CN113426286A - 一种芳香型微生物环保除臭剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于微生物制剂技术领域，具体涉及一种芳香型微生物环保除臭剂及其制备方法。所述步骤包括：分别将垃圾渗滤液、酸奶、甜酒、花蜜接种至PDA、LB、牛肉膏培养基上进行微生物富集培养获得各富集菌液；将各富集菌液分别进行活化培养并接种至发酵罐中发酵获得富集种子菌液；将各富集种子菌液至混合发酵罐中共同发酵获得芳香型微生物环保除臭剂。该除臭剂能够快速除臭，散发出玫瑰香味，且各发酵液中的微生物能够共生，在除臭过程中起到良好的协同作用，实现持续除臭。
Description
技术领域
本发明属于微生物制剂技术领域，具体涉及一种芳香型微生物环保除臭剂及其制备方法。
背景技术
源自于工业生产、养殖场、垃圾处理等恶臭气体已成为一种严重公害，对人们的生活产生了极大的影响，这些物质具体包括硫化物，含氮化合物，卤素以及有刺激性气味的有机化合物，不仅使大量传播疾病的昆虫、细菌滋生繁衍，而且对人体产生不同程度的危害。
现有技术中，处理恶臭气体采用的方法有通过掩蔽、吸附和稀释扩散的物理方法，通过氧化、吸附等化学方法，或者通过过滤、堆肥等生物方法，其中物理方法使用吸附剂将臭味物质吸收，但是臭味物质难以解吸，无法重复使用，造成二次污染，化学除臭剂利用氧化剂或还原剂进行氧化还原处理，其处理效果较差，且持续性较差，且对环境易造成不良影响；因此需要开发一种既能快速去除恶臭，又能持续除臭除臭剂。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明将垃圾渗滤液、酸奶、甜酒、花蜜中的微生物进行富集，并活化后进行混合发酵获得混合菌液，用以实现快速持续除臭，并散发香味。
为实现上述发明目的，本发明提供了一种芳香型微生物环保除臭剂的制备方法，所述制备方法具体包括以下步骤：
分别将垃圾渗滤液、酸奶、甜酒、花蜜接种至LB、PDA或牛肉膏培养基上进行微生物富集培养获得垃圾渗滤液富集菌落、酸奶富集菌落、甜酒富集菌落、花蜜富集菌落；
将所述垃圾渗滤液富集菌落、酸奶富集菌落、甜酒富集菌落、花蜜富集菌落分别进行活化培养并接种至发酵罐中发酵获得垃圾渗滤液富集种子菌液、酸奶富集种子菌液、甜酒富集种子菌液、花蜜富集种子菌液；
将所述垃圾渗滤液富集种子菌液、酸奶富集种子菌液、甜酒富集种子菌液、花蜜富集种子菌液至混合发酵罐中共同发酵获得芳香型微生物环保除臭剂。
进一步的，所述垃圾渗滤液富集菌落进行活化培养并接种至发酵罐中发酵垃圾渗滤液富集种子菌液获得具体包括：
将垃圾渗滤液富集菌落活化后接种到LB液体培养基中，在30℃下，在170r/min摇床中培养24-36h，获得垃圾渗滤液富集种子菌液；所述垃圾渗滤液富集种子菌液的菌浓度大于1×108CFU/mL；
所述LB液体培养基的成分包括质量分数为胰蛋白胨10g、酵母提取物5g，摇动容器直至溶质溶解，用5mol/LNaOH调pH至7.0，用去离子水定容至1L。
进一步的，所述甜酒富集菌落进行活化培养并接种至发酵罐中发酵获得甜酒富集种子菌液具体包括：
将甜酒富集菌落活化后接种到PDA液体培养基中，在30℃下，在170r/min摇床中培养24-36h，制备得到酵母菌的一级种子液，酵母菌的一级种子液要求菌浓在5×109CFU/mL以上。
进一步的，所述酸奶富集菌落进行活化培养并接种至发酵罐中发酵获得酸奶富集种子菌液具体包括：
将酸奶富集菌落活化后接种到LB液体培养基中，在30℃下，在180r/min摇床中培养24h-36h，制备得到酸奶富集种子菌液，所述酸奶富集种子菌液浓要求在1×108CFU/mL以上；
进一步的，所述花蜜富集菌落进行活化培养并接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中发酵获得花蜜富集种子菌液具体包括：
将花蜜富集菌落接种至牛肉膏蛋白胨培养基，在30℃下，在180r/min摇床中培养24h-36h，制备得到花蜜富集种子菌液，所述花蜜富集种子菌液浓要求在1×108CFU/mL以上；
所述牛肉膏蛋白胨培养基成分：牛肉膏：3.0g，蛋白胨：10.0g，NaCl：5.0g，琼脂：15-25g，pH：7.4-7.6，定容至1000ml。
进一步的，所述将所述垃圾渗滤液富集种子菌液、酸奶富集种子菌液、甜酒富集种子菌液、花蜜富集种子菌液至混合发酵罐中共同发酵获得芳香型微生物环保除臭剂步骤具体包括：
将所得到的垃圾渗滤液富集种子菌液、酸奶富集种子菌液、甜酒富集种子菌液、花蜜富集种子菌分别按照5-10％、10-15％、3-5％和5-10％的接种量，接种到混合发酵罐中进行培养，混合发酵条件设置为温度35℃，搅拌桨转速100r/min，溶氧量为90％，压力为0.04Mpa，发酵24h后，得到混合菌液的二级种子发酵液；将混合菌液的二级种子发酵液按照10％的接种量接种到生产发酵罐进行发酵，生产发酵条件设置温度35℃，搅拌桨转速100r/min，溶氧量为90％，压力为0.04Mpa，发酵24h，进行碳源和氮源补料，每次补料时间为8h，连续补料3次，补料三次后继续发酵24h，结束生产，得到生物环保除臭剂发酵液；发酵液总菌浓要求达到2×109～2×1010CFU/mL；
所述混合发酵罐中的培养基为质量分数为2％葡萄糖、1％酵母浸粉、0.1％的MgSO4、0.1％的KH2PO4；
所述生产发酵罐中的培养基为质量分数为3％葡萄糖、2％酵母浸粉、0.1％的MgSO4、0.1％的KH2PO4；
所述补料过程加入的为质量分数100％的葡萄糖和100％的酵母浸粉。
基于同一发明构思的，一种芳香型微生物环保除臭剂，所述环保除臭剂由上述任意所述的制备方法获得；
所述环保除臭剂为硫氧化菌、毕赤酵母菌、乳酸杆菌、芽孢杆菌、假单胞菌、寡养单胞菌的混合菌液。
进一步的，所述环保除臭剂中硫氧化菌、毕赤酵母菌、乳酸杆菌、芽孢杆菌、假单胞菌、寡养单胞菌的菌浓度比为：0.8-1.5:2-2.5:1.0-1.5:0.5-1.0:0.5-1.0。
有益效果：
(1)本发明微生物除臭剂将垃圾渗滤液、酸奶、甜酒、花蜜中的微生物进行富集，再经活化发酵获得混合发酵液，该混合发酵液中存在大量的代谢产物，能够快速除臭，散发出玫瑰香味，且各发酵液中的微生物能够共生，在除臭过程中起到良好的协同作用，实现持续除臭。
(2)本发明中甜酒富集菌液中含有大量的酵母菌，其含有高于其他微生物3-10倍的超氧化物歧化酶，可有效催化体内超氧阴离子自由基(O2-)转换成无害的H2O2和O2，解除O2-对机体的毒害作用，同时可利用氨基酸、糖类和各种有机物质，通过发酵产生促进细胞分裂的活性物质，为其他有效微生物增殖所需基质的生产提供营养保障，促进其他有益微生物的生长。所述垃圾渗滤液富集菌液中包含有硫氧化菌和芽孢杆菌，其中硫氧化菌能迅速氧化分解硫化氢，减少硫化氢气体的挥发和释放，进而减少恶臭气体的产生，芽孢杆菌能够杀灭致病菌、有害菌，抑制病菌的生长。酸奶富集菌液中包含乳酸菌，其发酵后将会产生大量乳酸、乙酸、柠檬酸等有机酸性物质，发酵液释放在空气中后能够形成不利于腐败微生物生活的酸性环境，通过次级代谢途径产生细菌素，有效抑制有害微生物的活动，进而抑制恶臭气体的释放，从根本上降解分解时产生恶臭气体的物质；花蜜富集菌液中包含假单胞菌和寡养单胞菌，其中假单胞菌产生各类氨基酸和香型物质，如玫瑰香、柠檬香等，有益人体感官；其中寡养单胞菌能够有效同化氨气和硫化氢，产生IAA、ACC等物质促进体系微生物生长。
具体实施方式
为使本发明要解决的技术问题、技术方案和优点更加清楚，下面将结合具体实施例进行详细描述，但本发明的保护范围并不限于以下具体实施例。
除非另有定义，下文中所使用的所有专业术语与本领域技术人员通常理解含义相同。本文中所使用的专业术语只是为了描述具体实施例的目的，并不是旨在限制本发明的保护范围。
除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
以下实施例中所使用的葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠、硫粉、K2HPO4、Ca(NO3)2·4H2O、KCl、MgSO4·7H2O和(NH4)2SO4，PDA培养基均为市售。所述垃圾渗滤液采集自湖南长沙中南大学垃圾中转站的自然渗滤液，所述甜酒为农家甜酒，花蜜为花园中自然生长的玫瑰花花蜜，酸奶为鲜奶发酵后制备的酸奶。
本发明实施例采用的所述LB液体培养基的成分包括质量分数为胰蛋白胨10g、酵母提取物5g，摇动容器直至溶质溶解.用5mol/L NaOH调pH至7.0，用去离子水定容至1L。所述牛肉膏蛋白胨液体培养基成分：牛肉膏：3.0g，蛋白胨：10.0g，NaCl：5.0g，pH：7.4-7.6，定容至1000ml。PDA液体培养基采用200g马铃薯加入1L水中煮沸20min后，过滤取滤液，加入20g葡萄糖溶解补足体积为1L。所述PDA培养基、LB培养基和牛肉膏蛋白胨培养基为在PDA液体培养基、LB液体培养基和牛肉膏蛋白胨液体培养基配置过程中加入琼脂获得的各固体培养基。
实施例1
一种芳香型微生物环保除臭剂，其由以下方法制备获得：
将垃圾渗滤液接种至LB培养基上进行微生物富集培养获得垃圾渗滤液富集菌落，将所述垃圾渗滤液富集菌落进行活化培养并接种至LB液体培养基中，在30℃下，在170r/min摇床中培养30h，获得垃圾渗滤液富集种子菌液，该菌浓度大于1×108CFU/mL。
将酸奶接种至LB培养基上进行微生物富集培养获得酸奶富集菌落，将所述酸奶富集菌落进行活化培养并接种至LB液体培养基中，在30℃下，在180r/min摇床中培养28h，制备得到酸奶富集种子菌液，该菌浓要求在1×108CFU/mL以上。
将甜酒接种至PDA培养基上进行微生物富集培养获得甜酒富集菌落，将所述甜酒富集菌落进行活化培养并接种至PDA液体培养基中，在30℃下，在170r/min摇床中培养24h，制备得到甜酒富集种子菌液，该菌液要求菌浓在5×109CFU/mL以上。
将花蜜接种至牛肉膏蛋白胨培养基上进行微生物富集培养获得花蜜富集菌落，将所述花蜜富集菌落进行活化培养并接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基，在30℃下，在180r/min摇床中培养26h，制备得到花蜜富集种子菌液，所述花蜜富集种子菌液浓要求在1×108CFU/mL以上。
将所得到的垃圾渗滤液富集种子菌液、酸奶富集种子菌液、甜酒富集种子菌液、花蜜富集种子菌分别按照10％、10％、4％和6％的接种量，接种到混合发酵罐中进行培养，混合发酵条件设置为温度35℃，搅拌桨转速100r/min，溶氧量为90％，压力为0.04Mpa，发酵24h后，得到混合菌液的二级种子发酵液；将混合菌液的二级种子发酵液按照10％的接种量接种到生产发酵罐进行发酵，生产发酵条件设置温度35℃，搅拌桨转速100r/min，溶氧量为90％，压力为0.04Mpa，发酵24h，进行碳源和氮源补料，每次补料时间为8h，连续补料3次，补料三次后继续发酵24h，结束生产，得到生物环保除臭剂发酵液；发酵液总菌浓要求达到2×109～2×1010CFU/mL。
所述环保除臭剂包括硫氧化菌、毕赤酵母菌、乳酸杆菌、芽孢杆菌、甲单胞菌、寡养单胞菌，各菌的菌浓度比为：1.2:2.0:1.2:1.0:0.6。
实施例2
一种芳香型微生物环保除臭剂，其由以下方法制备获得：
将垃圾渗滤液接种至LB培养基上进行微生物富集培养获得垃圾渗滤液富集菌落，将所述垃圾渗滤液富集菌落进行活化培养并接种至LB液体培养基中，在30℃下，在170r/min摇床中培养36h，获得垃圾渗滤液富集种子菌液，该菌浓度大于1×108CFU/mL。
将酸奶接种至LB培养基上进行微生物富集培养获得酸奶富集菌落，将所述酸奶富集菌落进行活化培养并接种至LB液体培养基中，在30℃下，在180r/min摇床中培养30h，制备得到酸奶富集种子菌液，该菌浓要求在1×108CFU/mL以上。
将甜酒接种至PDA培养基上进行微生物富集培养获得甜酒富集菌落，将所述甜酒富集菌落进行活化培养并接种至PDA液体培养基中，在30℃下，在170r/min摇床中培养28h，制备得到甜酒富集种子菌液，该菌液要求菌浓在5×109CFU/mL以上。
将花蜜接种至牛肉膏蛋白胨培养基上进行微生物富集培养获得花蜜富集菌落，将所述花蜜富集菌落进行活化培养并接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基，在30℃下，在180r/min摇床中培养30h，制备得到花蜜富集种子菌液，所述花蜜富集种子菌液浓要求在1×108CFU/mL以上。
将所得到的垃圾渗滤液富集种子菌液、酸奶富集种子菌液、甜酒富集种子菌液、花蜜富集种子菌分别按照8％、12％、5％和10％的接种量，接种到混合发酵罐中进行培养，混合发酵条件设置为温度35℃，搅拌桨转速100r/min，溶氧量为90％，压力为0.04Mpa，发酵24h后，得到混合菌液的二级种子发酵液；将混合菌液的二级种子发酵液按照10％的接种量接种到生产发酵罐进行发酵，生产发酵条件设置温度35℃，搅拌桨转速100r/min，溶氧量为90％，压力为0.04Mpa，发酵24h，进行碳源和氮源补料，每次补料时间为8h，连续补料3次，补料三次后继续发酵24h，结束生产，得到生物环保除臭剂发酵液；发酵液总菌浓要求达到2×109～2×1010CFU/mL。
所述环保除臭剂包括硫氧化菌、毕赤酵母菌、乳酸杆菌、芽孢杆菌、甲单胞菌、寡养单胞菌，各菌的菌浓度比为：1.1:2.0:1.4:0.6:0.8。
实施例3
一种芳香型微生物环保除臭剂，其由以下方法制备获得：
将垃圾渗滤液接种至LB培养基上进行微生物富集培养获得垃圾渗滤液富集菌落，将所述垃圾渗滤液富集菌落进行活化培养并接种至LB液体培养基中，在30℃下，在170r/min摇床中培养26h，获得垃圾渗滤液富集种子菌液，该菌浓度大于1×108CFU/mL。
将酸奶接种至LB培养基上进行微生物富集培养获得酸奶富集菌落，将所述酸奶富集菌落进行活化培养并接种至LB液体培养基中，在30℃下，在180r/min摇床中培养32h，制备得到酸奶富集种子菌液，该菌浓要求在1×108CFU/mL以上。
将甜酒接种至PDA培养基上进行微生物富集培养获得甜酒富集菌落，将所述甜酒富集菌落进行活化培养并接种至PDA液体培养基中，在30℃下，在170r/min摇床中培养36h，制备得到甜酒富集种子菌液，该菌液要求菌浓在5×109CFU/mL以上。
将花蜜接种至牛肉膏蛋白胨培养基上进行微生物富集培养获得花蜜富集菌落，将所述花蜜富集菌落进行活化培养并接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基，在30℃下，在180r/min摇床中培养32h，制备得到花蜜富集种子菌液，所述花蜜富集种子菌液浓要求在1×108CFU/mL以上。
将所得到的垃圾渗滤液富集种子菌液、酸奶富集种子菌液、甜酒富集种子菌液、花蜜富集种子菌分别按照5％、15％、3％和10％的接种量，接种到混合发酵罐中进行培养，混合发酵条件设置为温度35℃，搅拌桨转速100r/min，溶氧量为90％，压力为0.04Mpa，发酵24h后，得到混合菌液的二级种子发酵液；将混合菌液的二级种子发酵液按照10％的接种量接种到生产发酵罐进行发酵，生产发酵条件设置温度35℃，搅拌桨转速100r/min，溶氧量为90％，压力为0.04Mpa，发酵24h，进行碳源和氮源补料，每次补料时间为8h，连续补料3次，补料三次后继续发酵24h，结束生产，得到生物环保除臭剂发酵液；发酵液总菌浓要求达到2×109～2×1010CFU/mL。
所述环保除臭剂包括硫氧化菌、毕赤酵母菌、乳酸杆菌、芽孢杆菌、甲单胞菌、寡养单胞菌，各菌的菌浓度比为：0.8:2.2:1.2:0.7:0.9。
实施例4
一种芳香型微生物环保除臭剂，其由以下方法制备获得：
将垃圾渗滤液接种至LB培养基上进行微生物富集培养获得垃圾渗滤液富集菌落，将所述垃圾渗滤液富集菌落进行活化培养并接种至LB液体培养基中，在30℃下，在170r/min摇床中培养24h，获得垃圾渗滤液富集种子菌液，该菌浓度大于1×108CFU/mL。
将酸奶接种至LB培养基上进行微生物富集培养获得酸奶富集菌落，将所述酸奶富集菌落进行活化培养并接种至LB液体培养基中，在30℃下，在180r/min摇床中培养32h，制备得到酸奶富集种子菌液，该菌浓要求在1×108CFU/mL以上。
将甜酒接种至PDA培养基上进行微生物富集培养获得甜酒富集菌落，将所述甜酒富集菌落进行活化培养并接种至PDA液体培养基中，在30℃下，在170r/min摇床中培养28h，制备得到甜酒富集种子菌液，该菌液要求菌浓在5×109CFU/mL以上。
将花蜜接种至牛肉膏蛋白胨培养基上进行微生物富集培养获得花蜜富集菌落，将所述花蜜富集菌落进行活化培养并接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基，在30℃下，在180r/min摇床中培养36h，制备得到花蜜富集种子菌液，所述花蜜富集种子菌液浓要求在1×108CFU/mL以上。
将所得到的垃圾渗滤液富集种子菌液、酸奶富集种子菌液、甜酒富集种子菌液、花蜜富集种子菌分别按照7％、13％、5％和10％的接种量，接种到混合发酵罐中进行培养，混合发酵条件设置为温度35℃，搅拌桨转速100r/min，溶氧量为90％，压力为0.04Mpa，发酵24h后，得到混合菌液的二级种子发酵液；将混合菌液的二级种子发酵液按照10％的接种量接种到生产发酵罐进行发酵，生产发酵条件设置温度35℃，搅拌桨转速100r/min，溶氧量为90％，压力为0.04Mpa，发酵24h，进行碳源和氮源补料，每次补料时间为8h，连续补料3次，补料三次后继续发酵24h，结束生产，得到生物环保除臭剂发酵液；发酵液总菌浓要求达到2×109～2×1010CFU/mL。
所述环保除臭剂包括硫氧化菌、毕赤酵母菌、乳酸杆菌、芽孢杆菌、甲单胞菌、寡养单胞菌，各菌的菌浓度比为：0.9:2.0:1.5:0.8:0.5。
实施例5
一种芳香型微生物环保除臭剂，其由以下方法制备获得：
将垃圾渗滤液接种至LB培养基上进行微生物富集培养获得垃圾渗滤液富集菌落，将所述垃圾渗滤液富集菌落进行活化培养并接种至LB液体培养基中，在30℃下，在170r/min摇床中培养26h，获得垃圾渗滤液富集种子菌液，该菌浓度大于1×108CFU/mL。
将酸奶接种至LB培养基上进行微生物富集培养获得酸奶富集菌落，将所述酸奶富集菌落进行活化培养并接种至LB液体培养基中，在30℃下，在180r/min摇床中培养28h，制备得到酸奶富集种子菌液，该菌浓要求在1×108CFU/mL以上。
将甜酒接种至PDA培养基上进行微生物富集培养获得甜酒富集菌落，将所述甜酒富集菌落进行活化培养并接种至PDA液体培养基中，在30℃下，在170r/min摇床中培养30h，制备得到甜酒富集种子菌液，该菌液要求菌浓在5×109CFU/mL以上。
将花蜜接种至牛肉膏蛋白胨培养基上进行微生物富集培养获得花蜜富集菌落，将所述花蜜富集菌落进行活化培养并接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基，在30℃下，在180r/min摇床中培养30h，制备得到花蜜富集种子菌液，所述花蜜富集种子菌液浓要求在1×108CFU/mL以上。将所得到的垃圾渗滤液富集种子菌液、酸奶富集种子菌液、甜酒富集种子菌液、花蜜富集种子菌分别按照6％、13％、4％和8％的接种量，接种到混合发酵罐中进行培养，混合发酵条件设置为温度35℃，搅拌桨转速100r/min，溶氧量为90％，压力为0.04Mpa，发酵24h后，得到混合菌液的二级种子发酵液；将混合菌液的二级种子发酵液按照10％的接种量接种到生产发酵罐进行发酵，生产发酵条件设置温度35℃，搅拌桨转速100r/min，溶氧量为90％，压力为0.04Mpa，发酵24h，进行碳源和氮源补料，每次补料时间为8h，连续补料3次，补料三次后继续发酵24h，结束生产，得到生物环保除臭剂发酵液；发酵液总菌浓要求达到2×109～2×1010CFU/mL。
所述环保除臭剂包括硫氧化菌、毕赤酵母菌、乳酸杆菌、芽孢杆菌、甲单胞菌、寡养单胞菌，各菌的菌浓度比为：1.2:2.2:1.3:0.6:1.0。
对比例1
对比例1与实施例1的区别为在制备过程中不添加垃圾渗滤液和酸奶，其他制备方法与加入比例与实施例1相同。
对比例2
对比例2与实施例1的区别为在制备过程中不添加酸奶，其他制备方法与加入比例与实施例1相同。
对比例3
对比例3与实施例1的区别为在制备过程中不添加花蜜和垃圾渗滤液，其他制备方法与加入比例与实施例1相同。
对比例4
对比例4与实施例1的区别为在制备过程中不添加花蜜和甜酒，其他制备方法与加入比例与实施例1相同。
选取长沙市某一垃圾填埋场进行现场除臭实验，实验温度为30-35℃，风速小于3级，检测项目主要包括NH3和H2S，将实施例1-5和对比例1-4获得的除臭剂进行稀释10倍后，在垃圾填埋场按照1L/m3喷洒，喷洒后每个两小时采用北京市科安劳保新技术公司的大气采样器仪QC-3和大气采样袋采样，并检测相应的检测项目，试验方法：根据空气质量检测的GB/T14668-93：NH3的检测采用纳氏试剂比色法；GB11060.2-89：H2S的检测采用亚甲基蓝比色法。检测硫化氢和氨气下降率,从而检测除臭效果。其检测结果如表1所示。
表1实施例和对比例除臭剂对臭气的去除率和持续除臭效果
由表1数据可知，本发明实例1-5中制备的环保型生物除臭剂在垃圾填埋场使用时，喷洒5min中内空气中的氨气、硫化氢去除率平均在90％和85％以上，施用6h后，对空气中氨气、硫化氢去除率平均在50％和45％以上，实施例1的使用效果最好。
对比例1-4中，对氨气和硫化氢的去除率都较低，其中垃圾渗滤液中的硫氧化菌和酸奶中的乳酸菌分别对硫化氢和氨气较好的去除效果，根据对比例4，可证实接种花蜜中寡养单胞菌和甜酒中的酵母菌能够对乳酸菌和硫氧化菌除氨、硫化氢有明显的协同促进作用。
以上所述实施例，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明的技术范围内，根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围内。
Claims (7)
1.一种芳香型微生物环保除臭剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体包括以下步骤：
分别将垃圾渗滤液、酸奶、甜酒、花蜜接种至LB、PDA或牛肉膏培养基上进行微生物富集培养获得垃圾渗滤液富集菌落、酸奶富集菌落、甜酒富集菌落、花蜜富集菌落；
将所述垃圾渗滤液富集菌落、酸奶富集菌落、甜酒富集菌落、花蜜富集菌落分别进行活化培养并接种至发酵罐中发酵获得垃圾渗滤液富集种子菌液、酸奶富集种子菌液、甜酒富集种子菌液、花蜜富集种子菌液；
将所述垃圾渗滤液富集种子菌液、酸奶富集种子菌液、甜酒富集种子菌液、花蜜富集种子菌液至混合发酵罐中共同发酵获得芳香型微生物环保除臭剂。
2.根据权利要求1所述的芳香型微生物环保除臭剂的制备方法，其特征在于，所述垃圾渗滤液富集菌落进行活化培养并接种至发酵罐中发酵垃圾渗滤液富集种子菌液获得具体包括：
将垃圾渗滤液富集菌落活化后接种到LB液体培养基中，在30℃下，在170r/min摇床中培养24-36h，获得垃圾渗滤液富集种子菌液；所述垃圾渗滤液富集种子菌液的菌浓度大于1×108CFU/mL；
所述LB液体培养基的成分包括质量分数为胰蛋白胨10g、酵母提取物5g，摇动容器直至溶质溶解，用5mol/LNaOH调pH至7.0，用去离子水定容至1L。
3.根据权利要求1所述的芳香型微生物环保除臭剂的制备方法，其特征在于，所述甜酒富集菌落进行活化培养并接种至发酵罐中发酵获得甜酒富集种子菌液具体包括：
将甜酒富集菌落活化后接种到PDA液体培养基中，在30℃下，在170r/min摇床中培养24-36h，制备得到酵母菌的一级种子液，酵母菌的一级种子液要求菌浓在5×109CFU/mL以上。
4.根据权利要求1所述的芳香型微生物环保除臭剂的制备方法，其特征在于，所述酸奶富集菌落进行活化培养并接种至发酵罐中发酵获得酸奶富集种子菌液具体包括：
将酸奶富集菌落活化后接种到LB液体培养基中，在30℃下，在180r/min摇床中培养24h-36h，制备得到酸奶富集种子菌液，所述酸奶富集种子菌液浓要求在1×108CFU/mL以上。
5.根据权利要求1所述的芳香型微生物环保除臭剂的制备方法，其特征在于，所述花蜜富集菌落进行活化培养并接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中发酵获得花蜜富集种子菌液具体包括：
将花蜜富集菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基，在30℃下，在180r/min摇床中培养24h-36h，制备得到花蜜富集种子菌液，所述花蜜富集种子菌液浓要求在1×108CFU/mL以上；
所述牛肉膏蛋白胨培养基成分：牛肉膏：3.0g，蛋白胨：10.0g，NaCl：5.0g，pH：7.4-7.6，定容至1000ml。
6.根据所述权利要求1所述的芳香型微生物环保除臭剂的制备方法，其特征在于，所述将所述垃圾渗滤液富集种子菌液、酸奶富集种子菌液、甜酒富集种子菌液、花蜜富集种子菌液至混合发酵罐中共同发酵获得芳香型微生物环保除臭剂步骤具体包括：
将所得到的垃圾渗滤液富集种子菌液、酸奶富集种子菌液、甜酒富集种子菌液、花蜜富集种子菌分别按照5-10％、10-15％、3-5％和5-10％的接种量，接种到混合发酵罐中进行培养，混合发酵条件设置为温度35℃，搅拌桨转速100r/min，溶氧量为90％，压力为0.04Mpa，发酵24h后，得到混合菌液的二级种子发酵液；将混合菌液的二级种子发酵液按照10％的接种量接种到生产发酵罐进行发酵，生产发酵条件设置温度35℃，搅拌桨转速100r/min，溶氧量为90％，压力为0.04Mpa，发酵24h，进行碳源和氮源补料，每次补料时间为8h，连续补料3次，补料三次后继续发酵24h，结束生产，得到生物环保除臭剂发酵液；发酵液总菌浓要求达到2×109～2×1010CFU/mL；
所述混合发酵罐中的培养基为质量分数为2％葡萄糖、1％酵母浸粉、0.1％的MgSO4、0.1％的KH2PO4；
所述生产发酵罐中的培养基为质量分数为3％葡萄糖、2％酵母浸粉、0.1％的MgSO4、0.1％的KH2PO4；
所述补料过程加入的为质量分数100％的葡萄糖和100％的酵母浸粉。
7.一种芳香型微生物环保除臭剂，其特征在于，所述环保除臭剂由权利要去1-6任意所述的制备方法获得；
所述环保除臭剂为硫氧化菌、毕赤酵母菌、乳酸杆菌、芽孢杆菌、假单胞菌、寡养单胞菌的混合菌液。
根据权利要求7所述的芳香型微生物环保除臭剂，其特征在于，所述环保除臭剂中硫氧化菌、毕赤酵母菌、乳酸杆菌、芽孢杆菌、假单胞菌、寡养单胞菌的菌浓度比为：0.8-1.5:2-2.5:1.0-1.5:0.5-1.0:0.5-1.0。
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| CN202110900418.8A CN113426286A (zh) | 2021-08-05 | 2021-08-05 | 一种芳香型微生物环保除臭剂及其制备方法 |
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|---|---|---|---|
| CN202110900418.8A CN113426286A (zh) | 2021-08-05 | 2021-08-05 | 一种芳香型微生物环保除臭剂及其制备方法 |
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