CN113229427A - 一种适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品及其制备方法，其原料包括复合水解肽5‑10wt％、甜味剂2‑5wt％、食用香精0.2‑0.5wt％、环状糊精0.5‑1wt％、抗氧化剂0.5‑0.8wt％、乳化剂0.1‑0.6wt％，其余为水；其中复合水解肽是将蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵，以及乌龟肉或甲鱼肉按照特定的比例，采用特殊的水解方法制备而成。最终制备的复合水解肽功能饮品非常适合肿瘤患者或癌症康复人群的饮用，四种其主要功能性作用的氨基酸的配比更合理，除了能够提供更均衡更利于吸收的蛋白质营养以外，对肿瘤产生和生长具有一定程度的预防和抑制作用。
Description
技术领域
本发明属于功能饮品领域，特别是适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品。
背景技术
癌症是一种生活方式疾病。其中约有30％肿瘤疾病可归因于不良饮食和营养。而近70％的恶性肿瘤病人在病情的发展过程中常常发生程度不等的营养不良，甚至出现恶液质。营养不良又常导致人体各系统器官的功能减退，包括免疫功能的减退。并且由于多数肿瘤患者在接受手术、放疗和化疗后受到副作用的影响，患者对营养成分接受能力降低，机体有效吸收能力差减弱。
蛋白水解肽是指由3～7个氨基酸残基所组成的混合小肽(寡肽)体系，分子量在1000-200之间。蛋白水解肽是利用蛋白酶水解某种蛋白质原料制备而成，具有易于消化吸收，具有活性和多样及独特的生物学功能的小分子蛋白肽。蛋白肽是补充优质蛋白营养、提高免疫力、增强体质、强力抗辐射的有力武器，是免疫力低下的癌症(肿瘤)放化疗患者可以经常服用的营养补充品和辅助抗肿瘤保健食品。
现有技术中，中国授权专利CN103535825A提供了一种利用酶解提取扇贝糖蛋白制备的肿瘤术后保健饮品，这种饮品是在在中药提取液中加入扇贝糖蛋白I(GCFⅠ)、扇贝糖蛋白II(GCFⅡ)及砂糖制成。扇贝糖蛋白I是用鲜栉孔扇贝煮沸粗提，过滤取滤液冷冻干燥后，注入透析袋中透析，透析液再通过DEAE-纤维素柱分离，收集洗脱液浓缩后，再通过Sephadex G-100柱层析纯化制备而成。扇贝糖蛋白II是将GCFⅠ溶于水，37℃水浴混合酶解10h，80℃加热除蛋白，滤液用95％乙醇沉淀，收集沉淀冷冻干燥制得。
又例如中国专利申请CN108013315A提供了一种花青素与骨胶原蛋白肽的固体饮料，采用紫薯花青素或黑米花青素、骨胶原蛋白肽为主要原料，还加入食用香精、牛磺酸、维生素C、木糖醇、蜂蜜粉，称量、混合、包装得到。
又例如中国专利申请CN105614610A提供了一种酶解羊乳酪蛋白制备抗氧化肽饮料的方法，将脱脂羊乳磁力搅拌分离干燥得到酪蛋白干粉，然后配置成酪蛋白干溶液，并先后加入蛋白酶和环状糊精，最后加入糖、混合酸和稳定剂制备成抗氧化肽饮料。
又例如中国授权专利CN104068123A提供的乳白蛋白和油酸复合物抗肿瘤的保健饮料，将乳白蛋白和油酸制成复合物冻干粉，再加入奶粉或鲜奶、水、蔗糖和食品添加剂混匀，均质、灌装，杀菌制成饮料成品。
又例如中国授权专利CN104041901A提供的牡丹肽饮料，将牡丹肽溶液、牡丹籽壳提取液、牡丹花露、牡丹花提取液、甜味剂、乳化剂和水混合、均质、过筛制备而成。牡丹肽溶液是利用牡丹籽仁加水研磨制成牡丹籽浆液，再加入混合蛋白酶水解制备而成。
然而，上述这些专利的饮料，虽然具有一定的抗肿瘤或抑制肿瘤细胞活性的效果，但是由于上述这些蛋白水解肽的氨基酸组成比例问题，并不能起到较好的辅助抗肿瘤效果。
发明内容
针对以上现有技术的不足，本发明提供了一种适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，具体通过以下技术实现。
一种适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其特征在于，其原料包括复合水解肽5-10wt％、甜味剂2-5wt％、食用香精0.2-0.5wt％、环状糊精0.5-1wt％、抗氧化剂0.5-0.8wt％、乳化剂0.1-0.6wt％，其余为水；
所述复合水解肽的制备方法为：
S1、按重量比取5:3-8:3-8:2-4:1-3蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵，以及乌龟肉或甲鱼肉，再加入6-8倍的纯净水，搅拌均匀，调节pH值为6.5-7.0，加入中性蛋白酶在45-50℃下酶解，经灭酶处理后得到初级酶解液；
S2、取初级酶解液调节pH值为7.5-8.0，加入羧肽酶在45-50℃下酶解，经灭酶处理后得到次级酶解液；
S3、采用超滤法过滤去除次级酶解液中的酶，冷冻干燥得到粉末状复合水解肽成品。
本发明采用特殊的复合水解肽为原料，复合水解肽是采用蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵，还含有乌龟肉或甲鱼肉，即同时使用蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵、乌龟肉，或同时使用蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵、甲鱼肉，将五种蛋白质原料按照特定的比例混匀，再使用中性蛋白酶和羧肽酶水解后制备而成。蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵、乌龟肉和甲鱼肉可以采用新鲜的肉糜或蛋清，也可以选用预先干燥粉碎制备成的肉粉或蛋清粉，或者新鲜肉糜和肉粉混合使用。采用上述方法制备的复合水解肽经过检测，除含人体必需的氨基酸以外，更重要是精氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、缬氨酸的含量比例基本维持在1.16-2.65:4.45-5.66:3.80-4.15:5.20-5.80。含有上述比例的四种氨基酸制备成功能饮品，除了提供更均衡的蛋白类营养成，能够帮助肿瘤患者一定程度预防和抑制肿瘤的产生和生长。当蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵、乌龟肉(甲鱼肉)这五种蛋白质原料中缺少任意一种时，都会影响精氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、缬氨酸的含量比例，尤其是不使用还行和海胆卵时，对效果会有更明显的影响。当缺少中性蛋白酶和羧肽酶水解的先后顺序时，会对最终的复合水解肽中的精氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、缬氨酸含量比例会产生明显变化，虽然也会一定程度抑制预防肿瘤，但效果大打折扣。
上述复合水解肽功能饮品中，环状糊精可以选用α、β或γ-环状糊精，抗氧化剂可以选用维生素E、抗坏血酸(维生素C)；甜味剂可以选用常规的白糖等糖类以外，还可以使用木糖醇、赤藓糖醇、安赛蜜等甜味剂；乳化剂可以选用常见的食品用的乳化剂，例如蔗糖脂肪酸酯、山梨聚糖脂肪酸酯以及聚甘油脂肪酸酯等。
优选地，其原料包括复合水解肽9.5wt％、甜味剂4.0wt％、食用香精0.4wt％、环状糊精0.8wt％、抗氧化剂0.6wt％、乳化剂0.5wt％，其余为水。
优选地，步骤S1中，蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵，以及乌龟肉或甲鱼肉这五者的重量比为5:5:5:3:2。采用上述重量比并最终配制的复合水解肽，精氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、缬氨酸的含量比例约为1.22-1.42:5.30-5.44:3.89-4.03:5.68-5.77，具体比例随制备条件差异有细微波动；其中谷氨酰胺和缬氨酸含量相对较高，氨基酸类营养的组成更均衡，预防和抑制肿瘤效果相对更明显，且复合水解肽饮品更有利于肿瘤患者吸收利。
优选地，步骤S1的中性蛋白酶的加酶量为1800-2100u/g，酶解时间2-4h。
优选地，步骤S2的羧肽酶的加酶量为2500-3000u/g，酶解时间3-5h。
优选地，所述食用香精为植物精油。植物精油为市面上常见的精油品种，例如橘子精油、玫瑰精油等。
本发明还提供了上述适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品的制备方法，先将环状糊精加至水中搅拌均匀，然后加入复合水解肽，均质；然后加入抗氧化剂、乳化剂、甜味剂、食用香精，搅拌均匀，即得复合水解肽功能饮品。
与现有技术相比，本发明的有益之处在于：本发明提供的复合水解肽饮品中，四种其主要功能性作用的氨基酸的配比更合理，除了能够提供更均衡更利于吸收的蛋白质营养以外，对肿瘤产生和生长具有一定程度的预防和抑制作用。
具体实施方式
下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动条件下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
以下实施例和对比例，采用的环状糊精为β-环状糊精，甜味剂选用赤藓糖醇，乳化剂选用蔗糖硬脂酸酯。采用的蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵、乌龟肉、甲鱼肉均为市场采购的成品蛋清粉或肉粉。
以下实施例和对比例制备的复合水解肽功能饮品，其制备方法为：先将环状糊精加至水中搅拌均匀，然后加入复合水解肽，均质；然后加入抗氧化剂、乳化剂、甜味剂、食用香精，搅拌均匀，即得复合水解肽功能饮品。
实施例1
本实施例提供的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其原料包括复合水解肽9.5wt％、甜味剂4.0wt％、食用香精0.4wt％、环状糊精0.8wt％、抗氧化剂0.6wt％、乳化剂0.5wt％，其余为水；
所述复合水解肽的制备方法为：
S1、按重量比取5:5:5:3:2蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵、乌龟肉，再加入8倍的纯净水，搅拌均匀，调节pH值为6.5-7.0，加入约2000u/g中性蛋白酶在50℃下酶解约3.5h，100℃灭酶处理8min后得到初级酶解液；
S2、取初级酶解液调节pH值为7.5-8.0，加入2800u/g羧肽酶在50℃下酶解约5h，100℃灭酶处理8min后得到次级酶解液；
S3、采用超滤法过滤去除次级酶解液中的酶，冷冻干燥得到粉末状复合水解肽成品。
实施例2
本实施例提供的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其原料配比与实施例1相同，复合水解肽的制备方法也与实施例1基本相同，不同之处在于：复合水解肽的制备方法中，将步骤S1所用的乌龟肉替换成甲鱼肉，用量不变。
实施例3
本实施例提供的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其原料包括复合水解肽10wt％、甜味剂2wt％、食用香精0.2wt％、环状糊精0.5wt％、抗氧化剂0.5wt％、乳化剂0.1wt％，其余为水。
实施例4
本实施例提供的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其原料包括复合水解肽5wt％、甜味剂5wt％、食用香精0.5wt％、环状糊精1wt％、抗氧化剂0.8wt％、乳化剂0.6wt％，其余为水。复合水解肽的制备方法与实施例1相同。
实施例5
本实施例提供的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其原料配比与实施例1相同，复合水解肽的制备方法也与实施例1基本相同，不同之处在于：复合水解肽的制备方法中，步骤S1的蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵、乌龟肉的重量比为5:3:8:2:3。
实施例6
本实施例提供的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其原料配比与实施例1相同，复合水解肽的制备方法也与实施例1基本相同，不同之处在于：复合水解肽的制备方法中，步骤S1的蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵、乌龟肉的重量比为5:8:3:4:1。
对比例1
本对比例提供的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其原料和用量与实施例1相同，不同之处在于，复合水解肽中，只使用蛋清、鳄鱼肉、海胆卵和乌龟肉这四种蛋白质原料，四者比例仍然为5:5:3:2，不含有海星。
对比例2
本对比例提供的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其原料和用量与实施例1相同，不同之处在于，复合水解肽中，只使用蛋清、鳄鱼肉、海星和乌龟肉这四种蛋白质原料，四者比例仍然为5:5:5:2，不含有海胆卵。
对比例3
本对比例提供的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其原料和用量与实施例1相同，不同之处在于，复合水解肽中，只使用蛋清、海胆卵、海星和乌龟肉这四种蛋白质原料，四者比例仍然为5:5:3:2，不含有鳄鱼肉。
对比例4
本对比例提供的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其原料和用量与实施例1相同，不同之处在于复合水解肽的制备方法为：
S1、按重量比取5:5:5:3:2蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵，以及乌龟肉，再加入8倍的纯净水，搅拌均匀，调节pH值为7.5-8.0，加入2800u/g羧肽酶在50℃下酶解约5h，100℃灭酶处理8min后得到次级酶解液；
S2、取初级酶解液，调节pH值为6.5-7.0，加入约2000u/g中性蛋白酶在50℃下酶解约3.5h，100℃灭酶处理8min后得到初级酶解液；
S3、采用超滤法过滤去除次级酶解液中的酶，冷冻干燥得到粉末状复合水解肽成品。
应用例1：实施例和对比例的复合水解肽功能饮品中氨基酸含量检测
为了提高检测精度，直接以原料复合水解肽为检测对象，采用高效液相色谱串联质谱法测定实施例1、2、5、6和对比例1-4的原料复合水解肽中精氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、缬氨酸的含量，具体检测方法为本领域常见的氨基酸检测方法，本发明是参照“高效液相色谱串联质谱法测定酱油中水解氨基酸”(陈媛等，中国酿造，2012年第31卷第11期)中的方法进行检测，取1g复合水解肽加至5ml双蒸水中配制成样品溶液。检测结果如下表1所示。
表1复合水解肽中氨基酸含量(mg/L)和比例
从上表1可知，在制备复合水解肽时，当改变鳄鱼肉、海星、海胆卵、乌龟肉(甲鱼肉)的比例，或者缺少上述五种蛋白质原料中任意一种时，又或者制备复合水解肽的水解方法时，都会改变精氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、缬氨酸的含量。只有按照实施例1、2、5、6的制备方法时，才能将精氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、缬氨酸的含量比例控制在大约1.16-2.65:4.45-5.66:3.80-4.15:5.20-5.80的范围内。
应用例2：实施例和对比例的功能饮品的预防和抑制肿瘤效果评定
1、预防结肠癌肿瘤效果评定
取实施例1-6和对比例1-4制备的功能饮品为样品；取165只白化成年雄性大鼠，以氧化偶氮甲烷和硫酸葡聚糖钠诱导结肠癌，随机分成11组，每组15只，分别给予实施例1-6和对比例1-4制备的功能饮品样品和安慰剂，每日一次，每次3ml，连续灌胃10周。灌胃结束后解剖大鼠，计算每组大鼠结肠癌发病的数量，实验结果见下表2：
表2预防结肠癌肿瘤效果评定结果
| 组名 | 发病率 |
| 实施例1 | 26.67％ |
| 实施例2 | 33.33％ |
| 实施例3 | 20％ |
| 实施例4 | 33.33％ |
| 实施例5 | 40％ |
| 实施例6 | 40％ |
| 对比例1 | 80％ |
| 对比例2 | 73.33％ |
| 对比例3 | 86.67％ |
| 对比例4 | 86.67％ |
| 安慰剂组 | 93.33％ |
2、抑制肝癌肿瘤效果评定
选取若干只BABL/c裸鼠，选取人肝癌HepG2细胞系(采购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库)，将HepG2用无血清MEM培养基稀释为1×107个/mL，取100μL该细胞悬浮液接种于BABL/c裸鼠左侧腋窝皮下，生长7天，形成荷瘤小鼠模型。
取接种生长良好的荷瘤小鼠55只，随机分成11组，每组5只，分别给予实施例1-6和对比例1-4制备的功能饮品样品和安慰剂，每日一次，每次3ml，连续灌胃3周。给药同时以游标卡尺测量肿瘤大小(肿瘤体积＝长径×短径2/2)，统计处理。
通过测量后可以发现实施例3的肿瘤生长速度最慢，实施例1、2的次之但与实施例3相差不大，实施例4-6再次，对比例1-4的肿瘤生长速度也有所减慢，但是最终肿瘤体积明显大于实施例1-6，实施例1-6和对比例1-4的最终肿瘤体积都小于安慰剂组。
Claims (7)
1.一种适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其特征在于，其原料包括复合水解肽5-10wt％、甜味剂2-5wt％、食用香精0.2-0.5wt％、环状糊精0.5-1wt％、抗氧化剂0.5-0.8wt％、乳化剂0.1-0.6wt％，其余为水；
所述复合水解肽的制备方法为：
S1、按重量比取5:3-8:3-8:2-4:1-3蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵，以及乌龟肉或甲鱼肉，再加入6-8倍的纯净水，搅拌均匀，调节pH值为6.5-7.0，加入中性蛋白酶在45-50℃下酶解，经灭酶处理后得到初级酶解液；
S2、取初级酶解液调节pH值为7.5-8.0，加入羧肽酶在45-50℃下酶解，经灭酶处理后得到次级酶解液；
S3、采用超滤法过滤去除次级酶解液中的酶，冷冻干燥得到粉末状复合水解肽成品。
2.根据权利要求1所述的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其特征在于，其原料包括复合水解肽9.5wt％、甜味剂4.0wt％、食用香精0.4wt％、环状糊精0.8wt％、抗氧化剂0.6wt％、乳化剂0.5wt％，其余为水。
3.根据权利要求1所述的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其特征在于，步骤S1中，蛋清、鳄鱼肉、海星、海胆卵，以及乌龟肉或甲鱼肉这五者的重量比为5:5:5:3:2。
4.根据权利要求1所述的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其特征在于，步骤S1的中性蛋白酶的加酶量为1800-2100u/g，酶解时间2-4h。
5.根据权利要求1所述的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其特征在于，步骤S2的羧肽酶的加酶量为2500-3000u/g，酶解时间3-5h。
6.根据权利要求1所述的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品，其特征在于，所述食用香精为植物精油。
7.权利要求1-6任一项所述的适用于肿瘤患者饮用的复合水解肽功能饮品的制备方法，其特征在于，先将环状糊精加至水中搅拌均匀，然后加入复合水解肽，均质；然后加入抗氧化剂、乳化剂、甜味剂、食用香精，搅拌均匀，即得复合水解肽功能饮品。
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