CN113018379A - 一种治疗肺结核的中药复方及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种治疗肺结核的中药复方，所述中药复方由如下重量百分比原料组成：白及1～91％、黄精3～93％和葎草6～96％。本发明制备的口服制剂可提高强化期和巩固期的肺部病灶吸收率，改善患者临床症状，无肝肾损害等不良反应，突破耐多药结核的新药技术瓶颈。

Description

一种治疗肺结核的中药复方及其制备方法
技术领域
本发明属于中药领域，具体涉及一种治疗肺结核的中药复方、口服制剂及制备方法。
背景技术
耐多药结核病/耐利福平肺结核(MDR-TB/RR-TB)是目前全世界面临的极为严峻的公共卫生问题，而MDR-TB发病率高、发现率低、管理难度大，使本已严峻的结核病防控形势面临更多挑战。且MDR-TB的治疗需被迫使用活性较差、毒性较高的二线抗结核药物，具有治疗费用高、治疗成功率低、病死率高等特点，这提示MDR-TB治疗难度大，需加强新药研发与应用。我国MDR-TB治疗成功率约为52％，与WHO制定的治疗成功率目标(75％)相差甚远。
目前，耐多药肺结核需要经过长期的治疗，患者的肝肾等重要脏器在治疗的过程中承受巨大负担，长期的治疗很容易对患者的机体产生严重的毒副作用，因此，探索一种安全、有效、能降低化疗药物毒副作用的辅助治疗药物或方法，将是改变耐药性肺结核临床治疗格局的重要举措。
中医药在治疗肺结核疾病方面具有悠久的历史和丰富的经验，可广泛应用于耐多药肺结核的各个阶段，但至今仍未无一种对耐多药肺结核具有显著疗效的新型中药制剂。
发明内容
针对现有技术中存在的上述不足，本发明的目的在于提供一种提高耐多药肺结核的治疗成功率，并减少抗结核化疗药物的不良反应，且无毒副作用、可广泛用于治疗各类型肺结核的中药复方口服制剂。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种治疗肺结核的中药复方，所述中药复方由如下重量百分比原料组成：白及1～91％、黄精3～93％和葎草6～96％。
本发明提供的治疗肺结核的中药复方“耐劳康”配方是基于老一辈中医药专家的临床经验与传承，在临床用于治疗各种证型的肺结核，尤其是耐药肺结核已经多年。配方中葎草：《本草纲目》记载其有“润三焦，消五谷，益五脏，除九虫，辟温疫”之功效。著名中医药学家陈源生先生传有治肺结核单方，用新鲜葎草二两(干品一两)，煎水加白糖服，连服一至三月，并说：“在医疗实践中，证明葎草对肺结核、肠结核、肾结核、淋巴结核等有显著的疗效”。药理实验研究证实，葎草提取物对结核杆菌具有明显的抗菌活性。黄精：《日华子本草》谓其能“补五劳七伤……益脾胃，润心肺”。药理研究发现，黄精煎液对结核杆菌有抑制作用。《滇南本草》记载白及能“补肺虚，止咳嗽，治肺痨咳血”，临床研究表明，白及治疗肺结核空洞出血，不仅有良好的止血作用，而且对结核病灶的吸收、空洞闭合、痰菌转阴等均有效。“耐劳康”配方有可靠的补益五脏、抗痨止咳、修复肺损功效。
进一步，所述中药复方由如下重量百分比原料组成：白及5-30％、黄精10-50％和葎草20-85％。
进一步，所述中药复方由如下重量百分比原料组成：白及5-15％、黄精10-30％和葎草55-75％。
上述治疗肺结核的中药复方采用如下制备方法获得：
(1)按上述配比称取白及，粉碎，过筛，得白及粉；
(2)按上述配比称取黄精和葎草，混合后，加5-10倍量水浸泡过夜，煎煮2-3次，每次煎煮时间1小时，合并提取液，滤过，得提取液Ⅰ；
(3)将步骤(2)制得的提取液Ⅰ浓缩至相对密度为1.10～1.30g/cm3，放置24小时，滤过，得滤液Ⅰ；
(4)将步骤(3)制得的滤液Ⅰ浓缩至相对密度为1.15～1.30g/cm3(监测密度温度为40°，以保证监测密度的准确性)加入所述白及粉，混匀，减压干燥，粉碎，得细粉，即可。
进一步，步骤(4)中减压压力为-0.1Mpa，干燥温度为60℃。为了更好的保存有效成分。
进一步，步骤(4)制得的细粉可制成颗粒剂、胶囊、粉剂或丸剂。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明制备的口服制剂(可命名为“耐劳康”)可提高强化期和巩固期的肺部病灶吸收率，改善患者临床症状，无肝肾损害等不良反应，突破耐多药结核的新药技术瓶颈。
附图说明
图1为患者服用抗结核药物后肝功能损害照片；
图2为采用本专利发明中药治疗后改善肺部病灶吸收率照片。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明方法进行详细说明。
下述实施例中的实验方法，如无特别说明，均为常规方法。
一、制备治疗肺结核的中药复方
实施例1
一种治疗肺结核的中药复方，由如下重量百分比原料组成：白及1％、黄精3％和葎草96％。
将上述治疗肺结核的中药复方制成口服片剂，该口服制剂采用如下方法制得：
⑴取白及，粉碎，过筛，得白及粉；
⑵将黄精和葎草混合后，加10倍量水浸泡过夜，煎煮三次，每次煎煮时间1小时，合并提取液，滤过，得提取液Ⅰ；
⑶将步骤⑵制得的提取液Ⅰ浓缩至相对密度为1.20g/cm3(40℃)，放置24小时，滤过，得滤液Ⅰ；
⑷将步骤⑶制得的滤液Ⅰ浓缩至相对密度为1.20g/cm3(40℃)，加入白及粉，混匀，减压干燥(60℃，－0.1Mpa)，粉碎，得细粉；
⑸将步骤(4)制得的细粉压制成片。
实施例2
一种治疗肺结核的中药复方，由如下重量百分比原料组成：白及10％、黄精15％和葎草75％。
将上述治疗肺结核的中药复方制成口服片剂，该口服制剂采用如下方法制得：
⑴取白及，粉碎，过筛，得白及粉；
⑵将黄精和葎草混合后，加10倍量水浸泡过夜，煎煮三次，每次煎煮时间1小时，合并提取液，滤过，得提取液Ⅰ；
⑶将步骤⑵制得的提取液Ⅰ浓缩至相对密度为1.20g/cm3(40℃)，放置24小时，滤过，得滤液Ⅰ；
⑷将步骤⑶制得的滤液Ⅰ浓缩至相对密度为1.20g/cm3(40℃)，加入白及粉，混匀，减压干燥(60℃，－0.1Mpa)，粉碎，得细粉；
⑸将步骤(4)制得的细粉压制成片。
实施例3
一种治疗肺结核的中药复方，由如下重量百分比原料组成：白及91％、黄精3％和葎草6％。
将上述治疗肺结核的中药复方制成口服片剂，该口服制剂采用如下方法制得：
⑴取白及，粉碎，过筛，得白及粉；
⑵将黄精和葎草混合后，加10倍量水浸泡过夜，煎煮三次，每次煎煮时间1小时，合并提取液，滤过，得提取液Ⅰ；
⑶将步骤⑵制得的提取液Ⅰ浓缩至相对密度为1.20g/cm3(40℃)，放置24小时，滤过，得滤液Ⅰ；
⑷将步骤⑶制得的滤液Ⅰ浓缩至相对密度为1.20g/cm3(40℃)，加入白及粉，混匀，减压干燥(60℃，－0.1Mpa)，粉碎，得细粉；
⑸将步骤(4)制得的细粉压制成片。
二、药毒性试验
KM小鼠30只，雌雄各半，按体重随机分为2组，其中溶媒对照组10只，本发明制备的耐劳康颗粒组20只。按一日内3次灌服给予纯化水或耐劳康颗粒，耐劳康颗粒剂量为66g生药/kg(最大浓度0.55g生药/ml，最大给药体积0.4ml/10g体重)。给药后观察其一般状况和死亡情况，每日观察1次，共观察15天。给药当天定义为试验第1天(D1)。
2.1试验设计
2.1.1供试品临床拟用有关资料
根据委托方提供资料可知：耐劳康颗粒功能主治为益气养阴，培土生金，抗痨杀虫，止咳止血。用于耐药肺结核患者。
2.1.2剂量设计理由
(1)委托方提供耐劳康颗粒临床用法为口服，用量为每次1袋(34g生药)，一日3次，每日剂量为102g生药。
(2)小鼠单次给药毒性试验预试结果：KM小鼠一日2次给予耐劳康颗粒最大浓度(0.55g生药/ml)，最大给药体积(0.4ml/10g)，未见明显毒性反应，未见动物出现死亡。
根据上述结果，本申请进行最大给药量测定，以耐劳康颗粒最大浓度(0.55g生药/ml)、最大给药体积(0.4ml/10g)进行给药，给药3次，给药剂量为66g生药/kg，另设溶媒对照组(纯化水)。
2.1.3剂量设计
具体剂量设计见表1。
表1剂量设计
Figure BDA0002989841930000061
2.2给药
2.2.1给药途径及选择理由
给药途径：灌胃给药，与临床使用途径一致。
给药方法：采用规格为1ml的注射器连接12号灌胃针进行灌胃给药，给药前摇匀。
2.2.2给药体积
给药体积为0.4ml/10g体重。给药体积通过给药当日禁食后动物体重进行换算。
2.2.3给药频率及选择理由
给药3次，间隔4h给药一次。
2.2.4给药周期
给药期：1天，给药3次。给药当天定义为试验第1天(D1)。
恢复期：14天。
2.3各种指标检测方法及频率
2.3.1一般状况观察
表2一般状况观察
Figure BDA0002989841930000071
2.3.3组织病理学观察及检测时间
实验期间死亡动物的观察：剖检后对主要脏器进行肉眼观察，如有异常，取出现异常的脏器固定、保存，做病理组织学检查。如死亡时间超过4小时，则只进行肉眼观察主要脏器，不做留存及病理组织学检查。
实验结束存活动物动物的观察：脱颈椎处死后迅速剖检，对主要脏器进行肉眼观察，如有异常，取出现异常的脏器固定、保存，做病理组织学检查。
表3组织病理学观察
Figure BDA0002989841930000072
4试验结果与讨论
4.1一般状况观察
检疫及适应性饲养期和试验期间，各组小鼠一般状况均未见明显异常，均未见动物死亡。
4.2解剖观察
试验第15天观察结束后，各组小鼠大体解剖观察，心、肝、脾、肺、肾、胃肠道、生殖系统等脏器或组织的颜色、形态、质地、大小均未见异常改变。
三、药效学研究
耐劳康颗粒，临床用于耐药肺结核患者，本研究通过小鼠实验，观察耐劳康颗粒的抗氧化作用及止咳作用，为临床用药提供参考依据。
3.1对正常小鼠的抗氧化作用(NLK-YX-1)
3.1.1实验方法
将检疫合格后的KM小鼠随机分为5组(雌雄各半，体重不超过均值20％)，即溶媒对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性对照组(维生素C)，每组10只。按组别给予相应药物(溶媒对照组给予相应体积的纯化水)，给药体积为0.4ml/10g体重，每日给药2次，连续给药7天。
末次给药后1小时眼眶取血，离心后分离血清，ELISA法检测以下指标：丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧物酶(GSH-PX)、过氧化脂质(LPO)。
3.1.2实验结果
给药后，与溶媒对照组比较，耐劳康颗粒高、中剂量组小鼠血清LPO明显降低，有统计学差异。高、中剂量组其余血清指标如SOD、CAT、GSH-PX有一定的升高趋势，MDA有一定的降低趋势。结果表明耐劳康颗粒有一定的抗氧化作用，具体见表4。
表4耐劳康颗粒对小鼠抗氧化作用的影响(
Figure BDA0002989841930000081
n＝10)
Figure BDA0002989841930000082
注：与溶媒对照组比较，*为P<0.05，**为P<0.01，后同。
3.2对小鼠的止咳作用(NLK-YX-2)
3.2.1实验方法
取检疫合格后的KM小鼠随机分为5组(雌雄各半，体重不超过均值20％)，即溶媒对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性对照组(右美沙芬)，每组10只。按组别给予相应药物(溶媒对照组给予相应体积的纯化水)，给药体积为0.4ml/10g体重，每日给药2次，连续给药7天。
于末次给药后30min将小鼠放入多功能引喘仪内，以25％氨气喷雾引咳15s，以小鼠腹肌收或缩胸，同时张大嘴为咳嗽指标，观察各组小鼠自喷雾开始至出现咳嗽的潜伏期及2min内的咳嗽次数，
3.2.2实验结果
给药后，与溶媒对照组比较，耐劳康颗粒高剂量组小鼠咳嗽潜伏期明显延长；耐劳康颗粒高、中剂量组小鼠咳嗽次数明显减少，有统计学差异。结果提示耐劳康颗粒对氨水诱导的小鼠咳嗽有明显的抑制作用，具体见表5。
表5耐劳康颗粒对小鼠咳嗽潜伏期及咳嗽次数的影响(
Figure BDA0002989841930000091
n＝10)
Figure BDA0002989841930000092
3.3小结
结核病(tuberculosis，TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，Mtb)感染引起的一种传染性疾病，也是目前由单一病原菌感染致死率最高的疾病。根据WHO发布的最新统计报告，2015年全球新发结核病病例高达1040万，约180万人死于结核病；中国作为结核病高负担国家之一，每年约13万人死于结核病。结核病严重威胁着人类的健康，早期诊断及有效的治疗是消灭结核病的关键。
由于结核病灶部位及循环系统中均存在着一定的氧化微环境，因而结核病的发生发展与氧化应激之间存在着一定的联系。正常情况下，生物体的氧化物与抗氧化物水平处于动态平衡之中，当机体受到内/外源刺激之后，可产生过多的氧化物，脂质过氧化物是不稳定的，其可分解形成一系列复杂的混合物，脂质过氧化化合物能破坏人体细胞正常生理功能与某些疾病的病理过程，脂质过氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)作为脂质过氧化的一种指标。而超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)具有抗氧化功能，能使机体清除氧化剂以保护机体免受内外源刺激造成的损伤。结果显示耐劳康颗粒能明显降低正常小鼠的血清LPO活性，其余血清指标如SOD、CAT、GSH-PX有一定的升高趋势，MDA有一定的降低趋势，表明耐劳康颗粒具有一定的抗氧化作用。同时结核病患者有明显的咳嗽症状，结果显示耐劳康颗粒能明显延长小鼠咳嗽潜伏期，减少小鼠咳嗽次数，提示耐劳康颗粒有明显的止咳作用。
在本实验条件下，耐劳康颗粒有明显的止咳作用及一定的抗氧化作用，为临床用药提供实验依据。
四、临床疗效观察
病例1：患者某某，男，50岁，因发现肺结核1年，予正规西医抗结核方案治疗1年，复查未愈，诊断为耐多药肺结核，遂于2020年09月21日就诊，刻诊：咳嗽，偶痰中带血，伴夜间潮热、盗汗，舌淡，苔黄厚，脉虚。既往糖尿病病史。中医诊断为肺痨，辨证为阴虚肺热证，予葎草90g、白芨15g、黄精15g，每日1剂，服用3月，患者无明显咳嗽，潮热、盗汗较前减轻，复查肝肾功能未见异常，胸部CT示陈旧性肺结核病灶。
病例2:患者杨某，男，44岁，既往“乙肝小三阳”病史；患者因“气短、乏力1月余”于2020年04月22日至昆明医科大学第一附属医院行胸部CT示(见图1)：右肺散在小结节、斑片影，伴右下胸膜增厚、少量胸腔积液；肝肾功能未见异常；诊断为肺结核，服用异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇抗结核治疗，于2020年8月26日于重庆市人民医院复查时发现肝功能异常：谷丙转氨酶1279U/L，谷草转氨酶1157U/L，总胆红素30.8mmol/L，乙肝五项：乙肝表面抗原定量>.>240.00ng/ml，乙肝e抗体定量5.7PEI U/ml，乙肝核心抗体定量10.105PEIU/ml，HBV-DNA 4.683E+06IU/ml，住院予停用抗结核药物，保肝降酶、抗病毒等治疗后2020年9月4日复查肝功能示(见图2)：谷丙转氨酶54U/L，谷草转氨酶46U/L；因其抗结核治疗未至疗程，遂于9月6日就诊我处，刻诊：患者稍觉气短、乏力，无咳嗽咳痰，无咯血，无潮热、盗汗，无喘累，舌淡红，苔薄白，脉弦，诊断为肺痨，辨证为气阴两虚证，予葎草90g、白芨10g、黄精10g，每日1剂，服用2月，患者乏力、气短症状消失，于11月18日复查肝肾功能未见异常，胸部CT示右肺散在小结节及条索灶，肺底局部胸膜稍增厚。
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (6)

1.一种治疗肺结核的中药复方，其特征在于，所述中药复方由如下重量百分比原料组成：白及1～91％、黄精3～93％和葎草6～96％。
2.根据权利要求1所述的治疗肺结核的中药复方，其特征在于，所述中药复方由如下重量百分比原料组成：白及5-30％、黄精10-50％和葎草20-85％。
3.根据权利要求2所述的治疗肺结核的中药复方，其特征在于，所述中药复方由如下重量百分比原料组成：白及5-15％、黄精10-30％和葎草55-75％。
4.一种如权利要求1-3任一所述的治疗肺结核的中药复方的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)按上述配比称取白及，粉碎，过筛，得白及粉；
(2)按上述配比称取黄精和葎草，混合后，加5-10倍量水浸泡过夜，煎煮2-3次，每次煎煮时间1小时，合并提取液，滤过，得提取液Ⅰ；
(3)将步骤(2)制得的提取液Ⅰ浓缩至相对密度为1.10～1.30g/cm3，放置24小时，滤过，得滤液Ⅰ；
(4)将步骤(3)制得的滤液Ⅰ浓缩至相对密度为1.15～1.30g/cm3，加入所述白及粉，混匀，减压干燥，粉碎，得细粉，即可。
5.根据权利要求4所述的治疗肺结核的中药复方的制备方法，其特征在于，步骤(4)中减压压力为-0.1Mpa，干燥温度为60℃。
6.根据权利要求4所述的治疗肺结核的中药复方的制备方法，其特征在于，步骤(4)制得的细粉可制成颗粒剂、胶囊、粉剂或丸剂。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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