CN113186126A - 一种微生物菌剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及微生物菌剂领域，尤其涉及一种微生物菌剂，可以有效提高土壤环境，对瓜果、蔬菜、果树、花卉、棉花、水稻作物的根腐病、烂根、死苗、猝倒、立枯病、枯菱病、沤根症状进行预防和改善。

Description

一种微生物菌剂
技术领域
本发明涉及微生物菌剂领域，尤其涉及一种微生物菌剂。
背景技术
利用微生物的产生物运用到农业种植以被广泛推广，已商品化的农用抗生素几乎遍及了农药所有领域。其中作为杀菌剂的有春日霉素、多氧霉素、井冈霉素、农霉素、链霉素等；杀虫剂有阿维菌素、杀螨素等；除草剂有双丙氨膦；植物生长调节剂有赤霉素等，但现有的微生物菌剂不具备同时兼顾改良土壤、保护植物与促进植物生长的功能，功能比较单一，需要多种微生物菌剂配合使用才能达到种植需求，
发明内容
本发明的目的是为了解决背景技术中存在的缺点，而提出的一种微生物菌剂。
为达到以上目的，本发明采用的技术方案为：一种微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、将侧孢芽孢杆菌、土壤短芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌菌株分别固体活化培养后，制得浓度均为2-3×10^8CFU/ml的三种菌悬液；
S2、制备需要一级种子培养基、二级种子培养基与发酵培养基；
S3、将三种菌悬液分别以体积百分数为3-7％的接种量接种至一级种子培养基，培养得到浓度均为2-4×10^10CFU/ml的三种一级种子菌悬液；
S4、将三种一级种子菌悬液以等体积混合，然后以体积百分数为1-3％的接种量转接至二级种子培养基，培养得到混合菌浓度为1-5×10^11CFU/ml的二级种子混合菌悬液；
S5、将二级种子混合菌悬液按体积百分数为1-6％的接种量转接至发酵培养基；
S6、将接种后的二级种子混合菌悬液发酵至芽孢浓度为1-5×10^12CFU/ml、芽孢数占所述发酵菌液总菌数的80％以上，装瓶后得到微生物菌剂。
优选的，步骤S2中的一级种子培养基成分重量份包括：谷物粉20-28份、酵母提取物5-8份、氯化钠6-10份和蒸馏水1000份，且将一级种子培养基的pH控制在7.1-7.5。
优选的，步骤S2中的二级种子培养基成分重量份包括：玉米粉20-28份、酒糟粉8-12份、花生粕粉4-6份、氯化钠5-7份和蒸馏水1000份，且将二级种子培养基的pH控制在7.1-7.5。
优选的，步骤S5中的发酵培养基成分重量份包括：玉米粉13-15份、酒糟粉14-16份、花生粕粉6-8份、麸皮14-16份、氯化钠2-4份、磷酸钾43-5份、硫酸锰0.03-0.05份和蒸馏水1000份，且将菌剂发酵培养基的pH控制在7.1-7.5。
优选的，所述侧孢芽孢杆菌通过以下步骤制备获得：将侧孢芽孢杆菌菌株活化，无菌水冲洗，得到种子液；使用第一培养液对种子液进行扩增培养，得到第一扩增培养液；使用第二培养液对第一扩增培养液进行培养，得到第二扩增培养液；第二扩增培养液进行液体发酵培养，得到发酵液；将发酵液淋入固体培养基中进行固体发酵，并进行后处理，得到侧孢芽孢杆菌发酵菌液。
优选的，所述土壤短芽孢杆菌通过以下步骤制备获得：将分离得到的短小芽孢杆菌菌株转接到NA固体培养基，37℃恒温培养12h；之后从其中挑取单菌落，接入装量为20mLNA培养基的100mL三角摇瓶中，置于控温摇床，37℃，离心220r/min培养12h后制备获得菌液。
优选的，所述解淀粉芽孢杆菌菌株通过以下步骤制得：将解淀粉芽孢杆菌菌株接种到肉汤培养基中活化得到活化液；将活化液接种到发酵培养基中进行发酵培养得到解淀粉芽孢杆菌菌液。
一种微生物菌剂，通过上述的制备方法制备获得，包括以下重量份组分成分：侧孢芽孢杆菌25～35份、土壤短芽孢杆菌10～15份、解淀粉芽孢杆菌15～20份。
一种微生物菌剂的运用，使用上述的微生物菌剂，可以有效提高土壤环境，对瓜果、蔬菜、果树、花卉、棉花、水稻作物的根腐病、烂根、死苗、猝倒、立枯病、枯菱病、沤根症状进行预防和改善。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
可以有效提高土壤环境，对瓜果、蔬菜、果树、花卉、棉花、水稻作物的根腐病、烂根、死苗、猝倒、立枯病、枯菱病、沤根症状进行预防和改善；侧孢芽孢杆菌可以促进植物根系生长，增强根系吸收能力，从而提高作物产量，抑制植物体内外病原菌繁殖，减轻病虫害，降低农药残留，改良疏松土壤，解决土壤板结现象，从而活化土壤，提高肥料利用率，增强植物新陈代谢，促进光合作用和强化叶片保护膜，抵抗病原菌，固化若干重金属，降低植物体内重金属含量；而土壤短芽孢杆菌与解淀粉芽孢杆菌可以起到抑制病原菌的作用，因此在起到改良土壤的同时，也能保护植物，促进植物生长。
具体实施方式
以下描述用于揭露本发明以使本领域技术人员能够实现本发明。以下描述中的优选实施例只作为举例，本领域技术人员可以想到其他显而易见的变型。
实施例1
一种微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、将侧孢芽孢杆菌、土壤短芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌菌株分别固体活化培养后，制得浓度均为2×10^8CFU/ml的三种菌悬液；
S2、制备需要一级种子培养基、二级种子培养基与发酵培养基；
S3、将三种菌悬液分别以体积百分数为3％的接种量接种至一级种子培养基，培养得到浓度均为2×10^10CFU/ml的三种一级种子菌悬液；
S4、将三种一级种子菌悬液以等体积混合，然后以体积百分数为1％的接种量转接至二级种子培养基，培养得到混合菌浓度为1×10^11CFU/ml的二级种子混合菌悬液；
S5、将二级种子混合菌悬液按体积百分数为1％的接种量转接至发酵培养基；
S6、将接种后的二级种子混合菌悬液发酵至芽孢浓度为1×10^12CFU/ml、芽孢数占所述发酵菌液总菌数的83％时，装瓶后得到微生物菌剂。
实施例2
一种微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、将侧孢芽孢杆菌、土壤短芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌菌株分别固体活化培养后，制得浓度均为2×10^8CFU/ml的三种菌悬液；
S2、制备需要一级种子培养基、二级种子培养基与发酵培养基；
S3、将三种菌悬液分别以体积百分数为4％的接种量接种至一级种子培养基，培养得到浓度均为3×10^10CFU/ml的三种一级种子菌悬液；
S4、将三种一级种子菌悬液以等体积混合，然后以体积百分数为2％的接种量转接至二级种子培养基，培养得到混合菌浓度为2×10^11CFU/ml的二级种子混合菌悬液；
S5、将二级种子混合菌悬液按体积百分数为4％的接种量转接至发酵培养基；
S6、将接种后的二级种子混合菌悬液发酵至芽孢浓度为2×10^12CFU/ml、芽孢数占所述发酵菌液总菌数的87％时，装瓶后得到微生物菌剂。
实施例3
一种微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、将侧孢芽孢杆菌、土壤短芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌菌株分别固体活化培养后，制得浓度均为3×10^8CFU/ml的三种菌悬液；
S2、制备需要一级种子培养基、二级种子培养基与发酵培养基；
S3、将三种菌悬液分别以体积百分数为7％的接种量接种至一级种子培养基，培养得到浓度均为4×10^10CFU/ml的三种一级种子菌悬液；
S4、将三种一级种子菌悬液以等体积混合，然后以体积百分数为3％的接种量转接至二级种子培养基，培养得到混合菌浓度为5×10^11CFU/ml的二级种子混合菌悬液；
S5、将二级种子混合菌悬液按体积百分数为6％的接种量转接至发酵培养基；
S6、将接种后的二级种子混合菌悬液发酵至芽孢浓度为5×10^12CFU/ml、芽孢数占所述发酵菌液总菌数的95％以上，装瓶后得到微生物菌剂。
一种微生物菌剂，通过上述的制备方法制备获得，包括以下重量份组分成分：侧孢芽孢杆菌25～35份、土壤短芽孢杆菌10～15份、解淀粉芽孢杆菌15～20份。
一种微生物菌剂的运用，使用上述的微生物菌剂，可以有效提高土壤环境，对瓜果、蔬菜、果树、花卉、棉花、水稻作物的根腐病、烂根、死苗、猝倒、立枯病、枯菱病、沤根症状进行预防和改善。
可以有效提高土壤环境，对瓜果、蔬菜、果树、花卉、棉花、水稻作物的根腐病、烂根、死苗、猝倒、立枯病、枯菱病、沤根症状进行预防和改善；侧孢芽孢杆菌可以促进植物根系生长，增强根系吸收能力，从而提高作物产量，抑制植物体内外病原菌繁殖，减轻病虫害，降低农药残留，改良疏松土壤，解决土壤板结现象，从而活化土壤，提高肥料利用率，增强植物新陈代谢，促进光合作用和强化叶片保护膜，抵抗病原菌，固化若干重金属，降低植物体内重金属含量；而土壤短芽孢杆菌与解淀粉芽孢杆菌可以起到抑制病原菌的作用，因此在起到改良土壤的同时，也能保护植物，促进植物生长。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明的范围内。本发明要求的保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。

Claims (9)

1.一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1、将侧孢芽孢杆菌、土壤短芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌菌株分别固体活化培养后，制得浓度均为2-3×10^8CFU/ml的三种菌悬液；
S2、制备需要一级种子培养基、二级种子培养基与发酵培养基；
S3、将三种菌悬液分别以体积百分数为3-7％的接种量接种至一级种子培养基，培养得到浓度均为2-4×10^10CFU/ml的三种一级种子菌悬液；
S4、将三种一级种子菌悬液以等体积混合，然后以体积百分数为1-3％的接种量转接至二级种子培养基，培养得到混合菌浓度为1-5×10^11CFU/ml的二级种子混合菌悬液；
S5、将二级种子混合菌悬液按体积百分数为1-6％的接种量转接至发酵培养基；
S6、将接种后的二级种子混合菌悬液发酵至芽孢浓度为1-5×10^12CFU/ml、芽孢数占所述发酵菌液总菌数的80％以上，装瓶后得到微生物菌剂。
2.根据权利要求1所述的一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于：步骤S2中的一级种子培养基成分重量份包括：谷物粉20-28份、酵母提取物5-8份、氯化钠6-10份和蒸馏水1000份，且将一级种子培养基的pH控制在7.1-7.5。
3.根据权利要求1所述的一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于：步骤S2中的二级种子培养基成分重量份包括：玉米粉20-28份、酒糟粉8-12份、花生粕粉4-6份、氯化钠5-7份和蒸馏水1000份，且将二级种子培养基的pH控制在7.1-7.5。
4.根据权利要求1所述的一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于：步骤S5中的发酵培养基成分重量份包括：玉米粉13-15份、酒糟粉14-16份、花生粕粉6-8份、麸皮14-16份、氯化钠2-4份、磷酸钾43-5份、硫酸锰0.03-0.05份和蒸馏水1000份，且将菌剂发酵培养基的pH控制在7.1-7.5。
5.根据权利要求1所述的一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述侧孢芽孢杆菌通过以下步骤制备获得：将侧孢芽孢杆菌菌株活化，无菌水冲洗，得到种子液；使用第一培养液对种子液进行扩增培养，得到第一扩增培养液；使用第二培养液对第一扩增培养液进行培养，得到第二扩增培养液；第二扩增培养液进行液体发酵培养，得到发酵液；将发酵液淋入固体培养基中进行固体发酵，并进行后处理，得到侧孢芽孢杆菌发酵菌液。
6.根据权利要求1所述的一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述土壤短芽孢杆菌通过以下步骤制备获得：将分离得到的短小芽孢杆菌菌株转接到NA固体培养基，37℃恒温培养12h；之后从其中挑取单菌落，接入装量为20mLNA培养基的100mL三角摇瓶中，置于控温摇床，37℃，离心220r/min培养12h后制备获得菌液。
7.根据权利要求1所述的一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述解淀粉芽孢杆菌菌株通过以下步骤制得：将解淀粉芽孢杆菌菌株接种到肉汤培养基中活化得到活化液；将活化液接种到发酵培养基中进行发酵培养得到解淀粉芽孢杆菌菌液。
8.一种微生物菌剂，通过上述权利要求1-7任意一条所述的制备方法制备获得，其特征在于：包括以下重量份组分成分：侧孢芽孢杆菌25～35份、土壤短芽孢杆菌10～15份、解淀粉芽孢杆菌15～20份。
9.一种微生物菌剂的运用，使用权利要求8所述的微生物菌剂，其特征在于：可以有效提高土壤环境，对瓜果、蔬菜、果树、花卉、棉花、水稻作物的根腐病、烂根、死苗、猝倒、立枯病、枯菱病、沤根症状进行预防和改善。
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