CN114832021A - 一种含有人体同源菌株的益生菌粉及其应用 - Google Patents

一种含有人体同源菌株的益生菌粉及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN114832021A
CN114832021A CN202210534976.1A CN202210534976A CN114832021A CN 114832021 A CN114832021 A CN 114832021A CN 202210534976 A CN202210534976 A CN 202210534976A CN 114832021 A CN114832021 A CN 114832021A
Authority
CN
China
Prior art keywords
vitamin
probiotic powder
probiotic
bag
bifidobacterium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202210534976.1A
Other languages
English (en)
Inventor
金海鹰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bifido Beijing Biological Technology Co ltd
Original Assignee
Bifido Beijing Biological Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bifido Beijing Biological Technology Co ltd filed Critical Bifido Beijing Biological Technology Co ltd
Priority to CN202210534976.1A priority Critical patent/CN114832021A/zh
Publication of CN114832021A publication Critical patent/CN114832021A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/745—Bifidobacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/07—Retinol compounds, e.g. vitamin A
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
    • A61K31/355—Tocopherols, e.g. vitamin E
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/375—Ascorbic acid, i.e. vitamin C; Salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4415—Pyridoxine, i.e. Vitamin B6
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/455—Nicotinic acids, e.g. niacin; Derivatives thereof, e.g. esters, amides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A61K31/51—Thiamines, e.g. vitamin B1
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/525—Isoalloxazines, e.g. riboflavins, vitamin B2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/59—Compounds containing 9, 10- seco- cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/702—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7135—Compounds containing heavy metals
    • A61K31/714—Cobalamins, e.g. cyanocobalamin, i.e. vitamin B12
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/06—Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/26—Iron; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/30—Zinc; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

本发明公开了一种含有人体同源菌株的益生菌粉及其应用，属于微生物技术领域以及医药技术领域。本发明的益生菌粉由两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011、鼠李糖乳杆菌BH09、双重益生元和13种基础营养素组成，能够调节儿童肠道菌群紊乱，具体体现在：这一益生菌粉可改善肠道微生态环境，预防轮状病毒感染，预防及缓解儿童湿疹、过敏性皮肤炎，缓解腹泻、便秘等肠道问题，改善乳糖不耐受，可有效排除食物中的毒素。因此含有两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011和鼠李糖乳杆菌BH09的益生菌粉在调节儿童肠道菌群紊乱上具有很大的应用前景。

Description

一种含有人体同源菌株的益生菌粉及其应用
技术领域
本发明涉及一种含有人体同源菌株的益生菌粉及其应用，属于微生物技术领域和医药技术领域。
背景技术
儿童早期肠道菌群的建立组成，要追溯到婴幼儿时期在母亲子宫内的肠道菌群建立，经胎盘传递的母亲菌群结构，促使胎儿免疫和肠粘膜发育。
肠道菌群(intestinal microflora)是目前人体微生态学研究者关注的核心问题。随着大家对微生态认识的深入和分子生物学技术的应用广泛，证实肠道菌群对儿童重要的生理功能，诸如免疫、代谢、营养等的发育成熟过程起着决定性的作用，与感染性疾病、肠道慢性炎症性疾病、过敏性疾病、自身免疫性疾病及代谢疾病等密切相关。
肠道正常的微生物菌群可以抑制致病菌的过度生长,对人体健康起屏障作用。国内外对于肠道菌群微生态失衡的问题，临床上主要的方法主要有利巴韦林、潘生丁、蒙脱石散等药物治疗。
发明内容
为了解决婴童时期肠道菌群不平衡的表现特点，如奶瓣、肠胀气、便秘腹泻、过敏、乳糖不耐受等基础肠道不适引起的问题，依据现有临床及研究者发现结果，提出了一种含人体同源菌株的益生菌粉及其应用，具体如下：
本发明提供了一种含有人体同源菌株的益生菌粉，由两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011、鼠李糖乳杆菌BH09、双重益生元和13种基础营养素组成。所述两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011和鼠李糖乳杆菌BH09为主要调节成分，双重益生元和13种基础营养素为辅助调节成分。其中：所述双重益生元包括低聚果糖和低聚半乳糖，13种基础营养素包括钙、铁、锌、维生素A、维生素D、维生素E、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素C、烟酸和叶酸。
在本发明的一种实施方式中，按照每袋2g的添加量计，上述益生菌粉各成分添加量如下所示：
两歧双歧杆菌BGN4 40亿CFU/袋(按活菌数计)
长双歧杆菌BORI 25亿CFU/袋(按活菌数计)
乳双歧杆菌AD011 25亿CFU/袋(按活菌数计)
鼠李糖乳杆菌BH09 10亿CFU/袋(按活菌数计)
低聚果糖339.2mg/袋
低聚半乳糖92mg/袋
钙15mg/袋
铁0.3mg/袋
锌0.29mg/袋
维生素A 20μgRE袋
维生素D 0.03μg/袋
维生素E 0.2mgα-TE/袋
维生素B1 0.03mg/袋
维生素B2 0.03mg/袋
维生素B6 0.03mg/袋
维生素B12 0.1μg/袋
维生素C 3mg/袋
烟酸0.39mg/袋
叶酸8μgDFE/袋。
在本发明的一种实施方式中，上述益生菌的冻干菌粉的制备方法，包括如下步骤：
1)将两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011、鼠李糖乳杆菌BH09分别划线于MRS固体培养基上，37℃条件下培养48h，得到单菌落。
2)挑取单菌落分别接种于MRS液体培养基中，37℃条件下培养24～48h进行活化，得到一级种子液。
3)将一级种子液按接种量为3％(v/v)分别转接至种子培养基中得到二级种子液，培养条件为37℃，培养24～48h。
4)将二级种子液分别接入发酵培养基中进行高密度发酵，接种量为3％(v/v)，培养条件为35～37℃，培养24～48h。
5)待发酵液中菌体密度达到108～109CFU/mL，分别收集发酵液；将所述发酵液分别离心收集菌体。
6)收集菌体后分别用冻干保护剂重悬，得到重悬液。
7)将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011、鼠李糖乳杆菌BH09冻干菌粉。
在本发明的一种实施方式中，所述培养基为MRS培养基(g/L)：蛋白胨10g、牛肉浸粉10g、葡萄糖20g、乙酸钠2g、酵母浸粉5g、柠檬酸氢二铵2g、K2PO4·3H2O 0.4g、MgSO4·7H2O0.2g、MnSO40.05g、吐温80 1mL、琼脂15g，pH调制6.2～6.3。
在本发明的一种实施方式中，所述冻干保护剂按重量百分比计由以下成分制成：脱脂奶粉15％、海藻糖6％、甘油4％和木糖醇1.5％。
在本发明的一种实施方式中，上述益生菌粉的制备方法，包括如下步骤：
1)分别取两歧双歧杆菌BGN4冻干菌粉40亿CFU、长双歧杆菌BORI冻干菌粉25亿CFU、乳双歧杆菌AD011冻干菌粉25亿CFU和鼠李糖乳杆菌BH09冻干菌粉10亿CFU后混合。
2)向上述益生菌冻干菌粉混合物中依次加入低聚果糖339.2mg、低聚半乳糖92mg、钙15mg、铁0.3mg、锌0.29mg、维生素A 20μgRE、维生素D 0.03μg、维生素E 0.2mgα-TE、维生素B1 0.03mg、维生素B2 0.03mg、维生素B60.03mg、维生素B12 0.1μg、维生素C 3mg、烟酸0.39mg和叶酸8μgDFE，搅拌均匀，充分混合后分装至袋装即得益生菌粉，所述袋装选用密封性好、安全的食品级PE包装材质，规格为2g。
在本发明的一种实施方式中，上述益生菌粉的用法用量为：
对于全年龄层(包含幼儿和儿童)人群的食用建议为每天一袋，在10～20ml低于37℃的水、牛奶、粥或汤类中溶解后食用，饭后半小时内食用更佳，减少胃酸和胆汁的破坏力。也可以直接干吃。
若服用抗生素期间，建议先用抗生素，间隔2～3小时再用益生菌粉。
本发明还提供了一种上述益生菌粉在调节儿童肠道菌群紊乱表现上的应用。
本发明的有益效果在于：
1)本发明提供了一种含有人体同源菌株的益生菌粉，由两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011、鼠李糖乳杆菌BH09、双重益生元和13种基础营养素组成。此益生菌粉能够调节儿童肠道菌群紊乱，具体体现在：这一益生菌粉可改善肠道微生态环境，预防轮状病毒感染，预防及缓解儿童湿疹、过敏性皮肤炎，缓解腹泻、便秘等肠道问题，改善乳糖不耐受，可有效排除食物中的毒素。因此含有两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011和鼠李糖乳杆菌BH09的益生菌粉在调节儿童肠道菌群紊乱上具有很大的应用前景。
2)本发明中的两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011是从健康的母乳喂养婴儿的粪便中分离出来的，鼠李糖乳杆菌是从健康的人肠道里分泌出来的有益菌群。本发明中的双重益生元和13种营养素的搭配加入，符合国家GB/T 29602-2013及GB14880-2012允许添加量。因此，本发明的益生菌粉对人体而言，健康且无毒副作用。
具体实施方式
本发明提供了一种含有人体同源菌株的益生菌粉，由两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011、鼠李糖乳杆菌BH09、双重益生元和13种基础营养素组成。所述两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011和鼠李糖乳杆菌BH09为主要调节成分，双重益生元和13种基础营养素为辅助调节成分。其中：所述双重益生元包括低聚果糖和低聚半乳糖，13种基础营养素包括钙、铁、锌、维生素A、维生素D、维生素E、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素C、烟酸和叶酸。
下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
下述实施例中涉及的培养基如下：
MRS培养基(g/L)：蛋白胨10g、牛肉浸粉10g、葡萄糖20g、乙酸钠2g、酵母浸粉5g、柠檬酸氢二铵2g、K2PO4G3H2O 0.4g、MgSO4·7H2O 0.2g、MnSO40.05g、吐温80 1mL、琼脂15g，pH调制6.2～6.3。
实施例1：两歧双歧杆菌BGN4冻干菌粉的制备
1)两歧双歧杆菌BGN4划线于MRS固体培养基上，37℃条件下培养48h，得到单菌落。
2)挑取单菌落接种于MRS液体培养基中，37℃条件下培养24～48h进行活化，得到一级种子液。
3)将一级种子液按接种量为3％(v/v)分别转接至种子培养基中得到二级种子液，培养条件为37℃，培养24～48h。
4)将二级种子液分别接入发酵培养基中进行高密度发酵，接种量为3％(v/v)，培养条件为35～37℃，培养24～48h。
5)待发酵液中菌体密度达到108～109CFU/mL，分别收集发酵液；将所述发酵液分别离心收集菌体。
6)收集菌体后用冻干保护剂重悬(冻干保护剂按重量百分比计由以下成分制成：脱脂奶粉15％、海藻糖6％、甘油4％和木糖醇1.5％)，得到重悬液。
7)将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到两歧双歧杆菌BGN4冻干菌粉。
实施例2长双歧杆菌BORI冻干菌粉的制备
1)长双歧杆菌BORI划线于MRS固体培养基上，37℃条件下培养48h，得到单菌落。
2)挑取单菌落接种于MRS液体培养基中，37℃条件下培养24～48h进行活化，得到一级种子液。
3)将一级种子液按接种量为3％(v/v)分别转接至种子培养基中得到二级种子液，培养条件为37℃，培养24～48h。
4)将二级种子液分别接入发酵培养基中进行高密度发酵，接种量为3％(v/v)，培养条件为35～37℃，培养24～48h。
5)待发酵液中菌体密度达到108～109CFU/mL，分别收集发酵液；将所述发酵液分别离心收集菌体。
6)收集菌体后用冻干保护剂重悬(冻干保护剂按重量百分比计由以下成分制成：脱脂奶粉15％、海藻糖6％、甘油4％和木糖醇1.5％)，得到重悬液。
7)将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到长双歧杆菌BORI冻干菌粉。
实施例3乳双歧杆菌AD011冻干菌粉的制备
1)乳双歧杆菌AD011划线于MRS固体培养基上，37℃条件下培养48h，得到单菌落。
2)挑取单菌落接种于MRS液体培养基中，37℃条件下培养24～48h进行活化，得到一级种子液。
3)将一级种子液按接种量为3％(v/v)分别转接至种子培养基中得到二级种子液，培养条件为37℃，培养24～48h。
4)将二级种子液分别接入发酵培养基中进行高密度发酵，接种量为3％(v/v)，培养条件为35～37℃，培养24～48h。
5)待发酵液中菌体密度达到108～109CFU/mL，分别收集发酵液；将所述发酵液分别离心收集菌体。
6)收集菌体后用冻干保护剂重悬(冻干保护剂按重量百分比计由以下成分制成：脱脂奶粉15％、海藻糖6％、甘油4％和木糖醇1.5％)，得到重悬液。
7)将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到乳双歧杆菌AD011冻干菌粉。
实施例4鼠李糖乳杆菌BH09冻干菌粉的制备
1)鼠李糖乳杆菌BH09划线于MRS固体培养基上，37℃条件下培养48h，得到单菌落。
2)挑取单菌落接种于MRS液体培养基中，37℃条件下培养24～48h进行活化，得到一级种子液。
3)将一级种子液按接种量为3％(v/v)分别转接至种子培养基中得到二级种子液，培养条件为37℃，培养24～48h。
4)将二级种子液分别接入发酵培养基中进行高密度发酵，接种量为3％(v/v)，培养条件为35～37℃，培养24～48h。
5)待发酵液中菌体密度达到108～109CFU/mL，分别收集发酵液；将所述发酵液分别离心收集菌体。
6)收集菌体后用冻干保护剂重悬(冻干保护剂按重量百分比计由以下成分制成：脱脂奶粉15％、海藻糖6％、甘油4％和木糖醇1.5％)，得到重悬液。
7)将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到鼠李糖乳杆菌BH09冻干菌粉。
实施例5益生菌粉的制备
按照每袋2g的添加量计，益生菌粉各成分添加量如下所示：
两歧双歧杆菌BGN4 40亿CFU/袋(按活菌数计)
长双歧杆菌BORI 25亿CFU/袋(按活菌数计)
乳双歧杆菌AD011 25亿CFU/袋(按活菌数计)
鼠李糖乳杆菌BH09 10亿CFU/袋(按活菌数计)
低聚果糖339.2mg/袋
低聚半乳糖92mg/袋
钙15mg/袋
铁0.3mg/袋
锌0.29mg/袋
维生素A 20μgRE袋
维生素D 0.03μg/袋
维生素E 0.2mgα-TE/袋
维生素B1 0.03mg/袋
维生素B2 0.03mg/袋
维生素B6 0.03mg/袋
维生素B12 0.1μg/袋
维生素C 3mg/袋
烟酸0.39mg/袋
叶酸8μgDFE/袋。
上述益生菌粉的制备方法，包括如下步骤：
1)分别取两歧双歧杆菌BGN4冻干菌粉40亿CFU、长双歧杆菌BORI冻干菌粉25亿CFU、乳双歧杆菌AD011冻干菌粉25亿CFU和鼠李糖乳杆菌BH09冻干菌粉10亿CFU后混合。
2)向上述益生菌冻干菌粉混合物中依次加入低聚果糖339.2mg、低聚半乳糖92mg、钙15mg、铁0.3mg、锌0.29mg、维生素A 20μgRE、维生素D 0.03μg、维生素E 0.2mgα-TE、维生素B1 0.03mg、维生素B2 0.03mg、维生素B60.03mg、维生素B12 0.1μg、维生素C 3mg、烟酸0.39mg和叶酸8μgDFE，搅拌均匀，充分混合后分装至袋装即得益生菌粉，所述袋装选用密封性好、安全的食品级PE包装材质，规格为2g。
实施例6安全性试验
1.试验方法及依据
通过评估血细胞的溶血，粘蛋白降解，氨的产生，生物胺的产生，抗菌药的敏感性分析，抗生素耐药性的可转移性，抗生素抗性基因的PCR数据，基因组稳定性以及是否具有毒力因子/致病基因等多方面试验，对人体同源的两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011和鼠李糖乳杆菌BH09的安全性进行评估。
2.试验结果
1)四株菌均不显示溶血活性也不显示粘蛋白降解活性，没有发现生产氨的现象。
2)四株菌不生产5-戊二胺、组胺、酪胺，产生少量的腐胺，其含量与其他食物(例如菠菜，番茄酱，青豆，酸菜和香肠)相似或更低。
3)四株菌对庆大霉素及四环素的耐药性(敏感性)高于欧洲食品安全局(EFSA)的临界值。
4)在PCR分析研究中，未发现菌株的抗性基因。
5)四株菌对抗生素的耐药性均未通过与基因片段结合而转移。。
6)四株菌株的整个基因组序列已在GenBank中公开。
7)四株菌均不含有已知的产毒素基因和致病基因。
实施例7益生菌粉的安全性检测
1.检测依据及方法
根据食品安全国家标准食品中污染物限量GB 2762-2017、食品微生物学检验(菌落总数测定GB 4789.2-2016、大肠杆菌计数GB 4789.3-2016、沙门氏菌检验GB 4789.4-2016、霉菌检验GB 4789.15-2016)等标准方法对益生菌粉进行安全性检测。
2.检测结果
采用冷冻干燥微囊三层包埋技术制得的一种含人体同源的益生菌粉，其色泽为米黄色粉末，无正常视力可见的外来异物、无结块、无异味、无臭。且污染物铅、锡检测结果不活跃，菌落总数、大肠菌群、沙门氏菌、霉菌检测结果均通过。
实施例8具体病例
病例1：患者女，小宝12个月+，诉求：换奶粉后拉肚子已有4-5天，伴有奶瓣和泡沫，经常性拉稀便便，且不成形，拉便的量少且次数偏多，经判断为“继发性乳糖不耐受”的奶瓣便。食用本发明制备的益生菌粉，一次两袋，食用方法为将益生菌溶解在37℃左右温开水中，搅拌至完全溶解，饭后半小时内早晚各食用一次。食用第二天后拉便次数减少，继续食用7日后至症状有所改善，而后减少食用量至每天食用1次，1袋/次，坚持2个月，随访3个月未复发，拉便成形，无未消化的奶瓣便发生。
病例2：患者男，4岁，诉求：经常生病、输液，面黄肌瘦、没有精神，季节交替时节问题更甚，感冒咳嗽不断，频繁折腾去医院检查，发病初期即去医院检查进行输液，普通药物已无帮助，抗生素类药物刚使用时有效果，后发期间1周，效果已不明显。诊断为季节性流感，抵抗力差。食用本发明制备的益生菌粉，一次两袋，食用方法为将益生菌溶解在37℃左右温开水中，搅拌至完全溶解/直接干吃食用，饭后半小时内早晚各食用一次，连续食用1个月。而后坚持1年多减少食用量至每天食用1次，1袋/次，随访生病的情况改善了，去医院输液的次数少了，精神状态也好了。
病例3：患者男，5岁，诉求：与同龄孩子相比较瘦小，在幼儿园食欲不好、吃的少，几乎是三天拉一次便便，而且是绿便，有点便秘、消化不良，经检查后使用开塞露通便以及顺逆时针揉腹部。食用本发明制备的益生菌粉，一次两袋，食用方法为将益生菌溶解在37℃左右温开水中，搅拌至完全溶解，饭后半小时内早晚各食用一次。食用两天后拉便逐渐通畅，两天拉一次，继续食用7日后几乎每天拉一次至症状有所改善，大便不干，便便从绿色慢慢变成金黄色，肚子不胀气。而后减少食用量至每天食用2次，1袋/次，坚持3个月，随访6个月未复发。
实施例9临床试验
1.研究对象
选择因轮状病毒感染住院的46名2-6岁幼儿。23名患者被分配到治疗组，其余23名患者被分配到安慰剂组。
2.治疗方法
治疗组为食用本发明制备的益生菌粉2袋，安慰剂组为不含益生菌的等量脱脂奶粉(安慰剂包)，在视觉上与益生菌包无区别。每位患者需在饭后30分钟内食用，每天两次，共持续5天。记录治疗期间前后腹泻频率、呕吐频率、发烧持续时间。
3.效果评判标准
以治疗期间前后腹泻频率、呕吐频率、发烧持续时间匹配的情况来评判效果。有效：痊愈或3种问题的频率/时间缩短减少；无效：治疗前后3个问题情况持续发生，无明显好转趋势及变化。
4.统计学方法
进行配对t检验以评估两组轮状病毒感染症状的定量变化：研究期间前后腹泻频率、呕吐频率、发烧持续时间。当p值<0.05时，结果被认为具有统计学意义。
试验结果
2组效果评价，结果见表1.
表1 2组效果评价
Figure BDA0003647049940000081
从表1中可以看出，采用本发明的益生菌粉在改善抑制轮状病毒感染症状方面具有显著效果。
本发明提供了一种含有人体同源菌株的益生菌粉，由两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011、鼠李糖乳杆菌BH09、双重益生元和13种基础营养素组成。此益生菌粉能够调节儿童肠道菌群紊乱，具体体现在：这一益生菌粉可改善肠道微生态环境，预防轮状病毒感染，预防及缓解儿童湿疹、过敏性皮肤炎，缓解腹泻、便秘等肠道问题，改善乳糖不耐受，可有效排除食物中的毒素。其中，两歧双歧杆菌BGN4在过敏抑制应用方向上得以验证，且与乳双歧杆菌AD011混合在预防婴幼儿湿疹、花生过敏、卵清蛋白过敏的抑制与预防、特应性皮炎的改善与预防等问题上均得到了临床数据验证；菌株长双歧杆菌BORI在抗轮状病毒感染的临床上得以验证；两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011及鼠李糖乳杆菌BH09混合菌株在临床上改善肠易激综合征上得以验证。因此含有两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011和鼠李糖乳杆菌BH09的益生菌粉在调节儿童肠道菌群紊乱上具有很大的应用前景。
以上对本发明的实施方式作了详细说明，但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。

Claims (8)

1.一种含有人体同源菌株的益生菌粉，其特征在于，所述益生菌粉由两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011、鼠李糖乳杆菌BH09、双重益生元和13种基础营养素组成；所述两歧双歧杆菌BGN4、长双歧杆菌BORI、乳双歧杆菌AD011和鼠李糖乳杆菌BH09为主要调节成分，双重益生元和13种基础营养素为辅助调节成分；其中：所述双重益生元为低聚果糖和低聚半乳糖，13种基础营养素为钙、铁、锌、维生素A、维生素D、维生素E、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素C、烟酸和叶酸。
2.如权利要求1所述的一种含有人体同源菌株的益生菌粉，其特征在于，按照每袋2g的添加量计，所述益生菌粉各成分添加量如下所示：
两歧双歧杆菌BGN4 40亿CFU/袋(按活菌数计)
长双歧杆菌BORI 25亿CFU/袋(按活菌数计)
乳双歧杆菌AD011 25亿CFU/袋(按活菌数计)
鼠李糖乳杆菌BH09 10亿CFU/袋(按活菌数计)
Figure FDA0003647049930000011
叶酸8μgDFE/袋。
所述益生菌粉的制备方法，包括：
1)冻干菌粉的制备
保护剂与活化后的单一纯菌株、菌液分别混合，倒入容器置于真空冷冻干燥机中，制得4种单一益生菌冻干菌粉。
2)配方菌粉制备
分别取上述配方量4种单一益生菌冻干菌粉后混合，再依次加入上述配方量的低聚果糖、低聚半乳糖、钙、铁、锌、维生素A、维生素D、维生素E、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素C、烟酸和叶酸混合，搅拌均匀，分装至袋装即得益生菌粉。
3.如权利要求2所述的一种含有人体同源菌株的益生菌粉，其特征在于，所述保护剂按重量百分比计由以下成分制成：脱脂奶粉15％、海藻糖6％、甘油4％和木糖醇1.5％。
4.如权利要求2所述的一种含有人体同源菌株的益生菌粉，其特征在于，所述益生菌粉包装袋选用密封性好、安全的食品级PE包装材质。
5.如权利要求2所述的一种含有人体同源菌株的益生菌粉，其特征在于，所述益生菌粉的用法用量为：每天一袋，在10～20ml低于37℃的水、牛奶、粥或汤类中溶解后食用，饭后半小时内食用更佳。
6.如权利要求2所述的一种含有人体同源菌株的益生菌粉，其特征在于，所述益生菌粉的食用方法为：稀释后食用或直接干吃。
7.如权利要求2所述的一种含有人体同源菌株的益生菌粉，其特征在于，所述益生菌粉的食用建议为：服用抗生素期间，先用抗生素，间隔2～3小时再用益生菌粉。
8.如权利要求1或2所述的一种含有人体同源菌株的益生菌粉在调节儿童肠道菌群紊乱表现上的应用。
CN202210534976.1A 2022-05-17 2022-05-17 一种含有人体同源菌株的益生菌粉及其应用 Pending CN114832021A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210534976.1A CN114832021A (zh) 2022-05-17 2022-05-17 一种含有人体同源菌株的益生菌粉及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210534976.1A CN114832021A (zh) 2022-05-17 2022-05-17 一种含有人体同源菌株的益生菌粉及其应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN114832021A true CN114832021A (zh) 2022-08-02

Family

ID=82569171

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210534976.1A Pending CN114832021A (zh) 2022-05-17 2022-05-17 一种含有人体同源菌株的益生菌粉及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114832021A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115300605A (zh) * 2022-08-16 2022-11-08 比菲德(北京)生物科技有限公司 一种用于抗肥胖、瘦身的益生菌粉及其应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20200030395A1 (en) * 2016-09-27 2020-01-30 Dae Hee Lee Probiotics composition containing hericium erinaceus
CN111035014A (zh) * 2019-12-31 2020-04-21 成都三勒浆药业集团四川华美制药有限公司 一种益生菌制剂及其制备方法
CN111567812A (zh) * 2020-05-12 2020-08-25 仙乐健康科技股份有限公司 用于预防、缓解或治疗儿童功能性便秘的食品、保健品或药品
CN112617207A (zh) * 2020-12-18 2021-04-09 北京海思未来健康科技有限公司 一种含有补液盐和益生菌的组合物
CN113679048A (zh) * 2021-08-06 2021-11-23 吉林省红五味生物技术有限公司 一种调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉
CN114259050A (zh) * 2021-12-29 2022-04-01 重庆希尔安药业有限公司 一种改善肠道功能的饮品及其制备方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20200030395A1 (en) * 2016-09-27 2020-01-30 Dae Hee Lee Probiotics composition containing hericium erinaceus
CN111035014A (zh) * 2019-12-31 2020-04-21 成都三勒浆药业集团四川华美制药有限公司 一种益生菌制剂及其制备方法
CN111567812A (zh) * 2020-05-12 2020-08-25 仙乐健康科技股份有限公司 用于预防、缓解或治疗儿童功能性便秘的食品、保健品或药品
CN112617207A (zh) * 2020-12-18 2021-04-09 北京海思未来健康科技有限公司 一种含有补液盐和益生菌的组合物
CN113679048A (zh) * 2021-08-06 2021-11-23 吉林省红五味生物技术有限公司 一种调节婴幼儿肠道菌群平衡的高活性益生菌冻干粉
CN114259050A (zh) * 2021-12-29 2022-04-01 重庆希尔安药业有限公司 一种改善肠道功能的饮品及其制备方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
YEO OK HAN等: "The Anti-Rotaviral Activity of Low Molecular Weight and Non-Proteinaceous Substance from Bifidobacterium longum BORI Cell Extract", MICROORGANISMS, vol. 7, no. 4 *
华梦婷等: "肠易激综合征与肠道微生态关系的研究进展", 西部医学, vol. 26, no. 3, pages 396 *
李红等: "食品化学 第2版", vol. 2, 中国纺织出版社, pages: 269 *
段云峰: "益生菌促进胃肠道健康的机制及应用", 微生物学报, vol. 62, no. 3 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115300605A (zh) * 2022-08-16 2022-11-08 比菲德(北京)生物科技有限公司 一种用于抗肥胖、瘦身的益生菌粉及其应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106834187B (zh) 一种两歧双歧杆菌及其用途
US20190216866A1 (en) Composite probiotic lactic acid bacteria powder and preparation method and use thereof
Lewis et al. The use of biotherapeutic agents in the prevention and treatment of gastrointestinal disease
CN101897729B (zh) 一种益生菌组合物及其制剂
US20100166721A1 (en) Probotic compositions and uses thereof
WO2021114658A1 (zh) 动物双歧杆菌乳亚种i797、其分离纯化方法及应用
CN102711778B (zh) 利用动物双歧杆菌细菌或含有这种细菌的发酵乳制品减轻胃肠炎症的方法
US20110165127A1 (en) Dairy-derived probiotic compositions and uses thereof
Yang et al. Effect of synbiotics on intestinal microflora and digestive enzyme activities in rats
CN101558787A (zh) 一种益生菌酸奶的制备方法
CN112155056B (zh) 一种调节肠道的酸奶及其制备方法和应用
CN110106119B (zh) 一株分离自母乳的鼠李糖乳杆菌m9及其应用
CN106578064B (zh) 一种阿胶乳酸菌饮品及其制备方法
TW202200029A (zh) 可促進排便的組合物及其用途
CN112075637A (zh) 一种减少肠道气体产生的组合物
CN114651984A (zh) 干酪乳杆菌lc89及包含其的微生物制剂在制备缓解功能性便秘的产品中的应用
CN114921363A (zh) 一种抑制脂肪积累的复合益生菌及其应用
CN100482104C (zh) 一种乳酸菌口服液的制备方法
CN114686405B (zh) 一株具有减少脂肪和缓解高血糖，调节肠道免疫力的两歧双歧杆菌及其应用
CN115119940B (zh) 嗜酸乳杆菌LA85和乳双歧杆菌BLa80在抑制幽门螺旋杆菌上的应用
CN114832021A (zh) 一种含有人体同源菌株的益生菌粉及其应用
CN106879739A (zh) 一种含四类活菌的微生物发酵乳酸制剂及其制备方法
Vijaya Kumar et al. Beneficial effects of probiotics and prebiotics on human health
CN111345473A (zh) 一种含卵黄抗体IgY的益生菌组合物及应用制剂
WO2022061883A1 (zh) 一种调节肠道的酸奶及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination