CN113082155B - 丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途 - Google Patents

丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途 Download PDF

Info

Publication number
CN113082155B
CN113082155B CN202110259074.7A CN202110259074A CN113082155B CN 113082155 B CN113082155 B CN 113082155B CN 202110259074 A CN202110259074 A CN 202110259074A CN 113082155 B CN113082155 B CN 113082155B
Authority
CN
China
Prior art keywords
extract
agent
danzhiqing
prostatic hyperplasia
benign prostatic
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202110259074.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113082155A (zh
Inventor
高秀梅
苗琳
刘二伟
张晗
常艳旭
毛浩萍
杨晓华
吴垚锌
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tianjin University of Traditional Chinese Medicine
Original Assignee
Tianjin University of Traditional Chinese Medicine
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tianjin University of Traditional Chinese Medicine filed Critical Tianjin University of Traditional Chinese Medicine
Priority to CN202110259074.7A priority Critical patent/CN113082155B/zh
Publication of CN113082155A publication Critical patent/CN113082155A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113082155B publication Critical patent/CN113082155B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/487—Psoralea
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/46—Eucommiaceae (Eucommia family), e.g. hardy rubber tree
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • A61K36/537—Salvia (sage)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/896—Liliaceae (Lily family), e.g. daylily, plantain lily, Hyacinth or narcissus
    • A61K36/8964—Anemarrhena
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/55—Liquid-liquid separation; Phase separation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本申请提供了丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途，还提供了丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻的药物中的用途，以及包含丹知青娥方的提取物的药物组合物，及其在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途和在制备治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻的药物中的用途。丹知青娥方能够明显抑制前列腺体积增大，改善前列腺增生的组织病变，改善良性前列腺增生的症状，从而用于治疗良性前列腺增生；丹知青娥方还能够明显抑制膀胱体积增大，改善膀胱梗阻的组织病变，改善膀胱梗阻症状，从而用于治疗良性前列腺增生引起的膀胱梗阻。

Description

丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中 的用途
技术领域
本申请涉及医药技术领域，特别是涉及丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途。
背景技术
良性前列腺增生症(Benign Prostatic Hyperplasia，BPH)是中老年男性泌尿系统的高发病种，与年龄密切相关。流行病学研究显示，60岁以上的男性50％能在组织水平上观察到BPH症状；80岁以上的男性BPH的患病率接近90％。前列腺半包绕于膀胱颈尿道周围，呈倒栗子状实质性腺体器官，增生至一定程度后压迫膀胱出口尿道并使其发生形变，导致患者尿道阻力升高，尿液排出困难，进而引起膀胱体积增大、膀胱组织病变，即为膀胱梗阻。
BPH患者年龄普遍较高，考虑到发病人群的身体素质以及术后诸多并发症等因素，药物治疗是BPH的主要治疗手段。目前临床常见的治疗BPH药物包括5α-还原酶抑制剂、α-受体阻滞剂等，在抑制前列腺体积的增大等方面有显著的疗效，但存在一定的副作用。如α1肾上腺素能受体阻滞剂会引起患者头晕、无力、直立性低血压和射精异常等。5α-还原酶抑制剂可能会导致非酒精性脂肪肝疾病、胰岛素抵抗、2型糖尿病、干眼症、潜在的肾脏功能障碍以及其他代谢功能障碍。随着我国老龄化程度加深，我国BPH的发病率也逐年上升，因此亟需寻找一种更好的能够治疗良性前列腺增生的药物。
发明内容
本申请的发明人通过研究发现，丹知青娥方对良性前列腺增生及其引起的膀胱梗阻症状有明显的抑制作用，并基于此，完成了本申请。
本申请的第一方面提供丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途。
本申请的第二方面提供丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻的药物中的用途。
本申请的第三方面提供一种药物组合物，其包含丹知青娥方的提取物。
本申请的第四方面提供本申请第三方面的药物组合物在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途。
本申请的第五方面提供本申请第三方面的药物组合物在制备治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻的药物中的用途。
丹知青娥方能够明显抑制前列腺体积的增大，改善前列腺增生的组织病变，改善良性前列腺增生的症状，因此可用于治疗和/或预防良性前列腺增生，从而用于制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物。进一步的，丹知青娥方还可以明显抑制膀胱体积的增大，改善膀胱梗阻的组织病变，改善膀胱梗阻症状，从而用于治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻，进而用于制备治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻的药物。更进一步的，本申请提供的包含丹知青娥方的提取物的药物组合物，能够用于制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物，也能够用于制备治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻的药物。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的实施例。
图1为良性前列腺增生模型中，给药后各组大鼠的前列腺形态图，视野1cm。
图2为良性前列腺增生模型中，给药后各组大鼠的前列腺指数结果。
图3为良性前列腺增生模型中，给药后各组大鼠前列腺组织的HE染色结果，各图中上方图片为100倍镜下结果，标记为100×，下方图为200倍镜下结果，标记为200×。
图4为膀胱梗阻模型中，给药后各组大鼠的膀胱形态图，视野1cm。
图5为膀胱梗阻模型中，给药后各组大鼠的膀胱指数结果。
图6为膀胱梗阻模型中，给药后各组大鼠膀胱组织的HE染色结果，各图中上方图片为40倍镜下结果，标记为40×，下方图为100倍镜下结果，标记为100×。
图7为膀胱梗阻模型中，给药后各组大鼠膀胱组织的Masson染色结果，各图中上方图片为40倍镜下结果，标记为40×，下方图为100倍镜下结果，标记为100×。
图8为膀胱梗阻模型中，给药后各组大鼠膀胱组织的胶原容积分数结果。
具体实施方式
下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员基于本申请所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
本申请的第一方面提供丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途。
发明人在研究中发现，丹知青娥方能够明显抑制前列腺体积的增大，改善前列腺增生的组织病变，改善良性前列腺增生的症状，因此可用于治疗和/或预防良性前列腺增生，从而用于制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物。本申请中，丹知青娥方包括盐补骨脂、丹参、盐杜仲和知母，各药物的用药量根据药用所需进行配比，优选的盐补骨脂、丹参、盐杜仲和知母的质量比为1:(1.5-2.5):(1.5-2.5):(0.8-1.2)。
本申请的第二方面提供丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻的药物中的用途。
发明人在研究中发现，丹知青娥方还可以明显抑制膀胱体积的增大，改善膀胱梗阻的组织病变，改善膀胱梗阻症状，因此可用于治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻，从而用于制备治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻的药物。
本申请的第三方面提供一种药物组合物，其包含丹知青娥方的提取物。
在本申请第三方面的一些实施方式中，所述丹知青娥方的提取物通过以下方法制备：
(1)取质量为M1的盐补骨脂，加入体积为V1的体积分数60-80％乙醇水溶液浸泡，用体积分数60-80％乙醇水溶液渗漉，得到体积为V2的渗漉液，浓缩，得第一浸膏，其中，M1:V1为1:(1.5-3)g/mL，M1:V2为1:(13-17)g/mL；
(2)取质量为M2的丹参，加入体积为V3的体积分数90-98％乙醇水溶液浸泡，用体积分数90-98％乙醇水溶液渗漉，得到体积为V4的渗漉液和渗漉后的丹参药渣，浓缩渗漉液并干燥，得丹参提取物，其中，M2:V3为1:(1.5-3)g/mL，M2:V4为1:(5-7)g/mL；
(3)取质量为M3的盐杜仲、质量为M4的知母，与步骤(2)中的丹参药渣合并，分别用体积为V5的水煎煮两次，每次煎煮2.5-3.5h，获得两次煎煮的水提取液，浓缩，加入体积为V6、体积分数90-98％乙醇水溶液沉淀，取上清液，浓缩并干燥，得第二浸膏，其中，(M2+M3+M4):V5为1:(7-9)g/mL，(M2+M3+M4):V6为1:(2-4)g/mL；
(4)合并步骤(1)的第一浸膏、步骤(2)的丹参提取物和步骤(3)的第二浸膏，加水混合均匀后浓缩，即得所述丹知青娥方的提取物；
其中，M1:M2:M3:M4＝1:(1.5-2.5):(1.5-2.5):(0.8-1.2)。
在本申请第三方面的一些实施方式中，步骤(1)中浸泡时间为10-14h，渗漉流速为6-10mL/kg·min-1。发明人在研究中发现，盐补骨脂在体积分数60-80％乙醇水溶液中浸泡10-14h，能够充分膨胀，以便于盐补骨脂的渗漉提取。
在本申请第三方面的一些实施方式中，步骤(2)中浸泡时间为22-26h，渗漉流速为14-18mL/kg·min-1。发明人在研究中发现，丹参在体积分数90-98％乙醇水溶液中浸泡22-26h，能够充分膨胀，以便于丹参的渗漉提取。
在本申请第三方面的一些实施方式中，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体或赋形剂。
在本申请第三方面的一些实施方式中，所述药学上可接受的载体或赋形剂选自溶剂、稀释剂、分散剂、助悬剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂、粘合剂、润滑剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、香味剂、甜味剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂或抗氧化剂中的至少一种。
在本申请第三方面的一些实施方式中，所述药物组合物为散剂、片剂、胶囊剂、丸剂、滴丸剂、注射剂、乳剂、混悬剂或酊剂。上述各种剂型的药物组合物均可以按照药学领域的常规方法制备。
本申请的第四方面提供本申请第三方面的药物组合物在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途。
本申请的第五方面提供本申请第三方面的药物组合物在制备治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻的药物中的用途。
本文所用的术语，如未明确说明或定义，则它们具有本领域技术人员公知的一般含义。
如本文使用的，术语“治疗”具有其一般含义，并且在本文特别地是指对已经罹患本申请所述良性前列腺增生及其引起的膀胱梗阻的动物个体采用本申请的药物进行处理，以期对所述疾病产生治疗、治愈、缓解、减轻等作用。类似地，如本文使用的，术语“预防”具有其一般含义，并且在本文特别地是指对可能罹患本申请所述良性前列腺增生及其引起的膀胱梗阻或者对本申请所述良性前列腺增生及其引起的膀胱梗阻具有罹患风险的动物个体采用本申请的药物进行处理，以期对所述疾病产生防止、预防、阻止、隔断等作用。
如本文使用的，“药学上可接受的”表示当以通常用药剂量使用时没有实质的毒性作用，从而可被政府或与其相当的国际组织批准或者已被批准用于动物，更特别地用于人，或者被登录在药典上。
本申请药物组合物中可用的“药学上可接受的载体或赋形剂”可以是药物制剂领域中任何常规的载体，特定载体的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。
如本文使用的，术语“药物组合物”具有其一般含义。此外，本申请的“药物组合物”还可以以保健品、功能性食品、食品、食品添加剂等形式存在或提供。可采用制药领域特别是制剂领域中的常规技术，通过药品生产中常用的提取分离纯化手段得到本申请的药物组合物的原料的有效成分，任选地与一种或更多种药学可接受的载体或赋形剂混合，然后形成所需的剂型，来制备本申请的药物组合物。根据本申请的药物组合物，其为可以适用于口服给药、胃肠外给药或局部给药、外用给药的药物制剂，尤其适用于口服给药。用于口服施用的剂型可包括例如片剂、丸剂、硬或软胶囊剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂、散剂、粉剂、细粒剂、颗粒剂、小丸剂、酏剂等，并不限于此。除了活性成分外，这些制剂还可包含稀释剂(例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、纤维素和甘氨酸)、润滑剂(例如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其镁盐、钙盐和聚乙二醇)。片剂还可包含粘合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和聚乙烯吡咯烷。必要时，其还可包含药用添加剂，例如崩解剂(如淀粉、琼脂、海藻酸或其钠盐)、吸收剂、着色剂、香味剂、甜味剂等。片剂可根据常用的混合、造粒或包衣的方法制备。
材料
盐补骨脂(批号820180606)、丹参(批号190401077)、盐杜仲(批号180701208)、知母(批号190501271)：河北春开制药股份有限公司；8周龄SPF级Wistar雄性大鼠136只：北京维通利华实验动物技术有限公司；苏木素：北京索莱宝科技有限公司，G1120 100mL；伊红染液：北京索莱宝科技有限公司，G1120 100mL；Mayer苏木素染色液：北京索莱宝科技有限公司，G1346 100mL；丽春红品红染色液：北京索莱宝科技有限公司，G1346 100mL；苯胺蓝染液：北京索莱宝科技有限公司，G1346 100mL；正置显微镜：日本Olympus公司BX41。
下述实施例中所用实验材料和方法，如无特别说明，均为常规材料和方法。
制备例1丹知青娥方的提取物的制备
(1)取800g盐补骨脂，加入1600mL、70％乙醇水溶液浸泡12小时，用70％乙醇水溶液以8mL/kg·min-1流速渗漉，得到12000mL渗漉液，减压回收乙醇，浓缩至盐补骨脂质量：浓缩液体积为1:1.5，静置分层，倾去上层液，取下层得第一浸膏。放于4℃保存。
(2)取1600g丹参饮片，加入3200mL、95％乙醇水溶液浸泡24小时，用95％乙醇水溶液以16mL/kg·min-1流速渗漉，得到9600mL的渗漉液和渗漉后的丹参药渣，渗漉液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.15(50℃)，于65℃真空干燥，得丹参脂溶性提取物，粉碎过80目筛。
(3)取1600g盐杜仲饮片、800g知母饮片，与步骤(2)中的丹参药渣合并，分别用32000mL水煎煮两次，每次煎煮3h，获得两次煎煮的水提取液，减压浓缩至相对密度为1.15(50℃)，加入12000mL、95％乙醇水溶液沉淀，静置过夜，取上清液，过滤，滤液合并上清液，减压浓缩，烘箱干燥，得第二浸膏。放于4℃保存。
(4)合并步骤(1)的第一浸膏、步骤(2)的丹参脂溶性提取物和步骤(3)的第二浸膏，加4000mL水混合均匀后浓缩，即得丹知青娥方的提取物1458.16g。
实施例1丹知青娥方抑制大鼠前列腺增生的作用
8周龄SPF级Wistar雄性大鼠40只，体重240±20g，适应性饲养一周后行去势手术。随机选取8只大鼠作为假手术组实行假手术，其余32只大鼠做去势手术，完全摘除双侧睾丸及其附睾，并均于术后一周肌肉注射青霉素0.3mL/只/天，去势后大鼠随机分为4组：模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。术后21天开始给药，其中，假手术组，皮下注射玉米油0.1ml/d，灌胃给药生理盐水3ml/d；模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，皮下注射雌二醇/睾酮(E2/T，浓度比为1:100，E2终浓度为100μg/ml)0.1ml/d，模型组灌胃给药生理盐水3ml/d；低剂量组、中剂量组、高剂量组灌胃给药制备例1获得的丹知青娥方的提取物的水溶液0.1125g/ml、0.225g/ml、0.45g/ml，给药量均为12ml/kg。
连续给药28天，末次给药后24小时完成取材。取出前列腺组织，各组大鼠前列腺形态图如图1所示。用电子天平精确称量前列腺的湿重，按照公式：前列腺的湿重/大鼠体重×100％，计算前列腺指数(PI)，结果如图2所示。取前列腺背叶放于4％多聚甲醛中固定，待石蜡包埋，用于HE病理检测。
病理检测具体为：用切片机将石蜡包埋的前列腺组织蜡块切至5μm/片，二甲苯使石蜡切片脱蜡，经各级乙醇后至水洗后进行HE染色。具体步骤如下：二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100％乙醇2min→95％乙醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸馏水洗2min。苏木素染色5min，大量自来水冲洗。盐酸乙醇分化30s。自来水浸泡15min。置伊红染液染色2min。脱水，步骤如下：95％乙醇(I)1min→95％乙醇(Ⅱ)1min→无水乙醇(I)1min→无水乙醇(Ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3:1)1min→二甲苯(I)1min→二甲苯(Ⅱ)1min→中性树脂封片。各组大鼠前列腺组织的HE染色结果如图3所示。
本实施例中的中剂量组用药量为2.7g/kg，为临床等效剂量；高剂量组用药量为5.4g/kg，为临床等效剂量的两倍剂量。本申请中，临床等效剂量，是指全方生药量30g(其中补骨脂5g，杜仲10g，丹参10g，知母5g)用于成年人(按70kg计算)每天，人鼠系数6.3，换算成给予大鼠的剂量即为2.7g/kg。
根据图1可知，和假手术组相比，模型组大鼠前列腺体积明显增大，雌二醇/睾酮激素可以明显诱导大鼠前列腺增大；给药后，中剂量组、高剂量组大鼠的前列腺体积较模型组均有显著缩小，其中高剂量组大鼠的前列腺体积接近假手术组。根据图2结果可知，与假手术组相比，模型组大鼠前列腺指数明显增加(n＝8,**P<0.01,与假手术组比)；给药后，低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠的前列腺指数较模型组均有显著降低(n＝8,#P<0.05,##P<0.01,与模型组比)。表明用临床等效剂量(2.7g/kg)及两倍剂量(5.4g/kg)的丹知青娥方给药后显著抑制前列腺体积的增大，显著降低前列腺指数。
根据图3HE染色病理分析结果可知，假手术组前列腺腺腔上皮细胞排列整齐；模型组腺腔上皮增厚且排列紊乱，出现前列腺增生；低剂量组、中剂量组、高剂量组腺腔上皮细胞排列紊乱的现象均得到不同程度的改善，局部腺泡排列较为密集，表明本申请的丹知青娥方能够改善前列腺增生的组织病变。
由上述结果可知，丹知青娥方能够明显抑制前列腺体积的增大，改善前列腺增生的组织病变，改善良性前列腺增生的症状，因此可用于治疗和/或预防良性前列腺增生，从而用于制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物。
实施例2丹知青娥方对大鼠膀胱梗阻的改善作用
8周龄SPF级Wistar雄性大鼠96只，体重225±25g，适应性饲养一周后，行耻骨后途径膀胱颈部分结扎手术。随机选取16只大鼠作为假手术组实行假手术，其余80只大鼠，行耻骨后途径膀胱颈部分结扎手术，并均于术后在大腿内侧肌肉注射庆大霉素0.5mL/只/天，连用3天。结扎后大鼠适应性饲养一周，然后随机分为3组：模型组、中剂量组、高剂量组。术后7天开始给药，其中，假手术组、模型组，分别灌胃给药生理盐水3ml/d；中剂量组、高剂量组灌胃给药制备例1获得的丹知青娥方的提取物的水溶液0.225g/ml、0.45g/ml，给药量均为12ml/kg。连续给药35天，末次给药后24小时完成取材。取出膀胱组织，各组大鼠膀胱形态图如图4所示。用电子天平精确称量膀胱的湿重，按照公式：膀胱的湿重/大鼠体重×100％，计算膀胱指数(BI)，结果如图5所示。取膀胱组织放于4％多聚甲醛中固定，待石蜡包埋，用于病理检测。
病理检测具体为：用切片机将石蜡包埋的膀胱组织蜡块切至5μm/片，进行HE染色和Masson染色。HE染色具体步骤同实施例1，各组大鼠膀胱组织的HE染色结果如图6所示。Masson染色具体步骤如下：切片入媒染液，置入57℃-60℃的温箱内1h进行媒染，然后流水冲洗10min→天青石蓝染色液滴染3min，水洗2次，每次15s→Mayer苏木素染色液滴染2-3min，蒸馏水洗2次，每次15s→酸性乙醇分化液分化数秒至组织完全变红，水洗终止分化，蒸馏水冲洗10min→丽春红品红染色液滴染10min，蒸馏水洗2次，每次15s→磷钼酸溶液处理10min→倾去上液，切片不用水洗，直接滴加苯胺蓝染色液染5min→用弱酸溶液洗去苯胺蓝溶液后，继续滴加弱酸工作液覆盖切片处理2min→95％的乙醇脱水30s→无水乙醇脱水2次，第一次30s，第二次1min→二甲苯透明2次，每次1-2min→中性树胶封固。使用正置显微镜进行观察。各组大鼠膀胱组织的Masson染色结果如图7所示。采用ImageJ对各组Masson染色结果进行分析，得到各组胶原容积分数结果，如图8所示。
根据图4可知，和假手术组相比，模型组大鼠膀胱体积明显增大；给药后，中剂量组、高剂量组大鼠的膀胱体积较模型组均有显著减小。根据图5结果可知，与假手术组相比，模型组大鼠膀胱指数显著上升(n＝7,*P<0.05,与假手术组比)；给药后，高剂量组大鼠的膀胱指数较模型组有显著下降(n＝7,#P<0.05,与模型组比)，中剂量组大鼠的膀胱指数较模型组有下降的趋势。表明本申请的丹知青娥方能够明显抑制膀胱体积的增大，显著降低膀胱指数。
根据图6结果可知，模型组与假手术组相比，膀胱组织结构发生显著变化，模型组出现了膀胱平滑肌肌束的断裂和溶解，肌束之间间隙变宽；给药后，中剂量组、高剂量组与模型组相比，膀胱平滑肌肌束的断裂和溶解显著减少，肌束之间间隙明显减小，表明本申请的丹知青娥方能够显著改善膀胱平滑肌肌束的病变。根据图7结果可知，与假手术组相比，模型组中胶原纤维显著堆积；给药后，胶原纤维堆积情况显著缓解；根据图8结果可知，和假手术组相比，模型组大鼠胶原容积分数显著升高(n＝6,*P<0.05,与假手术组比)；给药后，中剂量组、高剂量组大鼠的胶原容积分数较模型组均有显著降低(n＝6,#P<0.05,与模型组比)；表明本申请的丹知青娥方能够显著改善膀胱组织的纤维化。图6-图8的结果表明本申请的丹知青娥方能够显著改善膀胱组织的组织病变。
由上述结果可知，丹知青娥方能够明显抑制梗阻后膀胱体积的增大，改善膀胱梗阻的组织病变，改善膀胱梗阻症状，从而用于治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻，进而用于制备治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻的药物。
发明人在研究中发现，本申请的丹知青娥方能够改善良性前列腺增生的症状，用于治疗和/或预防良性前列腺增生，进一步地，对于良性前列腺增生引起的膀胱梗阻也具有治疗和/或预防作用，因此本申请的丹知青娥方能够用于制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物以及用于制备治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻的药物。
以上所述仅为本申请的较佳实施例，并非用于限定本申请的保护范围。凡在本申请的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本申请的保护范围内。

Claims (6)

1.一种药物组合物在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途，其中，所述药物组合物包含丹知青娥方的提取物；所述丹知青娥方的提取物通过以下方法制备：
（1）取质量为M1的盐补骨脂，加入体积为V1的体积分数60-80%乙醇水溶液浸泡，用体积分数60-80%乙醇水溶液渗漉，得到体积为V2的渗漉液，浓缩，得第一浸膏，其中，M1:V1为1:(1.5-3)g/mL，M1:V2为1:(13-17)g/mL；
（2）取质量为M2的丹参，加入体积为V3的体积分数90-98%乙醇水溶液浸泡，用体积分数90-98%乙醇水溶液渗漉，得到体积为V4的渗漉液和渗漉后的丹参药渣，浓缩渗漉液并干燥，得丹参提取物，其中，M2:V3为1:(1.5-3)g/mL，M2:V4为1:(5-7)g/mL；
（3）取质量为M3的盐杜仲、质量为M4的知母，与步骤（2）中的丹参药渣合并，分别用体积为V5的水煎煮两次，每次煎煮2.5-3.5h，获得两次煎煮的水提取液，浓缩，加入体积为V6、体积分数90-98%乙醇水溶液沉淀，取上清液，浓缩并干燥，得第二浸膏，其中，(M2+M3+M4):V5为1:(7-9)g/mL，(M2+M3+M4):V6为1:(2-4)g/mL；
（4）合并步骤（1）的第一浸膏、步骤（2）的丹参提取物和步骤（3）的第二浸膏，加水混合均匀后浓缩，即得所述丹知青娥方的提取物；
其中，M1:M2:M3:M4=1:(1.5-2.5):(1.5-2.5):(0.8-1.2)。
2.根据权利要求1所述的用途，其中，步骤（1）中浸泡时间为10-14h，渗漉流速为6-10mL/kg·min-1；步骤（2）中浸泡时间为22-26h，渗漉流速为14-18mL/kg·min-1。
3.根据权利要求1-2中任一项所述的用途，其中，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体或赋形剂；所述药学上可接受的载体或赋形剂选自溶剂、稀释剂、分散剂、助悬剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂、粘合剂、润滑剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、香味剂、甜味剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂或抗氧化剂中的至少一种。
4.一种药物组合物在制备治疗和/或预防良性前列腺增生引起的膀胱梗阻的药物中的用途，其中，所述药物组合物包含丹知青娥方的提取物；所述丹知青娥方的提取物通过以下方法制备：
（1）取质量为M1的盐补骨脂，加入体积为V1的体积分数60-80%乙醇水溶液浸泡，用体积分数60-80%乙醇水溶液渗漉，得到体积为V2的渗漉液，浓缩，得第一浸膏，其中，M1:V1为1:(1.5-3)g/mL，M1:V2为1:(13-17)g/mL；
（2）取质量为M2的丹参，加入体积为V3的体积分数90-98%乙醇水溶液浸泡，用体积分数90-98%乙醇水溶液渗漉，得到体积为V4的渗漉液和渗漉后的丹参药渣，浓缩渗漉液并干燥，得丹参提取物，其中，M2:V3为1:(1.5-3)g/mL，M2:V4为1:(5-7)g/mL；
（3）取质量为M3的盐杜仲、质量为M4的知母，与步骤（2）中的丹参药渣合并，分别用体积为V5的水煎煮两次，每次煎煮2.5-3.5h，获得两次煎煮的水提取液，浓缩，加入体积为V6、体积分数90-98%乙醇水溶液沉淀，取上清液，浓缩并干燥，得第二浸膏，其中，(M2+M3+M4):V5为1:(7-9)g/mL，(M2+M3+M4):V6为1:(2-4)g/mL；
（4）合并步骤（1）的第一浸膏、步骤（2）的丹参提取物和步骤（3）的第二浸膏，加水混合均匀后浓缩，即得所述丹知青娥方的提取物；
其中，M1:M2:M3:M4=1:(1.5-2.5):(1.5-2.5):(0.8-1.2)。
5.根据权利要求4所述的用途，其中，步骤（1）中浸泡时间为10-14h，渗漉流速为6-10mL/kg·min-1；其中，步骤（2）中浸泡时间为22-26h，渗漉流速为14-18mL/kg·min-1。
6.根据权利要求4-5中任一项所述的用途，其中，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体或赋形剂；所述药学上可接受的载体或赋形剂选自溶剂、稀释剂、分散剂、助悬剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂、粘合剂、润滑剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、香味剂、甜味剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂或抗氧化剂中的至少一种。
CN202110259074.7A 2021-03-10 2021-03-10 丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途 Active CN113082155B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110259074.7A CN113082155B (zh) 2021-03-10 2021-03-10 丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110259074.7A CN113082155B (zh) 2021-03-10 2021-03-10 丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113082155A CN113082155A (zh) 2021-07-09
CN113082155B true CN113082155B (zh) 2022-07-22

Family

ID=76666789

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110259074.7A Active CN113082155B (zh) 2021-03-10 2021-03-10 丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113082155B (zh)

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100581572C (zh) * 2007-05-22 2010-01-20 中国人民解放军第二军医大学 知母提取物用于制备防治前列腺增生药物的用途
CN102940681A (zh) * 2012-10-31 2013-02-27 成都医路康医学技术服务有限公司 治疗前列腺增生的药物组合物
CN103550484A (zh) * 2013-10-30 2014-02-05 天津中医药大学 一种调节雌激素水平的药物组合物、其制备方法及用途
CN106580932B (zh) * 2016-11-30 2019-06-07 天津中医药大学 补骨脂酚在制备用于预防和/或治疗良性前列腺增生的药物中的用途

Also Published As

Publication number Publication date
CN113082155A (zh) 2021-07-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103301408B (zh) 中药提取物及其制备的按摩膏
CN110339329A (zh) 一种具有防脱生发治疗银屑病的中药组合物及其制备方法和应用
CN101780227B (zh) 一种治疗中风急性期的中药组合物及其制备方法
US11129863B2 (en) Composition, preparation method thereof, and application thereof in the prevention and treatment of mammary gland disease
CN108403939A (zh) 治疗痔疮及便秘的中药复方制剂及所用中药组合物
CN113082155B (zh) 丹知青娥方在制备治疗和/或预防良性前列腺增生的药物中的用途
CN117482131A (zh) 一种用于治疗慢性肾脏病的中药组合物与应用
CN104524106A (zh) 一种治疗前列腺炎、前列腺肥大的中药制剂及其制备方法
CN101007157A (zh) 一种治疗慢性胆囊炎的中药复方制剂
CN109528806B (zh) 南瓜籽油中甾醇组合物及其应用和治疗前列腺增生药物
CN107744571B (zh) 一种改善血管内皮功能障碍的药物组合物及其制备方法和用途
CN100548363C (zh) 治疗良性前列腺增生症的药物及其制备方法
CN105943758B (zh) 一种治疗不孕症的中药组合物及其应用
CN114869952A (zh) 地骨皮提取物在制备修复生殖系统损伤的产品中的应用
CN102895484A (zh) 一种复方清热解毒注射液及其制备方法
CN106563110A (zh) 一种治疗带状疱疹后遗神经痛的药物及制备方法
CN102327407B (zh) 治疗股骨头坏死的中药及其制备方法
CN102188580B (zh) 治疗乳腺小叶增生的中药外用药组合物和巴布膏剂及制备方法
CN108524593A (zh) 一种用于治疗痔疮的复方栓剂及其制备方法
CN109528865A (zh) 一种用于治疗中老年眼科疾病的中药制剂及其制备方法
CN110123886A (zh) 一种治疗骨质增生的药物组合物及其制备方法和应用
CN103989940A (zh) 一种治疗糖尿病的中药组合物
CN110478442A (zh) 一种多功能眼药水及其制备方法
CN102743499A (zh) 中草药治疗软组织内伤瘀血和脑出血的药物及其制备方法
CN107213426A (zh) 治疗乳腺疾病的中成药及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant