CN113227070A

CN113227070A - Ask1抑制剂

Info

Publication number: CN113227070A
Application number: CN201980066086.9A
Authority: CN
Inventors: F.冈扎莱兹洛佩兹德图里索; Z.辛; M.希梅尔鲍尔; J.H.琼斯
Original assignee: Biogan Ma Co
Current assignee: Biogan Ma Co; Biogen Inc; Biogen MA Inc
Priority date: 2018-08-14
Filing date: 2019-08-13
Publication date: 2021-08-06
Also published as: AU2019321412A1; EP3837251B1; EP3837251A1; MX2021001783A; BR112021002690A2; ES2963122T3; US20210317103A1; CO2021003218A2; WO2020036949A1; CA3109504A1; WO2020036949A8; MA53225A; JP2021534152A

Abstract

提供了式(I)的化合物：式(I)，包括式(II)、(III)、(IV)、(V)和(VI)的化合物，

其中X、R¹、R²、R³、R⁴和n如本文所定义，及其药学上可接受的盐，以及它们的使用和生产方法。这些化合物能够例如用于治疗对抑制凋亡信号调控激酶1(ASK1)有反应的病症。

Description

ASK1抑制剂

相关申请

本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2018年8月14日提交的美国临时申请第62/718,622号的申请日的权益，所述美国临时申请的全部内容通过引用并入本文。

技术领域

提供了抑制凋亡信号调控激酶1(ASK1)的某些药剂以及制备和使用这类药剂的方法。

背景技术

凋亡信号调控激酶1(ASK1)，也被称为MAP3K5，是有丝分裂原活化蛋白质激酶激酶激酶(“MAP3K”)家族的成员，其使c-Jun N末端蛋白质激酶(“JNK”)和p38 MAP激酶活化(Ichijo，H.等人，Science 1997，275，90-94)。ASK1是一种进化保守性和应激反应性有丝分裂原活化蛋白质激酶(MAPK)。在小鼠中，已发现ASK1在心脏、脑、肺、肝和肾中以及在发育皮肤、软骨和骨中表达(Tobiume等人，Biochem Biophys Res Commun.1997，239(3)，905-10)。ASK1是细胞死亡的主要调控物，并且参与由各种形式的细胞应激触发的若干应激诱导和受体介导细胞死亡路径，所述应激包括氧化应激、反应性氧物质(ROS)、内质网(ER)应激和未折叠蛋白反应(UPR)、线粒体应激、细菌性感染、增加的钙流入、DNA损害、紫外辐射、病毒性感染、热休克、渗透压休克、内毒素脂多糖(LPS)、FasL、以及由促炎性细胞因子诸如肿瘤坏死因子(TNF)和白介素-1达成的活化(Nishitoh等人，Genes Dev.2002，16，1345-1355；Matsukawa等人，Nat.Immunol.，2005，6，587-592；Tobiume等人，EMBO Rep.2001，2，222-228；Hayakawa R.等人，Proc.Jpn.Acad.Ser B Phys.Biol.Sci.2012，88(8)，434-53；Takeda等人，Cell Struct.Funct.2003，28(1)，23-29；Tibbles等人，Cell Mol LifeSci.1999，55(10)，1230-1254；Hattori等人，Cell Comm.Signal.2009，7，1-10；Takeda等人，Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.2007，48，1-8.27；Nagai等人J.Biochem.Mol.Biol.2007，40，1-6)。

ASK1响应于这些信号通过在Thr838处的自体磷酸化来经受活化，并且转而使MAP2K诸如MKK3/6和MKK4/7磷酸化，其接着分别使p38和JNK MAPK磷酸化和活化。JNK和p38路径的活化会诱导与细胞死亡、分化以及炎症性细胞因子的产生相关的应激反应。在非应激条件下，ASK1通过结合它的阻遏物硫氧还蛋白(Trx)(Saitoh，M.等人，Embo J.1998，17，2596-2606)，以及通过与AKT(Zhang，L.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A 1999，96，8511-8515)缔合来以非活性状态保持。

ASK1不仅在细胞死亡路径中，而且还在包括细胞因子反应的炎症性和先天性免疫反应以及细胞分化中起至关重要作用。视细胞类型而定，ASK1蛋白的磷酸化可导致凋亡或其他细胞反应。已报道ASK1活化和信号传导在广泛范围的疾病中起重要作用，所述疾病包括神经变性、心血管、炎症性、自体免疫性和代谢病症。此外，ASK1已牵涉于介导在心脏、脑和肾的缺血和再灌注之后的器官损害(Watanabe等人，BBRC 2005，333，562-567；Zhang等人，Life Sci 2003，74-37-43；Terada等人BBRC 2007，364：1043-49)。

因此，存在对可充当ASK1抑制剂的新型化合物的需要。

发明内容

在一个方面，本发明提供了一种式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

X是CH或N；

n是1或2；

R¹在每次出现时独立地选自H、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基、杂环基、卤基、-CN、-C(O)R^1a、-C(O)OR^1a、-C(O)N(R^1a)₂、-N(R^1a)₂、-N(R^1a)C(O)R^1a、-N(R^1a)C(O)OR^1a、-N(R^1a)C(O)N(R^1a)₂、-N(R^1a)S(O)₂R^1a、-OR^1a、-OC(O)R^1a、-OC(O)N(R^1a)₂、-SR^1a、-S(O)R^1a、-S(O)₂R^1a、-S(O)N(R^1a)₂和-S(O)₂N(R^1a)₂，其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基和杂环基任选地被一个或多个R¹⁰取代；

R^1a在每次出现时独立地选自H、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基和杂环基，其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基和杂环基在每次出现时任选且独立地被一个或多个R¹⁰取代；

R¹⁰在每次出现时独立地选自C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基、杂环基、卤基、-CN、-C(O)R^10a、-C(O)OR^10a、-C(O)N(R^10a)₂、-N(R^10a)₂、-N(R^10a)C(O)R^10a、-N(R^10a)C(O)OR^10a、-N(R^10a)C(O)N(R^10a)₂、-N(R^10a)S(O)₂R^10a、-OR^10a、-OC(O)R^10a、-OC(O)N(R^10a)₂、-SR^10a、-S(O)R^10a、-S(O)₂R^10a、-S(O)N(R^10a)₂和-S(O)₂N(R^10a)₂，其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基和杂环基在每次出现时任选且独立地被一个或多个独立地选自以下的取代基取代：卤基、-CN、-C(O)R^10a、-C(O)OR^10a、-C(O)N(R^10a)₂、-N(R^10a)₂、-N(R^10a)C(O)R^10a、-N(R^10a)C(O)OR^10a、-N(R^10a)C(O)N(R^10a)₂、-N(R^10a)S(O)₂R^10a、-OR^10a、-OC(O)R^10a、-OC(O)N(R^10a)₂、-SR^10a、-S(O)R^10a、-S(O)₂R^10a、-S(O)N(R^10a)₂和-S(O)₂N(R^10a)₂；

R^10a在每次出现时独立地选自H、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基和杂环基；

R²选自H、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基和杂环基，其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基和杂环基任选且独立地被一个或多个R²⁰取代；

R²⁰在每次出现时独立地选自C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基、杂环基、卤基、-CN、-C(O)R^20a、-C(O)OR^20a、-C(O)N(R^20a)₂、-N(R^20a)₂、-N(R^20a)C(O)R^20a、-N(R^20a)C(O)OR^20a、-N(R^20a)C(O)N(R^20a)₂、-N(R^20a)S(O)₂R^20a、-OR^20a、-OC(O)R^20a、-OC(O)N(R^20a)₂、-SR^20a、-S(O)R^20a、-S(O)₂R^20a、-S(O)N(R^20a)₂和-S(O)₂N(R^20a)₂，其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基和杂环基在每次出现时任选且独立地被一个或多个独立地选自以下的取代基取代：卤基、-CN、-C(O)R^20a、-C(O)OR^20a、-C(O)N(R^20a)₂、-N(R^20a)₂、-N(R^20a)C(O)R^20a、-N(R^20a)C(O)OR^20a、-N(R^20a)C(O)N(R^20a)₂、-N(R^20a)S(O)₂R^20a、-OR^20a、-OC(O)R^20a、-OC(O)N(R^20a)₂、-SR^20a、-S(O)R^20a、-S(O)₂R^20a、-S(O)N(R^20a)₂和-S(O)₂N(R^20a)₂；

R^20a在每次出现时独立地选自H、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基和杂环基；

R³选自H、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基和杂环基，其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基和杂环基任选地被一个或多个R³⁰取代；

R³⁰在每次出现时独立地选自C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基、杂环基、卤基、-CN、-C(O)R^30a、-C(O)OR^30a、-C(O)N(R^30a)₂、-N(R^30a)₂、-N(R^30a)C(O)R^30a、-N(R^30a)C(O)OR^30a、-N(R^30a)C(O)N(R^30a)₂、-N(R^30a)S(O)₂R^30a、-OR^30a、-OC(O)R^30a、-OC(O)N(R^30a)₂、-SR^30a、-S(O)R^30a、-S(O)₂R^30a、-S(O)N(R^30a)₂和-S(O)₂N(R^30a)₂，其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基和杂环基在每次出现时任选且独立地被一个或多个独立地选自以下的取代基取代：卤基、-CN、-C(O)R^30a、-C(O)OR^30a、-C(O)N(R^30a)₂、-N(R^30a)₂、-N(R^30a)C(O)R^30a、-N(R^30a)C(O)OR^30a、-N(R^30a)C(O)N(R^30a)₂、-N(R^30a)S(O)₂R^30a、-OR^30a、-OC(O)R^30a、-OC(O)N(R^30a)₂、-SR^30a、-S(O)R^30a、-S(O)₂R^30a、-S(O)N(R^30a)₂和-S(O)₂N(R^30a)₂；

R^30a在每次出现时独立地选自H、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、碳环基和杂环基，其中所述碳环基和杂环基各自任选地被C_1-4烷基或卤基取代；并且

R⁴是H或C_1-6烷基。

如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可具有作为ASK1调节剂的活性。具体地说如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可为ASK1抑制剂。

本发明还提供了一种包含至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐以及至少一种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。

在一个方面，本发明提供了一种治疗受试者的对抑制ASK1有反应的病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。

本发明还包括至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐用于制造用以治疗对抑制ASK1有反应的病症的药物的用途。还提供了一种用于治疗对抑制ASK1有反应的病症的方法中的本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。

其他特征或优势将根据对若干实施方案的以下详细描述，并且还根据随附权利要求而显而易知。

具体实施方式

定义

如本文所用，除非相反地明确陈述或另外根据上下文是明确的，否则术语“包括(include)”和它的变化形式(“包括(includes)”、“包括(including)”等)意图是非限制性的。也就是说，除非相反地明确陈述或另外根据上下文是明确的，否则“包括”意指“包括但不限于”等。

如本文所用，术语“烷基”是指饱和支链或非支链烃部分。优选地，烷基包含1至6个碳原子，或1至4个碳原子。在一些实施方案中，烷基包含6至20个碳原子。烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基或正己基。

“烯基”是指可为直链或支链，并且具有至少一个碳-碳双键的不饱和烃基团。具有2-6个碳原子的烯基可为优选的。烯基可含有1、2或3个碳-碳双键或更多个碳-碳双键。烯基的实例包括乙烯基、正丙烯基、异丙烯基、正丁-2-烯基、正己-3-烯基等。

“炔基”是指可为直链或支链，并且具有至少一个碳-碳三键的不饱和烃基团。具有2-6个碳原子的炔基可为优选的。炔基可含有1、2或3个碳-碳三键或更多个碳-碳三键。炔基的实例包括乙炔基、丙炔基、丁-2-炔基、正己-3-炔基等。

基团中碳原子的数目在本文中由前缀“C_x-xx”指定，其中x和xx是整数。举例来说，“C_1-4烷基”是具有1至4个碳原子的烷基。

“卤素”或“卤基”可为氟基、氯基、溴基或碘基。

如本文所用，术语“杂环基”是指(1)饱和或不饱和单环或双环(例如桥环或螺环系统)环系统，其具有3至10个环成员，或特别是3至8个环成员、3至7个环成员、3至6个环成员或5至7个环成员或4至7个环成员，所述环成员中的至少一者是杂原子，并且所述环成员中的最多4者(例如1、2、3或4者)可为杂原子，其中所述杂原子独立地选自O、S和N，并且其中C可为氧化的(例如C(O))，N可为氧化的(例如N(O))或季铵化的，并且S可任选地被氧化成亚砜和/或砜；或(2)杂芳基。如本文所用，术语“杂芳基”是指芳族5或6元单环系统，具有1至4个独立地选自O、S和N的杂原子，并且其中N可为氧化的(例如N(O))或季铵化的，并且S可任选地被氧化成亚砜和砜。在一个实施方案中，杂环基是3至7元饱和单环或3至6员饱和单环或5至7员饱和单环或4至7元饱和单环。在一个实施方案中，杂环基是3至7元单环或3至6员单环或5至7员单环。在另一实施方案中，杂环基是6或7元双环。在另一实施方案中，杂环基是4至7元单环非芳族环。在另一实施方案中，杂环基是6至8元螺环或桥接双环。杂环基可在杂原子或碳原子处连接。杂环基的实例包括氮杂环丙烷基、氧杂环丙烷基、硫杂环丙烷基、氧氮杂环丙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、吡咯烷基、四氢呋喃基、硫杂环戊烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、噁唑烷基、异噁唑烷基、噻唑烷基、异噻唑烷基、二氧杂环戊烷基、二硫杂环戊烷基、氧硫杂环戊烷基、哌啶基、四氢吡喃基、硫杂环己烷基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、二氧杂环己烷基、二硫杂环己烷基、三氧杂环己烷基、三硫杂环己烷基、氮杂环庚烷基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、二氢呋喃基、咪唑啉基、二氢吡喃基以及杂芳基环，包括氮杂环丁烯基、硫杂环丁烯基、吡咯基、呋喃基、苯硫基(或噻吩基)、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、呋咱基、噁二唑基、噻二唑基、二噻唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、吡喃基、噻喃基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噁嗪基、噻嗪基、二氧杂环己二烯基、二硫杂环己二烯基、氧硫杂环己烷基、三嗪基、四嗪基、氮杂环庚三烯基、氧杂环庚三烯基、硫杂环庚三烯基、二氮杂环庚三烯基和硫氮杂环庚三烯基等。

在一个实施方案中，杂环基是4至7元单环杂环基。4至7元单环杂环系统的实例包括氮杂环丁烷基、吡咯烷基、四氢呋喃基、硫杂环戊烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、噁唑烷基、异噁唑烷基、噻唑烷基、异噻唑烷基、二氧杂环戊烷基、二硫杂环戊烷基、氧硫杂环戊烷基、哌啶基、四氢吡喃基、硫杂环己烷基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、二氧杂环己烷基、二硫杂环己烷基、氮杂环庚烷基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、二氢呋喃基、咪唑啉基、二氢吡喃基、吡咯基、呋喃基、苯硫基(或噻吩基)、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、呋咱基、噁二唑基、噻二唑基、二噻唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、吡喃基、噻喃基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噁嗪基、噻嗪基、二氧杂环己二烯基、二硫杂环己二烯基、氧硫杂环己烷基、三嗪基、四嗪基、氮杂环庚三烯基、氧杂环庚三烯基、硫杂环庚三烯基、二氮杂环庚三烯基和硫氮杂环庚三烯基。

如本文所用，“4至7元单环饱和杂环基”是具有4至7个环成员，并且是饱和的单环杂环基。4至7元单环饱和杂环基的实例包括氮杂环丁烷基、吡咯烷基、四氢呋喃基、硫杂环戊烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、噁唑烷基、异噁唑烷基、噻唑烷基、异噻唑烷基、二氧杂环戊烷基、二硫杂环戊烷基、氧硫杂环戊烷基、哌啶基、四氢吡喃基、硫杂环己烷基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、二氧杂环己烷基、二硫杂环己烷基、氮杂环庚烷基、氧杂环庚烷基和硫杂环庚烷基。在一个实施方案中，4至7元单环饱和杂环基是氮杂环丁烷基、哌啶基、氧杂环丁烷基、哌嗪基或吗啉基。

如本文所用，“5或6元杂芳基”是指具有5或6个环成员的单环芳族杂环基。5或6元杂芳基的实例包括吡咯基、呋喃基、苯硫基(或噻吩基)、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、呋咱基、噁二唑基、噻二唑基、二噻唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、吡喃基、噻喃基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噁嗪基、噻嗪基、二氧杂环己二烯基、二硫杂环己二烯基、氧硫杂环己烷基、三嗪基和四嗪基。在一个实施方案中，5或6元杂芳基是吡咯基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、二噻唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、三嗪基和四嗪基。在另一实施方案中，5或6元杂芳基是吡啶基、嘧啶基、吡嗪基和哒嗪基。

如本文所用的术语“桥环系统”是具有碳环基或杂环基环的环系统，其中所述环的两个非邻近原子通过一个或多个(优选是一个至三个)选自C、N、O或S的原子来连接(桥接)。桥环系统可具有6至8个环成员。

如本文所用的术语“螺环系统”是具有两个环的环系统，所述环中的每一者独立地选自碳环基或杂环基，其中两个环结构共同具有一个环原子。螺环系统具有5至8个环成员。

如本文所用，术语“碳环基”是指具有3-7个碳原子、3-6或5-7个碳原子的饱和或不饱和单环或双环烃基团。术语“碳环基”涵盖环烷基和芳族基团。术语“环烷基”是指具有3-7个碳原子、3-6个碳原子或5-7个碳原子的饱和单环或双环或螺环烃基团。示例性单环碳环基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基、环丁二烯基、环戊二烯基、环己二烯基、环庚二烯基、苯基和环庚三烯基。示例性双环碳环基包括双环[2.1.1]己基、双环[2.2.1]庚基、双环[2.2.1]庚烯基、三环[2.2.1.0² ^，6]庚烷基、6，6-二甲基双环[3.1.1]庚基、或2，6，6-三甲基双环[3.1.1]庚基、螺[2.2]戊烷基和螺[3.3]庚烷基。

如本文所用，“C_3-6环烷基”是指具有3-6个碳原子的单环饱和环烷基。

在其中本文提供的化合物呈足以形成稳定无毒酸盐或碱盐的碱性或酸性的情况下，以药学上可接受的盐形式制备和施用化合物可为适当的。药学上可接受的盐的实例是用形成生理可接受的阴离子的酸形成的有机酸加成盐，例如甲苯磺酸盐、甲烷磺酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐、丁二酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、α-酮戊二酸盐和α-甘油磷酸盐。还可形成无机盐，包括盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、碳酸氢盐和碳酸盐。

药学上可接受的盐可使用本领域中熟知的标准程序来获得，例如通过使具有足够碱性的化合物诸如胺与提供生理上可接受的阴离子的适合酸反应。还可制备羧酸的碱金属(例如钠、钾或锂)或碱土金属(例如钙)盐。

药学上可接受的碱加成盐可从无机和有机碱制备。由无机碱获得的盐可包括钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐或镁盐。由有机碱获得的盐可包括伯胺、仲胺或叔胺的盐，所述伯胺、仲胺或叔胺诸如是烷基胺、二烃基胺、三烷基胺、取代的烷基胺、二(取代的烷基)胺、三(取代的烷基)胺、烯基胺、二烯基胺、三烯基胺、取代的烯基胺、二(取代的烯基)胺、三(取代的烯基)胺、环烷基胺、二(环烷基)胺、三(环烷基)胺、取代的环烷基胺、二取代的环烷基胺、三取代的环烷基胺、环烯基胺、二(环烯基)胺、三(环烯基)胺、取代的环烯基胺、二取代的环烯基胺、三取代的环烯基胺、芳基胺、二芳基胺、三芳基胺、杂芳基胺、二杂芳基胺、三杂芳基胺、杂环烷基胺、二杂环烷基胺、三杂环烷基胺、或混合二胺和三胺，其中胺上的取代基中的至少两者可为不同的，并且可为烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、芳基、杂芳基或杂环烷基等。还包括其中两个或三个取代基连同氨基氮一起形成杂环烷基或杂芳基的胺。胺的实例可包括异丙胺、三甲基胺、二乙基胺、三(异丙基)胺、三(正丙基)胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、三甲胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海卓胺、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、N-烷基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、吗啉、N-乙基哌啶等。其他羧酸衍生物可为有用的，例如羧酸酰胺，包括羧酰胺、低级烷基羧酰胺、二烷基羧酰胺等。

如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可在分子中含有一或多个不对称中心。根据本公开，未指定立体化学的任何结构都应被理解为包括呈纯或大致上纯形式的所有各种立体异构体(例如非对映异构体和对映异构体)以及它们的混合物(诸如外消旋混合物或对映异构体富集混合物)。本领域中熟知如何制备这类光学活性形式(例如通过重结晶技术来拆分外消旋形式，从光学活性起始物质进行合成，通过手性合成，或使用手性固定相进行色谱分离)。当用于所公开方法中的化合物的特定立体异构体通过名称或结构来描绘时，化合物的立体化学纯度是至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、97％、99％、99.5％或99.9％。“立体化学纯度”意指所需立体异构体相对于所有立体异构体的组合重量的重量百分比。当用于所公开方法中的化合物的特定立体异构体通过名称或结构来描绘成指示单一对映异构体时，化合物的对映异构体纯度是至少60％、70％、80％、90％、95％、97％、99％、99.5％或99.9％。“对映异构体纯度”意指所需立体异构体相对于所需立体异构体和它的对映异构体的组合重量的重量百分比。

所公开化合物可以互变异构形式存在，并且涵盖混合物和单独单种互变异构体。此外，一些化合物可展现同质多晶现象。

明确来说，本发明的化合物包括存在于式(I)以及本文公开的任何实例或实施方案中的原子的所有同位素。举例来说，H(或氢)代表氢的任何同位素形式，包括¹H、²H(D)和³H(T)；C代表碳的任何同位素形式，包括¹²C、¹³C和¹⁴C；O代表氧的任何同位素形式，包括¹⁶O、¹⁷O和¹⁸O；N代表氮的任何同位素形式，包括¹³N、¹⁴N和¹⁵N；P代表磷的任何同位素形式，包括³¹P和³²P；S代表硫的任何同位素形式，包括³²S和³⁵S；F代表氟的任何同位素形式，包括¹⁹F和¹⁸F；Cl代表氯的任何同位素形式，包括³⁵Cl、³⁷Cl和³⁶Cl；以此类推。在一优选实施方案中，由式(I)表示的化合物包含其中原子的处于它们的天然存在的丰度的同位素。然而，在某些情况下，合乎需要的是使一个或多个原子富含通常将以较小丰度存在的特定同位素。举例来说，¹H通常将以大于99.98％丰度存在；然而，本发明的化合物可在H所存在的一个或多个位置富含²H或³H。在式(I)的化合物的特定实施方案中，当例如氢富含氘同位素时，符号“D”可用于表示富含氘。在一个实施方案中，当对本发明的化合物进行放射性同位素例如³H及¹⁴C富集时，它们可用于药物和/或底物组织分布测定中。应了解本发明涵盖抑制ASK1活性的所有这类同位素形式。

本发明的化合物

在第一实施方案中，本发明的化合物由式(I)：

或其药学上可接受的盐表示，其中对于变量的定义如上所定义。

在第二实施方案中，本发明的化合物由式(II)：

或其药学上可接受的盐表示，其中变量如上对于式(I)所定义。

在第三实施方案中，本发明的化合物由式(III)：

在第四实施方案中，本发明的化合物由式(IV)：

在第五实施方案中，本发明的化合物由式(I)、(II)、(III)或(IV)或它们的药学上可接受的盐表示，其中：

R¹是H、C_1-6烷基或-OR^1a，其中所述C_1-6烷基任选地被一个至三个R¹⁰取代；

R^1a在每次出现时独立地选自H和C_1-6烷基；

R¹⁰在每次出现时独立地选自卤基和-OR^1a；并且

其余变量如第一、第二、第三或第四实施方案中所定义。

在第六实施方案中，本发明的化合物由式(I)、(II)、(III)或(IV)或它们的药学上可接受的盐表示，其中R¹是H、-OCH₃、-OCH₂CH₃、-CH₂OCH₃、-CF₃或-CHF₂；并且其余变量如第一、第二、第三、第四或第五实施方案中所定义。

在第七实施方案中，本发明的化合物由式(I)、(II)、(III)或(IV)或它们的药学上可接受的盐表示，其中：

R²选自H、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_3-6环烷基、苯基和5或6元杂芳基，其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_3-6环烷基、苯基和5或6元杂芳基任选且独立地被一个至三个R²⁰取代；

R²⁰在每次出现时独立地选自C_1-4烷基、C_2-4烯基、C_3-6环烷基、苯基、4至7元单环饱和杂环基、5或6元杂芳基、卤基、-CN、-C(O)R^20a、-C(O)OR^20a、-C(O)N(R^20a)₂、-N(R^20a)₂、-N(R^20a)C(O)R^20a、-N(R^20a)C(O)OR^20a、-N(R^20a)C(O)N(R^20a)₂、-N(R^20a)S(O)₂R^20a、-OR^20a、-OC(O)R^20a、-OC(O)N(R^20a)₂、-SR^20a、-S(O)R^20a、-S(O)₂R^20a、-S(O)N(R^20a)₂和-S(O)₂N(R^20a)₂，其中所述C_1-4烷基、C_2-4烯基、C_3-6环烷基、苯基、4至7元单环饱和杂环基和5或6元杂芳基在每次出现时任选且独立地被一个或多个独立地选自以下的取代基取代：卤基、-CN、-C(O)R^20a、-C(O)OR^20a、-C(O)N(R^20a)₂、-N(R^20a)₂、-N(R^20a)C(O)R^20a、-N(R^20a)C(O)OR^20a、-N(R^20a)C(O)N(R^20a)₂、-N(R^20a)S(O)₂R^20a、-OR^20a、-OC(O)R^20a、-OC(O)N(R^20a)₂、-SR^20a、-S(O)R^20a、-S(O)₂R^20a、-S(O)N(R^20a)₂和-S(O)₂N(R^20a)₂；

R^20a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基；

并且其余变量如第一、第二、第三、第四、第五或第六实施方案中所定义。

在第八实施方案中，本发明的化合物由式(I)、(II)、(III)或(IV)或它们的药学上可接受的盐表示，其中：

R²⁰在每次出现时独立地选自C_1-4烷基、C_2-4烯基、C_3-6环烷基、苯基、4至7元单环饱和杂环基、5或6元杂芳基、卤基、-CN、-N(R^20a)₂和-OR^20a；

R^20a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基；

并且其余变量如第一、第二、第三、第四、第五、第六或第七实施方案中所定义。

在第九实施方案中，第七或第八实施方案中所述的5或6元杂芳基选自吡啶基、嘧啶基、吡嗪基和哒嗪基。

在第十实施方案中，第八或第九实施方案中所述的4至7元单环饱和杂环基选自氮杂环丁烷基、哌啶基、氧杂环丁烷基、哌嗪基和吗啉基。

在第十一实施方案中，本发明的化合物由式(I)、(II)、(III)或(IV)或它们的药学上可接受的盐表示，其中：

R²是-CH₃、-CH₂CH₃、-CH₂CF₃、-C(CH₃)₃、-CH₂CH₂OCH₃、-CH₂CH(CH₃)₂、-CH₂CH₂N(CH₃)₂、-CH₂CH＝CH₂、-CH₂CH₂CH₃、

在第十二实施方案中，本发明的化合物由式(I)、(II)、(III)或(IV)或它们的药学上可接受的盐表示，其中：

R³选自H、C_1-6烷基、C_3-6环烷基和4至7元单环饱和杂环基，其中所述C_1-6烷基、C_3-6环烷基和4至7元单环饱和杂环基任选地被一个至三个R³⁰取代；

R³⁰在每次出现时独立地选自C_1-6烷基、卤基、-CN、-C(O)R^30a、-C(O)OR^30a、-C(O)N(R^30a)₂、-N(R^30a)₂、-N(R^30a)C(O)R^30a、-N(R^30a)C(O)OR^30a、-N(R^30a)C(O)N(R^30a)₂、-N(R^30a)S(O)₂R^30a、-OR^30a、-OC(O)R^30a、-OC(O)N(R^30a)₂、-SR^30a、-S(O)R^30a、-S(O)₂R^30a、-S(O)N(R^30a)₂和-S(O)₂N(R^30a)₂，其中所述C_1-6烷基在每次出现时任选且独立地被一个至三个独立地选自C_1-4烷基和卤基的取代基取代；

R^30a在每次出现时独立地是H或C_1-6烷基，其中C_1-6烷基任选地被一个至三个独立地选自C_1-4烷基和卤基的取代基取代；

并且其余变量如第一、第二、第三、第四、第五、第六、第七、第八、第九、第十或第十一实施方案中所定义。

在第十三实施方案中，本发明的化合物由式(I)、(II)、(III)或(IV)或它们的药学上可接受的盐表示，其中：

R³是C_1-6烷基、C_3-6环烷基或4至7元单环饱和杂环基，其中所述C_1-6烷基、C_3-6环烷基和4至7元单环饱和杂环基各自任选地被一个至三个R³⁰取代；

R³⁰在每次出现时独立地是C_1-3烷基、卤基、-C(O)OR^30a或-OR^30a，其中所述C_1-3烷基任选地被一个至三个卤基取代；

R^30a在每次出现时独立地选自H和C_1-4烷基；

并且其余变量如第十二实施方案中所定义。

在第十四实施方案中，本发明的化合物由式(I)、(II)、(III)或(IV)或它们的药学上可接受的盐表示，其中：

R³是-CH(CH₃)₂、-CH(CH₃)CF₃、-C(CH₃)₃、-CH(CH₃)CHF₂、-CH(CH₃)CH(CH₃)₂、-CH(CH₃)CH₂OCH₃、-CH(CH₃)CH₂OH、

并且其余变量如第十二实施方案中所定义。

在第十五实施方案中，本发明的化合物由式(I)、(II)、(III)或(IV)或它们的药学上可接受的盐表示，其中R⁴是H或-CH₃；并且其余变量如第一、第二、第三、第四、第五、第六、第七、第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施方案中所定义。在一具体实施方案中，R⁴是H。

在某些实施方案中，本发明的化合物由式(I)、(II)、(III)或(IV)或它们的药学上可接受的盐表示，其中：

R^1a在每次出现时独立地选自H和C_1-6烷基；

R¹⁰在每次出现时独立地选自卤基和-OR^1a；

R²⁰在每次出现时独立地选自C_1-4烷基、C_2-4烯基、C_3-6环烷基、苯基、4至7元单环饱和杂环基、5或6元杂芳基、卤基、-CN、-C(O)R^20a、-C(O)OR^20a、-C(O)N(R^20a)₂、-N(R^20a)₂、-N(R^20a)C(O)R^20a、-N(R^20a)C(O)OR^20a、-N(R^20a)C(O)N(R^20a)₂、-N(R^20a)S(O)₂R^20a、-OR^20a、-OC(O)R^20a、-OC(O)N(R^20a)₂、-SR^20a、-S(O)R^20a、-S(O)₂R^20a、-S(O)N(R^20a)₂和-S(O)₂N(R^20a)₂，其中所述C_1-4烷基、C_2-4烯基、C_3-6环烷基、苯基、4至7元单环饱和杂环基、5或6元杂芳基在每次出现时任选且独立地被一个或多个独立地选自以下的取代基取代：卤基、-CN、-C(O)R^20a、-C(O)OR^20a、-C(O)N(R^20a)₂、-N(R^20a)₂、-N(R^20a)C(O)R^20a、-N(R^20a)C(O)OR^20a、-N(R^20a)C(O)N(R^20a)₂、-N(R^20a)S(O)₂R^20a、-OR^20a、-OC(O)R^20a、-OC(O)N(R^20a)₂、-SR^20a、-S(O)R^20a、-S(O)₂R^20a、-S(O)N(R^20a)₂和-S(O)₂N(R^20a)₂；

R^20a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基；

R^30a在每次出现时独立地是H或C_1-6烷基，其中C_1-6烷基任选地被一个至三个独立地选自C_1-4烷基和卤基的取代基取代；并且

R⁴是H或C_1-6烷基。

R¹选自H、C_1-6烷基或-OR^1a，其中所述C_1-6烷基任选地被一个至三个R¹⁰取代；

R^1a在每次出现时独立地选自H和C_1-6烷基；

R¹⁰在每次出现时独立地选自卤基和-OR^1a；

R^20a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基；

R^30a在每次出现时独立地选自H和C_1-4烷基；并且

R⁴是H或C_1-6烷基。

在第十六实施方案中，本发明的化合物由式(V)或(VI)：

或它们的药学上可接受的盐表示，其中：

R¹是C_1-4烷基或-OR^1a，其中所述C_1-4烷基任选地被一个至三个卤基取代；

R^1a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基；

R²是C_1-4烷基、C_2-4烯基或5或6元杂芳基，其中所述C_1-4烷基、C_2-4烯基和5或6元杂芳基任选且独立地被一个至三个R²⁰取代；

R²⁰在每次出现时独立地选自C_3-6环烷基、卤基和-OR^20a；

R^20a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基；

R³是C_1-4烷基或C_3-6环烷基，其中所述C_1-4烷基和C_3-6环烷基各自任选地被一个至三个R³⁰取代；并且

R³⁰在每次出现时独立地是C_1-3烷基或卤基，其中所述C_1-3烷基任选地被一个至三个卤基取代。

在第十七实施方案中，本发明的化合物由式(V)或(VI)或它们的药学上可接受的盐表示，其中：

R¹是-OCH₃、-OCH₂CH₃或-CHF₂；

R²是-CH₃、-CH₂CH₃、-CH₂CH₂OCH₃、-CH₂CF₃、-CH₂CH＝CH₂、

R³是-CH(CH₃)₂、-CH(CH₃)CF₃、-CH(CH₃)CHF₂、

在第十八实施方案中，本发明的化合物选自：

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-乙氧基-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-乙基-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-苯甲基-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(叔丁基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-乙基-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(甲氧基甲基)-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

(S)-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-1-乙基-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-1-乙基-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-乙氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-3-乙氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-乙氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-环丁基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-环丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-(3，3-二氟环丁基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-环戊基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-(叔丁基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

(S)-3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(6-(4-(1-(三氟甲基)环丙基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1-(三氟甲基)环丙基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-(1，1-二氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-N-(6-(4-(1，1-二氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-N-(6-(4-(1，1-二氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(3-甲基丁烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(3-甲基丁烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(3-甲基丁烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-(2，2-二氟环丁基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-N-(6-(4-(2，2-二氟环丁基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-N-(6-(4-(2，2-二氟环丁基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-甲氧基-N-(6-(4-(1-甲氧基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-3-甲氧基-N-(6-(4-(1-甲氧基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-甲氧基-N-(6-(4-(1-甲氧基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

rac-N-(6-(4-(1-羟基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-N-(6-(4-(1-羟基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-N-(6-(4-(1-羟基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

4-(3-(6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯；

3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(哌啶-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(哌啶-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(哌啶-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(3-(6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯；

(S)-3-(3-(6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯；

(R)-3-(3-(6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-异丁基-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-异丁基-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(吡啶-2-基甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(2-(二甲基氨基)乙基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(环丙基甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(环丙基甲基)-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-1-(环丙基甲基)-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-1-(环丙基甲基)-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(环丙基甲基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-3-(二氟甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-(二氟甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-环丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-烯丙基-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-烯丙基-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-1-烯丙基-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-1-烯丙基-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-丙基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-甲氧基-1-丙基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(3-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(嘧啶-5-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(5-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(5-氰基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(5-羟基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(5-异丙氧基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(5-(二甲基氨基)吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-(5-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(5-氰基吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(5-环丙基吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-1-(5-(二甲基氨基)吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-1-(5-羟基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-1-(5-异丙氧基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(哒嗪-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-甲氧基-1-(哒嗪-3-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-3-甲氧基-1-(哒嗪-3-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-甲氧基-1-(哒嗪-3-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-甲氧基-1-(吡嗪-2-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-3-甲氧基-1-(吡嗪-2-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-甲氧基-1-(吡嗪-2-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-1-(吡嗪-2-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-3-(二氟甲基)-1-(吡嗪-2-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-(二氟甲基)-1-(吡嗪-2-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑一3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(环丙基甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(5-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(5-氰基吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

1-(5-环丙基吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-1-(5-(二甲基氨基)吡啶-3-基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-1-(5-羟基吡啶-3-基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-(二氟甲基)-1-(5-异丙氧基吡啶-3-基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(3-(1-环丙基-1H-咪唑-5-基)苯基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-甲氧基-N-(6-(4-(3-甲基丁烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(S)-3-甲氧基-N-(6-(4-(3-甲基丁烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-甲氧基-N-(6-(4-(3-甲基丁烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(4-环丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(氧杂环丁烷-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(四氢呋喃-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

(R)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(四氢呋喃-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；和

(S)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(四氢呋喃-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；

或它们的药学上可接受的盐。

在第十九实施方案中，本发明的化合物是例示章节中作为游离化合物或其药学上可接受的盐公开的化合物中的任一者。

在一些实施方案中，本发明的化合物或其药学上可接受的盐包括氘。

本发明的组合物和方法

在另一方面，本发明提供了一种包含至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐以及至少一种药学上可接受的载体的药物组合物。

本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可用于降低ASK1的活性，或另外影响ASK1的性质和/或特性，例如稳定性、磷酸化、激酶活性、与其他蛋白质的相互作用等。

本发明的一个方面包括一种治疗受试者的对抑制ASK1有反应的病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。

研究已证明ASK1参与ROS或ER应激相关的疾病机制，从而表明ASK1抑制剂可在各种人类疾病的情况下具有治疗作用。错误折叠蛋白质在内质网(ER)中的积累会诱导ER应激，从而导致对ER功能的扰乱。未折叠蛋白反应(UPR)是用以使功能恢复的ER质量控制系统。凋亡信号传导由ER应激延长或UPR功能失常所诱导。ASK1活化在神经变性疾病中的作用涉及ER应激机制与氧化应激机制两者。

在一些实施方案中，对抑制ASK1有反应的病症包括神经变性病症、心血管疾病、代谢(例如糖尿病)病症、炎症性疾病、在缺血之后的损害、自体免疫病症、破坏性骨病症、多聚谷氨酰胺疾病、谷氨酸神经毒性、疼痛、创伤性脑损伤、出血性中风、缺血、急性缺氧、肾纤维化(肾脏纤维化)、肾损伤(Terada等人，Biochem Biophys Res Commun.2007，364(4)，1043-92007)、糖尿病性肾病/糖尿病性肾病变、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肺动脉高血压(PAH)、视神经炎、肝病、呼吸疾病(慢性阻塞性肺病(COPD)、肺损伤)、心脏再灌注损伤(Gerczuk PZ等人，J Cardiovasc Pharmacol.2012，60(3)，276-82)、心脏肥大、心脏纤维化(Yamaguchi等人，J Clin Invest.2004，114(7)，937-43)、能量代谢病症、癌症(诸如肝癌、胃癌(Hayakawa等人，Proc Natl Acad Sci U S A.2011，108(2)，780-5)和感染(例如败血症)。

在一些实施方案中，本发明提供了一种用于治疗神经变性疾病的方法。在一些实施方案中，神经变性疾病包括阿尔茨海默病(Alzheimer disease)、海马硬化、额颞性痴呆(FTD)、额颞叶变性(FTLD)、亨廷顿氏病(Huntington′s disease)、皮质基底变性、肌萎缩性侧索硬化、脊髓性肌肉萎缩、运动神经元疾病、包涵体肌炎、帕金森氏病(Parkinson′sdisease)、路易体痴呆(dementia with Lewy bodies)、路易体病(Lewy body disease)、多系统萎缩、进行性核上麻痹、皮克氏病(Pick′s disease)、朊病毒疾病、创伤性脑损伤、缺血性和出血性中风、脑缺血、缺氧和谷氨酸神经毒性。在一些实施方案中，神经变性疾病选自阿尔茨海默氏病(AD)、帕金森氏病、亨廷顿氏病和肌萎缩性侧索硬化(ALS)。

ALS是一种影响脑和脊髓中的神经细胞的进行性神经变性疾病。ALS中运动神经元的进行性变性最终导致它们的死亡。当运动神经元死亡时，脑用以启动和控制肌肉运动的能力丧失。随着随意肌动作逐渐受到影响，人们可丧失言语、进食、移动和呼吸的能力。处于疾病的后期的患者可变得完全瘫痪。

体外研究显示ASK1为达成小鼠原代运动神经元的Fas受体诱导死亡所需，并且mutSOD1运动神经元显示对通过这个机制达成的死亡的易感性增加(Raoul等人，Neuron.2002，35(6)，1067-83)。突变SOD1蛋白通过活化ASK1来导致运动神经元死亡。ASK1路径的活化在mutSOD1运动神经元中增加，并且在SOD1小鼠疾病进展的早期是活跃的(Wengenack等人，Brain Res.2004，1027(1-2)，73-86；Holsek等人，Brain Res.2005，1045(1-2)，185-98)。在细胞中，ASK1介导mutSOD1表达性细胞中的细胞毒性信号传导，并且mutSOD1运动神经元中促存活路径的保护作用涉及对ASK1的抑制(Pevani等人，MolNeurobiol.2014，49(1)：136-48)。

在转基因小鼠研究中，在ALS的SOD1_G93A转基因小鼠模型中，ASK1的遗传缺失(Nishitoh等人，Genes and Dev 2008，22(11)，1451-64)与药理抑制(Fujisawa等人，Hum.Mol.Genet.2016，25(2)，245-53)两者均已证明运动神经元损失降低，并且寿命增加/延长，以及神经炎症减轻。

帕金森氏病是一种由脑的包括称为黑质的区域的各种部分中细胞的损失所致的神经系统病症。黑质细胞产生多巴胺，即一种负责传播脑内允许达成运动协调的信号的化学信使。多巴胺的损失会导致神经元在无正常控制的情况下放电，从而使患者不太能够指挥或控制他们的运动。帕金森氏病是由临床医师分类为运动病症的若干疾病中的一者。

在多巴胺能细胞损失的线粒体复合物1抑制剂MPTP(1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶)模型中，显示ASK1缺陷性小鼠相对地对MPTP病变具有抗性。在ASK1敲除小鼠中，MPTP诱导的多巴胺神经元毒性和运动损害也得以减弱，神经炎症也是如此，从而表明抑制ASK1具有保护作用(Lee等人，PlosOne 2012；7(1)，e29935)。在另一MPTP模型中，消除ASK1活性也减弱了多巴胺能细胞损失(Karunakaran等人，FASEB J.2007，21(9)，2226-36)。

在包括帕金森氏病的α-突触核蛋白病变中病原性蛋白质诸如α-突触核蛋白的积累以及它在模型系统中的过度表达和聚集与神经炎症和增加的氧化应激相关联。缺乏ASK1的α-突触核蛋白转基因小鼠显示运动功能改善(Lee等人，NeuroBiolAging 2015，36(1)，519-26)。

此外，在6-羟基多巴胺(6-OHDA，即一种导致多巴胺能细胞损失的毒素)模型中，减弱ASK1信号传导级联提供了针对多巴胺能神经元损失的保护(Hu等人，J Neurosci.2011，31(1)，247-61)。

AD是一种导致记忆、思考和行为问题的痴呆类型。在AD中，脑细胞变性以及死亡，从而导致记忆和心理功能稳定减退。AD的特征在于淀粉样蛋白-β(Aβ)肽和过磷酸化τ蛋白的水平增加，此导致标志病变Aβ斑块和τ蛋白缠结。

ASK1活化可与AD相关联。用毒性Aβ肽处理的神经元证明了归因于氧化应激(ROS)的毒性增加。暴露于Aβ肽导致ASK1活化(Wang等人，J Mol Neurosci.2015，55(1)，227-32)。通过ROS介导的ASK1活化来达成的Aβ诱导神经元死亡是Aβ诱导的神经毒性的关键机制(Kadowaki等人，Cell Death Differ.2005，12(1)，19-24)。ASK1还为ROS诱导的JNK活化和凋亡所需。

亨廷顿氏病是一种导致对脑中神经细胞的进行性破坏(变性)的遗传性疾病。亨廷顿氏病对个人的功能性能力具有广泛影响，并且通常导致运动、思考(认知)和精神病症。HTT基因中的突变导致亨廷顿氏病。HTT基因提供关于制造称为亨廷顿蛋白的蛋白质的指示。尽管这个蛋白质的功能是未知的，但它似乎在脑中的神经细胞(神经元)中起重要作用。

导致亨廷顿氏病的HTT突变涉及被称为CAG三核苷酸重复序列的DNA区段。这个区段由连续出现多次的一系列三个DNA构筑嵌段(胞嘧啶、腺嘌呤和鸟嘌呤)组成。通常，CAG区段在基因内重复10至35次。在患有亨廷顿氏病的人员中，CAG区段重复36至超过120次。具有36至39个CAG重复序列的人员可或可不显现亨廷顿氏病的征象和症状，而具有40或更多个重复序列的人员几乎始终显现病症。在蛋白质合成期间，扩增的CAG重复序列被翻译成一系列不间断谷氨酰胺残基，从而形成所谓多聚谷氨酰胺段(“polyQ”)。这类多聚谷氨酰胺段可经受增加的聚集。

研究已显示ASK1为由扩增的多聚谷氨酰胺重复序列触发的内质网应激诱导神经元细胞死亡所必需。(Nishitoh等人，Genes Dev.2002，16(11)，1345-55)。

本发明的另一实施方案包括一种用于治疗受试者的自体免疫疾病的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，自体免疫疾病选自类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、多发性硬化症、糖尿病、全身性硬化症、格雷福斯氏病(Grave′s disease)、格林-巴利综合征(Guillain-Barre syndrome)、重症肌无力、牛皮癣、克罗恩氏病(Crohn′s disease)、溃疡性结肠炎、视神经炎和休格连氏综合征(Sjogren′s syndrome)。

在一些实施方案中，自体免疫疾病是多发性硬化症(MS)。

多发性硬化症(MS)涉及免疫介导的过程，其中身体的免疫系统的异常反应针对由脑、脊髓和视神经组成的中枢神经系统(CNS)。免疫系统对包围并隔绝神经纤维的髓磷脂进行攻击。当髓磷脂被损害时，形成对疾病赋予它的名称的疤痕组织(硬化)。百分之二十的MS患者初始呈现视神经炎，并且30-70％的MS患者在疾病的过程期间显现视神经炎(视敏度损失，此可导致重度视神经脊髓炎和不可逆的视力丧失)。视神经炎是视神经的炎症，其是视神经病变的最常见形式。

在炎症、脱髓鞘和轴突变性的实验性自体免疫脑脊髓炎(EAE)模型中，在ASK1缺陷性小鼠以及用ASK1抑制剂治疗的小鼠中，EAE的严重性得以减轻。ASK1的抑制剂抑制了脊髓与视神经两者中由EAE诱发的炎症，从而表明TLR-ASK1-p38路径可充当免疫相关脱髓鞘性病症的治疗靶标(Guo等人，EMBOMol.Med.2(2010)504-515；Azuchi等人，NeurosciLett.2017，639，82-87)。

在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗受试者的心血管疾病的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐。

心血管疾病是指由以下中的任何一者或超过一者引起的心血管结构(心脏和血管)的疾病：例如心脏衰竭(包括充血性心脏衰竭、舒张性心脏衰竭和收缩性心脏衰竭)、急性心脏衰竭、缺血、复发性缺血、心肌梗塞、心律不齐、心绞痛(包括运动诱发的心绞痛、变异型心绞痛、稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛)、急性冠状动脉综合征、糖尿病、动脉粥样硬化和间歇性跛行。心血管疾病还包括与心脏瓣膜的不允许足量血液流过的功能失常相关的疾病(诸如瓣膜狭窄、瓣膜闭锁不全或反流、先天性瓣膜疾病、二叶式主动脉瓣疾病、或获得性瓣膜疾病)。

“间歇性跛行”意指与外周动脉疾病相关的疼痛。“外周动脉疾病”或PAD是一种类型的闭塞性外周血管疾病(PVD)。PAD影响在心脏和脑外部的动脉。PAD的最常见症状是当行走、登梯或运动时，臀部、大腿或小腿中发生疼痛性痉挛。疼痛被称为间歇性跛行。当列出症状间歇性跛行时，这意图包括PAD与PVD两者。

心律不整是指任何心率异常。心动徐缓是指心率异常缓慢，而心动过速是指心率异常快速。如本文所用，治疗心律不齐意图包括治疗上述心室性心动过速，诸如心房纤颤、心房扑动、房室结折返性心动过速、心房性心动过速以及心室性心动过速(VT)，包括特发性心室性心动过速、心室性纤颤、预激综合征和尖端扭转型室性心动过速(TdP)。

在另一实施方案中，本发明提供了一种用于治疗受试者的缺血的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐。

由反应性氧物质(ROS)对ASK1的活化已与在脑缺血之后的血管损伤和神经元死亡相关联。研究显示诱导ASK1表达会促进在缺血之后的凋亡性细胞死亡，并且使ASK1表达沉默会降低脑中的脑梗塞(Kim等人BrainRes.2011，1412，73-78)。已显示抑制ASK1会在缺血诱发的脑水肿中施加保护作用(Song等人，BrainRes.2015，1595，143-155)。还显示在脑缺血-再灌注模型中，阻止ASK1活化会施加神经保护作用(Liu等人，Neuroscience.2013，229，36-48)。

在大脑中动脉(MCA)闭塞模型中，ASK1抑制显示了神经元死亡降低，在缺氧/再灌注损伤模型中也同样如此(Cheon等人，Front Cell Neurosci.2016，10，213)。

当流向脑的某一区域的血液被切断时，发生中风。当这发生时，脑细胞被剥夺了氧，并且开始死亡。出血性中风是脑动脉瘤破裂或脆弱血管渗漏。当在脑内部的血管破裂，并且将血液渗漏至周围脑组织中时，发生作为一种更常见出血性中风的脑内出血。蛛网膜下出血涉及在脑与覆盖脑的组织之间的被称为蛛网膜下腔的区域中的出血。这个类型的中风最经常由动脉瘤破裂引起。脑(Cerebral/brain)缺血是一种在没有足够血液流向脑以满足代谢需求时发生的状况，并且可被视为中风的亚型。这导致供氧受限或脑缺氧，并且导致脑组织死亡、脑梗塞或缺血性中风。当将血液携带至脑的血管由血液凝块阻塞时，发生缺血性中风。栓塞性中风和血栓性中风是发生缺血性中风可采用的方式。在栓塞性中风中，血液凝块或斑块片段在身体中某处(通常是心脏)形成，并且行进至脑。一旦处于脑中，凝块即行进至足够小以致阻挡它通行的血管。血栓性中风由在对脑提供血液的动脉中的一者的内部形成的血液凝块引起。

在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗受试者的中风的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐。

当突发性创伤导致对脑的损害时，发生作为一种形式的获得性脑损伤的创伤性脑损伤(TBI)。因为对于逆转由创伤引起的初始脑损害可采取的措施很少，所以医务人员试图使具有TBI的个体稳定，并且集中于预防进一步损伤。主要关注包括确保对脑和身体其余部分的适当供氧，维持足够血流量，以及控制血压。

在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗受试者的创伤性脑损伤的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，本发明提供了一种用于治疗受试者的肝损伤的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐。

对乙酰氨基酚(APAP)用药过量是药物诱发的肝损伤的最常见形式。JNK活化是在APAP代谢期间产生的氧化应激的结果，从而导致肝细胞损害，伴有坏死性和凋亡性细胞死亡。(Nakagawa等人，Gastroenterology.2008，135(4)，1311-21)。已显示ASK1抑制剂针对APAP诱发的肝损伤进行保护(Xie等人，ToxicolAppl Pharmacol.2015，286(1)，1-9；He等人，Asian Pac J Trop Med.2016，9(3)，283-7)。

如本文所用，术语“受试者”和“患者”可互换使用，并且意指需要治疗的哺乳动物，例如伴侣动物(例如狗、猫等)、农场动物(例如母牛、猪、马、绵羊、山羊等)和实验室动物(例如大鼠、小鼠、豚鼠等)。通常，受试者是需要治疗的人。“需要治疗的受试者”是指已患有本文指定的疾病的受试者，或处于显现本文指定的疾病的风险下的受试者。

如本文所用，术语“治疗(treating/treatment)”是指获得所需药理和/或生理作用。作用可为治疗性的，此包括部分地或实质上实现以下结果中的一者或多者：部分地或完全地降低疾病、病症或综合征的程度；使与病症相关的临床症状或指标改善或好转；延迟、抑制或降低疾病、病症或综合征的进展的可能性；和/或延迟疾病、病症或综合征的发作。

本文提供的化合物或其药学上可接受的盐的向受试者施用的剂量可为10μg-500mg。

将本文所述的化合物或其药学上可接受的盐施用至哺乳动物包括任何适合递送方法。将本文所述的化合物或其药学上可接受的盐施用至哺乳动物包括以局部、经肠、胃肠外、经皮、经粘膜、通过吸入、脑池内、硬膜上、阴道内、静脉内、肌肉内、皮下、真皮内或玻璃体内方式将本文所述的化合物或其药学上可接受的盐施用至所述哺乳动物。将本文所述的化合物或其药学上可接受的盐施用至哺乳动物还包括以局部、经肠、胃肠外、经皮、经粘膜、通过吸入、脑池内、硬膜上、阴道内、静脉内、肌肉内、皮下、真皮内或玻璃体内方式向哺乳动物施用在所述哺乳动物的身体内或在所述哺乳动物的身体的表面上代谢成本文所述的化合物或其药学上可接受的盐的化合物。

因此，如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可与药学上可接受的媒介物诸如惰性稀释剂或可吸收的可食用载体组合来全身性施用，例如口服施用。它们可被封闭在硬壳或软壳明胶胶囊中，可被压制成片剂，或可直接与患者的膳食的食物合并。对于口服治疗性施用，如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可与一种或多种赋形剂组合，并且以可摄取片剂、经颊片剂、锭剂、胶囊、酏剂、混悬剂、糖浆或糯米纸囊剂等形式使用。这类组合物和制剂应含有至少约0.1％的活性化合物。组合物和制剂的百分比当然可变化，并且可适宜地在给定单位剂型的重量的约2％至约60％之间。活性化合物在这类在治疗上有用的组合物中的量可为使得将获得有效剂量水平的量。

片剂、锭剂、丸剂、胶囊等可包括以下各物：粘合剂，诸如黄蓍胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；赋形剂，诸如磷酸二钙；崩解剂，诸如玉米淀粉、马铃薯淀粉、海藻酸等；润滑剂，诸如硬脂酸镁；或甜味剂，诸如蔗糖、果糖、乳糖或阿斯巴甜(aspartame)；或调味剂。

活性化合物还可通过输注或注射加以静脉内或腹膜内施用。可在水中制备活性化合物或它的盐的溶液，任选地与无毒表面活性剂混合。

用于注射或输注的示例性药物剂型可包括无菌水溶液或分散液，或适合于临时制备无菌可注射或可输注溶液或分散液的包含活性成分的无菌粉末。在所有情况下，最终剂型在制造和储存条件下都应是无菌的、流动的以及稳定的。

可通过将活性化合物以所需量与如所需要的在以上列举的各种其他成分一起合并在适当溶剂中，随后进行过滤灭菌来制备无菌可注射溶液。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下，优选制备方法可为真空干燥和冷冻干燥技术，所述技术可产生活性成分加上存在于先前经无菌过滤的溶液中的任何额外所需成分的粉末。

示例性固体载体可包括精细分散固体，诸如滑石、粘土、微晶纤维素、二氧化硅、氧化铝等。有用的液体载体包括如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可任选地借助于无毒表面活性剂在有效水平下溶解或分散于其中的水、醇或二醇或水-醇/二醇掺合物。

如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐的有用剂量可通过比较它们的体外活性和在动物模型中的体内活性来确定。用于将在小鼠和其他动物中的有效剂量外推至人的方法为本领域所知；例如参见通过引用以它的整体并入本文的美国专利第4,938,949号。

如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐的为在治疗中使用所需的量可不仅随所选特定盐而变化，而且还随施用途径、所治疗疾患的性质以及患者的年龄和状况而变化，并且可最终由主治医师或临床医师酌情决定。然而，一般来说，剂量可在每天每kg体重约0.1至约10mg的范围内。

如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可适宜地以单位剂型施用；例如每个单位剂型含有0.01至10mg、或0.05至1mg的活性成分。在一些实施方案中，5mg/kg或更小的剂量可为适合的。

所需剂量可适宜地以单次剂量或以在适当间隔下施用的分次剂量提供。

所公开方法可包括一种药盒，所述药盒包括如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐和指导材料，所述指导材料可描述将如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐或包含如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐的组合物施用至细胞或受试者。这应被解释为包括为本领域技术人员所知的其他药盒实施方案，诸如包括(诸如无菌)溶剂的药盒，所述溶剂用于在将如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物施用至细胞或受试者之前溶解或混悬如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物。在一些实施方案中，受试者可为人。

例示

实施例1：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

向6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(72mg，0.35mmol)和3-甲氧基-1-甲基-吡唑-4-甲酸(55mg，0.35mmol)的混合物中添加Et₃N(0.73mL，5.3mmol)和丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.63mL)，并且在80℃下将反应加热4h。在这个时间之后，将混合物用少量MeOH(～2mL)淬灭，接着将它分配于EtOAc与水之间。将分离的水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将粗产物用MeCN(～2mL)湿磨，并且在真空下干燥以产生呈黄色固体状的标题化合物(22mg，18％)。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 8.85(s，1H)，8.34(d，J＝7.94Hz，1H)，7.93-8.10(m，2H)，7.81(d，J＝7.94Hz，1H)，5.29-5.62(m，1H)，4.10(s，3H)，3.81(s，3H)，1.64(d，J＝6.71Hz，6H)。MS(ESI)：342.2[M+H]⁺。

实施例2：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

向6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(61mg，0.30mmol)和1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸(45mg，0.36mmol)的混合物中添加Et₃N(0.5mL，3.6mmol)和丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.5mL)，并且在80℃下将混合物加热4h。在这个时间之后，将反应用少量MeOH(～2mL)淬灭，接着将它分配于EtOAc与水之间。将分离的水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将产物通过正相柱来纯化，用EtOAc/EtOH(3/1)洗脱，以产生标题化合物(34mg，36％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.82(s，1H)，8.20-8.32(m，2H)，8.08(s，1H)，7.98(t，J＝8.03Hz，1H)，7.81(d，J＝7.53Hz，1H)，5.75(quin，J＝6.71Hz，1H)，3.97(s，3H)，1.54(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(ESI)：312.2[M+H]⁺。

实施例3：3-乙氧基-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

向6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(39mg，0.19mmol和3-乙氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸(34mg，0.20mmol)的混合物中添加Et₃N(0.3mL，2.16mmol)和丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.3mL)，并且在110℃下将混合物用微波辐射加热1h。在这个时间之后，将反应用少量MeOH(～2mL)淬灭，接着将它分配于EtOAc与水之间。将分离的水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将粗产物用MeCN(～2mL)湿磨，并且在真空下干燥以产生呈灰白色固体状的标题化合物(20mg，29％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.84(s，1H)，8.38(d，J＝8.03Hz，1H)，7.93-8.04(m，2H)，7.82(d，J＝7.28Hz，1H)，5.54(quin，J＝6.78Hz，1H)，4.45(q，J＝7.03Hz，2H)，3.80(s，3H)，1.60(d，J＝6.78Hz，6H)，1.51(t，J＝7.03Hz，3H)。MS(ESI)：356.2[M+H]⁺。

实施例4：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡定-2-基)-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

向6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(30mg，O.15mmol)和3-(甲氧基甲基)-1-甲基-吡唑-4-甲酸(27mg，0.16mmol)的混合物中添加Et₃N(328μL，2.37mmol)和丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.25mL)，并且在110℃下将反应用微波辐射加热1.5h。在这个时间之后，将混合物用少量MeOH(～1mL)淬灭，接着将它分配于EtOAc与水之间。将分离的水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将产物通过正相柱来纯化，用EtOAc/EtOH(3/1)洗脱，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(34mg，64％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.84(s，1H)，8.31(d，J＝8.28Hz，1H)，8.07(s，1H)，8.00(t，J＝8.03Hz，1H)，7.84(d，J＝7.53Hz，1H)，5.74(dt，J＝13.36，6.75Hz，1H)，4.94(s，2H)，3.89-4.06(m，3H)，3.45(s，3H)，1.42-1.68(m，6H)。MS(ESI)：356.0[M+H]⁺。

实施例5：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例2中所述的一般性程序来合成产物，但使用1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸代替1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸以在冻干之后产生呈灰白色粉末状的标题化合物(48mg，51％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.82(s，1H)，8.34(s，1H)，8.25(d，J＝8.03Hz，1H)，8.00(t，J＝8.03Hz，1H)，7.84(d，J＝7.03Hz，1H)，5.71(quin，J＝6.71Hz，1H)，4.01(s，3H)，1.53(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(ESI)：380.1[M+H]⁺。

实施例6：3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例2中所述的一般性程序来合成产物，但使用3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸代替1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸以在冻干之后产生呈灰白色粉末状的标题化合物(48mg，53％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.82(s，1H)，8.36(s，1H)，8.28(d，J＝8.03Hz，1H)，7.99(t，J＝8.03Hz，1H)，7.83(d，J＝7.28Hz，1H)，6.97-7.43(m，1H)，5.69(dt，J＝13.49，6.68Hz，1H)，4.00(s，3H)，1.55(d，J＝6.53Hz，6H)。MS(ESI)：362.1[M+H]⁺。

实施例7：1-乙基-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

向6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(102mg，0.5mmol)和1-乙基-3-甲氧基-吡唑-4-甲酸(85mg，0.5mmol)的混合物中添加Et₃N(1mL，7.21mmol)和丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，1mL)，并且在80℃下将反应加热3.5h。在这个时间之后，将混合物用少量MeOH(～2mL)淬灭，接着将它分配于EtOAc与水之间。将分离的水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将粗产物用MeCN(～2mL)湿磨，并且在真空下干燥以产生呈浅棕色固体状的标题化合物(13mg，7％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.85(s，1H)，8.34(d，J＝8.28Hz，1H)，8.06(s，1H)，7.98(t，J＝8.03Hz，1H)，7.81(d，J＝7.28Hz，1H)，5.44(quin，J＝6.78Hz，1H)，3.95-4.17(m，5H)，1.64(d，J＝6.78Hz，6H)，1.46(t，J＝7.28Hz，3H)。MS(ESI)：356.2[M+H]⁺。

实施例8：1-苯甲基-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

向6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(203mg，1.00mmol)和1-苯甲基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸(232mg，1.00mmol)的混合物中添加Et₃N(2mL 14.4mmol)和丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，2mL)，并且在80℃下将混合物加热4h。在这个时间之后，将反应用少量MeOH(～2mL)淬灭，接着将它分配于EtOAc与饱和NaHCO₃之间。将分离的水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将粗产物用MeCN(～5mL)湿磨，并且在真空下干燥以产生呈浅棕色固体状的标题化合物(142mg，34％)。¹HNMR(400MHz，MeOD)δppm 8.87(s，1H)，8.36(d，J＝8.03Hz，1H)，8.13(s，1H)，8.00(t，J＝8.03Hz，1H)，7.83(d，J＝7.03Hz，1H)，7.29-7.45(m，5H)，5.46(quin，J＝6.78Hz，1H)，5.26(s，2H)，4.12(s，3H)，1.65(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(ESI)：418.O[M+H]⁺。

实施例9：1-(叔丁基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例2中所述的一般性程序来合成产物，但使用1-(叔丁基)-1H-吡唑-4-甲酸代替1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸以产生呈灰白色固体状的标题化合物(63mg，75％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.82(s，1H)，8.47(s，1H)，8.26(d，J＝8.03Hz，1H)，8.11(s，1H)，7.98(t，J＝8.03Hz，1H)，7.80(d，J＝7.28Hz，1H)，5.75(dt，J＝13.49，6.68Hz，1H)，1.64(s，9H)，1.54(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(ESI)：354.2[M+H]⁺。

实施例10：3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：6-氨基吡啶甲酰肼

在100℃下将6-氨基吡啶甲酸甲酯(1.0g，6.6mmol)、水合肼(2.3g，23mmol，2.2mL，50％纯度)于水(3mL)和MeOH(3mL)中的溶液加热2h。在这个时间之后，将挥发物在减压下移除以提供白色产物，将其与甲苯(40mL)共蒸发以产生标题化合物(980mg，98％)。

步骤B：(E)-N′-(6-(2-((E)-(二甲基氨基)亚甲基)肼-1-羰基)吡啶-2-基)-N，N-二甲基甲脒

在室温下将1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-甲胺(2.6mL，19.7mmol)添加至6-氨基吡啶甲酰肼(1.0g，6.6mmol)和MeCN(10mL)中，并且在75℃下将反应加热并搅拌4h。使反应冷却至室温，并且过滤以产生标题化合物(1.5g，87％)。MS(ESI)：263.0[M+H]⁺。

步骤C：6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺

将(E)-N′-(6-(2-((E)-(二甲基氨基)亚甲基)肼-1-羰基)吡啶-2-基)-N，N-二甲基甲脒(1.5g，5.7mmol)和1，1，1-三氟丙烷-2-胺(1.4g，12.8mmol)溶解于MeCN(9mL)中。接着添加乙酸(3mL)，并且在120℃下将所得混合物在密封管中加热过夜。在这个时间之后，将反应浓缩，溶解于EtOAc中，并且用NaHCO₃(饱和水溶液)洗涤。将分离的有机相经MgSO₄干燥，过滤，并且浓缩以产生呈无色油状的粗产物。通过硅胶色谱法(EtOAc)进行的纯化产生呈白色固体状的标题化合物(1.40g，95％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.91(s，1H)，7.57(dd，J＝8.4，7.4Hz，1H)，7.34(dd，J＝7.3，0.8Hz，1H)，6.99(quin，J＝7.3Hz，1H)，6.65(dd，J＝8.4，0.9Hz，1H)，1.84(d，J＝7.3Hz，3H)，MS(ESI)：258.2[M+H]⁺。

步骤D：3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将3-甲氧基-1-甲基-吡唑-4-甲酸(704mg，4.5mmol)和6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(1.1g，4.5mmol)溶解于Et₃N(6.2mL，45mmol)中。接着添加丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，4.6mL)，并且在80℃下将反应加热3h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且通过添加MeOH(5mL)来淬灭。将所得固体在真空下干燥以产生标题化合物(110mg，62％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.17(s，1H)，8.44(s，1H)，8.39(dd，J＝8.5，0.8Hz，1H)，8.07(dd，J＝7.5，0.8Hz，1H)，7.80-7.94(m，2H)，6.74(quin，J＝7.2Hz，1H)，4.09(s，3H)，3.81(s，3H)，1.81(d，J＝7.0Hz，3H)。MS(ESI)：396.1[M+H]⁺。

实施例11：(R)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：(R)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺

将N，6-双[(E)-二甲基氨基亚甲基氨基]吡啶-2-甲酰胺(1.0g，3.8mmol)和(2R)-1，1，1-三氟丙烷-2-胺(966mg，8.5mmol)溶解于MeCN(9mL)中。接着添加乙酸(3mL)，并且在120℃下将所得混合物在密封管中加热过夜。在这个时间之后，将反应浓缩，溶解于EtOAc中，并且用NaHCO₃(饱和水溶液)洗涤。将分离的有机相经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩以产生呈无色油状的粗标题产物。将它通过硅胶色谱法(EtOAc 100％)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(860mg，88％)。

步骤B：(R)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

向6-[(4R)-4-(2，2，2-三氟-1-甲基-乙基)-1，2，4-三唑-3-基]吡啶-2-胺(48mg，0.19mmol)和3-甲氧基-1-甲基-吡唑-4-甲酸(32mg，0.21mmol)于Et₃N(0.3mL，2.2mmol)中的混合物中添加丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.3mL)。在110℃下将混合物用微波辐射加热1h。在这个时间之后，将混合物用少量MeOH(～0.5mL)淬灭，接着将它分配于EtOAc与水之间。将水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将粗产物用MeCN(～1mL)湿磨，并且在真空下干燥以产生呈灰白色固体状的标题化合物(26mg，35％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.01(s，1H)，8.33(dd，J＝8.16，0.88Hz，1H)，7.81-8.08(m，3H)，6.79(quin，J＝7.22Hz，1H)，4.10(s，3H)，3.81(s，3H)，1.87(d，J＝7.28Hz，3H)。MS(ESI)：396.1[M+H]⁺。

实施例12：(S)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：(S)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺

将N，6-双[(E)-二甲基氨基亚甲基氨基]吡啶-2-甲酰胺(650mg，2.5mmol)和(2S)-1，1，1-三氟丙烷-2-胺(628mg，5.5mmol)溶解于MeCN(9.0mL)中。接着添加乙酸(3.0mL)，并且在120℃下将所得混合物在密封管中加热过夜。在这个时间之后，将反应浓缩，溶解于EtOAc中，并且用NaHCO₃(饱和水溶液)洗涤。将分离的有机相经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩以产生呈无色油状的粗产物。通过硅胶色谱法(EtOAc，100％)进行的纯化产生呈白色固体状的标题化合物(580mg，91％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.91(s，1H)，7.57(dd，J＝8.4，7.4Hz，1H)，7.34(dd，J＝7.3，0.8Hz，1H)，6.99(quin，J＝7.3Hz，1H)，6.65(dd，J＝8.4，0.9Hz，1H)，1.84(d，J＝7.3Hz，3H)，MS(ESI)：258.2[M+H]⁺。

步骤B：(S)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将3-甲氧基-1-甲基-吡唑-4-甲酸(515mg，3.3mmol)和(S)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(850mg，3.3mmol)溶解于Et₃N(4.6mL，33.0mmol)中。接着添加丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，3.4mL)，并且在80℃下将反应加热3h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且通过添加MeOH(2mL)来淬灭。过滤所得固体，并且在真空下干燥以产生呈白色固体状的标题化合物(950mg，73％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.01(s，1H)，8.33(dd，J＝8.16，0.88Hz，1H)，7.81-8.08(m，3H)，6.79(quin，J＝7.22Hz，1H)，4.10(s，3H)，3.81(s，3H)，1.87(d，J＝7.28Hz，3H)。MS(ESI)：396.1[M+H]⁺。

实施例13：1-乙基-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例2中所述的一般性程序来合成产物，但使用1-乙基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸代替1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸，以及6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(17mg，22％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.01(s，1H)，8.34(d，J＝7.28Hz，1H)，8.06(s，1H)，7.81-8.04(m，2H)，6.79(quin，J＝7.15Hz，1H)，3.99-4.21(m，5H)，1.87(d，J＝7.28Hz，3H)，1.46(t，J＝7.28Hz，3H)。MS(ESI)：410.0[M+H]⁺。

实施例14：((S)-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例3中所述的一般性程序来合成产物，但使用3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸代替3-乙氧基-1-甲基-吡唑-4-甲酸，以及(S)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(27mg，66％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.00(s，1H)，8.22(dd，J＝8.16，0.88Hz，1H)，7.81-8.13(m，3H)，7.16(dt，J＝14.56，7.28Hz，1H)，4.94(s，2H)，3.96(s，3H)，3.42(s，3H)，1.89(d，J＝7.28Hz，3H)。MS(ESI)：410.0[M+H]⁺。

实施例15：(S)-1-乙基-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例4中所述的一般性程序来合成产物，但使用1-乙基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸代替3-(甲氧基甲基)-1-甲基-吡唑-4-甲酸，以及(S)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(11mg，18％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.01(s，1H)，8.33(dd，J＝8.16，0.88Hz，1H)，8.06(s，1H)，7.84-8.03(m，2H)，6.79(quin，J＝7.22Hz，1H)，4.00-4.15(m，5H)，1.87(d，J＝7.28Hz，3H)，1.46(t，J＝7.28Hz，3H)。MS(ESI)：410.2[M+H]⁺。

实施例16：(S)-3-乙氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例3中所述的一般性程序来合成产物，但使用(S)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺以产生呈灰白色固体状的标题化合物(26mg，49％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.02(s，1H)，8.37(dd，J＝8.16，0.88Hz，1H)，7.88-8.10(m，3H)，6.75(quin，J＝7.22Hz，1H)，4.46(dtt，J＝10.54，7.03，7.03，3.39，3.39Hz，2H)，3.80(s，3H)，1.88(d，J＝7.03Hz，3H)，1.51(t，J＝7.03Hz，3H)。MS(ESI)：410.2[M+H]⁺。

实施例17：N-(6-(4-环丁基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：6-(4-环丁基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺

向于微波管中的(E)-N′-(6-(2-((E)-(二甲基氨基)亚甲基)肼-1-羰基)吡啶-2-基)-N，N-二甲基甲脒(263mg，1.00mmol)和环丁胺(171μL，2.00mmol)的混合物中依次添加MeCN(3mL)和乙酸(1mL)。在120℃下将混合物在热板中加热24h。在这个时间之后，将反应分配于EtOAc与饱和NaHCO₃之间。将水层通过EtOAc来萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将产物通过正相柱色谱法来纯化，用100％EtOAc洗脱，以产生标题化合物(188mg，87％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.79(s，1H)，7.55(dd，J＝8.28，7.53Hz，1H)，7.17(d，J＝7.28Hz，1H)，6.64(d，J＝8.28Hz，1H)，5.38-5.59(m，1H)，2.48-2.67(m，2H)，2.39(quind，J＝9.57，9.57，9.57，9.57，2.64Hz，2H)，1.79-1.99(m，2H)。MS(ESI)：216.0[M+H]⁺。

步骤B：N-(6-(4-环丁基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例3中所述的一般性程序来合成产物，但使用3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸代替3-乙氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸，以及6-(4-环丁基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状(18mg，27％)的标题化合物(18mg，27％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.88(s，1H)，8.34(d，J＝8.28Hz，1H)，8.02(s，1H)，7.96(t，J＝8.03Hz，1H)，7.82(d，J＝7.53Hz，1H)，5.44(quin，J＝8.53Hz，1H)，4.12(s，3H)，3.81(s，3H)，2.59-2.73(m，2H)，2.42-2.59(m，2H)，1.86-2.15(m，2H)。MS(ESI)：354.1[M+H]⁺。

实施例18：N-(6-(4-环丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例17中所述的一般性程序来合成产物，但在步骤A中使用环丙胺代替环丁胺以产生呈灰白色固体状的标题化合物(10mg，17％)。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 8.63(s，1H)，8.34(d，J＝8.55Hz，1H)，7.89-8.17(m，2H)，7.81(d，J＝7.32Hz，1H)，4.08(s，3H)，3.86-3.94(m，1H)，3.81(s，3H)，1.12-1.24(m，2H)，0.92-1.12(m，2H)。MS(ESI)：340.1[M+H]⁺。

实施例19：N-(6-(4-(3，3-二氟环丁基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例17中所述的一般性程序来合成产物，但在步骤A中使用3，3-二氟环丁烷-1-胺代替环丁胺以产生呈灰白色固体状的标题化合物(14mg，对于最后一步来说是24％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.93(s，1H)，8.36(dd，J＝8.16，0.88Hz，1H)，7.76-8.08(m，3H)，5.32-5.70(m，1H)，4.12(s，3H)，3.81(s，3H)，3.00-3.40(m，4H)。MS(ESI)：390.0[M+H]⁺。

实施例20：N-(6-(4-环戊基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例17中所述的一般性程序来合成产物，但在步骤A中使用环戊胺代替环丁胺以产生呈灰白色固体状的标题化合物(22mg，对于最后一步来说是40％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.80(s，1H)，8.34(d，J＝8.28Hz，1H)，7.90-8.13(m，2H)，7.81(d，J＝7.53Hz，1H)，5.47(quin，J＝7.09Hz，1H)，4.10(s，3H)，3.81(s，3H)，2.28-2.47(m，2H)，1.54-2.12(m，6H)。MS(ESI)：368.0[M+H]⁺。

实施例21：N-(6-(4-(叔丁基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例17中所述的一般性程序来合成产物，但在步骤A中使用2-甲基丙烷-2-胺代替环丁胺以产生呈浅黄色固体状的标题化合物(17mg，对于最后一步来说是48％)。¹HNMR(400MHz，MeOD)δppm 8.76(s，1H)，8.39(d，J＝8.28Hz，1H)，8.02(s，1H)，7.98(t，J＝8.03Hz，1H)，7.50(d，J＝7.53Hz，1H)，4.06(s，3H)，3.80(s，3H)，1.68(s，9H)。MS(ESI)：356.2[M+H]⁺。

实施例22：(S)-3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将3-(二氟甲基)-1-甲基-吡唑-4-甲酸(75mg，0.43mmol)和(S)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(110mg，0.43mmol)溶解于Et₃N(0.60mL，4.3mmol)中。接着添加丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.44mL)，并且在80℃下将反应加热3h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且通过添加MeOH(2mL)来淬灭。过滤所得固体，并且在真空下干燥以产生呈白色固体状的标题化合物(150mg，85％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.01(s，1H)，8.30-8.38(m，1H)，8.18-8.26(m，1H)，7.92-8.05(m，2H)，7.05-7.41(m，2H)，4.02(s，3H)，1.85-1.94(m，3H)。MS(ESI)：416.0[M+H]⁺。

实施例23：(R)-3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将3-(二氟甲基)-1-甲基-吡唑-4-甲酸(68mg，0.39mmol)和6-[4-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙基]-1，2，4-三唑-3-基]吡啶-2-胺(100mg，0.39mmol)溶解于Et₃N(0.54mL，3.9mmol)中。接着添加丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.4mL)，并且在80℃下将反应加热3h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且通过添加MeOH(2mL)来淬灭。过滤所得固体，并且在真空下干燥以产生标题化合物(92mg，57％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.01(s，1H)，8.30-8.38(m，1H)，8.18-8.26(m，1H)，7.92-8.05(m，2H)，7.05-7.41(m，2H)，4.02(s，3H)，1.85-1.94(m，3H)。MS(ESI)：416.0[M+H]⁺。

实施例24：3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(6-(4-(1-(三氟甲基)环丙基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：6-(4-(1-(三氟甲基)环丙基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺

将N，6-双[(E)-二甲基氨基亚甲基氨基]吡啶-2-甲酰胺(1.0g，3.8mmol)和1-(三氟甲基)环丙胺(954mg，0.20mL，7.6mmol)溶解于MeCN(6mL)中。接着添加乙酸(2mL)，并且在120℃下将所得混合物在密封管中加热过夜。在这个时间之后，将反应浓缩，溶解于EtOAc中，并且用NaHCO₃(饱和水溶液)洗涤。将分离的有机相经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩以产生呈无色油状的粗产物。通过硅胶色谱法(EtOAc)进行的纯化产生呈白色固体状的标题化合物(223mg，22％)。MS(ESI)：270.1[M+H]⁺。

步骤B：3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(6-(4-(1-(三氟甲基)环丙基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将3-(二氟甲基)-1-甲基-吡唑-4-甲酸(65mg，0.37mmol)和6-[4-[1-(三氟甲基)环丙基]-1，2，4-三唑-3-基]吡啶-2-胺(100mg，O.37mmol)溶解于Et₃N(0.50mL，3.7mmol)中。接着添加丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.4mL)，并且在80℃下将反应加热3h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且通过添加MeOH(2mL)来淬灭。过滤所得固体，并且在真空下干燥以产生标题化合物(100mg，63％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.85(br s，1H)，8.44(dd，J＝8.4，0.9Hz，1H)，8.37(s，1H)，8.13(s，1H)，8.09(dd，J＝7.7，0.9Hz，1H)，7.88(t，J＝8.0Hz，1H)，6.70-7.03(m，1H)，3.98(s，3H)，1.77-1.90(m，2H)，1.47-1.59(m，2H)。MS(ESI)：428.0[M+H]⁺。

实施例25：3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(1-(三氟甲基)环丙基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将3-甲氧基-1-甲基-吡唑-4-甲酸(70mg，0.45mmol)和6-[4-[1-(三氟甲基)环丙基]-1，2，4-三唑-3-基]吡啶-2-胺(120mg，0.45mmol)溶解于Et₃N(618μL，4.5mmol)中。接着添加丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.45mL)，并且在80℃下将反应加热3h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且通过添加MeOH(2mL)来淬灭。过滤所得固体，并且在真空下干燥以产生标题化合物(110mg，61％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.17(s，1H)，8.41(dd，J＝8.3，0.8Hz，1H)，8.38(s，1H)，7.98-8.03(m，1H)，7.81-7.88(m，2H)，4.08(s，3H)，3.81(s，3H)，3.77-3.77(m，1H)，1.76-1.85(m，2H)，1.48-1.57(m，2H)。MS(ESI)：408.0[M+H]⁺。

实施例26：N-(6-(4-(1，1-二氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：6-(4-(1，1-二氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺

将N，6-双[(E)-二甲基氨基亚甲基氨基]吡啶-2-甲酰胺(600mg，2.3mmol)和1，1-二氟丙烷-2-胺盐酸盐(435mg，3.3mmol)溶解于MeCN(6mL)和乙酸(2mL)的溶液中。在120℃下将反应在密封管中加热过夜。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且在真空中浓缩。将反应用EtOAc稀释，并且用饱和NaHCO₃(x2)洗涤。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并且浓缩。通过硅胶色谱法(EtOAc 100％)进行的纯化产生呈白色固体状的标题化合物(510mg，93％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.77(s，1H)，7.48-7.63(m，1H)，7.29(dd，J＝7.4，0.9Hz，1H)，6.56-6.72(m，1H)，5.95-6.41(m，2H)，1.68(d，J＝7.3Hz，3H)。MS(ESI)：240.0[M+H]⁺。

步骤B：N-(6-(4-(1，1-二氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

将3-甲氧基-1-甲基-吡唑-4-甲酸(104mg，0.67mmol)和6-[4-(2，2-二氟-1-甲基-乙基)-1，2，4-三唑-3-基]吡啶-2-胺(160mg，0.67mmol)溶解于Et₃N(0.93mL，6.69mmol)中。接着添加丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.7mL)，并且在80℃下将反应加热3h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且通过添加MeOH(2mL)来淬灭。过滤所得固体，并且在真空下干燥以产生呈白色固体状的标题化合物(83mg，33％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.11(s，1H)，8.41(td，J＝8.2，1.0Hz，2H)，8.06(dd，J＝7.7，0.9Hz，1H)，7.85-7.91(m，1H)，7.83(s，1H)，6.17-6.49(m，1H)，5.80-5.93(m，1H)，4.10(s，3H)，3.81(s，3H)，1.73(d，J＝7.3Hz，3H)。MS(ESI)：378.0[M+H]⁺。

实施例27和实施例28：(S)-N-(6-(4-(1，1-二氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺和(R)-N-(6-(4-(1，1-二氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺。

将N-(6-(4-(1，1-二氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺通过手性制备型SFC(使用CHIRALPAK AS-H 5μm，30x250mm柱，并且使用在100mL/min的流速下的作为流动相的30％MeOH(含有0.1％Et₂NH)/CO₂、ABPR120巴、MBPR 40psi)来纯化以按照洗脱的顺序产生：

实施例27(任意指定绝对立体化学)(11mg，37％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm9.11(s，1H)，8.41(td，J＝8.2，1.0Hz，2H)，8.06(dd，J＝7.7，0.9Hz，1H)，7.85-7.91(m，1H)，7.83(s，1H)，6.17-6.49(m，1H)，5.80-5.93(m，1H)，4.10(s，3H)，3.81(s，3H)，1.73(d，J＝7.3Hz，3H)。MS(ESI)：378.0[M+H]⁺。

实施例28(任意指定绝对立体化学)(12mg，40％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm9.11(s，1H)，8.41(td，J＝8.2，1.0Hz，2H)，8.06(dd，J＝7.7，0.9Hz，1H)，7.85-7.91(m，1H)，7.83(s，1H)，6.17-6.49(m，1H)，5.80-5.93(m，1H)，4.10(s，3H)，3.81(s，3H)，1.73(d，J＝7.3Hz，3H)。MS(ESI)：378.0[M+H]⁺。

实施例29：(S)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(3-甲基丁烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：(S)-6-(4-(3-甲基丁烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺

向于微波管中的(E)-N′-(6-(2-((E)-(二甲基氨基)亚甲基)肼-1-羰基)吡啶-2-基)-N，N-二甲基甲脒(1.05g，4.00mmol)和(S)-3-甲基丁烷-2-胺(1.05mL，9.06mmol)的混合物中依次添加MeCN(6mL)和乙酸(2mL)。在120℃下将混合物在热板中加热24h。在这个时间之后，将反应分配于EtOAc与饱和NaHCO₃之间。将分离的水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将产物通过正相柱色谱法来纯化，用EtOAc/EtOH(3/1)洗脱，以产生标题化合物(802mg，87％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.73(s，1H)，7.57(dd，J＝8.28，7.53Hz，1H)，7.17(d，J＝7.03Hz，1H)，6.65(d，J＝8.03Hz，1H)，5.08-5.34(m，1H)，1.96-2.11(m，1H)，1.55(d，J＝6.78Hz，3H)，30.90-0.97(m，3H)，0.67-0.78(m，3H)。MS(ESI)：232.0[M+H]⁺

步骤B：((S)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(3-甲基丁烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例3中所述的一般性程序来合成产物，但使用3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸代替3-乙氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸，以及(S)-6-(4-(3-甲基丁烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(50mg，55％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.84(s，1H)，8.35(d，J＝8.03Hz，1H)，7.92-8.07(m，2H)，7.81(d，J＝7.28Hz，1H)，5.12-5.34(m，1H)，4.11(s，3H)，3.81(s，3H)，2.08-2.27(m，1H)，1.60(d，J＝7.03Hz，3H)，1.04(d，J＝6.78Hz，3H)，0.86(d，J＝6.78Hz，3H)。MS(ESI)：370.0[M+H]⁺。

实施例30：N-(6-(4-(2，2-二氟环丁基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：6-(4-(2，2-二氟环丁基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺

向(E)-N′-(6-(2-((E)-(二甲基氨基)亚甲基)肼-1-羰基)吡啶-2-基)-N，N-二甲基甲脒(501mg，1.91mmol)和2，2-二氟环丁烷-1-胺盐酸盐(558mg，3.89mmol)的混合物中添加MeCN(3mL)和乙酸(1mL)，并且在120℃下将反应在热板中加热24h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且分配于EtOAc与NaHCO₃(饱和水溶液)之间。将水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中蒸发。将残余物通过柱色谱法来纯化，使用EtOAc作为洗脱剂以产生标题化合物(203mg，42％)。MS(ESI)：252.0[M+H]⁺。

步骤B：N-(6-(4-(2，2-二氟环丁基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例3中所述的一般性程序来合成产物，但使用3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸代替3-乙氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸，以及6-(4-(2，2-二氟环丁基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(19mg，34％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.95(d，J＝2.01Hz，1H)，8.38(d，J＝8.53Hz，1H)，7.91-8.09(m，2H)，7.86(d，J＝7.28Hz，1H)，6.07-6.39(m，1H)，4.10(s，3H)，3.81(s，3H)，2.42-2.80(m，4H)。MS(ESI)：390.0[M+H]⁺。

实施例31和实施例32：(S)-N-(6-(4-(2，2-二氟环丁基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺和(R)-N-(6-(4-(2，2-二氟环丁基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

将N-[6-[4-(2，2-二氟环丁基)-1，2，4-三唑-3-基]-2-吡啶基]-3-甲氧基-1-甲基-吡唑-4-甲酰胺(34mg，0.087mmol，来自实施例30)通过手性HPLC(使用CHIRALPAK AD-H5μm，30x250mm柱，并且使用在100mL/min的流速下的作为洗脱剂的25％MeOH/0.1％Et₂NH/CO₂溶液，ABPR 120巴，MBPR 40psi)来分离以产生：

实施例31(任意指定绝对立体化学)(11mg，32％)：¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm8.97(d，J＝1.76Hz，1H)，8.39(d，J＝8.28Hz，1H)，7.91-8.08(m，2H)，7.87(d，J＝7.53Hz，1H)，6.10-6.47(m，1H)，4.11(s，3H)，3.82(s，3H)，2.42-2.84(m，4H)。(ESI)：390.1[M+H]⁺。

实施例32(任意指定绝对立体化学)(8mg，24％)：¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.96(d，J＝1.76Hz，1H)，8.38(d，J＝7.78Hz，1H)，7.93-8.08(m，2H)，7.86(d，J＝7.28Hz，1H)，6.14-6.44(m，1H)，4.10(s，3H)，3.82(s，3H)，2.41-2.81(m，4H)。(ESI)：390.1[M+H]⁺。

实施例33和实施例34：(S)-3-甲氧基-N-(6-(4-(1-甲氧基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺和(R)-3-甲氧基-N-(6-(4-(1-甲氧基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺。

步骤A：6-(4-(1-甲氧基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺

在90℃下将1-甲氧基丙烷-2-胺(0.12mL，1.14mmol)和N-[(E)-二甲基氨基亚甲基氨基]-6-[(Z)-二甲基氨基亚甲基氨基]吡啶-2-甲酰胺(300mg，1.14mmol)于MeCN(7.5mL)和乙酸(4.5mL)的混合物中的溶液加热20h。在这个时间之后，将所得浅黄色溶液在减压下浓缩。将剩余黄色油状物溶解于MeOH中并添加氢氧化钠(120mg，3.0mmol)，并且在50℃下将所得橙色反应混合物加热2h。在这个时间之后，将挥发物移除，并且将所得残余物通过制备型HPLC(使用Sunfire Prep C18 OBD，5μm 30x50mm柱，并且在50mL/min的流速下在采用0.1％TFA的情况下历经20分钟使用100％水(初始条件)至80％水/20％MeCN作为流动相)来纯化，以产生标题化合物(156mg，68％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.17(s，1H)，7.78(dd，J＝7.3，8.8Hz，1H)，7.29(dd，J＝0.8，7.3Hz，1H)，6.90(dd，J＝0.8，8.8Hz，1H)，5.45(dquin，J＝4.1，6.9Hz，1H)，3.76-3.63(m，2H)，3.30(s，3H)，1.60(d，J＝7.0Hz，3H)。MS(ESI)：234.1[M+H]⁺。

步骤B：rac-3-甲氧基-N-(6-(4-(1-甲氧基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

在室温下向6-[4-(2-甲氧基-1-甲基-乙基)-1，2，4-三唑-3-基]吡啶-2-胺(80mg，0.35mmol)和DMAP(4mg，0.03mmol)于DCE(2mL)和DIPEA(240μL，1.37mmol)中的溶液中添加3-甲氧基-1-甲基-吡唑-4-羰基氯(180mg，1.0mmol)(由在亚硫酰氯中加热相应酰氯15分钟并移除挥发物来获得)。在室温下将反应搅拌30分钟，并且在这个时间之后，将混合物在减压下浓缩。将产物通过制备型HPLC(使用XTerra Prep RP18 OBD，10μm 50x250mm柱，并且在50mL/min的流速下从90/10至10/90使用水(含有0.1％TFA)/MeCN作为流动相)来纯化，以产生标题化合物(10mg，8％)。¹H NMR(400MHz，CD3CN)δppm 9.20(br s，1H)，8.49(s，1H)，8.29(dd，J＝1.0，8.0Hz，1H)，7.93-7.88(m，2H)，7.87-7.82(m，1H)，5.59(dquin，J＝4.5，6.8Hz，1H)，4.05(s，3H)，3.75(s，3H)，3.74-3.70(m，1H)，3.70-3.65(m，1H)，3.28(s，3H)，1.56(d，J＝7.0Hz，3H)。MS(ESI)：372.2[M+H]⁺。

步骤C：(S)-3-甲氧基-N-(6-(4-(1-甲氧基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺和(R)-3-甲氧基-N-(6-(4-(1-甲氧基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺。

将3-甲氧基-N-(6-(4-(1-甲氧基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(10mg)通过SFC(使用Chiralpak IG 5μm，30x250mm柱，并且使用：在100mL/min的流速下的作为流动相的40％MeOH/0.1％Et₂NH/CO₂溶液，ABPR 120巴，MBPR 40psi)来纯化以按照洗脱的顺序产生：(S)-3-甲氧基-N-(6-(4-(1-甲氧基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(4mg，0.01mmol，3％；任意指定立体化学)和(R)-3-甲氧基-N-(6-(4-(1-甲氧基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(4mg，0.01mmol，3％；任意指定立体化学)。¹H NMR(400MHz，CD3CN)δppm 9.20(br s，1H)，8.49(s，1H)，8.29(dd，J＝1.0，8.0Hz，1H)，7.93-7.88(m，2H)，7.87-7.82(m，1H)，5.59(dquin，J＝4.5，6.8Hz，1H)，4.05(s，3H)，3.75(s，3H)，3.74-3.70(m，1H)，3.70-3.65(m，1H)，3.28(s，3H)，1.56(d，J＝7.0Hz，3H)。MS(ESI)：372.2[M+H]⁺。

实施例35：rac-N-(6-(4-(1-羟基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：6-(4-(1-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺

在120℃下将1-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)丙烷-2-胺(2.5g，8.0mmol)和N-[(E)-二甲基氨基亚甲基氨基]-6-[(Z)-二甲基氨基亚甲基氨基]吡啶-2-甲酰胺(2.1g mg，1.14mmol)于MeCN(24mL)和乙酸(8mL)的混合物中的溶液以两个相同批次在biotage微波中加热1h。将所得浅黄色溶液在减压下浓缩，并且将剩余黄色油状物溶解于EtOAc(100mL)中，并用饱和NaHCO₃(2x20mL)洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将所得粗油状物溶解于MeOH(70mL)中，并添加氢氧化钠(840mg，21.0mmol)，并且在70℃下将所得橙色反应混合物加热6h。将挥发物移除，并且所得残余物不经进一步纯化即用于下一步骤中。

步骤B：N-(6-(4-(1-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

向于反应小瓶中的6-[4-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-1-甲基-乙基]-1，2，4-三唑-3-基]吡啶-2-胺(600mg，1.31mmol)和3-甲氧基-1-甲基-吡唑-4-甲酸(410mg，2.6mmol)的混合物中添加Et₃N(3.6mL，26mmol)和丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，4mL)，并且在80℃下将混合物加热4h。在这个时间之后，将反应用MeOH淬灭，并且与MeOH/MeCN共蒸发数次。将粗残余物分配于饱和NaHCO₃与EtOAc之间。分离有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩以产生标题化合物，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。

步骤C：rac-N-(6-(4-(1-羟基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

在0℃下向N-[6-[4-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-1-甲基-乙基]-1，2，4-三唑-3-基]-2-吡啶基]-3-甲氧基-1-甲基-吡唑-4-甲酰胺(222mg，0.37mmol)于THF(4mL)中的溶液中添加TBAF的溶液(1M，0.41mL)。在15分钟之后，将反应通过添加饱和NaHCO₃溶液来淬灭。接着添加EtOAc，并且产物在水层与有机层之间析出。通过过滤来以白色固体形式分离标题化合物(72mg，54％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.82(s，1H)，8.32(dd，J＝0.9，8.4Hz，1H)，8.01(s，1H)，7.98(dd，J＝7.5，8.3Hz，1H)，7.82(dd，J＝0.9，7.7Hz，1H)，5.48-5.39(m，1H)，4.11(s，3H)，3.97-3.86(m，2H)，3.81(s，3H)，1.64(d，J＝7.0Hz，3H)。MS(ESI)：358.2[M+H]⁺。

实施例36和实施例37：(R)-N-(6-(4-(1-羟基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺和(S)-N-(6-(4-(1-羟基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

将rac-N-(6-(4-(1-羟基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(16mg)通过SFC(使用Chiralpak OX-H 5μm，30x250mm柱，并且使用：在100mL/min的流速下的作为流动相的45％MeOH/0.1％Et₂NH/CO₂溶液，ABPR 120巴，MBPR 40psi)来纯化以按照洗脱的顺序产生：(R)-N-(6-(4-(1-羟基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(8mg，任意指定立体化学)和(S)-N-(6-(4-(1-羟基丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(8mg，任意指定立体化学)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.82(s，1H)，8.32(dd，J＝0.9，8.4Hz，1H)，8.01(s，1H)，7.98(dd，J＝7.5，8.3Hz，1H)，7.82(dd，J＝0.9，7.7Hz，1H)，5.48-5.39(m，1H)，4.11(s，3H)，3.97-3.86(m，2H)，3.81(s，3H)，1.64(d，J＝7.0Hz，3H)。MS(ESI)：358.2[M+H]⁺。

实施例38：4-(3-(6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

步骤A：4-(3-(6-氨基吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

在100℃下将4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(916mg，4.6mmol)和N-[(E)-二甲基氨基亚甲基氨基]-6-[(Z)-二甲基氨基亚甲基氨基]吡啶-2-甲酰胺(1.0g，3.8mmol)于MeCN(24mL)和乙酸(8mL)的混合物中的溶液以两个相同批次在biotage微波中加热1h。将所得浅黄色溶液在减压下浓缩，并且将剩余黄色油状物溶解于EtOAc(100mL)中，并用饱和NaHCO₃(2x20mL)洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将所得粗油状物溶解于MeOH(70mL)中，并添加氢氧化钠(470mg，12mmol)，并且在70℃下将所得橙色反应混合物加热1h。将挥发物移除，并且所得残余物不经进一步纯化即用于下一步骤中。

步骤B：4-(3-(6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

在100℃下将3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸(136mg，0.9mmol)、4-(3-(6-氨基吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.7mmol)、Et₃N(0.80mL，5.8mmol)和丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.5mL)于EtOAc(O.5mL)中的溶液在biotage微波中加热1h。在这个时间之后，将反应通过添加MeOH(5mL)来淬灭。接着添加硅胶(2g)，并且将挥发物移除。依次进行的柱色谱法(12g，SiO₂，使用0-15％MeOH/DCM(含有5％NH₄OH)作为洗脱剂)和质量导向的HPLC纯化(使用5-65％MeCN/H₂O(含有4％NH₄OH)作为洗脱剂)产生标题化合物(28mg，8％)。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm 8.93(s，1H)，8.37(d，J＝8.5Hz，1H)，8.33(s，1H)，8.03(d，J＝7.3Hz，1H)，7.89-7.83(m，2H)，5.35(tt，J＝3.7，11.9Hz，1H)，4.39(br s，2H)，4.08(s，3H)，3.81(s，3H)，3.00-2.84(m，2H)，2.28(br d，J＝11.0Hz，2H)，2.01-1.78(m，2H)，1.48(s，9H)。MS(ESI)：483.1[M+H]⁺。

实施例39：(R)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(哌啶-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A和B：(R)-3-(3-(6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

根据实施例38的步骤A和B中所述的一般性程序来合成产物，但使用(3R)-3-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯代替4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(916mg，4.57mmol)以产生标题化合物(90mg，对于最后一步来说是25％)。¹H NMR(500MHz，CD3CN)δppm 9.11(br s，1H)，8.50(s，1H)，8.30(d，J＝9.2Hz，1H)，7.89(m，J＝7.9Hz，2H)，7.87(s，1H)，5.55-4.87(m，1H)，4.54-4.12(m，1H)，4.00(s，3H)，3.73(s，3H)，3.04-2.94(m，1H)，2.94-2.79(m，1H)，2.33(br s，1H)，2.05-1.79(m，3H)，1.69-1.58(m，1H)，1.24(br s，9H)。MS(ESI)：483.2[M+H]⁺。

步骤C：(R)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(哌啶-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在室温下向(R)-3-(3-(6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(84mg，0.17mmol)于DCM(1.2mL)中的溶液中添加TFA(300μL)。将所得混合物搅拌1h。将挥发物移除，并且将粗残余物通过质量导向的HPLC(使用5-65％MeCN/H₂O(含有4％NH₄OH)作为洗脱剂)来纯化，以产生呈无色薄膜状的标题化合物(35mg，52％)。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 8.91(s，1H)，8.34(d，J＝8.5Hz，1H)，8.02(s，1H)，8.01-7.95(m，1H)，7.81(d，J＝7.3Hz，1H)，5.24-5.02(m，1H)，4.11(s，3H)，3.82(s，3H)，3.33(br s，1H)，3.06(br d，J＝12.2Hz，1H)，2.94(t，J＝11.3Hz，1H)，2.70(br t，J＝12.2Hz，1H)，2.39(br d，J＝12.2Hz，1H)，2.08-1.91(m，2H)，1.81-1.70(m，1H)。MS(ESI)：383.3[M+H]⁺。

实施例40：(S)-3-(3-(6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

步骤A：3-(3-(6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

在100℃下将3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸(141mg，0.9mmol)、(S)-3-(3-(6-氨基吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.7mmol)、Et₃N(840μL，6mmol)和丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.5mL)于EtOAc(0.5mL)中的溶液在biotage微波中加热1h。将反应通过添加MeOH(5mL)来淬灭，接着添加硅胶(2g)，并且将挥发物移除。柱色谱法(12g，SiO₂，0-15％MeOH(5％NH₄OH)/DCM)产生外消旋标题化合物(28mg，8％)。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm 9.11(s，1H)，8.40-8.34(m，1H)，8.30(s，1H)，8.02(d，J＝7.3Hz，1H)，7.87(t，J＝7.9Hz，1H)，7.84(s，1H)，6.00-5.78(m，1H)，4.10(s，3H)，3.98-3.83(m，2H)，3.81(s，3H)，3.76-3.53(m，2H)，2.59-2.46(m，1H)，2.46-2.32(m，1H)，1.49(br s，9H)。MS(ESI)：469.2[M+H]⁺。

步骤B：(S)-3-(3-(6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)吡咯烷-1-甲酸酯

将rac-3-(3-(6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(28mg，0.06mmol)通过SFC(使用Chiralpak IA-H 5μm，30x250mm柱，并且使用：在100mL/min的流速下的作为流动相的40％异丙醇/0.1％Et₂NH/CO₂溶液，ABPR 120巴，MBPR 60psi)来纯化以按照洗脱的顺序产生：(R)-3-(3-(6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(13mg，0.02mmol，任意指定立体化学)和(S)-3-(3-(6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(10mg，任意指定立体化学)。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm 9.11(s，1H)，8.40-8.34(m，1H)，8.30(s，1H)，8.02(d，J＝7.3Hz，1H)，7.87(t，J＝7.9Hz，1H)，7.84(s，1H)，6.00-5.78(m，1H)，4.10(s，3H)，3.98-3.83(m，2H)，3.81(s，3H)，3.76-3.53(m，2H)，2.59-2.46(m，1H)，2.46-2.32(m，1H)，1.49(br s，9H)。MS(ESI)：469.2[M+H]⁺。

实施例41：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯

向3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(30g，176mmol)于DMF(350mL)中的溶液中添加1-溴-2-甲氧基乙烷(31.8g，229mmol)和Cs₂CO₃(57.4g，176mmol)，并且在80℃下将混合物搅拌2h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩以产生胶状物，将其倾倒至EtOAc(900mL)中，并且用饱和NaCl(500mL x 2)洗涤。将分离的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩，并且将产物通过在硅胶上进行柱色谱法来纯化，使用石油醚/EtOAc(从4/1至1/1)作为洗脱剂以产生呈黄色油状的标题化合物(28g，70％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.90(s，1H)，4.21(q，J＝7.2Hz，2H)，4.11-4.15(m，2H)，3.91(s，3H)，3.70(t，J＝4.8Hz，2H)，3.31(s，3H)，1.29(t，J＝6.8Hz，3H)。

步骤B：3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-甲酸

向NaOH(9.8g，245.3mmol)于H₂O(300mL)中的溶液中添加3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(28g，122.6mmol)，并且在100℃下搅拌2h。在这个时间之后，将混合物用2N HCl(30mL)酸化，并且用DCM/MeOH(500mL/50mL x 3)萃取。将合并的有机萃取物经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩以产生呈白色固体状的标题化合物(15g，61％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 11.94(s，1H)，8.00(s，1H)，4.12(t，J＝5.2Hz，2H)，3.82(s，3H)，3.65(t，J＝5.2Hz，2H)，3.24(s，3H)。MS(ESI)：201.0[M+H]⁺。

步骤C：3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-羰基氯

在80℃下将3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-甲酸(81mg，0.40mmol)于亚硫酰氯(0.5mL，6.85mmol)中的混合物加热5分钟。在这个时间之后，将混合物浓缩，并且与MeCN共蒸发以产生标题化合物(85mg，98％)。

步骤D：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

向3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-羰基氯(85mg，0.39mmol)、6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(80mg，0.39mmol)和DMAP(48mg，0.39mmol)于DCE(1.00mL)中的混合物中添加许尼希氏碱(Hunig′s base)(340μL，1.94mmol)，并且在室温下将混合物搅拌过夜。在这个时间之后，将反应分配于EtOAc与饱和NaHCO₃之间。将分离的水层用EtOAc(x3)再萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中蒸发。将产物通过柱色谱法来纯化，使用EtOAc/EtOH(3/1)作为洗脱剂，以在冻干之后产生呈白色粉末状的标题化合物(35mg，23％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.85(s，1H)，8.28-8.42(m，1H)，8.06(s，1H)，7.92-8.04(m，1H)，7.81(d，J＝7.28Hz，1H)，5.25-5.64(m，1H)，4.20(t，J＝5.02Hz，2H)，4.11(s，3H)，3.74(t，J＝5.02Hz，2H)，3.34(s，3H)，1.64(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(ESI)：386.2[M+H]⁺

实施例42：1-异丁基-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例41中所述的一般性程序来合成标题化合物，但在步骤A中使用1-氯-2-甲基丙烷代替1-溴-2-甲氧基乙烷以产生呈灰白色固体状的标题化合物(27mg，对于最后一步来说是19％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.85(s，1H)，8.34(d，J＝8.28Hz，1H)，8.04(s，1H)，7.98(t，J＝8.03Hz，1H)，7.81(d，J＝7.53Hz，1H)，5.45(quin，J＝6.78Hz，1H)，4.11(s，3H)，3.85(d，J＝7.03Hz，2H)，2.22(dt，J＝13.74，6.81Hz，1H)，1.64(d，J＝6.78Hz，6H)，0.93(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(ESI)：384.0[M+H]⁺。

实施例43：1-异丁基-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例41中所述的一般性程序来合成标题化合物，但在步骤A中使用1-氯-2-甲基丙烷代替1-溴-2-甲氧基乙烷，并且在步骤D中使用6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺以产生呈灰白色固体状的标题化合物(8mg，对于最后一步来说是16％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm9.01(s，1H)，8.34(d，J＝7.28Hz，1H)，7.84-8.13(m，3H)，6.79(quin，J＝7.22Hz，1H)，4.10(s，3H)，3.85(d，J＝7.28Hz，2H)，2.22(dt，J＝13.74，6.81Hz，1H)，1.87(d，J＝7.03Hz，3H)，0.93(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(ESI)：438.0[M+H]⁺。

实施例44：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(吡啶-2-基甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例41中所述的一般性程序来合成产物，但在步骤A中使用2-(溴甲基)吡啶代替1-溴-2-甲氧基乙烷以产生呈灰白色固体状的标题化合物(22mg，对于最后一步来说是18％)。MS(ESI)：419.2[M+H]⁺。

实施例45：1-(2-(二甲基氨基)乙基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯

在80℃下将3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(85mg，0.50mmol)、2-氯-N，N-二甲基乙烷-1-胺HCl(108mg，0.75mmol)和Cs₂CO₃(326mg，1.0mmol)于DMF(1mL)中的混合物在反应小瓶中加热6h。在这个时间之后，将反应分配于EtOAc与水之间。将分离的水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将产物通过正相柱(用3/1EtOAc/EtOH(含有1％Et₃N)洗脱)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(70mg，58％)。MS(ESI)：242.1[M+H]⁺。

步骤B：1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸

将1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(99mg，0.41mmol)于THF(1mL)和MeOH(1mL)中的混合物用1N氢氧化钠(0.5mL)处理，并且在60℃下将反应混合物加热1.5h。在这个时间之后，将反应通过添加1N HCl(0.5mL)来中和，并且在真空中蒸发，以产生呈固体状的标题化合物，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。MS(ESI)：214.0[M+H]⁺。

步骤C：1-(2-(二甲基氨基)乙基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例2中所述的一般性程序来合成产物，但使用1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸代替1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸。将产物通过正相柱(用3/1EtOAc/EtOH(含有1％Et₃N)洗脱)来纯化，以产生呈浅棕色油状的标题化合物(28mg，17％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.84(s，1H)，8.32(d，J＝7.78Hz，1H)，8.09(s，1H)，7.96(t，J＝7.91Hz，1H)，7.80(d，J＝7.28Hz，1H)，5.34-5.53(m，1H)，4.15-4.23(m，2H)，4.1(s，3H)2.84(t，J＝6.53Hz，2H)，2.32(s，6H)，1.64(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(ESI)：399.2[M+H]⁺。

实施例46：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：1-(2-溴乙基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯

在80℃下将3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(85mg，0.5mmol)、1，2-二溴乙烷(86mL，1.0mmol)和Cs₂CO₃(163mg，0.5mmol)于DMF(1mL)中的混合物在反应小瓶中加热3h。在相同条件下重复反应，并且将合并的粗混合物分配于EtOAc与水之间。将分离的水层用EtOAc(x2)萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将产物通过正相色谱法来纯化，用50％EtOAc/庚烷洗脱，以产生标题化合物(78mg，28％)。MS(ESI)：277.0[M+H(⁷⁹Br)]⁺。

步骤B：3-甲氧基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯

在60℃下将1-(2-溴乙基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(78mg，0.28mmol)和吗啉(0.8mL，9.2mmol)于EtOH(0.8mL)中的混合物在反应小瓶中加热1h。在这个时间之后，将反应混合物分配于EtOAc与水之间。将分离的水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩以产生标题化合物(80mg，100％)。

步骤C：3-甲氧基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-甲酸

将3-甲氧基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(80mg，0.28mmol)于THF(0.5mL)和MeOH(0.5mL)中的混合物用1N氢氧化钠(0.5mL)处理，并且在60℃下将反应混合物加热1.5h。在这个时间之后，将混合物通过添加1N HCl(0.5mL)来中和，接着将它在真空中浓缩以产生呈固体状的标题化合物(71mg，100％)。MS(ESI)：256.0[M+H]⁺。

步骤D：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2-吗啉代乙基)-1N-吡唑-4-甲酰胺

向3-甲氧基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-甲酸(71mg，0.28mmol)和6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(57mg，0.28mmol)的混合物中添加Et₃N(38μL，0.28mmol)和丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.8mL)，并且在80℃下将混合物加热2.5h。在这个时间之后，将反应用少量MeOH(～2mL)淬灭，接着将它分配于EtOAc与水之间。将水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将产物通过正相色谱法来纯化，用EtOAc/EtOH(3/1)洗脱，以产生标题化合物(24mg，20％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.85(s，1H)，8.34(d，J＝8.03Hz，1H)，8.11(s，1H)，7.98(t，J＝8.03Hz，1H)，7.81(d，J＝7.28Hz，1H)，5.44(dt，J＝13.49，6.68Hz，1H)，4.15-4.25(m，2H)，4.12(s，3H)，3.59-3.76(m，4H)，3.46(q，J＝7.03Hz，2H)，2.36-2.62(m，4H)，1.64(d，J＝6.78Hz，6H)，MS(ESI)：441.2[M+H]⁺。

实施例47：1-(环丙基甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：1-(环丙基甲基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯

在80℃下将3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(85mg，0.50mmol)、(氯甲基)环丙烷(68mg，0.75mmol)和Cs₂CO₃(163mg，0.5mmol)于DMF(1mL)中的混合物在反应小瓶中加热1h。在相同条件下重复反应，并且将合并的粗混合物分配于EtOAc与水之间。接着将水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将产物通过正相色谱法来纯化，用30-40％EtOAc/庚烷洗脱，以产生呈白色固体状的标题化合物(180mg，80％)。MS(ESI)：225.1[M+H]⁺。

步骤B：1-(环丙基甲基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸

向1-(环丙基甲基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(178mg，0.79mmol)于THF(1.5mL)和MeOH(1.5mL)中的溶液中添加1N NaOH(1.5mL)，并且在60℃下将混合物加热2h。在这个时间之后，将混合物通过添加1N HCl(2mL)来酸化，接着将它分配于EtOAc与水之间。将分离的有机相经MgSO₄干燥，过滤，并且浓缩以产生呈白色固体状的标题化合物(146mg，94％)。MS(ESI)：197.1[M+H]⁺。

步骤C：1-(环丙基甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

向6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(61mg，0.3mmol)和1-(环丙基甲基)-3-甲氧基-吡唑-4-甲酸(59mg，0.3mmol)的混合物中添加Et₃N(1.1mL，7.91mmol)和丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.8mL)，并且在80℃下将混合物加热2h。在这个时间之后，将混合物用少量MeOH(～0.5mL)淬灭，接着将它分配于EtOAc与水之间。将分离的水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将产物通过正相色谱法来纯化，用EtOAc/EtOH(从1/0至3/1)洗脱，以产生呈浅黄色固体状的标题化合物(24mg，21％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.85(s，1H)，8.34(d，J＝8.03Hz，1H)，8.11(s，1H)，7.97(t，J＝7.91Hz，1H)，7.81(d，J＝7.28Hz，1H)，5.44(dt，J＝13.36，6.75Hz，1H)，4.11(s，3H)，3.86-3.98(m，2H)，1.60-1.69(m，6H)，1.19-1.41(m，1H)，0.51-0.81(m，2H)，0.19-0.50(m，2H)。MS(ESI)：382.0[M+H]⁺。

实施例48：(S)-1-(环丙基甲基)-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例47中所述的一般性程序来合成产物，但在步骤C中使用(S)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(12mg，35％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.92(s，1H)，8.24(dd，J＝8.03，0.75Hz，1H)，8.03(s，1H)，7.75-7.98(m，3H)，6.70(dt，J＝14.37，7.25Hz，1H)，4.02(s，3H)，3.81(d，J＝7.28Hz，2H)，1.78(d，J＝7.03Hz，3H)，1.05-1.36(m，1H)，0.42-0.71(m，2H)，0.13-0.42(m，2H)。MS(ESI)：436.0[M+H]⁺。

实施例49：3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将反应小瓶装以N-(6-(2-((二甲基氨基)亚甲基)肼-1-羰基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(50mg，0.15mmol)、四氢-2H-吡喃-4-胺(30mg，0.29mmol)、MeCN(2mL)和乙酸(0.7mL)的混合物。在回流下将所得混合物加热1h。通过质量导向的HPLC(使用5-65％MeCN/H₂O(含有4％NH₄OH)作为洗脱剂)进行的纯化产生标题化合物(7mg，13％)。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 8.91(br s，1H)，8.07(br d，J＝9.2Hz，1H)，7.94(s，1H)，7.70(br t，J＝7.9Hz，1H)，7.47(br d，J＝6.7Hz，1H)，5.41(d，J＝15.3Hz，1H)，4.37(br d，J＝14.7Hz，1H)，3.93(s，3H)，3.76(s，3H)，3.74(m，2H)，1.73(s，3H)。MS(ESI)：370.2[M+H]⁺。

实施例50：1-(环丙基甲基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：1-(环丙基甲基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯

向3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(2g，10.5mmol)于DMSO(30mL)中的溶液中添加(溴甲基)环丙烷(5.68g，42.0mmol)和Cs₂CO₃(6.85g，21.0mmol)，并且在120℃下将混合物加热3h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，并且通过HPLC(使用PhenomenexSynergi Max-RP 10μm，150x50mm柱，并且在120mL/min的流速下从25％至55％使用水(含有0.225％HCOOH)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(1.1g，47％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 8.48(s，1H)，7.35-7.03(m，1H)，4.32-4.19(m，2H)，4.05(d，J＝7.0Hz，2H)，1.34-1.24(m，4H)，0.57-0.50(m，2H)，0.43-0.36(m，2H)。MS(ESI)：245.1[M+H]⁺。

步骤B：1-(环丙基甲基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸

向1-(环丙基甲基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(1g，4.09mmol)于MeOH/H₂O(40mL，1/1)中的溶液中添加NaOH(819mg，20.5mmol)，并且在30℃下将混合物搅拌3h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，并且溶解于H₂O(100mL)中。将混合物的pH通过添加HCl水溶液(3N)来调整至3-4，并且用EtOAc(300mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(300mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩，以产生呈棕色固体状的标题化合物(800mg，89％)。MS(ESI)：217.1[M+H]⁺。

步骤C：1-(环丙基甲基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基氯

在60℃下将1-(环丙基甲基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(200mg，0.93mmol)于SOCl₂(4mL)中的溶液搅拌15h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩以产生标题化合物(200mg，91％)。

步骤D：1-(环丙基甲基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在28℃下将1-(环丙基甲基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基氯(200mg，0.85mmol)于DCM(10mL)中的溶液搅拌30分钟。在这个时间之后，用吡啶将混合物调整至pH7-8，并添加DMAP(260mg，2.13mmol)，并且在28℃下将混合物搅拌2h。在这个时间之后，将反应在真空中浓缩，并且通过制备型HPLC(使用Waters xbridge Prep OBD C185μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从24至54％使用水(含有0.05％NH₃.H₂O)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生标题化合物(91mg，26％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 10.56(s，1H)，8.88(s，1H)，8.72(s，1H)，8.16(dd，J＝0.8，8.3Hz，1H)，8.05-7.98(m，1H)，7.80(dd，J＝0.8，8.8Hz，1H)，7.49-7.19(m，1H)，5.51(m，1H)，4.11(d，J＝7.2Hz，2H)，1.44(d，J＝6.4Hz，6H)，1.36-1.24(m，1H)，0.64-0.58(m，2H)，0.47-0.42(m，2H)。MS(ESI)：402.2[M+H]⁺。

实施例51：(S)-3-(二氟甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：3-(二氟甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯

将3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(250mg，1.3mmol)和1-溴-2-甲氧基-乙烷(237mg，1.7mmol，160μL)溶解于DMF(2.0mL)中，并且在80℃下将混合物加热3h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，用EtOAc稀释，并且用水(x2)洗涤。将分离的有机层经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(50-100％EtOAc/庚烷)进行的纯化产生标题化合物(325mg，61％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.00(t，J＝1.1Hz，1H)，6.96-7.26(m，1H)，4.27-4.37(m，4H)，3.69-3.80(m，2H)，3.34(s，3H)，1.36(t，J＝7.2Hz，3H)。MS(ESI)：249.1[M+H]⁺。

步骤B：3-(二氟甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-甲酸

将3-(二氟甲基)-1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-甲酸乙酯(200mg，0.81mmol)溶解于THF(4.0mL)和MeOH(4.0mL)的溶液中。接着添加NaOH(1M，1mL)，并且在60℃下将反应加热1h。在这个时间之后，将反应通过添加1N HCl来酸化，并且将混合物分配于EtOAc与水之间。将分离的有机相干燥，经MgSO₄过滤，并且在真空中浓缩以产生标题化合物(170mg，96％)。MS(ESI)：221.0[M+H]⁺。

步骤C：(S)-3-(二氟甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将3-(二氟甲基)-1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-甲酸(178mg，0.81mmol)和6-[4-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙基]-1，2，4-三唑-3-基]吡啶-2-胺(208mg，0.81mmol)溶解于Et₃N(1.1mL，8.1mmol)中。接着添加丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，825μL)，并且在80℃下将反应加热3h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且通过添加MeOH(3mL)来淬灭。过滤所得固体，并且在真空下干燥以提供标题化合物(290mg，75％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.87(br t，J＝5.1Hz，1H)，8.43(d，J＝1.0Hz，1H)，8.38(dd，J＝8.3，0.8Hz，1H)，8.23(s，1H)，8.13(dd，J＝7.8，0.8Hz，1H)，7.92(t，J＝8.0Hz，1H)，6.69-7.09(m，2H)，4.34(t，J＝4.9Hz，2H)，3.73-3.84(m，2H)，3.36(s，3H)，1.80(d，J＝7.3Hz，3H)。MS(ESI)：460.1[M+H]⁺。

实施例52：(S)-3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例41中所述的一般性程序来合成标题化合物，但在步骤D中使用(S)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈白色粉末状的标题化合物(23mg，51％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.01(s，1H)，8.33(dd，J＝8.16，0.88Hz，1H)，8.05(s，1H)，7.87-8.03(m，2H)，6.79(dt，J＝14.49，7.18Hz，1H)，4.20(t，J＝5.15Hz，2H)，4.11(s，3H)，3.74(t，J＝5.15Hz，2H)，3.34(s，3H)，1.87(d，J＝7.28Hz，3H)。MS(ESI)：440.1[M+H]⁺。

实施例53：(R)-3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例41中所述的一般性程序来合成标题化合物，但在步骤D中使用(R)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈白色粉末状的标题化合物(23mg，52％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.01(s，1H)，8.33(d，J＝8.03Hz，1H)，8.05(s，1H)，7.83-8.02(m，2H)，6.59-6.90(m，1H)，4.20(t，J＝5.02Hz，2H)，4.11(s，3H)，3.74(t，J＝5.15Hz，2H)，3.34(s，3H)，1.88(d，J＝7.28Hz，3H)。MS(ESI)：440.1[M+H]⁺。

实施例54：N-(6-(4-环丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例41中所述的一般性程序来合成标题化合物，但在步骤D中使用6-(4-环丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(19mg，26％)。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 8.63(s，1H)，8.35(d，J＝8.55Hz，1H)，8.05(s，1H)，7.97(t，J＝7.94Hz，1H)，7.81(d，J＝7.94Hz，1H)，4.20(t，J＝5.19Hz，2H)，4.09(s，3H)，3.81-4.00(m，1H)，3.74(t，J＝4.88Hz，2H)，3.34(s，3H)，1.18(q，J＝6.92Hz，2H)，0.94-1.11(m，2H)。MS(ESI)：384.2[M+H]⁺。

实施例55：1-烯丙基-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：1-烯丙基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯

在80℃下将3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(1.72g，10.1mmol)、3-溴丙-1-烯(1.59g，13.1mmol)和Cs₂CO₃(3.29g，10.1mmol)于DMF(50mL)中的混合物搅拌3h。在这个时间之后，将反应用水(50mL)淬灭，并用EtOAc(50mL x 3)萃取，并且将合并的有机萃取物用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩以产生呈黄色油状的标题化合物(1.5g，68％)。

步骤B：1-烯丙基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸

在100℃下将1-烯丙基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(19g，90mmol)和NaOH(7.23g，180mmol)于H₂O(190mL)中的混合物搅拌3h在这个时间之后，使反应冷却至室温，接着将它通过添加HCl水溶液(3M)来酸化。过滤所得沉淀，用水洗涤，并且在真空下干燥(冻干)，以产生呈白色固体状的标题化合物(13g，79％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 11.96(s，1H)，8.03(s，1H)，6.16-5.83(m，1H)，5.45-5.01(m，2H)，4.61(d，J＝6.0Hz，2H)，3.81(s，3H)。MS(ESI)：182.9[M+H]⁺。

步骤C：1-烯丙基-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

向1-烯丙基-3-甲氧基-吡唑-4-甲酸(182mg，1.0mmol)和6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(203mg，1.0mmol)的混合物中添加Et₃N(2mL，14.4mmol)和丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，2mL)，并且在80℃下将混合物加热4h。在这个时间之后，将反应用少量MeOH(～2mL)淬灭，接着将它分配于EtOAc与水之间。将分离的水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。通过正相柱，用EtOAc/EtOH(3/1)洗脱进行的纯化产生标题化合物(200mg，54％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.85(s，1H)，8.34(d，J＝8.53Hz，1H)，8.06(s，1H)，7.98(t，J＝7.91Hz，1H)，7.81(d，J＝7.78Hz，1H)，5.91-6.16(m，1H)，5.39-5.56(m，1H)，5.16-5.36(m，2H)，4.67(d，J＝5.77Hz，2H)，4.11(s，3H)，1.64(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(ESI)：368.0[M+H]⁺。

实施例56：1-烯丙基-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例55中所述的一般性程序来合成产物，但使用6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(168mg，40％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.01(s，1H)，8.33(dd，J＝8.16，0.88Hz，1H)，8.06(s，1H)，7.75-8.04(m，2H)，6.79(quin，J＝7.22Hz，1H)，6.05(ddt，J＝16.78，10.57，5.90，5.90Hz，1H)，5.21-5.34(m，2H)，4.68(d，J＝5.77Hz，2H)，4.11(s，3H)，1.87(d，J＝7.28Hz，3H)。MS(ESI)：421.9[M+H]⁺。

实施例57：(S)-1-烯丙基-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例55中所述的一般性程序来合成产物，但使用(S)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(10mg，19％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.01(s，1H)，8.33(dd，J＝8.16，0.88Hz，1H)，8.06(s，1H)，7.81-8.04(m，2H)，6.79(dt，J＝14.37，7.25Hz，1H)，6.05(ddt，J＝16.82，10.54，5.90，5.90Hz，1H)，5.16-5.34(m，2H)，4.67(d，J＝6.02Hz，2H)，4.10(s，3H)，1.87(d，J＝7.28Hz，3H)。MS(ESI)：422.1[M+H]⁺。

实施例58：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-丙基-1H-吡唑-4-甲酰胺

向1-烯丙基-N-[6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)-2-吡啶基]-3-甲氧基-吡唑-4-甲酰胺(37mg，0.1mmol)于EtOH(5mL)中的溶液中添加10％Pd/C(11mg，0.01mmol)，并且在H₂氛围下(使用气球)将悬浮液搅拌3h。在这个时间之后，将固体滤除，并且将滤液浓缩以产生呈灰白色固体状的标题化合物(35mg，96％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.85(s，1H)，8.34(d，J＝8.03Hz，1H)，8.05(s，1H)，7.98(t，J＝8.03Hz，1H)，7.81(d，J＝7.28Hz，1H)，5.44(quin，J＝6.71Hz，1H)，4.11(s，3H)，4.01(t，J＝6.90Hz，2H)，1.88(sxt，J＝7.18Hz，2H)，1.64(d，J＝6.78Hz，6H)，0.92(t，J＝7.40Hz，3H)。MS(ESI)：370.2[M+H]⁺。

实施例59：3-甲氧基-1-丙基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例58中所述的一般性程序来合成产物，但使用1-烯丙基-3-甲氧基-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺代替1-烯丙基-N-[6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)-2-吡啶基]-3-甲氧基-吡唑-4-甲酰胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(48mg，65％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.01(s，1H)，8.33(dd，J＝8.03，0.75Hz，1H)，8.05(s，1H)，7.84-8.03(m，2H)，6.79(quin，J＝7.22Hz，1H)，4.10(s，3H)，4.01(t，J＝6.90Hz，2H)，1.68-2.00(m，5H)，0.92(t，J＝7.40Hz，3H)。MS(ESI)：423.9[M+H]⁺。

实施例60：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯

将3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(440mg，2.59mmol)、碘苯(791mg，3.88mmol)、CuI(49mg，0.26mmol)、K₂CO₃(714mg，5.17mmol)和L-脯氨酸(59mg，0.52mmol)于DMF(4mL)中的混合物用N₂脱气，并且在100℃下将混合物搅拌12h。在这个时间之后，使混合物冷却至室温，并且过滤。将滤液通过柱色谱法来纯化，使用EtOAc/石油醚(从1/20至1/1)作为洗脱剂，以产生呈黄色固体状的标题化合物(390mg，61％)。MS(ESI)：247.0[M+H]⁺。

步骤B：3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-甲酸

向3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(190mg，0.77mmol)于MeOH(7.5mL)中的溶液中添加含NaOH(93mg，2.3mmol)的H₂O(1.5mL)，并且在50℃下将混合物搅拌2h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，并且通过添加HCl水溶液(1M)来酸化至pH 2-3。通过过滤来收集固体，并且溶解于EtOAc(15mL)中，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩，以产生呈白色固体状的标题化合物(152mg，90％)。MS(ESI)：219.2[M+H]⁺。

步骤C：3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-羰基氯

在60℃下将3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-甲酸(100mg，0.46mmol)和SOCl₂(6mL)的混合物搅拌1.5h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，以产生呈黄色固体状的标题化合物(108mg，粗物质)。

步骤D：N-(6-(4-异丙基.-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺

在N₂下向3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-羰基氯(217mg，0.91mmol)于DCM(10mL)中的溶液中添加6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(370mg，1.82mmol)和DMAP(222mg，1.82mmol)，并且在29℃下将混合物搅拌16h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，并且通过制备型HPLC(使用Phenomenex Synergi C18 4μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从48至78％使用水(含有0.225％HCOOH)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(24mg，13％)。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.25(s，1H)，8.46(s，1H)，8.38-8.45(m，2H)，7.99(d，J＝7.2Hz，1H)，7.89(t，J＝8.0Hz，1H)，7.69(d，J＝7.0Hz，2H)，7.49(t，J＝8.0Hz，2H)，7.30-7.37(m，1H)，5.47-5.58(m，1H)，4.22(s，3H)，1.65(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：404.2[M+H]⁺。

实施例61：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：3-甲氧基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯

在100℃下在N₂下将3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(2g，11.8mmol)、3-溴吡啶(2.79g，17.6mmol)、L-脯氨酸(270mg，2.36mmol)、CuI(224mg，1.18mmol)和K₂CO₃(4.06g，29.4mmol)于DMF(30mL)中的溶液搅拌17h。在这个时间之后，将混合物用H₂O(100mL)稀释，并且用EtOAc(50mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩以产生粗物质，其通过HPLC(使用Phenomenex Synergi C18 4μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从16至36％使用水(含有0.05％HCl)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(600mg，21％)。MS(ESI)：248.0[M+H]⁺。

步骤B：3-甲氧基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酸

在50℃下将3-甲氧基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(500mg，2.02mmol)和NaOH(243mg，6.06mmol)于MeOH/H₂O(6mL，5/1)中的混合物搅拌3h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，并且用水(10mL)稀释。将混合物的pH通过添加HCl水溶液(3M)来调整至3-4，接着将它用EtOAc(300mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，并且浓缩以产生呈白色固体状的标题化合物(300mg，68％)。

步骤C：3-甲氧基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-羰基氯

在N₂下向3-甲氧基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酸(150mg，0.68mmol)于DCM(10mL)中的溶液中依次添加(COCl)₂(174mg，1.37mmol)和DMF(5滴)，并且在25℃下将混合物搅拌2h。在这个时间之后，将混合物在减压下浓缩以产生标题化合物(162mg，粗物质)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。

步骤D：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在N₂氛围下向3-甲氧基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-羰基氯(162mg，0.68mmol)和6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(277mg，1.36mmol)于DCM(10mL)中的溶液中添加DMAP(166mg，1.36mmol)，并且在25℃下将混合物搅拌17h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，并且通过制备型HPLC(使用Waters Xbridge Prep OBD C18 5μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从20至50％使用水(含有0.05％NH₃.H₂O)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(29mg，5％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm9.46(s，1H)，9.19-9.16(m，1H)，9.13(d，J＝2.2Hz，1H)，8.90(s，1H)，8.53(d，J＝3.9Hz，1H)，8.30-8.20(m，2H)，8.02(t，J＝7.9Hz，1H)，7.83(d，J＝7.5Hz，1H)，7.55(dd，J＝4.6，8.1Hz，1H)，5.45-5.25(m，1H)，4.14(s，3H)，1.53(d，J＝6.6Hz，6H)。MS(ESI)：405.1[M+H]⁺。

实施例62：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(3-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例61中所述的一般性程序来合成标题化合物，但使用2-氟-3-甲基吡啶代替3-溴吡啶。将最终产物通过制备型HPLC(使用Xtimate C18 5μm，150x25mm柱，并且在25mL/min的流速下从30至60％使用水(含有10mM NH₄HCO₃)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(14mg，对于最后两步来说是9％)。¹HNMR(400MHz，MeOD)δppm8.89(s，1H)，8.76(s，1H)，8.41(d，J＝8.0Hz，1H)，8.37(d，J＝4.0Hz，1H)，8.04(t，J＝8.0Hz，1H)，7.84-7.90(m，2H)，7.39(dd，J＝4.4，7.2Hz，1H)，5.46-5.54(m，1H)，4.23(s，3H)，2.61(s，3H)，1.68(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：419.1[M+H]⁺。

实施例63：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(嘧啶-5-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例61中所述的一般性程序来合成标题化合物，但使用5-溴嘧啶代替3-溴吡啶。将最终产物通过制备型HPLC(使用Xtimate C18 5μm，150x25mm柱，并且在25mL/min的流速下从23至53％使用水(含有10mM NH₄HCO₃)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(34mg，对于最后两步来说是9％)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 9.49(s，1H)，9.36(s，2H)，9.27(s，1H)，9.17(s，1H)，8.92(s，1H)，8.26(d，J＝8.0Hz，1H)，8.05(t，J＝8.0Hz，1H)，7.86(d，J＝7.2Hz，1H)，5.31-5.48(m，1H)，4.18(s，3H)，1.56(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：406.1[M+H]⁺。

实施例64：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例61中所述的一般性程序来合成标题化合物，但使用2-氯吡嗪代替3-溴吡啶。将最终产物通过制备型HPLC(使用Waters Xbridge Prep OBD C18 5μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从24至54％使用水(含有0.05％NH₃.H₂O)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(22mg，对于最后两步来说是8％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 9.74(s，1H)，9.17(d，J＝1.6Hz，1H)，9.10(s，1H)，8.91(s，1H)，8.67(d，J＝2.4Hz，1H)，8.61(m，1H)，8.23(dd，J＝3.6Hz，0.8Hz，1H)，8.04(t，J＝8.0Hz，1H)，7.85(dd，J＝7.6，0.8Hz，1H)，5.49-5.39(m，1H)，4.17(s，3H)，1.53(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：406.1[M+H]⁺。

实施例65：1-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：1-(4-溴吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸

向3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(1g，5.88mmol)于DMSO(20mL)中的溶液中添加4-溴-2-氟吡啶(1.03g，5.88mmol)和Cs₂CO₃(7.66g，23.5mmol)，并且在120℃下在N₂下将混合物搅拌17h。在这个时间之后，将混合物倾倒至水(100mL)中，并且用EtOAc(100mL)洗涤。用3M HCl将水相调整至pH～3-4，过滤固体，并且在真空下干燥以产生呈白色固体状的标题化合物(320mg，18％)。

步骤B：1-(4-溴吡啶-2-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例60步骤B和C中所述的一般性程序来合成产物，但使用1-(4-溴吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸代替3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯。将最终产物通过在硅胶上进行柱色谱法来纯化，用DCM/MeOH(从1/0至20/1)洗脱，以产生呈白色固体状的标题化合物(237mg，对于两步来说是49％)。

步骤C：1-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(6-(4-异丙基.-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

在N₂氛围下向1-(4-溴吡啶-2-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺(200mg，0.41mmol)于DMA(10mL)中的溶液中添加氰化锌(97mg，0.83mmol)和锌(16mg，0.25mmol)，随后添加Pd₂(dba)₃(38mg，0.041mmol)和dppf(46mg，0.083mmol)，并且在110℃下将所得混合物搅拌1h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且过滤。将滤液通过制备型HPLC(使用Waters Xbridge Prep OBD C18 5μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从26至56％使用MeCN和H₂O(含有0.05％NH₃.H₂O)作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(31mg，18％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 9.69(s，1H)，9.06(s，1H)，8.88(s，1H)，8.72(d，J＝5.2Hz，1H)，8.22-8.20(m，2H)，8.00(t，J＝8.4Hz，1H)，7.83-7.82(m，2H)，5.43-5.41(m，1H)，4.14(s，3H)，1.51(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：430.2[M+H]⁺。

实施例66：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例61中所述的一般性程序来合成产物，但在步骤A中使用4-溴吡啶代替3-溴吡啶。将最终产物通过用MeOH(20mL)湿磨来纯化，以产生呈灰色固体状的标题化合物(120mg，对于最后两步来说是65％)。¹HNMR(400MHz，D₂O)δppm 9.72(s，1H)，8.78(s，1H)，8.62(d，J＝6.4Hz，2H)，7.97-8.09(m，3H)，7.81(t，J＝8.0Hz，1H)，7.57(d，J＝7.6Hz，1H)，5.23-5.56(m，1H)，4.04(s，3H)，1.56(br d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：405.2[M+H]⁺。

实施例67：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(5-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：1-(5-溴吡啶-3-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸

向3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(10g，59mmol)于DMSO(100mL)中的溶液中添加Cs₂CO₃(58.6g，0.18mol)和3-溴-5-氟吡啶(10.3g，59mmol)，并且在120℃下将混合物搅拌18h。在这个时间之后，将混合物倾倒至水(500mL)中，并且用2N HCl调整至pH～3。过滤所得固体，收集，并且冻干以产生呈黄色固体状的标题化合物(10g，57％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 12.53(br，1H)，9.11(s，1H)，9.04(s，1H)，8.64(s，1H)，8.54(d，J＝1.6Hz，1H)，3.98(s，3H)。

步骤B：1-(5-溴吡啶-3-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-羰基氯

将1-(5-溴吡啶-3-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸(9.5g，3.1mmol)用SOCl₂(90mL)处理，并且在60℃下将混合物搅拌2h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩以产生呈灰白色固体状的粗标题化合物(10g，粗物质)。

步骤C：1-(5-溴吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

向1-(5-溴吡啶-3-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-羰基氯(10g，粗物质，3.1mmol)于DCM(120mL)中的溶液中添加6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(6.3g，3.1mmol)。接着添加吡啶(10mL)和DMAP(7.6g，6.2mmol)，并且在29℃下将混合物搅拌0.5h。在这个时间之后，过滤混合物，并且将固体用水和MeOH洗涤，接着将它冻干以产生呈白色固体状的粗标题化合物(12g，80％，两步)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 9.20(s，1H)，8.89(d，J＝2.0Hz，1H)，8.62(d，J＝2.0Hz，1H)，8.49(s，1H)，8.39-8.36(m，2H)，8.22(t，J＝2.0Hz，1H)，8.01(d，J＝7.6Hz，1H)，7.92-7.89(m，1H)，5.51-5.47(m，1H)，4.22(s，3H)，1.63(d，J＝6.8Hz，6H)。

步骤D：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(5-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在N₂下向1-(5-溴吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺(150mg，0.31mmol)于二噁烷/H₂O(5/1，6mL)中的溶液中添加三氟(甲基)硼酸钾(76mg，0.62mmol)、K₂CO₃(86mg，0.62mmol)和Pd(dppf)Cl₂(22mg，0.03mmol)，并且在90℃下将混合物搅拌18h。在这个时间之后，将反应在真空下浓缩，并且通过制备型HPLC(使用Waters Xbridge Prep OBD C185mm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从23至53％使用MeCN和H₂O(含有0.05％NH₃.H₂O)作为流动相)来纯化，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(37mg，28％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 9.45(s，1H)，9.13(s，1H)，8.92(d，J＝2.4Hz，1H)，8.90(s，1H)，8.37(s，1H)，8.23(d，J＝7.2Hz，1H)，8.11(s，1H)，8.02(t，J＝8.0Hz，1H)，7.82(d，J＝7.2Hz，1H)，5.39-5.31(m，1H)，4.13(s，3H)，2.37(s，3H)，1.53(d，J＝6.4Hz，6H)。MS(ESI)：419.2[M+H]⁺。

实施例68：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基－1-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在N₂下向1-(5-溴吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺(100mg，0.2mmol)于甲苯/水(10mL，10∶1)中的溶液中添加环丙基硼酸(107mg，1.24mmol)、PCy₃(58mg，0.2mmol)和Cs₂CO₃(404mg，1.24mmol)，随后添加Pd(OAc)₂(23mg，0.1mmol)，并且在110℃下将混合物搅拌2h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，并且通过制备型HPLC(使用Waters Xbridge Prep OBD C185μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从30至60％使用水(含有0.05％NH₃.H₂O)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生标题化合物(46mg，50％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 9.42(s，1H)，9.18(s，1H)，8.94-8.84(m，2H)，8.37(s，1H)，8.24(d，J＝8.4Hz，1H)，8.02(t，J＝8Hz，1H)，7.88-7.80(m，2H)，5.36(m，1H)，4.14(s，3H)，2.10-1.97(m，1H)，1.55(d，J＝6.6Hz，6H)，1.12-0.97(m，2H)，0.89(d，J＝3.6Hz，2H)。MS(ESI)：445.2[M+H]⁺。

实施例69：1-(5-氰基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

向1-(5-溴吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺(150mg，0.31mmol)和Zn(CN)₂(44mg，0.37mmol)于DMA(3.5mL)中的溶液中添加Zn(14mg，0.21mmol)、Pd₂(dba)₃(32mg，0.035mmol)和dppf(17mg，0.070mmol)，并且在120℃下在N₂氛围下将混合物搅拌20h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，并且通过制备型HPLC(使用Phenomenex Synergi C184μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从33至53％使用水(含有0.225％HCOOH)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(50mg，37％)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 9.48(s，1H)，9.41(d，J＝2.4Hz，1H)，9.25(s，1H)，8.92(s，1H)，8.97(s，1H)，8.82(s，1H)，8.26(d，J＝8.2Hz，1H)，8.05(t，J＝8.2Hz，1H)，7.86(d，J＝7.6Hz，1H)，5.34-5.44(m，1H)，4.18(s，3H)，1.56(d，J＝6.4Hz，6H)。MS(ESI)：430.2[M+H]⁺。

实施例70：1-(5-羟基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡定-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将1-(5-溴吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺(1g，2.07mmol)、4，4，4′，4′，5，5，5′，5′-八甲基-2，2′-双(1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷)(1.58g，6.21mmol)、KOAc(406mg，4.14mmol)和Pd(dppf)Cl₂(454mg，0.62mmol)于二噁烷(20mL)中的混合物用N₂脱气，并且在100℃下搅拌17h。在这个时间之后，将溶剂在真空中蒸发，并且将残余物溶解于DCM(100mL)中，并用H₂O(100mL x 2)洗涤。将分离的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩以产生标题化合物(2.5g，粗物质)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。

步骤B：1-(5-羟基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

将N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(2.3g，5.13mmol)于THF(50mL)中的混合物用AcOH(2.5mL)和H₂O₂(2.5mL，30％)处理，并且在50℃下将反应搅拌2h。在这个时间之后，过滤混合物，并且将滤饼在真空中浓缩以产生呈棕色固体状的标题化合物(450mg，21％)。MS(ESI)：443.2[M+Na]⁺。

实施例71：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在25℃下将1-(5-羟基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺(100mg，0.24mmol)、MeI(41mg，0.29mmol)、K₂CO₃(66mg，O.48mmol)和KI(40mg，0.24mmol)于DMF(4mL)中的混合物搅拌2h。在这个时间之后，过滤混合物，将滤液在真空中浓缩，并且通过制备型HPLC(使用Waters Xbridge Prep OBD C18 5μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从27至54％使用水(含有0.04％NH₃H₂O和10mMNH₄HCO₃)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(3.5mg，3.4％)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 9.44(s，1H)，9.22(s，1H)，8.90(s，1H)，8.72(s，1H)，8.27-8.20(m，2H)，8.02(t，J＝7.2Hz，1H)，7.89-7.79(m，2H)，5.41-5.30(m，1H)，4.14(s，3H)，3.91(s，3H)，1.53(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：435.1[M+H]⁺。

实施例72：1-(5-异丙氧基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

在80℃下将1-(5-羟基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺(100mg，0.24mmol)、2-碘丙烷(81mg，0.46mmol)、K₂CO₃(66mg，0.48mmol)和KI(40mg，0.24mmol)于DMF(2mL)中的混合物搅拌2h。在这个时间之后，添加DMF(3mL)，并且将混合物通过制备型HPLC(使用Waters Xbridge Prep OBD C18 5μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从32至62％使用水(含有0.04％NH₃H₂O和10mMNH₄HCO₃)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(37mg，34％)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 9.44(s，1H)，9.22(s，1H)，8.90(s，1H)，8.69(d，J＝2.2Hz，1H)，8.34-8.13(m，2H)，8.02(t，J＝8.1Hz，1H)，7.89-7.80(m，2H)，5.40-5.31(m，1H)，4.88-4.79(m，1H)，4.14(s，3H)，1.53(d，J＝6.6Hz，6H)，1.31(d，J＝5.7Hz，6H)。MS(ESI)：463.2[M+H]⁺。

实施例73：1-(5-(二甲基氨基)吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

在100℃下在N₂氛围下将1-(5-溴吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺(100mg，0.21mmol)、二甲胺盐酸盐(20mg，0.25mmol)、RuPhos(19mg，0.041mmol)、NaOtBu(79mg，0.83mmol)和Pd₂(dba)₃(19mg，0.021mmol)于甲苯(8mL)中的溶液搅拌12h。在这个时间之后，将混合物浓缩，并且通过制备型HPLC(使用Waters Xbridge Prep OBD C18 5mm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从29至43％使用水(含有0.04％NH₃H₂O和10mM NH₄HCO₃)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(15mg，16％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 9.47(s，1H)，9.21(s，1H)，8.92(s，1H)，8.42(d，J＝2.0Hz，1H)，8.27(d，J＝8.4Hz，1H)，8.10-8.01(m，2H)，7.85(d，J＝7.6Hz，1H)，7.48(t，J＝2.4Hz，1H)，5.38(quin，J＝6.4Hz，1H)，4.16(s，3H)，3.03(s，6H)，1.56(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：448.1[M+H]⁺。

实施例74：1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：(Z)-2-(乙氧基亚甲基)-4，4-二氟-3-氧代丁酸乙酯

将Ac₂O(50mL)添加至4，4-二氟-3-氧代丁酸乙酯(10.0g，60.2mmol)和三乙氧基甲烷(18.3g，123mmol)的混合物中，并且在100℃下将混合物搅拌8.5h。在这个时间之后，使用迪安-斯达克分水器(Dean-Stark trap)设备来将EtOAc移除，以产生呈黄色胶状的标题化合物(12g，90％)。

步骤B：3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯

在0℃下向(Z)-2-(乙氧基亚甲基)-4，4-二氟-3-氧代丁酸乙酯(11g，49.5mmol)于MeOH(100mL)中的溶液中逐滴添加N₂H₄.H₂O(7.6g，149mmol)，并且在70℃下将混合物搅拌3h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩以产生呈黄色胶状的标题化合物(10g，粗物质)。MS(ESI)：190.9[M+H]⁺。

步骤C：1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸

在120℃下将3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(5.00g，26.3mmol)和3-溴-5-氟吡啶(4.63g，26.3mmmol)和Cs₂CO₃(34.27g，105mmol)于DMSO(100mL)中的混合物搅拌12h。在这个时间之后，将混合物倾倒至水(100mL)中，并且用EtOAc(100mL)洗涤。用3M HCl将水相调整至pH 3～4。过滤固体，并且在真空下干燥以产生呈白色固体状的标题化合物(4.4g，81％)。MS(ESI)：317.9[(M+H)(⁷⁹Br)]⁺。

步骤D：1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基氯

在60℃下将1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(3.80g，11.95mmol)于SOCl₂(100mL)中的溶液搅拌12h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，以产生呈黄色固体状的标题化合物(4.00g，粗物质)。

步骤E：1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

用吡啶将1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基氯(4.00g，11.9mmol)和6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(4.83g，23.8mmol)于DCM(110mL)中的溶液调整至pH 7～8，接着添加DMAP(2.90g，23.8mmol)。在28℃下将混合物搅拌3h。在这个时间之后，将混合物用饱和NH₄Cl(100mL)稀释，并且将水层用DCM(100mL x 2)萃取。将合并的有机萃取物干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将混合物通过在硅胶上进行柱色谱法来纯化，用DCM/MeOH(从100/1至10/1)洗脱，以产生呈白色固体状的标题化合物(5.00g，83.6％)。MS(ESI)：503.0[(M+H)(⁷⁹Br)]⁺。

实施例75：3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-(5-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在N₂氛围下向1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(150mg，0.30mmol)于二噁烷/H₂O(5/1，3mL)中的溶液中添加三氟(甲基)硼酸钾(73mg，0.60mmol)和K₂CO₃(82mg，0.60mmol)，随后添加Pd(dppf)Cl₂(21.8mg，0.03mmol)，并且在100℃下将混合物加热48h。在这个时间之后，将混合物倾倒至水(10mL)中，并且用DCM/MeOH(10/1，10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将混合物通过制备型HPLC(使用Waters Xbridge Prep OBD C18 5μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从20至50％使用MeCN和H₂O(含有0.05％NH₃.H₂O)作为流动相)来纯化，以产生呈灰色固体状的标题化合物(28mg，22％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 10.69(s，1H)，9.44(s，1H)，8.91(s，1H)，8.90(s，1H)，8.86(s，1H)，8.50-8.49(m，1H)，8.19-8.16(m，1H)，8.12-8.01(m，1H)，7.82-7.79(m，1H)，7.41(t，J＝53.6Hz，1H)，5.56-5.48(m，1H)，2.41(s，3H)，1.41(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：439.0[M+H]⁺。

实施例76：1-(5-氰基吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在30℃下向1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(150mg，0.30mmol)于DMA(4mL)中的溶液中添加Zn(CN)₂(43mg，0.36mmol)、Zn(12mg，0.18mmol)、dppf(34mg，0.06mmol)和Pd₂(dba)₃(28mg，0.03mmol)。将混合物用N₂脱气，并且在120℃下搅拌20h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，并且通过制备型HPLC(使用Waters Xbridge Prep OBD C18 5μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从33至53％使用水(含有0.04％NH₃H₂O和10mM NH₄HCO₃)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(80mg，60％)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 10.73(s，1H)，9.51(s，1H)，9.40(d，J＝2.4Hz，1H)，9.13(d，J＝1.6Hz，1H)，8.89(s，1H)，8.84(t，J＝2.0Hz，1H)，8.21(d，J＝8.2Hz，1H)，8.06(t，J＝8.0Hz，1H)，7.85(d，J＝7.6Hz，1H)，7.30-7.61(m，1H)，5.490-5.59(m，1H)，1.45(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：450.1[M+H]⁺。

实施例77：1-(5-环丙基吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在110℃下将1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(100mg，0.20mmol)、环丙基硼酸(51mg，0.60mmol)、Pd(OAc)₂(18mg，0.060mmol)、PCy₃(45mg，0.16mmol)和Cs₂CO₃(129mg，0.40mmol)于甲苯/H₂O(11mL，10/1)中的混合物搅拌12h。在这个时间之后，将溶剂在真空中移除，并且将混合物通过在硅胶上进行柱色谱法来纯化，用DCM/MeOH(从100/1至30/1)洗脱，以产生呈白色固体状的标题化合物(21mg，23％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 10.66(s，1H)，9.41(s，1H)，8.85(s，2H)，8.49(s，1H)，8.16(d，J＝8.2Hz，1H)，8.02(t，J＝7.9Hz，1H)，7.89-7.74(m，2H)，7.60-7.22(m，1H)，5.57-5.43(m，1H)，2.18-2.01(m，1H)，1.41(d，J＝6.6Hz，6H)，1.13-1.01(m，2H)，0.91-0.82(m，2H)。MS(ESI)：465.2[M+H]⁺。

实施例78：3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

向1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(300mg，0.59mmol)于NMP(6mL)中的溶液中添加NaOMe(0.5mL，30％MeOH)，并且在90℃下将混合物搅拌30分钟。在这个时间之后，将混合物倾倒至水(10mL)中，并且用MeOH/DCM(1/10，20mL x 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将残余物通过制备型HPLC(使用WatersXbridge Prep OBD C18 5μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从27至57％使用水(含有0.04％NH₃H₂O和10mM NH₄HCO₃)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(67mg，24％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 10.98-10.49(br s，1H)，9.56(s，1H)，8.87(s，1H)，8.73(d，J＝1.8Hz，1H)，8.39(d，J＝2.4Hz，1H)，8.18(d，J＝8.4Hz，1H)，8.03(t，J＝8.0Hz，1H)，7.92-7.74(m，2H)，7.59-7.23(m，1H)，5.59(td，J＝6.8，13.3Hz，1H)，3.95(s，3H)，1.43(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：455.1[M+H]⁺。

实施例79：3-(二氟甲基)-1-(5-(二甲基氨基)吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在100℃下将1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(100mg，0.20mmol)、二甲胺盐酸盐(24mg，0.30mmol)、RuPhos(18mg，0.04mmol)、NaOtBu(95mg，0.99mmol)和Pd₂(dba)₃(18mg，0.02mmol)于DMF(5mL)中的混合物搅拌12h。在这个时间之后，过滤混合物，并且通过制备型HPLC(使用Waters Xbridge Prep OBD C18 5μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从23-53％使用水(含有0.04％NH₃H₂O和10mM NH₄HCO₃)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈黄色固体状的标题化合物(8.0mg，8.6％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 10.67(s，1H)，9.38(s，1H)，8.87(s，1H)，8.35(d，J＝1.6Hz，1H)，8.20-8.13(m，2H)，8.03(t，J＝7.6Hz，1H)，7.81(dd，J＝0.8，8.0Hz，1H)，7.57-7.24(m，2H)，5.52(quin，J＝6.6Hz，1H)，3.04(s，6H)，1.43(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：468.2[M+H]⁺。

实施例80：3-(二氟甲基)-1-(5-羟基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在N₂下向1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(300mg，0.59mmol)于二噁烷(5mL)中的溶液中添加4，4，4′，4′，5，5，5′，5′-八甲基-2，2′-双(1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷)(454mg，1.79mmol)、KOAc(117mg，1.19mmol)和Pd(dppf)Cl₂(43.6mg，0.059mmol)，并且在110℃下将混合物搅拌2h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，溶解于DCM(20mL)中，并且用水(20mL x2)洗涤。将有机层经Na₂SO₄干燥，并且浓缩以产生呈黑色固体状的标题化合物(600mg，粗物质)。

步骤B：3-(二氟甲基)-1-(5-羟基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

向3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-(5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(500mg，1.07mmol)于THF(10mL)中的溶液中添加H₂O₂/AcOH(1mL，1∶1)，并且在50℃下在N₂下将混合物搅拌1h。在这个时间之后，将混合物用水(20mL)稀释，并且用DCM/MeOH(10∶1，60mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将粗产物通过在硅胶上进行柱色谱法来纯化，用DCM/MeOH(20/1)洗脱，以产生呈白色固体状的标题化合物(110mg，23％)。MS(ESI)：441.2[M+H]⁺。

实施例81：3-(二氟甲基)-1-(5-异丙氧基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

向3-(二氟甲基)-1-(5-羟基吡啶-3-基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(90mg，0.21mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加2-碘丙烷(69.5mg，0.42mmol)、K₂CO₃(54mg，0.42mmol)和KI(34mg，0.21mmol)，并且在80℃下在N₂下将混合物搅拌2h。在这个时间之后，过滤混合物，并且将滤液通过制备型HPLC(使用XtimateC18 5μm，150x25mm柱，并且在25mL/min的流速下从35至54％使用水(含有10mM NH₄HCO₃)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(42mg，43％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 10.66(s，1H)，9.41(s，1H)，8.86(s，1H)，8.67(d，J＝2.0Hz，1H)，8.34(d，J＝2.4Hz，1H)，8.17-8.15(m，1H)，8.04-7.99(t，J＝8.0Hz，1H)，7.82-7.79(m，2H)，7.53-7.28(m，1H)，5.54-5.37(m，1H)，4.84(m，1H)，1.42-1.40(d，J＝6.6Hz，6H)，1.32-1.31(d，J＝6.0Hz，6H)。MS(ESI)：483.1[M+H]⁺。

实施例82：3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

向1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(100mg，0.21mmol)于MeOH(25mL)中的溶液中添加Pd/C(98mg)，并且在28℃下在H₂(15psi)下将混合物搅拌4h。在这个时间之后，过滤混合物，并且在真空中浓缩。将所得固体在减压下干燥，以产生呈白色固体状的标题化合物(40mg，46％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 10.74(s，1H)，9.57(s，1H)，9.14(d，J＝2.4Hz，1H)，8.88(s，1H)，8.68(d，J＝3.6Hz，1H)，8.33-8.27(m，1H)，8.22-8.16(m，1H)，8.04(t，J＝7.6Hz，1H)，7.84(dd，J＝0.8，7.6Hz，1H)，7.67(dd，J＝4.8，8.4Hz，1H)，7.58-7.31(s，1H)，5.59(td，J＝6.8，13.6Hz，1H)，1.44(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：425.1[M+H]⁺。

实施例83：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：3-甲氧基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯

在120℃下将3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(170mg，1.0mmol)、2-溴吡啶(174mg，1.1mmol)和Cs₂CO₃(326mg，1.0mmol)于DMF(1mL)中的混合物在密封管中加热过夜。在这个时间之后，将混合物分配于EtOAc与水之间，将水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将所得粗混合物通过正相柱来纯化，用10-20％EtOAc/庚烷洗脱，以产生呈白色固体状的标题化合物(36mg，15％)。MS(ESI)：248.1[M+H]⁺。

步骤B：3-甲氧基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酸

向于反应小瓶中的3-甲氧基-1-(2-吡啶基)吡唑-4-甲酸乙酯(36mg，0.145mmol)于THF(0.5mL)和MeOH(0.5mL)中的搅拌溶液中添加1N氢氧化钠(0.3mL)。在60℃下将反应混合物加热1.5h。在这个时间之后，将混合物通过添加1N HCl水溶液来酸化，并且在真空中浓缩以产生呈固体状的标题化合物，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。

步骤C：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

向于反应小瓶中的6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(30mg，0.15mmol)和3-甲氧基-1-(2-吡啶基)吡唑-4-甲酸(32mg，0.15mmol)的搅拌混合物中添加Et₃N(0.5mL，3.61mmol)和丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.5mL)，并且在80℃下将混合物加热1.5h。在这个时间之后，使反应混合物冷却至室温，并且用MeOH和水淬灭。过滤所得悬浮液，并且用水、EtOAc和MeOH洗涤以产生呈白色固体状的标题化合物(9mg，15％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 10.47(s，1H)，9.87(s，1H)，9.72(s，1H)，9.34(d，J＝3.76Hz，1H)，9.06(d，J＝8.03Hz，1H)，8.77-8.94(m，2H)，8.67(t，J＝8.78Hz，2H)，8.23(dd，J＝6.78，5.02Hz，1H)，5.94-6.46(m，1H)，4.96(s，3H)，2.35(d，J＝6.53Hz，6H)。MS(ESI)：405.2[M+H]⁺。

实施例84：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(哒嗪-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例83中所述的一般性程序来合成标题化合物，但在步骤A中使用3-氯哒嗪代替2-溴吡啶以产生呈灰白色固体状的标题化合物(43mg，对于最后一步来说是63％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 9.76(s，1H)，9.27-9.35(m，1H)，9.25(dd，J＝4.77，1.25Hz，1H)，8.90(s，1H)，8.11-8.34(m，2H)，8.04(t，J＝7.91Hz，1H)，7.95(dd，J＝9.04，4.77Hz，1H)，7.85(d，J＝7.53Hz，1H)，5.46(quin，J＝6.65Hz，1H)，4.15(s，3H)，1.53(d，J＝6.53Hz，6H)。MS(ESI)：406.2[M+H]⁺。

实施例85：(S)-3-甲氧基-1-(哒嗪-3-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例83中所述的一般性程序来合成标题化合物，但在步骤A中使用3-氯哒嗪代替2-溴吡啶，并且在步骤C中使用(S)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(12mg，对于最后一步来说是46％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 9.95(s，1H)，9.19-9.42(m，2H)，9.15(s，1H)，8.10-8.33(m，2H)，8.06(t，J＝7.91Hz，1H)，7.83-8.01(m，2H)，6.77-6.99(m，1H)，4.13(s，3H)，1.85(d，J＝7.28Hz，3H)。MS(ESI)：460.1[M+H]⁺。

实施例86：(R)-3-甲氧基-1-(哒嗪-3-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例83中所述的一般性程序来合成标题化合物，但在步骤A中使用3-氯哒嗪代替2-溴吡啶，并且在步骤C中使用(R)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(11mg，对于最后一步来说是43％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.23(s，1H)，9.11-9.17(m，1H)，9.02(s，1H)，8.37(d，J＝8.28Hz，1H)，8.25(dd，J＝8.91，1.13Hz，1H)，7.94-8.11(m，2H)，7.89(dd，J＝8.78，4.77Hz，1H)，6.85(quin，J＝7.15Hz，1H)，4.25(s，3H)，1.90(d，J＝7.03Hz，3H)。MS(ESI)：460.1[M+H]⁺。

实施例87：(S)-3-甲氧基-1-(吡嗪-2-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺。

步骤A：3-甲氧基-1-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯。

将3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(250mg，1.5mmol)、2-氯吡嗪(202mg，1.8mmol)、CuI(28mg，0.15mmol)、L-脯氨酸(34mg，0.29mmol)和碳酸钾(447mg，3.2mmol)溶解于DMF(6mL)中，并且在100℃下在N₂下将反应加热过夜。在这个时间之后，过滤反应，并且将滤液在真空中蒸发并通过柱色谱法来纯化，使用CH₂Cl₂作为洗脱剂以产生标题化合物(275mg，75％)。MS(ESI)：249.0[M+H]⁺。

步骤B：3-甲氧基-1-(吡嗪-2基)-1H-吡唑-4-甲酸。

将3-甲氧基-1-吡嗪-2-基-吡唑-4-甲酸乙酯(220mg，0.89mmol)溶解于THF(2mL)和MeOH(2mL)的溶液中。添加NaOH(1M，1.1mL)，并且在60℃下将反应加热1h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且通过添加1N HCl水溶液来酸化。将所得混合物分配于EtOAc与水之间，并且将分离的有机层经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩，以产生呈白色固体状的标题化合物(165mg，85％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.17(d，J＝1.5Hz，1H)，8.89(s，1H)，8.55(d，J＝2.5Hz，1H)，8.49(dd，J＝2.6，1.4Hz，1H)，4.11(s，3H)。MS(ESI)：221.0[M+H]⁺。

步骤C：(S)-3-甲氧基-1-(吡嗪-2-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将3-甲氧基-1-吡嗪-2-基-吡唑-4-甲酸(80mg，0.36mmol)和6-[4-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙基]-1，2，4-三唑-3-基]吡啶-2-胺(93mg，0.36mmol)溶解于Et₃N(503μL，3.6mmol)中。接着添加丙基膦酸酐(346mg，0.4mL，1.1mmol)，并且在80℃下将反应混合物加热3h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且通过添加MeOH(2mL)来淬灭。过滤所得固体，并且在真空下干燥以产生标题化合物(95mg，57％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.23(d，J＝1.5Hz，2H)，9.03(s，1H)，8.54(d，J＝2.5Hz，1H)，8.41-8.47(m，2H)，8.40(dd，J＝2.5，1.5Hz，1H)，8.08-8.14(m，1H)，7.92(t，J＝8.0Hz，1H)，6.73(quin，J＝7.2Hz，1H)，4.25(s，3H)，1.83(d，J＝7.3Hz，3H)。MS(ESI)：460.1[M+H]⁺。

实施例88：(R)-3-甲氧基-1-(吡嗪-2-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将3-甲氧基-1-吡嗪-2-基-吡唑-4-甲酸(147mg，0.67mmol)和(R)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(110mg，0.43mmol)溶解于Et₃N(593μL，4.3mmol)中。添加丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，0.4mL)，并且在80℃下将反应加热3h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且通过添加MeOH(2mL)来淬灭。过滤所得固体，并且在真空下干燥以产生标题化合物(114mg，58％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.19(s，1H)，9.06(d，J＝6.8Hz，2H)，8.58(d，J＝2.8Hz，1H)，8.52(s，1H)，8.38(d，J＝8.0Hz，1H)，7.92-8.10(m，2H)，6.86(dt，J＝14.4，7.3Hz，1H)，4.28(s，3H)，1.92(d，J＝7.3Hz，3H)。MS(ESI)：460.1[M+H]⁺。

实施例89：(S)-3-(二氟甲基)-1-(吡嗪-2-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：3-(二氟甲基)-1-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯

将3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(350mg，1.8mmol)、2-氯吡嗪(253mg，2.2mmol)、CuI(35mg，0.18mmol)、L-脯氨酸(42mg，0.37mmol)和碳酸钾(559mg，4mmol)的混合物溶解于DMF(12mL)中，并且在N₂氛围下加热至100℃，过夜。在这个时间之后，使反应冷却至室温，过滤，并且将溶剂在真空中蒸发。将粗物质通过柱色谱法来纯化，使用CH₂Cl₂作为洗脱剂以产生标题化合物(350mg，71％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.42(d，J＝1.3Hz，1H)，9.03(s，1H)，8.64(d，J＝2.5Hz，1H)，8.44(dd，J＝2.3，1.5Hz，1H)，7.16-7.28(m，1H)，4.38(q，J＝7.0Hz，2H)，1.40(t，J＝7.2Hz，3H)。MS(ESI)：269.0[M+H]⁺。

步骤B：3-(二氟甲基)-1-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-4-甲酸

将3-(二氟甲基)-1-吡嗪-2-基-吡唑-4-甲酸乙酯(345mg，1.3mmol)溶解于THF(4mL)和MeOH(4mL)的溶液中。添加NaOH(1M，1.6mL)，并且在60℃下将反应加热1h。在这个时间之后，将溶液通过添加1N HCl来酸化，并且将混合物分配于EtOAc与水之间。将有机相经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中蒸发以产生呈白色固体状的标题化合物(296mg，96％)。MS(ESI)：240.9[M+H]⁺。

步骤C：(S)-3-(二氟甲基)-1-(吡嗪-2-基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将3-(二氟甲基)-1-吡嗪-2-基-吡唑-4-甲酸(95mg，0.40mmol)和6-[4-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基-乙基]-1，2，4-三唑-3-基]吡啶-2-胺(102mg，0.40mmol)溶解于Et₃N(543μL，4mmol)中。添加丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，404μL)，并且在80℃下将反应混合物加热3h。在这个时间之后，使反应冷却至室温，并且通过添加MeOH(2mL)来淬灭。过滤所得固体，并且在真空下干燥以产生标题化合物(80mg，42％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.41(t，J＝1.3Hz，1H)，9.36(d，J＝1.5Hz，1H)，9.00(s，1H)，8.67(d，J＝3.0Hz，1H)，8.57(dd，J＝2.5，1.5Hz，1H)，8.23(dd，J＝7.9，1.4Hz，1H)，7.90-8.06(m，2H)，7.21-7.51(m，1H)，7.15(quin，J＝7.3Hz，1H)，1.90(d，J＝7.0Hz，3H)。MS(ESI)：480.0[M+H]⁺。

实施例90：N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-胺

将丙烷-2-胺(1.4mL，16mmol)、6-氨基吡啶-2-甲醛(997mg，8.16mmol)于DMF(8mL)中的混合物加热至100℃，持续30分钟，从而产生深色溶液。在这个时间之后，使混合物冷却至室温，并且添加K₂CO₃(2.26g，16.3mmol)和TosMIC(1.59g，8.16mmol)。在100℃下将所得混合物搅拌过夜。在这个时间之后，将反应混合物分配于EtOAc与饱和NaHCO₃之间，并且将有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将混合物通过正相柱来纯化，用EtOAc/EtOH(3/1)洗脱，以产生呈深棕色固体状的产物。将这个固体用MeCN(5mL)湿磨，以产生呈灰色结晶固体状的标题化合物(402mg，24％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.89(s，1H)，7.50(dd，J＝8.16，7.66Hz，1H)，7.19(d，J＝1.00Hz，1H)，6.83(d，J＝7.28Hz，1H)，6.52(d，J＝8.28Hz，1H)，5.32(dt，J＝13.36，6.75Hz，1H)，1.49(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(ESI)：203.0[M+H]⁺

步骤B：N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例2中所述的一般性程序来合成标题化合物，但使用6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺以产生呈灰白色固体状的标题化合物(80mg，29％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.13(d，J＝8.28Hz，1H)，7.95-8.06(m，2H)，7.84(t，J＝8.03Hz，1H)，7.35-7.54(m，2H)，5.31-5.49(m，1H)，4.12(s，3H)，3.83(s，3H)，1.62(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(ESI)：341.0[M+H]⁺。

实施例91：1-(环丙基甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例2中所述的一般性程序来合成标题化合物，但使用1-(环丙基甲基)-3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸代替1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸，以及6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(4mg，14％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.06-8.20(m，2H)，7.98(s，1H)，7.82(t，J＝7.91Hz，1H)，7.25-7.47(m，2H)，5.39(quin，J＝6.71Hz，1H)，4.11(s，3H)，3.90(d，J＝7.03Hz，2H)，1.54-1.65(m，6H)，1.25-1.41(m，1H)，0.57-0.74(m，2H)，0.26-0.48(m，2H)。MS(ESI)：381.0[M+H]⁺。

实施例92：N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例4中所述的一般性程序来合成标题化合物，但使用3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-甲酸代替3-(甲氧基甲基)-1-甲基-吡唑-4-甲酸，以及6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(23mg，42％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.12(d，J＝8.28Hz，1H)，8.05(s，1H)，8.00(s，1H)，7.83(t，J＝8.03Hz，1H)，7.27-7.47(m，2H)，5.31-5.46(m，1H)，4.20-4.29(m，2H)，4.12(s，3H)，3.76(t，J＝5.15Hz，2H)，3.36(s，3H)，1.61(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(ESI)：385.0[M+H]⁺。

实施例93：3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1-(5-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基氯

在50℃下将1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(3.8g，12mmol)于SOCl₂(50mL)中的溶液加热1h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，以产生呈黄色胶状的标题化合物(4g，粗物质)。

步骤B：1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

向1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基氯(4g，粗物质，12.5mmol)于DCM(100mL)中的溶液中添加6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-胺氯化氢(4g，15mmol)和吡啶(6mL)，随后添加DMAP(3g，25mmol)，并且在24℃下将混合物搅拌1h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，并且通过快速柱来纯化，使用DCM/MeOH(从1/0至20/1)作为洗脱剂，以产生呈棕色固体状的标题化合物(2.6g，41％，两步)。MS(ESI)：504.1[(M+H)(⁸⁰Br)]⁺。

步骤C：3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1-(5-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在90℃下将1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(80mg，159mmol)、三氟(甲基)硼酸钾(39mg，0.32mmol)、K₂CO₃(44mg，0.32mmol)和Pd(dppf)Cl₂(23mg，0.032mmol)于二噁烷/H₂O(2mL，5/1)中的混合物搅拌17h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，并且将混合物通过制备型HPLC(使用Xtimate C18 5μm，150x25mm柱，并且在25mL/min的流速下从37-67％使用水和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈绿色固体状的标题化合物(7mg，8％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm10.52(s，1H)，9.44(s，1H)，8.90(d，J＝2.2Hz，1H)，8.50(s，1H)，8.11(s，1H)，8.00(d，J＝7.5Hz，1H)，7.95(s，1H)，7.88(t，J＝7.9Hz，1H)，7.57-7.27(t，J＝53.6Hz，1H)，7.44-7.41(m，1H)，7.38(d，J＝0.9Hz，1H)，5.42(m，1H)，2.42(s，3H)，1.38(d，J＝6.6Hz，6H)。MS(ESI)：438.2[M+H]⁺。

实施例94：3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

向1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(80mg，0.16mmol)于MeOH(6mL)中的混合物中添加Pd/C(50mg，0.47mmol)，并且在20℃下在H₂(15psi)下将混合物搅拌3h。在这个时间之后，过滤混合物，并且将滤液通过制备型HPLC(使用Waters Xbridge Prep OBD C18 5μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从32至62％使用水(含有0.04％NH₃H₂O和10mM NH₄HCO₃)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(12mg，14％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 10.54(s，1H)，9.46(s，1H)，9.10(d，J＝2.4Hz，1H)，8.70-8.62(m，1H)，8.26(d，J＝9.6Hz，1H)，8.01(d，J＝8.4Hz，1H)，7.95(s，1H)，7.88(t，J＝8.0Hz，1H)，7.65(dd，J＝4.8，8.0Hz，1H)，7.44-7.38(m，3H)，5.48-5.38(m，1H)，1.38(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：424.1[M+H]⁺。

实施例95：1-(5-氰基吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在30℃下向1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(40mg，0.079mmol)于DMA(2.0mL)中的溶液中添加Pd₂(dba)₃(7.3mg，0.0079mmol)、dppf(8.8mg，0.015mmol)、Zn(CN)₂(5.6mg，0.047mmol)和Zn(6.3mg，0.095mmol)。将混合物用N₂脱气，并且在120℃下搅拌20h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，并且将混合物通过制备型HPLC(使用Xtimate C18 5μm，150x25mm柱，并且在25mL/min的流速下从40至70％使用水(含有10mM NH₄HCO₃)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈黄色固体状的标题化合物(5mg，14％)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 10.58(s，1H)，9.53(s，1H)，9.40(d，J＝2.6Hz，1H)，9.12(s，1H)，8.82(s，1H)，8.03(d，J＝7.8Hz，1H)，7.98(s，1H)，7.91(t，J＝8.0Hz，1H)，7.59(s，1H)，7.31-7.48(m，3H)，5.41-5.51(m，1H)，1.41(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：449.1[M+H]⁺。

实施例96：1-(5-环丙基吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

向1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(200mg，0.39mmol)于甲苯/水(5.5mL，10∶1)中的溶液中添加环丙基硼酸(68mg，0.79mmol)、Cs₂CO₃(259mg，0.79mmol)。接着在N₂下添加PCy₃(56mg，0.2mmol)、Pd(OAc)₂(22mg，0.09mmol)，并且在110℃下将混合物搅拌2h。在这个时间之后，将溶剂在减压下移除，并且将混合物通过制备型HPLC(使用Xtimate C18 5μm，150x25mm柱，并且在25mL/min的流速下从39-69％使用水和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(71mg，38％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 10.55(s，1H)，9.44(s，1H)，8.87(s，1H)，8.51(s，1H)，8.02(d，J＝8.0Hz，1H)，7.93-7.88(m，1H)，7.88-7.85(m，1H)，7.47-7.41(m，2H)，5.46-5.43(m，1H)，2.16-2.07(m，1H)，1.75(s，1H)，1.40(d，J＝6.6Hz，7H)，1.13-1.04(m，2H)，0.93-0.85(m，2H)。MS(ESI)：464.2[M+H]⁺。

实施例97：3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在90℃下将1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(200mg，0.40mmol)和NaOMe(500uL，25％纯度，于MeOH中)于NMP(2mL)中的混合物搅拌30分钟。在这个时间之后，将混合物用DMF(5.0mL)稀释，并且过滤固体。将滤液通过制备型HPLC(使用Waters xbridge Prep OBD C185μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从32至62％使用水(含有0.04％NH₃H₂O和10mM NH₄HCO₃)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(21mg，11％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 10.55(s，1H)，9.47(s，1H)，8.73(d，J＝1.6Hz，1H)，8.41(d，J＝2.8Hz，1H)，8.01-8.04(m，1H)，7.97(s，1H)，7.90(t，J＝7.6Hz，1H)，7.85(t，J＝2.4Hz，1H)，7.30-7.58(m，3H)，5.42-5.48(m，1H)，3.96(s，3H)，1.41(d，J＝6.4Hz，6H)。MS(ESI)：454.2[M+H]⁺。

实施例98：3-(二氟甲基)-1-(5-(二甲基氨基)吡啶-3-基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在100℃下在N₂下将1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(100mg，0.20mmol)、二甲胺盐酸盐(32.5mg，0.40mmol)、RuPhos(18.6mg，0.04mmol)、Pd₂(dba)₃(18.2mg，0.02mmol)、tBuONa(76.5mg，0.80mmol)于DMF(5mL)中的混合物搅拌3h。在这个时间之后，过滤混合物，并且将滤液通过制备型HPLC(使用Waters Xbridge Prep OBD 5μm C18，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从38-61％使用水(含有0.04％NH₃H₂O和10mM NH₄HCO₃)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(21mg，22％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 10.55(s，1H)，9.42(s，1H)，8.36(d，J＝2.0Hz，1H)，8.18(d，J＝2.8Hz，1H)，8.05-8.02(m，2H)，7.92-7.90(m，1H)，7.46-7.42(m，4H)，5.49-5.42(m，1H)，3.05(s，6H)，1.40(d，J＝6.8Hz，6H)。MS(ESI)：467.1[M+H]⁺。

实施例99：3-(二氟甲基)-1-(5-羟基吡啶-3-基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：(5-(3-(二氟甲基)-4-((6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)硼酸

在100℃下在N₂氛围下将1-(5-溴吡啶-3-基)-3-(二氟甲基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(400mg，0.80mmol)、4，4，4′，4′，5，5，5′，5′-八甲基-2，2′-双(1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷)(607mg，2.4mmol)、KOAc(156mg，1.6mmol)和Pd(dppf)Cl₂(175mg，0.24mmol)于二噁烷(10mL)中的混合物搅拌17h。在这个时间之后，将混合物在真空中浓缩，并且溶解于DCM(20mL)中。将所得混合物用H₂O(20mL x 2)洗涤，将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩以产生标题化合物(1.20g，粗物质)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。MS(ESI)：468.2[M+H]⁺。

步骤B：3-(二氟甲基)-1-(5-羟基吡啶-3-基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

向(5-(3-(二氟甲基)-4-((6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)硼酸(1.2g，2.57mmol)于THF(20mL)中的混合物中添加AcOH(1mL)和H₂O₂(1mL，30％)，并且在50℃下将混合物搅拌2h。在这个时间之后，过滤混合物，并且将滤饼在真空中浓缩以产生标题化合物(200mg，18％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm10.52(s，1H)，9.40(s，1H)，8.55(d，J＝1.6Hz，1H)，8.20(d，J＝2.0Hz，1H)，8.00(d，J＝7.6Hz，1H)，7.95(s，1H)，7.87(t，J＝8.0Hz，1H)，7.61(t，J＝2.4Hz，1H)，7.43-7.38(m，3H)，5.47-5.40(m，1H)，1.38(d，J＝6.4Hz，6H)。MS(ESI)：440.2[M+H]⁺。

实施例100：3-(二氟甲基)-1-(5-异丙氧基吡啶-3-基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在80℃下将3-(二氟甲基)-1-(5-羟基吡啶-3-基)-N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(80mg，0.18mmol)、2-碘丙烷(62mg，0.36mmol)、K₂CO₃(50mg，0.36mmol)和KI(30mg，0.18mmol)于DMF(2mL)中的混合物搅拌2h。在这个时间之后，过滤混合物，并且将滤液通过制备型HPLC(使用Waters Xbridge Prep OBD C18 5μm，150x30mm柱，并且在25mL/min的流速下从35-65％使用水(含有0.04％NH₃H₂O和10mMNH₄HCO₃)和MeCN作为流动相)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(6.3mg，6％)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 10.50(br s，1H)，9.42(s，1H)，8.66(d，J＝2.0Hz，1H)，8.33(d，J＝2.4Hz，1H)，8.02-7.92(m，2H)，7.87(t，J＝8.0Hz，1H)，7.81(t，J＝2.0Hz，1H)，7.56-7.25(m，3H)，5.46-5.39(m，1H)，4.87-4.80(m，1H)，1.38(d，J＝6.8Hz，6H)，1.32(d，J＝6.0Hz，6H)。MS(ESI)：482.2[M+H]⁺。

实施例101：N-(3-(1-环丙基-1H-咪唑-5-基)苯基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：3-甲氧基-1-甲基-N-(3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

在回流下将3-甲氧基-1-甲基-吡唑-4-甲酸(2.00g，12.8mmol)于亚硫酰氯(7.0mL，96.1mmol)中的混合物加热15分钟。在这个时间之后，将挥发物在减压下移除，从而产生呈米色固体状的相应酰氯。将固体溶解于DCM(7mL)中，并且在0℃下逐滴添加至3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(3.1g，14.1mmol)、DMAP(78mg，0.64mmol)和Et₃N(3.55mL，25.6mmol)于DCM(7mL)中的溶液中。在室温下使反应保持搅拌过夜。在这个时间之后，将挥发物移除，并且将残余物溶解于DCM(25mL)中，并用饱和NaHCO₃(10mL)洗涤。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，并且浓缩以产生标题化合物(4.50g，98％)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。

步骤B：N-(3-(1-环丙基-1H-咪唑-5-基)苯基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

将微波小瓶装以5-溴-1-环丙基-1H-咪唑(40mg，0.21mmol)、3-甲氧基-1-甲基-N-(3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(75mg，0.21mmol)、碳酸铯(137mg，0.42mmol)和Pd(dppf)G3(20mg，0.02mmol)。添加二噁烷(1.5mL)和水(75μL)。将小瓶用N₂吹扫，密封，并且在120℃下在biotage微波中辐照1h。在这个时间之后，将挥发物在减压下移除，并且将所得黑色残余物溶解于DMSO中，并经受制备型HPLC(使用Sunfire Prep C18 OBD，5μm 30x50mm柱，并且在50mL/min的流速下在采用0.1％TFA的情况下历经20分钟使用95％水/5％MeCN(初始条件)至50％水/50％MeCN作为流动相)。将含有产物的级分合并，蒸发至干，并且将所得残余物溶解于DCM(20mL)，中并用饱和NaHCO₃(10mL)洗涤。分离有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且浓缩以产生呈白色固体状的标题化合物(28mg，40％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.53(s，1H)，8.01(t，J＝1.8Hz，1H)，7.79(s，1H)，7.57(d，J＝0.8Hz，1H)，7.46-7.41(m，1H)，7.36(t，J＝7.8Hz，1H)，7.25(td，J＝1.4，7.8Hz，1H)，7.11(d，J＝1.3Hz，1H)，4.09(s，3H)，3.78(s，3H)，3.42(tt，J＝3.7，7.2Hz，1H)，1.06-0.98(m，2H)，0.90-0.82(m，2H)。MS(ESI)：338.1[M+H]⁺。

实施例102：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯

在100℃下将3-甲氧基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(170mg，1.0mmol)、1，1，1-三氟-2-碘乙烷(108μL，1.1mmol)和Cs₂CO₃(284mg，0.087mmol)于DMF(2mL)中的混合物用微波辐射加热30分钟。在相同条件下进行反应两次，并且将合并的粗混合物分配于EtOAc与水之间。将水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将残余物通过正相柱来纯化，用30％EtOAc/庚烷洗脱，以产生呈白色固体状的标题化合物(220mg，44％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.08(s，1H)，4.71-4.82(m，2H)，4.25(q，J＝7.11Hz，2H)，3.93(s，3H)，1.31(t，J＝7.15Hz，3H)。MS(ESI)：252.9[M+H]⁺。

步骤B：3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酸

向3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(203mg，0.8mmol)于THF(0.5mL)和MeOH(0.5mL)中的溶液中添加1N NaOH(1mL)。在室温下将反应混合物搅拌过夜。在这个时间之后，将混合物通过添加1N HCl水溶液来酸化，并且将混合物分配于EtOAc与水之间。将有机层经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩以产生呈白色固体状的标题化合物(170mg，95％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.05(s，1H)，4.72-4.80(m，2H)，3.93(s，3H)。

步骤C：N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

向6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(41mg，0.20mmol)和3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酸(45mg，0.21mmol)的混合物中添加Et₃N(0.4mL，2.9mmol)和丙基膦酸酐(≥50wt％，于EtOAc中，O.4mL)。在110℃下将混合物用微波辐射加热90分钟。在这个时间之后，将混合物用少量MeOH(～1mL)淬灭，接着将它分配于EtOAc与水之间。将水层用EtOAc萃取，并且将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将粗产物通过正相柱来纯化，用EtOAc/EtOH(7/1)洗脱，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(39mg，48％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.85(s，1H)，8.35(d，J＝7.78Hz，1H)，8.22(s，1H)，7.99(t，J＝8.03Hz，1H)，7.83(d，J＝7.28Hz，1H)，5.45(quin，J＝6.71Hz，1H)，4.87-4.96(m，2H)，4.13(s，3H)，1.64(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(ESI)：409.9[M+H]⁺。

实施例103：(S)-3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-N-(6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例102中所述的一般性程序来合成产物，但在步骤C中使用(S)-6-(4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(48mg，57％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.01(s，1H)，8.31-8.42(m，1H)，8.22(s，1H)，7.85-8.08(m，2H)，6.79(quin，J＝7.22Hz，1H)，4.87-4.95(m，2H)，4.12(s，3H)，1.87(d，J＝7.28Hz，3H)。MS(ESI)：463.9[M+H]⁺。

实施例104：(S)-3-甲氧基-N-(6-(4-(3-甲基丁烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例102中所述的一般性程序来合成产物，但在步骤C中使用(S)-6-(4-(3-甲基丁烷-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(50mg，67％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm8.84(s，1H)，8.36(d，J＝7.78Hz，1H)，8.22(s，1H)，7.99(t，J＝8.03Hz，1H)，7.83(d，J＝7.28Hz，1H)，5.16-5.34(m，1H)，4.88-4.97(m，2H)，4.14(s，3H)，2.08-2.27(m，1H)，1.60(d，J＝7.03Hz，3H)，1.04(d，J＝6.78Hz，3H)，0.86(d，J＝6.78Hz，3H)。MS(ESI)：438.0[M+H]⁺。

实施例105：N-(6-(4-环丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例102中所述的一般性程序来合成产物，但在步骤C中使用6-(4-环丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(18mg，43％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.64(s，1H)，8.36(d，J＝7.78Hz，1H)，8.22(s，1H)，7.99(t，J＝7.91Hz，1H)，7.83(d，J＝7.28Hz，1H)，4.87-4.94(m，2H)，4.11(s，3H)，3.91(dt，J＝7.53，3.51Hz，1H)，1.12(s，2H)，0.95-1.09(m，2H)。MS(ESI)：407.9[M+H]⁺。

实施例106：N-(6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据实施例102中所述的一般性程序来合成产物，但在步骤C中使用6-(1-异丙基-1H-咪唑-5-基)吡啶-2-胺代替6-(4-异丙基-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺，以产生呈灰白色固体状的标题化合物(11mg，46％)。¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.21(s，1H)，8.13(d，J＝8.03Hz，1H)，8.00(s，1H)，7.84(t，J＝7.91Hz，1H)，7.28-7.48(m，2H)，5.40(dt，J＝13.55，6.78Hz，1H)，4.88-4.96(m，2H)，4.14(s，3H)，1.61(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(ESI)：408.9[M+H]⁺。

实施例107：3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(氧杂环丁烷-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

步骤A：6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶甲酸甲酯

将3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸(1.23g，7.9mmol)、6-氨基吡啶甲酸甲酯(1.0g，6.7mmol)、丙基膦酸酐(4.38mL，3M，于EtOAc中)和Et₃N(5.5mL，40mmol)于EtOAc(2mL)中的混合物加热至110℃，持续30分钟。在这个时间之后，使反应混合物冷却至室温，并且通过过滤来以米色固体形式获得标题化合物，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。

步骤B：N-(6-(肼羰基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

在室温下将粗制6-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)吡啶甲酸甲酯(2g，6.89mmol)和水合肼(1.8mL，55wt％，于水中)于MeOH(2mL)中的溶液搅拌12h。通过过滤来以与未反应起始物质的2∶1混合物形式获得所需产物。使粗混合物不经进一步纯化即经受下一步骤。

步骤C：N-(6-(2-((二甲基氨基)亚甲基)肼-1-羰基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺

将来自步骤B的粗混合物(1.5g)溶解于N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(3.8mL，29mmol)中，并且在室温下搅拌过夜。将挥发物移除，并且将残余物溶解于MeOH中，并在硅胶(4g)上蒸发，并且通过柱色谱法(12g，SiO₂，使用0-15％MeOH(含有5％NH₄OH)/DCM作为洗脱剂)来纯化，以产生呈白色固体状的标题化合物(550mg，46％)。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm9.78(s，1H)，9.01(br s，1H)，8.45(d，J＝1.2Hz，1H)，8.44-8.39(m，1H)，7.93-7.90(m，1H)，7.86(d，J＝7.9Hz，1H)，7.83(s，1H)，4.15(s，3H)，3.81(s，3H)，2.99(s，6H)。MS(ESI)：346.2[M+H]⁺。

步骤D：3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(氧杂环丁烷-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将反应小瓶装以N-(6-(2-((二甲基氨基)亚甲基)肼-1-羰基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(138mg，0.4mmol)、氧杂环丁烷-3-胺(44mg，0.6mmol)、MeCN(3mL)和乙酸(1mL)的混合物。在回流下将所得混合物加热12h。在这个时间之后，将挥发物在减压下移除，并且使所得残余物经受质量导向的HPLC(使用5-65％MeCN/H₂O(含有4％NH₄OH)作为洗脱剂)以产生标题化合物(12mg，8％)。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm 8.51-8.44(m，1H)，8.48(s，1H)，8.02(d，J＝9.2Hz，1H)，7.77-7.64(m，1H)，7.41(t，J＝8.0Hz，1H)，7.25(dd，J＝1.2，6.7Hz，1H)，5.24-5.13(m，1H)，4.74-4.66(m，1H)，4.52(br d，J＝14.7Hz，1H)，4.02(br dd，J＝4.9，12.2Hz，1H)，3.95(s，3H)，3.91(br dd，J＝6.7，11.6Hz，1H)，3.75(s，3H)。MS(ESI)：356.2[M+H]⁺。

实施例108：3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将反应小瓶装以N-(6-(2-((二甲基氨基)亚甲基)肼-1-羰基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(50mg，0.15mmol)、四氢-2H-吡喃-4-胺(30mg，0.29mmol)、MeCN(2mL)和乙酸(0.7mL)的混合物。在回流下将所得混合物加热1h。通过过滤来从反应混合物分离粗标题化合物，并且进一步通过质量导向的HPLC(5-65％MeCN/H₂O(4％NH₄OH))来纯化，以产生标题化合物(7mg，13％)。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm 8.95(br s，1H)，8.46-8.30(m，2H)，8.05(br d，J＝7.3Hz，1H)，7.92-7.76(m，2H)，5.50(br t，J＝11.6Hz，1H)，4.27-4.16(m，2H)，4.11(s，3H)，3.82(s，3H)，3.61(br t，J＝11.9Hz，2H)，2.23(br d，J＝11.0Hz，2H)，2.16-1.95(m，2H)。MS(ESI)：384.2[M+H]⁺。

实施例109和实施例110：(R)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(四氢呋喃-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺和(S)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(四氢呋喃-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺。

步骤A：rac-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(四氢呋喃-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

将反应小瓶装以N-(6-(2-((二甲基氨基)亚甲基)肼-1-羰基)吡啶-2-基)-3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(50mg，0.15mmol)、四氢呋喃-3-胺(25mg，0.29mmol)、MeCN(2mL)和乙酸(0.7mL)的混合物。在回流下将所得混合物加热1h。通过过滤来从反应混合物分离粗化合物，并且进一步通过质量导向的HPLC(使用5-65％MeCN/H₂O(含有4％NH₄OH)作为洗脱剂)来纯化，以产生标题化合物(24mg，24％)。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm 8.74(s，1H)，8.35-8.30(m，1H)，8.00(s，1H)，8.00-7.95(m，1H)，7.87-7.84(m，1H)，5.81(tdd，J＝2.6，5.3，7.8Hz，1H)，4.27-4.19(m，1H)，4.17-4.11(m，2H)，4.10(s，3H)，4.00(dt，J＝5.8，9.0Hz，1H)，3.81(s，3H)，2.68(dddd，J＝6.7，7.8，9.2，14.2Hz，1H)，2.42-2.34(m，1H)。MS(ESI)：370.2[M+H]⁺。

步骤B：(R)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(四氢呋喃-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-iH-吡唑-4-甲酰胺和(S)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(四氢呋喃-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺。

将rac-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(四氢呋喃-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(24mg，0.06mmol)通过SFC(使用Chiralpak AD-H 5μm，30x250mm柱，并且在100mL/min的流速下使用30％MeOH/0.1％Et₂NH/CO₂溶液作为流动相)来纯化，以按照洗脱的顺序产生：(R)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(四氢呋喃-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(12mg，任意指定立体化学)和(S)-3-甲氧基-1-甲基-N-(6-(4-(四氢呋喃-3-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(10mg，任意指定立体化学)。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm 8.74(s，1H)，8.35-8.30(m，1H)，8.00(s，1H)，8.00-7.95(m，1H)，7.87-7.84(m，1H)，5.81(tdd，J＝2.6，5.3，7.8Hz，1H)，4.27-4.19(m，1H)，4.17-4.11(m，2H)，4.10(s，3H)，4.00(dt，J＝5.8，9.0Hz，1H)，3.81(s，3H)，2.68(dddd，J＝6.7，7.8，9.2，14.2Hz，1H)，2.42-2.34(m，1H)。MS(ESI)：370.2[M+H]⁺。

实施例111：ASK1 TR-FRET测定的简要描述

本文所述的化合物蛋白质激酶抑制活性由Reaction Biology Corp.(Malvern，PA)使用ASK1/MAP3K5测定来测试。测定程序如下(并且还可在Reaction Biology Corp.网站上获得)。

基础反应缓冲液：20mM Hepes(pH 7.5)、10mM MgCl₂、1mM EGTA、0.02％Brij35、0.02mg/mL BSA、0.1mM Na₃VO₄、2mM DTT、1％DMSO；

底物：20μM髓磷脂碱性蛋白(MBP)和10μMATP；

蛋白质激酶：ASK1/MAP3K5。

反应程序：

1.在新鲜制备的基础反应缓冲液中制备所指示底物。

2.将任何所需辅因子递送至底物溶液中。

3.将所指示激酶递送至底物溶液中，并且温和混合。

4.通过声学技术(Echo550；纳升范围)来将DMSO中的化合物递送至激酶反应混合物中，并且在室温下孵育20分钟。

5.将³³p-ATP(比活性10μCi/μL)递送至反应混合物中以引发反应。

6.在室温下将激酶反应孵育2h。

7.将反应点样于P81离子交换纸上。

8.通过过滤结合方法来检测激酶活性。

结果在以下提供，其中化合物编号对应于以上实施例中阐述的编号，“+”表示IC₅₀小于10μM，但大于1μM，“++”表示IC₅₀小于或等于1μM，但大于0.1μM，并且“+++”表示IC₅₀小于或等于0.1μM。

表1.

实施例112：ASK1(AUTO PHOS T838)测定的简要描述

使用MSD测定形式，在HEK-293T细胞中测量ASK1 T838自体磷酸化。将HEK 293T细胞以1800万个细胞和20mL DMEM(含10％FBS，Pen/Strep培养基)的密度接种于15em板中。在37℃下将板孵育过夜。将板上的培养基更换成OPTI-MEM无血清培养基，并且使用Lipofectamine 2000(Invitrogen)，用9μg ASK1-V5标签化全长质粒转染细胞，并且在37℃下将板孵育过夜。用胰蛋白酶处理细胞，在Nexcellometer上计数，并且在100,000个细胞/孔和200μL培养基的情况下铺至96孔组织培养板中。在37℃下将细胞孵育4小时，接着使用HP 300e添加ASK1化合物。在20μM下以3倍10点稀释点测试化合物，接着在37℃下孵育1小时。制备具有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液(Cell Signaling)，并且在4℃下维持直至使用。丢弃来自细胞的培养基，并且将120μL冷裂解缓冲液添加至细胞，在4℃下将板振荡1小时。使用Apricot液体处理器混合裂解物；使用50μL体积，以高速上下抽吸16次。将50μL细胞裂解物转移至含有小鼠抗V5抗体(1∶500稀释)的预包被MSD板中，并且用MSD洗涤缓冲液(TBST)洗涤3次，并用3％BSA溶液封闭。接着在4℃下在板振荡器上将板孵育过夜。将板用MSD洗涤缓冲液洗涤3次，并且将50μL兔抗pASK1 T838抗体添加至孔中，并在室温下在板振荡器上孵育2小时。接着将板洗涤，并将50μL山羊抗兔sulfa标签(1∶500稀释)添加至孔中，并且在室温下在板振荡器上孵育1小时。将板洗涤3次，并且将150μL 2X MSD Read缓冲液添加至孔中。立刻在MSD仪器读取器上对板进行读取，在所述读取器中测量化学发光信号。使用Graph Pad或Genedata分析数据，将数据归一化，并且将活性％相对于对数化合物浓度绘图。由4参数拟合获得IC₅₀值。

在以上基于细胞的测定中测试本文所述的化合物。结果在以下提供，其中化合物编号对应于以上实施例中阐述的编号，

表示IC₅₀大于10μM，

表示IC₅₀等于或小于10μM但大于1μM，并且

表示IC₅₀等于或小于1μM。

表2.

实施例113：体内脑穿透

为评估本文所述的化合物的CNS穿透，选择若干化合物用于体内大鼠K_puu研究。在这些实验中，通过持续四小时的时期进行IV输注(以1∶1∶3∶5比率使用N，N-二甲基乙酰胺∶乙醇∶1，2-丙二醇：水作为媒介物)来在颈动脉中施用化合物(1mg/kg、0.1mg/mL)以达到稳定状态。在这个时间之后，对血浆和脑浓度水平进行定量，并且通过在血浆和脑匀浆中测量的蛋白质结合来调整数值，以根据以下方程计算Kppu(参见Di，L.；Kerns，E.H.Blood-BrainBarrier in Drug Discovery(Wiley))。

K_puu＝C_u，b/C_u，p

其中：

C_u，b＝脑中未结合浓度(C x f_u，b)。(C＝在稳定状态时的浓度；

f_u，b＝脑中未结合分数)

并且其中：C_u，p＝血浆中未结合浓度(C x f_u，p)。(C＝在稳定状态时的浓度；f_u，p＝血浆中未结合分数)

血浆和脑蛋白质结合值通过快速平衡透析法来产生。相对于pH 7.4的100mM磷酸钾/150mM氯化钠的缓冲区室，在1μM下在从BioIVT(Westbury，NY)购买的K₂EDTA血浆和脑匀浆(在1xPBS中1∶7(w∶v)均质化)中分别孵育目标化合物4小时和6小时。在孵育结束时，从基质区室与缓冲区室两者获取样品，使用空白缓冲液和基质进行基质匹配，用乙腈提取，用水稀释，并且通过AB Sciex 5500，利用与MS/MS检测联用的Agilent RapidFire 365高通量LC来分析。接着通过比较基质区室和缓冲区室的内部标准/分析物峰面积比率来计算游离分数(f_u)。出于计算游离分数的目的，跨物种脑蛋白质结合被视为是等同的(参见Di，L.，等人，(2011a)Species Independence in Brain Tissue Binding Using BrainHomogenates，Drug Metab Dispos 39：1270-1277)。

通过完善建立的生物分析性提取(蛋白质沉淀)和检测方法(LC-MS/MS)来测量血浆和脑组织中的总药物浓度。通过MP Biomedicals FastPrep-24^TM均质器来将脑组织于MPBiomedicals Lysing Matrix D管中用1x PBS 1∶4(w∶v)均质化，接着通过用空白K₂EDTA血浆(从BioIVT购买)进行基质匹配，随后用乙腈进行蛋白质瓦解/提取，在氮气下将上清液干燥，并且用酸化水性/有机混合物复原来与血浆样品并行提取，随后相对于目标化合物的校正曲线加以测量，所述目标化合物在血浆中制备，用空白脑匀浆(用从BioIVT购买的脑产生)进行基质匹配，并且以类似方式提取。复原的提取物接着通过LC-MS/MS(AB Sciex5500)，利用二元HPLC设置(Shimadzu LC-20ADvp)和反相色谱法梯度(ACE 3 C18-AR)来分析。峰面积比率和1/x²回归拟合用于产生样品浓度值，所述样品浓度值与血浆和脑蛋白质结合值组合，用于产生游离药物浓度值和分配系数(K_puu)。

用先前实施例中所述的各种化合物进行这个实验，并且K_puu值在以下提供。

表3.

实施例	大鼠K<sub>puu</sub>
		12	0.26
23	0.14
		41	0.047
56	0.33
		62	0.16
64	0.38
		87	0.32
90	0.61

本发明的方面另外阐述于以下列举实施方案中。

1.一种式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

X是CH或N；

n是1或2；

R⁴是H或C_1-6烷基。

2.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物由式(II)：

或其药学上可接受的盐表示。

3.如实施方案1或2所述的化合物，其中所述化合物由式(III)：

或其药学上可接受的盐表示。

4.如实施方案1或2所述的化合物，其中所述化合物由式(IV)：

或其药学上可接受的盐表示。

5.如实施方案1-4中的任一者所述的化合物，其中：

R^1a在每次出现时独立地是H或C_1-6烷基；

R¹⁰在每次出现时独立地是卤基或-OR^1a。

6.如实施方案5所述的化合物，其中R¹是H、-OCH₃、-OCH₂CH₃、-CH₂OCH₃、-CF₃或-CHF₂。

7.如实施方案1-6中的任一者所述的化合物，其中：

R^20a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基。

8.如实施方案7所述的化合物，其中：

R^20a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基。

9.如实施方案7或8所述的化合物，其中所述5或6元杂芳基选自吡啶基、嘧啶基、吡嗪基和哒嗪基。

10.如实施方案8或9所述的化合物，其中所述4至7元单环饱和杂环基选自氮杂环丁烷基、哌啶基、氧杂环丁烷基、哌嗪基和吗啉基。

11.如实施方案7所述的化合物，其中R²是-CH₃、-CH₂CH₃、-CH₂CF₃、-C(CH₃)₃、-CH₂CH₂OCH₃、-CH₂CH(CH₃)₂、-CH₂CH₂N(CH₃)₂、-CH₂CH＝CH₂、-CH₂CH₂CH₃、

12.如实施方案1-11中的任一者所述的化合物，其中：

R^30a在每次出现时独立地选自H和C_1-6烷基，其中C_1-6烷基任选地被一个至三个独立地选自C_1-4烷基和卤基的取代基取代。

13.如实施方案12所述的化合物，其中：

R³⁰在每次出现时独立地是C_1-3烷基、卤基、-C(O)OR^30a或-OR^30a，其中所述C_1-3烷基任选地被一个至三个卤基取代；并且

R^30a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基。

14.如实施方案13所述的化合物，其中：

15.如实施方案1-14中的任一者所述的化合物，其中R⁴是H或-CH₃。

16.如实施方案15所述的化合物，其中R⁴是H。

17.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物由式(V)或(VI)：

或它们的药学上可接受的盐表示，其中：

R^1a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基；

R²⁰在每次出现时独立地选自C_3-6环烷基、卤基和-OR^20a；

R^20a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基；

18.如实施方案17所述的化合物，其中：

R¹是-OCH₃、-OCH₂CH₃或-CHF₂；

R³是-CH(CH₃)₂、-CH(CH₃)CF₃、-CH(CH₃)CHF₂、

19.一种药物组合物，所述药物组合物包含实施方案1-18中的任一者所述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。

20.一种治疗受试者的对抑制凋亡信号调控激酶1(ASK1)有反应的病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的实施方案1-18中的任一者所述的化合物或其药学上可接受的盐。

21.一种治疗受试者的神经变性病症、心血管疾病、代谢病症、炎症性疾病、自体免疫病症、破坏性骨病症、多聚谷氨酰胺疾病、谷氨酸神经毒性、疼痛、创伤性脑损伤、出血性中风、缺血、急性缺氧、肾纤维化(肾脏纤维化)、肾损伤、糖尿病性肾病、糖尿病性肾病变、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肺动脉高血压(PAH)、视神经炎、肝病、呼吸疾病、心脏再灌注损伤、心脏肥大、心脏纤维化、能量代谢病症、癌症或感染的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的实施方案1-18中的任一者所述的化合物或其药学上可接受的盐。

22.一种用于治疗受试者的神经变性病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的实施方案1-18中的任一者所述的化合物或其药学上可接受的盐。

23.如实施方案22所述的方法，其中所述神经变性病症是阿尔茨海默氏病(AD)、帕金森氏病、亨廷顿氏病或肌萎缩性侧索硬化(ALS)。

24.一种用于治疗受试者的自体免疫疾病的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的实施方案1-18中的任一者所述的化合物或其药学上可接受的盐。

25.如实施方案24所述的方法，其中所述自体免疫疾病是多发性硬化症。

26.一种用于治疗受试者的心血管疾病的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的实施方案1-18中的任一者所述的化合物或其药学上可接受的盐。

27.如实施方案26所述的方法，其中所述心血管疾病是缺血。

Claims

1.一种式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

X是CH或N；

n是1或2；

R⁴是H或C_1-6烷基。

2.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物由式(II)：

或其药学上可接受的盐表示。

3.如权利要求1或2所述的化合物，其中所述化合物由式(III)：

或其药学上可接受的盐表示。

4.如权利要求1或2所述的化合物，其中所述化合物由式(IV)：

或其药学上可接受的盐表示。

5.如权利要求1-4中任一项所述的化合物，其中：

R^1a在每次出现时独立地是H或C_1-6烷基；

R¹⁰在每次出现时独立地是卤基或-OR^1a。

6.如权利要求5所述的化合物，其中R¹是H、-OCH₃、-OCH₂CH₃、-CH₂OCH₃、-CF₃或-CHF₂。

7.如权利要求1-6中任一项所述的化合物，其中：

R^20a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基。

8.如权利要求7所述的化合物，其中：

R^20a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基。

9.如权利要求7或8中任一项所述的化合物，其中所述5或6元杂芳基选自吡啶基、嘧啶基、吡嗪基和哒嗪基。

10.如权利要求8或9所述的化合物，其中所述4至7元单环饱和杂环基选自氮杂环丁烷基、哌啶基、氧杂环丁烷基、哌嗪基和吗啉基。

11.如权利要求7所述的化合物，其中R²是-CH₃、-CH₂CH₃、-CH₂CF₃、-C(CH₃)₃、-CH₂CH₂OCH₃、-CH₂CH(CH₃)₂、-CH₂CH₂N(CH₃)₂、-CH₂CH＝CH₂、-CH₂CH₂CH₃、

12.如权利要求1-11中任一项所述的化合物，其中：

13.如权利要求12所述的化合物，其中：

R^30a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基。

14.如权利要求13所述的化合物，其中：

15.如权利要求1-14中任一项所述的化合物，其中R⁴是H或-CH₃。

16.如权利要求15所述的化合物，其中R⁴是H。

17.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物由式(V)或(VI)：

或它们的药学上可接受的盐表示，其中：

R^1a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基；

R²⁰在每次出现时独立地选自C_3-6环烷基、卤基和-OR^20a；

R^20a在每次出现时独立地是H或C_1-4烷基；

18.如权利要求17所述的化合物，其中：

R¹是-OCH₃、-OCH₂CH₃或-CHF₂；

R³是-CH(CH₃)₂、-CH(CH₃)CF₃、-CH(CH₃)CHF₂、

19.一种药物组合物，所述药物组合物包含权利要求1-18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。

20.如权利要求1-18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物或其药学上可接受的盐用于治疗对抑制凋亡信号调控激酶1(ASK1)有反应的病症。

21.如权利要求20所述的化合物，其中所述病症是神经变性病症、心血管疾病、代谢病症、炎症性疾病、自体免疫病症、破坏性骨病症、多聚谷氨酰胺疾病、谷氨酸神经毒性、疼痛、创伤性脑损伤、出血性中风、缺血、急性缺氧、肾纤维化(肾脏纤维化)、肾损伤、糖尿病性肾病、糖尿病性肾病变、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肺动脉高血压(PAH)、视神经炎、肝病、呼吸疾病、心脏再灌注损伤、心脏肥大、心脏纤维化、能量代谢病症、癌症或感染。

22.一种治疗受试者的对抑制凋亡信号调控激酶1(ASK1)有反应的病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的权利要求1-18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。

23.如权利要求22所述的方法，其中所述病症是神经变性病症、心血管疾病、代谢病症、炎症性疾病、自体免疫病症、破坏性骨病症、多聚谷氨酰胺疾病、谷氨酸神经毒性、疼痛、创伤性脑损伤、出血性中风、缺血、急性缺氧、肾纤维化(肾脏纤维化)、肾损伤、糖尿病性肾病、糖尿病性肾病变、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肺动脉高血压(PAH)、视神经炎、肝病、呼吸疾病、心脏再灌注损伤、心脏肥大、心脏纤维化、能量代谢病症、癌症或感染。