CN114544843B - 一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法 - Google Patents

一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN114544843B
CN114544843B CN202011329485.0A CN202011329485A CN114544843B CN 114544843 B CN114544843 B CN 114544843B CN 202011329485 A CN202011329485 A CN 202011329485A CN 114544843 B CN114544843 B CN 114544843B
Authority
CN
China
Prior art keywords
solution
diluent
proper amount
scale
shaking
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202011329485.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114544843A (zh
Inventor
刘宁
李达胜
汤伟彬
蔡强
兰柳琴
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhuhai Rundu Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Zhuhai Rundu Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhuhai Rundu Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Zhuhai Rundu Pharmaceutical Co Ltd
Priority to CN202011329485.0A priority Critical patent/CN114544843B/zh
Publication of CN114544843A publication Critical patent/CN114544843A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114544843B publication Critical patent/CN114544843B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G01N2030/067—Preparation by reaction, e.g. derivatising the sample
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G01N2030/8809—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
    • G01N2030/8872—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample impurities
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Abstract

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种伏立康唑中4‑(1‑溴代乙基)‑5‑氟‑6‑氯嘧啶的检测方法，该方法是通过4‑(1‑溴代乙基)‑5‑氟‑6‑氯嘧啶与2‑巯基苯并咪唑衍生得到衍生物后，使用LCMS方法进行检测，可用于监测伏立康唑的质量。该方法检测时间相对于高效液相检测时间短，出峰时间短，能快速，高效的对伏立康唑中4‑(1‑溴代乙基)‑5‑氟‑6‑氯嘧啶进行检测，检测灵敏度更高，更能有效控制产品质量，相对于液相检测专属性更好，抗干扰能力强，不必担心衍生试剂或者衍生介质对目标物检测产生干扰，从而有效控制伏立康唑中4‑(1‑溴代乙基)‑5‑氟‑6‑氯嘧啶的含量，保障用药安全。

Description

一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法
技术领域
本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法。
背景技术
伏立康唑（voriconazole），化学名为（2R,3S）-2-（2,4-二氟苯基）-3-（5-氟-4-嘧啶）-1-（1H-1,2,4-三唑-1-基）-2-丁醇，是第二代三唑类抗真菌化合物，用于治疗真菌感染，为广谱抗真菌药，对人和动物的真菌感染均有治疗作用。
基因毒性杂质是一类可与DNA反应，造成DNA损伤，在很低水平下即可诱发基因突变，并可能致癌的杂质，基因毒性物质特点是在很低浓度时即可造成人体遗传物质的损伤，进而导致基因突变并可能促使肿瘤发生。因其毒性较强，对用药的安全性产生了强烈的威胁，近年来也越来越多的出现因为在已上市药品中发现痕量的基因毒性杂质残留而发生大范围的医疗事故，被FDA强行召回的案例，给药厂造成了巨大的经济损失。
近年来各国的法规机构如ICH、FDA、EMA等都对基因毒性杂质有了更明确的要求，越来越多的药企在新药研发过程中就着重关注基因毒性杂质的控制和检测。
4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶，以下简称M1，结构式：，是伏立康唑的中间体，在伏立康唑的合成过程中，该化合物可能成为伏立康唑终产物的杂质之一，是潜在的基因毒性杂质。
目前，中国专利文献CN110441460A公开了一种伏立康唑中微量基因毒性杂质检测方法，涉及伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测，该方法使用联苯-4-硫酚对待测样品进行衍生化处理后，采用高效液相色谱法进行检测，该方法使用高效液相色谱法进行检测，检测时间长，抗干扰能力弱，衍生试剂可能对目标物检测产生干扰。
本发明为解决伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测问题，提供了一种便捷、高效、准确的检测方法，该方法检测时间相对于高效液相检测时间短，出峰时间短，能快速，高效的对伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶进行检测，检测灵敏度更高，更能有效控制产品质量，相对于液相检测专属性更好，抗干扰能力强，不必担心衍生试剂或者衍生介质对目标物检测产生干扰，从而有效控制伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的含量，保障用药安全。
发明内容
本发明提供一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法，该方法便捷、高效、准确，在系统适用性、重复性、专属性、准确度方面完全符合中国药典方法验证的指导原则，可用于伏立康唑的质量控制。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法，所述方法是通过4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶与2-巯基苯并咪唑衍生得到衍生物后，使用LCMS方法进行检测，所述检测方法包括以下步骤：
（1）配制溶液，分别配制稀释液、空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、供试品溶液和衍生液，所述衍生液包括衍生剂、衍生介质和盐酸溶液，所述对照品溶液包括对照品储备液。
（2）测定方法：采用LCMS测定杂质的含量，待系统稳定后，分别进空白溶液，灵敏度溶液，对照品溶液和供试品溶液，记录谱图；
Ⅰ：色谱条件如下:色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流速0.5ml/min±0.1mL/min，柱温：40℃±5℃，进样量：0.5μl，流动相以甲酸：水体系为流动相A，以乙腈为流动相B，采用梯度洗脱；
Ⅱ：MS条件：极性：正极，干燥气温度：350℃，干燥气流速：8L/min，雾化气压力：40psi，毛细管电压：3500V，鞘气温度：350℃，鞘气流速：10 L/min，电压：135V，扫描模式：SIM，采集时间：3.0min-6.3min，SIM Ion：m/z 309.1，Dwell：200ms。
进一步的，所述稀释液为乙腈：水=50：50（V/V）；
所述衍生剂：取适量2-巯基苯并咪唑置于容量瓶中，加入适量稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀；
所述衍生介质：取适量氢氧化钠置于容量瓶中，加入水溶解并稀释至刻度，摇匀；
所述盐酸溶液：取适量浓盐酸置于容量瓶中，加入水溶解并稀释至刻度，摇匀；
所述空白溶液：取适量衍生剂、衍生介质和稀释液置于容量瓶中，摇匀，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加适量盐酸溶液，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得；
所述对照品储备液：量取适量对照品，置于容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀；
所述对照品溶液：量取适量对照品储备液，置于容量瓶中，加适量稀释液，再加衍生剂和衍生介质，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得；
所述灵敏度溶液：量取适量对照品溶液，置于容量瓶中，加空白溶液稀释至刻度，摇匀，即得；
所述供试品溶液：取供试品适量置于容量瓶中，加适量稀释液，再加衍生剂和衍生介质，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加适量盐酸溶液，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得；
所述流动相为：
流动相A：甲酸：水=1:1000（V/V）；
流动相B：乙腈；
所述甲酸为AR及以上；
所述乙腈为HPLC级；
所述水为超纯水；
所述浓盐酸为AR及以上；
所述氢氧化钠为AR及以上；
所述色谱柱为Thermo AcclaimTM RSLC120 C18，2.1×100mm，2.2 μm。
进一步的，所述流动相梯度过程如下：
更优选的，本发明所述的测定方法，包括以下步骤：
（1）配制溶液：
稀释液：乙腈：水=50:50（V/V）；
衍生剂：6.25mg/ml 2-巯基苯并咪唑溶液（取2-巯基苯并咪唑约625mg，精密称定，置100ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀）
衍生介质：1mg/ml NaOH溶液（取氢氧化钠约100mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀）
盐酸溶液：精密移取浓盐酸1.0ml，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度摇匀，即得；
空白溶液：取25ml量瓶，加10ml稀释液，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500µl，摇匀；于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。
对照品储备液①：取4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶对照品约25mg，精密称定，置25ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀；精密量取上述溶液500µl，置20ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：25µg/ml）
对照品储备液②：精密量取对照品储备液①750µl，置100ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：187.5ng/ml）
对照品溶液：精密量取对照品储备液②500µl，置25ml量瓶中，加9.5ml稀释液，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500µl，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：3.75ng/ml）
灵敏度溶液：精密量取对照品溶液2.0ml，置10ml量瓶中，加空白溶液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：0.75ng/ml）
供试品溶液：取供试品约50mg，精密称定，置25ml量瓶中，加10ml稀释液，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500µl，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：2mg/ml）
色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱（如：Thermo AcclaimTM RSLC120 C18 2.1×100mm，2.2µm或效能相当的色谱柱）
进样量：0.5µl
柱温：40℃
流速：0.4ml/min
流动相A：甲酸：水=1:1000（V/V）
流动相B：乙腈
梯度洗脱，
Figure 10000252163219
所述的伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法还包括在检测之前的方法验证，该方法验证为按照正式检测的色谱条件，测定结果为：
本发明的伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法，能快速，高效的对伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶进行检测，检测时间更短，检测灵敏度更高，更能有效控制产品质量，相对于液相检测专属性更好，抗干扰能力强，不必担心衍生试剂或者衍生介质对目标物检测产生干扰，从而有效控制伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的含量，保障用药安全。
附图说明
图1为M1空白溶液图谱
图2为M1灵敏度溶液图谱
图3为M1对照品溶液图谱
图4为伏立康唑定位溶液图谱
图5为M1定位溶液图谱
图6为选择性溶液图谱
图7为供试品溶液图谱
图8为M1线性关系图
具体实施方式
以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。
实施例1：
1、色谱条件
仪器：Agilent InfinityII 1290 UHPLC+Agilent 6470 ESI-QQQ-MS、电子分析天平。
色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱（如：Thermo AcclaimTM RSLC120 C18 2.1×100mm，2.2µm或效能相当的色谱柱）
进样量：0.5µl
柱温：40℃
流速：0.4ml/min
流动相A：甲酸：水=1:1000（V/V）
流动相B：乙腈
2、溶液配制
稀释液：乙腈：水=50:50（V/V）；
衍生剂：6.25mg/ml 2-巯基苯并咪唑溶液（取2-巯基苯并咪唑约625mg，精密称定，置100ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀）
衍生介质：1mg/ml NaOH溶液（取氢氧化钠约100mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀）
盐酸溶液：精密移取浓盐酸1.0ml，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度摇匀，即得；
空白溶液：取25ml量瓶，加10ml稀释液，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500µl，摇匀；于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。
对照品储备液①：取4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶对照品约25mg，精密称定，置25ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀；精密量取上述溶液500µl，置20ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：25µg/ml）
对照品储备液②：精密量取对照品储备液①750µl，置100ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：187.5ng/ml）
对照品溶液：精密量取对照品储备液②500µl，置25ml量瓶中，加9.5ml稀释液，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500µl，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：3.75ng/ml）
灵敏度溶液：精密量取对照品溶液2.0ml，置10ml量瓶中，加空白溶液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：0.75ng/ml）
供试品溶液：取供试品约50mg，精密称定，置25ml量瓶中，加10ml稀释液，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500µl，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：2mg/ml）
LOQ溶液：根据灵敏度溶液所得M1的S/N值，调节稀释比例，使得S/N值不小于10。同法配制6份。
LOD溶液：精密量取LOQ溶液3.0ml，置10ml量瓶中，加空白溶液稀释至刻度，摇匀。
线性溶液-50%：精密量取线性储备液250µl，置25ml量瓶中，加9.75ml稀释液，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500µl，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：1.875ng/ml）
线性溶液-80%：精密量取线性储备液400µl，置25ml量瓶中，加9.6ml稀释液，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500µl，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：3ng/ml）
线性溶液-100%：精密量取线性储备液500µl，置25ml量瓶中，加9.5ml稀释液，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500µl，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：3.75ng/ml）
线性溶液-120%：精密量取线性储备液600µl，置25ml量瓶中，加9.4ml稀释液，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500µl，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：4.5ng/ml）
线性溶液-150%：精密量取线性储备液750µl，置25ml量瓶中，加9.25ml稀释液，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500µl，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：5.625ng/ml）
准确度溶液-LOQ：取供试品约50mg，精密称定，置25ml量瓶中，加适量稀释液使样品溶解，精密量取准确度储备液适量置该瓶中，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500µl，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：伏立康唑2mg/ml、M1 LOQ浓度）同法配制3份。
准确度溶液-100%：取供试品约50mg，精密称定，置25ml量瓶中，加9.5ml稀释液使样品溶解，精密量取准确度储备液500µl置该瓶中，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500µl，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：伏立康唑2mg/ml、M1 3.75ng/ml）同法配制3份。
准确度溶液-150%：取供试品约50mg，精密称定，置25ml量瓶中，加9.25ml稀释液使样品溶解，精密量取准确度储备液750µl置该瓶中，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500µl，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：伏立康唑2mg/ml、M1 5.625ng/ml）同法配制3份。
3、步骤
待系统稳定后，进空白溶液1针，灵敏度溶液1针，对照品溶液6针，空白溶液1针，供试品溶液1针，记录谱图。
4、要求
灵敏度溶液中M1的S/N值应不小于10；6针对照品溶液以M1峰面积计RSD应不得大于10.0%。
备注-1：为确认序列运行过程中系统稳定性，按以下方式和要求进行：
（1）当日常检测时，待对照品溶液完成进样后，建议每隔10针及序列的最后，进对照品溶液1针，要求后连续6针对照品溶液中M1峰面积的RSD应≤10.0%。
（2）当进行分析方法验证时，待对照品溶液完成进样后，每隔约8小时及序列的最后，进对照品溶液1针，要求后连续6针对照品溶液中M1峰面积的RSD应≤10.0%。
备注-2：限度=TTC/最大日剂量
ICH M7中基因毒性杂质TTC为1.5μg/天，伏立康唑片剂中伏立康唑的最大日剂量为0.8g/天，故用上述公式计算得到4-（1-溴代乙基）-5-氟-6-氯嘧啶限度为1.875ppm。
实施例2：系统适用性
系统适用性是通过测定灵敏度溶液中M1的S/N值及6针对照品溶液中M1峰面积的RSD而实现的。要求灵敏度溶液中M1的S/N值应≥10；6针对照品溶液中M1峰面积的RSD应不大于10.0%。为确认序列运行过程中的系统适用性，在验证过程中每隔约8小时及序列的最后，进1针对照品溶液，要求后连续6针对照品溶液中M1峰面积的RSD应不大于10.0%；如超出该范围，应做评估调查。
表2 系统适用性测定结果
实施例3：专属性
方法的专属性是通过测定空白溶液对检测无干扰；选择性溶液中M1与相邻峰之间的分离度而实现的，要求空白溶液对检测应无干扰，选择性溶液中M1与相邻峰之间的分离度应不小于1.5。
实施例4：重复性
重复性是通过测试6份供试品溶液（加标）测定结果的RSD而实现的，要求6份供试品溶液（加标）中M1测定结果的RSD应不大于10.0%。
实施例5：定量限和检测限
定量限和检测限是通过检测响应信号与噪声之比而实现的，定量限的信噪比（S/N）应不小于10：1，检测限的信噪比（S/N）应不小于3：1；在定量限浓度水平下，重复考察6份定量限溶液，要求6份LOQ溶液中M1单位浓度峰面积的RSD应不大于20.0%；LOQM1应不大于0.9ppm，S/N≥10；LOD溶液中M1的S/N≥3，且LOD＜LOQ。
实施例6：线性和范围
在LOQ～150%限度浓度范围内，取6个浓度点，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标画曲线。要求在LOQ～150%限度浓度范围内应呈线性，要求曲线的线性相关系数R的平方（R2）应不小于0.99，y轴截距的绝对值在100%浓度响应值的25%以内。
实施例7：准确度
准确度是通过被测组分实测浓度和理论浓度之间的回收率及回收率的总RSD（n=9）而实现的，要求加入LOQ浓度、100%限度浓度、150%限度浓度的准确度溶液中，M1的回收率应在70.0%～130.0%之间，回收率的总RSD（n=9）应不大于20.0%。
实施例8：耐用性
考察对照品溶液、供试品溶液和选择性溶液在室温下放置一段时间后进样，检测结果随时间变化的规律，为检测时对照品溶液和供试品溶液的放置时间提供参考。
要求：与0hr对照品溶液相比较，对照品溶液在室温考察期间，M1的回收率在80.0%～120.0%之间，且无明显的变化趋势，则对照品溶液在室温考察期间稳定；
若供试品溶液0hr有检出M1，供试品溶液在室温下放置一段时间内，测定结果变化值在M1限度的20%以内，且无明显的变化趋势，则供试品溶液在室温考察期间稳定；若供试品溶液0hr未检出M1，供试品溶液在室温下放置一段时间内，仍无M1检出，则供试品溶液在室温考察期间稳定；
选择性溶液在室温下放置一段时间内，M1的回收率在80.0%～120.0%之间，且无明显的变化趋势，则选择性溶液在室温考察期间稳定。

Claims (2)

1.一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法，其特征在于，所述方法是通过4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶与2-巯基苯并咪唑衍生得到衍生物后，使用LCMS方法进行检测，所述检测方法包括以下步骤：
（1）配制溶液，分别配制稀释液、空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、供试品溶液和衍生液，所述衍生液包括衍生剂、衍生介质和盐酸溶液，所述对照品溶液包括对照品储备液；
（2）测定方法：采用LCMS测定杂质的含量，待系统稳定后，分别进空白溶液，灵敏度溶液，对照品溶液和供试品溶液，记录谱图；Ⅰ：色谱条件如下:色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流速0.5ml/min±0.1mL/min，柱温：40℃±5℃，进样量：0.5μl，流动相以甲酸：水体系为流动相A，以乙腈为流动相B，采用梯度洗脱；Ⅱ：MS条件：极性：正极，干燥气温度：350℃，干燥气流速：8L/min，雾化气压力： 40psi，毛细管电压：3500V，鞘气温度：350℃，鞘气流速：10 L/min，电压：135V，扫描模式：SIM，采集时间：3.0min-6.3min，SIM Ion：m/z 309.1，Dwell：200ms;
所述流动相梯度过程如下：
。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述稀释液为乙腈：水的体积比V/V为 50：50；
所述衍生剂：取适量2-巯基苯并咪唑置于容量瓶中，加入适量稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀；
所述衍生介质：取适量氢氧化钠置于容量瓶中，加入水溶解并稀释至刻度，摇匀；
所述盐酸溶液：取适量浓盐酸置于容量瓶中，加入水溶解并稀释至刻度，摇匀；
所述空白溶液：取适量衍生剂、衍生介质和稀释液置于容量瓶中，摇匀，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加适量盐酸溶液，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得；
所述对照品储备液：量取适量对照品，置于容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀；
所述对照品溶液：量取适量对照品储备液，置于容量瓶中，加适量稀释液，再加衍生剂和衍生介质，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得；
所述灵敏度溶液：量取适量对照品溶液，置于容量瓶中，加空白溶液稀释至刻度，摇匀，即得；
所述供试品溶液：取供试品适量置于容量瓶中，加适量稀释液，再加衍生剂和衍生介质，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加适量盐酸溶液，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得；
所述流动相为：流动相A：甲酸：水的体积比V/V为 1:1000；流动相B：乙腈；
所述甲酸为AR级以上；
所述乙腈为HPLC级；
所述水为超纯水；
所述浓盐酸为AR级以上；
所述氢氧化钠为AR级以上；
所述色谱柱为Thermo AcclaimTM RSLC120 C18，2.1×100mm，2.2 μm。
CN202011329485.0A 2020-11-25 2020-11-25 一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法 Active CN114544843B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011329485.0A CN114544843B (zh) 2020-11-25 2020-11-25 一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011329485.0A CN114544843B (zh) 2020-11-25 2020-11-25 一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114544843A CN114544843A (zh) 2022-05-27
CN114544843B true CN114544843B (zh) 2023-05-02

Family

ID=81659625

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011329485.0A Active CN114544843B (zh) 2020-11-25 2020-11-25 一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114544843B (zh)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6197791B1 (en) * 1997-02-27 2001-03-06 American Cyanamid Company N-hdroxy-2-(alkyl, aryl, or heteroaryl, sulfanyl, sulfinyl or sulfonyl)-3-substituted alkyl, aryl or heteroarylamides as matrix metalloproteinase inhibitors
CN105699498A (zh) * 2014-11-25 2016-06-22 陕西合成药业股份有限公司 一种分离分析伏立康唑前药有关物质的hplc方法
CN110441460A (zh) * 2019-09-12 2019-11-12 武汉朗来科技发展有限公司 一种伏立康唑中微量基因毒性杂质检测方法
CN110794046A (zh) * 2019-09-30 2020-02-14 珠海润都制药股份有限公司 莫西沙星中间体中2,4,5-三氟-3-甲氧基苯甲酰氯的检验方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6197791B1 (en) * 1997-02-27 2001-03-06 American Cyanamid Company N-hdroxy-2-(alkyl, aryl, or heteroaryl, sulfanyl, sulfinyl or sulfonyl)-3-substituted alkyl, aryl or heteroarylamides as matrix metalloproteinase inhibitors
CN105699498A (zh) * 2014-11-25 2016-06-22 陕西合成药业股份有限公司 一种分离分析伏立康唑前药有关物质的hplc方法
CN110441460A (zh) * 2019-09-12 2019-11-12 武汉朗来科技发展有限公司 一种伏立康唑中微量基因毒性杂质检测方法
CN110794046A (zh) * 2019-09-30 2020-02-14 珠海润都制药股份有限公司 莫西沙星中间体中2,4,5-三氟-3-甲氧基苯甲酰氯的检验方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
P K Dubey 等.Synthesis of novel benzimidazoleβ-keto sulfones andβ-hydroxy sulfones and their regiospecific alkylation studies.《Indian Journal of Chemistry》.2010,第49B卷937-943. *
姚硕蔚 等.2-[5-取代苯 并咪(噻)唑-2-硫 基]-1-(4-取代苯基)乙酮 缩氨基胍的合成及NHE1 抑制活性.《中国药物化学杂志》.2007,第17卷(6),358-363. *

Also Published As

Publication number Publication date
CN114544843A (zh) 2022-05-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107367562B (zh) 硫酸多黏菌素b的分析检测方法及应用
WO2022062961A1 (zh) 一种检测依折麦布辛伐他汀片中6-氧代辛伐他汀含量的方法
CN112198260B (zh) 一种盐酸丙卡特罗药物制剂中工艺杂质含量的检测方法
CN110794046B (zh) 莫西沙星中间体中2,4,5-三氟-3-甲氧基苯甲酰氯的检验方法
CN111665301A (zh) 超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中抗真菌药物的试剂盒
CN113295805B (zh) 一种药物中水合肼的检测方法
CN110146605A (zh) 一种测定格列吡嗪原料药及其缓释片中特定基因毒性杂质的分析方法
CN114544843B (zh) 一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法
CN111551645B (zh) 一种硫酸羟氯喹有关物质的检测方法及其应用
CN114354800B (zh) 头孢呋辛酯中乙酰溴含量的分析方法
CN114689737B (zh) 一种s-邻氯苯甘氨酸甲酯酒石酸盐有关物质的分析方法
CN114544842B (zh) 一种伏立康唑中n-溴代丁二酰亚胺的检验方法
CN106018617B (zh) 一种用液相色谱法分离测定盐酸维拉佐酮中2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物含量的方法
CN114839287A (zh) 一种米铂中十四烷酸钠的检测方法
CN110824059B (zh) 一种非布司他中甲酰基杂质的检测方法
CN109270178B (zh) 一种高效液相色谱法分离测定度他雄胺软胶囊中度他雄胺及有关物质的方法
CN113671085B (zh) 一种缬沙坦中的2-叠氮基-3-甲基丁酸的检测方法
CN114646700B (zh) 一种（s）-吡咯烷-2-甲腈盐酸盐的检测方法
CN115856144B (zh) 一种氟康唑原料药及注射液中三甲基碘化亚砜杂质的检测方法
CN109030668A (zh) 钆塞酸二钠中间体的高效液相分析方法
CN115494183B (zh) 一种三氮唑类药物中1,2,4-三氮唑的检测方法
CN111965279B (zh) 一种测定布比卡因及其杂质含量的方法
CN114200050B (zh) 一种对溴苯甲醚中的有关物质含量的hplc检测方法
CN116338025A (zh) 液相色谱-质谱联用仪测定n-亚硝基伐尼克兰的方法
CN117805265A (zh) 一种洛索洛芬钠及其制剂中遗传毒性杂质的分析方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant