CN113307841B - 一种醇法制备的高纯度茶皂素及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种醇法制备高纯度茶皂素及其制备方法，步骤是：⑴粉碎过筛、浸泡与除铁：脱脂茶籽粕经粉碎过筛、乙醇水溶液浸泡和除铁，得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物；⑵酸化与提取：除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物，经调节pH、加热提取和离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液；⑶钙沉与洗涤：酸式茶皂素的乙醇提取液经中和、钙化、低温沉淀、乙醇水溶液及乙醇洗涤和离心分离，得醇洗的茶皂素酸钙沉淀；⑷酸化、洗涤与干燥：醇洗的茶皂素酸钙沉淀经酸化、降温沉淀、低温水洗和离心分离，所得的酸式茶皂素沉淀经干燥、粉碎、定量包装和密封，即得高纯度的茶皂素产品；该制备方法具有成本低、操作方便、茶皂素提取率高等优点。

Description

一种醇法制备的高纯度茶皂素及其制备方法

技术领域

本发明属于油料粕综合利用技术领域，具体涉及一种醇法制备的高纯度茶皂素及其制制备方法。

背景技术

茶皂素，属于典型的糖苷类物质，是多种糖苷成分的混合物。茶皂素由有机酸、苷元和糖体三个部分构成，结构中的有机酸为当归酸、醋酸和惕各酸；苷元为β-香树素(β-amyrin)衍生物，其基本碳架为齐墩果烷；有机酸与苷元中E 环上的C-21或者C-22位上的羟基通过酯键连接，形成复合苷元；糖体部分由阿拉伯糖、半乳糖、木糖和葡萄糖醛酸组成，四个单糖之间通过糖苷键链接形成四糖，四糖中葡萄糖醛酸C-1上的羟基与复合苷元C-1上的羟基通过脱水生成糖苷键链接而形成茶皂素。由于茶皂素分子结构中具有葡萄糖醛酸的羧基(－ COOH)，所以茶皂素具有酸性，茶皂素又可以称为茶皂素酸，茶皂素的结构见下式。

不同苷元和不同有机酸的连接，以及连接方式的各异造就了一系列结构类似、种类繁多的茶皂素单体。日本学者青山新次郎从茶树种子中首次分离得到了茶皂素，并通过水解实验得到了苷元和糖体从而确定了茶皂素的化学式。1952 年，日本东京大学学者石馆守山和上田阳第一次从茶籽中分离出茶皂素结晶并确定其熔点为224-225℃，并明确了茶皂素的分子式为C₅₇H₉₀O₂₆。

茶皂素纯品为乳白色或浅黄色粉末，具有很强的吸湿性，其水溶液对甲基红反应呈酸性(茶皂素酸)。酸性的茶皂素难溶于冷水、无水乙醇、无水甲醇，不溶于乙醚、丙酮、苯、石油醚等有机溶剂，在温水、醋酸乙酯、二硫化碳中有少许的溶解，在热水、碱性水溶液、含水乙醇、含水甲醇、正丁醇、冰醋酸、吡啶和醋干中溶解性能良好，可以通过这些介质对茶皂素进行提取。在pH﹥pK(茶皂素中的葡萄糖醛酸的羧基的离解常数)的条件下，茶皂素酸可以转化为茶皂素酸盐，茶皂素酸钠和茶皂素酸钾，在水中的溶解度比较大，可以利用此原理提取茶籽粕中的茶皂素；而茶皂素酸与通常的二价金属离子和三价金属离子生成的盐，如茶皂素酸钙、茶皂素酸镁、茶皂素酸亚铁和茶皂素酸铁，则为不溶于水的白色云状物的沉淀。因此，螯合和沉淀茶籽粕中固有和外来污染的二价金属离子和三价金属离子，有助于提高茶皂素的得率。申请人通过反复的资料分析和实验比对，发现绝大多数的研究者混淆了茶皂素、茶皂素酸和茶皂素酸盐的根本区别。

由于分子结构中同时具有亲水性的糖体和疏水性的苷元，茶皂素具有良好的表面活性，是天然的表面活性剂。据研究，茶皂素的HLB值为9.2，适合形成水包油型的乳化液。因此，茶皂素可以作为高档洗涤液的原料，用于生产果蔬清洗剂、洗发精、沐浴露、洗手液、洗脚液。茶皂素对多种微生物都有抑制作用。据研究，茶皂素对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌均有较明显的抑制作用，对白色念珠菌有一定的抑制作用，可以部分抑制一些导致食品变质的霉菌繁殖，被抑制的菌中既有革兰氏阳性菌又有革兰氏阴性菌，既有球菌又有杆菌，可见茶皂素有着广谱的抑菌作用，因此具有防腐剂的应用前景。茶皂素还具有类生物激素样的作用，对动植物生长都有促进作用。此外，茶皂素也具有抑制酒精吸收、保护胃肠道、抗高血压、抗渗消炎等生理活性。因此，市场对高纯度的茶皂素类产品的需求很大。

由于茶籽的产量较小，茶油的生产主要采用压榨工艺。目前，油茶籽经压榨提取茶籽油后所得的茶籽粕(也称为茶枯、茶籽饼)和茶籽粕经浸出法提取残油后的脱脂茶籽粕，基本处于废弃状态，既造成环境污染，又造成资源浪费。申请人通过反复和细致的实验研究，首次发现茶籽粕中含有铁屑，分析原因，应该是脱壳后的茶籽通过螺旋压榨机在压榨提油过程中，由于高压力的反复摩擦和挤压，螺旋压榨机的螺旋轧辊微小的脱落所致，铁屑的存在，既影响茶皂素产品的颜色，更不利于茶皂素的充分提取。茶籽粕、脱脂茶籽粕、茶籽壳和茶籽蒲中含有5～20％的茶皂素和蛋白质、多糖、黄酮等其他有用成分，因此，如何综合茶籽粕、脱脂茶籽粕、茶籽壳和茶籽蒲，就显得具有必要、紧迫和重要。

中国专利CN201910463338.3(一种茶皂素提取精制方法)、CN201911119365.5 (一种从油茶果壳中提取茶皂素的方法)、CN201910615565.3(一种茶皂素的提取方法)、CN202010475217.3(山茶粕中的茶皂素提取工艺及其在氨基酸洁面皂中的应用)、CN201710839054.0(一种提高水提茶皂素溶出率的方法)、 CN201811402817.6(一种油茶籽中茶皂素的提取方法)、CN201611008220.4(一种从采用乙醇水提法提取油茶籽油后的水相中同时回收乙醇和茶皂素的方法)、 CN201810246415.5(一种提高茶皂素得率的分离方法)、CN201910046926.7(一种茶皂素的提取方法)、CN201910463338.3(一种茶皂素提取精制方法)、 CN201810864405.8(一种茶皂素的制备方法)、CN201910615565.3(一种茶皂素的提取方法)、CN201910802169.1(一种高纯茶皂素的精制方法)、 CN201911196405.6(一种从油茶籽中提取茶油和茶皂素的方法)和 CN201711296589.4(一种高效去污的天然高纯茶皂素的制备方法)，分别涉及了茶皂素的提取、制备、提纯和精制的工艺与技术，但是，这些专利，存在如下不足：1.对茶皂素的性质认识不足，因而所用的技术方案存在这样或者那样的先天性的缺陷；2.所开发的茶皂素产品，要么提取率不高，要么纯度低，因而技术上不先进和经济上不合理。所以，不断研究茶皂素的提取与精制技术，开发茶皂素提取率高和纯度高的新技术和新工艺，具有重要的社会、经济和现实意义。

发明内容

针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供一种醇法制备的高纯度茶皂素，此茶皂素具有纯度高、产品特色突出、产品附加值高，经济效益好，可机械化制备的优点。

此外，本发明的另一个目的是在于提供了一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，该方法易行，具有茶皂素提取率高、成本低、原料利用充分、操作方便，设备选型与配套易，设备投资少等优点。

为了实现上述的目的，本发明是通过如下方案实现的：

一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)粉碎过筛、浸泡与除铁：先将脱脂茶籽粕用不锈钢粉碎机粉碎并经40～ 100目标准筛过筛，得脱脂茶籽粕粉；然后再将所得脱脂茶籽粕粉加入到乙醇水溶液中，在室温下搅拌浸泡，搅拌浸泡完毕后用除铁器除去充分吸液膨胀后的脱脂茶籽粕粉中的铁屑，得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物,备用；

(2)酸化与提取：在搅拌的情况下，先用盐酸溶液将步骤⑴所得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物的pH调节至3.1～3.3，然后继续搅拌并进行回流提取，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a1和沉淀b1；向所得沉淀b1中加入乙醇水溶液，按照第一次回流提取相同的方法进行第二次回流提取，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a2和沉淀b2；将酸式茶皂素的乙醇提取液a1和酸式茶皂素的乙醇提取液a2混合，得酸式茶皂素的乙醇提取液，备用；

(3)钙沉与洗涤：在搅拌的情况下，用氢氧化钙将步骤(2)所得酸式茶皂素的乙醇提取液的pH调节至5.0～6.0，调节温度为5～25℃，继续搅拌0.5～ 1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入乙醇水溶液，调节温度为5～25℃，搅拌0.5～1.5 小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入无水乙醇，调节温度为5～ 25℃，搅拌0.5～1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；将所得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品干燥脱乙醇，得醇洗的茶皂素酸钙沉淀，备用；

(4)酸化、洗涤与干燥：先向步骤⑶所得醇洗的茶皂素酸钙沉淀中加入软化水，调节温度为50～70℃，搅拌分散，在搅拌的情况下，用盐酸溶液调节混合液的pH为3.1～3.3；然后将混合物的温度降至0～20℃，并恒温搅拌1.0～ 3.0小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的上清液，得酸式茶皂素沉淀粗品；向所得酸式茶皂素沉淀粗品中加入软化水，搅拌分散，调节混合液的pH 为3.1～3.3和温度为0～20℃，继续搅拌0.5～1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的洗涤液，得酸式茶皂素沉淀；用干燥法在60℃以下将所得酸式茶皂素沉淀干燥至水分百分含量≦5％，粉碎、定量包装和密封，即得白色～淡黄色的高纯度的茶皂素产品。

优选的，步骤⑴中所述脱脂茶籽粕为油茶籽经压榨法压榨提取茶籽油后得到的压榨茶籽粕，再经浸出法脱除压榨茶籽粕中的残油后所得的油脂含量≤1.0％的茶籽粕；所述乙醇为工业级、食品级、化学纯或分析纯的乙醇；所述除铁器为食品工业或化学工业用的除铁器；所述脱脂茶籽粕粉与乙醇水溶液的质量比为 1:3-7，搅拌浸泡的时间为2～20小时。

优选的，步骤⑵中所述盐酸为工业级、化学纯或分析纯的盐酸；所述乙醇为工业级或食品级、化学纯或分析纯的乙醇。

优选的，步骤⑵中所述回流提取的温度为40～70℃，提取的时间为0.5～1.5 小时；所述沉淀b1与乙醇水溶液的质量比为1:2-6。

优选的，步骤⑶中所述的氢氧化钙为工业级、化学纯或分析纯的氢氧化钙；所述乙醇为工业级或食品级、化学纯或分析纯的乙醇。

优选的，步骤⑶中所述茶皂素酸钙沉淀粗品与乙醇水溶液的质量比为 1:2-5；所述第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品与无水乙醇的质量比为1：2～4。

优选的，步骤⑷中所述的盐酸为工业级、化学纯或分析纯的盐酸；所述的干燥法为真空干燥法或常压热风干燥法。

优选的，步骤⑷中醇洗的茶皂素酸钙沉淀与软化水的质量比为1:1.5-4.5；所述酸式茶皂素沉淀粗品与软化水的质量比为1：1.5～3.5。

优选的，所述乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为70～90％。

另外，本发明还保护一种由所述任一项制备方法制备得到的高纯度茶皂素。

本发明的技术构思如下：

本发明利用脱脂茶籽粕中固有的大分子的蛋白质和多糖及淀粉及果胶等大分子物质不溶于较高浓度的乙醇、浸泡软化和膨胀后的脱脂茶籽粕中的铁屑可被除铁器分离、脱脂茶籽粕粉中与茶皂素结合的二价及多价金属离子可转化为盐酸盐从而充分释放和游离出茶皂素、茶皂素分子中葡萄糖醛酸的羧基在酸性条件下可被封闭成羧酸从而将茶皂素转化成醇溶性的酸式茶皂素、醇溶性的酸式茶皂素可被钙化为醇不溶性的茶皂素酸钙沉淀、茶皂素酸钙沉淀中的色素和多酚及黄酮等成分具有醇溶性、茶皂素酸钙可被酸化为不溶于水的酸式茶皂素的性质，脱脂茶籽粕经粉碎过筛、乙醇水溶液浸泡与除铁后所得的除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物，经酸化、加热提取和离心分离得酸式茶皂素的乙醇提取液；酸式茶皂素的乙醇提取液通过氢氧化钙中和、钙化沉淀、乙醇水溶液及乙醇洗涤和离心分离后所得的醇洗的茶皂素酸钙沉淀，经酸化转化成水不溶的酸式茶皂素、降温、沉淀、水洗和离心分离后所得的酸式茶皂素沉淀，经通过干燥脱水、粉碎、定量包装和密封，即得白色～淡黄色的高纯度的茶皂素产品。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

(1)本发明方法通过不锈钢粉碎机粉碎脱脂茶籽粕、通过利用较高浓度的乙醇水溶液控制脱脂茶籽粕中固有的蛋白质和多糖及淀粉及果胶等大分子物质处于不溶解状态、浸泡充分膨胀及分散脱脂茶籽粕粉后用除铁器脱除螺旋压榨机压榨提油带入到茶籽粕中的铁屑，解决了蛋白质和多糖及淀粉及果胶等大分子物质与茶皂素的难于分离、普通粉碎机粉碎脱脂茶籽粕的铁锈带入、铁锈与茶籽粕中固有的多酚类物质作用而变色、铁锈与茶皂素反应生成不溶于水的茶皂素酸铁而降低茶皂素的提取率、螺旋压榨机压榨提油带入到茶籽粕中的铁屑通常无法脱除和铁屑与多酚作用变色以及铁屑在后续的提取过程与茶皂素反应生成不溶于水的茶皂素酸铁而降低茶皂素的提取率等技术问题和难点，主要达到了蛋白质和多糖及淀粉及果胶等大分子物质与茶皂素的易于分离、减轻后续的乙醇脱色负荷与难度、提高后续的茶皂素产品的颜色和纯度以及提高后续的茶皂素产品的得率的技术效果。

(2)本发明方法通过使用微酸性的酸化处理(pH为3.1～3.3)使脱脂茶籽粕粉中与茶皂素结合的二价及多价金属离子转化为盐酸盐从而充分释放和游离出茶皂素、通过微酸性的酸化处理(pH为3.1～3.3)将茶皂素分子中葡萄糖醛酸的羧基封闭成羧酸从而将茶皂素转化成醇溶性的酸式茶皂素、通过微酸性(pH 为3.1～3.3)的加热提取酸式茶皂素、通过醇溶性的酸式茶皂素被中和和钙化为醇不溶性的茶皂素酸钙沉淀而与杂质分离、通过乙醇水溶液及乙醇洗涤脱除茶皂素酸钙沉淀中的色素和多酚及黄酮等醇溶性成分，解决了由于脱脂茶籽粕固有的二价及多价金属离子与茶皂素结合形成不溶性的茶皂素酸盐而导致的茶皂素提取率低、解决了酸性条件(如通常的pH为1～3)加热提取使茶皂素中糖苷键的酸水解而导致茶皂素的固有结构被破坏和提取率低、解决了醇溶性的茶皂素与醇溶性的色素和多酚及黄酮等醇溶性成分的分离难等技术问题和难点，主要达到了充分提取茶皂素、提高茶皂素的利用率和得率、充分分离杂质和提高茶皂素的纯度的技术效果。

(3)本发明方法通过使用柔和的微酸性(pH为3.1～3.3)加热将醇洗的茶皂素酸钙酸化为热水可溶的酸式茶皂素，通过降温(0～20℃)沉淀酸式茶皂素，通过低温和微酸性(pH为3.1～3.3)的水洗等技术处理，解决了由于酸化茶皂素的pH太低(即酸性太强，如pH1～3)和温度过高引起的茶皂素中糖苷键的酸水解而导致茶皂素的固有结构被破坏和提取率低，解决了由于温度过高的水洗涤分离水溶性杂质而导致的茶皂素损失大等技术问题和难点，主要达到了降低酸式茶皂素的溶解度、充分沉淀酸式茶皂素、充分除去水溶性杂质、保持酸式茶皂素的固有分子结构和提高酸式茶皂素的得率与纯度的技术效果。

(4)本发明相对于现有技术，其进步体现在现有技术只能利用茶籽粕或者脱脂茶籽粕为原料通过各自的技术处理得到纯度低、颜色深、成本高和提取率低的茶皂素产品；而本发明实现了利用脱脂茶籽粕为原料制造纯度高、颜色浅、成本低和提取率高的茶皂素产品的技术突破，所得茶皂素产品的纯度可达98％以上，提取率可达95％以上。

附图说明

图1为本发明一种醇法制备的高纯度茶皂素制备方法的工艺流程图。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，包括如下步骤：

(1)粉碎过筛、浸泡与除铁：先将脱脂茶籽粕用不锈钢粉碎机粉碎并经60 目标准筛过筛，得脱脂茶籽粕粉；然后再将3kg所得脱脂茶籽粕粉加入到15kg 乙醇体积百分含量为8％的乙醇水溶液中，在室温下搅拌浸泡11小时，搅拌浸泡完毕后用除铁器除去充分吸液膨胀后的脱脂茶籽粕粉中的铁屑，得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物,备用；

(2)酸化与提取：在搅拌的情况下，用质量百分浓度为25％盐酸溶液将步骤⑴所得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物的pH调节至3.2，调节温度为55℃，继续搅拌和回流提取1小时，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a1和沉淀b1；向所得沉淀b1中加入质量倍数4倍的乙醇体积百分含量为80％的乙醇水溶液，按照第一次回流提取相同的方法进行第二次回流提取，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a2和沉淀b2；将酸式茶皂素的乙醇提取液a1和酸式茶皂素的乙醇提取液a2混合，得酸式茶皂素的乙醇提取液，备用

(3)钙沉与洗涤：在搅拌的情况下，用氢氧化钙将步骤(2)所得酸式茶皂素的乙醇提取液的pH调节至5.5，调节温度为15℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数3.5倍的乙醇体积百分含量为80％的乙醇水溶液，调节温度为 15℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数3 倍的无水乙醇，调节温度为15℃，搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；将所得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品干燥脱乙醇，得醇洗的茶皂素酸钙沉淀，备用；

(4)酸化、洗涤与干燥：先向步骤⑶所得醇洗的茶皂素酸钙沉淀中加入醇洗的茶皂素酸钙沉淀质量倍数3倍的软化水，调节温度为60℃，搅拌分散，在搅拌的情况下，用盐酸溶液调节混合液的pH为3.2；然后将混合物的温度降至 10℃，并恒温搅拌2小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的上清液，得酸式茶皂素沉淀粗品；向所得酸式茶皂素沉淀粗品中加入质量倍数2.5倍的软化水，搅拌分散，调节混合液的pH为3.2和温度为10℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的洗涤液，得酸式茶皂素沉淀；用真空干燥法在45℃下将所得酸式茶皂素沉淀干燥至水分百分含量≦5％，粉碎、定量包装和密封，即得白色的高纯度的茶皂素产品0.37公斤。

所得的高纯度茶皂素产品，为白色的粉末，得率为0.37/3＝12.3％。采用《中华人民共和国化工行业标准HG/T4492-2013天然非离子表面活性剂茶皂素》中的酸水解-丙酮索氏抽提-恒重法，测定所得茶皂素产品的茶皂素纯度为98.5％, 采用《中华人民共和国国家标准GB/T35131-2017油茶籽饼、粕》中的80％乙醇提取法和《中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1852-2006出口茶皂素中皂甙含量的测定》中的酸碱水解法，测定所用油茶籽粕中的茶皂素含量为 12.72％，经公式提取率＝(产品质量×纯度)/(原料质量×原料茶皂素含量)计算茶皂素的提取率为95.5％。

实施例2

一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，包括如下步骤：

(1)粉碎过筛、浸泡与除铁：先将脱脂茶籽粕用不锈钢粉碎机粉碎并经100 目标准筛过筛，得脱脂茶籽粕粉；然后再将56kg所得脱脂茶籽粕粉加入到392kg 乙醇体积百分含量为90％的乙醇水溶液中，在室温下搅拌浸泡20小时，搅拌浸泡完毕后用除铁器除去充分吸液膨胀后的脱脂茶籽粕粉中的铁屑，得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物,备用；

(2)酸化与提取：在搅拌的情况下，用质量百分浓度为20％盐酸溶液将步骤⑴所得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物的pH调节至3.1，调节温度为70℃，继续搅拌和回流提取1.5小时，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a1和沉淀b1；向所得沉淀b1中加入质量倍数9倍的乙醇体积百分含量为90％的乙醇水溶液，按照第一次回流提取相同的方法进行第二次回流提取，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a2和沉淀b2；将酸式茶皂素的乙醇提取液a1和酸式茶皂素的乙醇提取液a2混合，得酸式茶皂素的乙醇提取液，备用；

(3)钙沉与洗涤：在搅拌的情况下，用氢氧化钙将步骤(2)所得酸式茶皂素的乙醇提取液的pH调节至6.0，调节温度为5℃，继续搅拌1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数5倍的乙醇体积百分含量为90％的乙醇水溶液，调节温度为 5℃，继续搅拌1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数4 倍的无水乙醇，调节温度为5℃，搅拌1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；将所得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品干燥脱乙醇，得醇洗的茶皂素酸钙沉淀，备用；

(4)酸化、洗涤与干燥：先向步骤⑶所得醇洗的茶皂素酸钙沉淀中加入醇洗的茶皂素酸钙沉淀质量倍数1.5倍的软化水，调节温度为70℃，搅拌分散，在搅拌的情况下，用盐酸溶液调节混合液的pH为3.1；然后将混合物的温度降至0℃，并恒温搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的上清液，得酸式茶皂素沉淀粗品；向所得酸式茶皂素沉淀粗品中加入质量倍数1.5倍的软化水，搅拌分散，调节混合液的pH为3.1和温度为0℃，继续搅拌1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的洗涤液，得酸式茶皂素沉淀；用真空干燥法在50℃下将所得酸式茶皂素沉淀干燥至水分百分含量≦5％，粉碎、定量包装和密封，即得白色的高纯度的茶皂素产品7.27公斤。

所得的高纯度茶皂素产品，为白色的粉末，得率为7.27/56＝13.0％。采用《中华人民共和国化工行业标准HG/T4492-2013天然非离子表面活性剂茶皂素》中的酸水解-丙酮索氏抽提-恒重法，测定所得茶皂素产品的茶皂素纯度为99.0％, 采用《中华人民共和国国家标准GB/T35131-2017油茶籽饼、粕》中的80％乙醇提取法和《中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1852-2006出口茶皂素中皂甙含量的测定》中的酸碱水解法，测定所用油茶籽粕中的茶皂素含量为 13.39％，经公式提取率＝(产品质量×纯度)/(原料质量×原料茶皂素含量)计算茶皂素的提取率为96.0％。

实施例3

一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，包括如下步骤：

(1)粉碎过筛、浸泡与除铁：先将脱脂茶籽粕用不锈钢粉碎机粉碎并经40 目标准筛过筛，得脱脂茶籽粕粉；然后再将75kg所得脱脂茶籽粕粉加入到225kg 乙醇体积百分含量为70％的乙醇水溶液中，在室温下搅拌浸泡2小时，搅拌浸泡完毕后用除铁器除去充分吸液膨胀后的脱脂茶籽粕粉中的铁屑，得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物,备用；

(2)酸化与提取：在搅拌的情况下，用质量百分浓度为25％盐酸溶液将步骤⑴所得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物的pH调节至3.3，调节温度为40℃，继续搅拌和回流提取0.5小时，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a1和沉淀b1；向所得沉淀b1中加入质量倍数2倍的乙醇体积百分含量为70％的乙醇水溶液，按照第一次回流提取相同的方法进行第二次回流提取，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a2和沉淀b2；将酸式茶皂素的乙醇提取液a1和酸式茶皂素的乙醇提取液a2混合，得酸式茶皂素的乙醇提取液，备用；

(3)钙沉与洗涤：在搅拌的情况下，用氢氧化钙将步骤(2)所得酸式茶皂素的乙醇提取液的pH调节至5.5，调节温度为25℃，继续搅拌0.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数2倍的乙醇体积百分含量为70％的乙醇水溶液，调节温度为 25℃，继续搅拌0.51小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数 2倍的无水乙醇，调节温度为25℃，搅拌0.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；将所得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品干燥脱乙醇，得醇洗的茶皂素酸钙沉淀，备用；

(4)酸化、洗涤与干燥：先向步骤⑶所得醇洗的茶皂素酸钙沉淀中加入醇洗的茶皂素酸钙沉淀质量倍数4.5倍的软化水，调节温度为50℃，搅拌分散，在搅拌的情况下，用盐酸溶液调节混合液的pH为3.3；然后将混合物的温度降至20℃，并恒温搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的上清液，得酸式茶皂素沉淀粗品；向所得酸式茶皂素沉淀粗品中加入质量倍数3.5倍的软化水，搅拌分散，调节混合液的pH为3.3和温度为20℃，继续搅拌0.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的洗涤液，得酸式茶皂素沉淀；用热风干燥法在55℃下将所得酸式茶皂素沉淀干燥至水分百分含量≦5％，粉碎、定量包装和密封，即得淡黄色的高纯度的茶皂素产品8.95公斤。

所得的高纯度茶皂素产品，为白色的粉末，得率为8.95/75＝12.0％。采用《中华人民共和国化工行业标准HG/T4492-2013天然非离子表面活性剂茶皂素》中的酸水解-丙酮索氏抽提-恒重法，测定所得茶皂素产品的茶皂素纯度为98.0％, 采用《中华人民共和国国家标准GB/T35131-2017油茶籽饼、粕》中的80％乙醇提取法和《中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1852-2006出口茶皂素中皂甙含量的测定》中的酸碱水解法，测定所用油茶籽粕中的茶皂素含量为 12.31％，经公式提取率＝(产品质量×纯度)/(原料质量×原料茶皂素含量)计算茶皂素的提取率为95.0％。

实施例4

一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，包括如下步骤：

(1)粉碎过筛、浸泡与除铁：先将脱脂茶籽粕用不锈钢粉碎机粉碎并经80 目标准筛过筛，得脱脂茶籽粕粉；然后再将150kg所得脱脂茶籽粕粉加入到 2250kg乙醇体积百分含量为85％的乙醇水溶液中，在室温下搅拌浸泡2小时，搅拌浸泡完毕后用除铁器除去充分吸液膨胀后的脱脂茶籽粕粉中的铁屑，得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物,备用；

(2)酸化与提取：在搅拌的情况下，用质量百分浓度为30％盐酸溶液将步骤⑴所得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物的pH调节至3.2，调节温度为60℃，继续搅拌和回流提取12.5小时，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a1和沉淀b1；向所得沉淀b1中加入质量倍数4.5倍的乙醇体积百分含量为85％的乙醇水溶液，按照第一次回流提取相同的方法进行第二次回流提取，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a2和沉淀b2；将酸式茶皂素的乙醇提取液a1和酸式茶皂素的乙醇提取液a2混合，得酸式茶皂素的乙醇提取液，备用；

(3)钙沉与洗涤：在搅拌的情况下，用氢氧化钙将步骤(2)所得酸式茶皂素的乙醇提取液的pH调节至5.6，调节温度为10℃，继续搅拌1.25小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数4倍的乙醇体积百分含量为85％的乙醇水溶液，调节温度为 10℃，继续搅拌1.25小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数 3.5倍的无水乙醇，调节温度为10℃，搅拌1.25小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；将所得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品干燥脱乙醇，得醇洗的茶皂素酸钙沉淀，备用；

(4)酸化、洗涤与干燥：先向步骤⑶所得醇洗的茶皂素酸钙沉淀中加入醇洗的茶皂素酸钙沉淀质量倍数2倍的软化水，调节温度为65℃，搅拌分散，在搅拌的情况下，用盐酸溶液调节混合液的pH为3.2；然后将混合物的温度降至 5℃，并恒温搅拌2.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的上清液，得酸式茶皂素沉淀粗品；向所得酸式茶皂素沉淀粗品中加入质量倍数3倍的软化水，搅拌分散，调节混合液的pH为3.2和温度为5℃，继续搅拌1.25小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的洗涤液，得酸式茶皂素沉淀；用热风干燥法在55℃下将所得酸式茶皂素沉淀干燥至水分百分含量≦5％，粉碎、定量包装和密封，即得淡黄色的高纯度的茶皂素产品19.1公斤。

所得的高纯度茶皂素产品，为白色的粉末，得率为19.1/150＝12.7％。采用《中华人民共和国化工行业标准HG/T4492-2013天然非离子表面活性剂茶皂素》中的酸水解-丙酮索氏抽提-恒重法，测定所得茶皂素产品的茶皂素纯度为 98.9％,采用《中华人民共和国国家标准GB/T35131-2017油茶籽饼、粕》中的 80％乙醇提取法和《中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1852-2006出口茶皂素中皂甙含量的测定》中的酸碱水解法，测定所用油茶籽粕中的茶皂素含量为13.15％，经公式提取率＝(产品质量×纯度)/(原料质量×原料茶皂素含量)计算茶皂素的提取率为95.8％。

实施例5

一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，包括如下步骤：

(1)粉碎过筛、浸泡与除铁：先将脱脂茶籽粕用不锈钢粉碎机粉碎并经40 目标准筛过筛，得脱脂茶籽粕粉；然后再将125kg所得脱脂茶籽粕粉加入到 437.5kg乙醇体积百分含量为75％的乙醇水溶液中，在室温下搅拌浸泡5小时，搅拌浸泡完毕后用除铁器除去充分吸液膨胀后的脱脂茶籽粕粉中的铁屑，得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物,备用；

(2)酸化与提取：在搅拌的情况下，用质量百分浓度为20％盐酸溶液将步骤⑴所得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物的pH调节至3.2，调节温度为45℃，继续搅拌和回流提取1小时，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a1和沉淀b1；向所得沉淀b1中加入质量倍数2.5倍的乙醇体积百分含量为75％的乙醇水溶液，按照第一次回流提取相同的方法进行第二次回流提取，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a2和沉淀b2；将酸式茶皂素的乙醇提取液a1和酸式茶皂素的乙醇提取液a2混合，得酸式茶皂素的乙醇提取液，备用；

(3)钙沉与洗涤：在搅拌的情况下，用氢氧化钙将步骤(2)所得酸式茶皂素的乙醇提取液的pH调节至5.1，调节温度为20℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数2.5倍的乙醇体积百分含量为75％的乙醇水溶液，调节温度为 20℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数2.5 倍的无水乙醇，调节温度为20℃，搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；将所得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品干燥脱乙醇，得醇洗的茶皂素酸钙沉淀，备用；

(4)酸化、洗涤与干燥：先向步骤⑶所得醇洗的茶皂素酸钙沉淀中加入醇洗的茶皂素酸钙沉淀质量倍数4倍的软化水，调节温度为60℃，搅拌分散，在搅拌的情况下，用盐酸溶液调节混合液的pH为3.2；然后将混合物的温度降至 15℃，并恒温搅拌1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的上清液，得酸式茶皂素沉淀粗品；向所得酸式茶皂素沉淀粗品中加入质量倍数3倍的软化水，搅拌分散，调节混合液的pH为3.2和温度为15℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的洗涤液，得酸式茶皂素沉淀；用真空干燥法在60℃下将所得酸式茶皂素沉淀干燥至水分百分含量≦5％，粉碎、定量包装和密封，即得白色的高纯度的茶皂素产品15.1公斤。

所得的高纯度茶皂素产品，为白色的粉末，得率为15.1/125＝12.1％。采用《中华人民共和国化工行业标准HG/T4492-2013天然非离子表面活性剂茶皂素》中的酸水解-丙酮索氏抽提-恒重法，测定所得茶皂素产品的茶皂素纯度为 98.2％,采用《中华人民共和国国家标准GB/T35131-2017油茶籽饼、粕》中的 80％乙醇提取法和《中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1852-2006出口茶皂素中皂甙含量的测定》中的酸碱水解法，测定所用油茶籽粕中的茶皂素含量为12.45％，经公式提取率＝(产品质量×纯度)/(原料质量×原料茶皂素含量)计算茶皂素的提取率为95.3％。

实施例6

一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，包括如下步骤：

(1)粉碎过筛、浸泡与除铁：先将脱脂茶籽粕用不锈钢粉碎机粉碎并经100 目标准筛过筛，得脱脂茶籽粕粉；然后再将250kg所得脱脂茶籽粕粉加入到 1500kg乙醇体积百分含量为87.5％的乙醇水溶液中，在室温下搅拌浸泡15小时，搅拌浸泡完毕后用除铁器除去充分吸液膨胀后的脱脂茶籽粕粉中的铁屑，得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物,备用；

(2)酸化与提取：在搅拌的情况下，用质量百分浓度为25％盐酸溶液将步骤⑴所得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物的pH调节至3.1，调节温度为65℃，继续搅拌和回流提取1小时，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a1和沉淀b1；向所得沉淀b1中加入质量倍数5倍的乙醇体积百分含量为87.5％的乙醇水溶液，按照第一次回流提取相同的方法进行第二次回流提取，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a2和沉淀b2；将酸式茶皂素的乙醇提取液a1和酸式茶皂素的乙醇提取液a2混合，得酸式茶皂素的乙醇提取液，备用；

(3)钙沉与洗涤：在搅拌的情况下，用氢氧化钙将步骤(2)所得酸式茶皂素的乙醇提取液的pH调节至5.7，调节温度为12.5℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数4倍的乙醇体积百分含量为87.5％的乙醇水溶液，调节温度为12.5℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数3倍的无水乙醇，调节温度为12.5℃，搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；将所得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品干燥脱乙醇，得醇洗的茶皂素酸钙沉淀，备用；

(4)酸化、洗涤与干燥：先向步骤⑶所得醇洗的茶皂素酸钙沉淀中加入醇洗的茶皂素酸钙沉淀质量倍数2.5倍的软化水，调节温度为55℃，搅拌分散，在搅拌的情况下，用盐酸溶液调节混合液的pH为3.1；然后将混合物的温度降至7.5℃，并恒温搅拌2小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的上清液，得酸式茶皂素沉淀粗品；向所得酸式茶皂素沉淀粗品中加入质量倍数2.5倍的软化水，搅拌分散，调节混合液的pH为3.1和温度为7.5℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的洗涤液，得酸式茶皂素沉淀；用真空干燥法在60℃下将所得酸式茶皂素沉淀干燥至水分百分含量≦5％，粉碎、定量包装和密封，即得白色的高纯度的茶皂素产品31.65公斤。

所得的高纯度茶皂素产品，为白色的粉末，得率为31.65/250＝12.7％。采用《中华人民共和国化工行业标准HG/T4492-2013天然非离子表面活性剂茶皂素》中的酸水解-丙酮索氏抽提-恒重法，测定所得茶皂素产品的茶皂素纯度为 998.7％,采用《中华人民共和国国家标准GB/T35131-2017油茶籽饼、粕》中的 80％乙醇提取法和《中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1852-2006出口茶皂素中皂甙含量的测定》中的酸碱水解法，测定所用油茶籽粕中的茶皂素含量为13.04％，经公式提取率＝(产品质量×纯度)/(原料质量×原料茶皂素含量)计算茶皂素的提取率为95.8％。

实施例7

一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，包括如下步骤：

(1)粉碎过筛、浸泡与除铁：先将脱脂茶籽粕用不锈钢粉碎机粉碎并经40 目标准筛过筛，得脱脂茶籽粕粉；然后再将180kg所得脱脂茶籽粕粉加入到720kg 乙醇体积百分含量为70％的乙醇水溶液中，在室温下搅拌浸泡7小时，搅拌浸泡完毕后用除铁器除去充分吸液膨胀后的脱脂茶籽粕粉中的铁屑，得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物,备用；

(2)酸化与提取：在搅拌的情况下，用质量百分浓度为25％盐酸溶液将步骤⑴所得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物的pH调节至3.3，调节温度为50℃，继续搅拌和回流提取0.5小时，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a1和沉淀b1；向所得沉淀b1中加入质量倍数3倍的乙醇体积百分含量为70％的乙醇水溶液，按照第一次回流提取相同的方法进行第二次回流提取，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a2和沉淀b2；将酸式茶皂素的乙醇提取液a1和酸式茶皂素的乙醇提取液a2混合，得酸式茶皂素的乙醇提取液，备用；

(3)钙沉与洗涤：在搅拌的情况下，用氢氧化钙将步骤(2)所得酸式茶皂素的乙醇提取液的pH调节至5.2，调节温度为25℃，继续搅拌0.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数3倍的乙醇体积百分含量为70％的乙醇水溶液，调节温度为 25℃，继续搅拌0.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数2 倍的无水乙醇，调节温度为25℃，搅拌0.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；将所得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品干燥脱乙醇，得醇洗的茶皂素酸钙沉淀，备用；

(4)酸化、洗涤与干燥：先向步骤⑶所得醇洗的茶皂素酸钙沉淀中加入醇洗的茶皂素酸钙沉淀质量倍数2.5倍的软化水，调节温度为60℃，搅拌分散，在搅拌的情况下，用盐酸溶液调节混合液的pH为3.3；然后将混合物的温度降至20℃，并恒温搅拌0.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的上清液，得酸式茶皂素沉淀粗品；向所得酸式茶皂素沉淀粗品中加入质量倍数1.5 倍的软化水，搅拌分散，调节混合液的pH为3.3和温度为20℃，继续搅拌0.5 小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的洗涤液，得酸式茶皂素沉淀；用真空干燥法在50℃下将所得酸式茶皂素沉淀干燥至水分百分含量≦5％，粉碎、定量包装和密封，即得白色的高纯度的茶皂素产品21.89公斤。

所得的高纯度茶皂素产品，为白色的粉末，得率为21.89/180＝12.2％。采用《中华人民共和国化工行业标准HG/T4492-2013天然非离子表面活性剂茶皂素》中的酸水解-丙酮索氏抽提-恒重法，测定所得茶皂素产品的茶皂素纯度为 98.3％,采用《中华人民共和国国家标准GB/T35131-2017油茶籽饼、粕》中的 80％乙醇提取法和《中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1852-2006出口茶皂素中皂甙含量的测定》中的酸碱水解法，测定所用油茶籽粕中的茶皂素含量为12.53％，经公式提取率＝(产品质量×纯度)/(原料质量×原料茶皂素含量)计算茶皂素的提取率为95.4％。

实施例8

一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，包括如下步骤：

(1)粉碎过筛、浸泡与除铁：先将脱脂茶籽粕用不锈钢粉碎机粉碎并经80 目标准筛过筛，得脱脂茶籽粕粉；然后再将400kg所得脱脂茶籽粕粉加入到 2200kg乙醇体积百分含量为85％的乙醇水溶液中，在室温下搅拌浸泡17小时，搅拌浸泡完毕后用除铁器除去充分吸液膨胀后的脱脂茶籽粕粉中的铁屑，得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物,备用；

(2)酸化与提取：在搅拌的情况下，用质量百分浓度为20％盐酸溶液将步骤⑴所得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物的pH调节至3.3，调节温度为55℃，继续搅拌和回流提取1.5小时，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a1和沉淀b1；向所得沉淀b1中加入质量倍数5.5倍的乙醇体积百分含量为85％的乙醇水溶液，按照第一次回流提取相同的方法进行第二次回流提取，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a2和沉淀b2；将酸式茶皂素的乙醇提取液a1和酸式茶皂素的乙醇提取液a2混合，得酸式茶皂素的乙醇提取液，备用；

(3)钙沉与洗涤：在搅拌的情况下，用氢氧化钙将步骤(2)所得酸式茶皂素的乙醇提取液的pH调节至5.8，调节温度为5℃，继续搅拌1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数5倍的乙醇体积百分含量为85％的乙醇水溶液，调节温度为 5℃，继续搅拌1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数4 倍的无水乙醇，调节温度为5℃，搅拌1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；将所得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品干燥脱乙醇，得醇洗的茶皂素酸钙沉淀，备用；

(4)酸化、洗涤与干燥：先向步骤⑶所得醇洗的茶皂素酸钙沉淀中加入醇洗的茶皂素酸钙沉淀质量倍数4.5倍的软化水，调节温度为50℃，搅拌分散，在搅拌的情况下，用盐酸溶液调节混合液的pH为3.3；然后将混合物的温度降至0℃，并恒温搅拌3小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的上清液，得酸式茶皂素沉淀粗品；向所得酸式茶皂素沉淀粗品中加入质量倍数3.5倍的软化水，搅拌分散，调节混合液的pH为3.3和温度为0℃，继续搅拌1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的洗涤液，得酸式茶皂素沉淀；用真空干燥法在50℃下将所得酸式茶皂素沉淀干燥至水分百分含量≦5％，粉碎、定量包装和密封，即得白色的高纯度的茶皂素产品49.9公斤。

所得的高纯度茶皂素产品，为白色的粉末，得率为49.9/400＝12.5％。采用《中华人民共和国化工行业标准HG/T4492-2013天然非离子表面活性剂茶皂素》中的酸水解-丙酮索氏抽提-恒重法，测定所得茶皂素产品的茶皂素纯度为 98.9％,采用《中华人民共和国国家标准GB/T35131-2017油茶籽饼、粕》中的 80％乙醇提取法和《中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1852-2006出口茶皂素中皂甙含量的测定》中的酸碱水解法，测定所用油茶籽粕中的茶皂素含量为12.96％，经公式提取率＝(产品质量×纯度)/(原料质量×原料茶皂素含量)计算茶皂素的提取率为95.2％。

实施例9

一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，包括如下步骤：

(1)粉碎过筛、浸泡与除铁：先将脱脂茶籽粕用不锈钢粉碎机粉碎并经40 目标准筛过筛，得脱脂茶籽粕粉；然后再将35kg所得脱脂茶籽粕粉加入到 157.5kg乙醇体积百分含量为75％的乙醇水溶液中，在室温下搅拌浸泡9小时，搅拌浸泡完毕后用除铁器除去充分吸液膨胀后的脱脂茶籽粕粉中的铁屑，得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物,备用；

(2)酸化与提取：在搅拌的情况下，用质量百分浓度为25％盐酸溶液将步骤⑴所得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物的pH调节至3.2，调节温度为55℃，继续搅拌和回流提取1小时，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a1和沉淀b1；向所得沉淀b1中加入质量倍数4倍的乙醇体积百分含量为75％的乙醇水溶液，按照第一次回流提取相同的方法进行第二次回流提取，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a2和沉淀b2；将酸式茶皂素的乙醇提取液a1和酸式茶皂素的乙醇提取液a2混合，得酸式茶皂素的乙醇提取液，备用；

(3)钙沉与洗涤：在搅拌的情况下，用氢氧化钙将步骤(2)所得酸式茶皂素的乙醇提取液的pH调节至5.4，调节温度为15℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数3.5倍的乙醇体积百分含量为75％的乙醇水溶液，调节温度为 15℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数4 倍的无水乙醇，调节温度为15℃，搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；将所得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品干燥脱乙醇，得醇洗的茶皂素酸钙沉淀，备用；

(4)酸化、洗涤与干燥：先向步骤⑶所得醇洗的茶皂素酸钙沉淀中加入醇洗的茶皂素酸钙沉淀质量倍数3倍的软化水，调节温度为60℃，搅拌分散，在搅拌的情况下，用盐酸溶液调节混合液的pH为3.2；然后将混合物的温度降至 15℃，并恒温搅拌2小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的上清液，得酸式茶皂素沉淀粗品；向所得酸式茶皂素沉淀粗品中加入质量倍数2.5倍的软化水，搅拌分散，调节混合液的pH为3.2和温度为15℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的洗涤液，得酸式茶皂素沉淀；用真空干燥法在50℃下将所得酸式茶皂素沉淀干燥至水分百分含量≦5％，粉碎、定量包装和密封，即得白色的高纯度的茶皂素产品4.44公斤。

所得的高纯度茶皂素产品，为白色的粉末，得率为4.44/35＝12.7％。采用《中华人民共和国化工行业标准HG/T4492-2013天然非离子表面活性剂茶皂素》中的酸水解-丙酮索氏抽提-恒重法，测定所得茶皂素产品的茶皂素纯度为98.5％, 采用《中华人民共和国国家标准GB/T35131-2017油茶籽饼、粕》中的80％乙醇提取法和《中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1852-2006出口茶皂素中皂甙含量的测定》中的酸碱水解法，测定所用油茶籽粕中的茶皂素含量为 13.11％，经公式提取率＝(产品质量×纯度)/(原料质量×原料茶皂素含量)计算茶皂素的提取率为95.3％。

实施例10

一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，包括如下步骤：

(1)粉碎过筛、浸泡与除铁：先将脱脂茶籽粕用不锈钢粉碎机粉碎并经100 目标准筛过筛，得脱脂茶籽粕粉；然后再将50kg所得脱脂茶籽粕粉加入到300kg 乙醇体积百分含量为80％的乙醇水溶液中，在室温下搅拌浸泡16小时，搅拌浸泡完毕后用除铁器除去充分吸液膨胀后的脱脂茶籽粕粉中的铁屑，得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物,备用；

(2)酸化与提取：在搅拌的情况下，用质量百分浓度为30％盐酸溶液将步骤⑴所得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物的pH调节至3.1，调节温度为60℃，继续搅拌和回流提取1小时，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a1和沉淀b1；向所得沉淀b1中加入质量倍数6倍的乙醇体积百分含量为80％的乙醇水溶液，按照第一次回流提取相同的方法进行第二次回流提取，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a2和沉淀b2；将酸式茶皂素的乙醇提取液a1和酸式茶皂素的乙醇提取液a2混合，得酸式茶皂素的乙醇提取液，备用；

(3)钙沉与洗涤：在搅拌的情况下，用氢氧化钙将步骤(2)所得酸式茶皂素的乙醇提取液的pH调节至5.9，调节温度为10℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数4.5倍的乙醇体积百分含量为80％的乙醇水溶液，调节温度为 10℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入质量倍数3.5 倍的无水乙醇，调节温度为10℃，搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；将所得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品干燥脱乙醇，得醇洗的茶皂素酸钙沉淀，备用；

(4)酸化、洗涤与干燥：先向步骤⑶所得醇洗的茶皂素酸钙沉淀中加入醇洗的茶皂素酸钙沉淀质量倍数3.5倍的软化水，调节温度为65℃，搅拌分散，在搅拌的情况下，用盐酸溶液调节混合液的pH为3.1；然后将混合物的温度降至5℃，并恒温搅拌2.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的上清液，得酸式茶皂素沉淀粗品；向所得酸式茶皂素沉淀粗品中加入质量倍数3倍的软化水，搅拌分散，调节混合液的pH为3.1和温度为5℃，继续搅拌1小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的洗涤液，得酸式茶皂素沉淀；用真空干燥法在50℃下将所得酸式茶皂素沉淀干燥至水分百分含量≦5％，粉碎、定量包装和密封，即得白色的高纯度的茶皂素产品6.29公斤。

所得的高纯度茶皂素产品，为白色的粉末，得率为6.29/50＝12.6％。采用《中华人民共和国化工行业标准HG/T4492-2013天然非离子表面活性剂茶皂素》中的酸水解-丙酮索氏抽提-恒重法，测定所得茶皂素产品的茶皂素纯度为98.8％, 采用《中华人民共和国国家标准GB/T35131-2017油茶籽饼、粕》中的80％乙醇提取法和《中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1852-2006出口茶皂素中皂甙含量的测定》中的酸碱水解法，测定所用油茶籽粕中的茶皂素含量为 13.01％，经公式提取率＝(产品质量×纯度)/(原料质量×原料茶皂素含量)计算茶皂素的提取率为95.6％。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (7)

1.一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)粉碎过筛、浸泡与除铁：先将脱脂茶籽粕用不锈钢粉碎机粉碎并经40～100目标准筛过筛，得脱脂茶籽粕粉；然后再将所得脱脂茶籽粕粉加入到乙醇水溶液中，在室温下搅拌浸泡，搅拌浸泡完毕后用除铁器除去充分吸液膨胀后的脱脂茶籽粕粉中的铁屑，得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物,备用；

(2)酸化与提取：在搅拌的情况下，先用盐酸溶液将步骤⑴所得除铁屑后的脱脂茶籽粕粉的乙醇浸泡混合物的pH调节至3.1～3.3，然后继续搅拌并进行回流提取，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a1和沉淀b1；向所得沉淀b1中加入乙醇水溶液，按照第一次回流提取相同的方法进行第二次回流提取，提取完毕后离心分离，得酸式茶皂素的乙醇提取液a2和沉淀b2；将酸式茶皂素的乙醇提取液a1和酸式茶皂素的乙醇提取液a2混合，得酸式茶皂素的乙醇提取液，备用；

(3)钙沉与洗涤：在搅拌的情况下，用氢氧化钙将步骤(2)所得酸式茶皂素的乙醇提取液的pH调节至5.0～6.0，调节温度为5～25℃，继续搅拌0.5～1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入乙醇水溶液，调节温度为5～25℃，搅拌0.5～1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；向所得第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品中加入无水乙醇，调节温度为5～25℃，搅拌0.5～1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃上清液，得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品；将所得第二次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品干燥脱乙醇，得醇洗的茶皂素酸钙沉淀，备用；

(4)酸化、洗涤与干燥：先向步骤⑶所得醇洗的茶皂素酸钙沉淀中加入软化水，调节温度为50～70℃，搅拌分散，在搅拌的情况下，用盐酸溶液调节混合液的pH为3.1～3.3；然后将混合物的温度降至0～20℃，并恒温搅拌1.0～3.0小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的上清液，得酸式茶皂素沉淀粗品；向所得酸式茶皂素沉淀粗品中加入软化水，搅拌分散，调节混合液的pH为3.1～3.3和温度为0～20℃，继续搅拌0.5～1.5小时，搅拌完毕后离心分离，弃含水溶性杂质的洗涤液，得酸式茶皂素沉淀；用干燥法在60℃以下将所得酸式茶皂素沉淀干燥至水分百分含量≦5％，粉碎、定量包装和密封，即得白色～淡黄色的高纯度的茶皂素产品；

其中，步骤(1)中所述脱脂茶籽粕粉与乙醇水溶液的质量比为1:3-7，搅拌浸泡的时间为2～20小时；

其中，步骤⑵中所述回流提取的温度为40～70℃，提取的时间为0.5～1.5小时；所述沉淀b1与乙醇水溶液的质量比为1:2-6；

其中，所述乙醇水溶液中乙醇的体积百分含量为70～90％。

2.根据权利要求1所述的一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，其特征在于：步骤⑴中所述脱脂茶籽粕为油茶籽经压榨法压榨提取茶籽油后得到的压榨茶籽粕，再经浸出法脱除压榨茶籽粕中的残油后所得的油脂含量≤1.0％的茶籽粕；所述乙醇为工业级、食品级、化学纯或分析纯的乙醇；所述除铁器为食品工业或化学工业用的除铁器。

3.根据权利要求1所述的一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，其特征在于：步骤⑵中所述盐酸为工业级、化学纯或分析纯的盐酸；所述乙醇为工业级或食品级、化学纯或分析纯的乙醇。

4.根据权利要求1所述的一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，其特征在于：步骤⑶中所述的氢氧化钙为工业级、化学纯或分析纯的氢氧化钙；所述乙醇为工业级或食品级、化学纯或分析纯的乙醇。

5.根据权利要求1所述的一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，其特征在于：步骤⑶中所述茶皂素酸钙沉淀粗品与乙醇水溶液的质量比为1:2-5；所述第一次醇洗的茶皂素酸钙沉淀粗品与无水乙醇的质量比为1：2～4。

6.根据权利要求1所述的一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，其特征在于：步骤⑷中所述的盐酸为工业级、化学纯或分析纯的盐酸；所述的干燥法为真空干燥法或常压热风干燥法。

7.根据权利要求1所述的一种醇法制备高纯度茶皂素的制备方法，其特征在于：步骤⑷中醇洗的茶皂素酸钙沉淀与软化水的质量比为1:1.5-4.5；所述酸式茶皂素沉淀粗品与软化水的质量比为1：1.5～3.5。

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