CN113171463A - 原位载药水凝胶及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种原位载药水凝胶及其制备方法与应用。多臂聚乙二醇衍生物复合物的制备方法，包括将多臂聚乙二醇衍生物溶液预冻，然后依次进行三阶段的干燥。原位载药水凝胶包括多臂聚乙二醇衍生物复合物，磷酸盐缓冲溶液，缓冲盐溶液和药物。本发明原位载药水凝胶可用于组织创面封闭、修复、填充或治疗。

Description

原位载药水凝胶及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及一种原位载药水凝胶及其制备方法与应用。
背景技术
原位可降解水凝胶作为一种多尺度发展的材料，富含大量水分，生物相容性良好，其安全和性能可控，且可注射原位水凝胶在手术过程中易操作，因此在疾病的治疗中有广阔的研究前景。
PEG多样化修饰的水凝胶技术可应用在组织工程方面，特别是组织密封剂方面，有助于预防组织渗液、可制备针对眼科、神经外科、脊柱外科等不同临床降解周期需求的密封剂。基于PEG衍生物开发的水凝胶产品具有生物相容性好，无毒、无刺激，临床应用中术后无需再移除，产品会随着患者的康复逐渐降解并通过肾脏代谢等优点。目前该类产品中已有多种上市品，如ReSureSealant和OcuSeal Liquid Ocular Bandage等用于角膜切口封闭、结膜和巩膜手术伤口的封闭剂。
发明内容
发明人发现，多臂聚乙二醇衍生物作为水凝胶基材时其稳定性随着时间的延长而下降，从而延长了水凝胶的成胶时间，不能满足快速固化的需要。针对该技术问题，发明人通过大量实验研究发现，对多臂聚乙二醇衍生物进行预处理，可以提高其稳定性，能够避免延长水凝胶的成胶时间，满足快速固化的需要。
具体而言，本发明提供一种多臂聚乙二醇衍生物复合物的制备方法，包括：
将多臂聚乙二醇衍生物溶解于叔丁醇中，制成多臂聚乙二醇衍生物溶液；
向所述多臂聚乙二醇衍生物溶液中加入末端带氨基(-NH2)的化合物，混合均匀，制成混合物料；于-45℃至-35℃预冻；
然后依次于-15℃至-5℃进行第一干燥，干燥至叔丁醇含量10wt％-15wt％，含水量0.5wt％-1wt％；于10℃-15℃进行第二干燥，干燥至叔丁醇含量2wt％-5wt％，含水量≤0.2wt％-0.5wt％；于25℃-30℃进行第三干燥，干燥至叔丁醇含量≤0.1wt％，含水量≤0.1wt％。
研究发现，对多臂聚乙二醇衍生物进行如上预处理，可以显著提高其稳定性，能够避免水凝胶成胶时间的延长，满足快速固化的需要。
在一些实施例中，所述多臂聚乙二醇衍生物选自含有琥珀酰亚胺碳酸酯基、琥珀酰亚胺乙酸酯基、琥珀酰亚胺丙酸酯基、琥珀酰亚胺琥珀酸酯基、琥珀酰亚胺戊二酸酯基、琥珀酰亚胺葵二酸酯基的多臂聚乙二醇衍生物。
在一些实施例中，所述多臂包括四臂、六臂、八臂。
在一些实施例中，所述多臂聚乙二醇衍生物的数均分子量为10K-40K(即10000-40000)。
本文中，数均分子量10K意思是10000。
在一些实施例中，所述多臂聚乙二醇衍生物选自四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯(10k)、四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯(20k)、四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯(20k)、八臂聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯(20k)、八臂聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯(40k)。
在一些实施例中，将多臂聚乙二醇衍生物溶解于30-40℃(例如35℃)叔丁醇中，制成多臂聚乙二醇衍生物溶液。
在一些实施例中，以g/ml计，所述多臂聚乙二醇衍生物溶液中，多臂聚乙二醇衍生物与叔丁醇的重量体积比为1:(2-4)。研究发现，在该浓度范围内既可以保证有效的稳定性，又保证较快的溶解速度。
在一些实施例中，以g/ml计，所述混合物料中，所述多臂聚乙二醇衍生物与所述末端带氨基的化合物的重量比为1:(0.01-0.06)。
在一些实施例中，所述末端带氨基(-NH2)的化合物选自多聚赖氨酸或多聚赖氨酸盐、羧甲基壳聚糖、壳聚糖中的至少一种或几种的组合；优选三赖氨酸醋酸盐。
在一些实施例中，是在所述多臂聚乙二醇衍生物溶液在30℃-40℃(例如35℃)的条件下，将所述末端带氨基(-NH2)的化合物溶解于或超声分散于所述多臂聚乙二醇衍生物溶液中。
在一些实施例中，所述预冻的温度为-45℃、-40℃或-35℃。
在一些实施例中，在所述预冻前，事先将冻干机预冷至-45℃至-35℃范围内。
在一些实施例中，所述预冻的时间为100-150min，例如120min。
在一些实施例中，可将所述混合物料置于冻干瓶中进行干燥。
研究发现，通过预冻处理可以获得结构致密、表面光滑的小冰晶，有利于提高所述多臂聚乙二醇衍生物的稳定性。
在一些实施例中，所述第一干燥的温度为-15℃、-10℃或-5℃。
在一些实施例中，所述第一干燥的时间可为1200-1800min，例如1500min，具体时间可根据上述干燥所需的叔丁醇含量和含水量而确定。
在一些实施例中，所述第二干燥的温度为10℃或15℃。
在一些实施例中，所述第二干燥的时间可为240-720min，例如360min，具体时间可根据上述干燥所需的叔丁醇含量和含水量而确定。
在一些实施例中，所述第三干燥的温度为25℃或30℃。
在一些实施例中，所述第三干燥的时间可为60-600min，例如120min，具体时间可根据上述干燥所需的叔丁醇含量和含水量而确定。
研究发现，通过以上三阶段的干燥可以获得表面光滑致密、含水量低的冻干粉末，并有利于提高所述多臂聚乙二醇衍生物的稳定性。
在一些实施例中，在一些实施例中，所述预冻的温度为-45℃至-40℃，所述第一干燥的温度为-15℃至-10℃。实验发现，在该条件下，更有利于提高聚乙二醇衍生物的稳定性，处理后的聚乙二醇衍生物在存放720d后其固化时间无明显下降。
在一些实施例中，上述制备方法还包括将经第三干燥所得物料进行包装的步骤，优选在水分含量≤25ppm(例如20ppm)、氧(即氧气)含量≤25ppm(例如20ppm)的环境中包装。这样可以进一步提高多臂聚乙二醇衍生物的稳定性，降低多臂聚乙二醇衍生物的氧化和水解。
在一些实施例中，上述制备方法包括：
将聚乙二醇衍生物于35℃溶解于叔丁醇中，制成多臂聚乙二醇衍生物溶液；以g/ml计，所述多臂聚乙二醇衍生物溶液中，多臂聚乙二醇衍生物与叔丁醇的重量体积比为1:(2-4)；
将所述末端带氨基的化合物于35℃溶解于或超声分散于所述多臂聚乙二醇衍生物溶液中，制成混合物料；所述混合物料中，所述多臂聚乙二醇衍生物与所述末端带氨基的化合物的重量比为1:(0.01-0.06)；
将所述混合物料于-45℃至-35℃预冻；
然后依次于-15℃至-5℃进行第一干燥，干燥至叔丁醇含量10wt％-15wt％，含水量0.5wt％-1wt％；于10℃-15℃进行第二干燥，干燥至叔丁醇含量2wt％-5wt％，含水量≤0.2wt％-0.5wt％；于25℃-30℃进行第三干燥，干燥至叔丁醇含量≤0.1wt％，含水量≤0.1wt％；
在水分含量≤25ppm、氧含量≤25ppm的环境中包装。
发明人发现，通过以上预冻及冻干处理可以较好的提高聚乙二醇衍生物的稳定性，处理后的聚乙二醇衍生物在存放720d后其固化时间无明显下降。
本发明还包括上述方法制备的多臂聚乙二醇衍生物复合物，其具有较好的稳定性。
本发明还包括上述方法制备的多臂聚乙二醇衍生物复合物在制备水凝胶中的应用。
本发明还提供一种原位水凝胶，其包括：
第一组分，为上述方法制备的多臂聚乙二醇衍生物复合物；
第二组分，为磷酸盐缓冲溶液；
第三组分，为缓冲盐溶液；选自硼砂-磷酸盐缓冲溶液或碳酸钠-磷酸盐缓冲溶液。
在一些实施例中，所述磷酸盐缓冲溶液的pH值为6.5-7.5，这样可以保持水凝胶整体的酸碱性为中性或接近中性范围内。
在一些实施例中，所述磷酸盐缓冲溶液可参照中国药典2015版四部8004项下pH＝7.3磷酸盐缓冲液进行配置。
在一些实施例中，考虑到硼砂可能存在毒性，所述第三组分优选不含硼砂的磷酸盐缓冲溶液。
在一些实施例中，所述第三组分即缓冲盐溶液pH值为9.5-10.0，这样可以保证凝胶的固化时间。
在一些实施例中，所述硼砂-磷酸盐缓冲溶液或碳酸钠-磷酸盐缓冲溶液可分别用磷酸盐缓冲溶液(参见上文)和硼砂或碳酸钠进行配制，调节至所需的pH。
在一些实施例中，用0.1M碳酸钠溶液和磷酸盐缓冲液(参见上文，例如pH＝7.3)配制碳酸钠-磷酸盐缓冲溶液。
本发明原位载药水凝胶可在临用前进行配置，具体可将第一组分用第二组分溶解，然后再与第三组分混合即得原位水凝胶。
本发明还提供一种原位载药水凝胶，其包括：
第一组分，为上述方法制备的多臂聚乙二醇衍生物复合物；
第二组分，为磷酸盐缓冲溶液；
第三组分，为缓冲盐溶液；选自硼砂-磷酸盐缓冲溶液或碳酸钠-磷酸盐缓冲溶液；
第四组分，为药物。
在一些实施例中，所述第二组分磷酸盐缓冲溶液及第三组分为缓冲盐溶液与上文相同。
在一些实施例中，所述药物可选自眼科常用药，包括但不限于：抗炎药物(环孢素、红霉素、莫西沙星等)、去水肿药物(地塞米松、环糊精)、保湿(透明质酸、HPMC)、青光眼(盐酸卡替洛尔、奈舒地尔、曲伏前列素、贝美前列素、他氟前列素)、非甾体抗炎药等。
本发明原位载药水凝胶可在临用前进行配置，具体可将第一组分用第二组分溶解，将第四组分用第三组分溶解，然后将所得料液混合，即得原位载药水凝胶。
令人惊喜的是，本发明还克服了传统水凝胶不能载药的缺陷，采用上述方法制备的多臂聚乙二醇衍生物复合物能够负载药物尤其是眼科用药，除实现封闭、修复、填充外，还能达到治疗效果。
此外，本发明还可以通过调整两种缓冲盐溶液(即第二组分和第三组分)的比例实现不同的固化时间控制。
在一些实施例中，可将第一组分用第二组分磷酸盐缓冲溶液溶解，制成浓度为50-300mg/ml的料液。
在一些实施例中，可将第四组分用第三组分缓冲盐溶液溶解，制成浓度为6-200mg/ml的料液。
在一些实施例中，第一组分在所述原位载药水凝胶中的含量为2.5wt％-20wt％。
在一些实施例中，所述药物在所述原位载药水凝胶中的含量为0.02wt％-10wt％。
在一些实施例中，所述原位载药水凝胶的组分还包括包括第五组分即显色剂，可选自非偶氮类着色剂。当含有显色剂时，可将显色剂用第二组分或第三组分溶解，然后再与其他料液混合。在一些实施例中，显色剂在所述原位载药水凝胶中的含量为0.01wt％-0.1wt％。
本发明还提供上述原位载药水凝胶的制备方法，包括：
将第一组分用第二组分(即磷酸盐缓冲溶液)溶解，制成第一料液；
将第四组分用第三组分(即缓冲盐溶液)溶解，制成第二料液；
然后将第一料液和第二料液混合，制成原位载药水凝胶。
本发明通过对多臂聚乙二醇衍生物和含有氨基的化合物进行共同冻干处理，不仅可以提高其稳定性，满足快速固化的需要，而且可以提高其溶解速度，缩短操作时间，实现组织不同部位的可控时间固化和不同药物的负载，实现多种适应症的封闭、修复、填充和治疗。
本发明原位水凝胶、原位载药水凝胶可用于组织创面封闭、修复、填充或治疗。在临用前进行配置，在形成凝胶之前(例如可通过配件)将载药水凝胶用于组织相应部位，在满足组织封闭、修复、填充的同时，起到抗炎、抗感染、去水肿、保湿等治疗效果。该水凝胶可原位成型，第一组分溶解时间＜20s，根据不同组织应用部位可控在0-10s内形成凝胶，凝胶可通过水解降解。
附图说明
图1为本发明实验例中兔眼封闭效果的照片。
图2为本发明实验例中药物缓释曲线。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买得到的常规产品。
实施例1
本实施例提供一种多臂聚乙二醇衍生物复合物的制备方法，包括：
将四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯(10k)于35℃溶解于叔丁醇中，制成四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯溶液；其中，四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯与叔丁醇的比例为1g:2ml；
将三赖氨酸醋酸盐于35℃超声分散于四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯溶液中，混合均匀，制成混合物料；其中，所述混合物料中，四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯与三赖氨酸醋酸盐的重量比例为1:0.03；
将所述混合原料置于冻干瓶中；将冻干机预冷至-45℃至-35℃，然后将上述冻干瓶置于冻干机隔板上，预冻120min后于-15℃至-5℃进行第一干燥，干燥时间为1500min，然后分别在15℃进行第二干燥，干燥时间为360min、在30℃进行第三干燥，干燥时间为120min；
将冻干后的产品在水分含量20ppm、氧含量20ppm的环境中包装。
通过控制预冷温度、预冻温度以及第一干燥温度，分别制备样品1-3，具体见下表：
样品 预冷温度，℃ 预冻温度，℃ 预冻时间，min 第一干燥温度
1 -45 -45 120 -15
2 -35 -35 120 -15
3 -35 -35 120 -5
实施例2
本实施例提供一种多臂聚乙二醇衍生物复合物的制备方法，包括：
将多臂聚乙二醇衍生物于35℃溶解于叔丁醇中，制成多臂聚乙二醇衍生物溶液；其中，多臂聚乙二醇衍生物与叔丁醇的比例为1g:4ml；
将末端带氨基的化合物于35℃超声分散于多臂聚乙二醇衍生物溶液中，混合均匀，制成混合物料；
将所述混合原料置于冻干瓶中；将冻干机预冷至-45℃，然后将上述冻干瓶置于冻干机隔板上，预冻120min后于-15℃第一干燥1500min，然后分别在15℃第二干燥360min、30℃第三干燥120min；
将冻干后的产品在水分含量20ppm、氧含量20ppm的环境中包装。
通过选择不同的多臂聚乙二醇衍生物、末端带氨基的化合物，以及控制多臂聚乙二醇衍生物与末端带氨基的化合物的重量比，分别制备样品4-9，具体见下表：
Figure BDA0003002616300000081
实施例3
本实施例提供多臂聚乙二醇衍生物复合物的制备方法，包括：
将四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯(10k)于35℃溶解于叔丁醇中，制成四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯溶液；其中，四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯与叔丁醇的比例为1g:2ml；
将末端带氨基的化合物于35℃超声分散于四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯溶液中，混合均匀，制成混合物料；其中，所述混合物料中，四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯与三赖氨酸醋酸盐的重量比为1:0.03；
将所述混合原料置于冻干瓶中；将冻干机预冷至-45℃，然后将上述冻干瓶置于冻干机隔板上，预冻120min后于-15℃第一干燥1500min，然后分别在15℃第二干燥360min、30℃第三干燥120min；
将冻干后的产品在水分含量20ppm、氧含量20ppm的环境中包装，制成样品10。
实施例4
与实施例1的区别仅在于，将冻干后的产品在相对湿度50％普通环境包装，制成样品11。
对比例1
与实施例1的区别仅在于，通过控制预冷温度、预冻温度、降温速率以及第一干燥温度，分别制备样品12-15，具体见下表：
样品 预冷温度，℃ 预冻温度，℃ 降温速率，℃/min 预冻时间，min 第一干燥温度
12 -35 -35 / 120 0
13 -25 -45 1 120 -15
14 室温 -45 1 120 -15
15 室温 -45 0.5 120 -15
注：降温速率是指冻干机从预冷温度降至预冻温度的速率。
对比例2
将四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯(10k)于35℃溶解于叔丁醇中，制成四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯溶液；
将三赖氨酸醋酸盐于35℃超声分散于四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯溶液中，混合均匀，制成混合物料；其中，所述混合物料中，四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯与三赖氨酸醋酸盐的重量比为1:0.03；
将所述混合原料置于冻干瓶中；将冻干机预冷至-45℃，然后将上述冻干瓶置于冻干机隔板上，预冻120min后于-15℃至-5℃进行第一干燥，干燥时间为1500min，然后分别在15℃进行第二干燥，干燥时间为360min、在30℃进行第三干燥，干燥时间为120min；
将冻干后的产品在水分含量20ppm、氧含量20ppm的环境中包装。
通过控制四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯与叔丁醇的比例，制成样品16-17，具体见下表：
Figure BDA0003002616300000091
对比例3
将四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯(10k)于35℃溶解于叔丁醇中，制成溶液；其中，四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯与叔丁醇的比例为1g:2ml；将制成的溶液置于冻干瓶A中。
将三赖氨酸盐于35℃分散于叔丁醇中，制成混合物料；其中，三赖氨酸盐与叔丁醇的重量比为0.03g:2ml；将制成的混合物料置于冻干瓶B中。
将冻干机预冷至-45℃，然后将上述冻干瓶A和B分别置于冻干机隔板上，-45℃预冻120min后，于-15℃干燥1500min，然后分别在15℃干燥360min、30℃干燥120min。
然后按照四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯与三赖氨酸醋酸盐重量比为1:0.03，在水分含量20ppm、氧含量20ppm的环境中混合、包装，制成样品18。
对比例4
将四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯(10k)与抗氧剂2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)混合，干燥至含水量＜0.1％。然后与三赖氨酸醋酸盐在水分含量20ppm、氧含量20ppm的环境中混合，制成样品19。其中，四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯与三赖氨酸醋酸盐重量比为1:0.03，样品19中抗氧剂BHT含量为0.05wt％。
实验例1多臂聚乙二醇衍生物的稳定性研究
将上述实施例和对比例样品包装后存放于2-8℃的稳定性试验箱中，720d后测试其溶解和固化时间。
测试方法：
将以上样品分别加pH值7.5的磷酸盐缓冲溶液，振摇至全部溶解，配成浓度200mg/ml的溶液M；另取与所用磷酸盐缓冲溶液等量体积的pH值为10.0的碳酸钠-磷酸盐缓冲溶液，将溶液M和碳酸钠-磷酸盐缓冲溶液混合后形成凝胶，记录其固化时间。
实验结果见下表：
Figure BDA0003002616300000101
Figure BDA0003002616300000111
实验例2
按实施例1方法制备样品1。将样品1加pH值7.5的磷酸盐缓冲溶液，振摇至全部溶解，配成浓度50-300mg/ml的溶液N。另取与适量体积的pH值为10.0的碳酸钠-磷酸盐缓冲溶液，将溶液N和碳酸钠-磷酸盐缓冲溶液混合后形成凝胶，编号为A-E，记录其固化时间。
Figure BDA0003002616300000112
实验例3生物相容性结果
按实施例2方法制备样品6。
取四臂聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯(20k，与样品6的原料相同)，未经冻干等处理，作为对照样品。
参照GB 16886系列标准对以上样品进行生物学评价，结果如下表。
材料生物相容性结果
Figure BDA0003002616300000113
Figure BDA0003002616300000121
实验例4原位载药水凝胶及其应用实验
按实施例1方法制备样品1。
将600mg样品1加4ml的pH值7.5的磷酸盐缓冲溶液，振摇至全部溶解，配成溶液X。另取10mg的地塞米松，用2ml的pH值为10.0的碳酸钠-磷酸盐缓冲溶液溶解，得溶液Y，将溶液X和溶液Y混合后形成凝胶。
动物实验：选择兔眼模型，于兔眼角膜行长约10mm(3-9点位)的横向切口，采用涂抹器将凝胶涂抹至创面部位使切口封闭。术后7天观察术后切口封闭效果和局部炎症发生情况，结果表明：切口损伤可见愈合趋势，炎症反应逐渐恢复至最终完全恢复。兔眼封闭效果见图1。
实验例5原位载药水凝胶及其缓释性能测试
按实施例2方法制备样品6。
将样品6加pH值7.5的磷酸盐缓冲溶液，振摇至全部溶解，配成浓度300mg/ml的溶液X；
另取地塞米松，用pH值为10.0的碳酸钠-磷酸盐缓冲溶液溶解，得溶液Y，将溶液X和溶液Y混合后形成凝胶。该凝胶中地塞米松的含量为5wt％。
药物缓释的检测方法：取载药固化的水凝胶，按照水凝胶与释放介质体积的比例为1g:50ml，将样品置37℃±1℃水浴振荡器中，依法操作，分别在1h、2h、6h、1d、3d、6d、9d、12d、15d、18d、21d、24d、27d、30d时分别取样1.0ml，并补充同等体积的新鲜溶液，取样溶液滤过，取续滤液作为供试品溶液，按照中国药典2015版二部地塞米松项下含量检测规定的方法进行释放量检测。
药物缓释曲线见图2，结果表明水凝胶对地塞米松有较长的缓释效果。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种多臂聚乙二醇衍生物复合物的制备方法，包括：
将多臂聚乙二醇衍生物溶解于叔丁醇中，制成多臂聚乙二醇衍生物溶液；
向所述多臂聚乙二醇衍生物溶液中加入末端带氨基的化合物，混合均匀，制成混合物料；于-45℃至-35℃预冻；
然后依次于-15℃至-5℃进行第一干燥，干燥至叔丁醇含量10wt％-15wt％，含水量0.5wt％-1wt％；于10℃-15℃进行第二干燥，干燥至叔丁醇含量2wt％-5wt％，含水量≤0.2wt％-0.5wt％；于25℃-30℃进行第三干燥，干燥至叔丁醇含量≤0.1wt％，含水量≤0.1wt％。
2.根据权利要求1所述多臂聚乙二醇衍生物复合物的制备方法，其中，所述多臂聚乙二醇衍生物选自含有琥珀酰亚胺碳酸酯基、琥珀酰亚胺乙酸酯基、琥珀酰亚胺丙酸酯基、琥珀酰亚胺琥珀酸酯基、琥珀酰亚胺戊二酸酯基、琥珀酰亚胺葵二酸酯基的多臂聚乙二醇衍生物；和/或，
所述末端带氨基的化合物选自多聚赖氨酸或多聚赖氨酸盐、羧甲基壳聚糖、壳聚糖中的至少一种或几种的组合；优选三赖氨酸醋酸盐。
3.根据权利要求1或2所述多臂聚乙二醇衍生物复合物的制备方法，其中，
以g/ml计，所述多臂聚乙二醇衍生物溶液中，多臂聚乙二醇衍生物与叔丁醇的重量体积比为1:(2-4)；和/或，
以g/ml计，所述混合物料中，所述多臂聚乙二醇衍生物与所述末端带氨基的化合物的重量比为1:(0.01-0.06)。
4.根据权利要求1-3任一项所述多臂聚乙二醇衍生物复合物的制备方法，其中，所述预冻的时间为100-150min，例如120min；和/或，
所述第一干燥的时间为1200-1800min，例如1500min；和/或，
所述第二干燥的时间为240-720min，例如360min；和/或，
所述第三干燥的时间为60-600min，例如120min。
5.根据权利要求1-4任一项所述多臂聚乙二醇衍生物复合物的制备方法，还包括将经第三干燥所得物料进行包装的步骤，优选在水分含量≤25ppm、氧含量≤25ppm的环境中包装。
6.权利要求1-5任一项所述方法制备的多臂聚乙二醇衍生物复合物。
7.权利要求6所述多臂聚乙二醇衍生物复合物在制备水凝胶中的应用。
8.一种原位水凝胶，包括：
第一组分，为权利要求6所述多臂聚乙二醇衍生物复合物；
第二组分，为磷酸盐缓冲溶液；pH值优选为6.5-7.5；
第三组分，为缓冲盐溶液；选自硼砂-磷酸盐缓冲溶液或碳酸钠-磷酸盐缓冲溶液；所述缓冲盐溶液pH值优选为9.5-10.0。
9.一种原位载药水凝胶，包括：
第一组分，为权利要求6所述多臂聚乙二醇衍生物复合物；
第二组分，为磷酸盐缓冲溶液；pH值优选为6.5-7.5；
第三组分，为缓冲盐溶液；选自硼砂-磷酸盐缓冲溶液或碳酸钠-磷酸盐缓冲溶液；所述缓冲盐溶液pH值优选为9.5-10.0；
第四组分，为药物。
10.权利要求9所述原位载药水凝胶的制备方法，包括：
将所述第一组分用所述第二组分溶解，制成第一料液；
将所述第四组分用所述第三组分溶解，制成第二料液；
然后将所述第一料液和第二料液混合，制成原位载药水凝胶。
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