CN113546126A - 一种改进的玉蓝降糖胶囊制备方法及检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种改进的玉蓝降糖胶囊制备方法及检测方法,该制备方法在提取阶段调整了黄芩投料温控参数,将黄芩药材冷水投料改为沸水投料,破坏了黄芩酶的活性,消除了黄芩酶解,提高黄芩苷转移率和产品抑菌能力;在浓缩阶段采用了真空浓缩,降低了浓缩温度,使有效成分不被破坏;在干燥阶段采用了低温真空带式干燥法,缩短了干燥时间,提高生产效率,节约生产成本。检测方法包括对胶囊中黄芩、牛蒡子药材薄层鉴别的优化,对胶囊中黄芩苷含量测定方法的优化,增加了半枝莲药材薄层鉴别项目,通过方法学考察,该检测方法具有专属性强、耐用性好、良好的回收率等效果,能有效的检测改进制备工艺产品的质量情况,进一步提高产品质量。
Description
技术领域
本发明涉及药物制备及检测领域,具体涉及一种改进的玉蓝降糖胶囊制备方法及检测方法。
背景技术
玉蓝降糖胶囊,为贵州健兴药业有限公司的产品,功效为清热养阴,生津止渴。用于阴虚内热所致的消渴病,2型糖尿病及并发症的改善;由黄芩620g、桑叶285g、牛蒡子260g、蓝花参180g、半枝莲170g、假万寿竹根120g、青葙子93g组成,所述制备方法为;1)取桑叶30g粉碎成细粉;2)剩余桑叶与其余黄芩投入提取罐中,投料完毕后关闭投料口,打开饮用水阀门加6倍量的水,开启夹套蒸汽进行煎煮两次,第一次2小时,第二次1.5小时;3)合并煎液,以浓缩真空度为-0.05Mpa,浓缩温度为80℃进行减压浓缩至相对密度为1.17~1.20的清膏;3)再加入桑叶细粉,混匀,以干燥温度100℃进行热风循环烘箱干燥10小时,粉碎成细粉,过筛,混匀,装入胶囊,即得。
该制备方法存在的技术问题:(1)由于黄芩苷在黄芩酶的作用下会酶解成为黄芩素和葡萄糖醛酸,黄芩素不溶于水又不稳定,易沉淀在黄芩表面在空气中被氧化成绿色醌类衍生物,本方法采用冷水直接煎煮,黄芩表面在空气中易被氧化成绿色醌类衍生物,影响黄芩苷转移率和产品抑菌能力;(2)合并煎液后采用减压浓缩,浓缩温度高,有效成分易被破坏;(3)采用热风循环烘箱干燥法,干燥时间长、水分不均匀、影响药物质量等问题。
针对以上制备方法问题,发明人针对玉蓝降糖胶囊的制备问题,经过了多次制备方法的研究,在提取阶段调整了黄芩投料温控参数,将黄芩药材冷水投料改为沸水投料,破坏了黄芩酶的活性,消除了黄芩酶解,提高黄芩苷转移率和产品抑菌能力;在浓缩阶段采用了真空浓缩,降低了浓缩温度,使有效成分不被破坏;在干燥阶段采用了低温真空带式干燥法,缩短了干燥时间,提高生产效率,节约生产成本。
制备方法改进后制得的玉蓝降糖胶囊,根据国家药品监督管理局标准(WS-10113(ZD-0113)-2002)进行质量检测,部分检测结果存在以下问题:(1)黄芩药材鉴别实验中,斑点较模糊,样后斑点Rf值偏小,影响检验结果的判断;(2)牛蒡子药材鉴别实验中,斑点拖尾,分离度小、重现性差,影响检验结果的判断;(3)质量中缺少对半枝莲药材的鉴别检测;(4)质量中缺少对桑叶中芦丁含量的检测。
为了解决上述检测问题,有效的提高产品质量并提升玉蓝降糖胶囊的质量标准,我们参照WS-10113(ZD-0113)-2002和药典标准,本发明团队对玉蓝降糖胶囊原检测方法进行深入研发、考察,建立了一种用于玉蓝降糖胶囊质量的检测方法:优化了黄芩药材薄层鉴别方法,改变了黄芩薄层鉴别的展开剂,结果薄层斑点清晰、样后斑点Rf值适中;优化了牛蒡子药材薄层鉴别方法,改变了牛蒡子薄层鉴别的展开剂,结果薄层斑点清晰且无拖尾现象,重现在性高,样后斑点Rf值适中;增加了半枝莲药材的鉴别检测和桑叶中芦丁含量的测定,进一步确保了产量质量。
发明内容
本发明的目的是提供一种改进的玉蓝降糖胶囊制备方法。
本发明的另一目的是提供一种改进的玉蓝降糖胶囊的检测方法。
本发明玉蓝降糖胶囊的处方为:
黄芩620g 桑叶285g 牛蒡子260g 蓝花参180g
半枝莲170g 假万寿竹根120g 青葙子93g
本发明改进的玉蓝降糖胶囊制备方法为;(1)取桑叶30g粉碎成细粉;(2)将剩余桑叶与其余黄芩等六味投入提取罐中,投料完毕后关闭投料口,打开排气阀,先向贮罐内加药材6倍量的水,用浓缩器煮沸后,用泵打入提取罐,开启蒸汽加热煎煮二次,第一次2小时,第二次1.5小时;(3)合并煎液,以真空度为-0.04Mpa~-0.09Mpa,浓缩温度为50~80℃进行真空减压浓缩至相对密度为1.17~1.20的清膏;3)再加入桑叶细粉,混匀,以干燥温度80~150℃,真空度-0.085Mpa,履带速度120~180mm/min,进料泵100~130rpm,粉碎频率40~60Hz进行干燥4~8小时,粉碎成细粉,过筛,混匀,装入胶囊,即得。
优选的,本发明改进的玉蓝降糖胶囊制备方法为:(1)取桑叶30g粉碎成细粉;(2)将剩余桑叶与其余黄芩等六味投入提取罐中,投料完毕后关闭投料口,打开排气阀,先向贮罐内加药材6倍量的水,用浓缩器煮沸后,用泵打入提取罐,开启蒸汽加热煎煮二次,第一次2小时,第二次1.5小时;(3)合并煎液,以真空度为-0.06Mpa,浓缩温度为65℃进行真空减压浓缩至相对密度为1.18的清膏;3)再加入桑叶细粉,混匀,以干燥温度120℃,真空度-0.085Mpa,履带速度150mm/min,进料泵120rpm,粉碎频率50Hz进行干燥5小时,粉碎成细粉,过筛,混匀,装入胶囊,即得。
本发明所述玉蓝降糖胶囊的检测方法包括包括黄芩药材鉴别、牛蒡子药材鉴别、半枝莲药材鉴别、黄芩苷含量检测和芦丁含量检测。
本发明所述黄芩药材的鉴别方法为:(1)取本品内容物1g,加甲醇20ml,超声处理15分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为7:5:1的正丁醇-冰醋酸-水、为展开剂,置展开缸内预饱和20分钟,展开,取出,晾干,喷以5%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
本发明所述牛蒡子药材的鉴别方法为:取本品内容物2g,加60~90℃的石油醚20ml,加热回流30分钟,放冷,弃去石油醚,药渣挥干,加乙醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤液挥干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取牛蒡子苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为20:10:1的苯∶乙酸乙酯:水为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
本发明所述半枝莲药材的鉴别方法为:取本品内容物2g,加氯仿30ml,加热回流30分钟,滤过,滤液挥干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取半枝莲对照药材1g,同法制成对照药材溶液;再取木犀草素对照品、芹菜素对照品,分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述四种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为3∶3∶1甲苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,在105℃加热数分钟,置紫外光灯365nm下检视;供试品色谱中,在与对照品药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
本发明所述黄芩苷含量检测方法为:
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相;检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000;
对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.07mg的溶液,摇匀,即得;
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物,研细,取0.5g,精密称定,置25ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,精密称定,以功率为250W,频率为30KHz超声处理30分钟,放冷,加70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置50ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本发明所述芦丁含量检测方法为:
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为40:60甲醇-0.2~0.8%醋酸为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为358nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备 取芦丁对照品适量,精密称定,用甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入60-90%甲醇20ml,称定重量,以功率为100W,频率为40kHz超声处理30~60分钟,放冷,再称定重量,用60~90%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
优选的,
所述芦丁含量检测方法为:
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为40:60甲醇-0.4~0.6%醋酸为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为358nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备 取芦丁对照品适量,精密称定,用甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70~80%甲醇20ml,称定重量,以功率为100W,频率为40kHz超声处理45~55分钟,放冷,再称定重量,用70~80%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
进一步优选的,
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为40:60甲醇-0.5%醋酸为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为358nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备 取芦丁对照品适量,精密称定,用甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入75%甲醇20ml,称定重量,以功率为100W,频率为40kHz超声处理50分钟,放冷,再称定重量,用75%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
有益效果:
1、本发明改进后的制备方法在提取阶段调整了黄芩投料温控参数,将黄芩药材冷水投料改为沸水投料,破坏了黄芩酶的活性,消除了黄芩酶解,提高黄芩苷转移率和产品抑菌能力;在浓缩阶段采用了真空浓缩,降低了浓缩温度,使有效成分不被破坏;在干燥阶段采用了低温真空带式干燥法,缩短了干燥时间,提高生产效率,节约生产成本。
2、本申请检测方法包括对胶囊中黄芩、牛蒡子药材薄层鉴别的优化,对胶囊中黄芩苷含量测定方法的优化,增加了半枝莲药材薄层鉴别项目,通过方法学考察,该检测方法具有专属性强、耐用性好、良好的回收率等效果,能有效的检测改进制备工艺产品的质量情况,进一步提高产品质量。
3、本发明通过制备方法优化前后的对比实验,结果本申请的平均转移率为36.14%,高于优化前的26.14%;20批的黄芩苷平均含量为20.5mg/粒,高于优化前的16.4mg/粒,进一步证明了本方案提取方法的可行性。
4、本发明通过了黄芩药材优化前后薄层色谱方法的比较,结果黄芩药材优化前薄层色谱结果多为斑点模糊、拖尾、分离度不符合要求,只有个别批次符合规定,影响产品质量的判断;黄芩药材优化前薄层色谱结果均为斑点清晰,分离度符合要求,Rf值适中,表明重现性好。并通过了方法省实验证考察,表明优化后的黄芩药材薄层鉴别在不同湿度条件下,用高效薄层板和硅胶G商品板进行试验,色谱图斑点清晰,分离符合要求,Rf值适中,验证试验表明重现性好、耐用性好。
5、本发明通过了牛蒡子药材优化前后薄层色谱方法的比较,结果牛蒡子药材优化前薄层色谱结果多为斑点模糊、拖尾、分离度不符合要求,只有个别批次符合规定,影响产品质量的判断;牛蒡子药材优化前薄层色谱结果均为斑点清晰,分离度符合要求,Rf值适中,表明重现性好。并通过了方法学验证考察,结果表明化后的牛蒡子药材薄层鉴别在不同湿度条件下,用高效薄层板和硅胶G商品板进行试验,色谱图斑点清晰,分离符合要求,Rf值适中,验证试验表明重现性好、耐用性好。
6、本发明通过了半枝莲药材薄层色谱方法的筛选,结果优选方案供试品色谱中,在与对照品药材色谱和对照品色谱相应的位置上,荧光斑点斑点清晰,分离度符合要求,Rf值适中,重现性差。并通过方法学验证考察,结果表明优化后的半枝莲药材薄层鉴别在不同湿度条件下,用高效薄层板和硅胶G商品板进行试验,色谱图斑点清晰,分离符合要求,Rf值适中,验证试验表明重现性好、耐用性好。
7、本发明通过了对黄芩苷含量测定方法优化前后的比较,结果优化后10批成品的黄芩苷平均含量高于优化前的。故说明优化后的供试品提取方法更完全。本发明对黄芩含量的测定方法进行了方法验证考察,线性考察结果表明黄芩苷进样浓度在0.07μg/L~3.50mg/ml范围内呈良好的线性关系;精密度试验结果表明重复进样6次,计算相对标准偏差验证方法的精密度,计算RSD%值为1.22%,表明仪器精密度好;回收率试验结果表明栀子苷的回收率为97.45%,RSD为1.53%,说明本法有良好的回收率;专属性考察结果表明样品溶液色谱在对照品溶液色谱相应位置有相应的色谱峰,且阴性无干扰;并对10批样品进行了黄芩苷含量测定,结果10批黄芩苷平均含量均为19.78mg/粒,符合标准规定。
8、本发明通过了对芦丁含量测定方法优化前后的比较,结果优化后10批成品的芦丁平均含量高于优化前的平均含量,故说明优化后的供试品提取方法更完全,本发明对芦丁含量的测定方法进行了方法验证考察,线性考察结果表明芦丁进样浓度在0.10μg/L~5.00mg/ml范围内呈良好的线性关系;精密度试验结果表明重复进样6次,计算相对标准偏差验证方法的精密度,计算RSD%值为1.17%,表明仪器精密度好;回收率试验结果表明芦丁的回收率为98.33%,RSD为1.24%,说明本法有良好的回收率;专属性考察结果表明样品溶液色谱在对照品溶液色谱相应位置有相应的色谱峰,且阴性无干扰;并对10批样品进行了芦丁含量测定,结果10批芦丁平均含量均为0.2338mg/粒,暂定成品玉蓝降糖胶囊中芦丁含量标准为0.21mg/粒。
具体实施方式
下面通过具体实施例,对本发明的技术方案作进一步地具体说明。
实施例1
配方:黄芩620g、桑叶285g、牛蒡子260g、蓝花参180g、半枝莲170g、假万寿竹根120g、青葙子93g。
制备方法:(1)取桑叶30g粉碎成细粉;(2)将剩余桑叶与其余黄芩等六味投入提取罐中,投料完毕后关闭投料口,打开排气阀,先向贮罐内加药材6倍量的水,用浓缩器煮沸后,用泵打入提取罐,开启蒸汽加热煎煮二次,第一次2小时,第二次1.5小时;(3)合并煎液,以真空度为-0.06Mpa,浓缩温度为65℃进行真空减压浓缩至相对密度为1.18的清膏;3)再加入桑叶细粉,混匀,以干燥温度120℃,真空度-0.085Mpa,履带速度150mm/min,进料泵120rpm,粉碎频率50Hz进行干燥5小时,粉碎成细粉,过筛,混匀,装入胶囊,即得。
实施例2
配方:同实施例1。
制备方法:(1)取桑叶30g粉碎成细粉;(2)将剩余桑叶与其余黄芩等六味投入提取罐中,投料完毕后关闭投料口,打开排气阀,先向贮罐内加药材6倍量的水,用浓缩器煮沸后,用泵打入提取罐,开启蒸汽加热煎煮二次,第一次2小时,第二次1.5小时;(3)合并煎液,以真空度为-0.04MpaMpa,浓缩温度为50℃进行真空减压浓缩至相对密度为1.17的清膏;3)再加入桑叶细粉,混匀,以干燥温度80℃,真空度-0.085Mpa,履带速度120mm/min,进料泵100rpm,粉碎频率40Hz进行干燥4小时,粉碎成细粉,过筛,混匀,装入胶囊,即得。
实施例3
配方:同实施例1。
制备方法:(1)取桑叶30g粉碎成细粉;(2)将剩余桑叶与其余黄芩等六味投入提取罐中,投料完毕后关闭投料口,打开排气阀,先向贮罐内加药材6倍量的水,用浓缩器煮沸后,用泵打入提取罐,开启蒸汽加热煎煮二次,第一次2小时,第二次1.5小时;(3)合并煎液,以真空度为-0.09Mpa,浓缩温度为80℃进行真空减压浓缩至相对密度为1.20的清膏;3)再加入桑叶细粉,混匀,以干燥温度150℃,真空度-0.085Mpa,履带速度180mm/min,进料泵130rpm,粉碎频率60Hz进行干燥8小时,粉碎成细粉,过筛,混匀,装入胶囊,即得。
实施例4
配方:同实施例1。
制备方法:(1)取桑叶30g粉碎成细粉;(2)将剩余桑叶与其余黄芩等六味投入提取罐中,投料完毕后关闭投料口,打开排气阀,先向贮罐内加药材6倍量的水,用浓缩器煮沸后,用泵打入提取罐,开启蒸汽加热煎煮二次,第一次2小时,第二次1.5小时;(3)合并煎液,以真空度为-0.05Mpa,浓缩温度为60℃进行真空减压浓缩至相对密度为1..17的清膏;3)再加入桑叶细粉,混匀,以干燥温度100℃,真空度-0.085Mpa,履带速度130mm/min,进料泵110rpm,粉碎频率45Hz进行干燥6小时,粉碎成细粉,过筛,混匀,装入胶囊,即得。
实施例5
配方:同实施例1。
制备方法为;(1)取桑叶30g粉碎成细粉;(2)将剩余桑叶与其余黄芩等六味投入提取罐中,投料完毕后关闭投料口,打开排气阀,先向贮罐内加药材6倍量的水,用浓缩器煮沸后,用泵打入提取罐,开启蒸汽加热煎煮二次,第一次2小时,第二次1.5小时;(3)合并煎液,以真空度为-0.07Mpa,浓缩温度为70℃进行真空减压浓缩至相对密度为1.18的清膏;3)再加入桑叶细粉,混匀,以干燥温度110℃,真空度-0.085Mpa,履带速度140mm/min,进料泵115rpm,粉碎频率55Hz进行干燥5.5小时,粉碎成细粉,过筛,混匀,装入胶囊,即得。
实施例6
配方:同实施例1。
制备方法为;(1)取桑叶30g粉碎成细粉;(2)将剩余桑叶与其余黄芩等六味投入提取罐中,投料完毕后关闭投料口,打开排气阀,先向贮罐内加药材6倍量的水,用浓缩器煮沸后,用泵打入提取罐,开启蒸汽加热煎煮二次,第一次2小时,第二次1.5小时;(3)合并煎液,以真空度为-0.08Mpa,浓缩温度为75℃进行真空减压浓缩至相对密度为1.18的清膏;3)再加入桑叶细粉,混匀,以干燥温度130℃,真空度-0.085Mpa,履带速度175mm/min,进料泵125rpm,粉碎频率58Hz进行干燥7.5小时,粉碎成细粉,过筛,混匀,装入胶囊,即得。
实施例1~6制备的胶囊按分别按实施例7~11检测方法检测:
实施例7
【性状】
本品为胶囊剂,内容物为黄褐色至棕褐色的粉末及颗粒;味苦。
【鉴别】
(1)黄芩药材鉴别:取本品内容物1g,加甲醇20ml,超声处理15分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各8,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为7:5:1的正丁醇-冰醋酸-水、为展开剂,置展开缸内预饱和20分钟,展开,取出,晾干,喷以5%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(2)桑叶药材鉴别:取本品内容物4g,加石油醚(60~90℃)30ml,加热回流30分钟,放冷,弃去石油醚,药渣挥干,加乙醇30ml,加热回流30分钟,滤过,滤液蒸干。残渣加热水10ml,置60℃水浴上搅拌使溶解,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取桑叶对照药材2g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各3μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(5∶2∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(3)牛蒡子药材鉴别:取本品内容物2g,加60~90℃的石油醚20ml,加热回流30分钟,放冷,弃去石油醚,药渣挥干,加乙醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤液挥干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取牛蒡子苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各8μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为20:10:1的苯∶乙酸乙酯:水为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(4)半枝莲药材鉴别:取本品内容物2g,加氯仿30ml,加热回流30分钟,滤过,滤液挥干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取半枝莲对照药材1g,同法制成对照药材溶液;再取木犀草素对照品、芹菜素对照品,分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述四种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为3∶3∶1甲苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,在105℃加热数分钟,置紫外光灯365nm下检视;供试品色谱中,在与对照品药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
【检查】
按中国药典2020年版四部检测,应符合胶囊剂项下有关的各项规定。
【含量测定】
(1)黄芩苷含量测定:照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)为流动相;检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.07mg的溶液,摇匀,即得。
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物,研细,取0.5g,精密称定,置25ml量瓶中,加70%乙醇适量,超声处理30分钟,放冷,加70%乙醇稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置50ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计,不得少于15.0mg。
(2)芦丁含量测定:照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为40:60甲醇-0.5%醋酸为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为358nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备 取芦丁对照品适量,精密称定,用甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入75%甲醇20ml,称定重量,超声处理50分钟(功率为100W,频率为40kHz),放冷,再称定重量,用75%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含桑叶以芦丁(C27H30O16)计,不得少于0.21mg。
【功能主治】苗医:怡渥汗吴苯,曲靳挡嘎候。陡:科欠罗。阶:索干罗欧,卡欧豪凹诖,坳瓦罗岗蛙。
中医:清热养阴,生津止渴。用于阴虚内热所致的消渴病,2型糖尿病及并发症的改善。
【用法用量】口服,一次3~5粒,一日3次;饭前服用。
【注意事项】忌食辛辣,酒类;定期复查血糖。
【规格】每粒装0.3g
【贮藏】密封。
【有效期】1.5年。
实施例8
【性状】
本品为胶囊剂,内容物为黄褐色至棕褐色的粉末及颗粒;味苦。
【鉴别】
(1)黄芩药材鉴别:取本品内容物1g,加甲醇20ml,超声处理15分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为7:5:1的正丁醇-冰醋酸-水、为展开剂,置展开缸内预饱和20分钟,展开,取出,晾干,喷以5%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(2)桑叶药材鉴别:取本品内容物4g,加石油醚(60~90℃)30ml,加热回流30分钟,放冷,弃去石油醚,药渣挥干,加乙醇30ml,加热回流30分钟,滤过,滤液蒸干。残渣加热水10ml,置60℃水浴上搅拌使溶解,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取桑叶对照药材2g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各3μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(5∶2∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(3)牛蒡子药材鉴别:取本品内容物2g,加60~90℃的石油醚20ml,加热回流30分钟,放冷,弃去石油醚,药渣挥干,加乙醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤液挥干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取牛蒡子苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为20:10:1的苯∶乙酸乙酯:水为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(4)半枝莲药材鉴别:取本品内容物2g,加氯仿30ml,加热回流30分钟,滤过,滤液挥干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取半枝莲对照药材1g,同法制成对照药材溶液;再取木犀草素对照品、芹菜素对照品,分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述四种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为3∶3∶1甲苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,在105℃加热数分钟,置紫外光灯365nm下检视;供试品色谱中,在与对照品药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
【检查】
按中国药典2020年版四部检测,应符合胶囊剂项下有关的各项规定。
【含量测定】
(1)黄芩苷含量测定:照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)为流动相;检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.07mg的溶液,摇匀,即得。
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物,研细,取0.5g,精密称定,置25ml量瓶中,加70%乙醇适量,超声处理30分钟,放冷,加70%乙醇稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置50ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计,不得少于15.0mg。
(3)芦丁含量测定:照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为40:60甲醇-0.2%醋酸为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为358nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备 取芦丁对照品适量,精密称定,用甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入60%甲醇20ml,称定重量,超声处理30分钟(功率为100W,频率为40kHz),放冷,再称定重量,用60%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含桑叶以芦丁(C27H30O16)计,不得少于0.21mg。
【功能主治】苗医:怡渥汗吴苯,曲靳挡嘎候。陡:科欠罗。阶:索干罗欧,卡欧豪凹诖,坳瓦罗岗蛙。
中医:清热养阴,生津止渴。用于阴虚内热所致的消渴病,2型糖尿病及并发症的改善。
【用法用量】口服,一次3~5粒,一日3次;饭前服用。
【注意事项】忌食辛辣,酒类;定期复查血糖。
【规格】每粒装0.3g
【贮藏】密封。
【有效期】1.5年。
实施例9
【性状】
本品为胶囊剂,内容物为黄褐色至棕褐色的粉末及颗粒;味苦。
【鉴别】
(1)黄芩药材鉴别:取本品内容物1g,加甲醇20ml,超声处理15分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为7:5:1的正丁醇-冰醋酸-水、为展开剂,置展开缸内预饱和20分钟,展开,取出,晾干,喷以5%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(2)桑叶药材鉴别:取本品内容物4g,加石油醚(60~90℃)30ml,加热回流30分钟,放冷,弃去石油醚,药渣挥干,加乙醇30ml,加热回流30分钟,滤过,滤液蒸干。残渣加热水10ml,置60℃水浴上搅拌使溶解,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取桑叶对照药材2g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各3μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(5∶2∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(3)牛蒡子药材鉴别:取本品内容物2g,加60~90℃的石油醚20ml,加热回流30分钟,放冷,弃去石油醚,药渣挥干,加乙醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤液挥干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取牛蒡子苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为20:10:1的苯∶乙酸乙酯:水为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(4)半枝莲药材鉴别:取本品内容物2g,加氯仿30ml,加热回流30分钟,滤过,滤液挥干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取半枝莲对照药材1g,同法制成对照药材溶液;再取木犀草素对照品、芹菜素对照品,分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述四种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为3∶3∶1甲苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,在105℃加热数分钟,置紫外光灯365nm下检视;供试品色谱中,在与对照品药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
【检查】
按中国药典2020年版四部检测,应符合胶囊剂项下有关的各项规定。
【含量测定】
(1)黄芩苷含量测定:照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)为流动相;检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.07mg的溶液,摇匀,即得。
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物,研细,取0.5g,精密称定,置25ml量瓶中,加70%乙醇适量,超声处理30分钟,放冷,加70%乙醇稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置50ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计,不得少于15.0mg。
(4)芦丁含量测定:照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为40:60甲醇-0.8%醋酸为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为358nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备 取芦丁对照品适量,精密称定,用甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入90%甲醇20ml,称定重量,超声处理60分钟(功率为100W,频率为40kHz),放冷,再称定重量,用90%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含桑叶以芦丁(C27H30O16)计,不得少于0.21mg。
【功能主治】苗医:怡渥汗吴苯,曲靳挡嘎候。陡:科欠罗。阶:索干罗欧,卡欧豪凹诖,坳瓦罗岗蛙。
中医:清热养阴,生津止渴。用于阴虚内热所致的消渴病,2型糖尿病及并发症的改善。
【用法用量】口服,一次3~5粒,一日3次;饭前服用。
【注意事项】忌食辛辣,酒类;定期复查血糖。
【规格】每粒装0.3g
【贮藏】密封。
【有效期】1.5年。
实施例10
【性状】
本品为胶囊剂,内容物为黄褐色至棕褐色的粉末及颗粒;味苦。
【鉴别】
(1)黄芩药材鉴别:取本品内容物1g,加甲醇20ml,超声处理15分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各6μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为7:5:1的正丁醇-冰醋酸-水、为展开剂,置展开缸内预饱和20分钟,展开,取出,晾干,喷以5%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(2)桑叶药材鉴别:取本品内容物4g,加石油醚(60~90℃)30ml,加热回流30分钟,放冷,弃去石油醚,药渣挥干,加乙醇30ml,加热回流30分钟,滤过,滤液蒸干。残渣加热水10ml,置60℃水浴上搅拌使溶解,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取桑叶对照药材2g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各3μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(5∶2∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(3)牛蒡子药材鉴别:取本品内容物2g,加60~90℃的石油醚20ml,加热回流30分钟,放冷,弃去石油醚,药渣挥干,加乙醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤液挥干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取牛蒡子苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各6μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为20:10:1的苯∶乙酸乙酯:水为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(4)半枝莲药材鉴别:取本品内容物2g,加氯仿30ml,加热回流30分钟,滤过,滤液挥干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取半枝莲对照药材1g,同法制成对照药材溶液;再取木犀草素对照品、芹菜素对照品,分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述四种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为3∶3∶1甲苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,在105℃加热数分钟,置紫外光灯365nm下检视;供试品色谱中,在与对照品药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
【检查】
按中国药典2020年版四部检测,应符合胶囊剂项下有关的各项规定。
【含量测定】
(1)黄芩苷含量测定:照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)为流动相;检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.07mg的溶液,摇匀,即得。
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物,研细,取0.5g,精密称定,置25ml量瓶中,加70%乙醇适量,超声处理30分钟,放冷,加70%乙醇稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置50ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计,不得少于15.0mg。
(5)芦丁含量测定:照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为40:60甲醇-0.4%醋酸为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为358nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备 取芦丁对照品适量,精密称定,用甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇20ml,称定重量,超声处理45分钟(功率为100W,频率为40kHz),放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含桑叶以芦丁(C27H30O16)计,不得少于0.21mg。
【功能主治】苗医:怡渥汗吴苯,曲靳挡嘎候。陡:科欠罗。阶:索干罗欧,卡欧豪凹诖,坳瓦罗岗蛙。
中医:清热养阴,生津止渴。用于阴虚内热所致的消渴病,2型糖尿病及并发症的改善。
【用法用量】口服,一次3~5粒,一日3次;饭前服用。
【注意事项】忌食辛辣,酒类;定期复查血糖。
【规格】每粒装0.3g
【贮藏】密封。
【有效期】1.5年。
实施例11
【性状】
本品为胶囊剂,内容物为黄褐色至棕褐色的粉末及颗粒;味苦。
【鉴别】
(1)黄芩药材鉴别:取本品内容物1g,加甲醇20ml,超声处理15分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各9μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为7:5:1的正丁醇-冰醋酸-水、为展开剂,置展开缸内预饱和20分钟,展开,取出,晾干,喷以5%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(2)桑叶药材鉴别:取本品内容物4g,加石油醚(60~90℃)30ml,加热回流30分钟,放冷,弃去石油醚,药渣挥干,加乙醇30ml,加热回流30分钟,滤过,滤液蒸干。残渣加热水10ml,置60℃水浴上搅拌使溶解,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取桑叶对照药材2g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各3μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(5∶2∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(3)牛蒡子药材鉴别:取本品内容物2g,加60~90℃的石油醚20ml,加热回流30分钟,放冷,弃去石油醚,药渣挥干,加乙醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤液挥干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取牛蒡子苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各9μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为20:10:1的苯∶乙酸乙酯:水为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(4)半枝莲药材鉴别:取本品内容物2g,加氯仿30ml,加热回流30分钟,滤过,滤液挥干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取半枝莲对照药材1g,同法制成对照药材溶液;再取木犀草素对照品、芹菜素对照品,分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述四种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为3∶3∶1甲苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,在105℃加热数分钟,置紫外光灯365nm下检视;供试品色谱中,在与对照品药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
【检查】
按中国药典2020年版四部检测,应符合胶囊剂项下有关的各项规定。
【含量测定】
(1)黄芩苷含量测定:照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)为流动相;检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.07mg的溶液,摇匀,即得。
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物,研细,取0.5g,精密称定,置25ml量瓶中,加70%乙醇适量,超声处理30分钟,放冷,加70%乙醇稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置50ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计,不得少于15.0mg。
(6)芦丁含量测定:照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为40:60甲醇-0.6%醋酸为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为358nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备 取芦丁对照品适量,精密称定,用甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入80%甲醇20ml,称定重量,超声处理55分钟(功率为100W,频率为40kHz),放冷,再称定重量,用80%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含桑叶以芦丁(C27H30O16)计,不得少于0.21mg。
【功能主治】苗医:怡渥汗吴苯,曲靳挡嘎候。陡:科欠罗。阶:索干罗欧,卡欧豪凹诖,坳瓦罗岗蛙。
中医:清热养阴,生津止渴。用于阴虚内热所致的消渴病,2型糖尿病及并发症的改善。
【用法用量】口服,一次3~5粒,一日3次;饭前服用。
【注意事项】忌食辛辣,酒类;定期复查血糖。
【规格】每粒装0.3g
【贮藏】密封。
【有效期】1.5年。
为了进一步验证本发明的有效性,发明人进行了一系列的验证试验,摘录部分如下:
实验例1
1玉蓝降糖胶囊制备的提取浓缩条件考察对比
1.1配方:黄芩620g、桑叶285g、牛蒡子260g、蓝花参180g、半枝莲170g、假万寿竹根120g、青葙子93g。
1.2考察判定标准:转移率及黄芩苷含量测定。
1.3判定标准来源:玉蓝降糖胶囊(WS-10113(ZD-0113)-2002)。
1.4考察内容:
1.4.1优化前制备方法
(1)取桑叶30g粉碎成细粉;(2)剩余桑叶与其余黄芩投入提取罐中,投料完毕后关闭投料口,打开饮用水阀门加6倍量的水,开启夹套蒸汽进行煎煮两次,第一次2小时,第二次1.5小时;(3)合并煎液,以浓缩真空度为-0.05Mpa,浓缩温度为80℃进行减压浓缩至相对密度为1.17~1.20的清膏;(4)再加入桑叶细粉,混匀,以干燥温度100℃进行热风循环烘箱干燥10小时,粉碎成细粉,过筛,混匀,装入胶囊,即得。
1.4.2优化后制备方法
(1)取桑叶30g粉碎成细粉;(2)将剩余桑叶与其余黄芩等六味投入提取罐中,投料完毕后关闭投料口,打开排气阀,先向贮罐内加药材6倍量的水,用浓缩器煮沸后,用泵打入提取罐,开启蒸汽加热煎煮二次,第一次2小时,第二次1.5小时;(3)合并煎液,以真空度为-0.06Mpa,浓缩温度为65℃进行真空减压浓缩至相对密度为1.18的清膏;(4)再加入桑叶细粉,混匀,以干燥温度120℃,真空度-0.085Mpa,履带速度150mm/min,进料泵120rpm,粉碎频率50Hz进行干燥5小时,粉碎成细粉,过筛,混匀,装入胶囊,即得。
1.4.3检测方法
分别取上述“优化前”“优化后”制备的胶囊各20批,按“实施例7”黄芩苷含量测定方法进行检测,结果见表1。
表1制备方法优化前后结果对比表
结果:由表1可知,优化后的20批产品的转移率平均值高于优化前,黄芩苷含量平均值高于优化前,因此,证明优化后制备方法的可行性,优异性、合理性。
实验例2
1黄芩药材优化前后薄层色谱方法的比较
1.1优化前薄层色谱方法
取本品内容物1g,加甲醇20ml,超声处理15分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2)为展开剂,置展开缸内预饱和20分钟,展开,取出,晾干,喷以5%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
1.2优化后薄层色谱方法
取本品内容物1g,加甲醇20ml,超声处理15分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正丁醇-冰醋酸-水(7:5:1)为展开剂,置展开缸内预饱和20分钟,展开,取出,晾干,喷以5%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
1.3检测
取按“实验例1”项下的优选方法制备胶囊10批,分别按以上方法检测胶囊中黄芩药材鉴别,结果见表2。
表2黄芩药材薄层鉴别优化前后结果对比表
结果:由表2可知,黄芩药材优化前薄层色谱结果多为斑点模糊、拖尾、分离度不符合要求,只有个别批次符合规定,影响产品质量的判断;黄芩药材优化后薄层色谱结果均为斑点清晰,分离度符合要求,Rf值适中,表明重现性好。
2方法学验证
2.1专属性
取按“实施例1”制备的玉蓝降糖胶囊、黄芩苷对照品及缺黄芩阴性样品,同“实验例2”所述优化方法制得供试品溶液、对照品溶液及阴性供试品溶液,点于同一硅胶G薄层板上,以比例为7:5:1的正丁醇-冰醋酸-水、为展开剂,置展开缸内预饱和20分钟,展开,取出,晾干,喷以5%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,且斑点分离较好,阴性无干扰。
2.2重现性
取按“实施例1”制备的玉蓝降糖胶囊10批,分别按“实验例2”优选后的方法展开,结果见表3。
表3试验方法、条件及重现性试验结果
2.3耐用性
2.3.1不同薄层板的比较
取按“实施例1”制备的玉蓝降糖胶囊10批,分别按“实验例2”项的优选方法展开,比较青岛海洋化工厂分厂硅胶G商品板和高效硅胶G商品板的薄层,结果见表4。
表4不同薄层板耐用性结果表
结果:高效硅胶板商品板斑点清晰,分离符合要求,Rf值适中;硅胶G商品板斑点清晰,分离达到要求,Rf值适中,故本方法耐用性好。
2.3.2不同湿度的比较
比较了低湿度(30%)和高湿度(75%)环境下高效薄层板展开效果,结果见表5。
表5低湿度(30%)和高湿度(75%)环境下高效薄层板展开效果表
结果:斑点清晰,分离符合要求,Rf值适中,两个条件下均能得到较好的鉴别色谱。
经上述方法学验证试验,结果表明优化后的黄芩药材优化后的薄层鉴别在不同湿度条件下,用高效薄层板和硅胶G商品板进行试验,色谱图斑点清晰,分离符合要求,Rf值适中,验证试验表明优化方法的可靠性、重现性。
实验例3
1牛蒡子药材优化前后薄层色谱方法的比较
1.1优化前薄层色谱方法
取本品内容物2g,加60~90℃的石油醚20ml,加热回流30分钟,放冷,弃去石油醚,药渣挥干,加乙醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤液挥干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取牛蒡子苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-甲醇-水(40∶10∶1)的为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
1.2优化后薄层色谱方法
取本品内容物2g,加60~90℃的石油醚20ml,加热回流30分钟,放冷,弃去石油醚,药渣挥干,加乙醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤液挥干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取牛蒡子苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以苯∶乙酸乙酯:水(20:10:1)的为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
1.3检测
取按“实施例1”项下的优选方法制备胶囊10批,每批分别按以上方法检测牛蒡子药材的鉴别,结果见表6。
表6牛蒡子药材优化前后薄层色谱对比表
结果:由表6可知,牛蒡子药材优化前薄层色谱结果多为斑点模糊、拖尾、分离度不符合要求,只有个别批次符合规定,影响产品质量的判断;牛蒡子药材优化后薄层色谱结果均为斑点清晰,分离度符合要求,Rf值适中,表明优化方法的可靠性、重现性。
2、方法学验证
2.1专属性
取按“实施例1”制备的玉蓝降糖胶囊、牛蒡子苷对照品及缺牛蒡子阴性样品,同“实验例3”所述优化方法制得供试品溶液、对照品溶液及阴性供试品溶液,点于同一硅胶G薄层板上,以分别点于同一硅胶G薄层板上,以苯∶乙酸乙酯:水(20:10:1)的为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,且斑点分离较好,阴性无干扰。
2.2重现性
取按“实施例1”制备的玉蓝降糖胶囊10批,分别按“实验例3”优化方法展开,结果见表7。
表7试验方法、条件及重现性试验结果
2.3耐用性
2.3.1不同薄层板的比较
取按“实施例1”制备的玉蓝降糖胶囊10批,分别按“实验例3”优化方法展开,比较青岛海洋化工厂分厂硅胶G商品板和高效硅胶G商品板的薄层,结果见表8。
表8不同薄层板耐用性结果表
结果:高效硅胶板商品板斑点清晰,分离符合要求,Rf值适中;硅胶G商品板斑点清晰,分离达到要求,Rf值适中,故优化方法耐用性好。
2.3.2不同湿度的比较
比较了低湿度(30%)和高湿度(75%)环境下高效薄层板展开效果,结果见表9。
表9低湿度(30%)和高湿度(75%)环境下高效薄层板展开效果表
结果:斑点清晰,分离符合要求,Rf值适中,两个条件下均能得到较好的鉴别色谱。
经上述方法学验证试验,结果表明优化后的牛蒡子药材薄层鉴别在不同湿度条件下,用高效薄层板和硅胶G商品板进行试验,色谱图斑点清晰,分离符合要求,Rf值适中,验证试验表明重现性好、耐用性好。
实验例4
1半枝莲药材薄层色谱方法的筛选
取按“实施例1”项下的优选方法制备胶囊,分别按以下方法鉴别胶囊中半枝莲药材。
1.1方法一(药典标准)
取本品内容物2g,加甲醇30ml,超声处理40分钟,滤过,滤液回收溶剂至干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取半枝莲对照药材1g,同法制成对照药材溶液。再取木犀草素对照品、芹菜素对照品,分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述四种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(3∶3∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,在105℃加热数分钟,置紫外光灯(365nm)下检视。
结果:供试品色谱中,在与对照品药材色谱和对照品色谱相应的位置上,荧光斑点模糊,分离度合格,重现性差。
1.2方法二
根据“方法一”的薄层结果,首先考虑改变提取方法,即方法二为:取本品内容物2g,加甲醇30ml,加热回流提取40分钟,滤过,滤液烘干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取半枝莲对照药材1g,同法制成对照药材溶液。再取木犀草素对照品、芹菜素对照品,分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述四种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(3∶3∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,在105℃加热数分钟,置紫外光灯(365nm)下检视。
结果:供试品色谱中,在与对照品药材色谱和对照品色谱相应的位置上,荧光斑点模糊,分离度合格,重现性差。
1.3方法三
根据“方法二”的薄层结果,考虑改变提取溶剂,即方法三为:取本品内容物2g,加氯仿30ml,超声处理40分钟,滤过,滤液回收溶剂至干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取半枝莲对照药材1g,同法制成对照药材溶液。再取木犀草素对照品、芹菜素对照品,分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述四种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(3∶3∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,在105℃加热数分钟,置紫外光灯(365nm)下检视。
结果:供试品色谱中,在与对照品药材色谱和对照品色谱相应的位置上,荧光斑点清晰,分离度合格,重现性差。
1.4方法四
根据“方法三”的薄层结果,再改变提取方法,即方法四为:取本品内容物2g,加氯仿30ml,加热回流提取40分钟,滤过,滤液烘干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取半枝莲对照药材1g,同法制成对照药材溶液。再取木犀草素对照品、芹菜素对照品,分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述四种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(3∶3∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,在105℃加热数分钟,置紫外光灯(365nm)下检视。
结果:供试品色谱中,在与对照品药材色谱和对照品色谱相应的位置上,荧光斑点斑点清晰,分离度符合要求,Rf值适中,重现性差。故“方法四”为半枝莲药材薄层色谱方法优选方法。
2方法学验证
2.1专属性
取按“实施例1”制备的玉蓝降糖胶囊、半枝莲对照药材对照药材及缺半枝莲阴性样品,同“实验例4”所述“方法四”制得供试品溶液、对照品溶液及阴性供试品溶液,点于同一硅胶G薄层板上,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(3∶3∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,在105℃加热数分钟,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,且斑点分离较好,阴性无干扰。
2.2重现性
取按“实施例1”制备的玉蓝降糖胶囊10批,分别按“实验例4”中“方法四”展开,结果见表10。
表10试验方法、条件及重现性试验结果
2.3耐用性
2.3.1不同薄层板的比较
取按“实施例1”制备的玉蓝降糖胶囊10批,分别按“实验例4”中“方法四”的方法展开,比较青岛海洋化工厂分厂硅胶G商品板和高效硅胶G商品板的薄层,结果见表11。
表11不同薄层板耐用性结果表
结果:高效硅胶板商品板斑点清晰,分离符合要求,Rf值适中;硅胶G商品板斑点清晰,分离达到要求,Rf值适中,故本方法耐用性好。
2.3.2不同湿度的比较
比较了低湿度(30%)和高湿度(75%)环境下高效薄层板展开效果,结果见表12。
表12低湿度(30%)和高湿度(75%)环境下高效薄层板展开效果表
结果:斑点清晰,分离符合要求,Rf值适中,两个条件下均能得到较好的鉴别色谱。
经上述方法学验证试验,结果表明优化后的半枝莲药材薄层鉴别在不同湿度条件下,用高效薄层板和硅胶G商品板进行试验,色谱图斑点清晰,分离符合要求,Rf值适中,验证试验表明重现性好、耐用性好。
实验例5
1黄芩苷含量测定方法优化前后的比较
取按“实施例1”项下的优选方法制备胶囊各十批,按以下方法检测黄芩苷的含量,结果见表13。
1.1优化前检测方法
1.1.1色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相;检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000;
1.1.2对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.07mg的溶液,摇匀,即得;
1.1.3供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物,研细,取0.5g,精密称定,置25ml量瓶中,加70%乙醇适量,超声处理30分钟,放冷,加70%乙醇至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置50ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
1.1.4测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
1.2优化后检测方法
1.2.1色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相;检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000;
1.2.2对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.07mg的溶液,摇匀,即得;
1.2.3供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物,研细,称取0.5g,精密称定,置25ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,精密称定,以功率为250W,频率为30KHz超声处理30分钟,放冷,加70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置50ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
1.2.4测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
表13黄芩苷优化前后结果对比表
由上表可知,优化后10批成品的黄芩苷平均含量高于优化前的。故说明优化后的供试品提取方法更完全。
2方法验证
2.1线性考察 精密取浓度0.07mg/ml、0.14mg/ml、0.35mg/ml、0.7mg/ml、1.40mg/ml、3.50mg/ml的黄芩苷溶液,以标准浓度对其相含量进行回归分析,得到线性方程为Y=2826.4x+103.01,R2=0.9996,表明黄芩苷进样浓度在0.07μg/L~3.50mg/ml范围内呈良好的线性关系,结果见表14。
表14黄芩苷线性关系考察
2.2精密度试验 取以上按对照品溶液的制备方法制备的0.07mg/ml黄芩苷对照品溶液,在上述色谱条件下,重复进样6次,计算相对标准偏差验证方法的精密度,计算RSD%值为1.22%,表明仪器精密度好,测定结果见表15。
表15精密度试验
2.3回收率试验 采用加样回收,精密吸取已测定黄芩苷含量为0.48mg/粒的样品,再加黄芩苷对照品适量,按实施例1所述色谱条件测定,计算回收率,结果见表16,黄芩苷的回收率为97.45%,RSD为1.53%,说明本法有良好的回收率。
表16回收率试验
2.4专属性
取实施例1制备的玉蓝降糖胶囊及阴性样品按供试品溶液制备方法制备样品溶液及阴性样品溶液,按上述色谱条件,分别取对照品溶液、样品溶液、阴性样品溶液注入液相色谱仪,样品溶液色谱在对照品溶液色谱相应位置有相应的色谱峰,且阴性无干扰。
2.5稳定性试验
按实验例5“1.2.3”项下方法制备供试品溶液一份,室温放置,按拟定色谱条件下于0,2,4,8,12,24h分别进样,测定峰面积。供试品溶液RSD%为0.82%,表明该检测方法黄芩苷在24小时内相对稳定。稳定性试验结果见表17。
表17稳定性试验结果
3.4.6十批含量样品测定:结果见表18。
表18十批样品含量测定结果
结果:由表18可知,10批样品黄芩苷(C21H18O11)的平均含量为19.78mg/粒,符合规定(每粒含黄芩以黄芩苷计,不得少于15.0mg)。
实验例6
1芦丁含量测定筛选
1.1优化后检测方法
桑叶含量测定为原标准未收载,不能有效控制产品质,为了提升质量标准,参照2020版一部药典中桑叶的质量标准,结合玉蓝降糖胶囊的成分特征,发明人经过大量的实验筛选对比,得到玉蓝降糖胶囊中桑叶药材含量测定方法为:
1.1.1色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为40:60甲醇-0.5%醋酸为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为358nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于5000;
1.1.2对照品溶液的制备 取芦丁对照品适量,精密称定,用甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得;
1.1.3供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入75%甲醇20ml,称定重量,以功率为100W,频率为40kHz超声处理50分钟,放冷,再称定重量,用75%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
1.1.4测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
1.2优化前检测方法(药典标准)
1.2.1色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇为流动相A,以0.5%磷酸溶液为流动相B,按表19中的规定进行梯度洗脱;检测波长为358nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于5000。
表19梯度洗脱表
1.2.2照品溶液的制备 取芦丁对照品适量,精密称定,用甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得。
1.2.3供试品溶液的制备 取本品内容物1g,精密称定,置圆底烧瓶中,加甲醇50ml,加热回流30分钟,滤过,滤渣再用甲醇50ml,同法提取2次,合并滤液,减压回收溶剂,残渣用甲醇溶解,转移至25ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
1.2.4测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
1.3检测
取按“实施例1”项下的优选方法制备胶囊各十批,按以上方法检测桑叶中芦丁的含量,结果见表20。
表20芦丁含量对比表
由上表20可知,优化后10批成品的芦丁平均含量高于优化前的平均含量,故说明优化后的供试品提取方法更完全。
2方法验证
2.1线性考察 精密取浓度0.10mg/ml、0.20mg/ml、0.50mg/ml、1.00mg/ml、2.00mg/ml、5.00mg/ml的芦丁对照品溶液,以标准浓度对其相含量进行回归分析,得到线性方程为Y=9244x+22.218,R2=0.9999,表明芦丁进样浓度在0.10μg/L~5.00mg/ml范围内呈良好的线性关系,结果见表21。
表21芦丁线性关系考察
2.2精密度试验 取以上按对照品溶液的制备方法制备的0.1mg/ml芦丁对照品溶液,在上述色谱条件下,重复进样6次,计算相对标准偏差验证方法的精密度,计算RSD%值为1.17%,表明仪器精密度好,测定结果见表22。
表22精密度试验
2.3回收率试验 采用加样回收,精密吸取已测定芦丁含量为0.23mg/粒的样品,再加芦丁对照品适量,按实施例1所述色谱条件测定,计算回收率,结果见表23,芦丁的回收率为98.33%,RSD为1.24%,说明本法有良好的回收率。
表23回收率试验
2.4专属性
取实施例1制备的玉蓝降糖胶囊及阴性样品按供试品溶液制备方法制备样品溶液及阴性样品溶液,按上述色谱条件,分别取对照品溶液、样品溶液、阴性样品溶液注入液相色谱仪,样品溶液色谱在对照品溶液色谱相应位置有相应的色谱峰,且阴性无干扰。
2.5稳定性试验
按实验例6“1.1.3”项下方法制备供试品溶液一份,室温放置,按拟定色谱条件下于0,2,4,8,12,24h分别进样,测定峰面积。供试品溶液RSD%为0.92%,表明该检测方法芦丁在24小时内相对稳定。稳定性试验结果见表24。
表24稳定性试验结果
3.4.6十批含量样品测定:结果见表25。
表25十批样品含量测定结果
结果:由表25可知,10批样品含芦丁(C27H30O16)的平均含量为0.2338mg/粒,暂定成品玉蓝降糖胶囊中芦丁含量标准为0.21mg/粒。
虽然,上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验,对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作出一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的,因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种改进的玉蓝降糖胶囊制备方法,所述胶囊处方为:
处方黄芩620g 桑叶285g 牛蒡子260g 蓝花参180g
半枝莲170g 假万寿竹根120g 青葙子93g
其特征在于,所述玉蓝降糖胶囊的制备方法为:
(1)取桑叶30g粉碎成细粉;(2)将剩余桑叶与其余黄芩等六味投入提取罐中,投料完毕后关闭投料口,打开排气阀,先向贮罐内加药材6倍量的水,用浓缩器煮沸后,用泵打入提取罐,开启蒸汽加热煎煮二次,第一次2小时,第二次1.5小时;(3)合并煎液,以真空度为-0.04Mpa~-0.09Mpa,浓缩温度为50~80℃进行真空减压浓缩至相对密度为1.17~1.20的清膏;(4)再加入桑叶细粉,混匀,以干燥温度80~150℃,真空度-0.085Mpa,履带速度120~180mm/min,进料泵100~130rpm,粉碎频率40~60Hz进行干燥4~8小时,粉碎成细粉,过筛,混匀,装入胶囊,即得。
2.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,玉蓝降糖胶囊的制备方法为:(1)取桑叶30g粉碎成细粉;(2)将剩余桑叶与其余黄芩等六味投入提取罐中,投料完毕后关闭投料口,打开排气阀,先向贮罐内加药材6倍量的水,用浓缩器煮沸后,用泵打入提取罐,开启蒸汽加热煎煮二次,第一次2小时,第二次1.5小时;(3)合并煎液,以真空度为-0.06Mpa,浓缩温度为65℃进行真空减压浓缩至相对密度为1.18的清膏;(4)再加入桑叶细粉,混匀,以干燥温度120℃,真空度-0.085Mpa,履带速度150mm/min,进料泵120rpm,粉碎频率50Hz进行干燥5小时,粉碎成细粉,过筛,混匀,装入胶囊,即得。
3.一种用于权利要求1或2制备方法制备的玉蓝降糖胶囊的检测方法,其特征在于,所述玉蓝降糖胶囊的检测方法包括黄芩药材鉴别、牛蒡子药材鉴别、半枝莲药材鉴别、黄芩苷含量检测和芦丁含量检测。
4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述黄芩药材的鉴别方法为:(1)取本品内容物1g,加甲醇20ml,超声处理15分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为7:5:1的正丁醇-冰醋酸-水、为展开剂,置展开缸内预饱和20分钟,展开,取出,晾干,喷以5%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
5.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述牛蒡子药材的鉴别方法为:取本品内容物2g,加60~90℃的石油醚20ml,加热回流30分钟,放冷,弃去石油醚,药渣挥干,加乙醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤液挥干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取牛蒡子苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为20:10:1的苯∶乙酸乙酯:水为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
6.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述半枝莲药材的鉴别方法为:取本品内容物2g,加氯仿30ml,加热回流30分钟,滤过,滤液挥干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取半枝莲对照药材1g,同法制成对照药材溶液;再取木犀草素对照品、芹菜素对照品,分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述四种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以比例为3∶3∶1甲苯-甲酸乙酯-甲酸的为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,在105℃加热数分钟,置紫外光灯365nm下检视;供试品色谱中,在与对照品药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
7.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述黄芩苷含量检测方法为:
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相;检测波长为280nm,理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000;
对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.07mg的溶液,摇匀,即得;
供试品溶液的制备取装量差异项下的内容物,研细,取0.5g,精密称定,置25ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,精密称定,以功率为250W,频率为30KHz超声处理30分钟,放冷,加70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置50ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
8.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述芦丁含量检测方法为:
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为40:60甲醇-0.2~0.8%醋酸为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为358nm,理论板数按芦丁峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备取芦丁对照品适量,精密称定,用甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备取装量差异项下的内容物0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入60-90%甲醇20ml,称定重量,以功率为100W,频率为40kHz超声处理30~60分钟,放冷,再称定重量,用60~90%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
9.根据权利要求8所述的检测方法,其特征在于,所述芦丁含量检测方法为:
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为40:60甲醇-0.4~0.6%醋酸为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为358nm,理论板数按芦丁峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备取芦丁对照品适量,精密称定,用甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备取装量差异项下的内容物0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70~80%甲醇20ml,称定重量,以功率为100W,频率为40kHz超声处理45~55分钟,放冷,再称定重量,用70~80%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
10.根据权利要求9所述的检测方法,其特征在于,所述芦丁含量检测方法为:
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以比例为40:60甲醇-0.5%醋酸为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为358nm,理论板数按芦丁峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备取芦丁对照品适量,精密称定,用甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备取装量差异项下的内容物0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入75%甲醇20ml,称定重量,以功率为100W,频率为40kHz超声处理50分钟,放冷,再称定重量,用75%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
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侯光明等: "玉兰降糖胶囊治疗糖尿病视网膜病变临床研究", 《中国医药指南》 * |
李兴等: "玉兰降糖胶囊治疗2型糖尿病临床疗效观察", 《中西医结合心脑血管病杂志》 * |
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