入氨基的方法。其特征在于；其中所述氨基通过包括如下步骤的碘代异氰酸盐加成反应非对映选择性地引到甾核14位上：

a)将异氰酸盐加成到甾核14-15位双键上，较佳为用氰酸银和碘完成所述脱卤反应；

b)脱卤，较佳为用烷基锡氢化物和自由基引发剂完成脱卤反应，烷基锡氢化物以三正丁基锡为佳，自由基引发剂以过氧化苯甲酰为佳；

c)甾核14位上异氰酸根转化为氨基，较佳为经水解，最佳为加入盐酸或碳酸钾。

11.含权利要求1所述含寡糖的14-氨基甾类化合物的制备方法，其特征在于：其中所述氨基通过包括如下步骤的碘代异氰酸盐加成反应非对映选择性地引到甾核14位上：

a)将异氰酸盐加成到甾核14-15位双键上；

b)脱卤；

c)甾核14位上异氰酸根转化为氨基。