CN113308513B - 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒及其检测方法 - Google Patents

一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒及其检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒及其检测方法，所述试剂盒，包括试剂A和试剂B；所述试剂A包括胆固醇脂酶、胆固醇氧化酶、磷脂酶、过氧化物酶、色相、缓冲液、表面活性剂和增强剂；所述试剂B包括曲拉通X‑100、4‑氨基安替比林、过氧化物酶、缓冲液和增强剂；所述增强剂包括达瓦树胶、十二烷基二甲基甜菜碱和棉子糖。所述检测方法为两点终点法，反应方向为升反应，检测主波长为600nm，副波长为700nm，反应温度为37℃，时间为10min。本发明在提高试剂盒检测结果的准确度的同时，提高了试剂盒的稳定性，简化了储存条件，避免了医疗资源的浪费，同时，本发明各组分价格适中，更适合临床的推广应用。

Description

一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒及其检测方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒及其检测方法。
背景技术
血液中的脂蛋白可以根据其密度大小分为高密度脂蛋白(HDL)，低密度脂蛋白(LDL)，极低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微粒(CM)四大类。不同种类的脂蛋白胆固醇对于引起动脉粥样硬化的能力不一样。通常临床上检测最多的组分是高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)，低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)，就常规而言，高密度脂蛋白胆固醇对于动脉血管有一定的保护作用，其含量高发生心血管疾病的风险就低，低密度脂蛋白胆固醇则易引起动脉粥样硬化，增大发生心血管疾病的风险。然而，最近的研究表面，即使LDL-C的含量较低，有部分人群也容易发生心血管疾病，而部分LDL-C含量较高的人群却不一定会发生心血管疾病。这可能与LDL-C的不均一性有关，有研究显示，低密度脂蛋白的亚组分中颗粒较小密度较大的LDL称为小而密低密度脂蛋白(smalldenseLow-DensityLipoprotein，简称sdLDL)；而将颗粒较大、密度较低的LDL称为大而轻LDL。相比之下，sdLDL致动脉粥样硬化的能力更强，是目前公认的引发心血管疾病的重要危险因子之一。
目前针对小而密低密度脂蛋白胆固醇的测定方法主要有核磁共振光谱法、分子筛色谱法、电子显微镜技术、动态光散射法、微流控芯片毛细管电泳法。其中常用的有：(1)密度梯度超速离心法，是一种扩展型脂质特征测定产品，可报告22种血液胆固醇成分(包括对非空腹LDL亚型及脂蛋白所有子类的直接测定)，是目前国际上小而密低密度脂蛋白胆固醇测定的参考方法。(2)管式凝胶电泳：采用管式聚丙烯酰氨凝胶电泳原理，可完全分离鉴定所有脂蛋白(含7种LDL亚型，10种HDL亚型)。但上述两种检测方法均需要特殊实验设备，并且耗时久，操作复杂，并不适合临床常规检测。(3)过氧化物酶法：在国际上，日本电化生研公司最先推出了适用于临床常规开展的均相酶法，在中国与九强生物和生研技术合作，开发出了过氧化物酶法检测sd LDL-C的方法，在所有临床实验室应用当前设备都可以进行检测，也使得小而密低密度脂蛋白胆固醇作为冠心病的一个标志物将可能具有更广泛的临床实用性。
但是目前已有的低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒普遍存在检测准确度不高的问题，同时，有效期时间短，开瓶稳定性差，这极大地造成了医疗资源的浪费。
CN110564810A公开了一种高性能小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，其原料按重量分包括：试剂A：Good’s缓冲液90-110mmol/L、胆固醇酯酶1-3ku/L、胆固醇氧化酶1-2ku/L、磷脂酶0.7-0.9ku/L、过氧化氢酶400-600ku/L和N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐(TOOS)1-3mmol/L；试剂B：Good’s缓冲液90-110mmol/L、过氧化物酶2-3ku/L、4-氨基安替比林3-5mmol/L和叠氮钠0.04％-0.06％，该发明使用叠氮钠作为防腐剂会对胆固醇酯酶产生一定程度的抑制作用，因此影响测定的准确度。
CN108424952A公开了一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，所述试剂盒为液体双试剂，由试剂R1和试剂R2组成；所述试剂R1由以下组分组成：浓度为0.1-1.0mol/L的缓冲液，浓度为100-300U/L的过氧化氢酶，浓度为1-5mmol/L的N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐(TOOS)，浓度500-2000U/L的胆固醇酯酶，浓度为500-1600U/L的胆固醇氧化酶，浓度为50-100KU/L的磷脂酶，浓度为0.3-1.5g/L的聚乙二醇3-苄基苯基醚，浓度为0.5-1.5g/L的聚氧乙烯苄基苯乙烯醚，浓度为2.5-5ml/L的稳定剂；所述试剂R2由以下组分组成：浓度为0.1-1.0mol/L的缓冲液，浓度为100-200U/L的过氧化物酶，浓度为1.0-2.5mol/L的4-氨基安替比林，浓度为40-60.0mmol/L的曲拉通，浓度为2.5-5ml/L的稳定剂。为了提高开瓶稳定性，其在试剂R1和试剂R2中加入了稳定剂成分二硫苏糖醇，但二硫苏糖醇容易被空气氧化，稳定性差，且有毒，不适合用于制备小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒。
因此，为满足临床需要，研发一种准确度高、稳定性好且价格适中的小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒及其检测方法十分必要。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供了一种稳定性好，准确度高且价格适中的小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒及其检测方法。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，包括试剂A和试剂B；
所述试剂A包括胆固醇脂酶、胆固醇氧化酶、磷脂酶、过氧化物酶、色相、缓冲液、表面活性剂和增强剂；
所述试剂B包括曲拉通X-100、4-氨基安替比林4-AAP和缓冲液。
优选地，所述表面活性剂为椰油酰胺丙基甜菜碱、脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基糖苷、十八烷基三甲基氯化铵、椰油基羟乙基磺酸钠、肉豆蔻酸异丙酯和十六烷基异丙酯中的至少一种。
进一步优选地，所述表面活性剂为椰油酰胺丙基甜菜碱、脂肪醇聚氧乙烯醚和烷基糖苷的混合物。
更进一步优选地，所述椰油酰胺丙基甜菜碱、脂肪醇聚氧乙烯醚和烷基糖苷的质量比为4-6:1:1-3；更进一步优选为3-5:1:2；最优选为4:1:2。
优选地，所述增强剂包括达瓦树胶、十二烷基二甲基甜菜碱和棉子糖。
进一步优选地，所述增强剂为质量比0.1-0.5:5：1的达瓦树胶、十二烷基二甲基甜菜碱和棉子糖。
优选地，所述缓冲液为TRIS、MOPS、POPOS、HEPES或PIPES。
进一步优选地，所述缓冲液的pH为7.0。
优选地，所述试剂A包括胆固醇脂酶3000-4500U/L、胆固醇氧化酶1000-1500U/L、磷脂酶320-460U/L、过氧化物酶5.2-8.9kU/L、色相1-5mM/L、缓冲液80-120mM/L、表面活性剂10-80g/L和增强剂10-50g/L；
所述试剂B包括曲拉通X-100 30-100g/L、4-氨基安替比林1-5mM/L、过氧化物酶4-7kU/L、缓冲液50-80mM/L和增强剂5-10g/L。
进一步优选地，所述试剂A包括胆固醇脂酶3500-4000U/L、胆固醇氧化酶1100-1400U/L、磷脂酶350-440U/L、过氧化物酶5.8-8.0kU/L、色相2-4.5mM/L、缓冲液70-100mM/L、表面活性剂15-75g/L和增强剂12-45g/L；
所述试剂B包括曲拉通X-100 40-90g/L、4-氨基安替比林1.5-4.5mM/L、过氧化物酶4.5-6.0kU/L、缓冲液55-75mM/L和增强剂6.0-9.0g/L。
最优选地，所述试剂A包括胆固醇脂酶3800U/L、胆固醇氧化酶1250U/L、磷脂酶400U/L、过氧化物酶6.5kU/L、色相3.5mM/L、缓冲液90mM/L、表面活性剂45g/L和增强剂30g/L；
所述试剂B包括曲拉通X-100 50g/L、4-氨基安替比林3.5mM/L、过氧化物酶5.2kU/L、缓冲液60mM/L和增强剂7g/L。
本发明的试剂盒适用于杜邦AR、日立7080/7170/7600/7180、迈瑞BS320、迪瑞CS600、雅培C8000、东芝TBA40FR、奥林巴斯AU2700、贝克曼DXC800、西门子ADVIA2400、罗氏P800等全自动生化分析仪。
本发明还提供了上述小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒的检测方法，所述检测方法为两点终点法，反应方向为升反应，使用时，检测主波长为600nm，副波长为700nm，反应温度为37℃，时间为10min；
具体测定参数及方法，如下所示：
样品 3μl
试剂A(R1) 150μl
混匀，37℃孵育5分钟，读吸光度值A1
试剂B(R2) 50μl
混匀，37℃孵育10分钟，读吸光度值A2，
ΔA＝A2-A1
计算公式为：
Figure BDA0003086403150000041
其中，△A测定为测定样品加入试剂A和试剂B后的吸光度的差值；△A校准为标准品加入试剂A和试剂B后的吸光度的差值。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)本发明通过对试剂A中表面活性剂和增强剂的筛选以及二者比例的优化，可以特异地清除sd-LDL以外的脂蛋白，在提高试剂盒检测结果的准确度的同时，提高了试剂盒的稳定性。
(2)本发明提供的小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒，理论浓度与实测浓度的线性相关系数r≧0.999，准确度更高。
(3)本发明提供的小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒，所需标本量少(3μL血清即可)，且基本不受胆红素、甘油三酯和血红蛋白等影响；当胆红素、甘油三酯和血红蛋白的浓度高至100μM、3.0mM和10g/L时，对LDL-C测定无明显影响。
(4)本发明通过在试剂A和试剂B中同时加入由达瓦树胶、十二烷基二甲基甜菜碱和棉子糖组成的增强剂，提高了试剂盒的稳定性，简化了储存条件，避免了医疗资源的浪费，同时，本发明的各组分价格适中，更适合临床的推广应用。
具体实施方式
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。
在进一步描述本发明具体实施方式之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围。
当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本文中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同意义。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所采用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒
一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，包括试剂A和试剂B，
所述试剂A包括胆固醇脂酶3000U/L、胆固醇氧化酶1000U/L、磷脂酶320U/L、过氧化物酶5.2kU/L、色相5mM/L、缓冲液80mM/L、表面活性剂10g/L和增强剂10g/L；
所述试剂B包括曲拉通X-100 30g/L、4-氨基安替比林5mM/L、过氧化物酶4kU/L、缓冲液50mM/L和增强剂5g/L；
其中，所述表面活性剂由质量比为4:1:1的椰油酰胺丙基甜菜碱、脂肪醇聚氧乙烯醚和烷基糖苷组成；
所述增强剂由质量比为0.1:5:1的达瓦树胶、十二烷基二甲基甜菜碱和棉子糖组成；
所述缓冲液为TRIS，pH为7.0。
检测条件及方法：
所述检测方法为两点终点法，反应方向为升反应，测试条件为：使用时，检测主波长为600nm，副波长为700nm，样品用量为3μL，试剂A为150μL，试剂B为50μL，反应温度为37℃，时间为10min；
具体测定参数及方法，如下所示：
样品 3μl
试剂A(R1) 150μl
混匀，37℃孵育5分钟，读吸光度值A1
试剂B(R2) 50μl
混匀，37℃孵育10分钟，读吸光度值A2，
ΔA＝A2-A1
计算公式为：
Figure BDA0003086403150000061
其中，△A测定为测定样品加入试剂A和试剂B后的吸光度的差值；△A校准为标准品加入试剂A和试剂B后的吸光度的差值。
实施例2一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒
一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，包括试剂A和试剂B，
所述试剂A包括胆固醇脂酶4500U/L、胆固醇氧化酶1500U/L、磷脂酶460U/L、过氧化物酶8.9kU/L、色相1mM/L、缓冲液120mM/L、表面活性剂80g/L和增强剂50g/L；
所述试剂B包括曲拉通X-100 100g/L、4-氨基安替比林1mM/L、过氧化物酶7kU/L、缓冲液80mM/L和增强剂10g/L；
其中，所述表面活性剂由质量比为6:1:3的椰油酰胺丙基甜菜碱、脂肪醇聚氧乙烯醚和烷基糖苷组成；
所述增强剂由质量比为0.5:5:1的达瓦树胶、十二烷基二甲基甜菜碱和棉子糖组成；
所述缓冲液为TRIS，pH为7.0。
检测条件及方法同实施例1。
实施例3一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒
一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，包括试剂A和试剂B，
所述试剂A包括胆固醇脂酶3500U/L、胆固醇氧化酶1100U/L、磷脂酶350U/L、过氧化物酶5.8kU/L、色相4.5mM/L、缓冲液70mM/L、表面活性剂15g/L和增强剂12g/L；
所述试剂B包括曲拉通X-100 40g/L、4-氨基安替比林4.5mM/L、过氧化物酶4.5kU/L、缓冲液55mM/L和增强剂6.0g/L；
其中，所述表面活性剂由质量比为3:1:2的椰油酰胺丙基甜菜碱、脂肪醇聚氧乙烯醚和烷基糖苷组成；
所述增强剂由质量比为0.2:5:1的达瓦树胶、十二烷基二甲基甜菜碱和棉子糖组成。
检测条件及方法同实施例1。
实施例4一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒
一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，包括试剂A和试剂B，
所述试剂A包括胆固醇脂酶4000U/L、胆固醇氧化酶1400U/L、磷脂酶440U/L、过氧化物酶8.0kU/L、色相2mM/L、缓冲液115mM/L、表面活性剂75g/L和增强剂45g/L；
所述试剂B包括曲拉通X-100 90g/L、4-氨基安替比林1.5mM/L、过氧化物酶6.0kU/L、缓冲液75mM/L和增强剂9.0g/L；
其中，所述表面活性剂由质量比为5:1:2的椰油酰胺丙基甜菜碱、脂肪醇聚氧乙烯醚和烷基糖苷组成；
所述增强剂由质量比为0.4:5:1的达瓦树胶、十二烷基二甲基甜菜碱和棉子糖组成。
检测条件及方法同实施例1。
实施例5一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒
一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，包括试剂A和试剂B，
所述试剂A包括胆固醇脂酶3800U/L、胆固醇氧化酶1250U/L、磷脂酶400U/L、过氧化物酶6.5kU/L、色相3.5mM/L、缓冲液90mM/L、表面活性剂45g/L和增强剂30g/L；
所述试剂B包括曲拉通X-100 50g/L、4-氨基安替比林3.5mM/L、过氧化物酶5.2kU/L、缓冲液60mM/L和增强剂7g/L；
其中，所述表面活性剂由质量比为4:1:2的椰油酰胺丙基甜菜碱、脂肪醇聚氧乙烯醚和烷基糖苷组成；
所述增强剂由质量比为0.3:5:1的达瓦树胶、十二烷基二甲基甜菜碱和棉子糖组成。
检测条件及方法同实施例1。
对比例1
本对比例与实施例5的区别在于，所述表面活性剂由质量比为7:1:0.5的椰油酰胺丙基甜菜碱、脂肪醇聚氧乙烯醚和烷基糖苷组成；
所述增强剂由质量比为1:5:3的达瓦树胶、十二烷基二甲基甜菜碱和棉子糖组成。
对比例2
本对比例与实施例5的区别在于，所述表面活性剂由质量比为3:1:5的椰油酰胺丙基甜菜碱、脂肪醇聚氧乙烯醚和烷基糖苷组成；
所述增强剂由质量比为0.1:8:1的达瓦树胶、十二烷基二甲基甜菜碱和棉子糖组成。
对比例3
本对比例与实施例5的区别在于，所述表面活性剂由质量比为4:1:2的椰油酰胺丙基甜菜碱、聚氧乙烯十二烷基醚和烷基糖苷组成；
所述增强剂由质量比为0.3:5:1的阿拉伯胶、十二烷基二甲基甜菜碱和棉子糖组成。
对比例4
CN108424952A公开的试剂盒。
对比例5
CN111269962A公开的试剂盒。
性能试验：对上述实施例和对比例中的试剂A和试剂B进行性能试验。
1、线性范围对比：利用已知浓度的低密度脂蛋白胆固醇样本检测上述实施例和对比例的线性范围，结果如表1和表2所示。
表1
Figure BDA0003086403150000091
表2
浓度梯度mM/L 实施例5 对比例1 对比例2 对比例3
0 0 0 0 0
1 1.04 1.52 1.38 1.26
2 2.11 2.84 2.57 2.38
3 3.08 3.77 3.67 4.01
4 4.15 5.83 5.51 5.25
5 5.17 8.94 8.18 7.99
曲线方程 y＝1.0329x+0.0095 y＝1.6731x-0.3662 y＝1.554x-0.3333 y＝1.53x-0.3433
R2 0.9999 0.9587 0.9701 0.9753
由上表1和2可知，在0-5mM/L浓度范围内，本发明试剂盒的测试值能够达到理论值且二者相关性较好，R2均大于0.999，由此可见，本试剂盒的线性范围较广。同时通过对比例1-3发现，当改变表面活性剂和增强剂中各组分的配比，对试剂盒的线性范围产生了一定影响。
2、精密度
利用实施例1-5以对比例1-3制备的小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒对同一样本连续检测20次，取平均值，计算其CV％，结果如表3所示。
表3
组别 平均值 CV％
实施例1 5.32 2.18
实施例2 5.21 1.87
实施例3 5.10 1.58
实施例4 5.05 1.34
实施例5 5.02 0.64
对比例1 5.63 6.64
对比例2 5.52 7.97
对比例3 8.74 8.58
由上表可知，本发明制备的小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒的CV为0.64-2.18％，表明本发明制备的检测试剂盒的精密度较好。
3、稳定性
将实施例和对比例制备的试剂盒分别在25℃下和开瓶后在2-8℃下避光环境下存储，检测实施例1-5、对比例1-3和对比例5的试剂盒的稳定性；定期检测其标准品的吸光值，每次重复测定3次，取平均值，与标准品浓度相对偏差控制在10％以内，则认为检测试剂盒稳定，与标准品浓度相对偏差大于10％，则认为检测试剂盒不稳定。
检测结果如表4所示。
表4
Figure BDA0003086403150000101
Figure BDA0003086403150000111
4、干扰实验
在人血清样本中分别加入不同含量的干扰物质后，分别采用实施例1-5的试剂盒进行低密度脂蛋白胆固醇含量的测定。加入干扰物质后的测定值除以加入干扰物质前的测定值即为影响率，结果表明当胆红素、甘油三酯和血红蛋白的浓度分别在100μM、3.0mM和10g/L以下时，对测定结果的干扰均在10％以下，不影响测定结果。
综上所述，本发明通过对试剂A中表面活性剂和增强剂的筛选以及二者比例的优化，可以特异地清除sd-LDL以外的脂蛋白，在提高试剂盒检测结果的准确度的同时，提高了试剂盒的稳定性，存储时间大大延长；同时，本发明提供的小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒，理论浓度与实测浓度的线性相关系数r≧0.999，准确度更高。
另外，本发明意外的发现，通过在试剂A和试剂B中同时加入由达瓦树胶、十二烷基二甲基甜菜碱和棉子糖组成的增强剂，提高了试剂盒的稳定性，简化了储存条件，避免了医疗资源的浪费，同时，本发明的各组分价格适中，更适合临床的推广应用。
本发明提供的小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒，所需标本量少(3μL血清即可)，且基本不受胆红素、甘油三酯和血红蛋白等影响；当胆红素、甘油三酯和血红蛋白的浓度高至100μM、3.0mM和10g/L时，对LDL-C测定无明显影响。
以上是结合具体实施例对本发明进一步的描述，但这些实施例仅仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。

Claims (5)

1.一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，包括试剂A和试剂B；其特征在于，
所述试剂A包括胆固醇脂酶3000-4500U/L、胆固醇氧化酶1000-1500U/L、磷脂酶320-460U/L、过氧化物酶5.2-8.9kU/L、色相1-5mM/L、缓冲液80-120 mM/L、表面活性剂10-80g/L和增强剂10-50g/L；
所述试剂B包括曲拉通X-100 30-100g/L、4-氨基安替比林1-5 mM/L、过氧化物酶4-7kU/L、缓冲液50-80mM/L和增强剂5-10g/L；
所述表面活性剂为质量比4-6:1:1-3的椰油酰胺丙基甜菜碱、脂肪醇聚氧乙烯醚和烷基糖苷；
所述增强剂为质量比0.1-0.5:5:1的达瓦树胶、十二烷基二甲基甜菜碱和棉子糖。
2.根据权利要求1所述的小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为TRIS、MOPS、POPOS、HEPES或PIPES。
3.根据权利要求1所述的小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，其特征在于，所述试剂A包括胆固醇脂酶3500-4000U/L、胆固醇氧化酶1100-1400U/L、磷脂酶350-440U/L、过氧化物酶5.8-8.0kU/L、色相2-4.5mM/L、缓冲液70-100 mM/L、表面活性剂15-75g/L和增强剂12-45g/L；
所述试剂B包括曲拉通X-100 40-90g/L、4-氨基安替比林1.5-4.5 mM/L、过氧化物酶4.5-6.0 kU/L、缓冲液55-75mM/L和增强剂6.0-9.0g/L。
4.根据权利要求3所述的小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，其特征在于，所述试剂A包括胆固醇脂酶3800U/L、胆固醇氧化酶1250U/L、磷脂酶400U/L、过氧化物酶6.5kU/L、色相3.5mM/L、缓冲液90 mM/L、表面活性剂45g/L和增强剂30g/L；
所述试剂B包括曲拉通X-100 50g/L、4-氨基安替比林3.5 mM/L、过氧化物酶5.2kU/L、缓冲液60mM/L和增强剂7g/L。
5.根据权利要求1-4任一项所述的小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的检测方法为两点终点法，反应方向为升反应，使用时，检测主波长为600nm，副波长为700nm，反应温度为37℃，时间为10min。
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