CN113388168B - 一种透明质酸纳米微球复合物、制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种透明质酸纳米微球复合物的制备方法,包括以下步骤:S1,制备透明质酸纳米微球A;S2,向透明质酸溶液中加入1,4丁二醇二缩水甘油基醚溶液,搅拌反应,超滤离心后去除上清液得胶状物,即为透明质酸交联聚合物B;S3,将透明质酸钾、羟丙基三甲氯化铵、乙酰化透明质酸钠、水解透明质酸、水解透明质酸钠、去离子水混合均匀制备透明质酸衍生物复合溶液C;S4,将透明质酸交联聚合物B和透明质酸衍生物复合溶液C混合均匀,2~5℃密封稳定1.5~2.5h,制备透明质酸复合物D;S5,将透明质酸复合物D和透明质酸纳米微球A进行融合反应制备所述透明质酸纳米微球复合物E。该所述透明质酸纳米微球复合物E的皮肤吸收率高和作用持续时间长。
Description
技术领域
本发明涉及一种透明质酸纳米微球复合物、制备方法及应用,属于化妆品制备技术领域。
背景技术
透明质酸(hyaluronicacid,HA),又名玻璃酸、玻尿酸,由双糖单位排列形成且不含有硫的的直链多糖聚合物组成,其中存在于皮肤、肺和肠等器官中的透明质酸约占人体总量的50%。研究表明透明质酸分子能携带高于其本身500倍以上的水分,因其这一特性被广泛的应用在化妆品中,成为公认的化妆品中最佳的保湿成分。
但是,目前基于透明质酸和透明质酸的衍生物制备的化妆品存在以下缺点:透明质酸或透明质酸的衍生物难以渗透到真皮层,皮肤吸收率低,使得只有一小部分的透明质酸能够渗透进皮肤中发挥补水、保湿的功效,并且作用持续时间短暂,使得这类化妆品只能一定程度上起到对皮肤的修复和保湿效果,对皮肤的修复和保湿效果还不是太理想。
发明内容
本发明提供了一种透明质酸纳米微球复合物、制备方法及应用,可以有效解决上述问题。
本发明是这样实现的:
一种透明质酸纳米微球复合物的制备方法,包括以下步骤:
S1,制备透明质酸纳米微球A;
S2,向透明质酸溶液中加入1,4丁二醇二缩水甘油基醚溶液,搅拌反应,超滤离心后去除上清液得胶状物,即为透明质酸交联聚合物B;
S3,将透明质酸钾、羟丙基三甲氯化铵、乙酰化透明质酸钠、水解透明质酸、水解透明质酸钠、去离子水混合均匀制备透明质酸衍生物复合溶液C;
S4,将透明质酸交联聚合物B和透明质酸衍生物复合溶液C混合均匀,2~5℃密封稳定1.5~2.5h,制备透明质酸复合物D;
S5,将透明质酸复合物D和透明质酸纳米微球A进行融合反应制备所述透明质酸纳米微球复合物E。
作为进一步改进的,步骤S1具体包括以下步骤:
S11,配制透明质酸溶液;将石蜡与司盘-80混合均匀作为油相;
S12,向透明质酸溶液中加入己二酸二酰肼,混合溶解,调节pH为4~5,再在超声的条件下将油相逐滴缓慢加入,搅拌反应;再将1-乙基-( 3-二甲基氨基丙基)碳二亚酰胺盐酸盐溶液缓慢加入混合液中,室温下继续反应;
S13,反应结束后,在剧烈的搅拌条件下加入异丙醇,离心弃上清得到微球沉淀,洗涤干燥后得透明质酸纳米微球A。
作为进一步改进的,步骤S2中,所述透明质酸溶液的浓度为0.4~0.6w/v%;所述1,4丁二醇二缩水甘油基醚溶液的浓度为0.05~0.15w/v%;所述透明质酸溶液和所述1,4丁二醇二缩水甘油基醚溶液的体积比为1:3~6。
作为进一步改进的,步骤S2中,所述搅拌反应为2~5℃下搅拌反应1.5~2.5h。
作为进一步改进的,步骤S3中,所述透明质酸钾、羟丙基三甲氯化铵、乙酰化透明质酸钠、水解透明质酸、水解透明质酸钠、去离子水的质量体积比为1.5~2.5mg:0.5~1.5mg:0.25~0.8mg:0.35~1mg:0.1~0.4mg:40~60mL。
作为进一步改进的,步骤S4中,所述透明质酸交联聚合物B与所述透明质酸衍生物复合溶液C的体积比为1:0.8~1.2。
作为进一步改进的,步骤S5中,所述透明质酸复合物D和透明质酸纳米微球A的比例为1mL:0.1~5mg。
作为进一步改进的,步骤S5中,所述融合反应为在2~5℃下振荡40~50h。
一种上述的方法制备的透明质酸纳米微球复合物E。
一种上述的透明质酸纳米微球复合物E在制备化妆品中的应用。
本发明的有益效果是:
本发明的透明质酸纳米微球复合物的制备中透明质酸纳米微球能够将透明质酸衍生物偶联结合起来,形成一个纳米薄膜呵护在皮肤的表面,将透明质酸衍生物包裹在皮肤的表面,提高皮肤吸收率和延长作用持续时间,从而使得肌肤的含水量有质的提高。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施方式的技术方案,下面将对实施方式中所需要使用的附图作简单地介绍,应当理解,以下附图仅示出了本发明的某些实施例,因此不应被看作是对范围的限定,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1是本发明试验例1提供的含水量测试结果图。
图2是本发明试验例3提供的含水量测试结果图。
图3是本发明试验例4提供的含水量测试结果图。
具体实施方式
为使本发明实施方式的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合本发明实施方式中的附图,对本发明实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施方式是本发明一部分实施方式,而不是全部的实施方式。基于本发明中的实施方式,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式,都属于本发明保护的范围。因此,以下对在附图中提供的本发明的实施方式的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围,而是仅仅表示本发明的选定实施方式。基于本发明中的实施方式,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式,都属于本发明保护的范围。
在本发明的描述中,术语“第一”、“第二”仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中,“多个”的含义是两个或两个以上,除非另有明确具体的限定。
实施例1
1.透明质酸纳米微球的制备
(1)用量筒量取20ml的石蜡与0.25ml的Span-80(司盘-80)均匀混合作为油相。
(2)取5ml(质量/体积比为0.5%)的透明质酸溶液,加入25mg的ADH(己二酸二酰肼)搅拌溶解混匀,加入盐酸调节pH为4~5,制备成透明质酸-ADH混合液。
(3)用100ul移液枪吸取配制好的油相,在超声的条件下,缓慢逐滴加入透明质酸溶液中,600r/min磁力搅拌器下反应30min;准确称量30mg的EDC·HCL(1-乙基-( 3-二甲基氨基丙基)碳二亚酰胺盐酸盐)溶于0.5ml去离子水中,缓慢加入混合液中,室温下反应24h。
(4)反应结束后,在剧烈的搅拌条件下加入37.5ml的异丙醇,3000r/min的条件下离心5min,弃上清得到微球沉淀,再用一定量的二氯甲烷洗涤,超声,弃上清得到微球。将得到的固体在通风橱中静置干燥,即为所述透明质酸纳米微球A。
2.透明质酸纳米微球复合物的制备
(1)透明质酸交联聚合物B的制备:取0.5%的透明质酸溶液10ml加入到缓慢加入到40ml 0.1%的BDDE(1,4丁二醇二缩水甘油基醚)溶液中,4℃搅拌2h增加交联效果,超滤离心后去除上清液,放置4℃密封备用。
(2)透明质酸衍生物复合溶液C的制备:分别称取透明质酸钾2mg、羟丙基三甲氯化铵1mg、乙酰化透明质酸钠0.5mg、水解透明质酸0.5mg和水解透明质酸钠0.2mg依次加入到去离子水中(50ml)制备成透明质酸衍生物复合溶液C,放置-20℃密封备用。
(3)透明质酸复合物D的制备:用移液枪吸取4ml制备好的透明质酸衍生物复合溶液C放在离心管中,再用移液枪吸取1ml的透明质酸交联聚合物B1ml,低温操作用移液枪来回轻微吸打混合搅匀,放置4℃密封稳定2h。
(4)透明质酸纳米微球A和透明质酸复合物D融合:吸取1ml制备好的透明质酸复合物D放置在试管中,取制备好的透明质酸纳米微球A1mg将其加入到试管中,低温慢速振荡摇匀48h,使其完全融合在一起,得透明质酸纳米微球复合物E。
试验例1
随机选取了60名年龄段为20-40岁的志愿者,男女各30名,随机分成3组,为实验组1、实验组2、实验组3。实验组1使用实施例1制备的透明质酸纳米微球A,实验组2使用实施例1制备的透明质酸衍生物复合溶液C,实验组3使用实施例1制备的所述透明质酸纳米微球复合物E。
使用步骤为:日常洁面清洁之后,左脸涂抹实验组的溶液2滴,右脸作为空白对照组涂抹等量去离子水,每隔2h用皮肤水分测试仪测试志愿者脸部皮肤位置的含水量,每次测试选取脸部同样位置五处,求得含水量的平均值,测试结果图1。
结果发现,随着时间的延长,使用所述透明质酸纳米微球复合物E的组在2h时皮肤含水量达到最大值为56.5%,远远大于同时间段内的其他实验组,有明显的提高,而且12h后,使用所述透明质酸纳米微球复合物E的组仍保持较高的含水量。在8h后,所述透明质酸纳米微球A和透明质酸衍生物复合溶液C几乎没有保水作用,皮肤含水量和对照组相当,而所述透明质酸纳米微球复合物E的保水作用仍然较高,其皮肤含水量远大于所述透明质酸纳米微球A和透明质酸衍生物复合溶液C组的皮肤含水量之和,说明所述透明质酸纳米微球复合物E中透明质酸纳米微球A和透明质酸衍生物复合溶液C发挥了协同增效的作用。
试验例2
随机选择年龄段为20-40岁试用者400名,其中男性和女性分别为200名,随机分配为4组,为实验组1、实验组2、实验组3和空白对照组。实验组1使用实施例1制备的透明质酸纳米微球A,实验组2使用实施例1制备的透明质酸衍生物复合溶液C,实验组3使用实施例1制备的所述透明质酸纳米微球复合物E,空白对照组涂抹去离子水。每天涂抹2滴。每天用皮肤水分测试仪测试志愿者脸部皮肤位置的含水量,每次测试选取脸部同样位置五处,求得含水量的平均值,并计算含量增加率。计算公式为:皮肤含水量增加率=(试验组含水量-空白组含水量)/空白组含水量×100%。测试15天后的测试结果如表1所示。
表1
试验例3
随机选取了40名年龄段为20-40岁的志愿者,男女各20名,随机分成4组,分别使用纳米微球颗粒溶液(实验组1)、透明质酸复合物溶液(实验组2)、透明质酸及其复合物溶液(实验组3)和透明质酸纳米微球和透明质酸复合物混合溶液(实验组4),对照组为去离子水。每天涂抹2滴。每天用皮肤水分测试仪测试志愿者脸部皮肤位置的含水量,每次测试选取脸部同样位置五处,求得含水量的平均值。测试15天后的测试结果如图2所示。
试验例4
按照实施例1方法制备的透明质酸纳米微球复合物E,其中透明质酸纳米微球A设计成不同浓度。随机选取了20名年龄段为20-40岁的志愿者,男女各10名,涂抹一种浓度上述透明质酸纳米微球复合物E 2滴,涂抹2h后测试皮肤含水量,测试后间隔4h,在涂抹下一个浓度的上述透明质酸纳米微球复合物E 2滴,再测试皮肤含水量。测试结果如图3所示。结果表明,透明质酸纳米微球A的作用浓度范围为0.1-5mg/ml,随着浓度的增加后期的变化不是很明显。
以上所述仅为本发明的优选实施方式而已,并不用于限制本发明,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种透明质酸纳米微球复合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1,制备透明质酸纳米微球A;
S2,向透明质酸溶液中加入1,4丁二醇二缩水甘油基醚溶液,搅拌反应,超滤离心后去除上清液得胶状物,即为透明质酸交联聚合物B;
S3,将透明质酸钾、羟丙基三甲氯化铵、乙酰化透明质酸钠、水解透明质酸、水解透明质酸钠、去离子水混合均匀制备透明质酸衍生物复合溶液C;
S4,将透明质酸交联聚合物B和透明质酸衍生物复合溶液C混合均匀,2~5℃密封稳定1.5~2.5h,制备透明质酸复合物D;
S5,将透明质酸复合物D和透明质酸纳米微球A进行融合反应制备所述透明质酸纳米微球复合物E;
步骤S2中,所述透明质酸溶液的浓度为0.4~0.6w/v%;所述1,4丁二醇二缩水甘油基醚溶液的浓度为0.05~0.15w/v%;所述透明质酸溶液和所述1,4丁二醇二缩水甘油基醚溶液的体积比为1:3~6;
步骤S3中,所述透明质酸钾、羟丙基三甲氯化铵、乙酰化透明质酸钠、水解透明质酸、水解透明质酸钠、去离子水的质量体积比为1.5~2.5mg:0.5~1.5mg:0.25~0.8mg:0.35~1mg:0.1~0.4mg:40~60mL;
步骤S5中,所述透明质酸复合物D和透明质酸纳米微球A的比例为1mL:0.1~5mg。
2.根据权利要求1所述透明质酸纳米微球复合物的制备方法,其特征在于,步骤S1具体包括以下步骤:
S11,配制透明质酸溶液;将石蜡与司盘-80混合均匀作为油相;
S12,向透明质酸溶液中加入己二酸二酰肼,混合溶解,调节pH为4~5,再在超声的条件下将油相逐滴缓慢加入,搅拌反应;再将1-乙基-( 3-二甲基氨基丙基)碳二亚酰胺盐酸盐溶液缓慢加入混合液中,室温下继续反应;
S13,反应结束后,在剧烈的搅拌条件下加入异丙醇,离心弃上清得到微球沉淀,洗涤干燥后得透明质酸纳米微球A。
3.根据权利要求1所述透明质酸纳米微球复合物的制备方法,其特征在于,步骤S2中,所述搅拌反应为2~5℃下搅拌反应1.5~2.5h。
4.根据权利要求1所述透明质酸纳米微球复合物的制备方法,其特征在于,步骤S4中,所述透明质酸交联聚合物B与所述透明质酸衍生物复合溶液C的体积比为1:0.8~1.2。
5.根据权利要求1所述透明质酸纳米微球复合物的制备方法,其特征在于,步骤S5中,所述融合反应为在2~5℃下振荡40~50h。
6.一种权利要求1至5任一项所述的方法制备的透明质酸纳米微球复合物E。
7.一种权利要求6所述的透明质酸纳米微球复合物E在制备化妆品中的应用。
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