CN113558175A - 一种酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法及装置 - Google Patents
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Abstract
本发明属于黄曲霉毒素降解领域，公开了一种酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法及装置，采用免疫传感器黄曲霉毒素的检测方法对用二氧化氯处理后的酸枣仁再进行含黄曲霉毒素的溶液进行检测，获得黄曲霉毒素初始浓度；在离心管中加入红球菌PD630菌株活化液和的黄曲霉毒素溶液，震荡均匀后在20℃～60℃下水浴反应；于室温发酵处理；将反应后的样品经过微滤处理，进行反应后样品中残余黄曲霉毒素浓度检测；单因素处理，正交实验处理，获取红球菌PD630菌株活化液浓度预处理对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解优化条件。本发明将化学脱毒剂与微生物结合，操作简单并且不会对人体造成伤害。降解效率高。
Description
技术领域
本发明属于黄曲霉毒素降解领域，尤其涉及一种酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法及装置，
背景技术
目前，关于黄曲霉毒素的去除与降解引起科研人员的广泛关注。黄曲霉毒素是强致癌化合物,主要由某些曲霉属菌株产生。由于它们在不同条件下具有极高的稳定性,因此很难在人类饮食和动物饲料中完全去除它们。黄曲霉毒素以这种方式引发了许多健康问题(例如肝癌)。酸枣仁作为重要的中药，有养心补肝的功效。但也极易感染黄曲霉毒素，使酸枣仁等中的黄曲霉毒素解毒的传统方法分别包括物理和化学处理,例如挤压蒸煮工艺和氨化工艺。同时,考虑到对环境和身体健康的友好性,通过微生物进行的生物降解获得了广泛的应用。作为一种改进,具有强大的去除黄曲霉毒素能力又不会对人和动物造成任何损害的天然植物化学物质(植物提取物)。例如，有研究者利用复合菌剂(包括酵母菌和青霉菌，酵母菌为耐盐性假丝酵母菌和/或鲁氏酵母菌，青霉菌为灰黄青霉和/或产黄青霉本)降解黄曲霉毒素，将特定种类的酵母菌和青霉菌进行组合使用，能够有效地降解黄曲霉毒素，尤其是能够降解致癌性较强的黄曲霉毒素B1。该复合菌剂能够简便地处理或者添加到饲料材料中，从而能够降低饲料中黄曲霉的含量，有利于饲养动物的健康。
通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：现有技术中的物理降解方法可能对研究人员带来危害，通过微生物降解的方法研究不广泛，菌种培养复杂。
现有技术对黄曲霉毒素降解效果差。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法及装置。
本发明是这样实现的，一种酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法，包括：将干燥的酸枣仁用二氧化氯溶液喷淋表面，烘干，制备红球菌PD630菌株活化液，所述酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法还包括：
步骤1、采用免疫传感器黄曲霉毒素的检测方法(现有技术)对用二氧化氯处理后的酸枣仁再进行含黄曲霉毒素的溶液进行检测，获得黄曲霉毒素初始浓度；
步骤2、在离心管中加入红球菌PD630菌株活化液和步骤1的黄曲霉毒素溶液，震荡均匀后在20℃～60℃下水浴反应；于室温发酵处理；
步骤3、将反应后的样品经过微滤处理，进行反应后样品中残余黄曲霉毒素浓度检测；
步骤4、单因素处理，以黄曲霉毒素初始浓度溶液为原材料，以黄曲霉毒素降解率为指标，分析在不同水浴温度、水浴时间、红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比的处理条件下，并辅以微波炉加热，分析各因素对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响；
步骤5，正交实验处理，通过对单因素数据处理后，选取红球菌PD630菌株活化液浓度、水浴温度、水浴时间、红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比显著的数据，使用L9(34)正交表，进行三次重复实验，获取红球菌PD630菌株活化液浓度预处理对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解优化条件。
进一步，所述酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法进一步包括数据处理，所述数据处理包括：
(1)根据单因素实验所测得的数据，通过Excel进行作图分析；正交实验设计表及正交实验所测得数据，通过DPS进行处理；
(2)黄曲霉毒素初始浓度溶液黄曲霉毒素降解率的计算，按照以下公式进行计算：降解率的计算公式为：黄曲霉毒素降解率＝100×(初始浓度–残余浓度)/初始浓度。
进一步，所述单因素处理包括：
红球菌PD630菌株活化液浓度对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响：称取1g黄曲霉毒素初始浓度溶液于5个锥形瓶中，按照红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比分别加入0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、10％浓度的红球菌PD630菌株活化液浓度溶液，在60℃水浴温度下提取3小时，然后用微波炉处理，在5000r/min下离心25min，量取1ml上清液稀释一定倍数，测出黄曲霉毒素含量，设置三组重复实验；
进一步，所述单因素处理还包括：
水浴温度对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响：精确称取1g黄曲霉毒素初始浓度溶液于5个锥形瓶中，按照红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比加入0.01％的红球菌PD630菌株活化液浓度溶液，分别在20～30℃、45℃、60℃水浴温度下提取3h，然后用微波炉处理，在5000r/min下离心25min，量取1ml上清液稀释一定倍数，采用DNS法测出黄曲霉毒素含量，设置三组重复实验。
进一步，所述单因素处理还包括：
水浴时间对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响：精确称取1g黄曲霉毒素初始浓度溶液于5个的锥形瓶中，按照红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比加入0.01％的红球菌PD630菌株活化液浓度溶液，在30℃水浴温度下分别处理1h、2h、3h、24h、48h，然后用微波炉处理，在5000r/min下离心15min，精确量取1ml上清液稀释一定倍数，采用DNS法测出黄曲霉毒素含量，设置三组重复实验；
进一步，所述单因素处理还包括：
红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响：精确称取1g黄曲霉毒素初始浓度溶液于5个锥形瓶中，按照红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比1:10、1:20的比例加入0.01％的红球菌PD630菌株活化液浓度溶液，在30℃水浴温度下提取，然后用微波炉中处理，在5000r/min下离心25min，量取1ml上清液稀释一定倍数，测出黄曲霉毒素含量，设置三组重复实验。
进一步，
红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比为10～20％；
水浴温度20～30℃；
水浴时间24～48h。
进一步，二氧化氯溶液浓度为5ppm；
所述浑浊红球菌PD630菌株活化液的制备为将浑浊红球菌PD630(Rhodococcusopacus PD630，DSMZ 44193从市场购买)接种于营养肉汤培养基中，于30℃、160rpm的条件下培养24h得到菌株活化液。
本发明的另一目的在于提供一种实施所述酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法的酸枣仁中黄曲霉毒素的降解装置(可采用现有公开设备，主要创新在于运行本发明的方法)。
本发明的另一目的在于提供一种所述酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法在水果黄曲霉毒素残余量检测上的应用。
结合上述的所有技术方案，本发明所具备的优点及积极效果为：本发明将化学脱毒剂与微生物结合，先利用二氧化氯降低酸枣仁中的黄曲霉毒素，再进一步利用浑浊红球菌PD630菌株降解难以去除的黄曲霉毒素B1。最终达到降解黄曲霉毒素的效果，提高了降解效率。
通过单因素实验面分析法，得出红球菌PD630菌株活化液对黄曲霉毒素的最佳降解条件，在此条件下检测的黄曲霉毒素降解率为88.27％以上，反应条件温和，简单易操作且能较高效率的促进黄曲霉毒素的降解。
本发明回收简单方便，不会污染环境。
附图说明
图1是本发明实施例提供的酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法流程图。
图2是本发明实施例提供的酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法中数据处理流程图。
图3为不同时间浑浊红球菌PD630对黄曲霉毒素B1降解率图。
图4为浑浊红球菌PD630接种量对降解黄曲霉毒素B1的影响图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
针对现有技术存在的问题，设置了二氧化氯的对照组，以及对不同时间，不同接种量进行研究，提出了一种酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法及装置下面结合附图对本发明作详细的描述。
如图1所示，本发明提出的一种酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法，包括：
S101，将干燥的酸枣仁用二氧化氯溶液喷淋表面，烘干，制备红球菌PD630菌株活化液；
S102，采用免疫传感器黄曲霉毒素的检测方法(现有技术)对用二氧化氯处理后的酸枣仁再进行含黄曲霉毒素的溶液进行检测，获得黄曲霉毒素初始浓度；
S103，在离心管中加入红球菌PD630菌株活化液和步骤S102的黄曲霉毒素溶液，震荡均匀后在20℃～60℃下水浴反应；于室温发酵处理；
S104，将反应后的样品经过微滤处理，进行反应后样品中残余黄曲霉毒素浓度检测；
S105，单因素处理，以黄曲霉毒素初始浓度溶液为原材料，以黄曲霉毒素降解率为指标，分析在不同水浴温度、水浴时间、红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比的处理条件下，并辅以微波炉加热，分析各因素对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响；
S106，正交实验处理，通过对单因素数据处理后，选取红球菌PD630菌株活化液浓度、水浴温度、水浴时间、红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比显著的数据，使用L9(34)正交表，进行三次重复实验，获取红球菌PD630菌株活化液浓度预处理对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解优化条件。
如图2所示，所述酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法进一步包括数据处理，所述数据处理包括：
S201，根据单因素实验所测得的数据，通过Excel进行作图分析；正交实验设计表及正交实验所测得数据，通过DPS进行处理；
S202，黄曲霉毒素初始浓度溶液黄曲霉毒素降解率的计算，按照以下公式进行计算：降解率的计算公式为：黄曲霉毒素降解率＝100×(初始浓度–残余浓度)/初始浓度。
在本发明一优选实施例中，所述单因素处理包括：
红球菌PD630菌株活化液浓度对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响：称取1g黄曲霉毒素初始浓度溶液于5个锥形瓶中，按照红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比分别加入0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、10％浓度的红球菌PD630菌株活化液浓度溶液，在60℃水浴温度下提取3小时，然后用微波炉处理，在5000r/min下离心25min，量取1ml上清液稀释一定倍数，测出黄曲霉毒素含量，设置三组重复实验；
在本发明一优选实施例中，所述单因素处理还包括：
水浴温度对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响：精确称取1g黄曲霉毒素初始浓度溶液于5个锥形瓶中，按照红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比加入0.01％的红球菌PD630菌株活化液浓度溶液，分别在30℃、45℃、60℃水浴温度下提取3h，然后用微波炉处理，在5000r/min下离心25min，量取1ml上清液稀释一定倍数，采用DNS法测出黄曲霉毒素含量，设置三组重复实验。
在本发明一优选实施例中，所述单因素处理还包括：
水浴时间对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响：精确称取1g黄曲霉毒素初始浓度溶液于5个的锥形瓶中，按照红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比加入0.01％的红球菌PD630菌株活化液浓度溶液，在30℃水浴温度下分别处理1h、2h、3h、24h、48h，然后用微波炉处理，在5000r/min下离心15min，精确量取1ml上清液稀释一定倍数，采用DNS法测出黄曲霉毒素含量，设置三组重复实验；
在本发明一优选实施例中，所述单因素处理还包括：
红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响：精确称取1g黄曲霉毒素初始浓度溶液于5个锥形瓶中，按照红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比1:10、1:20的比例加入0.01％的红球菌PD630菌株活化液浓度溶液，在30℃水浴温度下提取，然后用微波炉中处理，在5000r/min下离心25min，量取1ml上清液稀释一定倍数，测出黄曲霉毒素含量，设置三组重复实验。
在本发明一优选实施例中，
红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比为10～20％；
水浴温度20～30℃；
水浴时间24～48h。
在本发明一优选实施例中，二氧化氯溶液浓度为5ppm；
所述浑浊红球菌PD630菌株活化液的制备为将浑浊红球菌PD630(Rhodococcusopacus PD630，DSMZ 44193从市场购买)接种于营养肉汤培养基中，于30℃、160rpm的条件下培养24h得到菌株活化液。
下面结合实验效果(或从现有技术公开)对本发明技术方案作进一步描述。
1、将常温下放置3个月的酸枣仁进行处理，处理方式是将酸枣仁分为6份，每份50g。首先，将其中的2份酸枣仁作为处理1，利用蒸馏水进行雾化喷淋，2h后放入35℃烘箱内烘干；其次，从剩余的4份中选择2份酸枣仁作为处理2，利用浓度为5ppm的二氧化氯溶液进行雾化喷淋，2h后放入35℃烘箱内烘干；最后，余下2份不做任何处理作为对照组。将三组烘干后的酸枣仁样品，按照《中国药典》2015年版规定之方法进行黄曲霉毒素测定，测定结果如下：
从测试结果可以看出，处理2也就是经过二氧化氯喷淋后的酸枣仁中含有的黄曲霉素均降低了，效果较为明显。
2、不同培养时间对浑浊红球菌PD630降解黄曲霉毒素B1的影响
将本发明得到的菌株活化液以10％接种量接种于黄曲霉毒素B1终浓度为0.4μg/mL的营养肉汤培养基中，空白对照为黄曲霉毒素B1(AFB1)浓度相同但不接种的NB培养基，在0，12，24，36，48，60，72h分别取样，测定培养液黄曲霉毒素B1含量变化。
图3为不同时间浑浊红球菌PD630对黄曲霉毒素B1降解率图。结果显示，PD630菌株培养48h得到的发酵液对AFB1降解率为89.6％，60h发酵液对AFB1降解率为91.4％，72h发酵液对AFB1降解率为93.2％。
3、浑浊红球菌PD630接种量对降解黄曲霉毒素B1的影响
将本发明得到的菌株活化液分别以5％、10％、15％、20％接种量接种于AFB1终浓度为0.4μg/mL的营养肉汤培养基中，空白对照为AFB1浓度相同但不接种的营养肉汤培养基，在30℃、160rpm下培养72h测定发酵液残余AFB1的含量。
图4为浑浊红球菌PD630接种量对降解黄曲霉毒素B1的影响图。结果显示，当PD630菌株接种量为20％，培养72h得到的发酵液对AFB1降解率最高，为95.81％。当PD630接种量为5％、10％、15％时，培养72h得到的发酵液对AFB1降解率分别为79.33％、90.23％、94.01％。
综上所述，本发明通过设置对照组以及对比不同培养时间对浑浊红球菌PD630降解黄曲霉毒素B1的影响、浑浊红球菌PD630接种量对降解黄曲霉毒素B1的影响，提出了最终的酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法。
本发明结合两种脱毒剂对黄曲霉毒素进行降解，操作简单并且不会对人体造成伤害，本发明将PD630菌株活化液以10％(v/v)接种于酸枣仁中，于室温发酵处理72h，对AFB1降解率可达到94.01％，降解效果十分明显。
4、单因素实验
分别对黄曲霉毒素初始浓度、红球菌PD630菌株活化液活力及反应时间、温度、pH值及反应体系体积进行单因素实验，研究这5个因素对黄曲霉毒素降解率的影响，分析得出影响黄曲霉毒素降解的主要因素为反应温度。根据实验结果和经济成本确定其他因素如黄曲霉毒素初始浓度、红球菌PD630菌株活化液反应时间分别为24h和48h。
5、响应面法实验的设计
在单因素实验的基础上，选择ApH值、B温度、C反应体系体积3个因素所确定的水平范围(表1)，利用Design-expert软件进行响应面实验设计并以黄曲霉毒素降解率作为响应值，对Box-Benhnken设计实验结果(表2)进行方差分析及二次多相回归拟合(表3)，得到黄曲霉毒素降解对pH值、温度及反应体系体积的多元回归方程：黄曲霉毒素降解率(％)＝75.27+2.89*A+3.96*B+3.51*C–0.33*A*B+1.13*A*C–1.25*B*C–7.85*A2–1.45*B2–3.85*C2。
表1
表2
表3
由表3可知，整体模型的Prob>F值<0.001，表明该二次方程模型极显著。模型失拟项表示的是模型预测值与实际值不拟合的概率，该模型失拟项Prob>F值小于0.0001，说明预测值与实际值不拟合的概率小于0.01％，说明该方程对实验拟合较好。相关系数R2＝0.9654，Radj 2＝0.9209，说明96.54％的数据可以用此方程来解释，该模型相关度较好。并且B、A2对黄曲霉毒素的降解率影响极显著，A、C、、C2对黄曲霉毒素的降解率影响显著。对黄曲霉毒素降解率影响大小的因素顺序依次为：B(温度)>C(体积)>A(pH值)。
根据回归分析结果，可见反应温度在各项因素中起到极显著的影响，其余单因素为显著。在考察的变量水平范围内，红球菌PD630菌株活化液对黄曲霉毒素的降解率在一定范围内随反应温度、pH值及反应体系体积增大而增大，当其水平越过一定值后，黄曲霉毒素降解率随之降低。
5、最佳工艺条件的预测与检验
利用Design-Expert 8软件对试验模型进行预测，得到最佳的降解条件，反应条件温和，简单易操作且能较高效率的促进黄曲霉毒素的降解。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法，包括：将干燥的酸枣仁用二氧化氯溶液喷淋表面，烘干，制备红球菌PD630菌株活化液，其特征在于，所述酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法还包括：
步骤1、采用免疫传感器黄曲霉毒素的检测方法对用二氧化氯处理后的酸枣仁再进行含黄曲霉毒素的溶液进行检测，获得黄曲霉毒素初始浓度；
步骤2、在离心管中加入红球菌PD630菌株活化液和步骤1的黄曲霉毒素溶液，震荡均匀后在20℃～60℃下水浴反应；于室温发酵处理；
步骤3、将反应后的样品经过微滤处理，进行反应后样品中残余黄曲霉毒素浓度检测；
步骤4、单因素处理，以黄曲霉毒素初始浓度溶液为原材料，以黄曲霉毒素降解率为指标，分析在不同水浴温度、水浴时间、红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比的处理条件下，并辅以微波炉加热，分析各因素对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响；
步骤5，正交实验处理，通过对单因素数据处理后，选取红球菌PD630菌株活化液浓度、水浴温度、水浴时间、红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比显著的数据，使用L9(34)正交表，进行三次重复实验，获取红球菌PD630菌株活化液浓度预处理对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解优化条件。
2.如权利要求1所述的酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法，其特征在于，所述酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法进一步包括数据处理，所述数据处理包括：
(1)根据单因素实验所测得的数据，通过Excel进行作图分析；正交实验设计表及正交实验所测得数据，通过DPS进行处理；
(2)黄曲霉毒素初始浓度溶液黄曲霉毒素降解率的计算，按照以下公式进行计算：降解率的计算公式为：黄曲霉毒素降解率＝100×(初始浓度–残余浓度)/初始浓度。
3.如权利要求1所述的酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法，其特征在于，所述单因素处理包括：
红球菌PD630菌株活化液浓度对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响：称取1g黄曲霉毒素初始浓度溶液于5个锥形瓶中，按照红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比分别加入0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、10％浓度的红球菌PD630菌株活化液浓度溶液，在60℃水浴温度下提取3小时，然后用微波炉处理，在5000r/min下离心25min，量取1ml上清液稀释一定倍数，测出黄曲霉毒素含量，设置三组重复实验。
4.如权利要求1所述的酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法，其特征在于，所述单因素处理还包括：
水浴温度对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响：精确称取1g黄曲霉毒素初始浓度溶液于5个锥形瓶中，按照红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比加入0.01％的红球菌PD630菌株活化液浓度溶液，分别在20～30℃、45℃、60℃水浴温度下提取3h，然后用微波炉处理，在5000r/min下离心25min，量取1ml上清液稀释一定倍数，采用DNS法测出黄曲霉毒素含量，设置三组重复实验。
5.如权利要求1所述的酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法，其特征在于，所述单因素处理还包括：
水浴时间对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响：精确称取1g黄曲霉毒素初始浓度溶液于5个的锥形瓶中，按照红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比加入0.01％的红球菌PD630菌株活化液浓度溶液，在30℃水浴温度下分别处理1h、2h、3h、24h、48h，然后用微波炉处理，在5000r/min下离心15min，精确量取1ml上清液稀释一定倍数，采用DNS法测出黄曲霉毒素含量，设置三组重复实验。
6.如权利要求1所述的酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法，其特征在于，所述单因素处理还包括：
红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比对黄曲霉毒素初始浓度溶液降解的影响：精确称取1g黄曲霉毒素初始浓度溶液于5个锥形瓶中，按照红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比1:10、1:20的比例加入0.01％的红球菌PD630菌株活化液浓度溶液，在30℃水浴温度下提取，然后用微波炉中处理，在5000r/min下离心25min，量取1ml上清液稀释一定倍数，测出黄曲霉毒素含量，设置三组重复实验。
7.如权利要求1所述的酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法，其特征在于，
红球菌PD630菌株活化液与酸枣仁含黄曲霉毒素的溶液体积比为10～20％；
水浴温度20～30℃；
水浴时间24～48h。
8.如权利要求1所述的酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法，其特征在于，二氧化氯溶液浓度为5ppm；
所述浑浊红球菌PD630菌株活化液的制备为将浑浊红球菌PD630(Rhodococcus opacusPD630，DSMZ 44193)接种于营养肉汤培养基中，于30℃、160rpm的条件下培养24h得到菌株活化液。
9.一种实施权利要求1～8任意一项所述酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法的酸枣仁中黄曲霉毒素的降解装置。
10.一种权利要求1～8任意一项所述酸枣仁中黄曲霉毒素的降解方法在水果黄曲霉毒素残余量检测上的应用。
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