CN113897319B - 一株解淀粉芽孢杆菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一株解淀粉芽孢杆菌，属于微生物技术领域。本发明所述解淀粉芽孢杆菌命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G‑7，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏编号为CGMCC No.22851。本发明所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G‑7对串珠镰刀菌具有显著的抑制作用，对伏马毒素的降解率高达99.54％，可以用于发酵饲料行业的防霉脱毒。

Description

一株解淀粉芽孢杆菌及其应用
技术领域
本发明属于微生物技术领域，尤其涉及一株解淀粉芽孢杆菌及其应用。
背景技术
伏马毒素是霉菌毒素的一种，也是农业中常见的致病菌之一，它是由串珠镰刀菌等镰刀菌产生的一种水溶性代谢产物。它普遍存在于饲料中，会对动物产生神经毒性、肺毒性、免疫抑制和胚胎毒性等有害作用，给养殖业带来了严重的经济损失。《GB13078-2017饲料卫生标准》中也规定了各饲料原料与饲料产品中伏马毒素的限量值为5mg/kg-60mg/kg。所以，饲料中伏马毒素的去除已经成为了当今研究的热点问题。
随着科学技术的发展，伏马毒素的去除大致分为物理削减法、化学削减法和生物降解法。物理削减方法包括物理吸附法、微波法、辐射法等。化学削减方法包括氨熏蒸、臭氧和其他强氧化剂处理等。而传统的物理和化学脱毒方法处理饲料产品中的霉菌毒素具有局限性，如营养物质流失、试剂残留、对环境的二次污染等。生物降解法可以通过利用微生物产生次生代谢物或分泌酶来有效降解霉菌毒素，以及利用微生物吸附毒素来去除霉菌毒素。通过生物降解法来降解伏马毒素不仅能高效地将毒素转化为无毒、环保、安全的产品，而且具有特异性强、转化效率高的生物酶催化作用。所以在饲料安全越来越被重视的今天，能够对自然界中产生伏马毒素的镰刀菌进行有效抑制且对存在的霉菌毒素进行有效降解已经成为了当今迫切需要解决的问题。
近年来，尽管一些细菌的次级代谢产物能够证明降解霉菌毒素，但是产品的提取方法比较复杂，且每批次的降解效果不稳定。因此筛选能够高效拮抗镰刀菌的生长并降解伏马毒素的菌株是当务之急。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一株解淀粉芽孢杆菌，具有拮抗串珠镰刀菌、降解伏马毒素的作用。
为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：
一株解淀粉芽孢杆菌，所述解淀粉芽孢杆菌命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)G-7，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏编号为CGMCC No.22851。
优选的，所述解淀粉芽孢杆菌来源于玉米地土壤。
本发明还提供了上述解淀粉芽孢杆菌发酵得到的发酵液。
本发明还提供了上述发酵液的制备方法，包括如下步骤：
将所述解淀粉芽孢杆菌接种至发酵培养基，在温度35～40℃、转速150～200rpm的条件下培养30～40h，得到发酵培养液，离心后得到所述发酵液；所述发酵培养基包括：蛋白胨0.8～1.3g/L，酵母膏0.8～1.3g/L，葡萄糖4.0～8.0g/L，碳酸钙0.7～1.3g/L，硫酸镁0.03～0.07g/L，磷酸氢二钠2.0～5.0g/L，磷酸二氢钠1.0～3.0g/L，pH值为7.2～7.4。
优选的，所述解淀粉芽孢杆菌以种子液的形式接种至发酵培养基；所述种子液的接种量为4.0～7.0％。
优选的，所述种子液的制备方法包括：将所述解淀粉芽孢杆菌接种于种子培养基中培养，得到所述种子液；所述种子培养基包括：蛋白胨8.0～12.0g，牛肉膏2.0～4.0g，氯化钠4.0～7.0g，pH值为7.0～7.2。
优选的，所述种子培养的温度为35～40℃，时间为12～24h，转速为150～200rpm。
优选的，所述离心转速为6000～10000r/min，时间为8～13min。
本发明还提供了上述的解淀粉芽孢杆菌或发酵液在拮抗串珠镰刀菌中的应用。
本发明还提供了上述的解淀粉芽孢杆菌或发酵液在降解伏马毒素中的应用。
相对于现有技术，本发明具有如下有益效果：
本发明提供了一株解淀粉芽孢杆菌，所述解淀粉芽孢杆菌命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏编号为CGMCC No.22851。本发明所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)G-7对串珠镰刀菌具有显著的抑制作用，对伏马毒素的降解率高达99.54％，可以用于发酵饲料行业的防霉脱毒。
生物保藏信息：
本发明所述解淀粉芽孢杆菌G-7，拉丁文为Bacillus amyloliquefaciens，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏编号为CGMCCNo.22851，保藏日期为2021年7月8日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
附图说明
图1为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7对镰刀菌的抑菌圈图；
图2为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7的菌落形态和革兰氏染色图；
图3为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7的系统发育树图；
图4为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7的最适生长pH结果；
图5为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7的最适生长温度结果；
图6为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7的生长曲线；
图7为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7的不同处理时间对伏马毒素降解率图；
图8为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7的不同pH下的伏马毒素降解率图；
图9为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7的不同温度下的伏马毒素降解率图。
具体实施方式
本发明提供了一株解淀粉芽孢杆菌，所述解淀粉芽孢杆菌命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏编号为CGMCCNo.22851。
在本发明中，所述解淀粉芽孢杆菌的形态特征为革兰氏阳性菌，细胞形态为杆状，呈乳白色不透明菌落，表面粗糙，有隆起，边缘不规则，能在pH3～7之间正常生长繁殖，生长温度为27～47℃。本发明所述解淀粉芽孢杆菌来源于玉米地土壤。
本发明提供了上述解淀粉芽孢杆菌发酵得到的发酵液。
本发明提供了上述发酵液的制备方法，包括如下步骤：将所述解淀粉芽孢杆菌接种至发酵培养基，在温度35～40℃、转速150～200rpm的条件下培养30～40h，得到发酵培养液，离心后得到所述发酵液；所述发酵培养基包括：蛋白胨0.8～1.3g/L，酵母膏0.8～1.3g/L，葡萄糖4.0～8.0g/L，碳酸钙0.7～1.3g/L，硫酸镁0.03～0.07g/L，磷酸氢二钠2.0～5.0g/L，磷酸二氢钠1.0～3.0g/L，pH值为7.2～7.4。
在本发明中，所述发酵温度优选为温度37℃，转速180rpm，时间36h；所述所述发酵培养基优选包括：蛋白胨1.0g/L，酵母膏1.0g/L，葡萄糖6.0g/L，碳酸钙1.0g/L，硫酸镁0.05g/L，磷酸氢二钠4.0g/L，磷酸二氢钠2.0g/L，pH值为7.3。
在本发明中，所述解淀粉芽孢杆菌优选以种子液的形式接种至发酵培养基；所述种子液的接种量优选为4.0～7.0％，更优选为6.0％。
在本发明中，所述种子液的制备方法优选包括：将所述解淀粉芽孢杆菌接种于种子培养基中培养，得到所述种子液；所述种子培养基优选包括：蛋白胨8.0～12.0g，牛肉膏2.0～4.0g，氯化钠4.0～7.0g，pH值为7.0～7.2，更优选为蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，氯化钠5.0g，pH值为7.1。
在本发明中，所述种子培养的温度优选为35～40℃，更优选为37℃，时间优选为12～24h，更优选为18h，转速优选为150～200rpm，更优选为180rpm。
在本发明中，所述离心转速优选为6000～10000r/min，更优选为8000r/min，时间优选为8～13min，更优选为10min。
本发明还提供了上述的解淀粉芽孢杆菌或发酵液在拮抗串珠镰刀菌中的应用。
本发明还提供了上述的解淀粉芽孢杆菌或发酵液在降解伏马毒素中的应用。
本发明对未提及原料的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的常规市售产品即可。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7的筛选
1.串珠镰刀菌拮抗菌菌株的筛选
将串珠镰刀菌接种于PDB培养基，28℃培养48h，按1％的比例倒入PDA培养基中，混匀并制备成串珠镰刀菌病原真菌平板。其中PDB培养基的制备方法为：土豆200.0g/L，葡萄糖20.0g/L，pH 7.0-7.2。PDA培养基的制备方法为：土豆200.0g/L，葡萄糖20.0g/L，琼脂15.0～20.0g，调节pH 7.0～7.2。将实验室4℃冰箱保藏的菌株活化，用画十字接种法接种于病原真菌平板上。28℃培养48h，观察菌株的拮抗作用。
将具有拮抗效果的菌株接种到NB培养基中，37℃培养48h，发酵液经8000r/min离心10min，取200μL上清液加入到病原菌平板的点样孔中28℃培养48h，观察透明圈的有无及大小。结果见图1。其中NB培养基的制备方法为：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，氯化钠5.0g，调节pH 7.0～7.2。
根据图1解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7对镰刀菌的抑菌圈图可知，菌株G-7对串珠镰刀菌具有显著的抑制作用。
2.伏马毒素降解菌的筛选
取对串珠镰刀菌有拮抗活性的菌株发酵液1.0mL，8000r/min离心10min得上清液，伏马毒素按1％的比例添加至发酵上清液中，使得伏马毒素的终浓度为1.0μg/mL，在37℃下180r/min的摇床培养72h。其中发酵培养基的制备方法为：蛋白胨1.0g/L，酵母膏1.0g/L，葡萄糖6.0g/L，碳酸钙1.0g/L，硫酸镁0.05g/L，磷酸氢二钠4.0g/L，磷酸二氢钠2.0g/L。使用酶联免疫法检测伏马毒素剩余含量，空白对照为只添加伏马毒素的发酵培养基。筛选结果见表1。
降解率＝(空白值-试验组残留值)/空白值×100％。
表1伏马毒素降解菌株的筛选结果
Figure BDA0003334381580000051
Figure BDA0003334381580000061
由表1数据可知，菌株G-7的伏马毒素降解率最高，可达99.54％。
实施例2菌株的种属鉴定及生理生化指标鉴定
1.菌株形态
本发明所述的解淀粉芽孢杆菌G-7在NA培养基上生长，其中，NA培养基的制备方法为：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，氯化钠5.0g，琼脂15.0～20.0g，调节pH 7.0～7.2。得到的菌株G-7呈现淡黄色，表面有褶皱，不透明，边缘不规则，中间隆起。革兰氏染色阳性菌，无荚膜，菌体呈小杆状，芽孢呈杆状，结果见图2。
2.16S rDNA鉴定
用细菌DNA提取试剂盒提取本发明菌株的DNA。
PCR扩增：
运用通用引物27F：5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’(见序列表
1),1492R:5’-TACGGYTACCTTGTTACGACTT-3’(见序列表2)。参照表
2配置PCR扩增反应体系，进行扩增(30个循环)，PCR反应条件见表3，PCR产物经1％琼脂糖凝胶电泳检测后，将样品送往深圳华大基因股份有限公司测序。
表2PCR反应体系
Figure BDA0003334381580000062
表3PCR反应条件
Figure BDA0003334381580000071
将测序所的本发明菌株G-7的16S rDNA序列(见序列表3)与Gene Bank中已注册的16S rDNA序列用Blast程序进行序列相似性比较分析，并构建系统发育树。由图3可知，本发明的菌株G-7与16S rDNA的基因序列与NCBI注册的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)的16S rDNA的基因序列具有较高的同源性，故确定筛选出的菌株G-7为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。
3.生理生化鉴定
参照东秀珠等的《常见细菌系统鉴定手册》对本发明菌株进行生理生化实验。试验结果见表4。
表4：解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7的生理生化特性
Figure BDA0003334381580000072
Figure BDA0003334381580000081
注：“+”表示阳性，“–”表示阴性
实施例3
菌株特性研究
1.菌株最适生长pH试验
制备菌株G-7的种子液，以6％的接种量将其接种在pH为3.0、4.0、5.0、6.0、7.0的100mL的发酵培养基。在37℃、180r/min摇床培养24h，600nm下测定吸光度，确定菌株G-7在不同pH值下的生长情况。
由图4可知，在全株玉米青贮过程中，乳酸菌大量繁殖下，发酵环境的pH值会迅速下降，因此菌株需要在较酸的环境下仍然生长繁殖。本发明菌株G-7能在pH3～7之间可以正常生长繁殖，在pH值为5时长势最好。
2.菌株最适生长温度试验
制备菌株G-7种子液，以6％的接种量将其接种在温度为27℃、37℃、47℃的100mL的发酵培养基。在37℃，180r/min摇床培养24h，600nm下测定吸光度，确定菌株G-7在不同温度下的生长情况。
由图5可知，中国地势辽阔，南北方气温相差较大，尤其是北方地区青贮时气温比较低。这就要求菌株在不同的温度下特别是低温条件能够正常生长繁殖。本发明菌株G-7以37℃为最适生长温度且在27～47℃内能正常生长。
3.菌株的生长曲线测定。
将活化后的菌株G-7接种到NB液体培养基中，在37℃、180r/min下培养，在0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h、24h、48h、72h、84h下取样，600nm处测定吸光度值，测定菌株的生长情况。由图6可知，在2-12小时，解淀粉芽孢杆菌G-7处于对数生长阶段，繁殖速率较高。在12-84小时解淀粉芽孢杆菌G-7数目趋于定处于稳定期。
实施例4
菌株降解伏马毒素的特性研究
1.不同处理时间对伏马毒素降解的影响
取本发明菌株的发酵上清液0.5mL，加入伏马毒素保证终浓度为1.0μg/mL，在180r/min、37℃摇床培养，分别在0h、1h、2h、3h、4h、5h、6h、7h、8h、9h时测定伏马毒素降解率，以确定菌株G-7的最佳降解时间。
由图7可知，本发明菌株G-7对伏马毒素的降解率在9h时达到最高，9h后降解率达到稳定期，降解率在7h后成线性上升趋势。
2.不同pH下的伏马毒素降解率
取本发明菌株G-7的发酵上清液0.5mL，加入伏马毒素使其终浓度为1.0μg/mL，然后分别调节pH值为3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0。在37℃下180r/min摇床处理72h后测定伏马毒素含量，以确定菌株G-7在不同pH下的降解率。
由图8可知，菌株随着pH值的下降，降解活性开始降低，在pH值为3.0时其降解率在5％左右，说明在低pH值时菌株生长速度缓慢，代谢产物减少，降解率下降。但在pH值为5时，降解率最高，为85.36％。同时pH值为4时也具有较高的降解率。
3.不同温度下的伏马毒素降解率
取本发明菌株的发酵上清液0.5mL，加入伏马毒素使其终浓度为1.0μg/mL，然后分别调节温度值为25℃、28℃、37℃、42℃。在180r/min摇床处理72h后测定伏马毒素含量，以确定菌株G-7在不同温度下的降解率。用以下公式来计算降解率：降解率＝(毒素添加量-毒素残留量)/毒素添加量×100％。
由图9可知，菌株G-7随着温度的上升，降解活性增强，在温度为37℃时其降解率最高，为83.18％。
上述实施例的结果表明，本发明提供的解淀粉芽孢杆菌G-7能够抑制串珠镰刀菌的生长，同时也能高效降解伏马毒素。对伏马毒素的降解率高达99.54％。通过对菌株G-7生长特性的研究发现该发明菌株具有较强的酸碱和温度耐受性，在pH3～7，27～47℃之间能生长良好。同时通过对发明菌株G-7的降解特性的研究，发现该菌株的最适降解pH值为5.0，最佳降解温度为37℃，最适降解温度为9h。并且本发明菌株在《饲料添加剂品种目录(2013)》中，可以直接用于饲料和养殖行业。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
序列表
<110> 河北农业大学
农恩保定生物科技有限公司
<120> 一株解淀粉芽孢杆菌及其应用
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> 上游引物(Artificial Sequence)
<400> 1
agagtttgat cctggctcag 20
<210> 2
<211> 22
<212> DNA
<213> 下游引物(Artificial Sequence)
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<210> 3
<211> 1411
<212> DNA
<213> 16S rDNA(Artificial Sequence)
<400> 3
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gactttcgtc cattgcggaa gattccctac tgctgcctcc cgtaggagtc tgggccgtgt 1140
ctcagtccca gtgtggccga tcaccctctc aggtcggcta cgcatcgtcg ccttggtgag 1200
ccgttacctc accaactagc taatgcgccg cgggtccatc tgtaagtggt agccgaagcc 1260
accttttatg tctgaaccat gcggttcaga caaccatccg gtattagccc cggtttcccg 1320
gagttatccc agtcttacag gcaggttacc cacgtgttac tcacccgtcc gccgctaaca 1380
tcagggagca agctcccatc tgtccgctcg a 1411

Claims (10)

1.一株解淀粉芽孢杆菌，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)G-7，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏编号为CGMCC No.22851。
2.根据权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌来源于玉米地土壤。
3.权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌发酵得到的发酵液。
4.权利要求3所述发酵液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
将所述解淀粉芽孢杆菌接种至发酵培养基，在温度35～40℃、转速150～200rpm的条件下培养30～40h，得到发酵培养液，离心后得到所述发酵液；
所述发酵培养基包括：蛋白胨0.8～1.3g/L，酵母膏0.8～1.3g/L，葡萄糖4.0～8.0g/L，碳酸钙0.7～1.3g/L，硫酸镁0.03～0.07g/L，磷酸氢二钠2.0～5.0g/L，磷酸二氢钠1.0～3.0g/L，pH值为7.2～7.4。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌以种子液的形式接种至发酵培养基；所述种子液的接种量为4.0～7.0％。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述种子液的制备方法包括：将所述解淀粉芽孢杆菌接种于种子培养基中培养，得到所述种子液；
所述种子培养基包括：蛋白胨8.0～12.0g，牛肉膏2.0～4.0g，氯化钠4.0～7.0g，pH值为7.0～7.2。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述种子培养的温度为35～40℃，时间为12～24h，转速为150～200rpm。
8.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述离心转速为6000～10000r/min，时间为8～13min。
9.根据权利要求1或2所述的解淀粉芽孢杆菌或权利要求3所述的发酵液在拮抗串珠镰刀菌中的应用。
10.根据权利要求1或2所述的解淀粉芽孢杆菌或权利要求3所述的发酵液在降解伏马毒素中的应用。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114836328B (zh) * 2022-05-10 2023-05-30 中国水稻研究所 歧皱青霉菌菌株ra51及其应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103981133A (zh) * 2014-05-14 2014-08-13 中国农业科学院农产品加工研究所 一株解淀粉芽孢杆菌及其在降解玉米赤霉烯酮中的应用
CN107988108A (zh) * 2017-12-20 2018-05-04 西安交通大学 一种拮抗霉菌的芽孢杆菌及其抗菌应用
CN109182197A (zh) * 2018-09-29 2019-01-11 淮阴工学院 一种解淀粉芽孢杆菌cplk1314及其在饲料储存中的应用
CN110079482A (zh) * 2019-05-24 2019-08-02 中国农业大学 一种饲用解淀粉芽孢杆菌及其应用
KR102015823B1 (ko) * 2018-05-28 2019-10-23 (주)에코비즈넷 진균독소 생성 균에 대한 억제능이 우수한 바실러스 서틸리스 ebn-yr47
CN111304119A (zh) * 2020-02-21 2020-06-19 江苏澳华生物科技研究院有限公司 一种降解伏马毒素的饲用枯草芽孢杆菌及其应用

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103981133A (zh) * 2014-05-14 2014-08-13 中国农业科学院农产品加工研究所 一株解淀粉芽孢杆菌及其在降解玉米赤霉烯酮中的应用
CN107988108A (zh) * 2017-12-20 2018-05-04 西安交通大学 一种拮抗霉菌的芽孢杆菌及其抗菌应用
KR102015823B1 (ko) * 2018-05-28 2019-10-23 (주)에코비즈넷 진균독소 생성 균에 대한 억제능이 우수한 바실러스 서틸리스 ebn-yr47
CN109182197A (zh) * 2018-09-29 2019-01-11 淮阴工学院 一种解淀粉芽孢杆菌cplk1314及其在饲料储存中的应用
CN110079482A (zh) * 2019-05-24 2019-08-02 中国农业大学 一种饲用解淀粉芽孢杆菌及其应用
CN111304119A (zh) * 2020-02-21 2020-06-19 江苏澳华生物科技研究院有限公司 一种降解伏马毒素的饲用枯草芽孢杆菌及其应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Biocontrol of Bacillus subtilis against Fusarium verticillioides in vitro and at the maize root level;L Cavaglieri等;Res Microbiol .;第156卷(第5-6期);748-754 *
拮抗串珠镰刀菌并降解 伏马毒素菌株的筛选及降解特性研究;伍常菁等;饲料研究;第44卷(第17期);56-59 *
解淀粉芽胞杆菌菌株HRH317对感染串珠镰孢菌玉米幼苗伏马毒素B1含量及相关防御酶活性的影响;赵欣等;植物保护学报;第47卷(第02期);273-282 *

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