CN113543793A - 螺旋藻提取物的制备方法、和包含螺旋藻提取物的用于改善认知能力的药学组合物及保健功能食品 - Google Patents

螺旋藻提取物的制备方法、和包含螺旋藻提取物的用于改善认知能力的药学组合物及保健功能食品 Download PDF

Info

Publication number
CN113543793A
CN113543793A CN202080018458.3A CN202080018458A CN113543793A CN 113543793 A CN113543793 A CN 113543793A CN 202080018458 A CN202080018458 A CN 202080018458A CN 113543793 A CN113543793 A CN 113543793A
Authority
CN
China
Prior art keywords
spirulina
extract
spirulina extract
maxima
temperature
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202080018458.3A
Other languages
English (en)
Inventor
康徒衡
金兑昊
李荣得
崔云龙
柳龙均
李原圭
朴雅米
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Korea Institute of Ocean Science and Technology KIOST
Original Assignee
Korea Institute of Ocean Science and Technology KIOST
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Korea Institute of Ocean Science and Technology KIOST filed Critical Korea Institute of Ocean Science and Technology KIOST
Publication of CN113543793A publication Critical patent/CN113543793A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/195—Proteins from microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/748—Cyanobacteria, i.e. blue-green bacteria or blue-green algae, e.g. spirulina
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D11/00—Solvent extraction
    • B01D11/02—Solvent extraction of solids
    • B01D11/028—Flow sheets
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D11/00—Solvent extraction
    • B01D11/02—Solvent extraction of solids
    • B01D11/0288—Applications, solvents
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D11/00—Solvent extraction
    • B01D11/04—Solvent extraction of solutions which are liquid
    • B01D11/0419—Solvent extraction of solutions which are liquid in combination with an electric or magnetic field or with vibrations
    • B01D11/0423—Applying ultrasound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/322—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the health of the nervous system or on mental function
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明的目的在于，在提高螺旋藻提取物的提取收率的同时保持提取物所包含的叶绿素的总含量。并且，本发明的目的在于，提供包含螺旋藻提取物作为有效成分，用于预防或治疗神经退行性疾病的药学组合物及保健功能食品，并提供利用螺旋藻提取物的神经退行性疾病的治疗方法。本发明提供一种螺旋藻提取物的制备方法，包括：步骤(a)，准备螺旋藻粉末；步骤(b)，向上述螺旋藻粉末加入50％至80％的酒精，在15℃至35℃的温度下进行超声波预处理；步骤(c)，在50℃至80℃的温度下提取螺旋藻提取物；步骤(d)，真空浓缩上述螺旋藻提取物；以及步骤(e)，冷冻干燥真空浓缩的上述螺旋藻提取物。

Description

螺旋藻提取物的制备方法、和包含螺旋藻提取物的用于改善 认知能力的药学组合物及保健功能食品
技术领域
本发明涉及螺旋藻提取物的制备方法、包含螺旋藻提取物的用于预防或治疗神经退行性疾病的药学组合物及保健功能食品以及利用螺旋藻提取物的神经退行性疾病的治疗方法，更详细地，涉及能够在提高提取收率的同时保持提取物所包含的叶绿素的总含量的螺旋藻提取物的制备方法、包含螺旋藻提取物的用于预防或治疗神经退行性疾病的药学组合物及保健功能食品以及利用螺旋藻提取物的神经退行性疾病治疗方法。
背景技术
痴呆症以记忆力障碍、判断力丧失等精神功能的普遍障碍为特征，是一种荒废人的生活的疾病。在韩国65岁以上的老年人中，痴呆的发病率约为8％，经估计，当前，韩国老年人口的约430万中约有35万人患有痴呆疾病(首尔特别市痴呆症中心，2015年痴呆疾病现状报告)。
随着人口老龄化的急速进程，预计痴呆患者的数量将激增，因此急需制定应对痴呆症的对策。并且，老年人医疗费持续增长，同时，2010年的老年痴呆症诊疗费相比前一年剧增32％(健康保险审查评价院，2010年医疗费用统计指标)。
虽然在痴呆症种类中占71％的很大一部分的阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease，AD)的病因尚未明确，但观察阿尔茨海默病患者的脑组织可以确认胆碱能神经的损伤很严重。因此，试图根据胆碱能神经的损伤来解释阿尔茨海默病的病因的理论称为胆碱能假说，近来，正在进行为了诱导乙酰胆碱(acetylcholine)的功能降低而阻碍乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase)的活性的尝试。并且，已知在阿尔茨海默病患者的脑中，由于β-分泌酶、γ-分泌酶(β,γ-secretase)的活性引起称为β淀粉样蛋白(Amyloid beta)的非正常的毒性蛋白的沉积形成神经斑和神经结，从而引起认知能力的损伤。
目前，用作阿尔茨海默病治疗剂的为乙酰胆碱酯酶抑制剂，有他克林(tacrine)、多奈哌齐(donepezil)、卡巴拉汀(rivastigmine)以及加兰他敏(galantamine)等。其中，加兰他敏是最近得到美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration，FDA)的认可并使用的，通过阻止乙酰胆碱的分解来保持突触中的乙酰胆碱浓度，从而表现出改善降低的认知能力的效果。
然而，上述药品为通过合成制备的单一制剂药物，效果为暂时且微弱的，而且不能选择性地只作用于脑部，因此具有由于各种副作用而难以长时间给药的缺点。并且，加兰他敏的安全型由于其毒性和副作用而受到怀疑，上述副作用降低了消费者的信赖度。因此，需要开发更为安全、功效优良的天然功能性材料的药品。并且，作为新一代阿尔茨海默病治疗剂而备受期待的与β淀粉样蛋白的沉积相关的β分泌酶的活性抑制物质仍未开发出来。
另一方面，螺旋藻(Spirulina)为在如非洲的乍得湖及墨西哥的特斯科科湖等的热带地区碱性湖泊的水面旺盛生长的属于极小的藻类(algae)的微生物。螺旋藻的细胞内有大量的叶绿素和藻蓝蛋白等，可以吸收太阳光来活跃地进行碳同化作用。叶绿素和藻蓝蛋白等色素显出翠蓝色，由此将螺旋藻归为蓝藻类(blue-green algae)。
螺旋藻为人可以食用的微生物，含有55％～70％的蛋白质、6％～9％的脂肪、15％～20％的碳水化合物，含有大量的无机质、维生素、纤维质及色素成分。螺旋藻不仅包含大量的蛋白质，还包含8种人体必需氨基酸，脂肪成分中游离脂肪酸(free-fatty acid)达到70％～80％，亚油酸(linoleic acid)、γ-亚油酸(γ-linolenic acid)等脂肪酸占有很大比重。螺旋藻的碳水化合物含量虽然少，但主要由鼠李糖和糖原组成，可在不依靠胰岛素的帮助的情况下被吸收，因此可以用作糖尿病患者的能量源。当地人长久以来采集该微细藻类并用作食用，营养学研究结果表明，高含量的蛋白质和包括氨基酸在内的各种营养素成分的组成是对人体健康非常有益的成分。
另一方面，作为与本发明相关的现有技术，韩国授权专利公报第10-1418545号提供了用于预防或治疗退行性神经系统脑疾病的药学组合物，但没有公开如本发明的使用天然功能性材料的用于治疗神经退行性疾病的组合物。
发明内容
技术问题
本发明的目的在于，提供螺旋藻提取物的制备方法，其可以提高用于预防或治疗神经退行性疾病的螺旋藻提取物的提取收率。
并且，本发明的目的在于，提供螺旋藻提取物的制备方法，其可以在提高螺旋藻提取物的提取收率的同时保持提取物所包含的叶绿素的总含量。
并且，本发明的目的在于，提供包含螺旋藻提取物作为有效成分的能够预防或治疗神经退行性疾病的药学组合物及保健功能食品。
技术方案
为了实现上述目的，本发明提供一种螺旋藻提取物的制备方法，包括：步骤(a)，准备螺旋藻粉末；步骤(b)，向上述螺旋藻粉末加入50％至80％的酒精，在15℃至35℃的温度下进行超声波预处理；步骤(c)，在50℃至80℃的温度下提取螺旋藻提取物；步骤(d)，真空浓缩上述螺旋藻提取物；以及步骤(e)，冷冻干燥真空浓缩的上述螺旋藻提取物。
上述步骤(a)的上述螺旋藻可以为选自由极大螺旋藻(Spirulina maxima)、钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)、吉特勒氏螺旋藻(Spirulina geitleri)、连体螺旋藻(Spirulina siamese)、大螺旋藻(Spirulina major)、盐泽螺旋藻(Spirulina subsalsa)、为首螺旋藻(Spirulina princeps)、宽松螺旋藻(Spirulina laxissima)、库塔螺旋藻(Spirulina curta)以及卷曲螺旋藻(Spirulina spirulinoides)组成的组中的一种。
在上述步骤(b)中，能够以1∶8(w/w)～1∶10(w/w)的比例混合上述螺旋藻粉末与上述酒精。
上述步骤(b)的上述超声波预处理的超声波频率可以为30kHz至50kHz。
上述步骤(b)的上述超声波预处理可以进行6小时至10小时。
上述步骤(c)的上述提取可以进行2小时至6小时。
上述步骤(d)的上述真空浓缩可以在30℃至60℃的温度下以50hPa至150hPa的压力进行。
上述步骤(e)的上述冷冻干燥可以在-70℃至-40℃的温度下以0毫托(mTorr)至10毫托的压力进行。
并且，本发明提供用于预防或治疗神经退行性疾病的药学组合物，其包含螺旋藻提取物作为有效成分，上述螺旋藻提取物通过如下方法获得：准备螺旋藻粉末后，向上述螺旋藻粉末加入50％至80％的酒精，在15℃至35℃的温度下进行超声波预处理后，在50℃至80℃的温度下提取螺旋藻提取物，之后真空浓缩并冷冻干燥上述提取物。
上述螺旋藻提取物可以包含叶绿素a。
上述神经退行性疾病可以为阿尔茨海默型痴呆、脑血管性痴呆、匹克病、克鲁兹佛得-雅克病、头部损伤引起的痴呆或者帕金森病。
上述组合物可以恢复作为神经退行性疾病症状的认知能力降低。
并且，本发明提供用于预防或治疗神经退行性疾病的保健功能食品，其包含螺旋藻提取物作为有效成分，上述螺旋藻提取物通过如下方法获得：准备螺旋藻粉末后，向上述螺旋藻粉末加入50％至80％的酒精，在15℃至35℃的温度下进行超声波预处理后，在50℃至80℃的温度下提取螺旋藻提取物，之后真空浓缩并冷冻干燥上述提取物。
上述螺旋藻提取物可以包含叶绿素a。
上述神经退行性疾病可以为阿尔茨海默型痴呆、脑血管性痴呆、匹克病、克鲁兹佛得-雅克病、头部损伤引起的痴呆或者帕金森病。
上述组合物可以恢复作为退行性疾病症状的认知能力降低。
并且，本发明提供一种神经退行性疾病治疗方法，包括向患有神经退行性疾病的个体给药螺旋藻提取物的步骤，上述螺旋藻提取物通过如下方法获得：准备螺旋藻粉末后，向上述螺旋藻粉末加入50％至80％的酒精，在15℃至35℃的温度下进行超声波预处理后，在50℃至80℃的温度下提取螺旋藻提取物，之后真空浓缩并冷冻干燥上述提取物。
上述螺旋藻提取物的一次剂量可以为150mg/kg至450mg/kg。
发明的效果
本发明的螺旋藻提取物的制备方法具有可以在提高螺旋藻提取物的提取收率的同时保持提取物所包含的叶绿素的总含量的效果。
并且，可以通过提供包含根据本发明提取的螺旋藻提取物作为有效成分的药学组合物及保健功能食品来预防并治疗如阿尔茨海默病的神经退行性疾病。
附图说明
图1为本发明一实施例的螺旋藻提取物的制备方法的工序流程图。
图2为在水迷宫实验中比较对照组与螺旋藻提取物给药组的逃避潜伏期(escapelatency time)的柱状图(*р＜005，**р＜001，***р＜0001)。
图3为在被动回避实验中比较对照组与螺旋藻提取物给药组的延迟时间(latencytime)的柱状图(*р＜005，**р＜001，***р＜0001)。
图4为测定对照组与螺旋藻提取物给药组的乙酰胆碱酯酶的抑制活性的柱状图(*р＜005，**р＜001，***р＜0001)。
图5为测定对照组与螺旋藻提取物给药组的脑源性神经营养因子(BDNF)的表达激活的柱状图(*р＜005，**р＜001，***р＜0001)。
图6为测定对照组与螺旋藻提取物给药组的上游转录因子(p-CREB)的表达激活的柱状图(*р＜005，**р＜001，***р＜0001)。
图7为测定对照组与螺旋藻提取物给药组的上游转录因子(磷酸化的细胞外信号调节激酶，p-ERK)的表达激活的柱状图(*р＜005，**р＜001，***р＜0001)。
图8为对诱导退行性脑疾病的实验鼠的大脑海马体进行组织切开后比较对照组与螺旋藻提取物给药组的抗体荧光染色结果的照片。
具体实施方式
图1为本发明一实施例的螺旋藻提取物的制备方法的工序流程图。
参照图1，本发明一实施例的螺旋藻提取物通过如下步骤制备：步骤(a)，准备螺旋藻粉末；步骤(b)，向上述螺旋藻粉末加入50％至80％的酒精，在15℃至35℃的温度下进行超声波预处理；步骤(c)，在50℃至80℃的温度下提取螺旋藻提取物；步骤(d)，真空浓缩上述螺旋藻提取物；以及步骤(e)，冷冻干燥真空浓缩的上述螺旋藻提取物。
本发明实施方式
在下述说明中，仅说明理解本发明的实施例所需的部分，需要留意的是，将在不混淆本发明要旨的范围内省略此外部分的说明。
以下说明的本说明书及发明要求保护范围中所使用的术语或词语不应局限于通常的含义或词典中的释义来解释，应立足于发明人可以为了以最佳的方法说明自己的发明而对术语的概念进行适当的定义的原则，以符合本发明技术思想的含义和概念来解释。由此，本说明书中记载的实施例和附图中示出的结构仅为本发明的优选实施例，而不代表本发明的全部技术思想，应该理解的是，在提出本申请的时间点，还存在可以替代上述实施例的多种等同技术方案和变形例。
螺旋藻提取物的制备方法
图1为本发明一实施例的螺旋藻提取物的制备方法的工序流程图。
参照图1，本发明一实施例的螺旋藻提取物通过如下步骤制备：步骤(a)，准备螺旋藻粉末；步骤(b)，向上述螺旋藻粉末加入50％至80％的酒精，在15℃至35℃的温度下进行超声波预处理；步骤(c)，在50℃至80℃的温度下提取螺旋藻提取物；步骤(d)，真空浓缩上述螺旋藻提取物；以及步骤(e)，冷冻干燥真空浓缩的上述螺旋藻提取物。
首先，准备螺旋藻粉末(步骤S10)。
螺旋藻为青绿色的蓝藻类，呈螺旋形态，大小为宽约10μm、长约300μm～500μm，可以通过肉眼观察到每一个细胞。螺旋藻一词与螺旋(spiral)一词源于同一词源，两个词都来源于表示纠缠或螺旋形含义的拉丁语。螺旋藻是自1967年召开的应用微生物国际会议中发表的有关埃塞俄比亚附近的Aranguadi湖生长的螺旋藻后才广为人知的，这种新的植物与小球藻相似，但蛋白质的含量高出很多，消化吸收率相当好，易于培养、收获，表现出强碱性。海藻类通过主颜色分为蓝、绿、红、褐色，螺旋藻为青绿的一种，其颜色是细胞内的叶绿素(绿色)的藻蓝蛋白(蓝色)所发出的颜色。
上述螺旋藻目前已知具有预防特应性皮炎的效果，已知具有抑制皮肤老化的效果，已知具有改善脂肪代谢的效果，但至今为止，对于其他生理活性的研究尚不充分。
于是，本发明人在寻找在体内稳定且治疗效果优秀的用于治疗及预防神经退行性疾病的治疗剂的过程中，确认螺旋藻提取物具有上述效果，从而完成了本发明。
尤其，在本发明中确认螺旋藻提取物在认知能力改善方面具有良好效果并且保护脑神经细胞的活性高，从而具有治疗或预防神经退行性疾病的卓越效果。
本发明所使用的上述螺旋藻可以选自由极大螺旋藻、钝顶螺旋藻、吉特勒氏螺旋藻、连体螺旋藻、大螺旋藻、盐泽螺旋藻、为首螺旋藻、宽松螺旋藻、库塔螺旋藻以及卷曲螺旋藻组成的组中，优选地，可以使用极大螺旋藻或钝顶螺旋藻，更优选地，可以使用极大螺旋藻。
上述螺旋藻粉末可以为干燥的粉末状态或者冷冻干燥的状态，但不限定于此。
向上述螺旋藻粉末加入50％至80％的酒精，在15℃至35℃的温度下进行超声波预处理(步骤S20)。
为了获得螺旋藻提取物，以酒精(乙醇)为溶剂溶解螺旋藻粉末。优选地，上述酒精使用50％至80％的酒精，更优选地，使用70％的酒精。
但是，本发明的技术思想不限定于此，可以使用药学上可接受的有机溶剂。例如，可以单独或混合使用纯水、包括甲醇(methanol)、乙醇(ethanol)、丙醇(propanol)、异丙醇(isopropanol)丁醇(butanol)等在内的碳原子数为1至4的醇类、丙酮(acetone)、醚(ether)、苯(benzene)、三氯甲烷(chloroform)、乙酸乙酯(ethyl acetate)、二氯甲烷(methylene chloride)、己烷(hexane)以及环己烷(cyclohexane)等各种溶剂。
能够以1∶8(w/w)～1∶10(w/w)的比例混合上述螺旋藻粉末与上述酒精。
对溶解有螺旋藻粉末的上述溶液进行超声波预处理。比起不进行预处理的情况，当进行超声波预处理后进行提取时，可以获得螺旋藻提取物所含的总叶绿素含量高且去除杂质的螺旋藻提取物，因此优选。
上述超声波预处理可以在30kHz至50kHz的频率下进行，优选地，可以在40kHz的频率下进行。
上述超声波预处理可以在15℃至35℃的温度下进行，优选地，可以在常温(25℃)下进行。
并且，上述超声波预处理可以进行6小时至10小时，优选地，可以进行8小时。
若预处理条件小于上述范围，则通过超声波预处理的效果微乎其微，若预处理条件大于上述范围，则可能获得变质为不具改善认知能力效果的结构的螺旋藻提取物，因此不优选。
在50℃至80℃的温度下提取螺旋藻提取物(步骤S30)。
虽然上述提取可以在50℃至80℃的温度下进行，但优选地，在65℃的温度下进行。
如上所述，本发明的螺旋藻提取物的制备方法在提取之前进行超声波预处理，将实施超声波预处理和实施提取的温度设定得不同，从而可以提高提取收率，还可以提高提取物所包含叶绿素的总含量。
然后，真空浓缩螺旋藻提取物(步骤S40).
优选地，上述真空浓缩使用真空减压浓缩机或者真空旋转蒸发器，但不限定于此。
上述真空浓缩可以在30℃至60℃的温度下进行，优选地，在45℃的温度下进行。
上述真空浓缩可以在50hPa至150hPa的压力下进行，优选地，在100hPa的压力下进行。
最后，冷冻干燥螺旋藻提取物(步骤S50)。
上述冷冻干燥可以在-70℃至-40℃的温度下进行，优选地，在-55℃的温度下进行。
上述冷冻干燥可以在0毫托至10毫托的压力下进行，优选地，在5毫托的压力下进行。
包含螺旋藻提取物作为有效成分的药学组合物
本发明提供包含根据上述制备方法制备的螺旋藻提取物作为有效成分的用于预防或治疗神经退行性疾病的药学组合物。
螺旋藻提取物可以包含叶绿素a(chlorophyll a)。叶绿素a为进行光合作用的生物具有的同化色素的一种，存在于细胞内的叶绿体中，在自然状态下以与蛋白质或脂蛋白结合的状态存在。
叶绿素a含有多酚(polyphenol)，多酚为在植物中发现的化学物质的一种，其特征在于，一个分子具有两个以上的酚基。多酚具有将人类体内的活性氧(有害氧)转换为无害物质的抗氧化效果，因此具有预防如阿尔茨海默型痴呆、脑血管性痴呆、匹克病、克鲁兹佛得-雅克病、头部损伤引起的痴呆或帕金森病等的神经退行性疾病的突出效果。
上述药学组合物的制剂形态可以为颗粒剂、散剂、片剂、包衣片剂、胶囊剂、栓剂、液剂、糖浆、汁液、悬浮剂、乳剂、点滴剂或能够注射的液剂等。例如，为了制剂化为片剂或胶囊剂的形态，有效成分可以与如乙醇、甘油、水等口服的、无毒性的药学上可接受的非活性载体结合。
并且，在所愿或需要的情况下，可以包含适当的结合剂、润滑剂、崩解剂及发色剂或它们的混合物。适当的结合剂包括淀粉、明胶、如葡萄糖或β-乳糖的天然糖、玉米甜味剂、如阿拉伯胶、黄芪胶或油酸钠的天然及合成胶、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等，但不限定于此。
崩解剂包括淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等，但不限定于此。在制剂化为液体溶液的组合物中，药剂学上可接受的载体是灭菌及生物相容的，可使用生理盐水、灭菌水、林格氏液、缓冲生理盐水、白蛋白注射溶液、葡萄糖溶液、麦芽糊精溶液、甘油、乙醇及混合上述成分中的一种以上来使用，可以根据需要添加抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂等其他常规添加剂。
并且，还可添加稀释剂、分散剂、表面活性剂、结合剂及润滑剂来制剂化为如水溶液、悬浮液、乳浊液等的注射用剂型、丸药、胶囊、颗粒或片剂。进而，作为本领域的适当方法，可利用在Remington's Pharmaceutical Science，Mack Publishing Company，EastonPA中公开的方法根据各种疾病或者根据成分来优选地进行制剂化。
本发明的上述药学组合物可以通过改善认知能力来治疗或预防神经退行性疾病。
上述神经退行性疾病可以为阿尔茨海默型痴呆症、脑血管性痴呆症、匹克病、克鲁兹佛得-雅克病、头部损伤引起的痴呆或帕金森病。
包含螺旋藻提取物作为有效成分的保健功能食品
本发明提供包含根据上述制备方法制备的螺旋藻提取物作为有效成分的用于预防或治疗神经退行性疾病的保健功能食品。
螺旋藻提取物可以包含叶绿素a。叶绿素a为进行光合作用的生物具有的同化色素的一种，存在于细胞内的叶绿体中，在自然状态下以与蛋白质或脂蛋白结合的状态存在。
叶绿素a含有多酚，多酚为在植物中发现的化学物质的一种，其特征在于，一个分子具有两个以上的酚基。多酚具有将人类体内的活性氧(有害氧)转换为无害物质的抗氧化效果，因此具有预防如阿尔茨海默型痴呆、脑血管性痴呆、匹克病、克鲁兹佛得-雅克病、头部损伤引起的痴呆或帕金森病等的神经退行性疾病的突出效果。
上述保健功能食品可以制备及加工为片剂、胶囊、粉末、颗粒、液体、丸等形态。
在本发明中，“保健功能食品”是指根据有关保健功能食品的法律第6727号的使用具有对人体有用的功能性的原料或成分制备及加工的食品，是指对人体结构及功能调节营养素或者以获得对生理学作用等的保健用途有用的效果为目的而摄取的食品。
本发明的保健功能食品可以包含常规的食品添加物，若无其他规定，则食品添加物的适当与否依据韩国食品药品安全厅认可的食品添加物公典的总则及普通试验法等通过与有关品目相关的规格及标准来判定。
上述“食品添加物公典”中收录的品目可以有例如酮类、甘氨酸、柠檬酸钙、烟酸、肉桂酸等化学合成物；柿色素、甘草提取物、结晶纤维素、高粱色素、瓜尔胶等天然添加物；L-谷氨酸钠制剂、面类加碱剂、防腐制剂、焦油色制剂等混合制剂类等。
例如，片剂形态的保健功能食品是可以在使用通常的方法将混合作为本发明有效成分的螺旋藻提取物与赋形剂、结合剂、崩解剂及其他添加剂的混合物颗粒化后，放入润滑剂等压缩成型，或者直接将上述混合物压缩成型。并且，上述片剂形态的保健功能食品还可以根据需要包含甜味剂等。
胶囊形态的保健功能食品中的硬质胶囊剂可以通过将混合作为本发明有效成分的螺旋藻提取物与赋形剂等添加剂的混合物填充进普通的硬质胶囊来制备，软质胶囊剂可以通过将混合螺旋藻提取物与赋形剂等添加剂的混合物填充进明胶等的胶囊基剂来制备。上述软质胶囊剂可以根据需要包含甘油或山梨醇等可塑剂、着色剂、保存剂等。
丸形态的保健功能食品可以通过现有公知的方法将混合作为本发明有效成分的螺旋藻提取物与赋形剂、结合剂、崩解剂等的混合物成型来制备，可以根据需要使用白糖或其他包衣剂制备包衣，或者也可以使用淀粉、滑石粉等的物质涂敷表面。
颗粒形态的保健功能食品可以通过现有公知的方法将混合作为本发明有效成分的螺旋藻提取物与赋形剂、结合剂、崩解剂等的混合物制备为颗粒状，可以根据需要含有香料、甜味剂等。
上述保健功能食品可以为饮料类、肉类、巧克力、食品类、饼干类、披萨、拉面、其他面类、口香糖类、糖果类、冰激凌类、酒精饮料类、复合维生素及健康辅助食品类等。
本发明的上述保健功能食品可以通过改善认知能力来治疗或预防神经退行性疾病。
上述神经退行性疾病可以为阿尔茨海默型痴呆症、脑血管性痴呆症、匹克病、克鲁兹佛得-雅克病、头部损伤引起的痴呆或帕金森病。
神经退行性疾病治疗方法
本发明提供一种神经退行性疾病的治疗方法，包括向个体给药药学上有效量的螺旋藻提取物的步骤。
上述神经退行性疾病可以为痴呆、阿尔茨海默病、脑血管性痴呆症、匹克病、克鲁兹佛得-雅克病、头部损伤引起的痴呆或帕金森病。
上述个体可以为包括人类在内的所有动物。
上述螺旋藻提取物还可以包含表现出相同或相似功能的一种以上的有效成分。
上述给药可以为口服给药，或者通过皮下注射、静脉注射或肌肉内注射的胃肠外给药，可以使用普通药品制剂的形态。
上述给药的给药单位可以包含为单独剂量的1倍、2倍、3倍或4倍，或者包含1/2倍、1/3倍或者1/4倍。优选地，单独剂量包含一次给药有效药物的量，这相当于常规一日剂量的全部、1/2倍、1/3倍或者1/4倍。
上述给药的剂量可以根据患者的年龄、体重、性别、给药方式、健康状态及疾病的程度而不同，可以根据医生或药师的判断以规定时间间隔一日给药一次或者一日分为数次给药。
一次剂量可以为150mg/kg至450mg/kg。若小于上述剂量的范围，则无法获得显著的效果，若大于上述剂量的范围，则不仅不经济，而且还有因超出常用量的范围而出现无法预料的副作用的隐患，因此以上述范围为佳。
上述给药的给药频率不受特别限制，可以一日给药一次或者将用量分为数次给药。
实施例
以下，为了具体说明本发明，将通过实施例加以详细说明。但是，本发明的实施例可以变形为多种其他实施方式，不应解释为本发明的范围限定于以下详细说明的实施例。本发明的实施例是向本发明所属技术领域的普通技术人员更为完整地说明本发明而提供的。
实施例1：螺旋藻提取物的制备
为了获得螺旋藻提取物，首先以1∶10(w/w)的比例混合100g干燥粉末形态的极大螺旋藻与70％的酒精(乙醇)。之后，在25℃的温度下，以40kHz的频率进行8小时的超声波预处理后，在65℃的温度下提取螺旋藻提取物4小时。将提取后获得的螺旋藻提取物在45℃的温度下以100hPa的压力进行真空压缩后，在-55℃的温度下以5毫托的压力冷冻干燥来制备为粉末形态，之后进行下述实验。
实验例1：螺旋藻提取物提取工序的收率比较
对于上述实施例1的螺旋藻提取物提取工序、现有的热水提取工序、70％及100％乙醇提取工序，比较了各自的提取收率及总叶绿素含量(表1)。
表1
Figure BDA0003243876000000141
确认到实施例1与比较例1至比较例3的提取工序的收率分布在10％至13％之间。
通过实施例1获得的螺旋藻提取物的提取收率约为11.6％，表现出与现有的其他工序相似或更高的收率。并且，在表现出比11.6％高的收率的比较例1及比较例2的提取工序的情况下，可以确认作为指标成分的总叶绿素(total chlorophyll)的含量比实施例1低。
因此，可以确认实施例1的提取工序具有与现有的其他工序相似或更高的收率，同时，还可提高提取物所包含的叶绿素的总含量。
实验例2：测定螺旋藻提取物对由β-淀粉样蛋白(1-42)(Aβ1-42)诱发的认知能力 障碍的改善能力
实验动物及药物给药
在4周龄的雄性小鼠中评价由β-淀粉样蛋白(1-42)(Amyloid beta1-42)引起的认知能力降低。购入ICR小鼠(BIOLINK公司，忠清北道阴城郡，韩国)并在实验动物饲育室中适应一周，每组随机分配6只。将分别以不同浓度给药通过实施例1制备的螺旋藻提取物(以下称SM70EE)的组和给药叶绿素a的组用作实验组。将未使用螺旋藻提取物处理的组用作对照组，将给药诱发痴呆的东莨菪碱(scopolamine)的组和给药作为痴呆治症疗剂的多奈哌齐(donepezil)的组用作比较组。在适应期间内，无限制地自由供应饲料和水，温度保持22±2℃，湿度保持50±10％，以12小时的周期(09:00～21:00)调节明暗。
认知能力评价方法
(1)水迷宫分析评价实验(Morris Water maze test)
在本实验例中，被动回避分析评价实验应用Morris的方法来实施。使用掺有牛奶的水(水温：20±1℃)填满水迷宫池(Water maze pool)(直径：90cm，深度：45cm)。将池(pool)分为四等分，在其中一部分的中央配置白色的平台(直径：6cm，高度：29cm)，淹没平台约1cm左右，使其无法在水面被看到。为了适应，实验的第一天在没有平台的情况下只进行60秒钟的游泳练习，从第二天开始，在配置有平台的池中实施为期4天的检查试验(testtrial)，测定给药药物的实验鼠向平台上逃避所用的时间，即逃避潜伏期(escape latencytime)。
在120秒钟内未逃避到平台的实验鼠由实验人员直接放到平台使其保持10秒钟的逃避状态。在4天期间，固定平台的位置，而将实验鼠入水的位置设置得不同。
从第二天开始每天实施试样给药，共给药4天，将东莨菪碱(1mg/kg)溶于生理盐水后，在实施训练30分钟前皮下注射来诱发痴呆。在给药东莨菪碱1小时前，口服给药螺旋藻提取物(SM70EE)(200mg/kg、400mg/kg)、叶绿素a(10mg/kg)以及作为阳性对照组的多奈哌齐(1mg/kg)来确认对于由东莨菪碱诱导的痴呆具有何种影响。
(2)被动回避分析评价实验(Passive avoidance test)
将被动回避测定装置的回避箱子(40cm×20cm×20cm)分为亮箱子和暗箱子，在各房间之间设置供实验鼠移动的门。进行如下训练：当放入在箱子底面以0.5cm的间隔设置有厚度为3mm的不锈钢杆的亮箱子的小鼠进入暗箱子时，通过不锈钢杆施加0.1mA/10g体重(body weight)的电刺激。24小时后，实施相同的试验来测定实验鼠在亮的房间停留的时间作为是否记忆前一日训练的指标。试样口服给药，东莨菪碱则皮下给药。
在实验120分钟前，口服给药螺旋藻提取物(SM70EE)(200mg/kg、400mg/kg)、叶绿素a(10mg/kg)以及作为阳性对照组的多奈哌齐(1mg/kg)，90分钟后向对照组皮下给药普通生理盐水(normal saline)，其他组则皮下给药东莨菪碱(1mg/kg)。给药东莨菪碱30分钟后，进行实验。24小时后，进行相同的实验，测定实验鼠向回避箱子移动的时间(escapelatency time)。若180秒钟内实验鼠没有移动，则终止实验。
实验结果
(1)水迷宫分析评价实验中的4天的逃避潜伏期
确认了螺旋藻提取物(SM70EE)在4天的水迷宫分析评价实验中的认知能力改善活性。
图2为在水迷宫实验中比较对照组与螺旋藻提取物给药组的逃避潜伏期的柱状图(*р＜005，**р＜001，***р＜0001)。
参照图2，在对照组的情况下，从第一天(day 1)到第四天(day4)，逃避潜伏期显著减少，而只使用东莨菪碱处理的组的逃避潜伏期增加了。螺旋藻提取物(SM70EE)在第四天(day 4)浓度依赖性地减少了因东莨菪碱增加的逃避潜伏期，在200mg/kg及400mg/kg的浓度下均表现出相似水平的低的逃避潜伏期，在400mg/kg的浓度下表现出66.39±25.70秒钟的最低水平的逃避潜伏期。在叶绿素a(10mg/kg)的情况下，也确认到浓度依赖性地减少逃避潜伏期。
(2)被动回避分析评价实验中的延迟时间(latency time)
通过被动回避实验测定螺旋藻提取物(SM70EE)的记忆力改善活性。
图3为在被动回避实验中比较对照组与螺旋藻提取物给药组的延迟时间的柱状图(*р＜005，**р＜001，***р＜0001)。
参照图3，在使用东莨菪碱处理的实验鼠的情况下，与对照组相比，延迟时间大为减少。螺旋藻提取物(SM70EE)在200mg/kg及400mg/kg的浓度下显著增加了通过东莨菪碱减少的延迟时间，在400mg/kg的浓度下，确认将减少的延迟时间增加至最高的73.33±19.35秒钟。并且，叶绿素a(10mg/kg)也增加了因东莨菪碱减少的延迟施加。
实验例3：测定螺旋藻提取物的乙酰胆碱酯酶(AChE)的抑制活性
在本实验例中，摘除上述实验例2的动物试验中使用的各实验组的鼠的海马体来测定乙酰胆碱酯酶的抑制活性。
图4为测定对照组与螺旋藻提取物给药组的乙酰胆碱酯酶的抑制活性的柱状图(*р＜005，**р＜001，***р＜0001)。
乙酰胆碱酯酶为分解作为大脑的胆碱能系统中的神经递质的乙酰胆碱的酶，若其活性高，则减少记忆力及认知能力。
向各对照组和实验组的鼠的海马体加入磷酸缓冲溶液(Phosphate buffer)并通过均质机(homogenizer)均质化后，在4℃的温度下以12000rpm的转速实施离心分离20分钟后取上层液。在96孔培养板(96well plate)中分别接种50μL的上层液、正常(standard)、空白(blank)。以50μL加入20μM的乙酰胆碱酯酶测定溶液(Acetylcholinesterase assaysolution)并培养15分钟后，在410nm的波长下测定吸光度。
参照图4，在给药东莨菪碱的实验鼠的情况下，测定出140.39±7.55％的乙酰胆碱酯酶活性，比对照组增加了。而在螺旋藻提取物(SM70EE)的情况下，在200mg/kg、400mg/kg的浓度下分别测定出116.16±7.11％、117.55±25.96％的乙酰胆碱酯酶活性，表现出显著减少因东莨菪碱增加的乙酰胆碱酯酶活性的倾向。通过上述结果可以确认螺旋藻提取物(SM70EE)通过抑制乙酰胆碱酯酶的活性来影响认知能力的改善。
并且，确认最佳剂量的结果，在200mg/kg和400mg/kg的浓度下，认知能力活性浓度依赖性地增加了。但其偏差微乎其微，在两个浓度下活性度的评价相似，因此在生产中，考虑经济性后判断200mg/kg的剂量适合认知能力改善活性。
实验例4：测定螺旋藻提取物的脑源性神经营养因子(BDNF)表达、上游转录因子 (CREB、ERK)的表达
在本实验例中，摘除上述实验例2的动物实验中使用的各实验组鼠的海马体来测定脑源性神经营养因子的表达及上游转录因子(CREB、ERK)的表达。
图5为测定对照组与螺旋藻提取物给药组的脑源性神经营养因子的表达激活的柱状图，图6为测定对照组与螺旋藻提取物给药组的上游转录因子(磷酸化cAMP反应元件结合蛋白，p-CREB)的表达激活的柱状图，图7测定为对照组与螺旋藻提取物给药组的上游转录因子(磷酸化的细胞外信号调节激酶，p-ERK)的表达激活的柱状图(*р＜005，**р＜001，***р＜0001)。
脑源性神经营养因子通过生成新的神经突来强化神经细胞之间的连接，增加连接的数量来增加认知能力，cAMP反应元件结合蛋白(CREB)为学习和记忆过程中所需的基因，作为脑源性神经营养因子表达的上游转录因子而活动。
向实验组和对照组的鼠的海马体加入磷酸缓冲溶液并通过均质机均质化后，在4℃的温度下以12000rpm的转速实施离心分离20分钟后取上层液。在96孔培养板中分别接种100μL的上层液、正常(standard)、空白(blank)，在37℃的温度下在培养箱中培养1小时30分钟。去掉培养板(Plate)中的上层液后，加入100μL的生物素化的抗小鼠脑源性神经营养因子抗体工作溶液(biotinylated anti-Mouse BDNF antibody working solution)，在37℃的温度下在培养箱中培养1小时。去掉培养板中的上层液后，使用0.01M的磷酸缓冲溶液洗涤3次。加入100μL的ABC工作溶液(ABC working solution)后，在30℃的温度下在培养箱中培养30分钟。使用0.01M的磷酸缓冲溶液洗涤5次后，加入90μL的3,3',5,5'-四甲基联苯胺显色剂(TMB color developing agent)后，在37℃的温度下在培养箱中培养20分钟～25分钟后，在450nm的吸光度下进行测定。
参考图5至图7，在给药东莨菪碱的实验鼠的情况下，表现出比对照组的脑源性神经营养因子表达值低的表达值。在以200mg/kg及400mg/kg的浓度给药螺旋藻提取物(SM70EE)的实验鼠的海马体部位中，确认因东莨菪碱减少的作为神经营养因子的脑源性神经营养因子的量被显著激活。并且，还确认了如下结果：螺旋藻提取物(SM70EE)显著激活了磷酸化cAMP反应元件结合蛋白的量，还诱导了细胞外信号调节激酶(ERK)的活性。
因此，可以确认螺旋藻提取物(SM70EE)通过增加减少的脑源性神经营养因子及上游转录因子(CREB、ERK)的表达量来影响认知能力的改善。
并且，通过动物行为实验确认最佳剂量的结果，在200mg/kg和400mg/kg的浓度下，认知能力的活性浓度依赖性地增加。但其偏差微乎其微，在两个浓度下活性度的评价相似，因此在生产中，考虑经济性后判断200mg/kg的剂量适合认知能力改善活性。
实验例5：利用抗体荧光染色法测定螺旋藻提取物的乙酰胆碱酯酶的抑制活性、上 游转录因子(CREB)表达以及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达能力
在本实验例中，为了确认螺旋藻提取物在大脑海马体中的乙酰胆碱酯酶活性抑制能力、上游转录因子(CREB)表达能力、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达能力，对实验鼠的大脑海马体进行组织切开后，进行抗体荧光染色。
图8为对诱导退行性脑疾病的实验鼠的大脑海马体进行组织切开后比较对照组与螺旋藻提取物给药组的抗体荧光染色结果的照片。
参照图8，在东莨菪碱给药组中，可以观察到乙酰胆碱酯酶的活性度在整个海马体和大脑皮质中整体地增加了。在多奈哌齐给药组和螺旋藻提取物给药组中，可以确认乙酰胆碱酯酶的活性度比东莨菪碱给药组降低了。
并且，与对照(control)组相比，在东莨菪碱给药组中，cAMP反应元件结合蛋白的活性度明显减少，而在多奈哌齐给药组和螺旋藻提取物给药组中，可以确认cAMP反应元件结合蛋白的活性度减少程度微乎其微。
另一方面，胶质纤维酸性蛋白(Glial Fibrillary acidic protein；GFAP)局限于位于大脑中的星形胶质细胞或作为星形细胞的星形胶质细胞(astrocyte)中，因此用作上述细胞的标记物。为了确认星形胶质细胞的表达程度，进行了胶质纤维酸性蛋白的免疫染色。
参照图8，在对照组中，确认胶质纤维酸性蛋白-阳性星形胶质细胞(GFAP-positive astrocyte)均匀地分布于大脑的海马体，一部分星形胶质细胞在齿状回(Dentate Gyrus；DG)中呈膨胀的形态，即，被激活的形态。在东莨菪碱给药组的整个海马体中，胶质纤维酸性蛋白的阳性反应增加，相反，在多奈哌齐给药组和给药螺旋藻提取物给药组中，齿状会中被激活的星形胶质细胞减少，观察到海马体部位稳定的现象。
通过上述结果判断螺旋藻提取物在脑细胞的内外减少引起退行性脑疾病的老废杂志。
以上，说明了有关本发明一实施例的螺旋藻提取物的制备方法、包含螺旋藻提取物的用于预防或治疗神经退行性疾病的药学组合物及保健功能食品以及利用螺旋藻提取物的神经退行性疾病治疗方法具体实施例，但显而易见的是，在不脱离本发明范围内，可以有多种实施变形。
因此，本发明的范围不应局限于上述说明的实施例，而应以发明要求保护范围以及与发明要求保护范围同等的范围来定义。
即，需要理解的是，上述实施例在所有方面仅为例示，而不是限定性的，比起详细的说明，本发明的范围通过发明要求保护范围体现，由该发明要求保护范围的含义及范围还有与之同等的概念导出的所有变更或变形的形态都应解释为包括于本发明的范围。

Claims (14)

1.一种螺旋藻提取物的制备方法，其特征在于，包括：
步骤(a)，准备极大螺旋藻(Spirulina maxima)粉末；
步骤(b)，向上述极大螺旋藻粉末加入50％(v/v)至80％(v/v)的酒精，在15℃至35℃的温度下进行超声波预处理；
步骤(c)，在50℃至80℃的温度下提取极大螺旋藻提取物；
步骤(d)，真空浓缩上述极大螺旋藻提取物；以及
步骤(e)，冷冻干燥真空浓缩的上述极大螺旋藻提取物。
2.一种螺旋藻提取物的制备方法，其特征在于，包括：
步骤(a)，准备极大螺旋藻(Spirulina maxima)粉末；
步骤(b)，以1∶8(w/w)～1∶10(w/w)的比例混合上述极大螺旋藻粉末与50％(v/v)至80％(v/v)的酒精，在15℃至35℃的温度下进行6小时至10小时的超声波预处理；
步骤(c)，在50℃至80℃的温度下提取极大螺旋藻提取物2小时至6小时；
步骤(d)，真空浓缩上述极大螺旋藻提取物；以及
步骤(e)，冷冻干燥真空浓缩的上述极大螺旋藻提取物。
3.根据权利要求1所述的螺旋藻提取物的制备方法，其特征在于，在上述步骤(b)中，以1∶8(w/w)～1∶10(w/w)的比例混合上述极大螺旋藻粉末与上述酒精。
4.根据权利要求1所述的螺旋藻提取物的制备方法，其特征在于，上述步骤(b)的上述超声波的频率为30kHz至50kHz。
5.根据权利要求1所述的螺旋藻提取物的制备方法，其特征在于，上述步骤(b)的上述超声波预处理进行6小时至10小时。
6.根据权利要求1所述的螺旋藻提取物的制备方法，其特征在于，上述步骤(c)的上述极大螺旋藻提取物的提取进行2小时至6小时。
7.根据权利要求1所述的螺旋藻提取物的制备方法，其特征在于，上述步骤(d)的上述真空浓缩在30℃至60℃的温度下以50hPa至150hPa的压力进行。
8.根据权利要求1所述的螺旋藻提取物的制备方法，其特征在于，上述步骤(e)的上述冷冻干燥在-70℃至-40℃的温度下以0毫托至10毫托的压力进行。
9.一种用于改善认知能力的药学组合物，其特征在于，包含螺旋藻提取物作为有效成分，上述螺旋藻提取物通过如下方法获得，即，准备极大螺旋藻(Spirulina maxima)粉末后，向上述极大螺旋藻粉末加入50％(v/v)至80％(v/v)的酒精，在15℃至35℃的温度下进行超声波预处理后，在50℃至80℃的温度下提取极大螺旋藻提取物，之后真空浓缩并冷冻干燥上述提取物。
10.根据权利要求9所述的用于改善认知能力的药学组合物，其特征在于，上述极大螺旋藻提取物包含叶绿素a。
11.根据权利要求9所述的用于改善认知能力的药学组合物，其特征在于，上述组合物恢复作为神经退行性疾病症状的认知能力降低。
12.一种用于改善认知能力的保健功能食品，其特征在于，包含螺旋藻提取物作为有效成分，上述螺旋藻提取物通过如下方法获得，即，准备极大螺旋藻(Spirulina maxima)粉末后，向上述极大螺旋藻粉末加入50％(v/v)至80％(v/v)的酒精，在15℃至35℃的温度下进行超声波预处理后，在50℃至80℃的温度下提取极大螺旋藻提取物，之后真空浓缩并冷冻干燥上述提取物。
13.根据权利要求12所述的用于改善认知能力的保健功能食品，其特征在于，上述极大螺旋藻提取物包含叶绿素a。
14.根据权利要求12所述的用于改善认知能力的保健功能食品，其特征在于，上述保健功能食品恢复作为脑神经疾病症状的认知能力降低。
CN202080018458.3A 2019-03-05 2020-02-19 螺旋藻提取物的制备方法、和包含螺旋藻提取物的用于改善认知能力的药学组合物及保健功能食品 Pending CN113543793A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020190025275A KR102007675B1 (ko) 2019-03-05 2019-03-05 스피룰리나 추출물 제조방법, 스피룰리나 추출물을 포함하는 인지능 개선용 약학적 조성물 및 건강기능식품
KR10-2019-0025275 2019-03-05
PCT/KR2020/002354 WO2020180025A1 (ko) 2019-03-05 2020-02-19 스피룰리나 추출물 제조방법, 스피룰리나 추출물을 포함하는 인지능 개선용 약학적 조성물 및 건강기능식품

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN113543793A true CN113543793A (zh) 2021-10-22

Family

ID=67612715

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202080018458.3A Pending CN113543793A (zh) 2019-03-05 2020-02-19 螺旋藻提取物的制备方法、和包含螺旋藻提取物的用于改善认知能力的药学组合物及保健功能食品

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20220160798A1 (zh)
JP (1) JP2022522798A (zh)
KR (1) KR102007675B1 (zh)
CN (1) CN113543793A (zh)
WO (1) WO2020180025A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116656436A (zh) * 2023-03-22 2023-08-29 山东思源精酿啤酒有限公司 一种绿色螺旋藻生啤酒的酿造方法及螺旋藻提取液

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102007675B1 (ko) * 2019-03-05 2019-08-06 한국해양과학기술원 스피룰리나 추출물 제조방법, 스피룰리나 추출물을 포함하는 인지능 개선용 약학적 조성물 및 건강기능식품
KR102522220B1 (ko) * 2020-11-18 2023-04-14 성창규 스피룰리나 미셀의 제조방법 및 이를 통해 제조된 스피룰리나 미셀이 탑재된 마이크로니들
TW202241480A (zh) * 2021-01-25 2022-11-01 日商Ｄｉｃ股份有限公司 用於提高記憶學習功能及／或認知功能以及抑制記憶學習功能及／或認知功能降低的組成物
GR20210100161A (el) * 2021-03-16 2022-10-10 Αγγελικη Παναγιωτη Κοσκεριδου Παρασκευασματα υγιεινων τροφιμων ή συμπληρωματων διατροφης ή καλλυντικων με τη χρηση της μπλε σπιρουλινας

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2000253853A (ja) * 1999-03-05 2000-09-19 Minoru Yoneda 機能性スピルリナ
WO2010030111A2 (ko) * 2008-09-09 2010-03-18 다이아텍코리아 주식회사 스피루리나로부터 클로로필 ａ 및 클로린을 제조하는 방법
KR20170067466A (ko) * 2015-12-08 2017-06-16 현 용 이 스피루리나 추출물을 유효성분으로 함유하는 치매 또는 인지능 개선용 약학적 조성물
CN106923337A (zh) * 2017-03-15 2017-07-07 福建农林大学 一种螺旋藻全活性物质的制备方法及其应用

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008120778A1 (ja) * 2007-03-30 2008-10-09 Earthus, Inc. ケトン体生成促進剤組成物
KR101418545B1 (ko) 2012-11-16 2014-07-10 주식회사 브레인트로피아 카르복시 디하이드로 에보다이아민을 포함하는 퇴행성 신경계 뇌 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물
CN103125932A (zh) * 2012-11-28 2013-06-05 荣成鹏泽食品有限公司 一种预防老年痴呆症的营养粉
KR20180061740A (ko) * 2016-11-30 2018-06-08 서원대학교산학협력단 스피룰리나 발효물을 유효성분으로 포함하는 인지능 개선용 조성물 및 이의 제조방법
FR3067569B1 (fr) * 2017-06-15 2021-05-28 Algama Procede d’extraction de composes hydrosolubles a partir de microalgues et/ou de cyanobacteries
KR102007675B1 (ko) * 2019-03-05 2019-08-06 한국해양과학기술원 스피룰리나 추출물 제조방법, 스피룰리나 추출물을 포함하는 인지능 개선용 약학적 조성물 및 건강기능식품

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2000253853A (ja) * 1999-03-05 2000-09-19 Minoru Yoneda 機能性スピルリナ
WO2010030111A2 (ko) * 2008-09-09 2010-03-18 다이아텍코리아 주식회사 스피루리나로부터 클로로필 ａ 및 클로린을 제조하는 방법
KR20170067466A (ko) * 2015-12-08 2017-06-16 현 용 이 스피루리나 추출물을 유효성분으로 함유하는 치매 또는 인지능 개선용 약학적 조성물
CN106923337A (zh) * 2017-03-15 2017-07-07 福建农林大学 一种螺旋藻全活性物质的制备方法及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
WOON YONG CHOI等: "Enhancement of Chlorophyll a Production from Marine Spirulina maxima by an Optimized Ultrasonic Extraction Process", 《APPL. SCI.》, vol. 8, no. 26 *
WOON YONG CHOI等: "Enhancement of Neuroprotective Effects of Spirulina maxima by a Low-temperature Extraction Process with Ultrasonic Pretreatment", 《BIOTECHNOLOGY AND BIOPROCESS ENGINEERING》, vol. 23, no. 4, pages 416 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116656436A (zh) * 2023-03-22 2023-08-29 山东思源精酿啤酒有限公司 一种绿色螺旋藻生啤酒的酿造方法及螺旋藻提取液

Also Published As

Publication number Publication date
WO2020180025A1 (ko) 2020-09-10
US20220160798A1 (en) 2022-05-26
JP2022522798A (ja) 2022-04-20
KR102007675B1 (ko) 2019-08-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN113543793A (zh) 螺旋藻提取物的制备方法、和包含螺旋藻提取物的用于改善认知能力的药学组合物及保健功能食品
RU2523384C2 (ru) Фитокомплекс из плодов бергамота, способ производства и применение в качестве пищевой добавки и в области фармакологии
WO2017135466A1 (ja) キサントフィルとヒシ属植物の加工物を含有する組成物
KR101614929B1 (ko) 인지장애 및 기억장애 치료용 약학 조성물
KR102351514B1 (ko) 브로콜리 새싹을 유효성분으로 하는 인지기능 또는 기억력 개선용 조성물
US11110145B2 (en) Composition for protecting cell from oxidative stress comprising green tea extract which has modified amounts of ingredients
JP2012526801A (ja) 発酵茶抽出物を含有する血液循環改善用組成物、発酵茶抽出物を含む薬剤学的組成物及び健康食品組成物
JP6484708B2 (ja) 網膜疾患を予防及び治療するための、有効成分としてスピルリナ・マキシマ抽出物を含有する医薬組成物
KR20170067466A (ko) 스피루리나 추출물을 유효성분으로 함유하는 치매 또는 인지능 개선용 약학적 조성물
WO2018221650A1 (ja) ルテイン類またはその塩およびヒシ属植物の加工物を含有する脳機能障害の予防および／または改善用組成物
KR102301757B1 (ko) 스트레스로 인한 기억력 감퇴 억제 및 학습 능력 향상을 위한 천연 혼합 조성물
KR102501955B1 (ko) 동과 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 면역 증진용 조성물
JP2015063507A (ja) 老化に起因する網膜障害の抑制剤
KR100758266B1 (ko) 숙취 해소 및 항산화 활성을 가지는 산구절초 추출물
KR20180137971A (ko) 신경 세포사 억제 활성을 갖는 황칠 열수 추출물을 포함하는 퇴행성 신경 질환 예방 및 치료용 조성물
KR102275055B1 (ko) 알피나 골무꽃 추출물을 포함하는 조성물
KR102604523B1 (ko) 화살나무 귀전우 추출물과 마늘발효액을 이용한 인지기능 개선 건강기능식품 조성물 제조방법
KR100550358B1 (ko) 쥐눈이콩 추출물을 함유하는 알츠하이머씨병을 비롯한 노인성 치매, 중증 근무력증, 위장관 및 방광평활근의 무력증, 및 녹내장 질환에 유효한 식품 및 사료
KR101753057B1 (ko) 인지기능장애 또는 퇴행성 뇌질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
KR20150018167A (ko) 천년초 발효물 함유 의약 조성물
KR20140141845A (ko) 복분자줄기 추출물을 주성분으로 하는 혈행개선용 조성물
KR102514847B1 (ko) 병풀, 벌사상자 및 영하구기자 추출물을 포함하는 인지 기능 장애 또는 신경염증의 예방 또는 치료용 조성물
KR20120029585A (ko) 혈당 강하용 두부 및 그 제조방법
KR102130107B1 (ko) 아라비노자일란 함유 미강 추출물을 포함하는 신경병증 또는 청각손상 예방 또는 치료용 조성물
KR20160088840A (ko) 부티로락톤 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 글루타메이트 독성 관련 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination