CN1129908A - 治疗剂 - Google Patents

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Abstract

一种治疗炎性疾病的方法，包括给所述炎性疾病的患者施以图中所示通式(I-Ⅻ)的化合物或其混合物。还包括一种用于缓解炎性疾病的治疗剂。其包括图中所示通式(I-Ⅻ)的化合物或其混合物以及适当的填料，该填料优选为磷酸二钙。本发明在其范围内还包括植物提取物，该提取物包括一个或多个上述的化合物，特别是伞形科属、芹菜(旱芹)、欧芹(Petroselimun hortense)和莳萝(Amethumgranveolens)的植物提取物。具信，上述通式的化合物，特别是丁基2-苯并(c)呋喃酮、芹菜子烯交酯和芹菜子交酯(cis和trans型，否则即为主要源自植物的香精油)与必需脂肪酸和他们前列腺素类似物之生理反应相仿。

Description

治疗剂
发明概述
本发明涉及一种治疗剂，该治疗剂可用于治疗炎性疾病如关节炎。
发明背景
关节炎意味着关节发炎，实际上指100多种风湿性疾病，其中一个或多个关节发生炎症。风湿性疾病不仅包括关节炎，而且还包括肌骨系统、关节、肌肉、韧带、腱和囊发生疼痛的疾病。风湿性综合症分为炎性的或变性的，但有时这并没有名称含意那么明显。也就是说，为炎性疾病所损伤的关节更容易受到变性因素的损害，这样，像是变性的综合症也可能与炎症有关。因此，风湿性综合症事实上可以表现为多种类型的疾病。另外，风湿性疾病可以与其他病症有关。由此，这种复杂性就使得诊断很难，而且其分类难以确定(见后附之参考文献1)。
Webb和Nash在1990(2)对该复杂问题的最新研究更表明了诊断上的困难性，这也类似地适用于根据美国风湿病协会(American Rheumatism Association)的分类的复杂性。因此，接下来对风湿性疾病的治疗也变得复杂了。Kremer在1990(3)也提及过这种复杂性，他探讨了类风湿病关节炎的传统疗法，并对此提出了改进意见，及使用联合的化疗和一种实验性的方法。这些治疗上的复杂性也适用于其他风湿性疾病如骨关节炎(1)。
关节炎与传染性物质有关，如细菌、真菌和病毒。因此就有了淋性关节炎、结核性关节炎、梅毒性关节炎，霉菌性(mycotic)关节炎和病毒性关节炎。还有多关节炎和病毒性关节炎。尚有不知病源的多关节炎，其主要牵涉脊柱关节、骶髂关节和椎旁软组织。还有神经病性关节疾病，其是一种归入混杂型关节炎中的渐进性、变性关节病，这也包括假痛风。假痛风指合钙盐出现在一个或多个关节的软骨结构中。由于钙盐晶体出现在关节滑液中，并伴随着慢性滑膜炎，所以称之为假痛风(软骨钙质沉着病)(1)。
类风湿性关节炎是一种不知病因的全身性疾病，虽然它可引发自身免疫的表现。临床和病理学上的发现及其导致的残废都是滑膜慢性炎症的结果。发炎而且高塑性的滑膜促使软骨损坏。好象是，滑膜中已存在的巨噬细胞和成纤型细胞被激活，并释放炎症反应介质。另外，免疫刺激使单细胞/巨唾细胞和白细胞流入滑液中，这也加重了类风湿性关节炎。
还有不同的类风湿性关节炎综合症(1)。再者，也存在着确定和判断疾病活性的难题，并且这也适用于类风湿性关节炎，Vander Heijde etal 1990(4)的最新文章即举例说明了研究和应用疾病活性范围的复杂性。
骨关节炎是一种关节软骨的变性关节疾病，有可能在二十岁时开始。具认为是对老化的一个反应，但加速其进程的因素尚不知晓。类风湿性关节炎的起因是可导致关节、软骨损坏的炎性反应，而骨关节炎的起因是关节软骨之修复的损坏或缺乏。这可导致炎性关节反应，但是很少有与类风湿性关节炎相仿之炎症病理特征。另外，软骨溃疡后，新骨形成都发生在关节软骨的边缘。这些边缘性的骨赘是特征性的骨“spars”。骨的变化还包括在关节下面的各种尺寸的囊肿和软骨下的骨的改变(1)。
对于类风湿性关节炎，还有多种的骨关节炎综合症，如钙化的腱炎和滑囊炎，其最通常的病因是钙沉积在旋转腱中以及封闭在滑膜袋中的滑囊发炎，所说的滑膜袋处在皮肤、韧带、腱、肌肉和骨之间的摩擦部位。这些就构成了非关节性风湿病型(1)。
痛风是遗传疾病型，其是嘌呤代谢或排泄的紊乱，这可由血内尿酸过多(血内尿酸增加)来识别。因此，痛风是异原性的紊乱集合，并且不同的疾病状态都可导致普通的血内尿酸过多的特征。而且，在化学治疗由于组织毁坏而引起的恶性肿瘤疾病后，嘌呤的增加使得尿酸过多，也可发生血内尿酸过多症(1)。
尿酸在溶解时是没有毒性的，但在PH7.4下以尿酸钠或在酸性尿中以尿酸沉淀时就会产生问题。尿酸钠形成的尿酸沉淀可在任何组织中发生，并导致组织的破裂和毁坏。其在肾中的沉淀可导致不同程度的肾损坏。其在滑膜组织和空间中的微晶沉淀导致急性炎性关节炎，也就是痛风性关节炎(1)。
在心脏移植后也发现血内尿酸过多和痛风性关节炎(5)。
因此，痛风是由尿酸盐晶体(尿酸单纳晶体)引发的炎性关节炎。这些尿酸单钠晶体(MSUC)导致滑膜炎和关节毁坏的机理尚未完全明了。但是，已有人认为花生酸类物(eicosanoids)是炎性反应的重要中介，并且是在应答MSUC时产生的(6)。痛风患者的滑液中发现花生酸类物的浓度升高(7，8)，在暴露于MSUC的滑膜细胞中生成了刺激骨重吸收的前列腺素(PGE2)(9)，和羟二十四酸(10-14)。而且也存在着白三烯(leukotriene)B4，其刺激中性白细胞浸润(15)。在花生酸类物制备中限速步骤好象是磷脂酶的生成，该磷脂酶可将脂肪酸由膜磷脂上断裂下来(16)。MSUC经由磷脂酶激活蛋白而刺激单细胞和中性白细胞，这样就可制备这些酶，所说的激活蛋白可以被秋水仙素和消炎痛抑制(16)，从高于类风湿性关节炎和骨关节炎之免疫机理角度看，无论无症状的或有症状的痛风都尚未清楚。在此方面，令人感兴趣的是血内尿酸过多并不是一种疾病而是痛风和冠心病的危险因素(17)。另外，如果并无血内尿酸过多症，MSUC也可能出现在滑膜液中(1，18，19)，因此使得对痛风的诊断困难。
已提出各种治疗方法来治疗炎性疾病，但是它们只取得了部分的成功，而且在此方面并未证实象Sany(23)中所描述的那么令人满意。例如，在类风湿性关节炎上已有各种的治疗剂，其包括主要是但不绝对是作用于巨噬细胞(如金盐)或TCD4+细胞(如青霉胺)上的慢作用药物，或免疫刺激剂(如lemamisole)或免疫抑制药如烷化剂和抗代谢物。也有人提议使用做为止痛用药和NSAIDS(非甾体性抗炎药)的阿司匹林以及如Kremer(3)中所述的氨甲喋呤。所有这些治疗剂都有各种严重的负作用。
参考文献(19)、(16)、(24)、(18)(25)、(26)、(17)、(27)、(4)和(5)也都讨论了这些问题。
痛风的治疗也是很困难的。抗炎药保泰松或消炎痛的使用可导致头痛和肠胃症状(恶心，呕吐，腹痛和腹泻)，但比秋水仙素的少，秋水仙素也可诱发白细胞减少。糖(肾上腺)皮质激素或ACTH产生各式的反应，并且回跳作用的发生率高(1)。
现参考现有技术。日本专利JP1157915描述了包含芹菜和拉维纪草提取物的超氧化物歧化酶(SOD)诱导剂，该提取物可通过用蒸气或大量的有机溶剂或回流方法的蒸馏来提取的。提取物可以以任意浓度使用，或者是以干燥物来使用。也可添加表面活性剂和乳糖。
法国专利2611502号公开了一种伞形科植物根部的提取物，该提取物具有利尿、心血管、止痛和抗炎活性。根部是用醇溶剂来提取的，然后干燥成粉末或用作杀菌剂。
德国专利3638484号提及了一种在水或醇介质中的欧芹之植物提取物，其可用作抗虱香波。
日本专利JP1257155号提出了一种抗氧化食品，其含有属于伞形科植物之粉状提取物。
日本专利JP57056416号和587058327号述及了一种含有芹菜之醇提物的漱口剂组合物。
俄国专利SU639552号披露了一种作为产科用组合物之欧芹汁醇提物。
对比文献还包括日本专利说明书63-90505和63-90506，他们涉及一种新的源自属于伞形科植物之Bupleurum falcatum的根茎的多糖，其可作为自免疫疾病如关节风湿病、甲状腺炎和慢性肾炎的治疗剂。
芹类植物Apium graveolens(伞形科)的种子的提取物已被确定具有药理学性质。这些包括驱风、利尿、通经(利于月经排出的药物)和防腐作用。另外，这些提取物已被确证可用来治疗支气管炎、哮喘、肝和胆的疾病、炎症、风湿病、关节炎和痛风(28，29，30)。芹菜籽提取物的这些治疗性质通常是提取物中香精油的作用。这些香精油实际上是构成种子的1％-2％(V/W)的挥发油，其可通过水蒸气蒸馏来得到(31)。如Mc Leodet al(32)和Salzer(33)中所述的，香精油组合物已为气相色谱法所证实。油的主要组分是帖烃苎烯和β-蛇床烯，这两种帖烯构成总油的约80％。剩余部分由其他帖烯和给予芹菜油特定香味的化合物如丁基2-苯并(c)呋喃酮(31)。科学数据已经证明芹菜茎的水和80％乙醇提取物都具有如Lewis et al(34)和Al-Hindawi et a1(35)中所述的抗炎性质。
在芹菜的常规醇提中，一个方法是用95％乙醇提取芹菜籽，直到提取出所有的溶于乙醇的芹菜组分。在过滤除去颗粒性物质后，可溶性组分即可用作基于挥发油之含量的治疗剂。
发明概述
因此，本发明的目的就是提供通常治疗炎性疾病或病痛和/或由身体中尿酸蓄积而引发的疾病或病痛。
本发明的治疗剂也还用来治疗子宫内膜异位，这是指体腔中子宫衬里之细胞的生长引起了炎性反应。
本发明的治疗剂包括具有图1中之通式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI和XII的化合物及其混合物。本发明的治疗剂包括含有一个或多个上述化合物的组合物，该组合物还包含一种或多种脂肪酸。
在图1的通式中，R1和R2是优选具有8-22个碳原子的烷基链。合适的R1和R2可包括式-CH(CH2)n -或＝CH(CH2)n -的结构或这些结构之含有侧链结构的异构体。n的值可以是上至30的任意整数，但n优选为6-20。R1和R2可包含偶数或奇数个碳原子，并可相同或不同。
R1和R2的端基T可以是甲基、乙基、羟基、羧酸、醇或羧酸的衍生物或羧酸的盐。R1和R2也包括单键或是以共扼或非共轭形式的双键。
R1和R2也可以是选择性地为任意取代基所取代的烷基链，所说的取代基可以包括氨基、羟基、磺酰基、硝基、氧基、烷氧基、卤素、为烷基取代基所取代的氨基或为烷基取代基所取代的磺酰基。
选择性的取代基S1，S2、S3和S4也可选自氨基、羟基、磺酰基、硝基、氧基、烷氧基、卤素、为烷基取代基所取代的氨基或为烷基取代基所取代的磺酰基。
以虚线表示的键表示在所示的位置由于价键的需要可能存在一个任意的键。
通式II的化合物可通过邻苯二甲酸酐与格氏试剂RMgX的反应来形成，其中X为卤化物，R是烷基。而后，通式I和III的化合物可通过化合物II与烷基卤化物的起始反应及随后的与醇的反应来形成。或者是，化合物II与醇反应，随后用酸进行脱水反应。通式IV的化合物可通过邻苯二甲酸与适当的烷化剂如格氏试剂来制备。
通式VI化合物的制备如下，荼醌与适当的烷化剂如格式试剂在2和3位上反应，制得式VI化合物，然后在相关部位上进行如上的脱水反应，制得式V和VII的化合物。
化合物VIII和IX可通过涉及有关位置上之烷基化的Friedel Crafts反应来制备，其中，烷基部分是支链结构的。
化合物X、XI和XII的制备如下，以氨或烷基胺与相应的化合物I、II或III反应，在有关位置上由-NR基团取代氧。
本发明植物提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)使植物原料与有机溶剂相接触，以提取植物原料中的可溶性组分，即制得溶剂提取物；
(2)分离植物原料与溶剂的混合物，以便由其中除去颗粒性物质；
(3)通过除去溶剂来浓缩提取物。
本发明在其范围内还包括植物提取物，该提取物包含上述化合物，以及特别是伞形科属、芹菜(Apium graveolens)、欧芹(Petroselimun hortense)和莳萝(Anethum graveolens)的植物提取物。
然而，令人高兴的是这些化合物也存在于茄属植物中。
植物提取物可由植物的叶和茎得到，但优选使用植物的种子作为起始原料。
对于芹菜籽，各种合适的芹菜籽的变种包括法国的、中国的和印度的种类，然而优选芹菜籽的印度变种。
优选将芹菜籽碾碎成粉末。这可通过多种方法中的任意一个来达到。如果芹菜籽的量相对较少，则研钵和研杵适于用来研碾。
另外，植物原料可以在球形磨、盘磨或其他任何适于粉碎植物原料的装置中被碾碎或研磨。首先，将平均尺寸为1.5×1.55mm、厚度为0.5mm的芹菜籽粉碎成平均直径为0.1-0.2mm的细颗粒。
碾碎后，将碾碎的种子悬浮在由以下溶剂构成的组中的合适溶剂中：醇，丙酮，二氯甲烷、苯、氯仿，二元醇包括丙二醇、醚和合适的有机油脂。最好的是，溶剂是醇。优选的醇为乙醇。乙醇的合适浓度为95％-98％(V/V)。种子与乙醇的优选比值为1kg种子对16升的乙醇，但该比值最高可至1kg种子对5升乙醇。
根据本发明，虽然可以使用95-98％的醇，但在本发明的方法中使用由95-98％浓度的乙醇重蒸馏的醇或纯醇将更为有效。因此，醇的优选浓度为99.99％。
缓慢搅动悬浮液，直至芹菜籽中的可提取的组分完全被所选用的溶剂提取出来。水浴温度可以不同，但优选为室温。可以使用更高的水浴温度。水浴可在封闭系统如各种容量的罐体中进行。水浴时间依芹菜籽的条件而变化，但优选最多至8天。
随后将颗粒性植物原料除去。颗粒性植物原料优选通过过滤和/或沉降来除去，但也可使用离心方法。过滤提取物之过滤器的合适孔径为0.2-10微米，更为合适的是4-5微米。可将两个或更多的过滤器串联使用。过滤过程可佐以负压或使用真空泵。
将已除去颗粒性植物原料的提取物浓缩，以除去溶剂和水(如果有的话)，剩下非挥发性的残留物。溶剂可通过使用加热、真空和/或加压而由提取物中蒸馏掉。如果溶剂为乙醇，蒸馏温度为可变的，但优选50-60℃。
在本发明的优选方案中，所制得的初始提取物是1/10浓缩物(即1kg的醇提物是由10kg的种子制得的)的醇提物。
醇提物可在真空下进一步浓缩，这样，由于除去乙醇和水，可减去50％的重量，从而得到粘性液体或浓缩物。10kg的种子适于制得0.5kg的浓缩物或1/20的浓缩物。
根据本发明，具信上式的化合物，特别是丁基2-苯并(c)呋喃酮，芹菜子烯交酯(sedanenolide)和芹菜子交酯(cis和trans型都可，否则即为主要是来自植物的香精油)与必须脂肪酸及其前列腺素类似物的生理反应相仿。这些脂肪酸包括源自亚油酸的n-6系列和源自α-亚麻酸的n-3系列，有关详情见Horrobin和Manku在Essential Fatty Acids Pathophysiology and Roles in Clinical Medicine中的文章：“Clinical Biochemistry of EFA”的22-24页(36)。
在将本发明之治疗剂施用到患有炎性疾病的病人时，上述化合物的服用或注射使得血中相同或相似的脂脂酸的水平升高，由此减轻外伤的疼痛。必须脂肪酸与全身功能的调节有关。
本发明的植物提取物适于以粉剂销售，其可在真空下干燥，也可包含磷酸二钙或其他合适的填料。
本发明所用的合适组合物可包括图1中之通式I-XII化合物中的一种或多种及5-95％重量的填料。更优选的是，包含在上述组合物中的填料至少为50％(重量)，最优选的是，包含在上述组合物中的填料至少为75％(重量)。
可与本发明之治疗剂联合使用的填料包括：二氧化硅、葡聚糖、葡萄糖或其他合适的碳水化合物。但优选磷酸二钙。乙醇提取物的光谱学
香精油溶解在醇中，并在190-214nm的U.V.区吸收(37)。因此，为证实醇提物中有香精油的存在，进行了光谱测定。
实施例1证实80％醇(如乙醇)提取物在稀释至25,000时的最大吸收即在200nm。
乙醇提取物的高效液相色谱(HPLC)
基于Fallon A，Booth RFG和Bell LD之Applicationsof HPLC in Biochemistry(PP193-196)(37)中所述的HPLC方法，实施例II表明了在提取物中的香精油有三个主峰及他们间相联系的外形。这些峰是A，B和C。
实施例III描述了制备型HPLC的条件，其是用来分离和纯制香精油之峰A，B和C。
由这些纯化合物的分离，可测得其重量，然后即可确定这些香精油在乙醇提取物和浓缩物中的浓度。
香精油(A，B和C)的光谱(实施例IV)
在80％乙醇中的纯香精油(A，B和C)的光谱测定表明，在可见光区，仅有如实施例I所示的特征UV.轮廓，而没有其他吸收。即，纯化合物有280nm的吸收峰和191-192nm的最大吸收(实施例IV)。
质谱、核磁共振和红外分析(实施例V)
质谱(MS)、核磁共振(NMR)和红外光谱(IR)已辨认出脂肪酸/油的三个峰为正丁基2-苯并(c)呋喃酮、芹菜子烯交酯和芹菜子交酯(实施例V)。
提取物的组成
经比较试验，确定含有34mg干重/ml之浓缩乙醇提取物的80％乙醇溶液将用于缓解风湿性疼痛的生物医学研究中。
34mg/ml之乙醇提取物的HPLC峰形如实施例VI所示。因此，峰A、B和C之间的比值可由他们的峰高来计算。
所以，B/A＝9.50
      C/A＝26.25
      C/B＝2.76由B/A和C/A的比值，即可计算出这些峰以总固体为计在提取物和在经稀释的提取物(34mg/ml)中的浓度。
因此，按34mg/ml之经稀释的乙醇提取物：1∶9.5∶26.25 A = 1 36.75 × 34 = 1.008 mg B = 9.5 36.75 × 34 = 8.789 C = 26.25 36.75 × 34 = 24.286 mg 34.083mg
在实施例Ⅲ中，由已知的峰C的浓度(峰A、B及C相似)，由实施例Ⅵ所示的峰高即可计算出脂肪酸/油A，B和C及区域D的浓度。因此，A＝0.5mg/ml
  B＝7.5mg/ml
  C＝20.5mg/ml
     28.5mg/ml则“D”区一定是34-28.5＝5.5mg/ml。由此，A，B，C，D的比值为1∶15∶41∶11。
血浆脂肪酸
由于在人血液中自然存在多种的脂肪酸，所以在服用含有34mg/ml之提取物的80％乙醇酊剂以及含有68mg之提取物的胶囊之前和之后采集血样。其结果是相似的。在两种情况下，血中三种(3)特别脂肪酸/油和其他脂肪酸的水平都升高，然后三小时后降至低于0时间(即服用提取物之前)的水平。另外，血浆与纯脂肪酸/油A、B和C共同进行色谱分析，表明血液和提取物中的脂肪酸/油之间是同样的。(实施例VII)
试验性研究
用Mc Gill疼痛调查表(Pain Questionaire)进行试验性研究：15位33-83岁的自愿者，他们都被医学上诊断为风湿性疼痛，患病时间10±8.5年，这是连续性的或是周期性的。在四个时间间隔上对自愿者进行测试，复个间隔为连续的三周，在此之后他们不继续服用提取物，并可再回到他们自愿参加的研究中。12周后，自愿者表明平常疼痛(t＝4.2，P＜0.001)和当前疼痛(t＝5.23，P＜0.001)的转换数据中有统计上的减少。疼痛的减轻是时间-剂量型的(r＝-0.90，0.001＜P＜0.01)。平常疼痛与当前疼痛也是负性相关的(r＝-0.90，0.001＜P＜0.01)。患有疼痛之平常和当前身体面积的数量也有明显的统计上的减少(P＜0.001)，前述的面积与平常疼痛(0.001＜P＜0.01)和当前疼痛(0.02＜P＜0.05)的减轻是相关的。刚重新进入研究时，自愿者的平均疼痛水平是其原始疼痛水平的70％。重新进入研究的时间延迟是2-57天。在平常疼痛、当前疼痛、患有疼痛之平常和当前身体面积上的减少都与研究的第一部分的情形相同。标准的血液生化学和血液学都是正常的。
剂量反应
基于由关节病和风湿病疼痛、前述的相关关系和实施例III的疼痛缓解之试验性研究，12周中当前疼痛与平常疼痛和患有疼痛的身体面积是相关的。然后，相对于当前疼痛的减轻可推算出3、6和12周时消耗的提取物的量(图34)。图35表示根据直到达到零疼痛时所服用的提取物来推断的曲线。
这样：
提取物在80％乙醇中为34mg/ml，2ml/day
＝68mg之提取物/天
＝1428mg/3周
＝2856mg/6周
＝5712mg/12周
推断出达到零疼痛时为11400mg。
1、12周中，该剂量为958.33mg/周或136mg/天。
2、这样，为在1周内达到零疼痛缓解，剂量将是958.33×12＝11500mg/周，
或1642.85mg/天
或821.42mg/每天二次。
每天1642.85mg之芹菜籽提取物的1/20浓缩物的剂量具认为是最大剂量。
本研究中所用的最小剂量是每天68mg的芹菜籽提取物之1/20浓缩物。
由“提取物的组成”页和实施例VI，可得到峰A、B和C的比值。然后计算这些峰在34mg/ml提取物之80％乙醇溶液中的浓度。这样，可进行相同的计算，以得出821.42mg的最大单一剂量。
∴A＝22.35mg
  B＝212.34mg
  C＝586.73mg
Figure A9419317600201
     281.42mg
与纯化合物的峰A、B和C相似，可确定实施例VI和D区。然后计算出脂肪酸A、B、C和D区的浓度。
因此，A＝12.1mg/ml
      B＝181.2mg/ml
      C＝495.3mg/ml
Figure A9419317600202
         788.6mg/mlD区是821.42-788.6＝32.82mg/ml。
实施例
        实施例I
乙醇提取物的U.V.和可见光谱
方法测量波长范围    90-185nm测量方式      (ABS)光测标度       (ABSO-1)反应时间       1秒狭缝宽度       2nm波长标度扩大   20nm/cm扫描速度       60nm(1)将样品和对比侧的吸收匣用溶剂注满。(用石英匣)(2)设定测量条件，如下：
启动波长     900→至λ
测量方式     (ABS→按键)
反应时间     1→反应
狭缝宽度     2→狭缝
波长标度扩大 20→图纸形式
扫描速度     60→扫描速度
记录方式     记录→关
调节SEQ以得到无背景校正的光谱
光源         灯选择→自动
光测标度     0→标度→100→标度
             (0→标度→1→标度)
校正波长     900→背景校正→185→背景校正
      启动(λ1-λ2)nm的灯。(3)按扫描键以启动背景校正。“正在校正”灯亮起来。背景校正在900-185nm的范围内进行。
由示于图2中的所得到之可见和UV光谱图，可以看出本发明芹菜籽提取物在稀释至1/25,000时在200nm时有最大吸收。
        实施例II乙醇提取物的高效液相色谱(分析用的)
使用Waterman单泵和C18分析用柱对乙醇提取物进行H.P.L.C分析。缓冲液是48％乙腈、52％水，PH＝7.0，流速0.5ml/min，图纸走速5mm/min，吸收203nm及0.01全反射的标度
图3是1μl的1/10稀释的乙醇提取物。香精油令人感兴趣的峰是A、B和C。
结合图4-6，其表明香精油A，B和C的吸收范围。
图4是乙醇提取物稀释至1/200，其表明丢失了252nm的峰，而峰B的面积减少。
图5是乙醇提取物稀释至1/50，其表明丢失了峰A，280nm的峰B和峰C减小。
图6是乙醇提取物稀释至1/50，其表明丢失了峰A和B，而且340nm的峰C则几乎全部丢失。
这表明，在提取物的峰中，吸收U.V.形(实施例II)是由于香精油，而不是乙醇提取物中的任何杂质。图4-6中所示的D相当于不包括峰A、B和C的吸收踪迹(trace)部分。
        实施例III
    高效液相色谱(制备用)
用PH7.0之48％乙腈和52％水将提取物稀释至1/10。所得黑色沉淀用己烷按1∶20萃取。在旋转蒸发器中于真空下将己烷除去。得到绿色的油状物。然后将其应用到C18制备用HPLC柱上，以48％乙腈、52％水为缓冲液。
流速        5ml/min
标度        0.4全反射
走纸速度    5mm/min
吸收        203nm
图7中三个峰A、B、C的第一次分离表明峰B和C还需要再次进行色谱分析。因此，图8所示为再次进行色谱分析的峰C，图9所示为再次进行色谱分析的峰B。这样三个峰(A、B、C)得到纯化。在旋转蒸发器中于减压下浓缩峰A、B和C的溶液至干，然后称重，再溶于80％乙醇中，以用于实施例II所述的分析用HPLC。
        实施例IV
脂肪酸峰A、B和C的光谱测定
如实施例I所述进行可见和U.V.光区的光谱测定。
在可见光区的光谱中没有吸收。在U.V.光区中，峰A在190nm有最大吸收，峰B是191nm，峰C是192nm。如图10-12所示。
        实施例V
质谱、核磁其振和红外光谱
实施例V涉及前述峰A、B和C的进一步分子特征。见图13-18所示。更具体地讲，图13-18代表峰A、峰B和峰C样品之质谱(MS)、核磁共振(NMR)和红外光谱(IR)的同时特征。图13是峰A的MS分析。很明显是丁基2-苯并(c)呋喃酮的结构。图14显示相同峰A的NMR，其证实了由MS中得出的结构。这表明有约70％芹菜子烯交酯和30％的正丁基2-苯并(c)呋喃酮存在。
图15是峰B的MS分析。同样，丁基2-苯并(c)呋喃酮结构是明显的。这为图16之相同峰B的NMR所证实，其表明有正丁基2-苯并(c)呋喃酮的存在。图17是峰C的MS分析。这表明有芹菜子交酯的存在。图18之使用红外光谱测定的进一步结构分析证实了由MS得到的结论。
        实施例VI乙醇提取物的分析用HPLC。该提取物用80％乙醇稀释至固体物的浓度为34mg/ml
如实施例II所述那样进行分析用HPLC。
图19-22证明了峰高对所用样品的体积的线性关系。样品是稀释至34mg/ml的乙醇提取物，将该提取物按1/10稀释以用于HPLC分析。
因此，在图19-21中，峰1对应于2μl的样品，峰2对应于1μl的样品，峰3对应于4μl的样品，峰4对应于3μl的样品，而峰5对应于5μl的样品。
由此数据可得到图22所示的校准曲线，并可确定有关组合的浓度。
        实施例VII
在服用提取物之前和之后的脂肪酸血浆水平
如前所述(实施例II)进行分析用HPLC。
在零时间和此后服用提取物后的不同时间间隔采集血样。由静脉针刺采集0.5ml的血样，放入EDAT涂布的管中，然后离心得到血浆。
血浆用80％乙醇稀释至1/2，以沉淀蛋白质，并使脂肪酸留存在溶液中。每0.1ml等份的血浆用80％乙醇加至0.5ml。然后再加入0.5ml 48％乙腈，使血浆的总稀释系数为20。然后取1.0ml作分析用。
图23.零时间的受试者表明在血浆中有三个自然存在的峰(A、B、C)的存在。在服用乙醇提取物(340mg)后，C峰冲出标度，然后只得使用20倍的稀释。
图24.受试者1，零时间，血浆20倍稀释。峰C仍在，但峰A和B在此稀释下没有发现。
图25.受试者1在服用提取物20分钟后表明，峰C增加108％。图26.受试者1在服用提取物70分钟后表明，峰C减少33％。
图27.受试者1在服用提取物3小时后表明，峰C不存在了。
图28.受试者2在零时间和在服用136mg提取物后的35分钟。峰A增加50％，峰B增加60％，峰C增加62％。
图29.受试者3在零时间和在服用136mg提取物后的1.0小时。峰A增加50％，峰B增加68％，峰C增加85％。
图30.受试者4在零时间和在服用提取物后的85分钟。只有峰B和C存在，但减少50％。图31.受试者5在零时间和在服用提取物后的3小时。只有峰B和C存在，但减少40％。
这些结果表明，虽然峰A、B和C的零时间浓度每个之间都不一样，但他们都有同样的模式，即：服用提取物后增加，而3小时时减少至低于零时间浓度。从C18柱上的保留时间来看，如果血浆峰A、B和C不与提取物中的相同，则他们是相似的。提取物和血浆中的纯化合物也如此(图32，共同进行色谱分析的图33)。
    实施例VIII
风湿病疼痛之疼痛缓解的试验性研究
1、统计上的考虑
1.1风湿病
风湿病代表着100多种风湿性疾病，其综合症是其他疾病的表现，和/或与其他疾病有关。因此，这种复杂性使得对风湿性疾病的分类、治疗和诊断都很困难。所以，诊断已被认为是一个变数，通过在研究中接纳自愿者，而由单独的医疗专家和普通住院医师及自诊来诊断，由此对其进行控制/让其进行。
1.2疼痛
风湿性疾病的主要普通因素是来自患病身体区域的疼痛。因此使用标准的Mc Gill疼痛调查表，该调查表被设计成可以对临床疼痛、疼痛评价指数进行定量测定，其可进行统计上的估测并用于个体对比。另外，问答被设计成以下这样，相同的问题以不同的方式来问，以通过统计上的分析来交叉检查反应。
1.3安慰剂对照
疼痛是变化的，其可以是忽重忽轻的或是连续的。因此要测定对平常疼痛和患有疼痛之平常身体面积以及询问时的当前疼痛和患有疼痛之当前身体面积的估测。因此，如果没有或限制安慰剂作用，那么平常疼痛和患有疼痛之平常身体面积就应随时间显著减少，并且是相关的。也就是说，安慰剂没有逆向作用。相似的，平常疼痛随时间的显著减少与当前疼痛的显著减少应是相关的。同样，当前疼痛随时间的显著减少与患有疼痛之当前身体面积是相关的。另外，患有疼痛之平常身体面积随时间的显著减少与患有疼痛之当前身体面积的显著减少是相关的。
1.4对照
由于1.1和1.3中所讨论的变化，自愿者之对照组的建立如果不是不可能也将是困难的。这可由自愿者充当其自身的对照来克服。这可通过表述研究期间的疼痛与研究开始的疼痛之比来实现。
1.5功效
功效实质上是产物性能的量度。这些产物可以有由低到高的功效。这就意味着，对于低功效的产物，很少有受试者对治疗有反应，研究需要为数众多的受试者来确定将获取最大效益者。对于高功效的产物，只需很少的受试者来证明功效。
1.6研究设计
对交叉研究(一组)或双交叉(两组)要仔细考虑，其中，自愿者一个阶段服用安慰剂，而另一个阶段则服用活性产物。但是，由于与活性产物味道相同的安慰剂尚不知道其存在，而且活性组分的作用的持续和方式都尚未知晓(washout)，所以不能确立交叉点。因此设计一个纵向的研究，其中，在自愿者于停止服用提取物后要求重回研究时，重复研究的第一部分。以此方式，与统计上的讨论(第三部分)一起，即可控制安慰剂作用，并确定功效。
在研究衩始，使用Mc Gill疼痛调查表对总共15名自愿者进行估测，并采集5ml血样以用于血液生化分析。然后给自愿者服用3周的酊剂形式的提取物，即在80％乙醇中为34mg/ml。一个人每天以少量的水服用两次(0.1ml)。
在3周结束时，对自愿者进行如前所述的估测，然后再重复此过程3周(共6周)。再给自愿者服用6周的提取物，然后在这6周结束时(共12周)进行继续(follow-up)测试。然后自愿者停止服用乙醇提取物，而且如果他们希望回到研究中，他们可通知当地官员，再重复研究的第一部分(2×3周)。
2.12周(0，3，6，12周)的结果
一组由15名自愿者构成，大多数情况(93％)都已被医学上诊断患有关节病或风湿病的疼痛，包括骨关节炎、骨质疏松症和痛风。疼痛已忽轻忽重地或连续地存在了约10年，而且大多数的自愿者(73％)都曾想尽各种办法来缓解疼痛。疼痛和关节缺乏活动性妨碍了进行家务劳动、受好和就业活动。
自愿者对疼痛的通常感受与患有风湿病/关节病的疼痛相似。这表明这些自愿者已经经受了很长时间的疼痛。
自愿者的平均年龄使他们处于关节性风湿病的高发组。表1示出了对每一个自愿者的现行药物治疗，如果适用的话。
解释
如表2和图34，12周中当前疼痛强度与自愿者的总数(Σ)之间的相关关系在统计上是显著的。其发生几率低于1/100。这表明，使用乙醇提取物(时间型的功效)，自愿者的当前疼痛强度连续下降12周。
如果不考虑没有疼痛的自愿者，统计分析偏向于乙醇提取物的功效。
解释
对于图35和表3所示数据的解释，3周和6周时的总平常疼痛指数相互间有显著的下降，而且相对于0周也有显著的下降，然而12周时不再进一步下降。
当前疼痛在3周时也表现了显著的下降，这与6周时的相似，12周时与6周时相比较又有进一步的显著下降。其单独发生的几率低于1/1000。
平常和当前疼痛指数的减少之间也有显著的相关。这样，平常疼痛在12周中下降，当前疼痛也如此。其单独发生的机会低于5/100。解释
如表4所示，将3，6和12周时的疼痛指数转换，以其对研究初始0周时的比例来表现。这样，每个自愿者即可作为其自身的对照：3，6或12周时的疼痛指数/0周时的疼痛指数
解释
以下将对表5中的数据作以解释。
平常疼痛
使用‘t′测试的参数分析表明，在3周时有4位没有反应者，而且平均的转换疼痛指数与0周时的没有显著差别。在6周时，没有反应者产生了反应，而且转换的平均疼痛指数有显著的下降，其与12周时的相似。其单独发生的机会小于1/1000。
如果不考虑在3周时的没有反应者及没有疼痛的反应者、以及12周时的没有疼痛的反应者，那么3周时和12周时的平均残余疼痛指数有显著的下降。其发生的机会小于1/1000。
当前疼痛
在3周时平均转换的疼痛指数有显著的下降，其与6周和12周时的相似。其发生的机会在低于5/1000-小于1/1000之间。如果不考虑在3、6和12周时没有疼痛的反应者，平均残余疼痛指数仍有显著下降。其发生的机会在小于1/100-小于1/1000之间。
解释
对于图36和表6所示数据的解释，在3周时患有疼痛之平常和当前身体面积的平均数量有显著的下降，其与6周和12周时的相似。其单独发生的机会低于1/1000。
12周中患有疼痛之平常和当前身体面积的平均数量之间有显著的相关。其发生的机会低于1/1000。解释
对于图37和表7所示数据的解释，患有疼痛的平常身体面积与平常疼痛指数之间的相关是显著的。其发生的机会低于1/100。这表明，随着患有疼痛之平常身体面积的数量减少，平常疼痛指数也减少。
解释
对于图38和表8所示数据的解释，患有疼痛的当前身体面积与当前疼痛之间的相关是显著的。其发生机会低于5/100。这表明，随着患有疼痛之当前身体面积的数量减少，当前疼痛指数也减少。
3、自愿者在12周时停止乙醇提取物的治疗后，在重新进入研究时对他们的继续治疗
总共有7名自愿者在继续治疗时失去联络。
三名自愿者无故不继续进行。一名自愿者因医疗问题复发，不能继续。一名自愿者由于进行州际旅行，不能照做。二名自愿者在57天时仍没有疼痛，不愿重新进入研究。停止乙醇提取物治疗后的57天时，有八名自愿者回到研究中。
在12周时停用乙醇提取物后，自愿者(8名)通知当他官员，他们希望重新开始服用乙醇提取物。疼痛调查表可以完成，并以此作为0周。0周时的当前疼痛以原始当前疼痛(开始研究时的原始0周)的百分数来表示。计录自停用乙醇提取物到疼痛增加时的天数，并以在要求重新开始服用乙醇提取之前的天数的比例来表示，其数据见图39和表9。
解释
如果当前疼痛的发展变得几乎与原始疼痛相等，则比例为0.5。也就是说，自愿者忍受疼痛的天数与疼痛发展的天数等量。当前疼痛的百分数越低；相对于开始研究时的原始疼痛的百分数，重新进入研究所推迟的时间就比发展疼痛水平所需的时间更长。
这表明，重新进入研究的要求不是以安慰剂作用为基础的。
疼痛增加的平均时间是23±17.4天，范围是9-57天。
重新进入研究的平均时间是34±15.5天，范围是9-57天。
比例＝0.68。
因此，以平均数来看，自愿者在重新进入研究前可以忍受70％的原始疼痛。
没有疼痛的自愿者的数量使得参数分析的数据不充分。因此，没有进行参数分析。
重新进入研究时的疼痛
解释
对于表10中数据的解释，在停止乙醇提取物治疗前的12周时，八名自愿者之平常和当前疼痛以及患有疼痛的平常和当前身体面积，相对于重新进入研究(0周)都有显著的下降。因此，疼痛和患有疼痛之身体面积在停止乙醇提取物治疗后都有显著增加。其单独发生的机会在低于5/100至低于1/1000之间。
重新进入研究后的继续治疗
解释
对于表11中数据的解释，在3周时平常和当前疼痛都显著下降，在6周时进一步显著下降。其发生的机会低于1/1000。
在3周时，患疼痛之平常和当前身体面积都有显著下降。其发生机会低于1/1000。
在6周时，患疼痛之平常身体面积没有进一步的显著下降，然而患疼痛之当前身体面积有所增加，但仍显著低于0周时的(P＜0.001)。
疼痛和患疼痛之身体面积的显著下降与研究的第一部分之情形相同。患有疼痛的当前身体面积在6周时的增加，其仍显著低于0周时的，表明强烈的疼痛通过使用乙醇提取物受到了控制。
解释
在图40和表12中，图示性地表示了八名自愿者在研究的第一部分(0，3，6和12周)和重新进入研究(0，3和6周)时的平常疼痛。这代表了对平常疼痛之Mc Gill疼痛评价指数的统计分析。
解释
在图41和表12中，图示性地表示了八名自愿者在研究的第一部分(0，3，6和12周)和重新进入研究(0，3和6周)时的当前疼痛。这代表了对当前疼痛之Mc Gill疼痛评价指数的统计分析。
解释
在图42的表14中，图示性地表示了八名自愿者在研究的第一部分(0，3，6的13周)和重新进入研究(0，3和6周)时的患有疼痛之平常身体面积之Mc Gill疼痛评价指数的统计分析。
解释
在图43和表15中，图示性地表示了八名自愿者在研究的第一部分(0，3，6和12周)和重新进入研究(0，3的6周)时的患有疼痛的当前身体面积。这代表了对患有疼痛之当前身体面积的Mc Gill疼痛评价指数的统计分析。
4、血液生化学
表16中的数据代表了血浆的生化分析，血样是非空腹的，并收集在EDTA管中，这就限制了测试范围。然而，初始血浆样品可以与在自愿者正服用乙醇提取物时采集的样品相比。可得如下结论，提取物对肾或肝功能没有影响。
一名自愿者在初始测试时，葡萄糖、GAMA-GT、GPT和GOT的水平就已升高，而在3，6，12和18周时仍保持升高的水平。在3，6，12和18周时，氯化物含量下降。经咨询，建议该自愿者去看医生。诊断为糖尿病及肉样瘤病复发，此人在进一步的继续治疗时失去联络。
一名自愿者在初始测试时患有痛风，其尿素、肌酸酐和尿酸盐的水平都已升高，这表明肾功能障碍。在3周时这些都恢复到正常范围，而且在6周和12周时仍保持在正常的范围内。此人在进一步的继续治疗时失去联络。
解释
表17的数据为，七名自愿者在研究结束后仍服用乙醇提取物3个月时的空腹(8小时)血液生化和血液学结果。
5、结论
结果符合统计上的讨论，其表明乙醇提取物可减轻风湿病/关节病疼痛患者的疼痛和患有疼痛的身体面积。
虽然，对于一些乙醇提取物的使用者，疼痛缓解仅仅出现在使用的第一个3-6周内，但其结果表明，疼痛缓解依赖于疼痛水平和使用乙醇提取物的持续时间。因此，服用乙醇提取物12周可达到最佳功效的结果。由参数分析可得以下结果。
               使用12周
平常疼痛 平均疼痛水平减少52％疼痛减少范围11％-100％
平常疼痛 残余疼痛(没有疼痛的不考虑)平均水平减少45％残余疼痛减少范围11％-90％
当前疼痛 平均水平减少68％疼痛减少范围10％-100％
当前疼痛 残余疼痛(没有疼痛的不考虑)平均水平减少45％残余疼痛减少范围10％-90％
这样，由于在12周时在显著减少的平常疼痛和当前疼痛的平均值之间没有显著的差异，所以可声明如下，乙醇提取物平均减少疼痛在45％-68％之间，而范围在10％-100％之间。该结果还表明，由于服用乙醇提取物而没有更进一步的疼痛，所以，乙醇提取物可持续缓解疼痛。这进一步为停用提取物后的疼痛返复及重新使用提取物后的疼痛减轻所证实。
反应的型式和相关分析表明，对于那些尚有残余疼痛的自愿者，如果他们在12周后继续服用乙醇提取物，则可得到进一步的疼痛缓解。外推表明，将需要总共持续22-24周。
乙醇提取物对肾和肝功能或常规血液生化学没有任何影响。相似地，乙醇提取物对血液学参数也没有影响。
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                表1
 1.无药物治疗 9
 2.维生素 1
 3.镇痛药 3(BP或扑热息痛)
4.激素 1(雌激素)
5.抗炎药 1(奈心安)
                                    表2
                          时间(周)
    当前疼痛强度     0     3     6     12     Σ
    EX＝难以忍受     0     0     0     0     0
    HOR＝剧痛     1     1     0     1     3
    DlST＝痛苦     1     2     1     1     5
    DC＝不适     7     2     6     1     16
    M＝中度     4     8     3     8     23
r＝-0.972p＞0.001＜0.01
                            表3
   周     Σ平常疼痛     X2     P     ∑当前疼痛  X2     P
    0     496.4     298.7
    3     354.2     40.7 ＜0.001     212.8  24.7   ＜0.001
    6     252.2     29.4 ＜0.001     189.6  2.5    ＞0.1
    12     261.5     0.34 ＞0.5     125  33.4    ＜0.001
r＝0.917p＞0.02＜0.05
                                          表4
                                      疼痛评价指数
                 平常疼痛对照1±0.33                  当前疼痛对照±0.36
   案号  3周(s    6、周.s     12、周s     3v周s  6、周s     12、周s
    1  0.38     0.60     0.68     0.47  0.10     0.56
    2  2.27     0.57     0     2.27  0.57     0
    3  0.53     O.15     0.10     0.11  0     0
4 0 0.26 0.46 0 0.26 0.46
    5  0.30     0.08     0     0.10  0     0
    6  0.60     0.40     0.28     0.14  0.40     0
    7  0.87     0.36     0.62     1.3  0.57     -
    8  1.00     0.79     0.60     0  0.15     0
    9  0.77     0.81     0.57     0.57  0.82     0.18
    10  0.82     0.78     0.81     0.84  0.82     0.86
    11  0.42     0.44     0.20     0.62  0     0.10
    12  1.02     0.86     0.89     1.0  0.91     0.90
    13  1.10     0.94     0.82     1.1  1.10     0.85
    14  0.95     0.78     0.79     0.36  0.80     0.52
    15  0.28     0.19     0.33     0  0.06     0
    X*±sd  0.76±0.51     0.53±0.28     0.48±0.30     0.59±0.61  0.43±0.37     0.32±0.34
    X**±sd  0.53±0.28      -     0.55±0.25     0.40±0.25  0.50±0.30     0.55±0.29
*X±sd＝全部观察
**X±sd＝全部观察减去大于1和为零的观察
                                                     表5
    平常疼痛指数              3周           6周             12周
    ｀t＇          P     ｀t＇     P     ｀t＇        P
    ×±sd*×±sd**     1.533.82     ＞0.05＜0.1＜0.001     4.20     ＜0.001     4.524.10     ＜0.001＜0.001
    当前疼痛指数
    ×±sd*×±sd**     2.243.46     ＞0.02＜0.05＞0.001＜0.01     4.283.85     ＜0.001＜0.01     523321    ＜0.001＞0.001＜0.01
                                             表6
    周      平常身体面积     ｀t＇    P     当前身体面积    ｀t＇      P
    0     3±1.91n＝77     2.15±1.2n＝68
    3     1.9±1.1n＝53     4.2 ＜0.001     1.48±0.63n＝27     3.5     ＜0.001
    6     1.59±0.81n＝45     5.6 ＜0.001     1.26±0.64n＝27     4.7     ＜0.001
    12     1.7±0.77n＝45     5.4 ＜0.001     1.27±0.56n＝33     5.0     ＜0.001
                      表7
    周  平均身体面积 总疼痛指数之和
    平常     平常
    0      3     496.4
    3     1.9     354.2
    6     1.59     252.2
    12     1.7     261.5
r＝0.973p＞0.001＜0.01
                表8
    周 平均身体面积 总疼痛指数之和
    当前     当前
    0     2.15     298.7
    3     1.48     212.2
    6     1.26     189.6
    12     1.27     125.0
     r＝0.915p＞0.002＜0.05
                   表9
    当前原始当前疼痛％     疼痛发展天数比例/重新开始乙醇提取物的比例
          60     42/49＝0.86
         100     14/28＝0.50
          51     13/15＝0.87
          95     21/36＝0.58
          39     29/36＝0.80
         100     7/46＝0.1 5
r＝0.827p＞0.02＜0.05
                              表10
                         McGILL疼痛评价指数
                 时间(周)
    周12   周O   周0X2       周OP
    平常疼痛     99.3  137.5  14.7     ＜0.001
    当前疼痛     36.6  116.3  186.0     ＜0.001
    平常身体面积     34  47  4.97 ＞0.02＜O.05
    当前身体面积     11  40  76.4     ＜O.001
                                                  表11
                                         McGILL疼痛评价指数
疼痛   周0  周3     周6     周3     周6  周3      周6
平常  137.5  85.3     60.7     19.8     7.1 ＜0.001     ＜O.001
当前  116.3  39.2     25.6     51.1     4.7 ＜O.001     ＞O.02＜0.05
UBA  47  22     19     13.3     0.4 ＜0.001     O.5
PBA  40  5     13     30.6     12.8 ＜O.001     ＜O.001
UBA＝平常身体面积总数
PBA＝当前身体面积总数
               表12
  时间(周)  平常疼痛(UP)
    0     262.4
    3     130.1
    6     97.2
    12     99.3
    0     137.5
    3     85.3
    6     52.6
             表13
  时间(周)  当前疼痛(PP)
    0     144.6
    3     83.2
    6     26.5
    12     36.6
    0     110.0
    3     29.2
    6     13.7
                表14
  时间(周) 平常身体面积(UBA)
    0     109
    3     31
    6     24
    12     34
    0     47
    3     20
    6     16
           表15
  时间(周) 当前身体面积(PBA)
    0     48
    3     24
    6     7
    12     11
    0     40
    3     6
   6     13
             TABLE16    表    16
                         血液生化学
    磷酸盐     Normal       钠     Normal
    总蛋白     Normal     氯化物     Normal
    白蛋白     Normal     重碳酸盐     Normal
    球蛋白     Normal     葡萄糖     Normal
    胆固醇     Normal     总胆红素     Normal
    甘油三酯     Normal     缀合胆红素     Normal
    尿素     Normal     Gamma GT     Normal
    肌酸酐     Normal     GPT     Normal
    尿酸盐     Normal     GOT     Normal
NORMAL＝正常
                    表17
                    血液生化学
      钠  Normal     ALT(SGPT) Normal
钾 Normal AST(SGOT) Normal
    氯化物  Normal     LDH Normal
    重碳酸盐  Normal     钙 Normal
    其他阳离子  Normal     白蛋白调解 Normal
    葡萄糖  Normal     磷酸盐 Normal
    尿素  Normal     总蛋白 Normal
    肌酸酐  Normal     白蛋白 Normal
    尿酸盐  Normal     球蛋白 Normal
    总胆红素  Normal     铁 Normal
    缀合胆红素  Normal     胆固醇 Normal
    ALK Phos  Normal     甘油三酯 Normal
    Gamma GT  Normal Normal
NORMAL＝正常

Claims (22)

1、治疗炎性疾病的方法，包括给所述炎性疾病的患者施以图1所示之通式I-XII的化合物或其混合物的步骤。
2、如权利要求1的方法，其中所述的化合物包括丁基2-苯并(c)呋喃酮，芹菜子烯交酯和cis及trans型的芹菜子交酯。
3、用于治疗炎性疾病的组合物，包括一个或多个图1所示通式I-XII之化合物或其混合物，还包括药物上可接受的填料。
4、如权利要求3的组合物，其中包括在所述组合物中的填料占5-95％(重量)。
5、如权利要求4的组合物，其中包括在所述组合物中的所述填料占50％(重量)或更多。
6、如权利要求5的组合物，其中包括在所述组合物中的所述填料占75％(重量)或更多。
7、如权利要求1的组合物，其中所述的填料为磷酸二钙。
8、制备用于治疗炎性疾病之植物提取物的方法，包括以下步骤：
(1)使植物原料与有机溶剂接触，该溶剂可提取植物原料中的可溶组分，以此制得溶剂提取物；
(2)将植物原料与溶剂的混合物分离，以由其中除去颗粒性原料；
(3)通过除去溶剂来浓缩提取物。
9、如权利要求8的方法，其中所述的植物原料是碾碎的植物种子，该种子的平均尺寸为1.5×1.55mm，厚度为0.5mm，将其粉碎以制得平均直径为0.1-0.2mm的细小的颗粒。
10、如权利要求9的方法，其中已粉碎的种子是悬浮在有机溶剂中的，种子与溶剂的比例为1kg的种子对5-16升的溶剂。
11、如权利要求10的方法，其中所述的溶剂为乙醇。
12、如权利要求11的方法，其中乙醇的浓度为95-98％。
13、如权利要求11的方法，其中乙醇的浓度为99.99％。
14、如权利要求10的方法，其中，在缓慢搅动下将已粉碎的种子与溶剂混合，直到种子中所有可提取的组分完全被有机溶剂提取出来。
15、如权利要求14的方法，其中，颗粒性植物原料是通过过滤被除去的，所使用的过滤器的孔径为0.2-10微米。
16、如权利要求15的方法，其中，在除去颗粒性植原料后，再浓缩有机溶剂提取物，以除去挥发性物质，而留下非挥发性的残留物。
17、如权利要示16的方法，其中，在真空下进一步浓缩残留物，这样，由于除去有机溶剂和水而有50％的重量损失，以得到粘性的液体或浓缩物。
18、由权利要求17的方法制备的粘性液体或浓缩物可用作治疗剂。
19、由芹菜籽之乙醇提取物制得的粘性液体或浓缩物，含有丁基2-苯并(c)呋喃酮，芹菜子烯交酯和芹菜子交酯。
20、用于缓解炎性疾病的治疗剂，包括如权利要求19的粘性液体或浓缩物。
21、治疗炎性疾病的方法，包括给以权利要求20之治疗剂的步骤。
22、由芹菜籽得到的乙醇提取物，其在HPLC分析时有实施例I-VI中的描述的峰A、B和C。
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