CN113447595A - 一种药物制剂的特征图谱的检测方法及其应用 - Google Patents

一种药物制剂的特征图谱的检测方法及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种药物制剂的特征图谱的检测方法，包括以下步骤：1)供试品溶液的制备；2)对照品溶液的制备；3)测定。本发明还进一步提供了上述药物制剂的特征图谱的检测方法在药物制剂的质量检测中的用途及其药物制剂的标准特征图谱的构建方法、质量控制方法。本发明更进一步提供了一种药物制剂中多味药材的特征图谱的筛选方法。本发明提供的一种药物制剂的特征图谱的检测方法及其应用，能够获得包含17个特征峰的药物制剂的特征图谱，并对其中10特征峰进行定位归属，方法精密度好，稳定性好，重现性好，保证药物制剂成分中有效成分的量相对稳定，从而保证临床用药的安全有效。

Description

一种药物制剂的特征图谱的检测方法及其应用
技术领域
本发明属于中药成分检测的技术领域，涉及一种药物制剂的特征图谱的检测方法及其应用，具体涉及一种药物制剂的特征图谱的HPLC检测方法及其在质量检测中应用。
背景技术
随着中药经典名方开发成为当下中医药界研究的热点，相关管理部门已经规定经典名方需严格遵从古方的处方、剂量和制备工艺进行研究。本发明的研究对象药物制剂方最早见于东汉·张仲景的《金匮要略·百合狐惑阴阳毒病脉证治》上篇，由百合、地黄2味药组成,以“百合七枚(擘)、生地黄汁一升”入药。原方记载“意欲食复不能食,常默默,欲卧不能卧,欲行不能行,饮食,或有美时,或有不用闻食臭时,如寒无寒,如热无热,口苦,小便赤,诸药不能治,得药则剧吐利,如有神灵者,身形如和,其脉微数。”、“百合病，不经吐、下、发汗，病形如初者，药物制剂主之”。药物制剂主要用于治疗由情志内伤所致的“百合病”，而“百合病”的病机为心肺阴虚内热，与现代神经精神系统相关疾病关系密切，百合病情志症状与现代抑郁症的临床表现相类似，现代医学常用药物制剂及其加减方或联合抗抑郁西药治疗各种病因诱发的抑郁症，临床与动物药理实验都表明了其疗效确切，但是与之相应的化学成分研究却较少。
经典名方物质基准是指以古代医籍记载的古代经典名方制备方法为依据制备而得的中药药用物质的标准，除成型工艺外，其余制备方法应当与古代医籍记载基本一致。物质基准包含对应实物、制备工艺及质量标准，对于质量标准，倡导整体性和全面性，应当包含特征图谱和指纹图谱。
特征图谱是选取图谱中某些重要的特征信息作为控制中药质量的重要鉴别手段，可确保其内在质量均一和稳定。经过十几年的研究和运用，该项技术已日趋成熟，在中药质量标准控制中得到更广泛应用。
发明内容
鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种药物制剂的特征图谱的检测方法及其应用，采用优化条件的前处理及高效液相色谱方法，建立了药物制剂的特征图谱，能够对药物制剂中10个化学成分进行了分析，并对药物制剂中各单味药材色谱峰进行了归属确证，保证药物制剂成分中有效成分的量相对稳定，从而保证临床用药的安全有效。本发明方法能全面的、准确的评价药物制剂的整体的、内在的质量。
为实现上述目的及其他相关目的，本发明第一方面提供一种药物制剂的特征图谱的检测方法，包括以下步骤：
1)供试品溶液的制备：将药物制剂样品，加水溶解后定容，摇匀，过滤，即得供试品溶液；
2)对照品溶液的制备：将枸橼酸、梓醇、桃叶珊瑚苷、地黄苷D、密力特苷、益母草苷、王百合苷C、王百合苷A、毛蕊花糖苷、王百合苷B对照品，加水溶解并定容，配成对照品溶液；
3)测定：采用高效液相色谱法(HPLC)法分别测定供试品溶液和对照品溶液，获得供试品溶液的特征图谱和对照品溶液的特征图谱，将供试品溶液的特征图谱与对照品溶液的特征图谱比较保留时间进行定性，对供试品溶液特征图谱中的指标成分进行归属定位，从而获得药物制剂的特征图谱。
优选地，步骤1)中，所述药物制剂加入的质量与水加入的体积之比为3:45-55，g/mL。
更优选地，所述药物制剂加入的质量与水加入的体积之比为3:50，g/mL。
优选地，步骤1)中，所述过滤为滤膜过滤。
更优选地，所述滤膜为0.45μm滤膜。
优选地，步骤2)中，所述枸橼酸的CAS号为77-92-9，所述桃叶珊瑚苷的CAS号为479-98-1，所述梓醇的CAS号为2415-24-9，所述地黄苷D的CAS号为81720-08-3，所述密力特苷的CAS号为19467-03-9，所述益母草苷的CAS号为52949-83-4，所述王百合苷C的CAS号为117591-85-2，所述王百合苷A的CAS号为114420-66-5，所述毛蕊花糖苷的CAS号为61276-17-3，所述王百合苷B的CAS号为114420-67-6。
优选地，步骤2)中，所述对照品溶液采用逐级稀释制得。
优选地，步骤3)中，所述高效液相色谱法(HPLC)中，采用检测器为二极管阵列检测器(DAD)。
优选地，步骤3)中，所述高效液相色谱法中的色谱柱为T3色谱柱。
更优选地，所述高效液相色谱法中的色谱柱为Waters XSelect HSS T3反相色谱柱(柱长为250mm，内径为4.6mm，填料粒径为5μm)，色谱柱中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶。
优选地，步骤3)中，所述高效液相色谱法中的检测波长为193-195nm。
更优选地，所述高效液相色谱法中的检测波长为194nm。
优选地，步骤3)中，所述高效液相色谱法中的柱温为33-37℃。更优选地，所述高效液相色谱法中的柱温为35℃。
优选地，步骤3)中，所述高效液相色谱法中的流速为0.95-1.05ml/min。更优选地，所述高效液相色谱法中的流速为1.0ml/min。
优选地，步骤3)中，所述高效液相色谱法中的进样量为10-30μL。更优选地，所述高效液相色谱法中的进样量为20μL。
优选地，步骤3)中，所述高效液相色谱法中理论板数按梓醇峰计算≥5000。
优选地，步骤3)中，所述高效液相色谱法中，流动相为乙腈-0.09-0.11％磷酸水溶液，其中，A相为乙腈，B相为0.09-0.11％磷酸水溶液；分析时间为60min；梯度洗脱。
更优选地，所述高效液相色谱法中，流动相为乙腈-0.10％磷酸水溶液，其中，A相为乙腈，B相为0.10％磷酸水溶液；分析时间为60min；梯度洗脱。
上述0.09-0.11％磷酸水溶液为体积百分数为0.09-0.11％的磷酸水溶液。上述0.10磷酸水溶液为体积百分数为0.10的磷酸水溶液。
更优选地，所述梯度洗脱的具体程序为：
0～13min，A相：B相体积比为1：99-1：99；
13～17min，A相：B相体积比为1：99-5：95；
17～30min，A相：B相体积比为5：95-5：95；
30～35min，A相：B相体积比为5：95-20：80；
35～50min，A相：B相体积比为20：80-20：80；
50～51min，A相：B相体积比为20：80-1：99；
51～60min，A相：B相体积比为1：99-1：99。
本发明第二方面提供一种药物制剂的特征图谱的检测方法在药物制剂的质量检测中的用途。
所述药物制剂为含有地黄和百合的药物制剂，具体包括且不限于百合地黄汤等。
本发明第三方面提供一种药物制剂的标准特征图谱的构建方法，包括：通过采用前述药物制剂的特征图谱的检测方法分别对多个药物制剂样品进行检测，获得多个药物制剂的特征图谱生成共有对照特征图谱，以图谱中均存在的色谱峰作为共有特征峰，确定共有特征峰的相对保留时间，建立药物制剂的标准特征图谱。
优选地，所述药物制剂的特征图谱的图谱生成法采用中位数法。所述中位数法是指共有特征峰的峰面积为共有对照特征图谱中在同一保留时间范围出现的色谱峰的峰面积的统计中位数。
优选地，所述药物制剂的标准特征图谱构建时，用于匹配共有特征峰的时间窗宽度为0.1。
所述药物制剂的标准特征图谱的具体数据见图1。
优选地，所述药物制剂的标准特征图谱包括17个共有指纹峰，以3号峰为参照峰(S峰，保留时间为1.0000)，其他16个共有指纹峰的相对保留时间依次为1号峰(0.6040-0.6281)、2号峰(0.6840-0.7083)、4号峰(1.3314-1.3449)、5号峰(1.7815-1.9266)、6号峰(1.9625-2.1283)、7号峰(2.0377-2.2067)、8号峰(2.3913-2.5840)、9号峰(2.8695-3.1199)、10号峰(2.9451-3.2626)、11号峰(3.0949-3.3828)、12号峰(3.1262-3.4171)、13号峰(3.1401-3.4334)、14号峰(3.1736-3.4677)、15号峰(3.2037-3.5019)、16号峰(3.6027-3.9389)、17号峰(3.9272-4.2942)。
优选地，所述药物制剂的标准特征图谱与对照品溶液的特征图谱进行比较，定位确定所述1号峰为枸橼酸的特征峰，所述3号峰为梓醇的特征峰，所述5号峰为桃叶珊瑚苷的特征峰，所述6号峰为地黄苷D的特征峰，所述7号峰为密力特苷的特征峰，所述8号峰为益母草苷的特征峰，所述11号峰为王百合苷C的特征峰，所述15号峰为王百合苷A的特征峰，所述16号峰为毛蕊花糖苷的特征峰，所述17号峰为王百合苷B的特征峰。
本发明第四方面提供一种药物制剂的特征图谱的质量控制方法，包括：采用前述药物制剂的特征图谱的检测方法获得的药物制剂的特征图谱，与采用前述药物制剂的标准特征图谱的构建方法获得的药物制剂的标准特征图谱，将药物制剂的色谱峰与相应共有特征峰进行相对保留时间的相似度比较。
优选地，本发明将药物制剂的色谱峰与相应共有特征峰进行保留时间的相似度比较时，采用国家药典委员会发布的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2012版软件进行比较。
优选地，本发明测得的药物制剂的特征图谱与药物制剂的标准特征图谱的相似度≥0.99，优选为≥0.992。
本发明第五方面提供一种药物制剂中多味药材的特征图谱的筛选方法，包括下列步骤：
A)药材样品溶液的制备：将包含地黄、百合的药物制剂样品去除其中任一1味药材，按药物制剂的特征图谱的检测方法的步骤1)进行制备，分别获得2种缺样阴性样品溶液；
B)测定：采用与药物制剂的特征图谱的检测方法的步骤3)中相同色谱条件的高效液相色谱(HPLC)法分别测定2种缺样阴性样品溶液，分别获得2种缺样阴性样品溶液的特征图谱；
C)质量检测：将2种缺样阴性样品溶液的特征图谱，分别与药物制剂的标准特征图谱的构建方法建立的药物制剂的标准特征图谱进行比较，通过相对保留时间，指认出2种缺样阴性样品溶液中相应单味药材在药物制剂的标准特征图谱中的共有特征峰，从而对2种缺样阴性样品溶液中相应单味药材的特征图谱中的特征峰进行归属定位。
优选地，步骤A)中，所述药物制剂包括且不限于百合地黄汤。所述百合地黄汤是按照经典名方《金匮要略》中记载的古方工艺制得。具体工艺如下：新鲜的百合用清水冲洗泥沙，除去表面浮水，称取百合7枚，掰开鳞茎用清水浸泡10h，去浮沫，用清水清洗干净放置备用；取鲜地黄于榨汁机中榨取鲜地黄汁200mL煮沸备用。取上述百合于烧杯中加水400mL，置于药壶中加热煎煮至200mL，滤过，滤液中加上述鲜地黄汁搅拌均匀，加热煎煮至300mL，即得。
所述地黄，为玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch.的新鲜或干燥块根。秋季釆挖，除去芦头、须根及泥沙，鲜用；或将地黄缓缓烘焙至约八成干。前者习称“鲜地黄”，后者习称“生地黄”。
所述百合，为百合科植物卷丹Lilium lancifolium Thunb.、百合Lilium browniiF.E.Brown var.viridulum Baker或细叶百合Lilium pumilum DC.的新鲜或干燥肉质鳞叶。
优选地，步骤C)中，所述药物制剂的标准特征图谱中，与2种缺样阴性样品溶液中相应单味药材的特征图谱的共有特征峰归属定位分别为，所述1、2、9、11、12、15、17号峰来源于百合；所述3、4、5、6、7、8、14、16号峰来源于地黄。
本发明中的用水均为纯净水。
如上所述，本发明提供的一种药物制剂的特征图谱的检测方法及其应用，以按照经典名方《金匮要略》古方工艺制得的药物制剂，采用特定前处理方法制成供试品溶液，在特定液相色谱条件下进行测定，能够获得包含17个特征峰的药物制剂的特征图谱，并对其中10特征峰进行定位归属。具体具有以下有益效果：
(1)本发明提供的一种药物制剂的特征图谱的检测方法及其应用，在建立药物制剂的HPLC特征图谱测定方法过程中，以相对保留时间为指标进行精密度、稳定性和重复性试验考察研究，确认了17个共有特征峰，并指认出其中10个峰，保证了方法的稳定性和适应性。
(2)本发明提供的一种药物制剂的特征图谱的检测方法及其应用，由于药物制剂中化学成分复杂，本发明在建立起特征图谱的过程中，采用了梯度洗脱的方法，解决了特征峰难以分开和杂质峰的干扰问题。
(3)本发明提供的一种药物制剂的特征图谱的检测方法及其应用，以药物制剂中各有效成分特征图谱作为一个整体看待，注重各个特征峰的前后顺序和相互关系，既避免了因只测少量成分而判定药物制剂整体质量的片面性，又减少了为质量达标而人为处理的可能性。
(4)本发明提供的一种药物制剂的特征图谱的检测方法及其应用，方法精密度好，稳定性好，重现性好，保证药物制剂成分中有效成分的量相对稳定，从而保证临床用药的安全有效。本发明方法能全面的、准确的评价药物制剂的整体的、内在的质量。
附图说明
图1显示为本发明中的药物制剂的标准特征图谱，其中，1：枸橼酸、3(S)：梓醇、5：桃叶珊瑚苷、6：地黄苷D、7：密力特苷、8：益母草苷、11：王百合苷C、15：王百合苷A、16：毛蕊花糖苷、17：王百合苷B。
图2显示为本发明中的药物制剂HPLC图谱中各色谱峰的药味归属比较图，其中，A为WZJZ-01批的药物制剂的HPLC图谱，B为地黄的HPLC图谱，C为百合的HPLC图谱。
图3显示为本发明中的32批次药物制剂样品的HPLC特征图谱的叠加图谱，其中，S1～S32为32批次药物制剂样品，R为对照品，17为17个共有特征峰。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步阐述本发明，应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。
以下实施例使用的试剂和仪器如下：
1、试剂
药物制剂(上海和黄药业有限公司制备)；乙腈(色谱纯，赛默飞世尔科技有限公司)；磷酸(色谱纯，上海安谱实验科技股份有限公司)；超纯水(纯水仪制备)；其余试剂(分析纯，国药)。
对照品的信息见表1。
表1
Figure BDA0003173817540000071
2、仪器
1260型高效液相色谱仪(美国Agilent公司)；e2695高效液相色谱仪(美国Waters公司)；SR205DU/A型电子天平(瑞士METTLER TOLEDO公司)；ME204E/02型电子天平(梅特勒-托利多(上海)有限公司)。
实施例1
1、供试品溶液的制备
将药物制剂样品按照经典名方《金匮要略》中记载的古方工艺制备，即将新鲜的百合用清水冲洗泥沙，除去表面浮水，称取百合7枚，掰开鳞茎用清水浸泡10h，去浮沫，用清水清洗干净放置备用；取鲜地黄于榨汁机中榨取鲜地黄汁200mL煮沸备用。取上述百合于烧杯中加水400mL，置于药壶中加热煎煮至200mL，滤过，滤液中加上述鲜地黄汁搅拌均匀，加热煎煮至300mL，即得。
将药物制剂样品取3g，精密称定，置50ml量瓶中，加水溶解，并稀释至刻度定容，摇匀，经0.45μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。
2、对照品溶液的制备
将枸橼酸、梓醇、桃叶珊瑚苷、地黄苷D、密力特苷、益母草苷、王百合苷C、王百合苷A、毛蕊花糖苷、王百合苷B对照品，加水溶解并定容，配成对照品溶液。
3、测定
采用高效液相色谱法(HPLC)分别检测供试品溶液和对照品溶液，获得供试品溶液的特征图谱和对照品溶液的特征图谱，将供试品溶液的特征图谱与对照品溶液的特征图谱比较保留时间进行定性，对供试品溶液特征图谱中的指标成分进行归属定位，从而获得药物制剂的特征图谱。
其中，高效液相色谱法包括以下检测条件：
检测器为二极管阵列检测器(DAD)；色谱柱为Waters XSelect HSS T3反相色谱柱(柱长为250mm，内径为4.6mm，填料粒径为5μm)，色谱柱中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；理论板数按梓醇峰计算≥5000；检测波长为194nm；柱温为35℃；流速为1.0ml/min；进样量为20μl；流动相为乙腈-0.10％磷酸水溶液，其中，A相为乙腈，B相为0.10％磷酸水溶液；分析时间为60min；梯度洗脱。
梯度洗脱的具体程序为：
0～13min，A相：B相体积比为1：99-1：99；
13～17min，A相：B相体积比为1：99-5：95；
17～30min，A相：B相体积比为5：95-5：95；
30～35min，A相：B相体积比为5：95-20：80；
35～50min，A相：B相体积比为20：80-20：80；
50～51min，A相：B相体积比为20：80-1：99；
51～60min，A相：B相体积比为1：99-1：99。
实施例2
按实施例1中方法，取16批药物制剂进行重复2次检测，获得多个药物制剂样品的特征图谱生成共有对照特征图谱，以图谱中均存在的色谱峰作为共有特征峰，确定共有特征峰的相对保留时间，建立药物制剂的标准特征图谱。
如图1所示，药物制剂的标准特征图谱包括17个共有指纹峰，以3号峰为参照峰(S峰，保留时间为1.0000)，其他16个共有指纹峰的相对保留时间依次为1号峰(0.6040-0.6281)、2号峰(0.6840-0.7083)、4号峰(1.3314-1.3449)、5号峰(1.7815-1.9266)、6号峰(1.9625-2.1283)、7号峰(2.0377-2.2067)、8号峰(2.3913-2.5840)、9号峰(2.8695-3.1199)、10号峰(2.9451-3.2626)、11号峰(3.0949-3.3828)、12号峰(3.1262-3.4171)、13号峰(3.1401-3.4334)、14号峰(3.1736-3.4677)、15号峰(3.2037-3.5019)、16号峰(3.6027-3.9389)、17号峰(3.9272-4.2942)。
如图1所示，药物制剂的标准特征图谱与对照品溶液的特征图谱进行比较，定位确定所述1号峰为枸橼酸的特征峰，所述3号峰为梓醇的特征峰，所述5号峰为桃叶珊瑚苷的特征峰，所述6号峰为地黄苷D的特征峰，所述7号峰为密力特苷的特征峰，所述8号峰为益母草苷的特征峰，所述11号峰为王百合苷C的特征峰，所述15号峰为王百合苷A的特征峰，所述16号峰为毛蕊花糖苷的特征峰，所述17号峰为王百合苷B的特征峰。
实施例3
将包含地黄、百合的药物制剂样品去除其中任一1味药材，按实施例1中药物制剂的特征图谱的检测方法的步骤1)进行制备，分别获得2种缺样阴性样品溶液。
采用与实施例1中药物制剂的特征图谱的检测方法的步骤3)中相同色谱条件的高效液相色谱法(HPLC)法分别测定2种缺样阴性样品溶液，分别获得2种缺样阴性样品溶液的特征图谱。
将2种缺样阴性样品溶液的特征图谱，分别与药物制剂的标准特征图谱的构建方法建立的药物制剂的标准特征图谱进行比较，通过相对保留时间，指认出2种缺样阴性样品溶液中相应单味药材在药物制剂的标准特征图谱中的共有特征峰，从而对2种缺样阴性样品溶液中相应单味药材的特征图谱中的特征峰进行归属定位。
如图2所示，所述药物制剂的标准特征图谱中，与2种缺样阴性样品溶液中相应单味药材的特征图谱的共有特征峰归属定位分别为，所述1、2、9、11、12、15、17号峰来源于百合；所述3、4、5、6、7、8、14、16号峰来源于地黄。
实施例4
对本发明的药物制剂的特征图谱的检测方法进行方法学验证，其性能指标结果如下。
1、精密度
取药物制剂样品，按实施例1中步骤1制备获得供试品溶液，按实施例1中步骤3的色谱条件，连续进样分析6次，以梓醇为参照峰，计算各峰的相对保留时间，结果见表2。结果表明，各个特征峰的相对保留时间的RSD均小于1.0％，表明仪器精密度良好。
表2
Figure BDA0003173817540000091
Figure BDA0003173817540000101
2、稳定性
取药物制剂样品，按实施例1中步骤1制备获得供试品溶液，按实施例1中步骤3的色谱条件，在室温下分别于0h、1h、2h、4h、6h、8h、10h、12h、24h进样分析，以梓醇为参照峰，计算各峰的相对保留时间，稳定性具体结果见表3。结果表明，相对保留时间的RSD均小于1.0％，供试品溶液在24小时内基本稳定，说明该方法稳定性良好。
表3
Figure BDA0003173817540000102
3、重复性
取同一批药物制剂样品，按实施例1中步骤1平行制备获得6份供试品溶液，按实施例1中步骤3的色谱条件，分别进样分析，以梓醇为参照峰，计算各峰的相对保留时间，重复性具体结果见表4。结果表明，相对保留时间的RSD均小于1.5％，说明该方法重复性良好。
表4
Figure BDA0003173817540000111
实施例5
将按实施例1测定获得的16批(共32份)药物制剂的色谱图，导入国家药典委员会开发的《2012版中药色谱指纹图谱相似度评价系统》中，以WZJZ-01批次样品为参照图谱，对照图谱生成法采用中位数法，选择0.1为时间窗宽度进行指纹共有峰的匹配，获得多个药物制剂的特征图谱生成共有对照特征图谱，以图谱中均存在的色谱峰作为共有特征峰，以峰3(梓醇)为参照峰S，确定共有特征峰的相对保留时间，建立具有17个共有特征峰的药物制剂的标准特征图谱，具体结果见图3、表5。
表5
Figure BDA0003173817540000112
Figure BDA0003173817540000121
实施例6
采用《2012版中药色谱指纹图谱相似度评价系统》对实施例5制备获得的各批次药物制剂(16批共32份)的特征图谱进行分析，每份样品与实施例5中确定的药物制剂的标准特征图谱进行比较，计算各药物制剂的相似度，具体结果见表6。由表6可知，各批次药物制剂的特征图谱与药物制剂的标准特征图谱的相似度均≥0.992，相似度无显著行差异(P＞0.05)。
表6
Figure BDA0003173817540000122
Figure BDA0003173817540000132
Figure BDA0003173817540000142
综上所述，本发明提供的一种药物制剂的特征图谱的检测方法及其应用，能够获得包含17个特征峰的药物制剂的特征图谱，并对其中10特征峰进行定位归属，方法精密度好，稳定性好，重现性好，保证药物制剂成分中有效成分的量相对稳定，从而保证临床用药的安全有效。所以，本发明克服了现有技术中的种种缺点而具高度产业利用价值。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims (10)

1.一种药物制剂的特征图谱的检测方法，包括以下步骤：
1)供试品溶液的制备：将药物制剂样品，加水溶解后定容，摇匀，过滤，即得供试品溶液；
2)对照品溶液的制备：将枸橼酸、梓醇、桃叶珊瑚苷、地黄苷D、密力特苷、益母草苷、王百合苷C、王百合苷A、毛蕊花糖苷、王百合苷B对照品，加水溶解并定容，配成对照品溶液；
3)测定：采用高效液相色谱法法分别测定供试品溶液和对照品溶液，获得供试品溶液的特征图谱和对照品溶液的特征图谱，将供试品溶液的特征图谱与对照品溶液的特征图谱比较保留时间进行定性，对供试品溶液特征图谱中的指标成分进行归属定位，从而获得药物制剂的特征图谱。
2.根据权利要求1所述的一种药物制剂的特征图谱的检测方法，其特征在于，步骤1)中，所述药物制剂加入的质量与水加入的体积之比为3:45-55，g/mL。
3.根据权利要求1所述的一种药物制剂的特征图谱的检测方法，其特征在于，步骤3)中，所述高效液相色谱法的检测条件为：检测器为二极管阵列检测器；色谱柱为T3色谱柱；检测波长为193-195nm；流动相为乙腈-0.09-0.11％磷酸水溶液，其中，A相为乙腈，B相为0.09-0.11％磷酸水溶液；分析时间为60min；梯度洗脱。
4.根据权利要求3所述的一种药物制剂的特征图谱的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的具体程序为：0～13min，A相：B相体积比为1：99-1：99；13～17min，A相：B相体积比为1：99-5：95；17～30min，A相：B相体积比为5：95-5：95；30～35min，A相：B相体积比为5：95-20：80；35～50min，A相：B相体积比为20：80-20：80；50～51min，A相：B相体积比为20：80-1：99；51～60min，A相：B相体积比为1：99-1：99。
5.根据权利要求1-4任一所述的一种药物制剂的特征图谱的检测方法在药物制剂的质量检测中的用途。
6.一种药物制剂的标准特征图谱的构建方法，包括：通过采用权利要求1-4任一所述的药物制剂的特征图谱的检测方法分别对多个药物制剂样品进行检测，获得多个药物制剂的特征图谱生成共有对照特征图谱，以图谱中均存在的色谱峰作为共有特征峰，确定共有特征峰的相对保留时间，建立药物制剂的标准特征图谱。
7.根据权利要求6所述的一种药物制剂的标准特征图谱的构建方法，其特征在于，所述药物制剂的标准特征图谱包括17个共有指纹峰，以3号峰为参照峰S峰，保留时间为1.0000，其他16个共有指纹峰的相对保留时间依次为1号峰0.6040-0.6281、2号峰0.6840-0.7083、4号峰1.3314-1.3449、5号峰1.7815-1.9266、6号峰1.9625-2.1283、7号峰2.0377-2.2067、8号峰2.3913-2.5840、9号峰2.8695-3.1199、10号峰2.9451-3.2626、11号峰3.0949-3.3828、12号峰3.1262-3.4171、13号峰3.1401-3.4334、14号峰3.1736-3.4677、15号峰3.2037-3.5019、16号峰3.6027-3.9389、17号峰3.9272-4.2942。
8.根据权利要求6所述的一种药物制剂的标准特征图谱的构建方法，其特征在于，所述药物制剂的标准特征图谱与对照品溶液的特征图谱进行比较，定位确定所述1号峰为枸橼酸的特征峰，所述3号峰为梓醇的特征峰，所述5号峰为桃叶珊瑚苷的特征峰，所述6号峰为地黄苷D的特征峰，所述7号峰为密力特苷的特征峰，所述8号峰为益母草苷的特征峰，所述11号峰为王百合苷C的特征峰，所述15号峰为王百合苷A的特征峰，所述16号峰为毛蕊花糖苷的特征峰，所述17号峰为王百合苷B的特征峰。
9.一种药物制剂的特征图谱的质量控制方法，包括：采用权利要求1-4任一所述的药物制剂的特征图谱的检测方法获得的药物制剂的特征图谱，与采用权利要求6-8任一所述药物制剂的标准特征图谱的构建方法获得的药物制剂的标准特征图谱，将药物制剂的色谱峰与相应共有特征峰进行相对保留时间的相似度比较，所述相似度≥0.99。
10.一种药物制剂中多味药材的特征图谱的筛选方法，包括下列步骤：
A)药材样品溶液的制备：将包含地黄、百合的药物制剂样品去除其中任一1味药材，按权利要求1-4任一所述的药物制剂的特征图谱的检测方法的步骤1)进行制备，分别获得2种缺样阴性样品溶液；
B)测定：采用与权利要求1-4任一所述的药物制剂的特征图谱的检测方法的步骤3)中相同色谱条件的高效液相色谱法分别测定2种缺样阴性样品溶液，分别获得2种缺样阴性样品溶液的特征图谱；
C)质量检测：将2种缺样阴性样品溶液的特征图谱，分别与权利要求6-8任一所述药物制剂的标准特征图谱的构建方法建立的药物制剂的标准特征图谱进行比较，通过相对保留时间，指认出2种缺样阴性样品溶液中相应单味药材在药物制剂的标准特征图谱中的共有特征峰，从而对2种缺样阴性样品溶液中相应单味药材的特征图谱中的特征峰进行归属定位。
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