CN113061138A - 一种三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物及制备方法和用途 - Google Patents
一种三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物及制备方法和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113061138A CN113061138A CN202110324068.5A CN202110324068A CN113061138A CN 113061138 A CN113061138 A CN 113061138A CN 202110324068 A CN202110324068 A CN 202110324068A CN 113061138 A CN113061138 A CN 113061138A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- compound
- triazole
- pyrimidine
- pyridine
- tetrahydro
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D487/14—Ortho-condensed systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
- C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D471/14—Ortho-condensed systems
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Abstract
本发明涉及一种三氮唑[5,4‑d]嘧啶酮三环类化合物及制备方法和用途，该类化合物以不同取代苯胺为初始原料，在盐酸和亚硝酸钠的作用下与叠氮化钠发生反应生成相应的苯基叠氮化合物（a1‑a7），接着与氰基乙酸乙酯在新制乙醇钠的作用下得到二环三唑类化合物（b1‑b7），然后在三氯氧磷作用下，分别和吡咯烷酮、戊内酰胺和ε‑己内酰胺反应成环得三氮唑[5,4‑d]嘧啶酮三环类化合物(c1‑c21)；并考察了21个化合物对人结肠癌细胞（HT‑29）、人宫颈癌细胞(HeLa)和人乳腺癌细胞(MCF‑7)抑制活性。结果显示：化合物c2,c5,c6,c9,c17对Hela人宫颈癌细胞有一定的抑制活性；化合物c8对HT‑29人结肠癌细胞有一定的抑制活性。
Description
技术领域
本发明涉及一种三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物及制备方法和用途，该类化合物经体外活性筛选结果表明：有5个化合物对Hela人宫颈癌细胞有一定的抑制活性；有1个化合物对HT-29人结肠癌细胞有一定的抑制活性。
背景技术
根据世界卫生组织(WHO)在2019年的统计评估，癌症已成为统计在列的183个国家中的112个国家国民70岁前死亡的第一或第二大死因，另外也是23个国家中排名第三或第四的主要死因。并且在我国的十大致死病因中，癌症也占了其中四项，前四项癌症患病率约为1.111‰。因此癌症已成为造成人类死亡的主要原因，同时也是提高世界各国平均寿命的重要障碍。
由此，针对各种癌症的新药研发、对已有抗肿瘤药物新应用的探索发现以及对其新临床治疗策略的研究是重要和迫切的任务。为了取得更好的疗效，对传统抗肿瘤药物的结构进行修饰改造以增加靶向性、降低毒性，同时探索新的生物靶点，实现联合给药特或高效化治疗成为新的研究方向。
杂环化合物是药物分子中的重要结构单元，因其具有良好的生物活性在药物化学占据着十分重要的地位。含氮杂环对生命科学具有重要意义，因为它们种类丰富，且具有多样化的生物活性，氮杂环化合物一直对有机合成化学工作者和药物化学工作者有着强烈的吸引力。科学家们从不同的角度对大量的氮杂环化合物进行了不断的研究，从而发现了它们在药物研究和药物中的应用。含氮杂环具有在人体中的稳定性和高选择性，以及氮原子易于通过氢键与DNA结合的等特点8在药物中大量存在，据统计约60％的有机小分子药物中具有含氮杂环。
三氮唑是一类重要的五元杂环，为两个碳原子和三个氮原子构成的五元环；三唑化合物主要分为1,2,3-三唑类和1,2,4-三唑两大类。1,2,3-三氮唑类化合物因为氢键形成、偶极-偶极和π-π堆叠相互作用等特征，引起众多有机化学者和药物化学者的极大关注，相关研究工作包括其合成方法日趋增多10-14。尤其是随着一系列1,2,3-三唑类化合物成功用于临床和农业生产，1,2,3-三唑类化合物的研发成为近年来研究的热点领域之一。而且研究表明1,2,3-三唑类化合物具有抗癌、抗炎、抗结核、抗微生物、抗病毒等多种活性。
因此，从三氮唑类化合物的生物活性可以看出，寻找和探索这些化合物的合成方法对于寻找先导化合物具有较大的理论和应用价值。
本发明以常见的试剂为起始原料，经三步反应合成了21个三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物，活性筛选结果表明：有5个化合物对Hela人宫颈癌细胞有一定的抑制活性；有1个化合物对HT-29人结肠癌细胞有一定的抑制活性。
参考文献：
1.World Health Organization(WHO).Global health estimates:Leadingcauses of death,2000-2019.WHO；2020..https://www.who.int/data/gho/data/themes/ mortality-and-global-health-estimates/ghe-leading-causes-of-death.
2.Taylor,A.P.；Robinson,R.P.；Fobian,Y.M.；Blakemore,D.C.；Jones,L.H.；Fadeyi,O.,Modern advances in heterocyclic chemistry in drugdiscovery.Org.Biomol.Chem.2016,14(28),6611-6637
3.Pearce,S.J.D.D.,The importance of heterocyclic compounds in anti-cancer drug design.Drug Discovery 2017,67:155-159.
4.Gomtsyan,A.,Heterocycles in drugs and drug discovery.ChemHeterocycl Compd(N Y)2012,48(1):7-10.
5.Heravi,M.M.；Zadsirjan,V.,Prescribed drugs containing nitrogenheterocycles:an overview.Rsc.Adv.2020,10(72):44247-44311.
6.Vitaku,E.；Smith,D.T.；Njardarson,J.T.,Analysis of the structuraldiversity,substitution patterns,and frequency of nitrogen heterocycles amongU.S.FDA approved pharmaceuticals.J.Med.Chem.2014,57(24):10257-74.
7.Jampilek,J.,Heterocycles in Medicinal Chemistry.Molecules,2019,24(21):3839.
8.Ozkay,Y.；Isikdag,I.；Incesu,Z.；Akalin,G.,Synthesis of 2-substituted-N-[4-(1-methyl-4,5-diphenyl-1H-imidazole-2-yl)phenyl]acetamide derivativesand evaluation of their anticancer activity.Eur.J.Med.Chem.2010,45(8),3320-3328.
9.Sahu,J.K.；Ganguly,S.；Kaushik,A.,Triazoles:A valuable insight intorecent developments and biological activities.Chin.J.Nat.Med,2013,11(5):456-465.
10.Bonandi,E.；Christodoulou,M.S.；Fumagalli,G.；Perdicchia,D.；Rastelli,G.；Passarella,D.,The 1,2,3-triazole ring as a bioisostere in medicinalchemistry.Drug Discov.Today 2017,22(10):1572-1581.
11.Bozorov,K.；Zhao,J.；Aisa,H.A.,1,2,3-Triazole-containing hybrids asleads in medicinal chemistry:A recent overview.Bioorg.Med.Chem.2019,27(16):3511-3531.
12.Xu,Z.；Zhao,S.J.；Liu,Y.,1,2,3-Triazole-containing hybrids aspotential anticancer agents:Current developments,action mechanisms andstructure-activity relationships.Eur.J.Med.Chem.2019,183,111700.
13.Hosseinnejad,T.；Ebrahimpour-Malmir,F.；Fattahi,B.,Computationalinvestigations of click-derived 1,2,3-triazoles as keystone ligands forcomplexation with transition metals:a review.Rsc.Adv.2018,8(22),12232-12259.
14.Dheer,D.；Singh,V.；Shankar,R.,Medicinal attributes of 1,2,3-triazoles:Current developments.Bioorg.Chem.2017,71,30-54.
本发明在国内外有关专利、文献综合分析的基础上，合成了系列三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物并研究了这些化合物对Hela人宫颈癌细胞、HT-29人结肠癌细胞、MCF-7乳腺癌细胞的抑制活性，以供后期发现疗效显著、靶点明确的抗肿瘤活性的候选药物。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物及制备方法和用途，该类化合物以不同取代苯胺为初始原料，在盐酸和亚硝酸钠的作用下与叠氮化钠发生反应生成相应的苯基叠氮化合物(a1-a7)，接着与氰基乙酸乙酯在新制乙醇钠的作用下得到二环三唑类化合物(b1-b7)，然后在三氯氧磷作用下，分别和吡咯烷酮、戊内酰胺和ε-己内酰胺反应成环得三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物(c1-c21)；并考察了21个化合物对人结肠癌细胞(HT-29)、人宫颈癌细胞(HeLa)和人乳腺癌细胞(MCF-7)抑制活性。结果显示：化合物c2,c5,c6,c9,c17对Hela人宫颈癌细胞有一定的抑制活性；化合物c8对HT-29人结肠癌细胞有一定的抑制活性。
本发明所述的一种三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物及制备方法和用途，其结构式为：
其中：
化合物c1为3-(3,4-二氯苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮；
化合物c2为3-(3,4-二氯苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮；
化合物c3为3-(3,4-二氯苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮；
化合物c4为3-(4-溴苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮
化合物c5为3-(4-溴苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮
化合物c6为3-(4-溴苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮
化合物c7为3-(4-氯苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮；
化合物c8为3-(4-氯苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮；
化合物c9为3-(4-氯苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮；
化合物c10为3-(4-氟苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮；
化合物c11为3-(4-氟苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮；
化合物c12为3-(4-氟苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮；
化合物c13为3-(4-氰基苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮；
化合物c14为3-(4-氰基苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮；
化合物c15为3-(4-氰基苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮；
化合物c16为3-(4-甲基苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮；
化合物c17为3-(4-甲基苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮；
化合物c18为3-(4-甲基苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮；
化合物c19为3-(4-甲基苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮；
化合物c20为3-(4-甲基苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮；
化合物c21为3-(4-甲基苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮。
所述三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物的制备方法，按下列步骤进行：
a、将不同取代苯胺与盐酸在冰浴中溶解，然后将亚硝酸钠溶于水后逐滴加入，充分搅拌后，滴加叠氮化钠水溶液并在室温下搅拌，反应完全后，用乙酸乙酯萃取，并用饱和食盐水洗涤，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到粗产物a1-a7；
b、将氰基乙酸乙酯和步骤a得到的粗产物a1-a7搅拌后逐滴加入新配制的乙醇钠溶液中，反应逐渐有固体析出，TLC监测反应，叠氮化合物基本反应完全后，结束反应，减压除去残留的乙醇，向反应液中加入饱和NH4Cl水溶液，用二氯甲烷萃取，有机层经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后，减压条件下浓缩，得到固体产物，再用乙醇重结晶得到淡黄色或浅白色固体二环类化合物b1-b7；
c、将步骤b制备得到的二环类化合物b1-b7溶解于1,4-二氧六环中，然后加入无水三氯氧磷，常温下搅拌，加入相应的内酰胺，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，在减压条件下浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比1-3:1石油醚和乙酸乙酯，分别得到目标三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物c1-c21。
所述三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物中的c2,c5,c6,c9,c17在抗Hela人宫颈癌的药物中的用途。
所述三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物中的c8在抗HT-29人结肠癌的药物中的用途。
本发明所述的三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物的制备方法，按下列步骤进行：
化合物a1-a7的制备：
a、在装有磁性搅拌棒的250mL圆底烧瓶中，将不同取代苯胺30mmol与HCl 6M，50mL在冰浴中溶解，然后将亚硝酸钠2.8g，40mmol溶于25mL水后逐滴加入，充分搅拌0.5h，滴加50mL叠氮化钠2.6g，44mmol水溶液，在室温下搅拌至反应完全后，用乙酸乙酯萃取混合物，并用饱和食盐水洗涤，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到粗产物a1-a7；无需进一步纯化可直接使用；
化合物b1-b7的制备：
b、乙醇钠的制备：取0.26g金属钠，用石油醚洗净滤纸擦干，剪碎缓慢后溶于15mL无水乙醇中，待全部溶解后备用；
c、向装有磁子的250mL反应瓶中依次加入氰基乙酸乙酯1.17mL，0.11mol，步骤a得到的不同取代的苯基叠氮a1-a7 0.1mol，搅拌下逐滴加入新制的乙醇钠溶液，反应逐渐有固体析出，TLC监测反应，叠氮化合物基本反应完全后结束反应，减压旋蒸除去残留的乙醇后，向反应液中加入饱和NH4Cl水溶液，用二氯甲烷萃取，有机层经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压条件下浓缩，得到固体产物，再用乙醇重结晶得到淡黄色或浅白色固体产物b1-b7；
化合物c1-c21的制备：
d、将步骤c得到的固体产物b1-b7 0.4mmol溶解于1,4-二氧六环2mL中，然后加入无水三氯氧磷0.8mmol，73μL常温下搅拌10min后，加入内酰胺0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压条件下浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比1:1-3:1石油醚和乙酸乙酯，得到三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物c1-c21。
本发明所述的三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物，是以不同取代的苯胺为起始原料，先反应合成不同取代的苯基叠氮，然后再得到相应的苯基三氮唑，接着在三氯氧磷作用下和内酰胺反应得到三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物，其合成路线如下：
具体实施方式
依据实施例对本发明进一步说明，但本发明不仅限于这些实施例；
试剂：所有试剂均为市售的分析纯。
实施例1
化合物a1-a7的制备
在装有磁力搅拌棒的250mL圆底烧瓶中，将不同取代苯胺30mmol与HCl6N，50mL在冰浴中溶解，然后逐滴加入亚硝酸钠2.8g，40mmol溶于25mL水的溶液，充分搅拌0.5h，滴加50mL叠氮化钠2.6g，44mmol水溶液，在室温下搅拌至反应完全，用乙酸乙酯萃取混合物，并用饱和食盐水洗涤，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到粗产物a1-a7，无需进一步纯化可直接使用；各粗产物a1-a7的名称为：
化合物a1为3,4-二氯苯基叠氮；
化合物a2为4-溴苯基叠氮；
化合物a3为4-氯苯基叠氮；
化合物a4为4-氟苯基叠氮；
化合物a5为4-氰基苯基叠氮；
化合物a6为4-甲基苯基叠氮；
化合物a7为4-乙基苯基叠氮。
实施例2
化合物b1-b7的制备：
乙醇钠的制备：取0.26g金属钠，用石油醚洗净滤纸擦干，剪碎缓慢后溶于15mL无水乙醇中，待全部溶解后备用；
向装有磁子的250mL反应瓶中依次加入氰基乙酸乙酯1.17mL，0.11mol、实施例1得到的苯基叠氮a1-a7 0.1mol，搅拌下逐滴加入配制的乙醇钠溶液，反应逐渐有固体析出，TLC监测反应，叠氮化合物基本反应完全后结束反应，减压除去残留的乙醇后，向反应液中加入饱和NH4Cl水溶液，用二氯甲烷萃取，有机层经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后，减压条件下浓缩，得到固体产物，再用乙醇重结晶得到淡黄色或浅白色固体产物b1-b7；其中各名称为：
化合物b1为1-(3,4-二氯苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑；
化合物b2为1-(4-溴苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑；
化合物b3为1-(4-氯苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑；
化合物b4为1-(4-氟苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑；
化合物b5为1-(4-氰基苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑；
化合物b6为1-(4-甲基苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑；
化合物b7为1-(4-乙基苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑。
实施例3
化合物c1的制备：
将实施例2得到的b1为1-(3,4-二氯苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑120.5mg，0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg，0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入吡咯烷酮37.4mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比1:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c1为3-(3,4-二氯苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮，产率23.6％，淡黄色固体，熔点225-226℃；
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.35(d,J＝2.5Hz,1H),8.07(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.64(d,J＝8.8Hz,1H),4.28(t,2H),3.27(t,J＝8.0Hz,2H),2.47–2.34(m,2H).HRMS(ESI)cacld for C13H9Cl2N5O[M+H]+ 322.0257,found 322.0257。
实施例4
化合物c2的制备：
将实施例2得到的b1为1-(3,4-二氯苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑120.5mg，0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入戊内酰胺43.6mg，0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比2:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c2为3-(3,4-二氯苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮，产率22.3％，淡黄色固体，熔点190-191℃；
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.40(d,J＝2.5Hz,1H),8.11(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.64(d,J＝8.7Hz,1H),4.16(t,J＝6.1Hz,2H),3.09(t,J＝6.6Hz,2H),2.02(dq,J＝19.0,6.6Hz,4H).HRMS(ESI)cacld for C14H11Cl2N5O[M+H]+ 336.0413,found 336.0411。
实施例5
化合物c3的制备：
将实施例2得到的b1为1-(3,4-二氯苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑120.5mg，0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入ε-己内酰胺49.8mg，0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比3:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c3为3-(3,4-二氯苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮，产率24.6％，淡黄色固体，熔点182-183℃；
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.40(d,J＝2.4Hz,1H),8.11(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.64(d,J＝8.8Hz,1H),4.46(t,2H),3.17(t,2H),1.92–1.88(m,4H),1.86–1.80(m,2H).HRMS(ESI)cacld for C15H13Cl2N5O[M+H]+ 350.0570,found 350.0572。
实施例6
化合物c4的制备：
将实施例2得到的b2为1-(4-溴苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑125.5mg，0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入吡咯烷酮37.4mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比1:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c4为3-(4-溴苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮，产率25.3％，淡黄色固体，熔点212-213℃；
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.02(d,J＝8.6Hz,2H),7.69(d,J＝8.5Hz,2H),4.28(t,J＝7.1Hz,2H),3.25(t,J＝7.8Hz,2H),2.40(p,J＝7.4Hz,2H).HRMS(ESI)cacldfor C13H10BrN5O[M+H]+ 332.0141,found 332.0145。
实施例7
化合物c5的制备：
将实施例2得到的b2为1-(4-溴苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑125.5mg，0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg，0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入戊内酰胺43.6mg，0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比2:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c5为3-(4-溴苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮，产率25.3％，淡黄色固体，熔点198-199℃；
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.06(d,J＝8.8Hz,2H),7.68(d,J＝8.8Hz,2H),4.15(t,J＝6.1Hz,2H),3.06(t,J＝6.6Hz,2H),2.01(dq,J＝20.2,6.7Hz,4H).HRMS(ESI)cacld for C14H12BrN5O[M+H]+ 346.0298,found 346.0303。
实施例8
化合物c6的制备：
将实施例2得到的b2为1-(4-溴苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑125.5mg，0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg，0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入ε-己内酰胺49.8mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比3:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c6为3-(4-溴苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮，产率24.8％，淡黄色固体，熔点187-188℃；
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.07(d,J＝8.8Hz,2H),7.69(d,J＝8.8Hz,2H),4.45(t,2H),3.15(t,2H),1.91–1.80(m,6H).HRMS(ESI)cacld for C15H14BrN5O[M+H]+360.0454,found 360.0457。
实施例9
化合物c7的制备：
将实施例2得到的b3为1-(4-氯苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑106.5mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中加反应瓶中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入吡咯烷酮37.4mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比1:1的石油醚:乙酸乙酯＝，得到化合物c7为3-(4-氯苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮，产率26.6％，淡黄色固体，熔点206-207℃；
1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ8.06(d,J＝8.8Hz,2H),7.52(d,J＝8.8Hz,2H),4.27(t,J＝7.3Hz,2H),3.24(t,J＝8.0Hz,2H),2.39(p,J＝7.8Hz,2H).HRMS(ESI)cacldfor C13H10ClN5O[M+H]+ 288.0647,found 288.0648。
实施例10
化合物c8的制备：
将实施例2得到的b3为1-(4-氯苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑106.5mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中加反应瓶中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入戊内酰胺43.6mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比2:1的石油醚:乙酸乙酯＝，得到化合物c8为3-(4-氯苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮，产率25.7％，淡黄色固体，熔点187-188℃；
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.12(d,J＝8.8Hz,2H),7.53(d,J＝8.8Hz,2H),4.16(t,J＝6.0Hz,2H),3.06(t,J＝6.6Hz,2H),2.08–1.95(m,4H).HRMS(ESI)cacld forC14H12ClN5O[M+H]+ 302.0803,found 302.0805。
实施例11
化合物c9的制备：
将实施例2得到的b3为1-(4-氯苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑106.5mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中加反应瓶中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入ε-己内酰胺49.8mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比3:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c9为3-(4-氯苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮，产率26.1％，淡黄色固体，熔点172-173℃；
1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ8.13(d,J＝8.8Hz,2H),7.54(d,J＝8.8Hz,2H),4.45(t,J＝5.1Hz,2H),3.15(t,2H),1.91–1.80(m,6H).HRMS(ESI)cacld for C15H14ClN5O[M+H]+ 316.0960,found 316.0961。
实施例12
化合物c10的制备：
将实施例2得到的b4为1-(4-氟苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑100.1mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中加反应瓶中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入吡咯烷酮37.4mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压条件下浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比1:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c10为3-(4-氟苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮，产率24.6％，淡黄色固体，熔点175-176℃；
1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ8.06(dd,J＝9.0,4.6Hz,2H),7.27–7.25(m,2H),4.27(t,J＝7.3Hz,2H),3.24(t,J＝7.9Hz,2H),2.39(p,J＝7.7Hz,2H).HRMS(ESI)cacldfor C13H10FN5O[M+H]+ 272.0942,found 272.0943。
实施例13
化合物c11的制备：
将实施例2得到的b4为1-(4-氟苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑100.1mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中加反应瓶中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入戊内酰胺43.6mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比2:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c11为3-(4-氟苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮，产率24.9％，淡黄色固体，熔点169-170℃；
1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ8.11(dd,J＝8.8,4.7Hz,2H),7.25(s,2H),4.16(t,J＝6.1Hz,2H),3.05(t,J＝6.7Hz,2H),2.04(p,J＝6.2Hz,2H),1.97(p,J＝6.8Hz,2H).HRMS(ESI)cacld for C14H12FN5O[M+H]+ 286.1099,found 286.1099。
实施例14
化合物c12的制备：
将实施例2得到的b4为1-(4-氟苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑100.1mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中加反应瓶中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入ε-己内酰胺49.8mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压条件下浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比3:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c12为3-(4-氟苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮，产率23.7％，淡黄色固体，熔点157-158℃；
1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ8.15–8.10(m,2H),7.29–7.26(m,2H),4.46(t,J＝8.2Hz,2H),3.14(t,J＝5.2Hz,2H),1.91–1.80(m,6H).HRMS(ESI)cacld for C15H14FN5O[M+H]+ 300.1255,found 300.1256。
实施例15
化合物c13的制备：
将实施例2得到的b5为1-(4-氰基苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑102.9mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入吡咯烷酮37.4mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比1:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c13为3-(4-氰基苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮，产率27.2％，淡黄色固体，熔点190-191℃；
1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ8.42(d,J＝8.4Hz,2H),7.87(d,J＝8.4Hz,2H),4.30(t,J＝7.4Hz,2H),3.28(t,J＝8.0Hz,2H),2.41(p,J＝7.7Hz,2H).HRMS(ESI)cacldfor C14H10N6O[M+H]+ 279.0989,found 279.0991。
实施例16
化合物c14的制备：
将实施例2得到的b5为1-(4-氰基苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑102.9mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入戊内酰胺43.6mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比2:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c14为3-(4-氰基苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮，产率26.4％，淡黄色固体，熔点188-189℃；
1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ8.46(d,J＝8.6Hz,2H),7.87(d,J＝8.6Hz,2H),4.17(t,J＝6.2Hz,2H),3.09(t,J＝6.7Hz,2H),2.06(p,J＝5.9Hz,2H),2.00(p,J＝6.5Hz,2H).HRMS(ESI)cacld for C15H12N6O[M+H]+ 293.1145,found 293.1146。
实施例17
化合物c15的制备：
将实施例2得到的b5为1-(4-氰基苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑102.9mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入ε-己内酰胺49.8mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比3:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c15为3-(4-氰基苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮，产率26.1％，淡黄色固体，熔点178-179℃；
1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ8.46(d,J＝8.5Hz,2H),7.87(d,J＝8.5Hz,2H),4.47(t,2H),3.18(t,J＝5.1Hz,2H),1.92–1.82(m,6H).HRMS(ESI)cacld for C16H14N6O[M+H]+ 307.1302,found 307.1305。
实施例18
化合物c16的制备：
将实施例2得到的b6为1-(4-甲基苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑98.5mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入吡咯烷酮37.4mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比1:1石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c16为3-(4-甲基苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮，产率24.5％，淡黄色固体，熔点169-170℃；
1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ7.91(d,J＝8.7Hz,2H),7.07(d,J＝8.8Hz,2H),4.27(t,J＝7.3Hz,2H),3.88(s,3H),3.22(t,J＝7.9Hz,2H),2.37(p,J＝7.7Hz,2H).HRMS(ESI)cacld for C14H13N5O2[M+H]+ 284.1142,found 284.1143。
实施例19
化合物c17的制备：
将实施例2得到的b6为1-(4-甲基苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑98.5mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入戊内酰胺43.6mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压条件下浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比2:1石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c17为3-(4-甲基苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮，产率25.3％，淡黄色固体，熔点186-185℃；
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ7.95(d,J＝8.4Hz,2H),7.35(d,J＝8.1Hz,2H),4.15(t,J＝6.1Hz,2H),3.05(t,J＝6.6Hz,2H),2.44(s,3H),2.00(dp,J＝20.0,6.6Hz,4H).HRMS(ESI)cacld for C15H15N5O2[M+H]+ 298.1299,found 298.1300。
实施例20
化合物c18的制备：
将实施例2得到的b6为1-(4-甲基苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑98.5mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入ε-己内酰胺49.8mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压条件下浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比3:1石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c18为3-(4-甲基苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮，产率26.2％，淡黄色固体，熔点213-214℃；
1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ7.98(d,J＝8.9Hz,2H),7.07(d,J＝8.9Hz,2H),4.45(t,2H),3.88(s,3H),3.13(t,2H),1.89–1.80(m,6H).HRMS(ESI)cacld for C16H17N5O2[M+H]+ 312.1455,found 312.1456。
实施例21：化合物c19的制备
将实施例2得到的b7为1-(4-乙基苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑104.1mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中加反应瓶中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入吡咯烷酮37.4mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比1:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c19为3-(4-乙基苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮，产率25.7％，淡黄色固体，熔点233-134℃；
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ7.92(d,J＝8.2Hz,2H),7.39(d,J＝8.2Hz,2H),4.27(t,J＝7.3Hz,2H),3.23(t,J＝8.0Hz,2H),2.73(q,J＝7.6Hz,2H),2.38(p,J＝7.8Hz,2H),1.28(t,J＝8.1,7.2Hz,3H).HRMS(ESI)cacld for C15H15N5O[M+H]+ 282.1349,found282.1351。
实施例22
化合物c20的制备：
将实施例2得到的b7为1-(4-乙基苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑104.1mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中加反应瓶中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入戊内酰胺43.6mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压条件下浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比2:1石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c20为3-(4-乙基苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮，产率25.9％，淡黄色固体，熔点148-149℃；
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ7.97(d,J＝8.2Hz,2H),7.38(d,J＝8.2Hz,2H),4.15(t,J＝6.1Hz,2H),3.05(t,J＝6.6Hz,2H),2.73(q,J＝7.6Hz,2H),2.00(dq,J＝20.0,6.4Hz,4H),1.29(t,J＝7.6Hz,3H).HRMS(ESI)cacld for C16H17N5O[M+H]+ 296.1506,found296.1508。
实施例23
化合物c21的制备：
将实施例2得到的b7为1-(4-乙基苯基)-4-乙氧羰基-5氨基三氮唑104.1mg,0.4mmol溶解在1,4-二氧六环2mL中加反应瓶中，然后加入无水三氯氧磷122.7mg,0.8mmol，常温下搅拌10min后，加入ε-己内酰胺49.8mg,0.44mmol，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，减压条件下浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比3:1的石油醚:乙酸乙酯，得到化合物c21为3-(4-乙基苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮，产率26.1％，淡黄色固体，熔点166-167℃；
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ7.98(d,J＝8.4Hz,2H),7.38(d,J＝8.3Hz,2H),4.45(t,2H),3.14(t,2H),2.74(q,J＝7.6Hz,2H),1.91–1.80(m,6H),1.29(t,J＝7.6Hz,3H).HRMS(ESI)cacld for C17H19N5O[M+H]+ 310.1662,found 310.1662。
实施例24
实施例3-23得到的三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物的抗肿瘤活性筛选：
MTT法检测细胞存活率：
实验过程：将生长在对数生长期的细胞，吸去培养基，PBS洗1次，胰酶消化，加培养基终止，轻轻吹打，计数，以相应的细胞密度接种在96孔板中(100μL/孔)，过夜培养，加化合物(20μL/孔)，每一化合物设浓度梯度，每一浓度设3复孔，CO2温度37℃培养箱内培养48小时，吸弃旧培养基，加入MTT 100μL，再继续培养2h，温度37℃孵育2小时后，使用MB酶标仪测570nm处的光吸收值(OD)；
计算公式：
细胞活力百分比％＝(化合物OD-空白OD/对照组OD-空白OD)×100％
细胞抑制率％＝1-细胞活力％＝[1-(化合物OD-空白OD/对照组OD-空白OD)]×100％，用graphpad，经公式拟合得IC50；
样品处理：样品用DMSO溶解，低温保存，DMSO在最终体系中的浓度控制在不影响检测活性的范围之内；
数据处理及结果说明：初筛选择单浓度条件下，例如单体化合物浓度50μM；提取物50μg/μL，对样品的活性进行测试；对于在一定条件下表现出活性的样品，例如抑制率％(Inhibition)大于50％，进一步测试活性剂量依赖关系，即IC50值，通过样品活性对样品浓度进行非线性拟和得到，计算所用软件为Graphpad Prism 4；通常情况下，每个样品在测试中均设置复孔(n≥3)，在结果中以标准偏差(Standard Deviation,SD)表示；
表1为本发明三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物c1-c21抗肿瘤活性结果：
从表中可以看出：本发明所述的三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物c1-c21中，化合物c2,c5,c6,c9,c17对Hela人宫颈癌细胞有一定的抑制活性；化合物c8对HT-29人结肠癌细胞有一定的抑制活性。
Claims (4)
1.一种三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物，其特征在于该类化合物的结构如下所示：
其中：
化合物c1为3-(3,4-二氯苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮；
化合物c2为3-(3,4-二氯苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮；
化合物c3为3-(3,4-二氯苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮；
化合物c4为3-(4-溴苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮
化合物c5为3-(4-溴苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮
化合物c6为3-(4-溴苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮
化合物c7为3-(4-氯苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮；
化合物c8为3-(4-氯苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮；
化合物c9为3-(4-氯苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮；
化合物c10为3-(4-氟苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮；
化合物c11为3-(4-氟苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮；
化合物c12为3-(4-氟苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮；
化合物c13为3-(4-氰基苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮；
化合物c14为3-(4-氰基苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮；
化合物c15为3-(4-氰基苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮；
化合物c16为3-(4-甲基苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮；
化合物c17为3-(4-甲基苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮；
化合物c18为3-(4-甲基苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮；
化合物c19为3-(4-甲基苯基)-3,5,6,7-四氢-9H-吡咯[1,2-a][1,2,3]三氮唑[4,5-d]嘧啶-9-酮；
化合物c20为3-(4-甲基苯基)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶[1,2-a]三氮唑[4,5-d]嘧啶-10(3H)-酮；
化合物c21为3-(4-甲基苯基)-3,5,6,7,8,9-六氢-11H-吡啶[1,2,3]三氮唑[4',5',4,5]嘧啶[1,2-a]氮杂
-11-酮。
2.根据权利要求1所述的三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物的制备方法，其特征在于按下列步骤进行：
a、将不同取代苯胺与盐酸在冰浴中溶解，然后将亚硝酸钠溶于水后逐滴加入，充分搅拌后，滴加叠氮化钠水溶液并在室温下搅拌，反应完全后，用乙酸乙酯萃取，并用饱和食盐水洗涤，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到粗产物a1-a7；
b、将氰基乙酸乙酯和步骤a得到的粗产物a1-a7搅拌后逐滴加入新配制的乙醇钠溶液中，反应逐渐有固体析出，TLC监测反应，叠氮化合物基本反应完全后，结束反应，减压除去残留的乙醇，向反应液中加入饱和NH4Cl水溶液，用二氯甲烷萃取，有机层经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后，减压条件下浓缩，得到固体产物，再用乙醇重结晶得到淡黄色或浅白色固体二环类化合物b1-b7；
c、将步骤b制备得到的二环类化合物b1-b7溶解于1,4-二氧六环中，然后加入无水三氯氧磷，常温下搅拌，加入相应的内酰胺，加热回流，TLC监测反应完全后，降至室温，在减压条件下浓缩，采用柱层析梯度洗脱，洗脱剂为体积比1-3:1石油醚和乙酸乙酯，分别得到目标三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物c1-c21。
3.一种如权利要求1所述的三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物中的c2,c5,c6,c9,c17在抗Hela人宫颈癌的药物中的用途。
4.一种如权利要求1所述的三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物中的c8在抗HT-29人结肠癌的药物中的用途。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110324068.5A CN113061138B (zh) | 2021-03-26 | 2021-03-26 | 一种三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物及制备方法和用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110324068.5A CN113061138B (zh) | 2021-03-26 | 2021-03-26 | 一种三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物及制备方法和用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113061138A true CN113061138A (zh) | 2021-07-02 |
| CN113061138B CN113061138B (zh) | 2023-05-05 |
Family
ID=76563720
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110324068.5A Active CN113061138B (zh) | 2021-03-26 | 2021-03-26 | 一种三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物及制备方法和用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113061138B (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113831296A (zh) * | 2021-07-27 | 2021-12-24 | 北京理工大学 | 1-苯基-3-(4-(嘧啶-5-基氨基)苯基)丙-2-烯-1-酮类化合物及其用途 |
| CN113943308A (zh) * | 2021-12-09 | 2022-01-18 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种三环嘧啶类衍生物及用途 |
| CN114106000A (zh) * | 2021-12-15 | 2022-03-01 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种咪唑并[4,5-d]嘧啶酮三环类衍生物及抗肿瘤用途 |
| CN114478549A (zh) * | 2022-02-18 | 2022-05-13 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种吡唑并[3,4-d]吡咯(啶)并[1,2-a]嘧啶酮亚芳基类衍生物及其用途 |
| CN114478550A (zh) * | 2022-02-24 | 2022-05-13 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种三环吡咯并[2,3-d]嘧啶酮类衍生物及用途 |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105418609A (zh) * | 2015-12-31 | 2016-03-23 | 山东大学 | 4-(1,2,3-三氮唑取代苯胺基)-吡啶骈嘧啶酮衍生物及其制备方法与应用 |
| CN106749316A (zh) * | 2016-11-29 | 2017-05-31 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种氮杂环噻吩[2,3‑d]嘧啶酮‑3‑甲酰胺类衍生物及用途 |
| CN106749317A (zh) * | 2016-11-29 | 2017-05-31 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种氮杂环噻吩[2,3‑d]嘧啶酮苯磺酰胺类衍生物及用途 |
| CN106749271A (zh) * | 2016-12-07 | 2017-05-31 | 青岛科技大学 | 一类[1,2,4]‑三氮唑并[1,5‑a]嘧啶酮类杂环化合物、其制备方法及其用途 |
| CN107602563A (zh) * | 2017-09-19 | 2018-01-19 | 马鞍山德鸿生物技术有限公司 | 百草枯催吐剂三氮唑嘧啶酮的制备方法 |
| CN109503588A (zh) * | 2018-11-15 | 2019-03-22 | 江苏诺恩作物科学股份有限公司 | 一种三氮唑嘧啶酮制备方法 |
| CN110251518A (zh) * | 2019-06-28 | 2019-09-20 | 青岛科技大学 | 1,2,4-三氮唑类杂环化合物在制备预防或治疗与中枢系统相关疾病药物中的应用 |
-
2021
- 2021-03-26 CN CN202110324068.5A patent/CN113061138B/zh active Active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105418609A (zh) * | 2015-12-31 | 2016-03-23 | 山东大学 | 4-(1,2,3-三氮唑取代苯胺基)-吡啶骈嘧啶酮衍生物及其制备方法与应用 |
| CN106749316A (zh) * | 2016-11-29 | 2017-05-31 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种氮杂环噻吩[2,3‑d]嘧啶酮‑3‑甲酰胺类衍生物及用途 |
| CN106749317A (zh) * | 2016-11-29 | 2017-05-31 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种氮杂环噻吩[2,3‑d]嘧啶酮苯磺酰胺类衍生物及用途 |
| CN106749271A (zh) * | 2016-12-07 | 2017-05-31 | 青岛科技大学 | 一类[1,2,4]‑三氮唑并[1,5‑a]嘧啶酮类杂环化合物、其制备方法及其用途 |
| CN107602563A (zh) * | 2017-09-19 | 2018-01-19 | 马鞍山德鸿生物技术有限公司 | 百草枯催吐剂三氮唑嘧啶酮的制备方法 |
| CN109503588A (zh) * | 2018-11-15 | 2019-03-22 | 江苏诺恩作物科学股份有限公司 | 一种三氮唑嘧啶酮制备方法 |
| CN110251518A (zh) * | 2019-06-28 | 2019-09-20 | 青岛科技大学 | 1,2,4-三氮唑类杂环化合物在制备预防或治疗与中枢系统相关疾病药物中的应用 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| THASNIM PUTHIYEDATH等: "A click-generated triazole tethered oxazolone-pyrimidinone dyad: A highly selective colorimetric and ratiometric FRET based fluorescent probe for sensing azide ions", 《SENSORS AND ACTUATORS B: CHEMICAL》 * |
| 刘奇等: "1,2,3-三氮唑并［4,5-d］嘧啶酮三环类衍生物的合成及抗肿瘤活性研究", 《中国药物化学杂志》 * |
| 张自义等: "稠杂环化合物的研究（XVI）1-芳基-1,2,3-连三唑[4,5-e]嘧啶酮及哌啶/氢化吖辛因[1,2-b]嘧啶酮类化合物的合成", 《高等学校化学学报》 * |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113831296A (zh) * | 2021-07-27 | 2021-12-24 | 北京理工大学 | 1-苯基-3-(4-(嘧啶-5-基氨基)苯基)丙-2-烯-1-酮类化合物及其用途 |
| CN113943308A (zh) * | 2021-12-09 | 2022-01-18 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种三环嘧啶类衍生物及用途 |
| CN113943308B (zh) * | 2021-12-09 | 2023-11-10 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种三环嘧啶类衍生物及用途 |
| CN114106000A (zh) * | 2021-12-15 | 2022-03-01 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种咪唑并[4,5-d]嘧啶酮三环类衍生物及抗肿瘤用途 |
| CN114106000B (zh) * | 2021-12-15 | 2023-11-24 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种咪唑并[4,5-d]嘧啶酮三环类衍生物及抗肿瘤用途 |
| CN114478549A (zh) * | 2022-02-18 | 2022-05-13 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种吡唑并[3,4-d]吡咯(啶)并[1,2-a]嘧啶酮亚芳基类衍生物及其用途 |
| CN114478550A (zh) * | 2022-02-24 | 2022-05-13 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种三环吡咯并[2,3-d]嘧啶酮类衍生物及用途 |
| CN114478550B (zh) * | 2022-02-24 | 2023-11-24 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 一种三环吡咯并[2,3-d]嘧啶酮类衍生物及用途 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113061138B (zh) | 2023-05-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113061138B (zh) | 一种三氮唑[5,4-d]嘧啶酮三环类化合物及制备方法和用途 | |
| CN107056772A (zh) | 基于cereblon配体诱导BET降解的双功能分子及其制备和应用 | |
| CN112125911B (zh) | Cdk9抑制剂及其制备方法与应用 | |
| CN102603743A (zh) | 抗肿瘤的氮杂苯并[f]薁衍生物其制备方法及其用途 | |
| CN108864111A (zh) | 一种含苯并咪唑的Tr*ger’s base类化合物及其制备方法与应用 | |
| JP7420403B2 (ja) | キナーゼ阻害剤として使用される化合物およびその応用 | |
| CN112574216A (zh) | 一种化合物及其制备方法以及其在制备治疗抗癌药物中的应用 | |
| El-Assaly et al. | Synthesis, molecular docking studies, and antimicrobial evaluation of pyrano [2, 3-c] pyrazole derivatives | |
| CN113999211B (zh) | 一类特异性抗前列腺癌活性的含1,2,3-三氮唑的吲唑骨架衍生物 | |
| CN102060792B (zh) | 2′-胺基查尔酮唑类化合物及其吡唑啉和环丙基唑类衍生物、制备方法与用途 | |
| CN108864089A (zh) | 一种新型吲哚并吡啶酮药物分子及其制备方法和应用 | |
| CN110642864B (zh) | 含吡唑结构的螺[吲唑-吡唑啉]衍生物及制备方法与应用 | |
| CN110172058B (zh) | 7-氮杂螺[5.6]十二烷-10-酮类化合物及其制备方法与用途 | |
| CN111606888B (zh) | 吡咯类衍生物及其制备方法与应用 | |
| CN110759920A (zh) | 对甲氧基苯基取代含吡唑结构的螺[吲唑-吡唑啉]衍生物及其制备方法与应用 | |
| CN112300235B (zh) | 一种苯并咪唑衍生物bi321及其制备方法和应用 | |
| Shi et al. | Synthesis, Crystal Structure, and Antiproliferative Activity of Novel 7-Arylaminopyrazolo [1, 5-a] pyrimidine Derivatives Containing the Hydrazone Moiety | |
| CN110734442B (zh) | 3,4,5-三甲氧基苯基取代含吡唑结构的螺[吲唑-吡唑啉]衍生物及制备方法与应用 | |
| CN112375112B (zh) | 一种苯并咪唑衍生物bi361及其制备方法和应用 | |
| CN110724148B (zh) | 对氯苯基取代含吡唑结构的螺[吲唑-吡唑啉]衍生物及其制备方法与应用 | |
| CN111560013B (zh) | 一种自噬抑制剂及其应用 | |
| CN102058585A (zh) | 罗丹宁衍生物作为抗肿瘤药物的应用 | |
| CN110655522B (zh) | 邻氯苯基取代含吡唑结构的螺[吲唑-吡唑啉]衍生物及其制备方法与应用 | |
| CN111875605B (zh) | 含取代吡唑和β-咔啉单元的双酰胺类化合物的制备与应用 | |
| CN111718326B (zh) | 一种含喹啉结构的nnn型嘧啶腙钴(ii)配合物及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |