CN113519849A

CN113519849A - 提升肠道对大肠杆菌感染的抵御力的母乳低聚糖及其应用

Info

Publication number: CN113519849A
Application number: CN202010289929.6A
Authority: CN
Inventors: 卡洛琳·安妮卡·凡·鲁-鲍曼; 盖瑞特·施密特; 吉塞拉·阿德里安娜·怀斯; 谷方婕; 司徒文佑; 王雯丹
Original assignee: Inner Mongolia Yili Industrial Group Co Ltd
Current assignee: Inner Mongolia Yili Industrial Group Co Ltd
Priority date: 2020-04-14
Filing date: 2020-04-14
Publication date: 2021-10-22
Anticipated expiration: 2040-04-14
Also published as: CN113519849B

Abstract

本发明提供了提升肠道对大肠杆菌感染的抵御力的母乳低聚糖及其应用。具体地，本发明提供了母乳低聚糖在制备用于提升肠道对大肠杆菌感染的抵御力的组合物中的应用，其中母乳低聚糖为3‑FL、3’‑SL或6’‑SL。本发明发现母乳低聚糖能显著减少致腹泻的大肠杆菌粘附在肠道细胞上，提升肠道在大肠杆菌侵染后的屏障能力，降低大肠杆菌侵染后炎症因子IP‑10的释放，可用于添加在婴幼儿食品(包括婴幼儿配方粉、辅食、营养补充剂)，以及3岁以上儿童、青少年和成人的营养补充剂或食品中，具有广阔的应用前景。

Description

提升肠道对大肠杆菌感染的抵御力的母乳低聚糖及其应用

技术领域

本发明是关于母乳低聚糖的新应用，具体地说，是关于母乳低聚糖3-FL、3’-SL、6’-SL在提升肠道对大肠杆菌感染的抵御力方面的新应用。

背景技术

在上个千年，已有医学文献记载，未经母乳喂养的婴儿有较高的疾病率和死亡率。母乳不仅为婴儿提供所需营养，母乳中的活性成分更为婴儿的肠道发育和免疫力完善提供保障。母乳喂养的婴儿与配方奶喂养的婴儿相比，肠道菌群中有益菌特别是双歧杆菌和乳酸菌的相对丰度更高。

母乳通过菌群的传递，加上母乳低聚糖和母乳中的细胞因子等活性成分，为新生儿建立起健康的肠道菌群。婴儿每天通过母乳摄入10⁷-10⁸个细菌，包括乳酸菌和双歧杆菌。这些菌通过母乳直接传递给婴儿，部分可在婴儿肠道定植，促进生命早期肠道菌群的建立。婴儿肠道菌群的建立，对其肠道的发育，以及对健康和免疫系统有着短期，甚至终生的影响。

母乳低聚糖(Human Milk Oligosaccharides，简称HMOs)属于母乳中除乳糖和脂肪外，含量第三丰富的物质。其总含量在泌乳期的各个阶段有变化，在成熟乳中大约是12-14g/L，而初乳中大约是20-24g/L。每一种母乳低聚糖的结构在还原端都有一个乳糖，大部分以聚乳糖胺作为结构主链，并在链端含有岩藻糖、唾液酸或二者均有。母乳低聚糖主要由三大类组成：(1)岩藻糖基类低聚糖，以2’-岩藻糖基低聚糖和3’-岩藻糖基低聚糖为代表性物质；(2)唾液酸基类低聚糖，以3’-唾液酸基乳糖和6’-唾液酸基乳糖为代表性物质；(3)不含岩藻糖基或唾液酸基的核心糖链结构形成的低聚糖，以乳糖-N-四糖和乳糖-N-新四糖为代表性物质。

HMOs的存在与含量存在个体差异，并与哺乳母亲的路易斯分泌型组成有关。由于婴幼儿配方粉的原料通常是牛乳，而牛乳中通常不含或含有很少这类低聚糖物质，HMOs便成为了婴幼儿配方粉想要更加接近母乳成分所必须跨越的一道鸿沟。

上世纪90年代，在大部分母乳中均含有的HMO，2-岩藻糖基乳糖(2’-FL)被发现可有效地减轻大肠杆菌中稳定毒素的毒性；到了2003年，该低聚糖被报道可抑制弯曲空肠杆菌的附着和感染。随后，母乳低聚糖的三大主要功能被逐步报道和发现：(1)抑制特定病菌的附着和感染；(2)作为益生元，促进肠道共生系统里面细菌的生长；(3)直接减缓粘膜在有毒刺激下的炎症反应。使用了2’-FL的首个临床干预试验证实了在低卡路里配方中加入这个特定成分不仅安全还可以让配方奶喂养的婴儿生长速率与母乳喂养的婴儿具有可比性。2’-FL也被用作成年人的营养补充剂，缓解肠道应激性综合症或炎症性肠病，或被用作益生元维持肠道菌群平衡。

肠道菌群是人体肠道微生态系统的重要组成物质，对人类健康有重要作用，如可提供必需营养素，生成维生素K，辅助消化过程与促进血管生成和肠道神经作用。

目前在婴幼儿配方粉、辅食及营养补充剂领域，需要有缓解婴幼儿肠道不适及提升自身免疫能力的解决方案。同时，在3岁以上儿童、青少年及成人领域，也需要维持肠道菌群平衡，调节免疫能力。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种母乳低聚糖的新应用。

本发明发现一些母乳低聚糖能显著减少致腹泻的大肠杆菌粘附在肠道细胞上，提升肠道在大肠杆菌侵染后的屏障能力，降低大肠杆菌侵染后炎症因子IP-10的释放，从而提供了母乳低聚糖的新应用。

具体而言，本发明提供了母乳低聚糖在制备用于提升肠道对大肠杆菌感染的抵御力的组合物中的应用。

已知母乳低聚糖包括岩藻糖基乳糖、唾液酸基乳糖，以及不带岩藻糖基或唾液酸基的母乳寡糖基本糖链结构(典型的代表物质包括乳糖-N-四糖及其同分异构体乳糖-N-新四糖)。

其中2’-岩藻糖基乳糖(2’-fucosyllactose，2’-FL或2-FL或2FL)，为岩藻糖与乳糖形成的三糖结构，是岩藻糖基类低聚糖的代表性物质。市售该物质通常为经微生物发酵法制备，与人乳中发现的寡糖具有相同结构。

3-岩藻糖基乳糖(3-fucosyllactose，3’-FL或3-FL或3FL)，为岩藻糖与乳糖形成的三糖结构，与2’-岩藻糖基乳糖互为同分异构体。是岩藻糖基类低聚糖的代表性物质。该物质经微生物发酵法制备，与人乳中发现的寡糖具有相同结构。

乳糖-N-四糖(lacto-N-tetraose，LNT)，为乳糖与四糖形成的六糖结构，是以核心糖链为基础结构，且不含岩藻糖基或唾液酸基的低聚糖的代表性物质。该物质经微生物发酵法制备，与人乳中发现的寡糖具有相同结构。

3’-唾液酸基乳糖(3’-sialyllactose，3’-SL或3-SL或3SL)，为唾液酸与乳糖形成的三糖结构，是唾液酸基类低聚糖的代表性物质。该物质经微生物发酵法制备，与人乳中发现的寡糖具有相同结构。

6’-唾液酸基乳糖(6’-sialyllactose，6’-SL或6-SL或6SL)，为唾液酸与乳糖形成的三糖结构，是唾液酸基类低聚糖的代表性物质。该物质经微生物发酵法制备，与人乳中发现的寡糖具有相同结构。

根据本发明的具体实施方案，本发明的母乳低聚糖在制备用于提升肠道对大肠杆菌感染的抵御力的组合物中的应用中，所述母乳低聚糖为岩藻糖基类低聚糖或唾液酸基类低聚糖，优选地，所述母乳低聚糖为3-FL、3’-SL或6’-SL。

根据本发明的具体实施方案，本发明的母乳低聚糖在制备用于提升肠道对大肠杆菌感染的抵御力的组合物中的应用中，所述组合物是用于抑制大肠杆菌EPEC对于小肠上皮细胞Caco-2的吸附作用。优选地，所述母乳低聚糖为3’-SL。更优选地，3’-SL在制备用于抑制大肠杆菌EPEC对于小肠上皮细胞Caco-2的吸附作用的组合物时，其在组合物中的应用量可为0.03-15g/kg，具体可根据组合物种类及应用对象适当调整。

根据本发明的具体实施方案，本发明的母乳低聚糖在制备用于提升肠道对大肠杆菌感染的抵御力的组合物中的应用中，所述组合物是用于修复大肠杆菌引起的肠道上皮细胞屏障的破坏。优选地，所述母乳低聚糖为3’-SL或6’-SL。更具体地，3’-SL在制备用于修复大肠杆菌引起的肠道上皮细胞屏障的破坏的组合物时，其在组合物中的应用量具体可根据组合物种类及应用对象适当调整，例如液态乳等液态形式的组合物中，3’-SL应用量可为0.03-1.5g/L，而在固态形式的组合物如固体饮料或固态营养补充剂中，3’-SL应用量可为1-500g/kg或更高浓度。6’-SL在制备用于修复大肠杆菌引起的肠道上皮细胞屏障的破坏的组合物时，其在组合物中的应用量具体可根据组合物种类及应用对象适当调整，例如液态乳等液态形式的组合物中，6’-SL应用量可为0.03-1.5g/L，而在固态形式的组合物如固体饮料或固态营养补充剂中6’-SL应用量可为1-500g/kg或更高浓度。

根据本发明的具体实施方案，本发明的母乳低聚糖在制备用于提升肠道对大肠杆菌感染的抵御力的组合物中的应用中，所述组合物是用于降低炎症因子IP10的释放。优选地，所述母乳低聚糖为3’-SL或3-FL。更优选地，3’-SL在制备用于降低炎症因子IP10的释放的组合物时，其在组合物中的应用量具体可根据组合物种类及应用对象适当调整，例如液态乳等液态形式的组合物中，3’-SL应用量可为0.03-1.5g/L，而在固态形式的组合物如固体饮料或固态营养补充剂中3’-SL应用量可为1-500g/kg或更高浓度。3-FL在制备用于降低炎症因子IP10的释放的组合物时，其在组合物中的应用量具体可根据组合物种类及应用对象适当调整，例如液态乳等液态形式的组合物中，3-FL应用量可为0.05-10g/L，而在固态形式的组合物如固体饮料或固态营养补充剂中3-FL应用量可为1-500g/kg或更高浓度。

根据本发明的具体实施方案，本发明的母乳低聚糖在制备用于提升肠道对大肠杆菌感染的抵御力的组合物中的应用中，所述组合物包括食品组合物、饲料组合物或药品组合物。

在本发明的一些具体实施方案中，所述组合物为食品组合物，所述食品可以为婴幼儿食品(包括婴幼儿配方粉、辅食、营养补充剂)，或是3岁以上儿童、青少年和成人的营养补充剂或食品，例如可以是发酵乳制品(例如发酵乳、风味发酵乳、发酵乳饮料等)、乳酪、含乳饮料、固体饮料或乳粉等。以婴儿配方粉为例，3’-SL的添加量可为0.03-1.5g/L(以配方粉冲调成乳液的量计)，优选为0.03-0.5g/L。6’-SL的添加量可为0.03-1.5g/L(以配方粉冲调成乳液的量计)，优选为0.03-0.5g/L。3-FL的添加量可为0.05-10g/L(以配方粉冲调成乳液的量计)，优选为0.1-5g/L。

综上所述，本发明发现母乳低聚糖能显著减少致腹泻的大肠杆菌粘附在肠道细胞上，提升肠道在大肠杆菌侵染后的屏障能力，降低大肠杆菌侵染后炎症因子IP-10的释放，可用于添加在婴幼儿食品(包括婴幼儿配方粉、辅食、营养补充剂)，以及3岁以上儿童、青少年和成人的营养补充剂或食品中，具有对婴幼儿，或3岁以上幼儿和成人，在受到大肠杆菌感染时，提高生物体抵御感染的作用，具有广阔的应用前景。

附图说明

图1显示母乳低聚糖各单体与组合物对受试致病菌EPEC存活率影响。

图2显示母乳低聚糖各单体与组合物对致病菌EPEC作用于肠道细胞Caco-2的粘附实验结果。

图3显示母乳低聚糖各单体与各组合物对致病菌EPEC作用于肠道细胞Caco-2的粘附实验结果(以粘附数值相比对照的百分比呈现)。

图4显示母乳低聚糖各单体在大肠杆菌尚未加入时，与肠道细胞共培养，是否会造成肠道屏障的变化。

图5显示母乳低聚糖各单体对大肠杆菌造成的肠道屏障破坏的作用。

图6显示在未加入大肠杆菌共培养时，母乳低聚糖单体对肠道细胞分泌炎症因子IL-8的影响。

图7显示在未加入大肠杆菌共培养时，母乳低聚糖单体对肠道细胞分泌炎症因子IP-10的影响。

图8显示在加入大肠杆菌共培养时，母乳低聚糖单体对肠道细胞分泌炎症因子IL-8的影响。

图9显示在加入大肠杆菌共培养时，母乳低聚糖单体对肠道细胞分泌炎症因子IP-10的影响。

具体实施方式

为了对本发明的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，现结合具体实施例及对本发明的技术方案进行以下详细说明，应理解这些实例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。实施例中，各原始试剂材料均可商购获得，未注明具体条件的实验方法为所属领域熟知的常规方法和常规条件，或按照仪器制造商所建议的条件。

除非另外专门定义，本文使用的所有技术和科学术语都与相关领域普通技术人员的通常理解具有相同的含义。

此外，为避免重复，以下列出各实施例中的实验需要经过的通用步骤，如菌株培养等。

1.实验准备步骤

1.1培养基配置与受试益生元的储存和配置

含有益生元的培养基在每次实验当天于无菌环境中新鲜配置，并预热到37℃。受试的益生元(2’-FL，3-FL，3’-SL，6’-SL，LNT，GOS，FOS)被储存在干燥避光的室温环境中。

1.2不同益生元的配制

各实验中，除特别注明外，各益生元的受试浓度均为5g/L。

1.3Caco-2细胞培养

从DSMZ(德国不伦瑞克)公司购得人结肠肿瘤细胞系(Caco-2)，并在有5％CO₂，37℃一定湿度条件下培养。第40-44代Caco-2细胞被用于实验。MEM培养基中加入了20％(体积/体积)的胎牛血清(FBS)，1％的非必需氨基酸，1％的Glutamax，1％的丙酮酸钠，添加或未添加1％的青霉素-链霉素溶液，以及50μg/mL的庆大霉素(均从荷兰布雷达的Invitrogen公司购得)。细胞在T75培养瓶中长到80％丰度，用胰蛋白酶消化处理获取。

1.4致病菌ETEC和EPEC的培养

此研究使用了两种致病菌，分别是肠毒性的大肠杆菌ETEC H10407和肠道致病菌大肠杆菌EPEC血清型O119(EPEC serotype O119)。这两种菌可用来模拟体外的小肠感染。这两种都是导致婴儿腹泻和旅行者腹泻的常见致病菌，尤其在卫生条件较差的发展中地区。ETEC H10407是一个体外实验中常用的、被较好的定义的模型菌株，且已被广泛用在其他评估益生菌和益生元对于致病菌吸附和炎症信号传导的研究中。此菌株也被用在动物试验中用于研发疫苗。EPEC血清型O119是从婴儿粪便分离的，益生元已被证明可减少其吸附。

用BHI-B培养基(美国纽约默克公司)培养ETEC细胞株H10407(ATCC35401)。在37℃厌氧条件下过夜培养后，致病菌在感染前被再次培养，以达到对数中期。离心收集细胞，冲洗并在实验前用PBS再悬浮。

EPEC血清型O119株在冷冻干燥条件下从DSMZ处购得(DSM8699)。用BHI-B培养基(美国纽约默克公司)培养菌株。在37℃厌氧条件下过夜培养后，致病菌在感染前被再次培养，以达到对数中期。离心收集细胞，冲洗并在实验前用PBS再悬浮。

1.5数据分析

如有可能，用三次重复(有时候可用六次重复)来进行每个单独测试的统计分析。抗粘附数据用10log转化。对于10log转化后的抗粘附数据和表皮信号传导数据用one-wayANOVA来进行统计分析。用Dunnett’s posthoc测试来鉴定与阴性对照或者用大肠杆菌刺激条件下的统计差异。P<0.05被认为有显著性差异。因Dunnett’s posthoc测试用了ANOVAMSResidual用作差异的pooled评估，且用了修改的显著性数值用来调整比较的数目，所以同样的结果在一个图表中可能显著，而另一个图表中可能不显著。

2.具体实验步骤

2.1抗粘附测试

在24孔板上培养Caco-2细胞。在试验当天，用预热的PBS冲洗Caco-2细胞。受试物质被以三倍平行重复加到Caco-2细胞中。用受试物质培养细胞1小时。接着加入致病菌大肠杆菌，以感染倍数(MOI)50：1加入(最终浓度为10⁷CFU/mL)，与受试物质在37℃共培养1小时。作为阴性对照，Caco-2细胞在培养基中仅与致病菌一起培养。因被报道为可减少致病菌吸附，1mM氧化锌(ZnO)被用作阳性对照。在培养后，冲洗并裂解Caco-2细胞，然后致病菌被接种在琼脂上。在37℃琼脂平板上培养过夜后，数细菌的CFU菌落数以衡量致病菌吸附。数生长中的大肠杆菌菌落数并记录为CFU/mL。与抗粘附测试平行的，将大肠杆菌(终浓度为)10⁷CFU/mL添加到1mL受试的组合五种，并在37℃共培养1小时以测量活性。培养后，从每个样品离心收集大肠杆菌，再悬浮于PBS中，并在琼脂平板上接种。在37℃琼脂平板上培养过夜后，数细菌的CFU菌落数以衡量致病菌吸附。数生长中的大肠杆菌菌落数并记录为CFU/mL。

2.2肠道屏障完整性测试

理想的小肠上皮屏障功能是保护宿主免受致病菌侵入和/或致病菌来源毒素的先决条件。在此研究中，体外的屏障完整性通过测定肠道细胞层的跨表皮的电阻(TEER)体现。食物成分可能具有保护感染后肠道屏障功能下降的功能(减轻感染后TEER的下降)。为了研究益生元对于感染的作用，测定了TEER在大肠杆菌感染前和感染后随时间变化的情况。

Caco-2细胞被接种到Transwell聚碳酸酯细胞培养插入物中，平均孔径为0.4um，面积为0.33cm²直至完全分化(±1000Ω)。用世界精准仪器购入的EVOM2表皮伏特测量器测量跨上皮细胞电阻(TEER)以衡量屏障完整性。

在测试当天，细胞被冲洗，并在37℃下用不含抗生素和血清，但含有受试物质的培养基中培养1小时。紧接着加入大肠杆菌到受试物质之上(感染倍数MOI为200:1)，并培养6小时。在实验开始前(t＝-1)，受试物质暴露1小时后及添加致病菌前(t＝0)，并在致病菌接触后1小时、2小时、3小时、4小时和6小时分别测定TEER。在与致病菌接触后单独条件下的TEER值与其各自在t＝0时的TEER值相关，且被表述成ΔTEER(Ω.cm2)。阴性对照(只加入大肠杆菌)与未接触致病菌或受试物质的阳性对照也在实验组别中。所有条件重复测定三次，一些对照组被重复测定6次。

2.3炎症因子释放测试

益生元具有免疫调节(促进或者抗炎症)作用，能增加对于感染的抵抗力或者促进肠道健康。益生元的免疫调节作用可在存在或不存在促炎症刺激的情况下，测定小肠上皮细胞的细胞因子/趋化因子产生来衡量。用大肠杆菌菌株刺激Caco-2细胞并测定上清液中IL-8和IP-10的产生，可筛选益生元对于趋化因子/细胞因子的产生的影响。IL-8对于紧急的自身免疫反应很重要，可以导致中性粒细胞的聚集。IP-10在免疫的二级应答中很重要。它可以吸引单核细胞和巨噬细胞，也包括Th1细胞，这些对于清除感染有重要作用。促炎症的益生元可以增加IL-8、IP-10的生成，而抗炎症的益生元可以减少IL-8、IP-10的生成。

将Caco-2细胞在96孔板养到适合的丰度。在实验最初，用不含抗生素的培养基冲洗细胞一次。将单层细胞与受试物质在37℃下用不含抗生素的培养基中共培养1小时，重复三次。加入大肠杆菌刺激细胞(MOI 200:1)。在1小时培养后，单层细胞与致病菌共培养，并用含有受试物质和50μg/mL庆大霉素的培养液冲洗和培养过夜。作为空白对照，只用了培养液而没用大肠杆菌刺激。用大肠杆菌刺激但没用受试物质的培养液被用作大肠杆菌应答的对照。此外，作为Caco-2细胞应答的对照，用含有Rec TNFα(10ng/mL)以及Rec IFNγ(5ng/mL)(均从英国阿宾顿的R&D systems购入)的混合物培养液刺激细胞。刺激24小时候收集上清液并储存于-20℃。按照生产商的使用指导，用Bio-Plex试剂盒(美国加州BioRad公司)测试IL-8，IP-10和RANTES。

3.受试物质对致病菌EPEC存活率影响测试

为验证致病菌吸附的减少是否与致病菌活性有关，在益生元培养后也检测了致病菌活性。如图1，加入受试物质ZnO、2’-FL、3-FL、3’-SL、6’-SL、LNT、GOS、FOS等后，未显著影响大肠杆菌EPEC O119菌的存活率。可见母乳低聚糖不会影响大肠杆菌EPEC的存活率。

实施例1：多种母乳低聚糖对致病菌EPEC于肠道粘附实验

实验前准备步骤以及具体实验方法请见前述段落。通过常见致腹泻菌株(EPECO119)研究了益生元及其组合物阻止致病菌吸附到小肠上皮细胞的保护作用。结果参见图2和图3。

图2显示，3’-SL对于大肠杆菌EPEC对于小肠上皮细胞Caco-2的吸附有抑制作用，效果显著(p<0.05)。而作为对照的常见益生元FOS(低聚果糖)显著增加了大肠杆菌EPEC对于小肠上皮细胞Caco-2的吸附。

图3是将阴性对照组的数值作为100％时，将各母乳低聚糖对于大肠杆菌EPEC吸附小肠上皮细胞Caco-2的实验数据与阴性对照组相比，以百分比为单位呈现。可见3’-SL能抑制大肠杆菌EPEC对于小肠上皮细胞Caco-2的吸附作用，效果显著(p<0.05)。而作为对照的常见益生元低聚果糖FOS和低聚半乳糖GOS则显著增加了大肠杆菌EPEC对于小肠上皮细胞Caco-2的吸附。

实施例2：多种母乳低聚糖对跨膜电阻(TEER)影响的实验

实验前准备步骤以及具体实验方法请见前述段落。结果参见图4和图5。

图4显示，在未加入致病菌大肠杆菌时，将各HMO单体与肠道细胞共培养，并不会引起跨膜电阻(TEER)值的变化。可见各HMO作为受试物质，在没有加入致病菌的条件下，其可能导致跨膜电阻改变的基底值是可以忽略不计的。

图5显示，在不同的时间点测试了受试物质对于跨膜电阻的影响，在t＝1这个时间点，两种唾液酸基类HMO单体物质3’-SL和6’-SL对于大肠杆菌引起的肠道上皮细胞屏障的破坏有一定修复作用，且与未加入干预物而只有大肠杆菌的阴性对照TEER数值持续下跌相比，这两种HMO对曲线的下跌起到了一定提升作用，干预物质效果显著(p<0.05)。

实施例3：多种母乳低聚糖对肠道细胞分泌炎症因子IL-8和IP-10的影响

实验前准备步骤以及具体实验方法请见前述段落。

如图6和图7所示，在未加入致病菌大肠杆菌ETEC时，当肠道细胞与各HMO单体共培养，各HMO单体并不会导致肠道细胞产生炎症因子IL-8和IP-10。这证明作为各HMO单体作为受试物质，在这一测试中，其可能导致的炎症因子变化的能力或其基底值是可以忽略不计的。

如图8所示，当与大肠杆菌ETEC共培养时，3’-SL和6’-SL有降低炎症因子IL-8的趋势，但无显著效果。说明岩藻糖基类和唾液酸基类的HMO单体对于炎症因子的释放调控作用可能各异。

如图9显示，当与大肠杆菌ETEC共培养时，3-FL可以降低炎症因子IP10的释放，效果显著(P<0.01)，3’-SL也可以降低炎症因子IP10的释放，效果显著(P<0.001)。说明岩藻糖基类和唾液酸基类的HMO单体对于炎症因子的释放有一定调控作用。

Claims

1.母乳低聚糖在制备用于提升肠道对大肠杆菌感染的抵御力的组合物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其中，所述母乳低聚糖为岩藻糖基类低聚糖或唾液酸基类低聚糖。

3.根据权利要求1所述的应用，其中，所述母乳低聚糖为3-FL、3’-SL或6’-SL。

4.根据权利要求1所述的应用，其中，所述组合物是用于抑制大肠杆菌EPEC对于小肠上皮细胞Caco-2的吸附作用。

5.根据权利要求4所述的应用，其中，所述母乳低聚糖为3’-SL。

6.根据权利要求1所述的应用，其中，所述组合物是用于修复大肠杆菌引起的肠道上皮细胞屏障的破坏。

7.根据权利要求6所述的应用，其中，所述母乳低聚糖为3’-SL或6’-SL。

8.根据权利要求1所述的应用，其中，所述组合物是用于降低炎症因子IP10的释放。

9.根据权利要求8所述的应用，其中，所述母乳低聚糖为3’-SL或3-FL。

10.根据权利要求1～9任一项所述的应用，其中，所述组合物包括食品组合物、饲料组合物或药品组合物。