CN113009060B - 高效液相色谱法测定盐酸羟考酮含量的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了高效液相色谱法测定盐酸羟考酮含量的方法，该方法以醋酸水溶液与甲醇的混合液为提取液，提取液对盐酸羟考酮的溶解性好，能够最大限定将盐酸羟考酮提取出来，再以C18色谱柱，庚烷磺酸钠缓冲液为水相与甲醇和乙腈混合液为有机相作为流动相，进行色谱分析；方法操作简单，测量准确，可重复性好。

Description

高效液相色谱法测定盐酸羟考酮含量的方法

技术领域

本发明涉及药物质量分析领域，具体涉及高效液相色谱法测定盐酸羟考酮含量的方法。

背景技术

盐酸羟考酮是由阿片生物碱蒂巴因植物衍生物制成的半合成阿片类药物，主要作用于中枢神经系统和平滑肌，对μ，κ和δ受体具有激动剂活性。羟考酮起效快，可用于轻到中度肝肾功能损害，不仅对伤害性疼痛，对内脏痛和神经病理性疼痛也有较好的治疗作用，可单独应用，也可与非甾体抗炎药等联合应用于多模式镇痛，是多模式镇痛的基础用药。羟考酮适用于不同类型病变的中度至重度慢性疼痛，包括癌症和非癌症疼痛。

羟考酮是一种吗啡类的纯阿片类物质激动剂，此类药物可能是药物滥用者、药物成瘾者、药物依赖患者寻觅的目标。血浆中阿片类药物峰浓度的升高是产生欣快感的先决条件，在成瘾的发生中起到了重要作用。阿片类药物的剂型、给药途径和给药方式的选择可影响药物峰浓度，从而影响成瘾的发生率。既往报道的阿片类药物成瘾主要是由于选用速效剂型，尤其是注射剂反复静脉注射给药，引起短时间内血药浓度急剧升高。将羟考酮制备成控缓释制剂，规范使用，血药浓度不会出现过高的峰值，成瘾风险可显著降低。美国食品与药品监督管理局(FDA)于1995年首次批准PURDUE PHARMA LP(普渡制药)的盐酸羟考酮缓释片上市，商品名：OXYCONTIN(奥施康定)。

目前，有关盐酸羟考酮含量测定方法在USP、BP、EP以及Chp中均有收载，BP、EP、USP与Chp均有收载原料药测定方法，其中BP、EP采用滴定法进行测定，USP与Chp中收载方法检测波长与流动相截止波长相近，均不太适用于制剂含量测定；盐酸羟考酮缓释制剂(奥施康定)含量测定方法流动相体系复杂，供试品制备溶剂为水相体系，样品不能充分提取，使用该方法测定含量在93％～97％之间，不能准确表征制剂的含量情况。

因此，亟需一种操作简单，测量准确，可重复性好的有效测定盐酸羟考酮缓释片含量的方法，该方法可用于盐酸羟考酮缓释片和含有盐酸羟考酮组分的药物的含量分析。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种高效液相色谱法测定盐酸羟考酮含量的方法，该方法操作简单，测量准确，可重复性好。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

高效液相色谱法测定盐酸羟考酮含量的方法，具体步骤如下：将含盐酸羟考酮的制剂加提取溶液，超声溶解、过滤，得到酸羟考酮制剂中的主成分提取液，然后将提取液用C18色谱柱，庚烷磺酸钠缓冲液为水相与以甲醇、乙腈为有机相的混合溶液为流动相，流速为1.2ml/min，柱温为40℃，检测波长为230nm，进行色谱分析；所述提取溶液为醋酸水溶液与甲醇体积比为3:7混合液，所述醋酸水溶液的醋酸体积分数为0.1％。

优选的，所述含盐酸羟考酮的制剂为盐酸羟考酮缓释片。

优选的，所述超声溶解为超声10～20min。

优选的，所述庚烷磺酸钠缓冲液的浓度为1.1g/L。

优选的，所述庚烷磺酸钠缓冲液的配制方法为将庚烷磺酸钠用水溶解后，加磷酸调节pH至2.0。

优选的，所述流动相中水相:甲醇:乙腈的体积比为750:98:152～726:106:168。

优选的，所述提取液的具体制备方法如下：将含盐酸羟考酮的制剂按每毫克主成分加入2.5ml提取溶液，超声溶解，冷却至室温，摇匀，滤过，取滤液稀释5倍得到提取液。

本发明的有益效果在于：本发明公开了高效液相色谱法测定盐酸羟考酮含量的方法，该方法以醋酸水溶液与甲醇的混合液为提取液，提取液对盐酸羟考酮的溶解性好，能够最大限定将盐酸羟考酮提取出来，再以C18色谱柱，庚烷磺酸钠缓冲液为水相与甲醇和乙腈混合液为有机相作为流动相，进行色谱分析；方法操作简单，测量准确，可重复性好。

附图说明

为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图进行说明：

图1为系统适用性溶液图谱；

图2为对照品溶液图谱；

图3为供试品溶液图谱。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好的理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。

本发明中含量检测HPLC条件如下：

色谱柱：C18；检测波长：230nm；流速：1.2ml/min；柱温：40℃。

混合提取溶液的配制(0.3ml/L冰醋酸溶液)：吸取冰醋酸0.3ml，溶于300ml水中，混匀，再加入700ml甲醇，混匀即得。

流动相的配制：以庚烷磺酸钠缓冲液为水相与以甲醇、乙腈为有机相的混合溶液为流动相，水相中庚烷磺酸钠的浓度为1.1g/ml；水相:乙腈:甲醇的体积比为1000ml:138ml:217ml，具体配制方法是称取庚烷磺酸钠约1.1g，加水1000ml，搅拌溶解，滴加稀释的磷酸调节pH至2.0，另外再加入乙腈138ml，甲醇217ml，混匀，过滤，超声除气即得。‘

系统适用性溶液的图谱如图1所示。结果显示，理论板数、分离度、灵敏度、拖尾因子和重复性等参数均符合接收标准。

供试品溶液的图谱如图3所示。结果显示，辅料峰与主峰间分离度良好，不干扰主峰检测；主峰理论板数、拖尾因子等参数均符合接收标准。

实施例1、盐酸羟考酮含量检测方法

盐酸羟考酮含量检测方法，包括如下步骤：

(1)供试品溶液的制备：

取盐酸羟考酮缓释片适量(相当于盐酸羟考酮10mg)，进行研磨预处理，置于25ml量瓶中，加混合提取溶液20ml，超声15min使溶解，冷却至室温，加混合提取溶液定容至刻度；摇匀，滤过，取滤液2ml于10ml容量瓶中，加流动相稀释并定容至刻度，摇匀，制成每1ml约含盐酸羟考酮80μg的供试品溶液；

(2)色谱分析

将步骤(1)制得的供试品溶液以C18为色谱柱；以庚烷磺酸钠缓冲液为水相，甲醇、乙腈为有机相的混合溶液为流动相，流速为1.2ml/min，柱温为40℃，检测波长为230nm，进样量为20μl注入液相色谱系统检测，记录色谱图(图3)，按外标法以峰面积计算盐酸羟考酮的含量。

另取标准品盐酸羟考酮同法制成含盐酸羟考酮80μg/ml的对照品溶液，选用C18色谱柱，流速1.2ml/min，检测波长230nm，柱温40℃，取对照品溶液20μl，注入液相色谱系统，记录色谱图(图2)，按外标法以峰面积计算盐酸羟考酮的含量。

(3)重复性试验

按步骤(1)供试品溶液的制备方法制备供试品溶液6份，以C18为色谱柱；以庚烷磺酸钠缓冲液为水相，甲醇、乙腈为有机相的混合溶液为流动相，流速为1.2ml/min，柱温为40℃，检测波长为230nm，进样量为20μl注入液相色谱系统检测，记录色谱图，按外标法以峰面积计算盐酸羟考酮的含量。

6份供试品溶液含量测定结果均值为99.4％，RSD值为0.2％，供试品溶液的制备方法可重复性好。

(4)回收率试验

按本品标示量浓度的80％、100％、120％进行加样回收试验。

按本品标示量的80％、100％、120％分别精密称取盐酸羟考酮对照品各3份，分别置25ml量瓶中，按处方量分别加入空白混合辅料，按步骤(1)供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，以C18为色谱柱；以庚烷磺酸钠缓冲液为水相，甲醇、乙腈为有机相的混合溶液为流动相，流速为1.2ml/min，柱温为40℃，检测波长为230nm，进样量为20μl注入液相色谱系统检测，记录色谱图，按外标法以峰面积计算盐酸羟考酮的含量。

三个浓度水平下回收率分别为100.4％、99.7％、101.2％，综合回收率为100.4％，RSD值为1.0％，检测方法能准确测定盐酸羟考酮的含量。

以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。

Claims (3)

1.高效液相色谱法测定盐酸羟考酮含量的方法，其特征在于，具体步骤如下：将含盐酸羟考酮的制剂按每毫克主成分加入2.5ml提取溶液，超声溶解10～20min、冷却至室温，摇匀，过滤，得到盐酸羟考酮制剂中的主成分提取液，然后将提取液用C18色谱柱，浓度为1.1g/L、pH为2.0的庚烷磺酸钠缓冲液为水相与以甲醇、乙腈为有机相的混合溶液为流动相，流速为1.2ml/min，柱温为40℃，检测波长为230nm，进行色谱分析；所述提取溶液为醋酸水溶液与甲醇体积比为3:7混合液，所述醋酸水溶液的醋酸体积分数为0.1％；所述流动相中水相:甲醇:乙腈的体积比为750:98:152～726:106:168。

2.根据权利要求1所述高效液相色谱法测定盐酸羟考酮含量的方法，其特征在于：所述含盐酸羟考酮的制剂为盐酸羟考酮缓释片。

3.根据权利要求1所述高效液相色谱法测定盐酸羟考酮含量的方法，其特征在于：所述庚烷磺酸钠缓冲液的配制方法为将庚烷磺酸钠用水溶解后，加磷酸调节pH至2.0。

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