CN113679048A - 一种调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉，通过添加多种适合婴幼儿食用的益生菌种类，包括乳双歧杆菌HN019、鼠李糖乳杆菌HN001、乳双歧杆菌Bi‑07、动物双歧杆菌Bb‑12和短双歧杆菌M‑16V，并进行科学配比，从而安全有效地调节婴幼儿肠道菌群平衡。同时，本发明采用多种益生元，包括低聚半乳糖和低聚果糖，并进行科学配比，避免了菌群因高温与胃酸刺激会引起大量死亡，保持益生菌的高活性，同时提高了菌种在运输、储存等过程中稳定性。本发明的高活性益生菌冻干粉，可用于固体饮料、发酵剂等产品中。
Description
技术领域
本发明涉及益生菌制备技术领域，尤其涉及一种调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉。
背景技术
自90年代初以来形形色色的“益生菌”类保健品风靡了整个世界。与此同时“益生菌”的研究业已成为国际上的热门研究课题。何谓益生菌？国际营养学界普遍认可的定义是：益生菌系一种对动物有益的细菌它们可直接作为食品添加剂服用以维持肠道菌丛的平衡。
当人体住满足够的益生菌时人就会处于健康的状态，但是一旦体内菌群失去平衡比如菌种间比例发生大幅变化或者超出正常数值时，那么腹泻、过敏、胃口不佳、疲倦、免疫力低等一系列病症就会随之而来，人体的健康就会亮红灯，而这时适当添加益生菌协助体内菌群平衡才能让人重现健康状态。
双歧杆菌(Bifidobacterium)是一种革兰氏阳性专性厌氧菌，是健康动物和人肠道内定植的优势益生菌。研究发现婴儿肠道中的双歧杆菌占肠道菌种的60％，60岁以上的老人其肠道内的双歧杆菌仅占总菌群的7.9％，即双歧杆菌数量比例随着年龄的增加及消化功能的减弱而变化。它对宿主产生免疫、营养、刺激生长及生物颉颃等作用，维持肠道微生态平衡，提高机体防御能力，而且不在肠道内产生内、外毒素，也不产生有害气体和致病物质。近些年来，人体肠道内双歧杆菌的种类和数量已经成为人体健康状态是否良好的一项重要指标。目前已经发现和报道的双歧杆菌有32种，例如婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、青春双歧杆菌 (Bifidobacterium adolescentis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)等。
婴幼儿由于自身免疫系统发育尚未成熟，母传抗体在出生后逐渐消失，在出生后最初六年都处于易感期，这段时间很多婴幼儿都会出现胃肠功能、免疫功能不完善、机体抵抗力较弱、消化功能紊乱、肠吸收不良及感染性疾病等。这些小状态不但阻碍了婴幼儿体格的生长和发育，对婴幼儿智力认知的发育、情感社交能力的发育都带来不同程度的影响，而目前适合婴幼儿食用的益生菌种类较少，现有产品对调节婴幼儿肠道菌群平衡的效果不是特别明显，同时，保持益生菌的体内外活性一直是本领域的瓶颈问题，菌群因高温与胃酸刺激会引起大量死亡，因此需要保证菌群的高活性从而安全有效地解决各种肠道问题。
发明内容
本发明针对上述技术问题，提供一种调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉，由A组份和B 组份混合冻干而成，A组份和B组份的质量比为1:9，其中，
A组份由以下重量份的原料组成：
乳双歧杆菌HN019冻干粉50-60份；
鼠李糖乳杆菌HN001冻干粉30-40份；
乳双歧杆菌Bi-07冻干粉1-5份；
动物双歧杆菌Bb-12冻干粉1-5份；
短双歧杆菌M-16V冻干粉1-5份；
B组份由以下重量份的原料组成：
麦芽糊精45-55份；
低聚半乳糖20-25份；
脱脂奶粉10-15份；
低聚果糖1-5份；
每克冻干粉中含有活菌≥6×1010CFU，且水分含量低于3％。
优选地，A组份由以下重量份的原料组成：
乳双歧杆菌HN019冻干粉55份；
鼠李糖乳杆菌HN001冻干粉38份；
乳双歧杆菌Bi-07冻干粉2份；
动物双歧杆菌Bb-12冻干粉3份；
短双歧杆菌M-16V冻干粉2份。
优选地，B组份由以下重量份的原料组成：
麦芽糊精50份；
低聚半乳糖20份；
脱脂奶粉15份；
低聚果糖5份。
本发明还提供了上述冻干粉的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备A组份：将乳双歧杆菌HN019冻干粉、鼠李糖乳杆菌HN001 冻干粉、乳双歧杆菌Bi-07冻干粉、动物双歧杆菌Bb-12冻干粉和短双歧杆菌M-16V冻干粉分别置于试管中活化，得到一级种子液，然后将一级种子液分别接种于培养基上培养24小时得到二级种子液，将二级种子液分别接入发酵培养基中进行发酵，接种量为4％，培养温度35℃，厌氧培养12 小时，分别收集发酵液；
S2、将步骤S1中收集的多个发酵液分别离心，收集菌体后加入保护剂乳化，分别真空冷总干燥制得菌粉，然后按照所述重量份数混合得到A组份，备用；
S3、制备B组份：将麦芽糊精、低聚半乳糖、低聚果糖、脱脂奶粉分别过100目筛，按照所述重量份将其混合，搅拌均匀，得B组份，备用；
S4、将步骤S3的B组份，加入适量水搅拌使之溶解，按照A组份和 B组份质量比，将A组份缓慢均匀加入到B组份中，搅拌混匀，得到混合物C组份；
S5、将混合物C组份进行冷冻干燥，得到益生菌冻干粉D，每克中含有活菌≥6×1010CFU。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
通过添加多种适合婴幼儿食用的益生菌种类，包括乳双歧杆菌HN019、鼠李糖乳杆菌HN001、乳双歧杆菌Bi-07、动物双歧杆菌Bb-12和短双歧杆菌M-16V，并进行科学配比，从而安全有效地调节婴幼儿肠道菌群平衡。同时，本发明采用多种益生元，包括低聚半乳糖和低聚果糖，并进行科学配比，避免了菌群因高温与胃酸刺激会引起大量死亡，保持益生菌的高活性，同时提高了菌种在运输、储存等过程中稳定性。本发明的高活性益生菌冻干粉，可用于固体饮料、发酵剂等产品中。
具体实施方式
本发明提供的一种调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉，由A组份和B组份混合冻干而成，A组份和B组份的质量比为1:9，其中， A组份由以下重量份的原料组成：
乳双歧杆菌HN019冻干粉50-60份；
鼠李糖乳杆菌HN001冻干粉30-40份；
乳双歧杆菌Bi-07冻干粉1-5份；
动物双歧杆菌Bb-12冻干粉1-5份；
短双歧杆菌M-16V冻干粉1-5份；
B组份由以下重量份的原料组成：
麦芽糊精45-55份；
低聚半乳糖20-25份；
脱脂奶粉10-15份；
低聚果糖1-5份；
每克冻干粉中含有活菌≥6×109CFU，且水分含量低于3％。
乳双歧杆菌HN019为革兰阳性菌，呈不规则杆状，长0.9～1.2um，宽 0.4～0.6um，不具移动性，不形成内生孢子，过氧化氢酶实验为阴性。在液态或半固态的环境下培养只有少数会成对出现，不会形成链状，为兼性厌氧菌或绝对厌氧菌。最适生长温度为37～41℃，超过45℃则不生长。乳双歧杆菌HN019 对酸和胆盐具有很强的耐受能力，对肠道细胞的黏附能力很强。研究表明乳双歧杆菌HN019具有以下生理功：1、调节免疫，2、降低肠道和呼吸道感染，3、显著降低痢疾，4、显著降低肺炎，5、降低严重性下呼吸道感染的发生率，6、降低患严重疾病和高热的天数减少。乳双歧杆菌HN019被列入我国《可用于婴幼儿食品的菌种名单》，并通过了美国食品药品监督管理局的GRAS(一般认为安全的物质)认定，主要用于制作膳食补充剂，固体饮料及婴幼儿学龄前儿童的配方粉。
鼠李糖乳杆菌HN001是一种革兰氏阳性兼性厌氧、不运动、不生芽孢的杆状微生物。鼠李糖乳杆菌已被列入《具有在食品中安全使用记录史的微生物清单》。该物种也被纳入到欧盟食品安全局(EFSA)的安全资格认定列表。
乳双歧杆菌Bi-07为革兰阳性、厌氧、不产芽孢的多型性杆菌，能够发酵产乳酸。乳双歧杆菌Bi-07已被列入《具有在食品中安全使用记录史的微生物清单》。欧洲食品安全局也将该物种加入到安全资格认定列表中。
动物双歧杆菌Bb-12是一种过氧化氢酶阴性的杆状细菌，可有效促进肠道菌群平衡，并提高人体免疫力，并于2005年获得中国卫生部新资源证书，2011 年11月中国卫生部正式批准用于婴幼儿食品。
短双歧杆菌M-16V(Bifidobacteriumbreve)属于双歧杆菌属。该菌种已列入欧盟安全资格认定(QPS)推荐的生物制剂列表中，并列入国际乳业联盟 (IDF)“具有在食品中安全使用记录史的微生物清单”。2011年短双歧杆菌列入我国《可用于食品的菌种名单》。短双歧杆菌M-16V分离自健康婴儿肠道内，经接种、发酵培养、浓缩、冷冻干燥制得。该菌种已通过美国食品药品监督管理局的GRAS(一般认为安全的物质)认定，可用于婴幼儿配方粉。
低聚半乳糖、低聚果糖作为益生元，来促进益生菌生长是“活菌外养”瓶颈问题的最有效的方法，可以避免菌群因高温与胃酸刺激的大量死亡与本体菌群对外来菌群的抗拒从人体内原生增殖益生菌，从而安全有效地解决各种肠道问题。
麦芽糊精、脱脂奶粉作为冻干保护剂。
本发明所使用的各原料符合以下规定：
麦芽糊精应符合GB/T 20884的规定。
低聚半乳糖应符合卫生部公告第20号[2008]的规定。
脱脂奶粉应符合GB 10765的规。
低聚果糖应符合GB/T 23528的规定。
乳双歧杆菌(HN019)、鼠李糖乳杆菌(HN001)、乳双歧杆菌(Bi-07)、动物双歧杆菌(Bb-12)、短双歧杆菌(M-16)应符合QB/T 4575的规定。
生产用水应符合GB 5749的规定。
为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面将结合实施例对本发明作进一步的详细介绍。
实施例1调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉制备
S1、制备A组份：将乳双歧杆菌HN019冻干粉、鼠李糖乳杆菌HN001 冻干粉、乳双歧杆菌Bi-07冻干粉、动物双歧杆菌Bb-12冻干粉和短双歧杆菌M-16V冻干粉分别置于试管中活化，得到一级种子液，然后将一级种子液分别接种于培养基上培养20小时得到二级种子液，将二级种子液分别接入发酵培养基中进行发酵，接种量为4％，培养温度35℃，厌氧培养12 小时，分别收集发酵液；
S2、将步骤S1中收集的多个发酵液分别离心，收集菌体后加入保护剂乳化，分别真空冷总干燥制得菌粉，然后按照将乳双歧杆菌HN019冻干粉 55份、鼠李糖乳杆菌HN001冻干粉38份、乳双歧杆菌Bi-07冻干粉2份、动物双歧杆菌Bb-12冻干粉3份和短双歧杆菌M-16V冻干粉2份混合得到 A组份，备用；
S3、制备B组份：将麦芽糊精、低聚半乳糖、低聚果糖、脱脂奶粉分别过100目筛，按照麦芽糊精50份、低聚半乳糖20份、脱脂奶粉15份、低聚果糖5份将其混合，搅拌均匀，得B组份，备用；
S4、将步骤S3的B组份，加入适量水搅拌使之溶解，按照A组份和 B组份质量比1:9，将A组份缓慢均匀加入到B组份中，搅拌混匀，得到混合物C组份；
S5、将混合物C组份进行冷冻干燥，得到益生菌冻干粉D，每克中含有活菌≥6×1010CFU。
S6、将S5中得到的益生菌冻干粉D放置于粉碎机中进行粉碎，然后过600目筛，得到调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌粉，然后将调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌粉放入包装机中等份包装，每袋1g，即得成品。
所得成品的感官指标与试验方法符合表1规定。
表1感官指标与试验方法
所得成品的理化指标与试验方法符合表2规定。
表2理化指标与试验方法
所得成品的微生物指标与试验方法符合表3的规定。
表3微生物指标与试验方法
所得成品的营养成分检测结果如表4所示。
表4营养成分表
| 项目 | 每100克 | NRV％ |
| 能量 | 1785千焦(KJ) | 21％ |
| 蛋白质 | 7.8克(g) | 13％ |
| 脂肪 | 1.4克(g) | 2％ |
| 碳水化合物 | 41.3克(g) | 14％ |
| 钠 | 0克(g) | 0％ |
实施例2调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉制备
制备方法与实施例1相同，不同之处在于：
步骤S2中A组分为：乳双歧杆菌HN019冻干粉50份、鼠李糖乳杆菌HN001冻干粉40份、乳双歧杆菌Bi-07冻干粉5份、动物双歧杆菌Bb-12 冻干粉1份、短双歧杆菌M-16V冻干粉1份。
所得成品的感官、理化、微生物、营养成分检测结果与实施例1相似。
实施例3调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉制备
制备方法与实施例1相同，不同之处在于：
步骤S2中A组分为：乳双歧杆菌HN019冻干粉60份、鼠李糖乳杆菌HN001冻干粉30份、乳双歧杆菌Bi-07冻干粉1份、动物双歧杆菌Bb-12 冻干粉5份、短双歧杆菌M-16V冻干粉5份。
所得成品的感官、理化、微生物、营养成分检测结果与实施例1相似。
实施例4调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉制备
制备方法与实施例1相同，不同之处在于：
步骤S3中B组份为：麦芽糊精45份、低聚半乳糖25份、脱脂奶粉 15份、低聚果糖1份。
所得成品的感官、理化、微生物检测结果与实施例1相似，营养成分略有不同。
实施例5调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉制备
制备方法与实施例1相同，不同之处在于：
步骤S3中B组份为：麦芽糊精55份、低聚半乳糖20份、脱脂奶粉10 份、低聚果糖5份。
所得成品的感官、理化、微生物检测结果与实施例1相似，营养成分略有不同。
对比例1
制备方法与实施例1相同，不同之处在于：
步骤S2中A组分为：乳双歧杆菌HN019冻干粉20份、鼠李糖乳杆菌HN001冻干粉20份、乳双歧杆菌Bi-07冻干粉20份、动物双歧杆菌Bb-12 冻干粉20份、短双歧杆菌M-16V冻干粉20份。
所得成品的感官、理化、微生物、营养成分检测结果与实施例1相似。
对比例2
制备方法与实施例1相同，不同之处在于：
步骤S3中B组份为：麦芽糊精55份、低聚半乳糖10份、脱脂奶粉5 份、低聚果糖10份。
所得成品的感官、理化、微生物检测结果与实施例1相似，营养成分略有不同。
对比例3
制备方法与实施例1相同，不同之处在于：
步骤S4中A组份和B组份质量比1:8。
所得成品的感官、理化、微生物、营养成分检测结果与实施例1相似。
对比例4
制备方法与实施例1相同，不同之处在于：
步骤S4中A组份和B组份质量比1:10。
所得成品的感官、理化、微生物、营养成分检测结果与实施例1相似。
对比例5
制备方法与实施例1相同，不同之处在于：
步骤S2中A组分为：乳双歧杆菌HN019冻干粉20份、鼠李糖乳杆菌HN001冻干粉20份、乳双歧杆菌Bi-07冻干粉20份、动物双歧杆菌Bb-12 冻干粉20份、短双歧杆菌M-16V冻干粉20份。
步骤S3中B组份为：麦芽糊精55份、低聚半乳糖10份、脱脂奶粉5 份、低聚果糖10份。
步骤S4中A组份和B组份质量比5:16。
所得成品的感官、理化、微生物检测结果与实施例1相似，营养成分略有不同。
将实施例1-5和对比例1-4制备的冻干粉成品分别置于25℃下储存，分别在0天、1个月、3个月、6个月、12个月、24个月检测其活菌数，结果见表1。
表1实施例1-5和对比例1-4冻干粉活菌数
通过上述实验可以看出，采用本发明配方范围的冻干粉活菌数较高且 2年内菌存活率较高，其中，实施例1的的活性最高，而超出本发明配方的冻干粉活菌数和2年内存活率均达不到本发明的效果。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换，但这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
Claims (5)
1.一种调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉，其特征在于，由A组份和B组份混合冻干而成，A组份和B组份的质量比为1:9，其中，
A组份由以下重量份的原料组成：
乳双歧杆菌HN019冻干粉50-60份；
鼠李糖乳杆菌HN001冻干粉30-40份；
乳双歧杆菌Bi-07冻干粉1-5份；
动物双歧杆菌Bb-12冻干粉1-5份；
短双歧杆菌M-16V冻干粉1-5份；
B组份由以下重量份的原料组成：
麦芽糊精45-55份；
低聚半乳糖20-25份；
脱脂奶粉10-15份；
低聚果糖1-5份；
每克冻干粉中含有活菌≥6×1010CFU，且水分含量低于3％。
2.根据权利要求1所述的调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉，其特征在于，A组份由以下重量份的原料组成：
乳双歧杆菌HN019冻干粉55份；
鼠李糖乳杆菌HN001冻干粉38份；
乳双歧杆菌Bi-07冻干粉2份；
动物双歧杆菌Bb-12冻干粉3份；
短双歧杆菌M-16V冻干粉2份。
3.根据权利要求1所述的调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉，其特征在于，B组份由以下重量份的原料组成：
麦芽糊精 50份；
低聚半乳糖 20份；
脱脂奶粉 15份；
低聚果糖 5份。
4.根据权利要求1所述的调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉，其特征在于，其制备方法包括以下步骤：
S1、制备A组份：将乳双歧杆菌HN019冻干粉、鼠李糖乳杆菌HN001冻干粉、乳双歧杆菌Bi-07冻干粉、动物双歧杆菌Bb-12冻干粉和短双歧杆菌M-16V冻干粉分别置于试管中活化，得到一级种子液，然后将一级种子液分别接种于培养基上培养24小时得到二级种子液，将二级种子液分别接入发酵培养基中进行发酵，接种量为4％，培养温度35℃，厌氧培养12小时，分别收集发酵液；
S2、将步骤S1中收集的多个发酵液分别离心，收集菌体后加入保护剂乳化，分别真空冷总干燥制得菌粉，然后按照所述重量份数混合得到A组份，备用；
S3、制备B组份：将麦芽糊精、低聚半乳糖、低聚果糖、脱脂奶粉分别过100目筛，按照所述重量份将其混合，搅拌均匀，得B组份，备用；
S4、将步骤S3的B组份，加入适量水搅拌使之溶解，按照A组份和B组份质量比，将A组份缓慢均匀加入到B组份中，搅拌混匀，得到混合物C组份；
S5、将混合物C组份进行冷冻干燥，得到益生菌冻干粉D，每克中含有活菌≥6×1010CFU。
5.根据权利要求1-3任一项所述的调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、制备A组份：将乳双歧杆菌HN019冻干粉、鼠李糖乳杆菌HN001冻干粉、乳双歧杆菌Bi-07冻干粉、动物双歧杆菌Bb-12冻干粉和短双歧杆菌M-16V冻干粉分别置于试管中活化，得到一级种子液，然后将一级种子液分别接种于培养基上培养24小时得到二级种子液，将二级种子液分别接入发酵培养基中进行发酵，接种量为4％，培养温度35℃，厌氧培养12小时，分别收集发酵液；
S2、将步骤S1中收集的多个发酵液分别离心，收集菌体后加入保护剂乳化，分别真空冷总干燥制得菌粉，然后按照所述重量份数混合得到A组份，备用；
S3、制备B组份：将麦芽糊精、低聚半乳糖、低聚果糖、脱脂奶粉分别过100目筛，按照所述重量份将其混合，搅拌均匀，得B组份，备用；
S4、将步骤S3的B组份，加入适量水搅拌使之溶解，按照A组份和B组份质量比，将A组份缓慢均匀加入到B组份中，搅拌混匀，得到混合物C组份；
S5、将混合物C组份进行冷冻干燥，得到益生菌冻干粉D，每克中含有活菌≥6×1010CFU。
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