CN113166159A - 具有pde9a抑制活性的化合物及其药物用途 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种具有特定化学结构且具有PDE9A抑制活性的化合物或其药学上可接受的盐。本发明提供一种含有所述化合物或其药学上可接受的盐的组合物。本发明提供一种根据本发明的所述化合物、其盐和含有所述化合物或盐的组合物用于治疗或预防PDE9A相关疾病的药物用途。本发明还提供一种用于治疗或预防PDE9A相关疾病的方法，所述方法包括向需要治疗的受试者施用有效量的根据本发明的所述化合物、其盐或含有所述化合物或盐的组合物。

Description

具有PDE9A抑制活性的化合物及其药物用途
技术领域
本申请要求于2018年12月6日提交的韩国申请号10-2018-0156038的优先权，并且该申请的说明书和附图中公开的所有内容通过引用并入本文。
本发明涉及一组具有特定结构和优异的PDE9A抑制活性的化合物。本发明还涉及包含此类化合物的药物组合物。本发明涉及一种用于使用这些化合物治疗与PDE9A有关疾病的有用方法。即，本发明涉及一种根据本发明的化合物用于治疗或预防PDE9A相关疾病的医学用途。
背景技术
磷酸二酯酶9A(PDE9A)主要在脑中，特别是在小脑和海马的新皮质中表达，并且已知通过记忆和学习与cGMP浓度的调节、即与谷氨酸相关的信号有关。因此，已知磷酸二酯酶9A的抑制可用于治疗阿尔茨海默氏病、CNS障碍或由各种神经退行性过程引起的认知障碍。因此，它被认为是治疗或减轻认知障碍的可用药理学靶标，认知障碍例如为伴有学习和记忆问题的伴额叶变性痴呆，包括路易体痴呆、皮克氏综合征、帕金森氏病以及阿尔茨海默氏病。
此外，除了颅神经疾病外，最近在心脏病患者中、特别是在心输出量保持性心力衰竭患者中发现了磷酸二酯酶9A的过表达，并且在诱导心脏病理学病状的动物模型中观察到了磷酸二酯酶9A的过表达。此外，已经报道了通过抑制磷酸二酯酶9A改善心功能并减轻心肌肥大的效应，因此，其作为用于患有心血管疾病的患者、特别是患有心输出量保持性心力衰竭的患者的有用药理学靶标而近年来受到关注。
发明内容
技术问题
因此，本发明要解决的问题是提供一种具有PDE9A抑制活性的化合物、包含所述化合物作为活性成分的药物组合物以及用于治疗或预防其PDE9A相关疾病的医学用途。
本发明要解决的另一个问题是提供一种用于治疗或减轻PDE9A相关疾病的方法，其特征在于其抑制PDE9A活性，并且其包括向需要治疗的患者施用根据本发明的化合物，改善或预防PDE9A相关疾病。
技术方案
为了解决上述问题，本发明的一个实施方案提供一种由以下化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐。
[化学式1]
Figure BDA0003097861360000021
在化学式1中，
A1为NH或N-C1-2烷基，
A2为H、线性或支化C1-5烷基或苯基，
X为选自由以下组成的组中的取代基：-H、卤素、-NO2、-CN、-SR1、未取代或被一个或多个卤素取代的线性或支化C1-10烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的线性或支化C1-10烷氧基、未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳基以及未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳氧基，
Y为选自由以下组成的组中的取代基：未取代或被一个或多个卤素取代的C1-10线性或支化烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的C3-10环烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的包含O或S杂原子的6-10元杂环烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的C1-10线性或支化烷氧基、未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳基以及未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳氧基，
R1为选自由以下组成的组的取代基：未取代或被一个或多个卤素取代的C1-10线性或支化烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的C1-10线性或支化烷氧基、未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳基、未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C1-2烷基-C6-10芳基以及未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳氧基。
具体实施方式
如本文所用，术语“卤素”和“卤代基”意指氟、氯、溴或碘。
如本文所用，术语“C6-10芳基”意指含有6个至10个环原子的碳环芳族基团。代表性实例包括但不限于苯基、甲苯基、二甲苯基、萘基、四氢萘基、蒽基、芴基、茚基和薁基(azulenyl)。碳环芳族基团可为任选取代的。
如本文所用，术语“芳氧基”为RO-，并且R为如上文所定义的芳基。
如本文所用，术语“一种或多种药学上可接受的盐”是指由根据本公开的活性化合物与相对无毒的酸或碱制备的盐，这取决于那些化合物的特定取代基。当化合物具有相对酸性的基团时，可以通过使中性化合物与足够量的所需碱和纯溶剂或惰性溶剂接触来获得碱加成盐。合适的药学上可接受的碱加成盐包括但不限于钠、钾、钙、铝、有机氨基、镁盐等。当化合物具有相对碱性的基团时，可以通过使中性化合物与足够量的所需酸和纯溶剂或惰性溶剂接触来获得酸加成盐。合适的药学上可接受的酸加成盐包括衍生自以下的盐：无毒有机酸，包括但不限于乙酸、丙酸、异丁酸、草酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯基磺酸、柠檬酸、酒石酸、甲磺酸等；以及无毒无机酸，包括但不限于盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、一氢碳酸、磷酸、一氢磷酸、二氢磷酸、硫酸、一氢硫酸、碘化氢、亚磷酸等。它还包括氨基酸的盐，例如精氨酸盐(arginate)或其类似物，并且它还包括有机酸的类似物，例如葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸。本公开的一些特定化合物具有碱性和酸性官能团两种，用于具有碱性或酸性部分(加成)盐的化合物的转化。
如本文所用，短语“本发明的一种或多种化合物”包括化学式1的任何一种或多种化合物，以及其包合物、水合物、溶剂化物或多晶型物。并且，即使术语“本发明的一种或多种化合物”未提及其药学上可接受的盐时，所述术语也包括其盐。在一个实施方案中，本公开的化合物包括立体化学纯的化合物，例如基本上不含(例如，大于85％ee、大于90％ee、大于95％ee、大于97％ee或大于99％ee)其他立体异构体的那些。即，如果根据本公开的化学式1化合物或其盐为互变异构体和/或立体异构体(例如，几何异构体和构象异构体)，则此类分离的异构体和它们的混合物也包括在本公开的范围内。如果本公开的化合物或其盐的结构中具有不对称碳，则它们的活性旋光异构体和它们的外消旋混合物也包括在本公开的范围内。
如本文所用，术语“多晶型物”是指本公开的化合物的固体结晶形式或其复合物。同一化合物的不同多晶型物可表现出不同的物理、化学和/或光谱性质。不同的物理性质包括但不限于稳定性(例如，对热或光的稳定性)、可压缩性和密度(在制剂和产品制造方面很重要)以及溶解速率(可影响生物利用率)。稳定性的差异可能是以下所引起：化学反应性的变化(例如，差异氧化，使得剂型在包含一种多晶型物时的变色快于包含另一种多晶型物时的变色)；或机械特征(例如，片剂因为动力学上有利的多晶型物转化成热力学更稳定的多晶型物而在储存时破碎)；或两者(例如，一种多晶型物的片剂更容易在高湿度下分解)。多晶型物的不同物理性质可能影响它们的加工。例如，由于例如颗粒的形状或大小分布，一种多晶型物与另一种多晶型物相比，可能更可能形成溶剂化物或者可能更难以过滤或洗涤掉杂质。
如本文所用，术语“溶剂化物”意指还包括由非共价分子间力结合的化学计量或非化学计量量的溶剂的根据本公开的化合物或它的盐。优选的溶剂为挥发性的、无毒的并且对于以痕量施用于人来说为可接受的。
如本文所用，术语“水合物”意指还包括由非共价分子间力结合的化学计量或非化学计量量的水的根据本公开的化合物或它的盐。
如本文所用，术语“包合物”意指含有其中捕获了客分子(例如，溶剂或水)的空间(例如，通道)的以晶格形式的化合物或它的盐。
在根据本发明的一个实施方案中，优选地，在化学式1的取代基中
A1为NH或N-C1-2烷基，
A2为H、线性或支化C1-5烷基或苯基，
X为选自由以下组成的组中的取代基：-H、卤素、-NO2、-CN、-SR1、未取代或被一个或多个卤素取代的线性或支化C1-5烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的线性或支化C1-5烷氧基以及未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的苯基，
Y为选自由以下组成的组中的取代基：未取代或被一个或多个卤素取代的C1-6线性或支化烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的C3-6环烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的包含O或S杂原子的6-8元杂环烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的C1-6线性或支化烷氧基、未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳基以及未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳氧基，并且
R1为选自由以下组成的组中的取代基：未取代或被一个或多个卤素取代的C1-6线性或支化烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的C1-6线性或支化烷氧基、未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳基以及未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳氧基。
在根据本发明的一个实施方案中，更优选地，在化学式1的取代基中
A1为NH或NCH3，
A2为H、CH3或苯基，
X为选自由以下组成的组中的取代基：-H、-Cl、-Br、-SR1、甲基、乙基、叔丁基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、异丙氧基、苯基、4-氟苯基和4-甲基苯基，
Y为苯基、4-氟苯基、4,4-二氟环己基、吡喃、噻喃、异丙基或环丙基，并且
R1为甲基、乙基、异丙基、苯基、苄基、4-甲基苄基或4-氯苄基。
为了实现上述目的，本发明人在合成各种化合物之后进行了各种评估实验，以确保化合物具有高PDE9A抑制活性和对它们的高选择性以及其用途，并且最终通过确认本发明的化合物合适于本发明的目的而完成本发明。
根据本发明的优选化合物的非限制性实例包括以下表1的化合物及其药学上可接受的盐。
此外，如以下方案1中所示，本发明提供了一种用于制备由化学式1表示的化合物的方法，其包括以下步骤：通过使由化学式2表示的化合物与由化学式3表示的化合物反应来获得由化学式1表示的化合物。
[方案1]
Figure BDA0003097861360000061
在方案1中，A1、A2、X和Y如化学式1中所定义。
在下文中，将详细描述根据本发明的由方案1表示的制造方法。
如以上方案1中所示，根据本发明的由化学式1表示的化合物可以通过使用由化学式2表示的羧酸化合物和由化学式3表示的胺化合物作为起始物质通过缩合反应来制备。
在用于制备根据本发明的由化学式1表示的化合物的方法中，步骤1为以下步骤：通过使由化学式2表示的化合物与由化学式3表示的化合物反应来获得由化学式1表示的化合物。具体而言，由化学式1表示的化合物可以通过在缩合剂的存在下，使由化学式2表示的化合物和由化学式3表示的化合物缩合来制备。更具体地，具有酰胺键的由化学式1表示的化合物可以通过在缩合剂和碱的存在下，使由化学式2表示的羧酸化合物和由化学式3表示的胺化合物缩合来制备。
此时，可以通过两种常规方法进行缩合反应，并且具体实例如下。
制造方法1-A
可以通过在方案1中在碱的存在下，使用缩合剂与由化学式2表示的化合物和由化学式3表示的化合物来制备。
此时，可用的缩合剂包括：基于有机磷的试剂，诸如双(2-氧代-3-噁唑烷基)次磷酰氯(BOP-Cl)、苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)磷鎓六氟磷酸盐(BOP)和二苯基磷酰叠氮化物(DPPA)；基于碳二亚胺的试剂，诸如二环己基碳二亚胺(DCC)、二异丙基碳二亚胺(DIC)和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDC)；N,N-羰基二咪唑；O-苯并三唑-N,N,N',N'-四甲基-脲-六氟磷酸盐(HBTU)；1-[双(二甲氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(HATU)；2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物(CMPI)；2-氟-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(CDMT)。
此外，使用碱以加速反应并且增加产率，并且可用的碱包括：有机碱，诸如N,N-二甲氨基吡啶(DMAP)、吡啶、三乙胺、N,N-二异丙基乙胺和1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯(DBU)；或无机碱，诸如碳酸氢钠、氢氧化钠和氢氧化钾。这些可以等量或过量地单独或组合使用。
另外，反应溶剂包括：醚溶剂，诸如四氢呋喃、二噁烷、二氯甲烷和1,2-二甲氧基乙烷；芳烃溶剂，诸如苯、甲苯和二甲苯；二甲基甲酰胺(DMF)；二甲亚砜；乙腈；等。这些可以单独或组合使用。反应温度为0℃至溶剂的沸点。
制造方法1-B
此外，通过已知方法，将方案1的由化学式2表示的羧酸化合物转化成酰卤、羧酸酐或活性酯(例如，对硝基苯基酯、N-羟基琥珀酰亚胺酯、五氟苯基酯等)，然后使其在碱的存在下与由化学式3表示的胺化合物反应，以得到由化学式1表示的化合物。
此时，碱包括：叔胺有机碱，诸如三乙胺和二异丙基乙胺；和无机碱，诸如碳酸钠、碳酸钾、氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸铯、氢氧化钡等。这些可以等量或过量地单独或组合使用。
此外，可用于反应的溶剂包括：醚溶剂，诸如二噁烷、四氢呋喃和1,2-二甲氧基乙烷；含有卤素的溶剂，诸如1,2-二氯甲烷或1,2-二氯乙烷；芳烃溶剂，诸如苯和甲苯；等。这些可以单独或组合使用。反应可以在没有溶剂的情况下发生。反应温度为0℃至溶剂的沸点。
起始物质(由化学式2表示的化合物)的制备
作为方案1的起始物质的由化学式2表示的化合物可以通过包括以下的方法来制备：通过使由化学式4表示的化合物与由化学式5表示的化合物反应来获得由化学式6表示的化合物的步骤(步骤1)；通过使步骤1中获得的由化学式6表示的化合物反应来获得由化学式7表示的化合物的步骤(步骤2)；通过使步骤2中获得的由化学式7表示的化合物与由化学式8表示的化合物反应来获得由化学式9表示的化合物的步骤(步骤3)；以及通过使步骤3中获得的由化学式9表示的化合物反应来获得由化学式2表示的化合物的步骤(步骤4)，如以下方案2所示。
[方案2]
Figure BDA0003097861360000081
在方案2中，Y和A2如化学式1中所定义。
在下文中，将详细描述由方案2表示的制造方法。
在由方案2表示的制造方法中，步骤1为使由化学式4表示的化合物与由化学式5表示的化合物反应以得到由化学式6表示的化合物的步骤。具体而言，此步骤为在碱性条件下，通过以由化学式4表示的醛和称为肼的化合物5的环化反应来获得由化学式6表示的化合物。
在上文反应中，由化学式5表示的化合物可以是可商购获得的化合物，并且由化学式6表示的化学品可以是可商购获得的化合物或通过已知方法由对应的酮化合物制备。
另外，哌啶是可用于反应的代表性碱。此外，有机碱(诸如吡咯烷、吡啶、三乙胺、N,N-二异丙基乙胺和DBU)或无机碱(诸如NaOH、Na2CO3、K2CO3和Cs2CO3)可以等效量或过量使用。
此外，反应溶剂为：醚溶剂，诸如四氢呋喃、二噁烷和1,2-二甲氧基乙烷；芳烃溶剂，诸如苯、甲苯和二甲苯；低级醇，诸如甲醇、乙醇、丙醇和丁醇；二甲基甲酰胺(DMF)；二甲亚砜(DMSO)；乙腈；水等；可单独或组合使用，并且反应温度为0℃至溶剂的沸点。
在由方案2表示的制造方法中，步骤2为通过使步骤1中获得的由化学式6表示的化合物反应来获得由化学式7表示的化合物的步骤。具体而言，此为通过在碱性或酸性条件下，使由化学式6表示的酯化合物水解来制备由化学式7表示的羧酸化合物的步骤。
此时，碱包括无机碱，诸如碳酸钠、碳酸钾、氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸铯和氢氧化钡。这些可以等量或过量地单独或组合使用。酸包括盐酸、硫酸、甲磺酸等，并且酸可以等效量或过量地单独或组合使用。
此外，可用于反应的溶剂包括：醚溶剂，诸如四氢呋喃、二噁烷、二氯甲烷和1,2-二甲氧基乙烷；芳烃溶剂，诸如苯、甲苯和二甲苯；基于醇的溶剂，诸如甲醇和乙醇；二甲基甲酰胺(DMF)；二甲亚砜(DMSO)；乙腈；水等。这些可以单独或组合使用。反应温度为0℃至溶剂的沸点。
在由方案2表示的制造方法中，步骤3为通过使步骤2中获得的由化学式7表示的化合物与由化学式8表示的硫醇反应来获得由化学式9表示的化合物的步骤。具体而言，此为通过在碱性条件下，用步骤2中获得的由化学式7表示的以氯取代的吡唑并嘧啶酮化合物和由化学式8表示的硫醇进行取代来制备由化学式9表示的酯化合物的步骤。
在这种情况下，碱包括无机碱，诸如碳酸钠、碳酸钾、氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸铯和氢氧化钡。这些可以等量或过量地单独或组合使用。
此外，可用于反应的溶剂包括：醚溶剂，诸如四氢呋喃、二噁烷、二氯甲烷和1,2-二甲氧基乙烷；芳烃溶剂，诸如苯、甲苯和二甲苯；基于醇的溶剂，诸如甲醇和乙醇；二甲基甲酰胺(DMF)；二甲亚砜(DMSO)；乙腈；水等。这些可以单独或组合使用。反应温度为0℃至溶剂的沸点。
在由方案2表示的制造方法中，步骤4为通过使步骤3中获得的由化学式9表示的化合物反应来获得由化学式2表示的化合物的步骤。具体而言，此为通过在碱性或酸性条件下，使由化学式9表示的酯化合物水解来制备由化学式2表示的羧酸化合物的步骤。
此时，碱包括无机碱，诸如碳酸钠、碳酸钾、氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸铯和氢氧化钡。这些可以等量或过量地单独或组合使用。酸包括盐酸、硫酸、甲磺酸等，并且酸可以等效量或过量地单独或组合使用。
此外，可用于反应的溶剂包括：醚溶剂，诸如四氢呋喃、二噁烷、二氯甲烷和1,2-二甲氧基乙烷；芳烃溶剂，诸如苯、甲苯和二甲苯；基于醇的溶剂，诸如甲醇和乙醇；二甲基甲酰胺(DMF)；二甲亚砜(DMSO)；乙腈；水等。这些可以单独或组合使用。反应温度为0℃至溶剂的沸点。
起始物质(由化学式5表示的化合物)的制备
作为方案2的起始物质的由化学式5表示的化合物可以根据Y类型通过下文方案3中所示的制造方法来制备。
[方案3]
Figure BDA0003097861360000101
在方案3中，Y如化学式1所定义；R2为选自由以下组成的组中的取代基：卤素、未取代或被一个或多个卤素取代的C1-10线性或支化烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的C1-10线性或支化烷氧基、未取代或取代的C6-10芳基和未取代或取代的C6-10芳氧基，其中R3独立地为C1-10线性或支化烷基。
在下文中，将详细描述由方案3表示的制造方法。
在由反应方案3表示的制造方法中，步骤1为通过使由化学式10表示的化合物反应来获得由化学式11表示的化合物的步骤。具体而言，此为通过使由化学式10表示的酮化合物与叔丁基卡巴酯(tert-butyl carbazate)的缩合反应来制备由化学式11表示的亚胺化合物的步骤。
此外，可用于反应的溶剂包括：醚溶剂，诸如四氢呋喃、二噁烷、二氯甲烷和1,2-二甲氧基乙烷；芳烃溶剂，诸如苯、甲苯和二甲苯；基于醇的溶剂，诸如甲醇和乙醇；二甲基甲酰胺(DMF)；二甲亚砜(DMSO)；乙腈；水等。这些可以单独或组合使用。反应温度为0℃至溶剂的沸点。
在由方案3表示的制造方法中，步骤2为通过使步骤1中获得的由化学式11表示的化合物反应来获得由化学式12表示的化合物的步骤。具体而言，此为通过由化学式11表示的亚胺化合物与金属还原剂的还原反应来制备由化学式12表示的肼化合物的步骤。
可用于上文反应的金属还原剂可为硼氢化钠(NaBH4)、三乙酰氧基硼氢化钠(NaBH(OAc)3)或氰基硼氢化钠(NaBH3CN)。
此外，可用于反应的溶剂包括：醚溶剂，诸如四氢呋喃、二噁烷、二氯甲烷和1,2-二甲氧基乙烷；芳烃溶剂，诸如苯、甲苯和二甲苯；基于醇的溶剂，诸如甲醇和乙醇；二甲基甲酰胺(DMF)；二甲亚砜(DMSO)；乙腈；水等。这些可以单独或组合使用。反应温度为0℃至溶剂的沸点。
在由方案3表示的制造方法中，步骤3为通过使步骤2中获得的由化学式12表示的化合物反应来获得由化学式5表示的化合物的步骤。具体而言，此步骤通过脱保护反应除去由化学式12表示的肼化合物的胺保护基来制备由化学式5表示的最终化合物。
在本发明中，使用酸条件，并且盐酸、硫酸、甲磺酸、三氟乙酸等可用作酸。
此外，可用于反应的溶剂包括：醚溶剂，诸如四氢呋喃、二噁烷、二氯甲烷和1,2-二甲氧基乙烷；芳烃溶剂，诸如苯、甲苯和二甲苯；基于醇的溶剂，诸如甲醇和乙醇；二甲基甲酰胺(DMF)；二甲亚砜(DMSO)；乙腈；水等。这些可以单独或组合使用。反应温度为0℃至溶剂的沸点。
起始物质(由化学式3表示的化合物)的制备1
作为方案1的起始物质的由化学式3表示的化合物可以根据X类型通过下文方案4中所示的制造方法来制备。
[方案4]
Figure BDA0003097861360000121
在方案4中，A1如化学式1中所定义；X为SR1；L为氯、溴或碘；R1如化学式1中所定义。
在下文中，将详细描述由方案4表示的制造方法。
在由方案3表示的制造方法中，步骤1为使由化学式13表示的化合物与由化学式14表示的化合物反应来获得由化学式3表示的化合物的步骤。具体而言，此为通过在碱性条件下用由化学式13表示的噻二唑硫醇化合物和由化学式14表示的烷基卤进行取代反应来制备由化学式3表示的噻二唑胺化合物的步骤。
此时，碱可为：无机碱，诸如碳酸钠、碳酸钾、氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸铯、氢氧化钡等；或有机碱，诸如哌啶、吡咯烷、吡啶、三乙胺、N,N-二异丙基乙胺或DBU。这些可以等量或过量地单独或组合使用。
此外，可用于反应的溶剂包括：醚溶剂，诸如四氢呋喃、二噁烷、二氯甲烷和1,2-二甲氧基乙烷；芳烃溶剂，诸如苯、甲苯和二甲苯；基于醇的溶剂，诸如甲醇和乙醇；二甲基甲酰胺(DMF)；二甲亚砜(DMSO)；乙腈；水等。这些可以单独或组合使用。反应温度为0℃至溶剂的沸点。
起始物质(由化学式3表示的化合物)的制备2
作为方案1的起始物质的由化学式3表示的化合物可以根据X类型通过下文方案5中所示的制造方法来制备。
[方案5]
Figure BDA0003097861360000122
在方案5中，R3为选自由以下组成的组中的取代基：卤素、未取代或被一个或多个卤素取代的C1-10线性或支化烷基、未取代或被一个或多个烷氧基取代的C1-10线性或支化烷氧基、未取代或取代的C6-10芳基和未取代或取代的C6-10芳氧基，其中R3独立地为C1-10线性或支化烷基。
在下文中，将详细描述由方案5表示的制造方法。
在由方案5表示的制造方法中，步骤1为使由化学式15表示的化合物与由化学式16表示的化合物反应来制备由化学式3表示的化合物的步骤。具体而言，在此步骤中，在氯化试剂的存在下，使由式15表示的苯甲酸化合物与由化学式16表示的硫代氨基脲化合物进行环化反应，以制备由化学式3表示的化合物。
可用于上文反应的氯化试剂可为亚硫酰氯(SOCl2)、磷酰氯(POCl3)等。
作为反应溶剂，水溶性溶剂诸如水、醚溶剂诸如四氢呋喃、二噁烷或1,2-二甲氧基乙烷等可单独或组合使用，并且反应温度为0℃至溶剂的沸点。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据本发明的化学式1化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载剂。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种用于治疗疾病或病状的方法，包括向有需要的个体施用治疗有效量的化学式1化合物或其药学上可接受的盐，其中疾病或病状为磷酸二酯酶9A相关疾病。
即，本发明提供一种医学用途，其特征在于，将根据本发明的化学式1化合物或其药学上可接受的盐用作活性成分。在一个实施方案中，本发明的医学用途为磷酸二酯酶9A相关疾病。
在一个实施方案中，磷酸二酯酶9A相关疾病为神经疾病或精神疾病。在一个实施方案中，神经或精神病症为阿尔茨海默氏病、亨丁顿氏病、路易体痴呆或皮克氏综合征。
在另一个实施方案中，磷酸二酯酶9A相关疾病为心力衰竭，特别是心输出量保持性心力衰竭和镰状细胞病。
本发明的化合物通常以治疗有效量施用。本发明的化合物可以通过任何合适的途径以合适于此途径的药物组合物的形式并以用于预期治疗的有效剂量来使用。有效剂量通常为约0.001至约100mg/kg体重/天，优选地约0.01至约50mg/kg体重/天，以单剂量或分剂量的形式。根据年龄、物种和所治疗的疾病或病状，低于此范围下限的剂量水平可能是合适的。在其他情况下，可以使用较大剂量而无有害副作用。较大剂量可以分为几个较小剂量，以便全天施用。用于确定适当剂量的方法是本发明所属领域中众所周知的，例如，可以使用Remington:The Science and Practice of Pharmacy,Mack Publishing Co.,第20版,2000。
对于治疗上文提及的疾病或病状，可如下施用本文所述的化合物或其药学上可接受的盐：
口服施用
本公开的化合物可以口服施用，包括通过吞咽来施用，以使得化合物进入胃肠道，或从嘴巴直接吸收到血流中(例如，经颊或舌下施用)。
口服施用的合适组合物包括固体、液体、凝胶或粉末制剂，并具有诸如片剂、锭剂、胶囊、颗粒即或粉剂的剂型。
口服施用的组合物可以配制成立即释放或调节释放，包括延迟释放或持续释放，任选地具有肠溶衣。
液体制剂可以包括溶液、糖浆和混悬液，其可以用于软胶囊或硬胶囊中。此类制剂可以包含药学上可接受的载剂，例如水、乙醇、聚乙二醇、纤维素或油。制剂还可包含一种或多种乳化剂和/或悬浮剂。
在片剂剂型中，存在的药物的量可以为剂型的约0.05重量％至约95重量％，更通常为约2重量％至约50重量％。此外，片剂可包含崩解剂，其占剂型的约0.5重量％至约35重量％，更通常约2重量％至约25重量％。崩解剂的实例包括但不限于乳糖、淀粉、羧甲淀粉钠、交聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、麦芽糖糊精或其混合物。
用于片剂的合适的润滑剂的存在量可为约0.1重量％至约5重量％，并且包括但不限于滑石、二氧化硅、硬脂酸、硬脂酸钙、硬脂酸锌或硬脂酸镁、硬脂富马酸钠等。
用于片剂的合适的粘合剂包括但不限于明胶、聚乙二醇、糖、树胶、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素等。用于片剂的合适的稀释剂包括但不限于甘露糖醇、木糖醇、乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、微晶纤维素和淀粉。
用于片剂的合适的增溶剂的存在量可为约0.1重量％至约3重量％，并且包括但不限于聚山梨醇酯、月桂基硫酸钠、十二烷基硫酸钠、碳酸丙烯酯、二乙二醇单乙醚、二甲基异山梨醇酯、聚乙二醇、(天然或氢化)蓖麻油、HCORTM(Nikkol)、油酰酯、GelucireTM、羊脂酸/辛酸甘油单/二酯、脱水山梨糖醇酐脂肪酸酯和Solutol HSTM。
肠胃外施用
本公开的化合物可以直接施用到血流、肌肉或内部器官中。肠胃外施用的合适方式包括静脉内、肌肉内、皮下动脉内、腹膜内、鞘内、颅内等。肠胃外给药的合适装置包括注射器(包括针头和无针头注射器)和输注方法。
肠胃外施用的组合物可以配制成立即释放或调节释放，包括延迟释放或持续释放。
大多数肠胃外制剂是含有赋形剂的水溶液，赋形剂包括盐、缓冲剂和等渗剂。
肠胃外制剂还可以以脱水形式(例如，通过冻干)或作为无菌非水溶液来制备。这些制剂可以与合适的媒介物例如无菌水一起使用。增溶剂也可以用于制备肠胃外溶液。
局部施用
本公开的化合物可以局部施用于皮肤或透皮施用。用于此局部施用的制剂可以包含洗剂、溶液、乳膏、凝胶、水凝胶、软膏、泡沫、植入物、贴剂等。局部施用制剂的药学上可接受的载剂可以包括水、酒精、矿物油、甘油、聚乙二醇等。局部施用还可以通过电穿孔、离子电渗疗法、超声透入疗法等来进行。
局部施用的组合物可以配制成立即释放或调节释放，包括延迟释放或持续释放。
有益效果
本发明提供一种能够通过抑制PDE 9A活性来表现出各种药理活性的化合物、含有所述化合物作为有效成分的药物组合物、它们的医学用途(特别是用于治疗或减轻神经疾病和精神疾病)以及包括向有需要的个体施用的治疗或预防方法。
发明方式
将基于以下实施例更详细地描述本发明，但这并不意图限制本发明的范围。此外，本领域的普通技术人员将能够在不损害本发明的精神的范围内对本发明进行各种修改和变化。
<制备实施例1>(4,4-二氟环己基)肼氯化氢的制备
步骤1：2-(4,4-二氟亚环己基)肼-1-羧酸叔丁酯的制备
Figure BDA0003097861360000161
将300mg 4,4-二氟环己酮(2.24mmol)溶解于10ml己烷中，并且添加296mg叔丁基卡巴酯(2.24mmol)，接着在回流下搅拌3小时。在反应完成之后，减压浓缩混合物，以得到550mg标题化合物(2.24mmol)，产率100％。
Rf＝0.30(己烷:乙酸乙酯＝3:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.72(br s,1H),2.45(t,J＝6.4Hz,2H),2.37(t,J＝6.4Hz,2H),1.99-2.12(m,4H),1.43(s,9H)
步骤2：2-(4,4-二氟环己基)肼-1-羧酸叔丁酯的制备
Figure BDA0003097861360000162
将550mg步骤1中获得的2-(4,4-二氟亚环己基)肼-1-羧酸叔丁酯溶解于10ml THF中，并且添加950mg三乙酰氧基硼氢化钠(4.48mmol)并在室温下搅拌15小时。在反应完成之后，将产物用100ml乙酸乙酯萃取，用100ml无机盐溶液洗涤，经由无水硫酸钠(Na2SO4)干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝3:1，v/v)纯化，以得到465mg标题化合物(1.86mmol)，产率84％。
Rf＝0.45(己烷:乙酸乙酯＝3:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.20(br s,1H),4.38(br s,1H),2.86-2.95(m,1H),1.93-2.11(m,2H),1.59-1.83(m,4H),1.41-1.49(m,2H),1.38(s,9H)
步骤3：(4,4-二氟环己基)肼氯化氢的制备
Figure BDA0003097861360000171
将465mg步骤2中获得的2-(4,4-二氟环己基)肼-1-羧酸叔丁酯(1.86mmol)溶解于10ml甲醇中，并且添加盐酸并在50℃下搅拌3小时。在反应完成之后，减压浓缩产物，以得到335mg标题化合物(1.79mmol)，产率96％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ3.05-3.12(m,1H),1.96-2.09(m,4H),1.79-1.91(m,2H),1.52-1.59(m,2H)
<制备实施例2>2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000172
步骤1：4,6-二氯-1-(4,4-二氟环己基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶的制备
Figure BDA0003097861360000173
将340mg 2,4,6-三氯嘧啶-5-甲醛(1.61mmol)溶解于6ml乙醇中，并且在-78℃下添加300mg制备实施例1步骤3中获得的(4,4-二氟环己基)肼氯化氢(1.61mmol)和0.86mlN,N-二异丙基乙胺(4.82mmol)并搅拌3小时。在反应完成之后，将产物用100ml乙酸乙酯萃取，用100ml无机盐溶液洗涤，经由无水硫酸钠(Na2SO4)干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝10:1，v/v)纯化，以得到360mg标题化合物(1.17mmol)，产率73％。
Rf＝0.35(己烷:乙酸乙酯＝10:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),4.97-5.04(m,1H),2.13-2.23(m,6H),2.03-2.07(m,2H)
步骤2：6-氯-1-(4,4-二氟环己基)-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-酮的制备
Figure BDA0003097861360000181
将340mg上文步骤1中制备的4,6-二氯-1-(4,4-二氟环己基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(1.11mmol)溶解于6ml THF中，并且添加1ml 2N氢氧化钠(1.11mmol)，并且将混合物在回流下搅拌15小时。在反应完成之后，用6N盐酸酸化混合物，并且对沉淀的固体化合物进行过滤，以得到320mg标题化合物(1.10mmol)，产率99％。
Rf＝0.40(二氯甲烷:甲醇＝20:1，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.11(s,1H),4.77-4.81(m,1H),2.08-2.17(m,6H),1.94-2.00(m,2H)
步骤3：2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯的制备
Figure BDA0003097861360000182
将150mg上文步骤2中制备的6-氯-1-(4,4-二氟环己基)-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]吡啶-4-酮(0.520mmol)、153mg碳酸钾(1.559mmol)和119μl硫代乙醇酸乙酯(1.091mmol)溶解于3ml DMF中，接着在90℃下搅拌3小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水、1N盐酸和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(甲醇/二氯甲烷＝3％，v/v)纯化，以得到170mg固体标题产物(0.457mmol)，产率88％。
Rf＝0.60(正己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,MeOD-d4)δ7.95(s,1H),4.68-4.80(m,1H),4.21(q,J＝7.1Hz,2H),4.09(s,2H),1.92-2.38(m,8H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H)
步骤4：2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000191
将162mg上文步骤3中制备的2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯(0.435mmol)溶解于3ml四氢呋喃中，并且添加2N氢氧化钠，并且将混合物在室温下搅拌1小时30分钟。在反应完成之后，将其用1N盐酸中和，用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水和饱和盐水洗涤。减压浓缩产物，以得到151mg固体标题化合物(0.435mmol)，产率99％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.87(brs,1H),12.60(brs,1H),7.98(s,1H),4.65-4.73(m,1H),4.00(s,2H),1.95-2.23(m,8H)
<实施例1>2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000192
步骤1：2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000201
将40mg制备实施例2中获得的2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.116mmol)、24mg 5-氯-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.174mmol)、59mg CMPI(0.232mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加41μl DIPEA(0.232mmol)并在50℃下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到12.6mg固体标题化合物(0.027mmol)，产率24％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.35(brs,1H),12.63(brs,1H),7.97(s,1H),4.47-4.61(m,1H),4.27(s,2H),1.65-2.14(m,8H)
<制备实施例3>2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000202
步骤1：4,6-二氯-1-苯基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶的制备
Figure BDA0003097861360000203
将2g 2,4,6-三氯嘧啶-5-甲醛(9.44mmol)溶解于30ml乙醇中，并且在-78℃下添加0.9ml苯肼盐酸盐(9.44mmol)和4.8ml N,N-二异丙基乙胺(28.32mmol)并搅拌3小时。在反应完成之后，将产物用300ml乙酸乙酯萃取，用200ml无机盐溶液洗涤，经由无水硫酸钠(Na2SO4)干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝20:1，v/v)纯化，以得到1.7g标题化合物(6.41mmol)，产率68％。
Rf＝0.50(己烷:乙酸乙酯＝10:1，v/v)
1H NMR(300MHz,CD3OD)δ8.35(s,1H),8.17(d,J＝8.5Hz,2H),7.59(dd,J＝8.5,7.6Hz,2H),7.44(dd,J＝7.6,7.6Hz,1H)
步骤2：6-氯-1-苯基-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-酮的制备
Figure BDA0003097861360000211
将1.9g上文步骤1中制备的4,6-二氯-1-苯基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(8.98mmol)溶解于20ml THF中，并添加10ml 2N氢氧化钠(17.96mmol)，并且将混合物在回流下搅拌15小时。在反应完成之后，用6N盐酸酸化混合物，并且对沉淀的固体化合物进行过滤，以得到2.2g标题化合物(8.98mmol)，产率99％。
Rf＝0.23(二氯甲烷:甲醇＝20:1，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.47(br s,1H),8.35(s,1H),7.94(d,J＝8.0Hz,2H),7.58(dd,J＝8.0,7.4Hz,2H),7.43(dd,J＝7.4,7.4Hz,1H)
步骤3：2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯的制备
Figure BDA0003097861360000212
将1g上文步骤2中制备的6-氯-1-苯基-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]吡啶-4-酮(4.054mmol)和1.644g碳酸钾(12.162mmol)溶解于15ml DMF中，添加930μl硫代乙醇酸乙酯(4.514mmol)，接着在90℃下搅拌3小时30分钟。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(正己烷:乙酸乙酯＝3:1->1:1->甲醇/二氯甲烷＝5％，v/v)纯化，以得到1.117g固体标题产物(3.381mmol)，产率83％。
Rf＝0.53(正己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,MeOD-d4)δ8.15(s,1H),8.00(d,J＝8.0Hz,2H),7.50-7.57(m,2H),7.36-7.43(m,1H),4.03-4.12(m,4H),1.14(t,J＝7.1Hz,3H)
步骤4：2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000221
将1.117g上文步骤3中制备的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯(3.381mmol)溶解于20ml四氢呋喃中，并且添加2N氢氧化钠，并且将混合物在室温下搅拌1小时。在反应完成之后，将其用1N盐酸中和，用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水和饱和盐水洗涤。减压浓缩产物，以得到928mg固体标题化合物(3.07mmol)，产率91％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.01(brs,1H),12.84(brs,1H),8.25(s,1H),8.05(d,J＝8.2Hz,2H),7.49-7.56(m,2H),7.35-7.42(m,1H),4.03(s,2H)
<制备实施例4>5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000222
步骤1：5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000223
将2g 5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-硫醇(15.96mmol)和1.01g氢氧化钾(18.02mmol)溶解于20ml异丙醇和15ml水中，并且缓慢添加1.27ml碘乙烷(15.767mmol)，并在室温下搅拌4小时且在60℃下搅拌1小时。在反应完成之后，将其添加至70ml冰水中，并在0℃下静置30分钟。将所得固体过滤并用水洗涤，以得到1.238g固体标题化合物(7.678mmol)，产率48％。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ5.15(brs,2H),3.18(q,J＝7.4Hz,2H),1.42(t,J＝7.4Hz,3H)
<实施例2>N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000231
步骤1：N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000232
将28mg制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.093mmol)、18mg制备实施例4中获得的5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.111mmol)和36mg 2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘(0.140mmol)溶解于2ml DMF中，然后添加24μl DIPEA(0.140mmol)，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到21.1mg目标固体化合物(0.047mmol)，产率51％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.82-13.08(m 2H),8.23(s,1H),7.84(d,J＝7.7Hz,2H),7.19-7.35(m,3H),4.31(s,2H),3.19(q,J＝7.2Hz,2H),1.30(t,J＝7.2Hz,3H)
<实施例3>N-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000233
步骤1：N-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000241
将50mg制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.165mmol)、57mg 2-氨基-5-甲基-1,3,4-噻二唑(0.496mmol)和63mg 2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘(0.248mmol)溶解于2ml DMF中，添加43μl DIPEA(0.248mmol)，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水、乙醚和乙酸乙酯洗涤，并且过滤，以得到37mg固体标题化合物(0.093mmol)，产率56％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.77-12.93(m,2H),8.23(s,1H),7.85(d,J＝7.7Hz,2H),7.20-7.36(m,3H),4.31(s,2H),2.59(s,3H)
<实施例4>2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000242
步骤1：2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000243
将50mg制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.165mmol)、67mg 2-氨基-1,3,4-噻二唑(0.660mmol)和84mg 2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘(0.330mmol)溶解于2ml DMF中。然后，添加58μl DIPEA(0.330mmol)，并且将混合物在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水、乙醚和乙酸乙酯洗涤，并且过滤，以得到37.4mg固体标题化合物(0.097mmol)，产率59％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.00(brs,1H),12.89(brs,1H),9.16(s,1H),8.23(s,1H),7.83(d,J＝7.3Hz,2H),7.24-7.29(m,2H),7.19-7.23(m,1H),4.33(s,2H)
<实施例5>N-(5-乙基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000251
步骤1：N-(5-乙基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000252
将50mg制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.165mmol)、85mg 2-氨基-5-乙基-1,3,4-噻二唑(0.660mmol)和84mg 2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘(0.330mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加58μl DIPEA(0.330mmol)，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水、乙醚和乙酸乙酯洗涤，并且过滤，以得到45mg固体标题化合物(0.109mmol)，产率66％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.88(brs,1H),12.82(brs,1H),8.23(s,1H),7.85(d,J＝7.8Hz,2H),7.28-7.33(m,2H),7.21-7.25(m,1H),4.31(s,2H)
<制备实施例5>5-(苄基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000253
步骤1：5-(苄基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000261
将200mg 5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-硫醇(1.240mmol)溶解于5ml乙醇中，并且添加2N氢氧化钠和155μl苄基溴(1.302mmol)，接着搅拌16小时和1小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(甲醇/二氯甲烷＝2％->5％，v/v)纯化，以得到254mg固体标题产物(1.137mmol)，产率92％。
Rf＝0.33(甲醇/二氯甲烷＝5％，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.30-7.37(m,4H),7.24-7.29(m,3H),4.29(s,2H)
<实施例6>N-(5-(苄基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-(4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000262
步骤1：N-(5-(苄基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-(4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000263
将50mg制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.165mmol)、154mg制备实施例5中获得的5-(苄基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.660mmol)和84mg 2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘(0.330mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加58μl DIPEA(0.330mmol)，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水、乙醚、甲醇和乙酸乙酯洗涤，并且过滤，以得到44.8mg固体标题化合物(0.088mmol)，产率53％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.03(brs,1H),12.88(brs,1H),8.24(s,1H),7.82(d,J＝7.8Hz,2H),7.33-7.37(m,2H),7.20-7.31(m,6H),4.45(s,2H),4.30(s,2H)
<实施例7>N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000271
步骤1：N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000272
将50mg制备实施例3中获得的4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.165mmol)、119mg 2-氨基-5-溴-1,3,4-噻二唑(0.660mmol)和84mg 2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘(0.330mmol)溶解于2ml DMF中。之后，添加58μl DIPEA(0.330mmol)，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水、乙醚和乙酸乙酯洗涤，并且过滤，以得到25.1mg固体标题化合物(0.054mmol)，产率33％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.31(brs,1H),12.90(brs,1H),8.23(s,1H),7.83(d,J＝7.8Hz,2H),7.29-7.34(m,2H),7.22-7.26(m,1H),4.34(s,2H)
<制备实施例6>5-((4-氯苄基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000273
步骤1：5-((4-氯苄基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000281
将200mg 5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-硫醇(1.240mmol)和268mg 4-氯苄基溴(1.302mmol)溶解于5ml乙醇中，并且添加2N氢氧化钠，并在室温下搅拌16小时和1小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(甲醇/二氯甲烷＝2％->5％，v/v)纯化，以得到187mg固体标题产物(0.756mmol)，产率59％。
Rf＝0.21(甲醇/二氯甲烷＝5％，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.33-7.41(m,4H),7.29(brs,2H),4.28(s,2H)
<实施例8>N-(5-((4-氯苄基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-(4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000282
步骤1：N-(5-((4-氯苄基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-(4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000283
将50mg制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.165mmol)、170mg制备实施例6中获得的5-((4-氯苄基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.660mmol)和84mg 2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘(0.330mmol)溶解于2ml DMF中，添加58μl DIPEA(0.330mmol)，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水、乙醚、甲醇和乙酸乙酯洗涤，并且过滤，以得到27.5mg固体标题化合物(0.051mmol)，产率31％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.80-13.11(m,2H),8.23(s,1H),7.82(d,J＝7.4Hz,2H),7.17-7.42(m,7H),4.44(s,2H),4.30(s,2H)
<制备实施例7>5-((4-甲基苄基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000291
步骤1：5-((4-甲基苄基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000292
将200mg 5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-硫醇(1.240mmol)和241mg 4-甲基苄基溴(1.302mmol)溶解于5ml乙醇中，并且添加2N氢氧化钠并在室温下搅拌16小时和1小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(甲醇/二氯甲烷＝2％->5％，v/v)纯化，以得到257mg固体标题产物(1.083mmol)，产率87％。
Rf＝0.20(甲醇/二氯甲烷＝5％，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.27(brs,2H),7.23(d,J＝8.0Hz,2H),7.12(d,J＝8.0Hz,2H),4.25(s,2H),2.27(s,3H)
<实施例9>N-(5-((4-甲基苄基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-(4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000293
步骤1：N-(5-((4-甲基苄基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-(4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000301
将50mg制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.165mmol)、157mg制备实施例7中获得的5-((4-甲基苄基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.660mmol)和84mg 2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘(0.330mmol)溶解于2mlDMF中，添加58μl DIPEA(0.330mmol)，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水、乙醚、甲醇和乙酸乙酯洗涤，并且过滤，以得到30.6mg固体标题化合物(0.059mmol)，产率36％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.87-13.06(m,2H),8.24(s,1H),7.81(d,J＝7.4Hz,2H),7.19-7.31(m,5H),7.03(d,J＝7.7Hz,2H),4.40(s,2H),4.29(s,2H),2.20(s,3H)
<制备实施例8>2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸的制备
Figure BDA0003097861360000302
步骤1：2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸乙酯的制备
Figure BDA0003097861360000303
将150mg制备实施例3的步骤2中制备的6-氯-1-苯基-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]吡啶-4-酮(0.608mmol)和252mg碳酸钾(1.824mmol)溶解于5ml DMF中，添加165μl 2-巯基丙酸乙酯(1.277mmol)，接着在90℃下搅拌3小时30分钟。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水、1N盐酸和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(正己烷:乙酸乙酯＝3:1->1:1->甲醇/二氯甲烷＝5％，v/v)纯化，以得到154mg固体标题产物(0.447mmol)，产率74％。
Rf＝0.51(正己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ10.45(brs,1H),8.22(s,1H),8.04(d,J＝7.8Hz,2H),7.50-7.55(m,2H),7.35-7.40(m,1H),4.58(q,J＝7.3Hz,1H),4.17-4.25(m,1H),4.06-4.13(m,1H),1.71(d,J＝7.3Hz,3H),1.21(t,J＝7.1Hz,3H)
步骤2：2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸的制备
Figure BDA0003097861360000311
将146mg上文步骤1中制备的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸乙酯(3.381mmol)溶解于5ml四氢呋喃中，添加2N氢氧化钠，接着在室温下搅拌4小时。在反应完成之后，将其用1N盐酸中和，用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水和饱和盐水洗涤。将其减压浓缩，以得到134mg固体标题化合物(0.423mmol)，产率99％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.50-13.40(m,2H),8.24(s,1H),8.06(d,J＝7.5Hz,2H),7.50-7.58(m,2H),7.34-7.42(m,1H),4.44(q,J＝7.5Hz,1H),1.58(d,J＝7.5Hz,3H)
<实施例10>N-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000312
步骤3：N-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000321
将30mg制备实施例8中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸(0.095mmol)、22mg 2-氨基-5-甲基-1,3,4-噻二唑(0.190mmol)和48mg BOP-Cl(0.190mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加26μl TEA(0.190mmol)并在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷＝5％，v/v)纯化，以得到13.6mg固体标题产物(0.033mmol)，产率35％。
Rf＝0.19(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.80-12.90(m,2H),8.23(s,1H),7.92(d,J＝7.9Hz,2H),7.39-7.47(m,2H),7.26-7.33(m,1H),4.77(q,J＝7.5Hz,1H),2.59(s,3H),1.64(d,J＝7.5Hz,3H)
<实施例11>N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000322
步骤1：N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000323
将40mg制备实施例8中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸(0.126mmol)、41mg制备实施例4中获得的5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.253mmol)和64mg BOP-Cl(0.253mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加35μl TEA(0.253mmol)并在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷＝5％，v/v)纯化，以得到19.8mg固体标题产物(0.043mmol)，产率34％。
Rf＝0.18(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.07(brs,1H),12.87(brs,1H),8.24(s,1H),7.89(d,J＝7.8Hz,2H),7.39-7.44(m,2H),7.27-7.31(m,1H),4.76(q,J＝7.0Hz,1H),3.20(q,J＝7.3Hz,2H),1.64(d,J＝7.0Hz,3H),1.31(t,J＝7.3Hz,3H)
<实施例12>N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000331
步骤1：N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000332
将40mg制备实施例8中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸(0.126mmol)、41mg 5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.253mmol)和64mg BOP-Cl(0.253mmol)溶解于2ml DMF中。之后，添加35μl TEA(0.253mmol)，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷＝3％，v/v)纯化，以得到13.1mg固体标题产物(0.027mmol)，产率22％。
Rf＝0.43(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.23(s,1H),7.91(d,J＝6.8Hz,2H),7.41-7.49(m,2H),7.27-7.34(m,1H),4.71(q,J＝7.2Hz,1H),1.64(d,J＝7.2Hz,3H)
<实施例13>N-(5-(甲基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000341
步骤1：N-(5-(甲基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000342
将50mg制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.165mmol)、97mg 5-(甲基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.660mmol)和84mg 2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘(0.330mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加58μl DIPEA(0.330mmol)并在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到56.3mg固体标题化合物(0.130mmol)，产率79％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.02(brs,1H),12.89(brs,1H),8.24(s,1H),7.84(d,J＝7.7Hz,2H),7.21-7.37(m,3H),4.32(s,2H),2.69(s,3H)
<制备实施例9>5-(异丙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000343
步骤1：5-(异丙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000351
将500mg 5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-硫醇(3.754mmol)和316mg氢氧化钾(5.631mmol)溶解于5ml异丙醇和3ml水中，并且缓慢添加375μl 2-碘丙烷(3.754mmol)并在室温下搅拌4小时并在60℃下搅拌1小时。在反应完成之后，将其添加至70ml冰水中，并在0℃下静置30分钟。将所得固体过滤并用水洗涤，以得到391mg固体标题化合物(2.231mmol)，产率59％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.34(brs,2H),3.50(sep,J＝6.6Hz,1H),1.29(d,J＝6.6Hz,6H)
<实施例14>N-(5-(异丙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000352
步骤1：N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000353
将50mg制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.165mmol)、116mg制备实施例9中获得的5-(异丙基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.660mmol)和84mg 2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘(0.330mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加58μl DIPEA(0.330mmol)，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到40.9mg固体标题化合物(0.089mmol)，产率54％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.07(brs,1H),12.99(brs,1H),8.23(s,1H),7.83(d,J＝7.4Hz,2H),7.18-7.33(m,3H),4.32(s,2H),3.66-3.78(m,1H),1.31(d,J＝6.6Hz,6H)
<制备实施例10>5-(苯基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000361
步骤1：5-(苯基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000362
将500mg 5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-硫醇(3.754mmol)和316mg氢氧化钾(5.631mmol)溶解于5ml异丙醇和3ml水中，缓慢添加440μl 1-碘丙烷(4.505mmol)并在室温下搅拌4小时且在60℃下搅拌1小时。在反应完成之后，将其添加至70ml冰水中，并在0℃下静置30分钟。将所得固体过滤并用水洗涤，以得到530mg固体标题化合物(3.024mmol)，产率81％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.34(brs,2H),3.50(sep,J＝6.6Hz,1H),1.29(d,J＝6.6Hz,6H)
<实施例15>N-(5-(异丙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000363
步骤1：N-(5-(异丙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000364
将50mg制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.165mmol)、116mg制备实施例10中获得的5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.660mmol)和84mg 2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘(0.330mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加58μl DIPEA(0.330mmol)并在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到40.9mg固体标题化合物(0.089mmol)，产率54％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.07(brs,1H),12.99(brs,1H),8.23(s,1H),7.83(d,J＝7.4Hz,2H),7.18-7.33(m,3H),4.32(s,2H),3.66-3.78(m,1H),1.31(d,J＝6.6Hz,6H)
<制备实施例11>2-((1-(4-氟苯基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000371
步骤1：2-((1-(4-氟苯基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯的制备
Figure BDA0003097861360000372
将100mg 6-氯-1-(4-氟苯基)-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]吡啶-4-酮(0.378mmol)、153mg碳酸钾(2.232mmol)和87μl硫代乙醇酸乙酯(0.794mmol)溶解于3mlDMF中，接着在90℃下搅拌3小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，接着用水、1N盐酸和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(甲醇/二氯甲烷＝3％，v/v)纯化，以得到106mg固体标题产物(0.304mmol)，产率81％。
Rf＝0.68(正己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.86(brs,1H),8.25(s,1H),7.99-8.04(m,2H),7.34-7.40(m,2H),4.12(s,2H),4.00(q,J＝6.9Hz,2H),1.05(t,J＝6.9Hz,3H)
步骤2：2-((1-(4-氟苯基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000381
将101mg步骤1中获得的2-((1-(4-氟苯基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯(0.290mmol)溶解于3ml四氢呋喃中，并且添加2N氢氧化钠，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，将其用1N盐酸中和，用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水和饱和盐水洗涤。减压浓缩产物，以得到63mg固体标题化合物(0.197mmol)，产率68％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.98(brs,1H),12.84(brs,1H),8.25(s,1H),8.01-8.09(m,2H),7.30-7.39(m,2H),4.02(s,2H)
<实施例16>N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-(4-氟苯基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000382
步骤1：N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-(4-氟苯基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000383
将30mg制备实施例11中获得的2-((1-(4-氟苯基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.094mmol)、61mg制备实施例3中获得的5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.376mmol)和48mg CMPI(0.187mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加33μlDIPEA(0.187mmol)并在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到9.4mg固体标题化合物(0.020mmol)，产率22％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.82-13.04(m,2H),8.23(s,1H),7.65(dd,J＝13.6,8.8Hz,2H),7.13(dd,J＝8.8,8.8Hz,2H),4.30(s,2H),3.19(q,J＝7.1Hz,2H),1.30(t,J＝7.1Hz,3H)
<实施例17>N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-(4-氟苯基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000391
步骤1：N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-(4-氟苯基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000392
将30mg制备实施例11中获得的2-((1-(4-氟苯基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.094mmol)、68mg 5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.376mmol)和48mg CMPI(0.187mmol)溶解于2ml DMF中。然后，添加33μl DIPEA(0.187mmol)，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到9.4mg固体标题化合物(0.020mmol)，产率22％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.25(brs,1H),12.91(brs,1H),8.23(s,1H),7.64(dd,J＝13.8,8.8Hz,2H),7.15(dd,J＝8.8,8.5Hz,2H),4.33(s,2H)
<实施例18>N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-N-甲基-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000401
步骤1：N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-N-甲基-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000402
将35mg制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.114mmol)、60mg 5-(甲基硫代)-N-甲基-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.342mmol)和58mg 2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘(0.228mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加40μlDIPEA(0.228mmol)，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到31.3mg固体标题化合物(0.068mmol)，产率60％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.92(brs,1H),8.24(s,1H),7.73-7.80(m,2H),7.22-7.29(m,3H),4.68(s,2H),3.81(s,3H),3.19(q,J＝7.1Hz,2H),1.30(t,J＝7.1Hz,3H)
<实施例19>2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000403
步骤1：2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000411
将40mg制备实施例2中获得的2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.116mmol)、56mg制备实施例4中获得的5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.348mmol)和88mg HATU(0.232mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加41μl DIPEA(0.232mmol)，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到21mg固体标题化合物(0.043mmol)，产率22％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.09(brs,1H),12.62(brs,1H),7.96(s,1H),4.46-4.55(m,1H),4.24(s,2H),3.21(q,J＝7.1Hz,2H),1.66-2.01(m,8H),1.32(t,J＝7.1Hz,3H)
<制备实施例12>5-(对甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000412
步骤1：5-(对甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000413
将对甲苯酸(500mg，3.67mmol)溶解于过量磷酰氯中，并且添加硫代氨基脲(1.004g，11.02mmol)。在75℃下反应2小时之后，将混合物冷却。添加水之后，使其沸腾4小时并且冷却。用50％氢氧化钾水溶液重结晶并过滤之后，获得677mg(3.52mmol)，产率96％。
Rf＝0.45(EA:HEX＝1:10)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.83(br s,2H),7.80(d,J＝8.0Hz,2H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),2.66(s,3H)
<实施例20>2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-(对甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000421
步骤1：2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-)硫代)-N-(5-(对甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000422
将制备实施例8中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸(40mg，0.165mmol)溶解于二甲基甲酰胺中，并且添加制备实施例12中获得的5-(对甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(101mg，0.661mmol)，HATU(50mg，0.33mmol)，HOAT(36mg，0.33mmol)和DIPEA(47μl，0.33mmol)。在室温下反应多于12小时之后，添加冷水时形成白色固体。将固体过滤，然后进行柱色谱法(MeOH/MC 5％)，以得到10mg(0.021mmol)，产率16％。
Rf＝0.20(EA:HEX＝2:1)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.03(br s,1H),12.92(br s,1H),8.23(s,1H),7.91(d,J＝7.7Hz,2H),7.79(d,J＝7.7Hz,2H),7.40-7.45(m,2H),7.28-7.34(m,3H),4.79(q,J＝7.4Hz,1H),2.35(s,1H),1.65(d,J＝7.4Hz,3H)
<实施例21>2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000423
步骤1：2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000431
将40mg实施例2中获得的2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.116mmol)、65mg 5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.348mmol)和41mg CDMT(0.232mmol)溶解于2ml DMF中，添加26μl NMM(0.232mmol)，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷5％)纯化，以得到14mg固体标题产物(0.028mmol)，产率24％。
Rf＝0.47(甲醇/二氯甲烷＝10％，v/v)
1H NMR(500MHz,MeOD-d4)δ7.94(s,1H),4.57-4.62(m,1H),4.24(s,2H),1.74-2.19(m,8H)
<实施例22>N-(5-(叔丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000432
步骤1：N-(5-(叔丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000433
将40mg制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.132mmol)、62mg 5-叔丁基-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.397mmol)和67mg 2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘(0.264mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加46μl DIPEA(0.264mmol)，并在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到23.5mg固体标题化合物(0.053mmol)，产率40％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.77-12.92(m,2H).8.23(s,1H),7.84(d,J＝7.4Hz,2H),7.17-7.31(m,3H),4.29(s,2H),1.37(s,9H)
<制备实施例13>5-(4-氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000441
步骤1：5-(4-氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000442
在将4-氟苯甲酸(300mg，2.14mmol)溶解于过量磷酰氯中之后，添加硫代氨基脲(195mg，2.14mmol)。在75℃下反应2小时之后，将混合物冷却。并且在添加水之后，将混合物沸腾4小时并冷却。用50％氢氧化钾水溶液重结晶并过滤之后，获得233mg(1.20mmol)，产率56％。
Rf＝0.32(EA:HEX＝3:1)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.09(br s,1H),12.91(br s,1H),8.23(s,1H),7.95-7.99(m,2H),7.85(d,J＝7.7Hz,2H),7.28-7.38(m,4H),7.19-7.24(m,1H),4.35(s,2H)
<实施例23>N-(5-(4-氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000443
步骤1：N-(5-(4-氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000451
将制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(40mg，0.138mmol)溶解于二甲基甲酰胺中，并且添加制备实施例13中获得的5-(4-氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(107mg，0.55mmol)，HATU(105mg，0.276mmol)，HOAT(37mg，0.276mmol)和DIPEA(48μl，0.276mmol)。在室温下反应多于12小时之后，添加冷水时形成白色固体。将固体过滤并通过柱色谱法(EA:HEX＝3:1->MeOH/MC＝5％)纯化，以得到40mg(0.084mmol)，产率61％。
Rf＝0.32(EA:HEX＝3:1)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.09(br s,1H),12.91(br s,1H),8.23(s,1H),7.95-7.99(m,2H),7.85(d,J＝7.7Hz,2H),7.28-7.38(m,4H),7.19-7.24(m,1H),4.35(s,2H)
<实施例24>2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-(对甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000452
步骤1：2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-(对甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000461
将制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(40mg，0.138mmol)溶解于二甲基甲酰胺中，并且添加制备实施例12中获得的5-(对甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(64mg，0.552mmol)，HATU(105mg，0.276mmol)，HOAT(37mg，0.276mmol)和DIPEA(48μl，0.276mmol)。在室温下反应多于12小时之后，添加冷水时形成白色固体。过滤固体，得到39mg(0.081mmol)，产率59％。
Rf＝0.35(EA:HEX＝3:1)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.05(br s,1H),12.89(br s,1H),8.23(s,1H),7.85(d,J＝7.9Hz,2H),7.80(d,J＝7.9Hz,2H),7.28-7.33(m,4H),7.19-7.24(m,1H),4.35(s,2H),2.35(s,3H)
<制备实施例14>5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000462
步骤1：5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-胺的制备
Figure BDA0003097861360000463
在将苯甲酸(500mg，4.09mmol)溶解于过量磷酰氯之后，添加硫代氨基脲(373mg，4.09mmol)。在75℃下反应2小时之后，将混合物冷却。并且在添加水之后，将混合物沸腾4小时并冷却。用50％氢氧化钾水溶液重结晶并过滤之后，获得300mg(1.68mmol)，产率41％。
Rf＝0.45(EA:HEX＝1:10)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.73(dd,J＝1.9,8.2Hz,2H),7.40-7.46(m,5H)
<实施例25>N-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000471
步骤1：N-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000472
将制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(40mg，0.138mmol)溶解于二甲基甲酰胺中，并且添加制备实施例14中获得的5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-胺(42mg，0.413mmol)，HATU(105mg，0.276mmol)，HOAT(37mg，0.276mmol)和DIPEA(48μl，0.276mmol)。在室温下反应多于12小时之后，添加冷水时形成白色固体。过滤固体，得到48mg(0.102mmol)，产率74％。
Rf＝0.22(EA:HEX＝3:1)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.99(br s,1H),8.22(s,1H),7.84-7.91(m,4H),7.50-7.52(m,3H),7.28-7.31(m,2H),7.19-7.22(m,1H),4.34(s,2H)
<制备实施例15>2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-2-苯基乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000473
步骤1：2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-2-苯基乙酸乙酯的制备
Figure BDA0003097861360000481
将184mg制备实施例3步骤2中获得的6-氯-1-苯基-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]吡啶-4-酮(0.744mmol)、302mg碳酸钾(2.232mmol)和219mg 2-巯基-2-苯基乙酸乙酯(1.116mmol)溶解于5ml DMF中并且在90℃下搅拌16小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水、1N盐酸和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(正己烷:乙酸乙酯＝2:1->1:1->甲醇/二氯甲烷＝5％，v/v)纯化，以得到80mg固体标题产物(0.197mmol)，产率26％。
Rf＝0.54(正己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ10.22(brs,1H),8.20(s,1H),8.00(d,J＝7.8Hz,2H),7.52-7.57(m,2H),7.45-7.50(m,2H),7.36-7.43(m,4H),5.65(s,1H),4.14-4.21(m,1H),3.99-4.07(m,1H),1.11(t,J＝7.1Hz,3H)
步骤2：2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-2-苯基乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000482
将73mg步骤1中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-2-苯基乙酸乙酯(0.180mmol)溶解于3ml四氢呋喃，并且添加2N氢氧化钠，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，将其用1N盐酸中和，用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水和饱和盐水洗涤。减压浓缩产物，以得到71mg固体标题化合物(0.180mmol)，产率99％。
1H NMR(300MHz,MeOD-d4)δ8.16(s,1H),8.03(d,J＝7.7Hz,2H),7.48-7.59(m,4H),7.35-7.44(m,4H),5.63(s,1H)
<实施例26>N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-2-苯基乙酰胺
Figure BDA0003097861360000491
步骤1：N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-2-苯基乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000492
将28mg制备实施例15中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-2-苯基乙酸(0.074mmol)、36mg制备实施例4中获得的5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.368mmol)和38mg BOP-Cl(0.148mmol)溶解于2ml DMF中，然后添加26μl DIPEA(0.148mmol)，接着在室温下搅拌64小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝3:1->1:1，v/v)纯化，以得到5mg固体标题产物(0.0096mmol)，产率13％。
Rf＝0.45(Hex:EA＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,MeOD-d4)δ8.15(s,1H),7.71(d,J＝7.9Hz,2H),7.47-7.53(m,2H),7.30-7.43(m,5H),7.19-7.26(m,1H),5.79(s,1H),3.20(q,J＝7.5Hz,2H),1.39(t,J＝7.5Hz,3H)
<制备实施例16>(四氢-2H-吡喃-4-基)肼氯化氢的制备
Figure BDA0003097861360000493
步骤1：2-(四氢-4H-4-基亚基)肼-1-羧酸叔丁酯的制备
Figure BDA0003097861360000501
将3g四氢-4H-吡喃4-酮(29.96mmol)溶解于60ml己烷中，并且添加3.96g叔丁基卡巴酯(29.96mmol)，接着在回流下搅拌3小时。在反应完成之后，减压浓缩产物，以得到6.4g标题化合物(29.96mmol)，产率100％。
Rf＝0.19(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.65(br s,1H),3.69(t,J＝5.7Hz,2H),3.60(t,J＝5.7Hz,2H),2.41(t,J＝5.7Hz,2H),2.27(t,J＝5.7Hz,2H),1.43(s,9H)
步骤2：2-(四氢-2H-吡喃-4-基)肼-1-羧酸叔丁酯的制备
Figure BDA0003097861360000502
将6.4g步骤1中获得的2-(四氢-4H-4-基亚基)肼-1-羧酸叔丁酯(29.96mmol)溶解于50ml THF中，并且添加12.7g三乙酰氧基硼氢化钠(59.92mmol)并在室温下搅拌15小时。在反应完成之后，将产物用500ml乙酸乙酯萃取，用500ml无机盐溶液洗涤，经由无水硫酸钠(Na2SO4)干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:2，v/v)纯化，以得到6g标题化合物(27.74mmol)，产率92％。
Rf＝0.38(己烷:乙酸乙酯＝1:2，v/v)
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.24(br s,1H),3.95-3.99(m,2H),3.38-3.43(m,2H),3.05-3.11(m,1H),1.75-1.81(m,2H),1.40-1.52(m,11H)
步骤3：(四氢-2H-吡喃-4-基)肼氯化氢的制备
Figure BDA0003097861360000503
将6g步骤2中获得的2-(四氢-2H-吡喃-4-基)肼-1-羧酸叔丁酯(27.74mmol)溶解于50ml甲醇中，并且添加盐酸并在50℃下搅拌3小时。在反应完成之后，减压浓缩产物，以得到4g标题化合物(26.21mmol)，产率94％。
Rf＝0.00(己烷:乙酸乙酯＝3:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.25(br s,1H),3.83-3.92(m,2H),3.23-3.31(m,2H),3.08-3.18(m,1H),1.84-1.95(m,2H),1.41-1.54(m,2H)
<制备实施例17>2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000511
步骤1：4,6-二氯-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶的制备
Figure BDA0003097861360000512
将5.55g制备实施例16中获得的2,4,6-三氯嘧啶-5-甲醛(26.21mmol)溶解于50ml乙醇中，并且在-78℃下添加4g上文步骤3中获得的(四氢-2H-吡喃-4-基)肼氯化氢(26.21mmol)和14ml N,N-二异丙基乙胺(78.63mmol)并搅拌3小时。在反应完成之后，将产物用100ml乙酸乙酯萃取，用100ml无机盐溶液洗涤，经由无水硫酸钠(Na2SO4)干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝5:1，v/v)纯化，以得到6.5g标题化合物(23.80mmol)，产率91％。
Rf＝0.20(己烷:乙酸乙酯＝9:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),4.96-5.03(m,1H),3.98-4.02(m,2H),3.56-3.61(m,2H),2.10-2.19(m,2H),1.90-1.95(m,2H)
步骤2：6-氯-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-酮的制备
Figure BDA0003097861360000513
将6.5g上文步骤1中制备的4,6-二氯-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(23.80mmol)溶解于50ml THF中，并且添加25ml 2N氢氧化钠(23.80mmol)，接着在回流下搅拌15小时。在反应完成之后，用6N盐酸酸化混合物，并且对沉淀的固体化合物进行过滤，以得到5.4g标题化合物(21.20mmol)，产率89％。
Rf＝0.20(二氯甲烷:甲醇＝20:1，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.21(br s,1H),8.11(s,1H),4.75-4.81(m,1H),3.95-3.99(m,2H),3.51-3.56(m,2H),2.05-2.12(m,2H),1.81-1.86(m,2H)
步骤3：2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯的制备
Figure BDA0003097861360000521
将300mg上文步骤2中获得的6-氯-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]吡啶-4-酮(1.178mmol)、478mg碳酸钾(3.117mmol)和270μl硫代乙醇酸乙酯(2.474mmol)溶解于5ml DMF中，接着在90℃下搅拌16小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水、1N盐酸和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(甲醇/二氯甲烷3％，v/v)纯化，以得到374mg固体标题产物(1.105mmol)，产率94％。
Rf＝0.27(正己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ10.71(brs,1H),8.04(s,1H),4.68-4.81(m,1H),4.25(q,J＝7.1Hz,2H),4.11-4.20(m,2H),4.00(s,2H),3.54-3.65(m,2H),2.29-2.45(m,2H),1.87-1.96(m,2H),1.31(t,J＝7.1Hz,3H)
步骤4：2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000531
将360mg上文步骤3中制备的2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯(1.064mmol)溶解于5ml四氢呋喃中，并且添加2N氢氧化钠，并且室温下搅拌16小时。在反应完成之后，将其用1N盐酸中和，用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水和饱和盐水洗涤。在减压浓缩之后，获得277mg固体标题化合物(0.893mmol)，产率84％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.86(brs,1H),12.54(brs,1H),7.98(s,1H),4.65-4.78(m,1H),3.94-4.03(m,4H),3.41-3.52(m,2H),1.99-2.15(m,2H),1.79-1.88(m,2H)
<实施例27>N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000532
步骤1：N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000533
将40mg制备实施例17中获得的2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.129mmol)、62mg制备实施例4中获得的5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.387mmol)和66mg CMPI(0.258mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加45μl DIPEA(0.258mmol)，接着在室温下搅拌72小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷3％，v/v)纯化，以得到19.5mg固体标题产物(0.043mmol)，产率33％。
Rf＝0.23(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.96(s,1H),4.48-4.56(m,1H),4.23(s,2H),3.74-3.80(m,2H),3.15-3.24(m,4H),1.89-1.99(m,2H),1.50-1.57(m,2H),1.31(t,J＝7.3Hz,3H)
<制备实施例18>2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸的制备
Figure BDA0003097861360000541
步骤1：2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸乙酯的制备
Figure BDA0003097861360000542
将300mg制备实施例2步骤2中获得的6-氯-1-(4,4-二氟环己基)-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]吡啶-4-酮(1.039mmol)、431mg碳酸钾(3.117mmol)和282μl 2-巯基丙酸乙酯(2.182mmol)溶解于5ml DMF中并且在90℃下搅拌3小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水、1N盐酸和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝2:1，v/v)纯化，以得到201mg固体标题产物(0.520mmol)，产率50％。
Rf＝0.65(正己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ10.74(brs,1H),8.03(s,1H),4.61-4.74(m,1H),4.49(q,J＝7.2Hz,1H),4.09-4.31(m,2H),2.24-2.48(m,4H),1.88-2.13(m,4H),1.70(d,J＝7.2Hz,3H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H)
步骤2：2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸的制备
Figure BDA0003097861360000551
将200mg步骤1中获得的2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸乙酯(0.518mmol)溶解于3ml四氢呋喃中，并且添加2N氢氧化钠，并在室温下搅拌1小时30分钟。在反应完成之后，将其用1N盐酸中和，用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水和饱和盐水洗涤。减压浓缩产物，以得到166mg固体标题化合物(0.463mmol)，产率89％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.97(s,1H),4.65-4.77(m,1H),4.42(q,J＝7.2Hz,1H),1.93-2.23(m,8H),1.56(d,J＝7.2Hz,3H)
<实施例28>2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000552
步骤1：2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000553
将40mg制备实施例18中获得的2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.112mmol)、54mg制备实施例4中获得的5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.336mmol)和39mg CDMT(0.223mmol)溶解于2ml DMF中，添加25μl NMM(0.223mmol)，接着在室温下搅拌48小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1.5:1->1:1.5，v/v)纯化，以得到28.7mg固体标题产物(0.057mmol)，产率51％。
Rf＝0.24(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ12.05-12.70(m,2H),8.02(s,1H),4.61-4.80(m,2H),3.24(q,J＝7.2Hz,2H),2.13-2.41(m,4H),1.91-2.02(m,4H),1.78(d,J＝7.5Hz,3H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H)
<制备实施例19>(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)肼氯化氢的制备
Figure BDA0003097861360000561
步骤1：2-(四氢-4H-硫代吡喃-4-基亚基)肼-1-羧酸叔丁酯的制备
Figure BDA0003097861360000562
将3.3g四氢-4H-硫代吡喃-4-酮(28.40mmol)溶解于60ml己烷中，并且添加4.13g叔丁基卡巴酯(31.24mmol)，接着在回流下搅拌3小时。在反应完成之后，减压浓缩产物，以得到6.5g标题化合物(28.40mmol)，产率100％。
Rf＝0.15(己烷:乙酸乙酯＝3:1，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.67(br s,1H),2.73-2.76(m,2H),2.65-2.68(m,2H),2.60-2.63(m,2H),2.47-2.50(m,2H),1.43(s,9H)
步骤2：2-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)肼-1-羧酸叔丁酯的制备
Figure BDA0003097861360000563
将6.4g上文步骤1中获得的2-(四氢-4H-硫代吡喃-4-基亚基)肼-1-羧酸叔丁酯(28.40mmol)溶解于80ml THF中，并且添加12g三乙酰氧基硼氢化钠(56.80mmol)并在室温下搅拌15小时。在反应完成之后，将产物用300ml乙酸乙酯萃取，用300ml无机盐溶液洗涤，经由无水硫酸钠(Na2SO4)干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝2:1，v/v)纯化，以得到6.5g标题化合物(27.97mmol)，产率98％。
Rf＝0.34(己烷:乙酸乙酯＝2:1，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.20(br s,1H),4.28(br s,1H),2.65-2.73(m,3H),2.05-2.49(m,2H),1.93-1.98(m,2H),1.34-1.43(m,1H)
步骤3：(四氢-2H-吡喃-4-基)肼氯化氢的制备
Figure BDA0003097861360000571
将6.5g步骤2中获得的2-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)肼-1-羧酸叔丁酯(27.97mmol)溶解于60ml甲醇中，并且向其中添加盐酸并在50℃搅拌3小时。在反应完成之后，减压浓缩反应溶液，以得到4.7g标题化合物(27.97mmol)，产率94％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ2.91-2.96(m,1H),2.66-2.72(m,2H),2.57-2.62(m,2H),2.25-2.29(m,2H),1.53-1.60(m,2H)
<制备实施例20>2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000572
步骤1：4,6-二氯-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶的制备
Figure BDA0003097861360000573
将5.9g制备实施例19中获得的2,4,6-三氯嘧啶-5-甲醛(27.97mmol)溶解于60ml乙醇中，并且在-78℃下添加4.7g上文步骤3中获得的(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)肼氯化氢(27.97mmol)和15ml N,N-二异丙基乙胺(83.91mmol)并搅拌3小时。在反应完成之后，将产物用200ml乙酸乙酯萃取，用200ml无机盐溶液洗涤，经由无水硫酸钠(Na2SO4)干燥，并且减压浓缩反应溶液。将残余物通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝5:1，v/v)纯化，以得到7g标题化合物(24.20mmol)，产率86％。
Rf＝0.41(己烷:乙酸乙酯＝10:1，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),4.78-4.85(m,1H),2.93-2.98(m,2H),2.73-2.78(m,2H),2.15-2.25(m,4H)
步骤2：6-氯-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-酮的制备
Figure BDA0003097861360000581
将7g上文步骤1中制备的4,6-二氯-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(24.20mmol)溶解于50ml THF中，并且添加25ml 2N氢氧化钠(47.60mmol)，并在回流下搅拌15小时。在反应完成之后，用6N盐酸酸化混合物，并且对沉淀的固体化合物进行过滤，以得到5.7g标题化合物(21.05mmol)，产率87％。
Rf＝0.31(二氯甲烷:甲醇＝20:1，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.20(br s,1H),8.11(s,1H),4.56-4.63(m,1H),2.88-2.94(m,2H),2.72-2.76(m,2H),2.10-2.20(m,4H)
步骤3：2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯的制备
Figure BDA0003097861360000591
将200mg上文步骤2中获得的6-氯-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]吡啶-4-酮(0.739mmol)、300mg碳酸钾(2.216mmol)和170μl硫代乙醇酸乙酯(1.552mmol)溶解于4ml DMF中，接着在90℃下搅拌3小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，接着用水、1N盐酸和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)纯化，以得到196mg固体标题产物(0.553mmol)，产率75％。
Rf＝0.47(正己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ10.08(brs,1H),8.02(s,1H),4.48-4.56(m,1H),4.26(q,J＝7.1Hz,2H),4.00(s,2H),2.79-2.93(m,4H),2.36-2.46(m,2H),2.21-2.28(m,2H),1.32(t,J＝7.1Hz,3H)
步骤4：2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000592
将185mg上文步骤3中制备的2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯(0.522mmol)溶解于5ml四氢呋喃中，并且添加2N氢氧化钠，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，将其用1N盐酸中和，用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水和饱和盐水洗涤。减压浓缩产物，以得到173mg固体标题化合物(0.530mmol)，产率99％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.97(s,1H),4.45-4.58(m,1H),3.98(s,2H),2.69-2.88(m,4H),2.07-2.21(m,4H)
<实施例29>N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000601
步骤1：N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000602
将40mg制备实施例20中获得的2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.123mmol)、63mg 5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.369mmol)和63mg CMPI(0.245mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加43μl DIPEA(0.245mmol)，接着在室温下搅拌72小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到31.1mg固体标题化合物(0.066mmol)，产率54％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.07(brs,1H),12.59(brs,1H),7.95(s,1H),4.28-4.40(m,1H),4.24(s,2H),3.21(q,J＝7.3Hz,2H),2.51-2.58(m,4H),1.82-2.07(m,4H),1.32(t,J＝7.3Hz,3H)
<实施例30>N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000603
步骤1：N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000611
将40mg制备实施例3中获得的2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.132mmol)、54mg 5-氯-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.397mmol)和58mg2-氯-1,3-二甲基咪唑鎓四氟硼酸盐(0.265mmol)溶解于2ml DMF，并且添加46μl DIPEA(0.264mmol)，接着在50℃下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到29mg固体标题化合物(0.069mmol)，产率52％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.91-13.20(m,2H),8.23(s,1H),7.84(d,J＝7.7Hz,2H),7.30-7.37(m,2H),7.21-7.28(m,1H),4.33(s,2H)
<实施例31>2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000612
步骤1：2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000613
将56mg制备实施例18中获得的2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.156mmol)、84mg 5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.468mmol)和80mg CDMT(0.313mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加34μl NMM(0.313mmol)，接着在50℃下搅拌16小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)纯化，以得到36mg固体标题产物(0.069mmol)，产率44％。
Rf＝0.29(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.39(brs,1H),12.63(brs,1H),7.97(s,1H),4.69(q,J＝7.2Hz,1H),4.48-4.60(m,1H),1.65-2.28(m,8H),1.59(d,J＝7.2Hz,3H)
<实施例32>N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000621
步骤1：N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000622
将50mg制备实施例20中获得的2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.153mmol)、41mg 5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.229mmol)和78mg CMPI(0.306mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加53μl DIPEA(0.306mmol)，并在50℃下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到17.9mg固体标题化合物(0.037mmol)，产率24％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.37(brs,1H),12.61(brs,1H),7.96(s,1H),4.31-3.49(m,1H),4.27(s,2H),2.51-2.60(m,4H),1.84-2.05(m,4H)
<实施例33>N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000631
步骤1：N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000632
将45mg制备实施例17中获得的2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.145mmol)、78mg 5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.435mmol)和74mg CMPI(0.290mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加51μl DIPEA(0.290mmol)，接着在50℃下搅拌16小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷3％，v/v)纯化，以得到16.1mg固体标题产物(0.034mmol)，产率24％。
Rf＝0.11(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.39(brs,1H),12.64(brs,1H),7.96(s,1H),4.45-4.59(m,1H),4.26(s,2H),3.73-3.84(m,2H),3.13-3.25(m,2H),1.86-2.04(m,2H)
<制备实施例21>2-((1-环己基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000633
步骤1：4,6-二氯-1-环己基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶的制备
Figure BDA0003097861360000641
将4.39g 2,4,6-三氯嘧啶-5-甲醛(20.71mmol)溶解于50ml乙醇中，并且在-78℃下添加3.12g环己基肼氯化氢(20.71mmol)和11ml N,N-二异丙基乙胺(62.13mmol)并搅拌3小时。在反应完成之后，将产物用200ml乙酸乙酯萃取，用200ml无机盐溶液洗涤，经由无水硫酸钠(Na2SO4)干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝10:1，v/v)纯化，以得到5.2g标题化合物(19.18mmol)，产率92％。
Rf＝0.39(己烷:乙酸乙酯＝10:1，v/v)
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.15(s,1H),4.75-4.82(m,1H),2.01-2.08(m,2H),1.93-1.99(m,2H),1.77-1.81(m,1H),1.48-1.57(m,2H),1.30-1.39(m,1H),1.01-1.04(m,2H)
步骤2：6-氯-1-环己基-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-酮的制备
Figure BDA0003097861360000642
将5g上文步骤1中制备的4,6-二氯-1-环己基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(18.44mmol)溶解于12ml THF中，并且添加19ml 2N氢氧化钠(36.88mmol)并在回流下搅拌15小时。在反应完成之后，用6N盐酸酸化混合物，并且对沉淀的固体化合物进行过滤，以得到4.6g标题化合物(18.20mmol)，产率98％。
Rf＝0.35(二氯甲烷:甲醇＝20:1，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.18(br s,1H0,8.07(s,1H),4.46-4.52(m,1H),1.80-1.87(m,4H),1.66-1.69(m,1H),1.40-1.48(m,2H),1.18-1.25(m,1H)
步骤3：2-((1-环己基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯的制备
Figure BDA0003097861360000651
将400mg上文步骤2中获得的6-氯-1-环己基-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]吡啶-4-酮(1.583mmol)、642mg碳酸钾(4.749mmol)和363μl硫代乙醇酸乙酯(3.324mmol)溶解于5ml DMF中并在90℃下搅拌3小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，接着用水、1N盐酸和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)纯化，以得到376mg固体标题产物(1.118mmol)，产率71％。
Rf＝0.52(正己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ10.58(brs,1H),8.00(s,1H),4.45-4.57(m,1H),4.25(q,J＝7.1Hz,2H),3.99(s,2H),1.89-2.04(m,6H),1.69-1.80(m,2H),1.35-1.53(m,2H),1.31(t,J＝7.1Hz,3H)
步骤4：2-((1-环己基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000652
将370mg上文步骤3中制备的2-((1-环己基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯(1.118mmol)溶解于5ml四氢呋喃中，并且添加2N氢氧化钠，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，将其用1N盐酸中和，用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水和饱和盐水洗涤。减压浓缩产物，以得到354mg固体标题化合物(1.118mmol)，产率99％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.85(brs,1H),12.53(brs,1H),7.92(s,1H),4.38-4.52(m,1H),3.97(s,2H),1.61-1.92(m,7H),1.18-1.50(m,3H)
<实施例34>N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-环己基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000661
步骤1：N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-环己基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000662
将40mg制备实施例21中获得的2-((1-环己基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.130mmol)、63mg 5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.390mmol)和66mg CMPI(0.260mmol)溶解于2ml DMF中，然后添加45μl DIPEA(0.260mmol)，接着在50℃下搅拌18小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，接着用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->1:2，v/v)纯化，以得到13.4mg固体标题产物(0.030mmol)，产率23％。
Rf＝0.18(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.91(s,1H),4.24-4.31(m,1H),4.23(s,2H),3.20(q,J＝7.3Hz,2H),1.47-1.77(m,7H),1.31(t,J＝7.3Hz,3H),1.03-1.17(m,3H)
<实施例35>N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-环己基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000663
步骤1：N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-环己基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000671
将40mg制备实施例21中获得的2-((1-环己基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.130mmol)、66mg 5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.390mmol)和66mgCMPI(0.260mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加45μl DIPEA(0.260mmol)，接着在50℃下搅拌18小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到9.7mg固体标题化合物(0.021mmol)，产率16％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.36(brs,1H),12.58(brs,1H),7.92(s,1H),4.17-4.30(m,3H),1.48-1.90(m,7H),1.01-1.26(m,3H)
<实施例36>N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000672
步骤1：N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000673
将40mg制备实施例17中获得的2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.129mmol)、66mg 5-氯-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.258mmol)和66mg CMPI(0.258mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加45μl DIPEA(0.258mmol)，接着在50℃下搅拌16小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷3％，v/v)纯化，以得到21.9mg固体标题产物(0.051mmol)，产率40％。
Rf＝0.09(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.39(brs,1H),12.64(brs,1H),7.99(s,1H),4.47-4.60(m,1H),4.26(s,2H),3.75-3.85(m,2H),3.14-3.25(m,2H),1.86-2.03(m,2H),1.50-1.60(m,2H),1.86-2.04(m,2H)
<制备实施例22>2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000681
步骤1：4,6-二氯-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶的制备
Figure BDA0003097861360000682
将2.22g 2,4,6-三氯嘧啶-5-甲醛(10.49mmol)溶解于30ml乙醇中，并且在-78℃下添加1.16g异丙基肼氯化氢(10.49mmol)和5.5ml N,N-二异丙基乙胺(31.47mmol)并搅拌3小时。在反应完成之后，将产物用200ml乙酸乙酯萃取，用200ml无机盐溶液洗涤，经由无水硫酸钠(Na2SO4)干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝10:1，v/v)纯化，以得到2.1g标题化合物(9.08mmol)，产率87％。
Rf＝0.48(己烷:乙酸乙酯＝10:1，v/v)
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.16(s,1H),5.16-5.22(m,1H),1.60(d,J＝6.7Hz,6H)
步骤2：6-氯-1-异丙基-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-酮的制备
Figure BDA0003097861360000683
将2g步骤1中制备的4,6-二氯-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(8.65mmol)溶解于12ml THF中，并且添加8.6ml 2N氢氧化钠(17.13mmol)并在回流下搅拌15小时。在反应完成之后，用6N盐酸酸化混合物，并且对沉淀的固体化合物进行过滤，以得到1.7g标题化合物(7.99mmol)，产率92％。
Rf＝0.29(二氯甲烷:甲醇＝20:1，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.16(br s,1H),8.08(s,1H),4.85-4.91(m,1H),1.44(d,J＝7.0Hz,6H)
步骤3：2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯的制备
Figure BDA0003097861360000691
将300mg步骤2中获得的6-氯-1-异丙基-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]吡啶-4-酮(1.411mmol)、572mg碳酸钾(4.233mmol)和324μl硫代乙醇酸乙酯(2.963mmol)溶解于5mlDMF中并在90℃下搅拌3小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，接着用水、1N盐酸和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷＝5％，v/v)纯化，以得到287mg固体标题产物(0.968mmol)，产率69％。
Rf＝0.44(正己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ10.78(brs,1H),8.04(s,1H),4.89-5.00(m,1H),4.25(q,J＝7.1Hz,2H),4.00(s,2H),1.54(d,J＝6.9Hz,6H),1.31(t,J＝7.1Hz,3H)
步骤4：2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000692
将287mg上文步骤3中制备的2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯(0.968mmol)溶解于5ml四氢呋喃中，并且添加2N氢氧化钠，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，将其用1N盐酸中和，用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水和饱和盐水洗涤。减压浓缩产物，以得到252mg固体标题化合物(0.939mmol)，产率97％。
1H MMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.90(brs,1H),12.56(brs,1H),7.95(s,1H),4.80-4.90(m,1H),3.90(s,2H),1.42(d,J＝6.6Hz,6H)
<实施例37>N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000701
步骤1：N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000702
将40mg制备实施例22中获得的2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.149mmol)、36mg制备实施例4中获得的5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.224mmol)和76mg CMPI(0.298mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加52μl DIPEA(0.298mmol)，接着在50℃下搅拌18小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，接着用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷＝5％，v/v)纯化，以得到32.3mg固体标题产物(0.078mmol)，产率53％。
Rf＝0.13(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.11(brs,1H),12.61(brs,1H),7.93(s,1H),4.69-4.79(m,1H),4.22(s,2H),3.20(q,J＝7.2Hz,2H),1.30(t,J＝7.2Hz,3H),1.15(d,J＝6.6Hz,6H)
<实施例38>N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000711
步骤1：N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000712
将40mg制备实施例22中获得的2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.149mmol)、40mg 5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.224mmol)和76mgCMPI(0.298mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加52μl DIPEA(0.298mmol)，接着在50℃下搅拌18小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，接着用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷＝5％，v/v)纯化，以得到22.2mg固体标题产物(0.052mmol)，产率53％。
Rf＝0.11(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.41(brs,1H),12.59(brs,1H),7.93(s,1H),4.68-4.79(m,1H),4.25(s,2H),1.15(d,J＝6.6Hz,6H)
<实施例39>N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000713
步骤1：N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000721
将40mg制备实施例20中获得的2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.123mmol)、25mg 5-氯-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.184mmol)和63mg CMPI(0.246mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加43μl DIPEA(0.246mmol)，接着在50℃下搅拌16小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到14.7mg固体标题化合物(0.033mmol)，产率27％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.37(brs,1H),12.65(brs,1H),7.96(s,1H),4.31-4.41(m,1H),4.26(s,2H),2.53-2.62(m,4H),1.85-2.08(m,4H)
<制备实施例23>2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000722
步骤1：4,6-二氯-1-环丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶的制备
Figure BDA0003097861360000723
将1.95g 2,4,6-三氯嘧啶-5-甲醛(9.21mmol)溶解于30ml乙醇中，并且在-78℃下添加1g环丙基肼氯化氢(9.21mmol)和4.8ml N,N-二异丙基乙胺(27.63mmol)并搅拌3小时。在反应完成之后，将产物用200ml乙酸乙酯萃取，用200ml无机盐溶液洗涤，经由无水硫酸钠(Na2SO4)干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝10:1，v/v)纯化，以得到950mg标题化合物(4.15mmol)，产率45％。
Rf＝0.45(己烷:乙酸乙酯＝10:1，v/v)
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.10(s,1H),3.88-3.92(m,1H),1.35-1.38(m,2H),1.21-1.25(m,2H)
步骤2：6-氯-1-环丙基-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-酮的制备
Figure BDA0003097861360000731
将930mg步骤1中获得的4,6-二氯-1-环丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(4.06mmol)溶解于12ml THF中，并且添加4ml 2N氢氧化钠(8.12mmol)并在回流下搅拌15小时。在反应完成之后，用6N盐酸酸化混合物，并且对沉淀的固体化合物进行过滤，以得到680mg标题化合物(3.23mmol)，产率80％。
Rf＝0.28(二氯甲烷:甲醇＝20:1，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.20(br s,1H),8.02(s,1H),3.78-3.82(m,1H),1.05-1.15(m,4H)
步骤3：2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯的制备
Figure BDA0003097861360000732
将300mg步骤2中获得的6-氯-1-环丙基-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]吡啶-4-酮(1.424mmol)、578mg碳酸钾(4.273mmol)和327μl硫代乙醇酸乙酯(2.990mmol)溶解于5mlDMF中并在90℃下搅拌3小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，接着用水、1N盐酸和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷＝5％，v/v)纯化，以得到345mg固体标题产物(1.172mmol)，产率82％。
Rf＝0.28(正己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ10.91(brs,1H),7.97(s,1H),4.26(q,J＝7.1Hz,2H),4.03(s,2H),3.69-3.79(m,1H),1.22-1.35(m,5H),1.05-1.13(m,2H)
步骤4：2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸的制备
Figure BDA0003097861360000741
将336mg上文步骤3中制备的2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯(1.142mmol)溶解于5ml四氢呋喃中，并且添加2N氢氧化钠，接着在室温下搅拌16小时。在反应完成之后，将其用1N盐酸中和，用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，并且用水和饱和盐水洗涤。减压浓缩产物，以得到262mg固体标题化合物(0.991mmol)，产率87％。
1H MMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.89(brs,1H),12.55(brs,1H),7.91(s,1H),4.03(s,2H),3.70-3.80(m,1H),0.98-1.18(m,4H)
<实施例40>N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000742
步骤1：N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000743
将40mg制备实施例23中获得的2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.150mmol)、36mg制备实施例4中获得的5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.224mmol)和76mg CMPI(0.298mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加52μl DIPEA(0.298mmol)，接着在50℃下搅拌18小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到8.5mg固体标题化合物(0.021mmol)，产率14％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.40-13.15(m,2H),7.88(s,1H),4.26(s,2H),3.59-3.70(m,1H),3.21(q,J＝7.1Hz,2H),1.32(t,J＝7.1Hz,3H),0.92-1.00(m,2H)
<实施例41>N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000751
步骤1：N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000752
将40mg制备实施例23中获得的2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.150mmol)、36mg 5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.224mmol)和76mgCMPI(0.298mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加52μl DIPEA(0.298mmol)，接着在50℃下搅拌18小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到27.4mg固体标题化合物(0.064mmol)，产率43％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.36(brs,1H),12.62(brs,1H),7.88(s,1H),4.29(s,2H),3.58-3.67(m,1H),0.93-1.00(m,2H),0.73-0.81(m,2H)
<实施例42>N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-环己基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000753
步骤1：N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-环己基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000761
将40mg制备实施例21中获得的2-((1-环己基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.130mmol)、52mg 5-氯-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.390mmol)和66mgCMPI(0.260mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加45μl DIPEA(0.260mmol)并在50℃下搅拌18小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到19.5mg固体标题化合物(0.046mmol)，产率35％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.37(brs,1H),12.59(brs,1H),7.92(s,1H),4.19-4.32(m,3H),1.49-1.92(m,7H),1.02-1.17(m,3H)
<实施例43>N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000762
步骤1：N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000763
将40mg制备实施例22中获得的2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.149mmol)、34mg 5-氯-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.224mmol)和76mgCMPI(0.298mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加52μl DIPEA(0.298mmol)并在50℃下搅拌18小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯和四氢呋喃萃取，接着用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷＝5％，v/v)纯化，以得到31.4mg固体标题产物(0.081mmol)，产率55％。
Rf＝0.13(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.42(brs,1H),12.59(brs,1H),7.93(s,1H),4.69-4.78(m,1H),4.25(s,2H),1.16(d,J＝6.4Hz,6H)
<实施例44>N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000771
步骤1：N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000772
将40mg制备实施例23中获得的2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.150mmol)、36mg 5-氯-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.224mmol)和76mgCMPI(0.298mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加52μl DIPEA(0.298mmol)并在50℃下搅拌18小时。在反应完成之后，添加水以沉淀，用水和乙醚洗涤，并且过滤，以得到23.2mg固体标题化合物(0.060mmol)，产率43％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.37(brs,1H),12.63(brs,1H),7.89(s,1H),4.29(s,2H),3.61-3.66(m,1H),0.94-0.99(m,2H),0.75-0.81(m,2H)
<制备实施例24>2-((1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸的制备
Figure BDA0003097861360000781
步骤1：2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸乙酯的制备
Figure BDA0003097861360000782
将300mg制备实施例17步骤2中获得的6-氯-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]吡啶-4-酮(1.178mmol)、488mg碳酸钾(3.534mmol)和319μl 2-巯基丙酸乙酯(2.474mmol)溶解于5ml DMF中，接着在90℃小搅拌5小时30分钟。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并且用水、1N盐酸和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝2:1->1:1，v/v)纯化，以得到240mg固体标题产物(0.681mmol)，产率58％。
Rf＝0.39(正己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ10.83(brs,1H),8.05(s,1H),4.69-4.82(m,1H),4.50(q,J＝7.4Hz,1H),4.12-4.31(m,4H),3.55-3.67(m,2H),2.29-2.45(m,2H),1.85-1.98(m,2H),1.70(d,J＝7.4Hz,3H),1.29(t,J＝7.0Hz,3H)
步骤2：2-((1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸的制备
Figure BDA0003097861360000783
将228mg上文步骤1中制备的2-((1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸乙酯(0.647mmol)溶解于3ml四氢呋喃，并且添加2N氢氧化钠，并且将混合物在室温下搅拌1小时30分钟。在反应完成之后，将其用1N盐酸中和，用乙酸乙酯萃取，并且用水和饱和盐水洗涤。减压浓缩产物，以得到178mg固体标题化合物(0.549mmol)，产率85％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.97(brs,1H),12.58(brs,1H),7.98(s,1H),4.65-4.80(m,1H),4.39(q,J＝7.1Hz,1H),3.93-4.05(m,2H),3.41-3.54(m,2H),1.96-2.16(m,2H),1.77-1.92(m,2H),1.55(d,J＝7.1Hz,3H)
<实施例45>N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000791
步骤1：N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000792
将40mg制备实施例24中获得的2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.123mmol)、30mg制备实施例4中获得的5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.185mmol)和54mg CIB(0.247mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加43μl DIPEA(0.247mmol)，接着在50℃下搅拌16小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷＝3％，v/v)纯化，以得到25.6mg固体标题产物(0.055mmol)，产率45％。
Rf＝0.06(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.14(brs,1H),12.61(brs,1H),7.97(s,1H),4.66(q,J＝7.1Hz,1H),4.46-4.60(m,1H),3.91-4.01(m,1H),3.63-3.72(m,1H),3.42-3.53(m,1H),3.20(t,J＝7.2Hz,2H),2.97-3.03(m,1H),1.74-2.07(m,3H),1.57(d,J＝7.1Hz,3H),1.21-1.36(m,4H)
<实施例46>N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000801
步骤1：N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000802
将40mg制备实施例24中获得的2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.123mmol)、33mg 5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.185mmol)和54mg CIB(0.247mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加43μl DIPEA(0.247mmol)，接着在50℃下搅拌16小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷＝3％，v/v)纯化，以得到6.8mg固体标题产物(0.014mmol)，产率11％。
Rf＝0.12(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.42(brs,1H),12.63(brs,1H),7.97(s,1H),4.68(q,J＝7.3Hz.1H),4.49-4.62(m,1H),3.92-4.02(m,1H),3.68-3.78(m,1H),3.42-3.54(m,1H),3.03-3.15(m,1H),1.75-2.07(m,3H),1.58(d,J＝7.3Hz,3H),1.24-1.37(m,1H)
<实施例47>N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000811
步骤1：N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000812
将40mg制备实施例24中获得的2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酸(0.123mmol)、25mg 5-氯-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.185mmol)和54mg CIB(0.247mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加43μl DIPEA(0.247mmol)并在50℃下搅拌16小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷＝3％，v/v)纯化，以得到22.1mg固体标题产物(0.05mmol)，产率41％。
Rf＝0.06(己烷:乙酸乙酯＝1:1，v/v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.41(brs,1H),12.62(brs,1H),7.97(s,1H),4.68(q,J＝7.4Hz,1H),4.49-4.62(m,1H),3.92-4.01(m,1H),3.68-3.78(m,1H),3.43-3.55(m,1H),3.03-3.14(m,1H),1.75-2.09(m,3H),1.58(d,J＝7.4Hz,3H),1.25-1.37(m,1H)
<实施例48>N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000813
步骤1：N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺的制备
Figure BDA0003097861360000821
将45mg制备实施例18中获得的2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酸(0.126mmol)、51mg 5-氨基-2-氯噻唑(0.378mmol)和64mg 2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘(0.252mmol)溶解于2ml DMF中，并且添加44μl DIPEA(0.252mmol)并在50℃下搅拌16小时。在反应完成之后，将产物用乙酸乙酯萃取，并用水和饱和盐水洗涤。将减压浓缩的滤液通过柱色谱法(正己烷:乙酸乙酯＝1:1->甲醇/二氯甲烷＝3％，v/v)纯化，以得到44mg固体标题产物(0.092mmol)，产率73％。
Rf＝0.26(甲醇/二氯甲烷＝5％，v/v)
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.09(s,1H),4.78-4.91(m,1H),4.69(q,J＝7.4Hz,1H),1.99-2.46(m,6H),1.75(d,J＝7.4Hz,3H),1.24-1.30(m,2H)
实施例1-48中制备的化合物的化学结构式总结并显示于以下表1中。
【表1】
Figure BDA0003097861360000831
Figure BDA0003097861360000841
Figure BDA0003097861360000851
Figure BDA0003097861360000861
基于由MDS(MDS Analytical Technologies，Sunyvale，CA，USA)提供的偏振测定(IMAP-FP筛选表达试剂盒)，测试了根据本发明的代表性化合物对磷酸二酯酶9A的抑制活性。作为缓冲溶液，制备了反应溶液(将由MDS提供的含有0.01％Tween 20的反应溶液稀释5倍，然后添加5mM DTT)和偏振检测溶液(将由MDS提供的结合溶液A和B以比率3:1混合，并且添加IMAP结合试剂1/600)。制备了100μM底物(F1-cGMP底物；MDS)和3.6μg/ml酶PDE9A(ab54113；abcam)。将3.6μg/ml PDE9A和100μM底物分别稀释至20ng/ml(最终反应浓度：5ng/ml)和400nM(最终反应浓度：100nM)。在所有稀释和制备过程中使用的缓冲溶液为添加了1mM DTT的1×反应溶液，并且最后使用偏振检测溶液诱导偏振。
使用16通道移液器(多16-通道，Finnpipette，Thermo Scientific，Essex，UK)将制备的样品分配在黑色微板(Multiwell 384孔板，#3573，Corning Life Sciences，Lowell，MA，USA)上。每孔总反应体积为20μl。此时，将10μl 2％DMSO、5μl底物溶液和5μl反应溶液用作阴性对照，并且将10μl 2％DMSO、5μl底物溶液和5μl PDE9A溶液用作阳性对照。作为实验组，使用10μl实施例中制备的化合物、5μl底物溶液和5μl PDE9A溶液。在酶与底物反应之前，在化合物与酶之间进行了约10分钟的预处理后，添加5μl cGMP诱导酶反应。在反应期间，每种化合物、酶和底物分别占总体积的50％、25％和25％，在即将添加之前，它们分别以2、4和4倍的高浓度制备。酶促反应后，轻轻摇动1分钟，并在室温下诱导酶促反应1小时。然后，添加60μl预先制备的偏振检测溶液以引起偏振。
在荧光检测溶液中，混合了由三价金属离子组成的纳米颗粒，其与通过酶促反应暴露的磷酸结合而增加分子量，从而诱导了偏振。在室温下静置2小时后，使用多标记计数器(Envision，PerkinElmer，Turku，Finland)(发射波长：P-535nm，S-535nm，激发波长：480nm)测量偏振(荧光偏振，FP)值，并且结果表示为IC50值，其为在体外抑制50％的PDE9A的化合物浓度(表2)。
【表2】
Figure BDA0003097861360000871
Figure BDA0003097861360000881

Claims (9)

1.一种由以下化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐，
[化学式1]
Figure FDA0003097861350000011
在化学式1中，
A1为NH或N-C1-2烷基，
A2为H、线性或支化C1-5烷基或苯基，
X为选自由以下组成的组中的取代基：-H、卤素、-NO2、-CN、-SR1、未取代或被一个或多个卤素取代的线性或支化C1-10烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的线性或支化C1-10烷氧基、未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳基以及未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳氧基，
Y为选自由以下组成的组中的取代基：未取代或被一个或多个卤素取代的C1-10线性或支化烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的C3-10环烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的包含O或S杂原子的6-10元杂环烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的C1-10线性或支化烷氧基、未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳基以及未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳氧基，
R1为选自由以下组成的组中的取代基：未取代或被一个或多个卤素取代的C1-10线性或支化烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的C1-10线性或支化烷氧基、未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳基、未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C1-2烷基-C6-10芳基以及未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳氧基。
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中
A1为NH或N-C1-2烷基，
A2为H、线性或支化C1-5烷基或苯基，
X为选自由以下组成的组中的取代基：-H、卤素、-NO2、-CN、-SR1、未取代或被一个或多个卤素取代的线性或支化C1-5烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的线性或支化C1-5烷氧基以及未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的苯基，
Y为选自由以下组成的组中的取代基：未取代或被一个或多个卤素取代的C1-6线性或支化烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的C3-6环烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的包含O或S杂原子的6-8元杂环烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的C1-6线性或支化烷氧基、未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳基以及未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳氧基，并且
R1为选自由以下组成的组中的取代基：未取代或被一个或多个卤素取代的C1-6线性或支化烷基、未取代或被一个或多个卤素取代的C1-6线性或支化烷氧基、未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳基以及未取代或被一个或多个卤素或C1-10线性或支化烷基取代的C6-10芳氧基。
3.根据权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中
A1为NH或NCH3，
A2为H、CH3或苯基，
X为选自由以下组成的组中的取代基：-H、-Cl、-Br、-SR1、甲基、乙基、叔丁基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、异丙氧基、苯基、4-氟苯基和4-甲基苯基，
Y为苯基、4-氟苯基、4,4-二氟环己基、吡喃、噻喃、异丙基或环丙基，并且
R1为甲基、乙基、异丙基、苯基、苄基、4-甲基苄基或4-氯苄基。
4.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物为
(1)2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺；
(2)N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(3)N-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(4)2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺；
(5)N-(5-乙基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(6)N-(5-(苄基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-(4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(7)N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(8)N-(5-((4-氯苄基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-(4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(9)N-(5-((4-甲基苄基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-(4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(10)N-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺；
(11)N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺；
(12)N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺；
(13)N-(5-(甲基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(14)N-(5-(异丙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(15)N-(5-(苯基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(16)N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-(4-氟苯基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(17)N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-(4-氟苯基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(18)N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-N-甲基-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(19)2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺；
(20)N-(5-(叔丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(((4-氧代-1-(四氢-2H-呋喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)甲基)-苯甲酰胺；
(21)2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺；
(22)N-(5-(叔丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(23)N-(5-(4-氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(24)N-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(25)2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-(对甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺；
(26)N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-2-苯基乙酰胺；
(27)N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(28)2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)丙酰胺；
(29)N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(30)N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(31)2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)-N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)丙酰胺；
(32)N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(33)N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(34)N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-环己基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(35)N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-环己基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(36)N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(37)N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(38)N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(39)N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(40)N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(41)N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(42)N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-环己基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(43)N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-异丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(44)N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-环丙基-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)乙酰胺；
(45)N-(5-(乙基硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺；
(46)N-(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺；
(47)N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺；或
(48)N-(5-氯-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-((1-(4,4-二氟环己基)-4-氧代-4,5-二氢-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)硫代)丙酰胺。
5.一种组合物，其包含根据权利要求1至4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载剂。
6.一种药物组合物，其用于治疗或预防与磷酸二酯酶9A有关的疾病，其包含根据权利要求1至4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
7.根据权利要求6所述的药物组合物，其中所述疾病为神经疾病或精神疾病。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其中所述神经病症或精神病症为阿尔茨海默氏病、亨丁顿氏病、路易体痴呆或皮克氏综合征。
9.根据权利要求6所述的药物组合物，其中所述疾病为心力衰竭，特别是心输出量保持性心力衰竭或镰状细胞病。
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