CN1129011A

CN1129011A - 含有两种纤维素酶成分的洗涤剂组合物

Info

Publication number: CN1129011A
Application number: CN 94193076
Authority: CN
Inventors: M·舒莱因; A·C·康文特; B·杰弗雷斯; D·F·迪科米罗夫
Original assignee: Novo Nordisk AS; Procter and Gamble Co
Current assignee: Novo Nordisk AS; Procter and Gamble Co
Priority date: 1993-07-12
Filing date: 1994-07-07
Publication date: 1996-08-14
Also published as: EG20618A; JPH09500667A; CZ11096A3; WO1995002675A1; MA23260A1; AU7069294A; BR9407066A; CA2166682A1; FI960132A0; FI960132A; MXPA94005317A

Abstract

含有如下第一和第二纤维素酶成分的洗涤剂组合物，1)第一纤维素酶成分具有保持型活性，优选在pH8.5下对纤维三糖的催化活性相当于Kcat至少为0.01S^-1，并具有颗粒污物去除能力，和(2)第二纤维素酶成分具有多个功能区，包括与催化区结合的至少一个非催化区，优选每毫克纤维素酶蛋白对Red Avicel的催化活性高于10^-4IU，并具有清色能力，其中至少一种纤维素酶成分为单一(重组)成分。该组合物用于含纤维素织物的清洗和清色。

Description

含有两种纤维素酶成分的洗涤剂组合物

本发明涉及含有纤维素酶的洗涤剂组合物，它在用于洗涤含纤维素织物时能提供更好的颗粒污物去除作用以及清色作用。

重复洗涤织物(特别是含纤维素织物)常造成织物粗糙。很早以前就已建议并证明使用溶纤维素酶降低含纤维素织物(如棉布)的粗糙度。但这种降低的机制仍未被详细阐明。

本领域至今仍未能完满解决对不仅具有良好清洁性能、还具有优良的织物软化性能和其它织物维护益处的洗涤剂组合物之需求。

在专利申请WO 89/09259(Novo Industri A/S)中已描述了用于降低含棉织物粗糙度的纤维素酶制剂。该专利申请(WO 89/09259)中公开了富含内切葡聚糖酶活性的纤维素酶部分。

溶纤维素酶(即纤维素酶)的效力作为织物清洁剂和降粗糙剂已被认识到一段时间；GB—A—2,075,028、GB—A—2,095,275和GB—A—2,094,826公开了含纤维素酶以提高清洁性能的洗涤剂组合物；GB—A—1,368,599公开了纤维素酶降低含棉织物粗糙度的应用；US.4,435,307教导了亲自腐质霉Humicola insolens的溶纤维素酶及其部分(称为ACX1)作为降粗糙度洗涤剂添加剂的应用。

EP—A—0 269 168公开了含纤维素酶的优化洗涤剂组合物，其在弱碱性PH范围内配制并提供织物清洁、软化和维护性能。

纤维素酶的实际应用受到阻碍，因为本领域中已知纤维素酶制剂是种复杂的混合物，而其中只有某部分在织物维护环境中有效；因而难于实现用于洗涤剂工业的纤维素酶的有经济效益的工业生产；而且为了在织物上获得所需效果将需要应用大量的这种纤维素酶制剂。

纤维素酶生产的改进常不能证明可有效地应用于洗涤剂中。

某些酶制剂如纤维素酶对洗衣的有益作用与国际接受的酶分类间模棱两可的关联至今仍是个问题。例如，许多被描述为纤维素酶的酶，按迄今已知的所有标准应可期望显示良好的洗涤性能，但在洗涤条件下对含纤维素织物的清色作用不好。

选择能够显示良好洗涤性能和清色作用的适当酶的现今仅有方法是大规模的洗涤试验，这需要大量的时间和资源。用于评价纤维素酶活性的所有已知方法，如使用CMC、滤纸、无定形和结晶纤维素的方法，都不能区别有价值的酶和无活性的酶，并且不能对用于洗涤含纤维素织物时的预期性能提供任何参考。

因此，开发更有效的含纤维素酶洗涤剂组合物以满足消费者的需要仍是一个问题，因为本领域现在还不知何种纤维素酶对此目的切实有效。

还有，希望提供一种新型含酶洗涤剂组合物，它能够提供有效的清色作用和颗粒污物去除作用，在有限洗涤循环次数后，它既不损坏也不部分降解含纤维素织物，如棉织物。

本发明涉及包含第一和第二纤维素酶成分的洗涤剂组合物，第一纤维素酶成分具有保持型活性并能够去除颗粒污物；第二纤维素酶成分具有多个功能区，包括结合于催化区的至少一个非催化区，并具有清色能力；其中至少一种纤维素酶成分是单一(重组)成分。

这种组合物无论是粒状洗涤剂还是液体洗涤剂形式都特别适用作洗衣洗涤剂。

令人惊异地发现，当用于洗涤含纤维素织物时具有清色活性的纤维素酶成分优选具有多个功能区，即一个或多个催化区与一个或多个非催化区结合，例如纤维素酶结合区，以及此成分可具有保持型活性或反转型活性；当用于洗涤含纤维素织物时具有颗粒污物去除活性的纤维素酶成分具有保持型活性。

相信第一纤维素酶成分的保持型活性可用该成分对低分子量碳水化合物底物显示催化活性的能力来证明；具有清色能力的第二纤维素酶成分的多功能区结构可用该成分对纤维糊精(尤其是具有6个葡萄糖单位的纤维糊精(DP6)，如染色微晶纤维素)显示高催化活性、而对低分子量碳水化合物底物基本不显示催化活性的能力来证明。

还发现由至少两种溶纤维素成分组成的纤维素酶组合物互补用于洗涤剂组合物，第一成分对染色微晶纤维素显示低度活性而对短纤维寡糖显示高度活性，第二成分对染色微晶纤维素显示高度活性，以提高用于洗涤含纤维素织物(如棉织物)时的洗涤剂性能，尤其是在不损害织物条件下获得颗粒污物去除作用(第一成分)和更好的清色作用(第二成分)。

本发明还涉及及含有所述第一和第二纤维素酶成分的洗涤剂组合物，除以上益处外，其在蛋白酶存在下在重负(heavy duty)液体中的稳定性提高。以前已观察到纤维素酶对蛋白酶的作用敏感，即在洗涤剂中一般使用的蛋白酶存在下，纤维素酶降解为低分子量多肽，使目标纤维素酶失活。

本发明组合物的第一种纤维素酶成分完全出人意料地显示：在中性PH下在含高水平洗涤蛋白酶的重负液体洗涤剂组合物中性能活性的高稳定性。发现该纤维素酶成分的性能稳定性对含有以硼酸为主的常规可逆性蛋白酶抑制剂的重负液体组合物中蛋白酶的降解敏感性较低。

该中性PH重负液体组合物在其表面活性剂组成、蛋白酶和蛋白酶可逆性抑制剂的水平方面可在宽范围内变化，而不丧失本发明的主要优点。本申请实施例部分描述了含有上述第一和第二纤维素酶成分的本发明洗涤剂组合物的典型实例。

本发明的另一目的是提供一种含第一和第二纤维素酶成分的洗涤剂添加剂，所述第一纤维素酶具有去除颗粒污物的能力，第二纤维素酶具有清色能力，其中至少一种纤维素酶成分为单一成分。

本发明的又一目的是提供一种在洗涤机中处理织物的方法，其包括应用本发明的洗涤剂组合物。

附图

本发明通过附图作进一步说明，其中：

图1表示保持型葡萄糖苷酶的机制；和

图2表示逆转型葡萄糖苷酶的机制。

在本说明书和权利要求中，术语“纤维素酶成分”指水解纤维素的酶。纤维素酶成分可为给定微生物产生的纤维素酶系统中存在的成分，这种纤维素酶系统大多含有数种不同的纤维素酶成分，包括通常鉴别为如纤维生物水解酶、外切纤维生物水解酶、内切葡聚糖酶、β-葡糖苷酶的那些。

或者，纤维素酶成分可为单一成分，即基本不合通常存在于给定微生物产生的纤维素酶系统中的其他纤维素酶成分，该单一成分为重组成分，即克隆编码该单一成分的DNA序列，然后用该DNA序列转化细胞并在宿主中表达，参见，如国际专利申请WO 91/17243和WO 91/17244，将它们并入本文作为参考。宿主优选为异源宿主，但在某些条件下，也可以是同源性宿主。

本文所用术语“纤维素酶蛋白重量”指构成纤维素酶成分的蛋白重量。

本文所用“清色作用”指通过多次洗涤循环去除衣服和/或织物表面的绒毛和小球从而保持原始的颜色。

本文所用术语“颗粒污物去除作用”指对被污物颗粒或铺张在织物表面的微小纤维罗网的其它不溶物颗粒所污染的含纤维素织物或衣服的更强的清洁作用。

本文所用术语“保持型活性”指(第一)纤维素酶成分催化水解的立化化学过程，其中(保持型糖苷酶)的机制如图1中所示，参见Chem.Rev.，90，p.1171—1202(1990)(Sinott，M.L.：酶促糖基转移的催化机制)。离开具有保持型活性纤维素酶活性位点的裂解产物以及底物均为β-构型，参见Eur.J.Biochem，217，p.947—953(1993)。

本文所用术语“反转型活性”指其中(反转型糖苷酶)的机制如图2所示的纤维素酶成分催化水解的立体化学过程，参见Chem.Rev.，90，p.1171—1202(1990)(Sinott，M.L.：酶促糖基转移的催化机制)和Eur.J.Biochem，217，p.947—953(1993)。

糖苷键水解的立体化学一定由酶活性位点的结构和拓扑结构决定，并常解释为单置换或双置换催化机制。相信在给定纤维素酶家族(参见Gene(Amst)，81，p.83—95(1989)和Biochem，J.，293，p.781—788(1993))中，甚至在它们的氨基酸保守率极低时也具有相似的折迭，并进一步显示给定纤维素酶家族的成员都具有相同的总体折选和拓扑结构(J.Biochem，217，p.947—953(1993))。

另外，考虑第一纤维素酶成分可具有外切式作用。术语“外切一式作用”指从链的非还原端去除纤维二糖单位而开始纤维素的降解。

另外，考虑第二纤维素酶成分具有内切一式作用。术语“内切一式作用”指水解纤维素织物中低结晶度的无定形区。

本文所用术语“(功能)区”指能够完成某一具体任务的氨基酸序列。例如术语“碳水化合物结合区”或“纤维素结合区”(“CBD”)指能够使酶与碳水化合物底物，尤其是纤维素结合的氨基酸序列，术语“催化活性区”(“CAD”)指能够进行催化裂解并具有一个或多个活性位点的氨基酸序列。CBD是一非催化功能区的实例。CAD和CBD可通过连接区连接或结合。参见Trends Biotechnol.，5，p.255—261(1987))和Microbiol.Rev.，55，p.303—315(1991)。

本文所用术语“核心酶”指基本由单一切能区即催化活性区组成的酶，该酶没有“尾”。

本文所用术语“对染色微晶纤维素的活性”指对用吸光/产荧光化合物(如活性染料)共价标记的微晶纤维素的水解活性，通过分光光度计测量模拟洗涤条件的条件下水解产生的标记产物释放量来测定，例如模拟碱性pH、温度、持续时间、搅拌和洗涤剂浓度。该实验在“方法”下描述。

因此，对染色微晶纤维素显示催化活性的纤维素酶成分一定在模拟洗涤条件下能够从修饰的微晶纤维素上释放标记的可溶产物。

本文所用术语“对短纤维寡糖的活性”指对含有两个葡萄糖单位和一外加的离去基团，如葡萄糖单位、或修饰的葡萄糖单位、或产色/产荧光基团、或其他基团的纤维寡糖的活性，造成糖苷键的断裂，通过在模拟洗涤条件(如碱性PH、温度、持续时间、搅拌和洗涤剂浓度)的条件下水解，测量还原性末端复原或产色或产荧光标记化合物的释放量来测定。该实验在“方法”下描述。

因此，显示对短纤维寡糖催化活性的纤维素酶在洗涤条件下一定能够水解短纤维寡糖，即含有两个葡萄糖单位和一外加离去基团的纤维寡糖，外加离去基团如为葡萄糖单位，或修饰的葡萄糖单位，或产色/产荧光基团，或其他基团。

本申请中，术语“免疫反应性”意指产生的蛋白可与针对原始纤维素—或半纤维素降解酶的抗体发生反应。

本申请中，术语“同系物”意指由如下DNA编码的多肽，该DNA和编码具有目标氨基酸序列之纤维素酶成分的DNA在某些特定条件下与同一探针杂交[如在5×SSC中预浸并在20％甲酰胺溶液、5×Denhard’t溶液、50mM磷酸钠(PH6.8)和50μg变性超声处理牛胸腺DNA中-40℃预杂交1小时，然后在补有100μM ATP的相同溶液中于-40℃杂交18小时]。该术语意在包括目标序列的衍生物，如通过在原序列C—末端和/或N—末端增加一个或多个氨基酸残基，在原序列中一个或多个位点取代一个或多个氨基酸残基、在原序列的任一末端或两末端或在原序列内一个或多个位点缺失一个或多个氨基的残基，或在原序列内一个或多个位点插入一个或多个氨基酸残基而获得。认识到如上所述任何衍生物与同一探针杂交，这说明本发明范围内的纤维素酶衍生物都与含目标氨基酸序列的纤维素酶成分具有相同的优良活性。另外，任何增加、取代、缺失或插入优选涉及目标序列的相当有限数目的氨基酸，即小增加、取代、缺失或插入，因为预期大的增加、取代、缺失或插入可造成不满足上述杂交要求的纤维素酶成分(多肽)。

本发明涉及一种洗涤剂组合物，它含有具有保持型活性和颗粒污物去除作用的第一纤维素酶成分，和包含至少一个与催化区结合的非催化区并具有清以作用的多功能区第二纤维素酶成分，其中至少一种纤维素酶成分为单一(重组)成分。

纤维素酶成分可使用任何适宜技术从目标微生物获得。例如，可通过用本领域中已知方法发酵微生物和从发酵液或微生物中分离含纤维素酶的制剂来获得纤维素酶制剂，但更优选使用本领域已知的重组DNA技术。这种方法一般包括在允许目标酶表达的条件下、在培养基中、培养用能够表达并携带纤维素酶成分编码DNA的重组DNA载体转化的宿主细胞，并从培养物中回收酶。编码纤维素酶之DNA序列的克隆

可按本领域中熟知的各种方法从产生目标纤维素酶的任何细胞或微生物分离编码亲本纤维素酶的DNA序列。首先应使用来自产目标纤维素酶的生物的染色体DNA或信使RNA构建基因组DNA和/或cDNA文库。然后，如果纤维素酶的氨基酸序列已知，可合成同源性标记寡核苷酸探针并用于从细菌DNA或从真菌cDNA文库鉴定编码纤维素酶的克隆。或者，含另一细菌或真菌菌株纤维素酶之同源序列的标记寡核苷酶探针，可用于鉴定纤维素酶编码性克隆，即通过杂交并用较低严格性洗涤条件来进行。

还有一种鉴定产纤维素酶克隆的方法，它涉及：将基因组DNA片段插入表达载体中(如质粒)，用所形成的基因组DNA文库转化不产纤维素酶的细菌，然后将转化的细菌铺在含纤维素酶底物的琼脂上。那些含有携纤维素酶之质粒的细菌将产生周围有清澈琼脂晕的菌落，这是由于所分泌的纤维素酶对底物的消化。

或者，可按已知的标准技术合成制备编码酶的DNA序列，如S.L.Beaucage和M.H.Caruthers在Tetrahedron Letters 22，1981，p.1859—1869中所述磷酸二酰胺法，或Matthes等在The EMBO J.3，1984，p.801—805中所述方法。按照磷酸二酰胺法，如在自动DNA合成仪中合成寡核苷酸，纯化、退火、连接并克隆在适当的载体中。

最后，DNA序列可以是基因组和合成、合成和cDNA或基因组和cDNA的混合来源，这是按标准技术连接合成、基因组或cDNA来源的片段(适当时)而制得的，这些DNA片段相当于整个DNA序列的各个部分。还可用特异探针通过聚合酶链反应(PCR)来制备DNA序列，如按US 4683202或R.K.Saiki等，Science 239，1988，p.487—491中描述的方法。纤维素酶变体的表达

根据本发明，按上述方法或本领域已知的其他替代方法产生的突变的纤维素酶编码序列可用表达载体表达成酶形式，表达载体一般包含编码启动子、操纵子、核糖体结合位点、翻译起始信号、和选择性的抑制基因或各种活化基因的调控序列。为了能使表达的蛋白质分泌，可在纤维素酶编码序列之前插入编码“信号序列”的核苷酸。为了在调控序列的引导下表达，待处理的本发明靶基因在适当的阅读框架内与调控序列有效地连接。能加入质粒载体并能支持突变纤维素酶基因转录的启动子序列，包括但不限于原核β—内酰胺酶启动子(Villa—Kamaroff等，1978，Proc.Natl，Acad.Sci.U.S.A.75：3737—3731)和tac启动子(DeBer等，1983，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.80：21—25)。还可参考Scientific Amcrican，1980，242：74—94中的“来自重组细菌的有用蛋白”。

按照一种实施方案，用带有突变DNA的表达载体转化枯草芽孢杆菌。如果在分泌性微生物如枯草芽孢杆菌中表达，信号序列之前可有翻译起始信号，之后为目标DNA序列。信号序列的作用是转运表达产物至细胞壁，在此处分泌时则将信号序列从产物切下。以上定义的术语“调控序列”包括存在的信号序列。

在一现优选的生产本发明纤维素酶变体的方法中，丝状真菌用作宿主生物。该丝状真菌宿主可方便地为以前已用作产重组蛋白宿主的种类，如曲霉菌株，例如黑曲霉、构巢曲霉或米曲霉。米曲霉在产生重组蛋白中的应用广泛描述在如EP 238 023中。

为了在曲霉中表达纤维素酶变体，在编码纤维素酶变体的DNA序列之前加启动子。该启动子可为在曲霉中显示强转录活性的任何DNA序列，并可衍生自胞外或胞内蛋白如淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、蛋白酶、脂酶、纤维素酶或糖酵解酶的编码基因。

适宜启动子的实例为那些衍生自米曲霉TAKA淀粉酶、Rhi-zomucor miehei天冬氨酸蛋白酶、黑曲霉α-淀粉酶、黑曲霉酸稳定性α-淀粉酶、黑曲霉葡糖淀粉酶、Rhizomucor miehei脂酶、米曲霉碱性蛋白酶或米曲霉丙糖磷酸异构酶编码基因启动子。

具体讲，当宿主生物是米曲霉时，用于本发明方法中的优选启动子为米曲霉TAKA淀粉酶启动子，因为它在米曲霉中显示强转录活性。在EP 238 023中有TAKA淀粉酶启动子的序列。

终止序列和多聚腺苷化序列可适当地来自启动子的同一来源。

对转化真菌宿主细胞所用技术在EP 238 023中有适当的描述。

为了保证纤维素酶变体从宿主细胞分泌，编码纤维素酶变体的DNA序列之前可加信号序列，它可以是天然存在的信号序列或其功能性部分或合成序列，只要能使蛋白从细胞中分泌即可。具体讲，信号序列可衍生自曲霉淀粉酶或葡糖淀粉酶的编码基因，Rhizo mucormiehei脂酶或蛋白酶的编码基因，或腐质霉纤维素酶、木聚糖酶或脂酶的编码基因。该信号序列优选衍生自米曲霉TAKA淀粉酶、黑曲霉中性α-淀粉酶、黑曲霉酸稳定性α-淀粉酶或黑曲霉葡糖淀粉酶的编码基因。

用于培养转化宿主细胞的培养基可为任何适于生长曲霉细胞的常规培养基。转化子通常是稳定的，可在无选择压力下培养。但如果发现转化子不稳定，可向细胞中引入选择标记用于选择。

可通过熟知的步骤从培养基中方便地回收宿主细胞分泌的成熟纤维素酶蛋白，包括通过离心或过滤从培养基中分离细胞，加盐如硫酸铵从培养基中沉淀蛋白成分，然后经层析步骤分离如离子交换层析、亲和层析等分离。

本发明洗涤剂组合物含有的非单一重组成分可为常规技术产生(如由给定微生物产生)的成分，作为纤维素酶体系的一部分。

在本发明的一优选实施方案中，通过在异源宿主中克隆和表达产生的单一成分在洗涤剂给组合物中存在的量，以组合物中纤维素蛋白总重量为基础计算，至少为5％，优选至少10％，尤其是至少20％。

第一和第二成分两者都可为重组(单一)成分，即，通过克隆编码该单一成分的DNA序列，用该DNA序列转化细胞，并在异源或同源性宿主中表达。但第一和第二成分还可在同一异源或同源宿主中克隆和表达。

在本发明的一优选实施方案中，在洗涤剂组合物中存在的第一和第二纤维素酶成分的纤维素酶蛋白重量比率优选在约30∶1到约1∶30范围内，更优选在约10∶1到约1∶10范围内，尤其是在约2∶1到1∶2范围内。

因此，本发明所要求的洗涤剂组合物中应优选分别含有如下浓度的第一和第二纤维素酶成分，该浓度相当于能使形成的洗液中每升含0.001—100mg纤维素酶蛋白的浓度。

优选地，第一和第二纤维素酶成分分别为真菌或细菌纤维素酶成分，即真菌或细菌来源的。

设想第一和第二纤维素酶成分分别来自或分离和纯化自己知能够产生纤维素水解酶的微生物，如腐质霉属、牙孢杆菌属、木霉属、毁丝霉属、Phanerochaete、Schizophyllum、青霉属、曲霉属和地霉属(Geotricum)的种类。产生的成分可以是同源性或异源性成分。优选这些成分是同源性的。但产自特异微生物并与针对高纯度纤维素酶成分(它具有所希望的特性)的抗体产生免疫反应的异源成分也是优选的。

优选地，第一纤维素酶对低分子量碳水化合物底物显示催化活性，尤其是对纤维三糖在PH8.5的催化活性相当于Kcat至少为0.01s^-1。

第一纤维素酶不足以或不能够提供清色作用，因而对染色微晶纤维素显示低催化活性。

在本发明的一优选实施方案中，第一纤维素酶成分为核心酶，即无“尾”或为单一功能区蛋白的纤维素酶。

可用于本发明洗涤剂组合物中的第一纤维素酶成分可方便地为与来自腐霉H.insolens DSM 1800的高纯化～70KD纤维生物水解酶(EC3、2、1、91)抗体产生免疫反应的纤维生物水解酶成分，或为该～70KD纤维生物水解酶显示纤维素酶活性的同系物或衍生物。优选的纤维生物水解酶成分具有所附SEQ ID NO：1中所示在Nucle-ic Acid Research，vol，18(1990)，p668(De Oliviera，Alzevedo，M和Radford，A.)中所公开的氨基酸序列，或与所述序列具有至少60％，优选至少70％，更优选75％，更优选至少80％，更优选85％，尤其是至少90％同源性的所述纤维生物水解酶的变体。在以下实施例1中，称该纤维素酶成分为CBH I。

另一优选的纤维生物水解酶成分是由相当于所附SEQ ID NO：1的第1—449(部分)氨基酸序列的449个氨基酸的序列组成的核心酶(“核心CBH I”)。核心CBH I的表观分子量为约48KD。

或者，第一纤维素酶成分可为与来自腐质霉H.insolens，DSM1800的高纯化～5.0KD内切葡聚糖酶的抗体产生免疫反应的内切葡聚糖成分，或者该～50KD内切葡聚糖酶显示纤维素酶活性的同系物或衍生物。优选的内切葡聚糖酶成分具有SEQ ID NO：2中所示PCT专利申请WO 91/17244中图14A—E公开的氨基酸序列，或与所述序列具有至少60％，优选至少70％，更优选75％，更优选至少80％，更优选至少85％，尤其至少90％同源性的所述内切葡聚糖酶的变体。在下文实施例1中，称该内切葡聚糖酶成分为EGI。

或者，第一纤维素酶成分可为与来自尖镰孢DSM 2672的高纯化～50KD(表观分子量，氨基酸组成相当于45KD，外加2n糖基化位点)内切葡聚糖酶的抗体产生免疫反应的内切葡聚糖酶成分，或为该～50KD切内葡聚糖酶显示纤维素酶活性的同系物或衍生物。优选的葡聚糖酶成分具有SEQ ID NO：3中所示、PCT专利申请WO91/17244图3，中公开的氨基酸序列，或与所述序列具有至少60％，优选至少70％，更优选75％，更优选至少80％，更优选85％，尤其是至少90％同源性的所述内切葡聚糖酶的变体。在下述实施例1中，称此内切葡聚糖酶成分为EGI—F。

使用常规Taka启动子和AMG终止子，用含有相当于SEQ IDNO：3氨基酸序列之DNA序列的质粒转化后，米曲霉可产生EGI—F纤维素酶成分。可用阳离子层析将EGI—F纯化至同质，其PI＞9。应用Adv.Protein Chem，17，p.69—165(1962)(C.Tanford)中的PHKa值，基于氨基酸组成计算的PI为9。计算的摩尔消光系数为58180。

另一优选的第一纤维素酶成分可为欧洲专利公开EP—A2—271004中公开的任何纤维素酶，该纤维素酶的非降解指数(NDI)不小于500，是一种最佳PH不低于7的亲碱纤维素酶，或当羧甲基纤维素(CMC)用作底物时在PH不低于8时的相对活性为最佳条件下活性的50％或更高；该纤维素酶优先选自碱性纤维素酶K(由芽孢杆菌KSM—635，FERM BP 1485产生)、碱性纤维素酶K—534(由芽孢杆菌KSM—53t，FERM BP 1508产生)、碱性纤维素酶K—539(由芽孢杆菌KSM—539，FERM BP 1509产生)，碱性纤维素酶K—577(由芽杆菌KSM—577，FERM BP 1510产生)；碱性纤维素酶K—521(由芽杆菌KSM—521，FERM BP 1507产生)；碱性纤维素酶K—580(由芽杆菌KSM—580，FERM BP 1511产生)；碱性纤维素酶K—588(由芽杆菌KSM—588，FERM BP 1513产生)；碱性纤维素酶K—597(由芽杆菌KSM—597，FERM BP 1514产生)；碱性纤维素酶K—522(由芽杆菌KSM—522，FERM BP 1512产生)；CMC酶I，CMC酶II(均由芽杆菌KSM—635，FERM BP 1485产生)；碱性纤维素酶E—II和E—III(均由芽杆菌KSM—522，FERM BP1512产生)。

具有清色能力的第二纤维素酶成分优选具有多个功能区，即一个或多个催化区与一个或多个非催化区结合，如纤维素结合区，因为例如纤维素结合位点的存在增强对清色作用的活性。

第二纤维素酶成分可具有保持型活性或反转型活性。

优选地，第二纤维素酶成分显示对纤维糊精的高催化活性，更优选对较长链纤维糊精，尤其对还原的更长链纤维糊精的高催化活性。

在本发明的一优选实施方案中，第二纤维素酶成分显示对染色微晶纤维素的高催化活性，特别是每1mg纤维素酶蛋白对红微晶纤维素(Red Avicel)的催化活性高于10^-4IU，1IU酶活性的定义见于“方法”下。

可用于本发明洗涤剂组合物中清色成分的(第二)纤维素酶成分通常对低分子量碳水化合物底物基本不显示活性。优选地，第二纤维素酶成分对低分子量碳水化合物底物(尤其对纤维三糖)在PH8.5下的催化活性相当于Kcat低于0.01s^-1；更优选第二纤维素酶成分对纤维三糖基本不显示催化活性，即该成分不能水解纤维三糖，但能够水解β-1，4-葡萄糖单位的较高级寡聚物。

按“方法”下所述方法测量对红微晶纤维素的催化活性。

虽然本发明洗涤剂组合物中存在第二纤维素酶成分的主要目的是该成分的清色能力，但第二成分常常还能够去除颗粒污物。

可用于本发明洗涤剂组合物中的第二纤维素酶成分可方便地为与来自腐质霉H.insolens DSM 1800的高纯化～43KD内切葡聚糖酶之抗体产生免疫反应的内切葡聚糖酶，或其为该～43KD内切葡聚糖酶显示纤维素酶活性的同系物或衍生物。优选的内切葡聚糖酶成分具有SEQ ID NO：4中所示在PCT专利申请WO 91/17243中SEOID#2公开的氨基酸序列，或与所述序列具有至少60％，优选至少70％，更优选75％，更优选至少80％，更优选85％，尤其至少90％同源性的所述内切葡聚糖酶的变体。在下述实施例1中，称此内切葡聚糖酶为EG V。

另一优选的内切葡聚糖酶成分含有SEQ ID NO：5所示、PCT专利申请WO 93/11249中SEQ ID#11公开的部分DNA序列编码的氨基酸序列，或氨基酸序列与所述序列具有至少60％，优选至少70％，更优选75％，更优选至少80％，更优选85％，尤其是至少90％同源性的所述内切葡聚糖酶的变体。在下述实施例1中，该内切葡聚糖酶被称为EG VI。

又一优选内切葡聚糖酶成分含PCT专利申请WO 93/11249中SEQ ID#9(将其并入本文作为参考)公开的部分DNA序列编码的氨基酸序列。下文实施例1中称此内切葡聚糖酶与EG II。

又一优选内切葡聚糖酶成分含有PCT专利申请WO 93/11249SEQ ID#7(将其并入本文作为参考)公开的部分DNA序列编码的氨基酸序列。下文实施例1中称此内切葡聚糖酶为EG III。

或者，第二纤维素酶成分可为与来自芽孢杆菌B.lautus NCIMB40250的高纯化～63KD内切葡聚糖酶之抗体产生免疫反应的内切葡聚糖酶，或其为该～60KI内切葡聚糖酶显示纤维素酶活性的同系物或衍生物。优选的内切葡聚糖酶成分具有SEQ ID NO：6中所示在PCT专利申请WO 91/10732中SEQ ID#7公开的氨基酸序列，或与所述序列具有至少60％，优选至少70％，更优选75％，更优选至少80％，更优选85％，尤其至少90％同源性的所述内切葡聚糖酶的变体。在下述实施例1中，称此～60KD内切葡聚糖酶为EG C。

在一特异方面，本发明提供洗涤剂添加剂。可通过加入含有一种或多种酶的不同添加剂，或通过加入包含所有这些酶的合并添加剂来向洗涤剂组合物中加入酶。本发明的洗涤剂添加剂(即分离的或全并的添加剂)可被配制成如颗粒、液体、浆液等。优选的洗涤剂添加剂配制物为颗粒(尤其是非粉尘颗粒)、液体(尤其是稳定化液体)、浆液、或保护的酶。

可按如US 4 106 991和US 4661 452中公开的方法制备无粉尘颗粒，可任选按本领域已知的方法将其包衣。洗涤剂酶可在制粒前或后进行混合。

液体酶制剂例如可通过加入诸如丙二醇的多元醇、糖或糖醇、乳酸、硼酸或硼酸衍生物(如硼酸芳酯)进行稳定化，可按已有方法配制该制剂。其他酶稳定剂是本领域内熟知的。可按EP 238 216中公开的方法制备保护的酶。洗涤剂组合物

可将本发明的洗涤剂组合物配制成任何方便的形式，如粉末或液体。本发明的洗涤剂组合物可含有本领域中已知的其它洗涤剂成分，如实施例中所示的助洗剂、漂白剂、漂白活化剂、抗污物再沉剂、香料等等。

另外，洗涤剂组合物含有表面活性剂，其可为阴离子、非离子、两性、阳离子或两性离子型以及这些类型的混合物。

1972年5月23日授予Norris等的美国专利366 4 961中给出了这些表面活性剂的典型实例。

阴离子表面活性剂的混合物在本申请中尤其适用，如磺酸盐和硫酸盐表面活性剂的混合物，其重量比为5∶1至1∶2，优选3∶1至2∶3，更优选3∶1至1∶1。优选的磺酸盐，包括烷基中含9—15(尤其是11—13)个碳原子的磺酸盐，包括烷基中含9—15(尤其是11—13)个碳原子的烷基苯磺酸盐，和α-磺酸化脂肪酸甲酯，其中脂肪酸衍生自C₁₂-C₁₈脂肪源，优选C₁₆-C₁₈脂肪源。每种情况下阳离子为碱金属，优选钠。优选的硫酸盐表面活性剂为烷基中含12—18个碳原子的烷基硫酸盐，其任选与烷基中含10—20(优选10—16)个碳原子、平均乙氧基化度为1—6的乙氧基硫酸盐混合。本发明中优选的烷基硫酸盐的实例为牛脂烷基硫酸盐、椰子烷基硫酸盐、和C_14-15烷基硫酸盐。每种中的阳离子也是碱金属阳离子，优选钠离子。还优选用于本发明的是硫酸盐和/或乙氧基硫酸盐的混合物。

可用于本发明的一类非离子表面活性剂是环氧乙烷与疏水残基的缩合物，以提供平均亲水—亲脂平衡值(HLB)为8—17，优选9.5—13.5，更优选10—12.5的表面活性剂。疏水(亲脂)残基可为脂肪或芳香性质，可对与任何特定疏水基团缩合的聚氧亚乙基的长度方便地进行调节，以产生亲水和疏水元件间具有适当平衡度的水溶性化合物。

特别优选的此类非离子表面活性剂为含3—8摩尔环氧乙烷/摩尔醇的C₉-C₁₅伯醇乙氧基化物，尤其是含6—8摩尔环氧乙烷/摩尔醇的C₁₄-C₁₅伯醇和含有3—5摩尔环氧乙烷/摩尔醇的C₁₂-C₁₄伯醇。

另一类非离子表面活性剂包括以下通式的烷基聚葡糖苷化合物：

RO(C_nH_2nO)tZx其中Z为葡萄糖衍生的残基；R为含12—18个碳原子的疏水烷基；t为0—10，n为2或3；x为1.3—4，该化合物包含10％以下的未反应脂肪醇和50％以下的短链烷基聚葡糖苷。EP—B—0070077,0075996和0094 118中公开了这类化合物和其在洗涤剂中的应用。

合适的非离子表面活性剂还有下式的多羟基脂肪酸酰胺表面活性剂或其烷氧基化衍生物：其中R¹为H、C_1-4烃基、2-羟乙基、2-羟丙基或其混合物，R₂为C_5-31烷基，及Z为具有线性烃链及至少3个直接与此链连接的羟基的多羟基烃基。优选，R₁为甲基，R₂为C_11-15烷基或链烯基直链如椰子烷基或其混合物，Z从还原性糖如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖在还原胺化反应中衍生而来。

又一类表面活性剂是诸如胺氧化物的半极性表面活性剂。适合的胺氧化物选自单C₈-C₂₀(优选C₁₀-C₁₄)N—烷基或链烯基胺氧化物，和亚丙基-1，3-二胺二氧化物，其中剩余的N位由甲基、羟乙基或羟丙基取代。

另一类表面活性剂是两性表面活性剂，如基于多胺的种类。

阳离子表面活性剂也可用于本发明洗涤剂组合物中，适当的季铵表面活性剂选自单C₈-C₁₆(优选C₁₀-C₁₄)N—烷基或链烯基铵表面活性剂，其中剩余的N位被甲基、羟乙基或羟丙基取代。

优选各种类表面活性剂的混合物，更优选阴离子—非离子混合物，也优选阴离子—非离子—阳离子混合物。尤其优选的混合物描述在英国专利2040987和欧洲专利申请公开0087914中。洗涤剂组合物可包含1％—70％(重量)的表面活性剂，但在本发明组合物中存在的表面活性剂量一般为1％至30％，更优选10—25％(重量)。助洗剂

助洗剂材料一般占本发明洗涤剂组合物的5％至80％。本发明组合物不含或基本没有含磷酸盐组洗剂(此处“基本没有”定义为构成洗涤剂助洗剂总系统的1％以下)，本发明助洗剂系统由水溶性助洗剂、水不溶性助洗剂、或其混合物组成。

水不溶性助洗剂可为无机离子交换材料，一般为无机水合硅铝酸盐材料，更优选水合合成沸石，如水合沸石A，X，B，MAP或HS。

优选的硅铝酸盐离子交换材料具有如下晶胞式：

Mz[(AlO₂)₂(SiO₂)_Y]_XH₂O其中M为钙交换阳离子，z和y至少为6；x与y的摩尔比为1.0至0.5，x至少为5，优选为7.5至276，更优选为10至264。该硅铝酸盐呈水合形式，优选含10％至28％、更优选18％至22％水的晶体。

上述硅铝酸盐离子交换材料进一步用粒径表征，其为0.1到10微米，优选为0.1—4微米。本文中的术语“粒径”代表通过常规分析技术如扫描电子显微镜的测定测得的给定离子交换材料的平均颗粒直径。该硅铝酸盐离子交换材料进一步用其钙离子交换容量来表征，其以无水物计算为至少200mg当量CaCO₃水硬度/g硅铝酸盐，一般在300mg eq./g到352mg eq./g范围内。该硅铝酸盐离子交换材料进一步用其钙离子交换率来表征，详细描述见GB—1,429,143。

用于实施本发明的硅铝酸离子交换材料是市场上可得到的，可为天然物质，但优选是合成衍生的。美国专利3,985,669中讨论了一种生产硅铝酸盐离子交换材料的方法。优选的可用于本发明的合成结晶硅铝酸盐离子交换材料有沸石A、沸石B、沸石X、沸石MAP、沸石HS和其混合物。在一特别优选的实施方案中，结晶硅铝酸盐离子交换材料是沸石A，并具有下式：

Na₁₂[(AlO₂)₁₂(SiO₂)₁₂]_xH₂O其中X为20—30，尤其为27。具有式Na₈₆[(AlO₂)₈₆(SiO₂)₁₀₆]—10.276H₂O的沸石X，以及式Na₆[(AlO₂)₆(SiO₂)₆]7.5H₂O的沸石HS也适用。

另一适合的水不溶性无机助洗剂材料是层状硅酸盐，如SKS—6(Hoechst)。SKS—6是一种由硅酸钠(Na₂Si₂O₅)组成的结晶层状硅酸盐。高Ca²⁺/Mg²⁺结合溶量主要是阳离子交换机制。在热水中该材料变得较易溶解。

水溶性助洗剂可为单体或寡聚的羧酸螯合剂。

含一个羧基的适当羧酸包括乳酸、乙醇酸和其酯衍生物，如比利时专利831368，821369和821370中所述。含两个羧基的多元羧酸包括琥珀酸、丙二酸、(亚乙二氧基)二乙酸、马来酸、二甘醇酸、酒石酸、丙醇二酸和富马酸的水溶性盐，以及德国专利公开2,446,686和2,446,687和美国专利3,935,257中公开的醚羧化物，和比利时专利840,623中描述的亚磺酰羧化物。含三个羧基的多元羧酸特别包括水溶性柠檬酸盐、乌头酸盐和柠康酸盐，以及琥珀酸衍生物如英国专利1,379,241中描述的羧甲基氨基琥珀酸盐、荷兰专利申请72058 73中描述的乳酸氧基琥珀酸盐(lactoxysuccinates)，和氧杂多元羧酸如美国专利1,387,447中描述的2-氧杂-1，1，3-丙烷三羧酸盐。

含有4个羧基的多元羧酸包括英国专利1,261,829中公开的氧杂二琥珀酸，1，1，2，2-乙烷四羧酸，1，1，3，3-丙烷四羧酸和1，1，2，3-丙烷四羧酸。含有磺基的多元羧酸包括英国专利1,398,421和1,398,422和美国专利3,936,448中公开的磺基琥珀酸衍生物，和英国专利1,082,1 79中描述的磺酸化热解柠檬酸，而含膦酸取代基的多元羧酸公开在美国专利1,439,000中。

脂环或杂环多元羧酸包括环戊烷—顺，顺，顺—四羧酸，环戊二烯五羧酸，2，3，4，5-四氢呋喃—顺，顺，顺—四羧酸，2，5-四氢呋喃—顺—二羧酸，2，2，5，5-四氢呋喃—四羧酸，1，2，3，4，5，6-己烷—六羧酸和多元醇如山梨醇、甘露醇和木糖醇的羧甲基衍生物。芳族多元羧酸包括英国专利1,425,343中公开的苯六甲酸、1，2，4，5-苯四酸和二苯甲酸衍生物。

上述羧酸中，优选的多元羧酸是每分子含至多三个羧基的羟基羧酸，尤其是柠檬酸。

用于本发明组合物的优选助洗系统包括水不溶性硅铝酸盐助洗剂如沸石A和水溶性羧酸螫合剂如柠檬酸的混合物。

可形成本发明助洗剂系统之部分的其他助洗剂材料包括无机物，如碱金属碳酸盐、碳酸氢盐、硅酸盐，和有机物，如有机膦酸、氨基聚亚烷基膦酸和氨基多元羧酸。

其他适当的水溶性有机盐为均聚或共聚酸或其盐，其中该聚羧酸包括被不多于2个碳原子彼此分隔的至少2个羧基。

此类聚合物公开于GB—A—1,596,756中。这种盐的实例为MW 2000—5000的聚丙烯酸盐和它们与马来酸酐的共聚物，如分子量为20,000—70,000(尤其是约40,000)的共聚物。任选成分

本发明组合物典型含有一般构成洗涤剂组合物一部分的任选成分。这种任选成分的实例有防再沉剂和污物悬浮剂、荧光增白剂、漂白剂、漂白活化剂、抑泡剂、防结块剂、染料和颜料，可加入所需的不同量。

适于本发明的防再沉剂和污物悬浮剂包括纤维素衍生物如甲基纤维素、羧甲基纤维素和羟乙基纤维素，及均聚或共聚羧酸或其盐。这类聚合物包括以上提及作为助洗剂的聚丙烯酸和马来酸酐—丙烯酸共聚物，以及马来酸酐与乙烯、甲基乙烯基醚或甲基丙烯酸的共聚物，其中马来酸酐构成共聚物的至少20mol％。这些物质一般以组合物重量的0.5％—10％，更优选0.75％—8％，更优选1％—6％的重量使用。

优选的荧光增白剂是阴离子性质，其实例有4，4’-二-(2-二乙醇氨基-4-苯胺基-S-三嗪-6-基氨基)芪-2：2’-二磺酸二钠，4，4’-二-(2-吗啉代-4-苯胺基-S-三嗪-6-基氨基)茋-2：2’-二磺酸二钠，4，4-二-(2，4-二苯胺基-S-三嗪-6-基氨基)芪-2：2’-二磺酸二钠，4’，4”-二-(2，4-二苯胺基-S-三嗪-6-基氨基)茋-2-磺酸钠，4，4’-二-(2-苯胺基-4-(N-甲基-N-2-羟乙基氨基)-S-三嗪-6-基氨基)茋-2，2’-二磺酸二钠，4，4’-二-(4-苯基-2，1，3-三唑-2-基)茋-2，2’-二磺酸二钠，4，4’-二-(2-苯胺基-4-(1-甲基-2-羟乙基氨基)-S-三嗪-6-基氨基)茋-2，2’-二磺酸二钠，2-(茋基-4”-(萘并-1’，2’：4，5)-1，2，3-三唑-2”-磺酸钠和4，4’-二(2-磺基苯乙烯基)联苯。

可使用任何颗料无机过氧化物漂白剂，其用量为组合物重量的3—40％，更优选8—25％，最优选12—20％(重量)。这种漂白剂的优选实例是过硼酸钠单水合物和四水合物，过碳酸盐和其混合物。

例如过碳酸盐颗粒与洗涤剂粉末中其它粒状成分干混合。

本发明组合物含有1—40％，优选3—30％，最优选5—25％(重量)的碱金属过碳酸盐漂白剂；其呈平均直径为250—900μm，优选500—700μm的颗粒形式。

当本发明组合物为洗衣活性时，过碳酸盐的水平一般为20％到80％(重量)。

碱金属过碳酸盐漂白剂一般呈钠盐形式。过碳酸钠是相当于式2Na₂CO₃·3H₂O₂的添加化合物。为了增强储存稳定性，过碳酸漂白剂可进一步用碱金属硫酸盐和碳酸盐的混合盐包衣。在1977年3月9日授予Interox的英国专利1,466,799中已描述了这种包衣及包衣方法。混合盐包衣材料与过碳酸盐的重量比在1∶2000至1∶4范围内，更优选在1∶99至1∶9，最优选在1∶49∶1∶19。优选该混合盐为硫酸钠和碳酸钠的混合盐，其通式为Na₂SO₄·n·Na₂CO₃，其中n为0.1—3，优选n为0.3—1.0，最优选n为0.2—0.5。

其他适合的包衣材料为硅酸钠，SiO₂∶Na₂O比率为1.6∶1至2.8∶1，及硅酸镁。

市场供应的碳酸盐/硫酸盐包衣的过碳酸盐漂白剂可包括少量重金属螯合剂如EDTA，1-羟基亚乙基1，1-二膦酸(HEDP)或氨基膦酸盐，在制备过程中加入之。按如上所述加入的优选的重金属螯合剂包括：有机膦酸盐和氨基亚烷基多(亚烷基膦酸盐)(如乙烷1-羟基二膦酸碱金属盐)、次氮基—三亚甲基膦酸盐、乙二胺四亚甲基膦酸盐和二亚乙基三胺五亚甲基膦酸盐。

特别当制备洗衣用洗涤剂组合物时，含过碳酸盐洗涤剂粉末的堆集密度优选为650g/l以上。

另一优选的另行混合的成分为过氧羧酸漂白前体，一般称为漂白活化剂，其优选以颗粒状或凝结形式加入。在美国专利1586769和214 3231中公开了此类化合物的适合例子，在欧洲专利公开0 062523中描述了将其制成粒状的方法。这种化合物的优选实例是四乙酰乙二胺和3，5，5-三甲基己酰氧基苯磺酸钠。

一般使用组合物重量0.5—10％(重量)，更常用1—8％，优选2—6％水平的漂白活化剂。

另一任选成分是抑泡剂，例如硅氧烷、硅石—硅氧烷的混合物。硅氧烷的一般代表是烷基化聚硅氧烷材料，而硅石一般使用粉碎形式如硅石气溶胶和干凝胶，及各种类型的疏水硅石。可以颗粒形式加入这些材料，其中抑泡剂以有利于释放的形式结合在水溶性或水不溶性、基本非表面活性的洗涤剂不可渗透的载体中。或者，抑泡剂可溶解或分散在液体载体中，通过喷雾施于一种或多种其他成分上。

如上所述，有用的硅氧烷泡沫控制剂可包括前文提到的烷基化聚硅氧烷类别与固态硅石的混合物。可通过将硅氧烷添加到固体硅石的表面制备这种混合物。优选的硅氧烷泡沫控制剂的代表是：粒径为10—20mμ、比表面积大于50m²/g疏水硅烷化(最优选三甲基硅烷化)硅石与分子量为约500到约200,000的二甲基硅氧烷液体紧密混合，硅氧烷与硅烷化硅石的重量比为约1∶1到约1∶2。

Bartollota等的美国专利3,933,672中公开了一种优选的硅氧烷泡沫控制剂。其他特别有利的抑泡剂是自乳化硅氧烷抑泡剂，见1977年4月28日公布的德国专利申请DTOS 2,645,126中。这种化合物的一个例子是DC—544，Dow Corning有商品供应，这是一种硅氧烷/甘醇共聚物。

以上描述的抑泡剂一般以组合物重量的0.001％—2％，优选0.01％—1％(重量)的水平使用。关于泡沫改性剂的掺入，优选将其制成单独的颗粒，这使得其中可含有其他泡沫控制剂如C₂₀-C₂₄脂肪酸、微晶纤维素蜡和高分子量环氧乙烷和环氧丙烷共聚物，否则这些物质对基质的分散有不利影响。在前述Bartolotta等的美国专利3,933,672中公开了这种泡沫改性颗粒的制备技术。

其他有用的聚合物是聚乙二醇，特别是那些分子量为1000—10000，更优选2000—8000，最优选约4000的聚乙二醇。它们以0.20—5％，更优选0.25％—2.5％(重量)的水平使用。这些聚合物和前述均聚或共聚的聚羧酸盐对改进白度保持、织物灰沉积、和在过滤金属杂质存在下对粘土、蛋白和可氧化污物的清除性能有作用。

可用于本发明组合物的污物释放剂通常是对苯二甲酸与二乙醇和/或丙二醇单元以各种排列形成的共聚物或三元共聚物。这种聚合物的例子公开了美国专利4116885和4711730和欧洲公开专利申请0272 033中。按照EP—A—0 272 033，一种特别优选的聚合物具有下式：(CH₃(PEG)₄₃)_0.75(POH)_0.25[T-PO)_2.8(T-PEG)_0.4]T(PO-H)_0.25((PEG)₄₃CH₃)_0.75其中PEG为-(OC₂H₄)O-，PO为(OC₃H₆O)，T为(PCOC₆H₄CO).

二甲基对苯二甲酸、二甲基磺基间苯二甲酸、乙二醇和1，2-丙二醇的随机共聚物的改性聚酯是非常有用的，末端基团主要由磺基苯甲酸酯组成，其次由乙二醇和/或丙二醇的单酯组成。目的是获得两端“主要”由磺基苯甲酸酯封端的聚合物，在本发明中，这里所说的共聚物大部分是由磺基苯甲酸酯基团封端的。但有些共聚物没有完全被封端，因此其末端基团可由乙二醇和/或1，2-丙二醇的单酯组成，即“其次”由这种末端组成。

本发明选择的聚酯含有约46％(重)的二甲基对苯二甲酸、约16％(重)的1，2-丙二醇、约10％(重)的乙二醇、约13％(重)的二甲基磺基苯甲酸和约15％(重)的磺基间苯二甲酸，分子量为约3000。EP—A—311 342中描述了这些聚酯和其制备方法。

某些聚合物材料如典型分子量为5000—20000(优选10000—15000)的聚乙烯吡咯烷酮还可用作防止洗涤过程中织物间不稳定染料转移的试剂。特别优选的洗涤剂组分是结合了能提供一种颜色保护益处的技术。这种技术的实例是如共同未决的欧洲专利申请92.202.108.6(以下将公开)中公开的含聚酰胺-N-氧化物的聚合物。

这些聚合物含有以下结构式I的单元：(I)其中P为可聚合单元，其上可结合N—O基团，或其中N—O基团形成可聚合单元的一部分或两者的结合；A为

-O-，-S-，

X为0或1；

R为脂族、乙氧基化脂族、芳族、杂环或脂环基团或其任意组合，其上可结合N—O基团的氮原子或N—O基团的氮原子为这些基团的一部分。

N—O基团可由以下通式代表：

其中R1、R2和R3为脂族、芳族、杂环或脂环基团或其组合，x或/和y或/和z为0或1，其中可结合N—O基团的氮，或N—O基团的氮构成这些基团的一部分。

其中N—O基团构成可聚合单元一部分的适当聚胺N—氧化物包括其中R选自脂族、芳族、脂环或杂环基团的聚胺N—氧化物。一类所述聚胺N—氧化物包括其中N—O基团氮原子构成R—基团一部分的聚胺N—氧化物。优选的聚胺N—氧化物是其中R为杂环基团如吡啶、吡咯、咪唑、吡咯烷、哌啶、喹啉、吖啶和其衍生物的那些。另一类所述聚胺N—氧化物包括其中N—O基团氮原子与R—基团连接的聚胺N—氧化物。

其他适合的聚胺N—氧代物是其中N—O基团结合在可聚合单元上的聚胺氧化物。这些聚胺N—氧化物的优选类别是这样的通式(I)聚胺N—氧代物，其中R为芳族、杂环或脂环基团，其中N—O功能团的氮原子为R基团的一部分。

这些类别的实例是其中R为杂环化合物如吡啶、吡咯、咪唑和其衍生物的聚胺氧化物。

另一类优选的聚胺N—氧化物是这样的通式(I)聚胺氧化物，其中R为芳族、杂环或脂环基团，其中N—O功能团的氮与所述R基团连接。

这类的实例是其中R可为芳基如苯基的聚胺氧化物。

可使用任何聚合物骨架，只要形成的胺氧化物聚合物是水溶性的并具有染料转移抑制性能。适当的聚合骨架的实例有聚乙烯、聚烯烃、聚酯、聚醚、聚酰胺、聚酰亚胺、聚丙烯酸及其混合物。

本发明胺N—氧化物聚合物中典型的胺与胺N—氧化物比率为10∶1到1∶1000000。但含聚胺N—氧化物聚合物中存在的氧化胺量，可经适当的共聚化或适当程度的N—氧化来改变。胺与胺N—氧化物的优选比率为2∶3到1∶1000000，更优选为1∶4到1∶1000000，最优选1∶7到1∶1000000。该聚合物包括随机或嵌段共聚物，其中一类单体为胺N—氧化物，另一类单体是或不是胺N—氧化物。聚胺N—氧化物的胺N—氧化物单元的pKa＜10，优选pKa＜7，更优选pKa＜6。

可获得几乎任何聚合度的含聚胺N—氧化物的聚合物。聚合度并不关键，只要使材料具有所希望的水溶解度和染料吸着力。

含聚胺N—氧化物的聚合物平均分子量典型为500到1000，000，优选为1000到50,000，更优选为2000到30,000，最优选为3,000到20,000。

含聚胺N—氧化物的聚合物的存在量一般为洗涤剂组合物重的0.001—10％，更优选0.01—2％，最优选0.05—1％(重量)。

其他颜色保护技术可基于过氧化物酶的应用。

还可以向本发明洗涤剂组合物中加入织物软化剂。这些软化剂可以是无机或有机型。无机软化剂例如为GB—A—1,400,898中公开的绿土粘土。有机织物软化剂包括GB—A—1514276和EP—B—0,011,340中公开的水不溶性叔胺，和它们与EP—B—0,026,527和EP—B—0,026,528中公开的C₁₂-C₁₄季铵盐的组合，及EP—B—0,242,919中公开的二—长链酰胺。其他有用的织物软化系统有机成分包括如EP—A—0,299,575和0,313,146中公开的高分子量聚氧化乙烯材料。

绿土粘土的用量一般为5—20％，更优选为8—15％(重量)，该物质作为干混合成分被加入到配方的其余物质中。有机织物软化剂如水不溶性叔胺或二—长链酰胺材料的用量为0.5—5％(重量)，一般为1—3％(重量)，而高分子量聚氧化乙烯材料和水溶性阳离子物质的加入量为0.1—2％，一般为0.15—1.5％(重量)。这些物质一般加在组合物的喷雾干燥部分，虽然有时作为干混合颗粒加入，或作为熔化液体喷酒在组合物其他固体成分上更为方便。

除本发明洗涤剂组合物中含有的特异纤维素酶成分外，该组合物中可含有其他酶，如蛋白酶、脂酶、酯酶、过氧化物酶、氧化酶、淀粉酶和其他类纤维素酶。制备方法

可通过各种方法制备本发明组合物，包括干混合、喷雾干燥、凝结和制粒以及这些技术的任何组合。优选的制备方法

制备本发明组合物的优选方法涉及喷雾干燥、在高速混合器中凝结及干混合的组合。

将含相对不溶性阴离子表面活性剂的第一粒状成分喷雾干燥，转移部分喷雾干燥产品，向其上喷以少量非离子表面活性剂，然后与其余部分再混合。在连续高速混合机如Lodige KM混合机中，用碳酸钠作为中和剂干中和阴离子表面活性剂制备第二粒状成分。然后将第一和第二成分连同其他干混合成分如羧酸螫合剂、无机过氧化漂白剂、漂白活化剂、污物悬浮剂、硅酸盐和酶一起送上传送带，它们从此被转移到一水平旋转的鼓上，在这里向产物上喷以香料和硅氧烷抑泡剂。在一特别优选的组合物中，采用另一转鼓混合步骤，其中引入少量(约2％)的研细的结晶硅铝酸盐，以增加密度和改进颗粒流动特征。

本发明洗涤剂组合物呈颗粒状，用其密度来表征，其密度高于常规洗涤剂组合物的密度。在20℃测定的本发明组合物密度为550—950g/l，优选为650—850g/l组合物。

本发明组合物的“紧密”形式最好地反映在无机填充盐的量上；无机填充盐是粉状洗涤剂组合物的常规成分；在常规洗涤剂组合物中，填充盐以显著的量存在，典型地为组合物总重的17—35％。

在本发明组合物中，填充盐的量不超过总组合物的15％，优选不超过10％，最优选不超过组合物重的5％。

本发明组合物中所用无机填充盐选自碱金属和碱土金属的硫酸盐和氯化物。

优选的填充盐为硫酸钠。洗涤方法

当在洗涤机的主洗循环中使用较少量本发明组合物时，本发明紧密洗涤剂组合物就能达到常规洗涤剂组合物的相同效力。

因此，本发明的另一实施方案中，提供一种在洗涤机中洗涤织物的方法，其中主洗循环中本发明洗涤组合物的用量为15—170g。

在欧式条件下，推荐主洗循环中本发明洗涤剂组合物的典型用量为80—140g，无需预洗。

本发明组合物优选直接输送到转筒中，而不是经由机器的外壳间接加入。这一点很容易达到，将组合物装入一袋或容器中，在洗涤循环开始时应搅动、升温或转筒中洗涤水的浸没的反应而从中释放出该组合物。这种容器应与待洗的织物一起放在转筒中。或者可使洗涤机自身适于直接向转筒加入组合物，例如在入口门处备一分配设置。

一般这样设计其中洗涤剂组合物含于袋或容器中的产品，使得能在干燥状态保持容器完整以防止内容物在干态释出，但该容器在洗涤环境中适于释放内容物，一般是在水溶液没入时。

该容器通常具有柔韧性，如为袋或囊。这种袋可为纤维结构，外包不透水的保护材料以保持内容物，如欧洲专利申请0018678中公开的那种。或者，它可由不溶性合成聚合材料制成，但设计边界密封或闭合使其在水介质中破裂，如欧洲公开的专利申请0011500、0011501、0011502和0011968中公开的那样。遇水易破的闭合的一种方便形式是：在由不透水的聚合物膜如聚乙烯或聚丙烯制成的袋囊的一个边设置水溶性粘合剂并密闭。

作为这种袋或容器产品的一种变异形式，可使用迭片产品，其中中心柔韧层用组合物浸渍和/或包衣，然后加上一个或多个外层以产生织物样美效果。可将这些层封在一起以保持在使用时粘合，或与水接触时分离以利于释放包衣或浸渍材料。

另一迭层形式包括一个凹凸层或变形层，它提供一系列囊样小容器，向每个小容器中存入定量的洗涤剂成分，第二层盖在第一层上，并在囊样容器间两层接触的地方与之封合。洗涤剂成分可以颗粒、糊状或熔化形式存放在小容器中，迭片层应阻止囊样小容器中的内容物在加入水中之前释出。当与水接触时，各层可分离或可保持粘合在一起，唯一的要求是该结构应允许囊样小容器的内容物向溶液中迅速释放。每单位面积底物的囊样小容器的数目是个选择问题。但一般将在每平方米500～25,000间变化。

在本发明的这一方面，用作柔韧性迭片层的适宜材料包括海绵、纸和纺织物和无纺织物。

但用于本发明方法的优选工具包括使用可重复用的分配装置，其壁对液体可渗透但对固态组合物不可透过。

欧洲专利申请公开0343069和0344070中公开了这类装置。后一申请中公开了这样一种装置，它包括一袋形柔片，该柔片从确定了一孔的支持环上伸展，该孔和袋相适应以包含一个洗涤循环中所需的足够产品。一部分洗涤介质经该孔流入袋中，溶解产物，然后溶液从该孔流出到洗涤介质中。支持环上备有防止润湿而未溶解的产物外漏的设置，该设置一般包括一些径向延伸壁，它们从一中央凸起以辐轮结构向外延伸，或其中壁为螺旋形的相似结构。方法

对标记微晶纤维素的活性测定

红微晶纤维素(Red Avicel)底物的制备

红微晶纤维素底物的制备如下：

Avicel^是由日本Asashi Chemical Co.Ltd生产的一种微晶纤维素产品。162g Avicel^相当于形成Avicel纤维素聚合链的1摩尔葡萄糖单元。

活性染料使用英国皇家化学工业公司(ICI)生产的染料Procion^Red H—E3B。

按制造商提供的用于棉布染色的说明，将活性染料与Avicel^共价结合。

制备Procion^ Red H—E3B在蒸馏水中的10g/l溶液，在20℃搅拌过夜将此溶液以5000rpm离心20分钟，除去沉淀。

将10g Avicel^置于一250ml锥形烧杯中。加入50ml染料溶液，于室温下搅拌混合物1小时。将混合物慢慢加热至50℃计30分钟，然后加入1ml Na₂SO₄的热水悬液(500克无水Na₂SO₄/l)。

将混合物慢慢加热至90℃计约45分钟。在此加热过程中，约15分钟后向混合物中加入3ml Na₂SO₄/热水(500g无水Na₂SO₄/l)，30分钟后再加入Na₂SO₄/热水(500g无水的Na₂SO₄/l)。

将混合物于85℃静置20分钟。然后以5分钟间隔加入3×1ml碱溶液(100g/l Na₂CO₃，4g/l NaOH)。将形成的混合物于85℃振摇1小时，再冷却过夜。

此混合物于25℃以4000 rpm离心15分钟。除去上清液，向沉淀中加入60ml水。在一磁力搅拌器上搅拌混合物30分钟，然后离心15分钟。重复这一步骤直到上清液无色为止，将形成的沉淀冷冻干燥，得到干燥的染色底物，红微晶纤维素(Red Avicel)。

对红微晶纤维素催化活性的测定方法

制备0.1M Tris—HCl缓冲液(pH 7.5)中的底物悬液，它含有40g/l如上所制备的Red Avicel(相当于5g染料/162g干Avicel^)。

将待测的酶样品溶于相同缓冲液中。

将0.5ml底物悬液和0.5ml酶溶液混合，并置于40℃恒温的微生物摇床上。2小时后，以4000g 4℃离心混合物终止反应。将上清液转移到1cm石英杯中，在536nm波长处测定吸收度。

计算和结果定义：

通过在536nm滤长处监测染色底物在85％磷酸中溶液的吸收度，来测定如上所制备的Red Avivel的总染料负载。对分别在85％磷酸和缓冲液中测得的吸收度之差进行了校正。

比较分别在85％磷酸和Tris—HCl缓冲液中的(未结合)红染料在536nm处测得的吸收度，以确定这一校正值。

吸收度(536nm) 85％磷酸 0.1M Tris—HCl缓冲液

0.1g/l未结合红染料 0.88 O.D 0.93 O.D

Red Avicel 44 O.D 46.5 O.D^*

*：计算值〔44 O.D.×(0.93/0.88)〕

O.D：光密度

假设染色过程非常一致地沿着的水解敏感性曲线进行，可以底物(Red Avicel)中每一摩尔葡萄糖单元的总染料负载(即每162g干Avicel^R 5g红染料)计算从底物释放的有色物的浓度。

所得的光密度(O.D)减去相应的空白后对酶浓度(mg酶蛋白/ml)作图。空白以上达0.2 O.D.的曲线起始区用于计算。

因此，对Red Avicel(用Drocion^ Red H—E3B染色的Avicel^，的1 IU酶活性定义为：在1升总体积中，每分钟能够溶解1毫摩尔作为葡萄糖单元的有色物(相当于0.046 O.D./分的Red Avicel)的酶量。

纤维素酶活性(S—CEVU)的测定

纤维素酶水解CMC，从而增加保温混合物的粘度。

根据AF 302/2—GB分析方法以S—CEVU测定纤维素酶活性，如果请求可从本申请人得到这一方法。

S—SEVU分析通过测定样品降低羧甲基纤维素(CMC)溶液的粘度来对样品中存在的催化活性进行定量。在40℃、pH 7.5下用降低CMC底物粘度的相对酶标准进行此分析。

对纤维三糖的纤维素酶活性

通过联合分析测定用Kcat(S^-1)表示的对纤维三糖的纤维素酶活性：

(催化剂：纤维素酶)

(催化剂：葡糖氧化酶)

(催化剂：过氧化物酶)然后在418nm处用分光光度计测定吸收度(ABTS^OX在418nm处的最大吸收度)。

方法：

使用GOD—Perid检测试剂盒(可从Bochringer Mannheim购得，art.124 036)。将试剂盒中的缓冲剂—酶溶液溶于500ml milliQ水中。调节溶液的pH至8.5(NaOH)。

将80mgABTS^R(可从Bochringer Mcnheim购得，art.756 407)溶于10ml GOD—Perid中，相当于ABTS^R总浓度为10mg/ml。

制备5mmol纤维三糖(可以Merck购得，art.24741)在水中的底物原溶液(2.52mg/ml)。制备相当于1000μmol、500μmol、376μmol、250μmol、100mo和60μmol的水稀释液。

将一份底物溶液与一份GOD—Perid混合制备反应混合物。

制备浓度为1.0—3.0μmol的待测纤维素酶的溶液。

混合50μl酶溶液和450μl反应混合物。

在HP 8452A二极管阵列分光光度计上于40℃恒温、用1cm石英杯在418nm波长处进行测定。反应后每20秒测一次ABTS的氧化，共600秒。计算：

从Lineweaver—Burk曲线(1/V对1/〔S〕的曲线)计算对纤维三糖的纤维素酶活性：用线性回归分析确定斜率和截距。

计算中使用了下列常数：

纤维毒酶：ε＝66，310M^-1·cm^-1

ABTS^OX∶ε＝0.0323μmo1^-1·cm^-1

下列实施例说明本发明并有助于理解本发明。实施例1

如上所述测定纤维素酶活性(以S—CEVU测定)，即分别测定对纤维三糖的活性和对染色微晶纤维素的活性。

对列于下表I中的酶(即纤维素酶)进行这些测定，所测活性也列于此表中。CBH I、EG I和EG I—F具有保持型活性(Eur.J.Biochem.，217.P 947—953(1993))。

表I

酶	分子量(kD)	活性每毫克蛋白		对纤维三糖的活性k_csl(S^-1)
		活性每毫克蛋白			S-CEVU^*	Red Avicel单位
		第一纤维素酶成分：
CBH I	70	第一纤维素酶成分：					0	0.0000242	0.015
CBH I	70	EG I	50	200	0.0000354	1.5	0	0.0000242	0.015
EG I-F	50	EG I	50	200	0.0000354	1.5	465	0.0000252	5.5
EG I-F	50	第二纤维素酶成分：					465	0.0000252	5.5
EG II	50	第二纤维素酶成分：					200	0.00021	0
EG II	50	EG III	26	14	n.a.	0	200	0.00021	0
EG V	43	EG III	26	14	n.a.	0	430	0.002204	0
EG V	43	EG V核	22	700	0.002043	0	430	0.002204	0
EG VI	38	EG V核	22	700	0.002043	0	150	0.000424	0
EG VI	38	EG C	60	n.a.	0.002511	0	150	0.000424	0

*：S-(纤维素酶粘度单位)

结果表明纤维素酶成分EG II、EG III、EG V、EG V核、EGD VI和EG C均对Red Avicel显示催化活性，每毫克蛋白相当于536nm波长的收度大于10^-4，与之相比，纤维素酶成分CBH I、EG I和EGI—F对Red Avicel的催化活性非常低。因此，当用于洗涤含纤维素织物时，纤维素酶成分EG II、EG III、EG V、EG V核、EG VI和EGC具有清色能力并能有效地清色。所述纤维素酶成分还具有颗粒活性去除能力，但它们的这种能力伴有中度织物损害作用，这与纤维素酶成分CBH I和EG I的颗粒污物去除能力不同，见下文。

另外，表明纤维素酶成分CBH I、EG I和EG I—F在pH 8.5对纤维三糖显示催化活性，而EG II、EG III、EG V、EG C核、EG VI和EG C不对纤维三糖显示任何活性。因此，当以0.001—100mg剂量使用时，纤维酶成分CBH I、EG I—F和EG—I能有效去除颗粒污物而不损坏织物，并且无清色作用。实施例IIA.去色斑

试验步骤

将4块炭黑沾染的布块(5×7.5cm)在一Linitest中洗涤，于40℃用10个不锈钢球搅拌。洗涤剂浓度为0.7％，使用自来水。每个Linitest罐中装有400ml洗涤溶液。洗涤循环时间为60分钟。每个循环后，在自来水下分别漂洗每个布块。然后在一洗衣机中在一起漂洗所有布块。

参照洗涤剂是不合酶、不含染料转移抑制剂聚合物的欧洲型洗涤剂，加柠檬酸至pH 7。

	去色斑百分数
	去色斑百分数	参照(Ref)	16
Ref+EG I(100 S-CEVU/400ml)	32	参照(Ref)	16
Ref+EG I(100 S-CEVU/400ml)	32	Ref+EG V(100 s-CEVU/400ml)	17
Ref+EG I(100 S-CEVU/400ml)+EG V(100 S-CEVU/400ml)	35	Ref+EG V(100 s-CEVU/400ml)	17

B.去微球/清色作用

试验步骤

将4件蓝色内衣布样(旧睡衣裤织物，尺寸：10×7.5cm)在一Linitest中于40℃洗涤，用10个不锈钢球搅拌。洗涤剂浓度为0.7％，使用自来水。每个Linitest罐中装有400ml洗涤剂溶液。洗涤循环时间为60分钟。每次循环后，分别在自来水下漂洗每件内衣布样。再在洗衣机中一起漂洗所有布样。

参照洗涤剂是不含酶和染料转移抑制剂聚合物的欧洲型洗涤剂组合物，加柠檬酸至pH 7。

5次洗涤循环后与参照(无酶)相比进行肉眼定级(*)。测定结果示于下表中。数据为4个内衣布样的平均值。

*0＝同样好

1＝稍好些

3＝好许多

4＝极好

蓝色内衣	去微球
蓝色内衣	去微球		EG I(100 s-CEUV/400ml)	EG V(100 s-CEVU/400ml)	EG I(100 s-CEVU/400ml)+EG V(100 s-CEVU/400ml)
-0.09	1.63(s0.33)	2.84(s0.33)	EG I(100 s-CEUV/400ml)	EG V(100 s-CEVU/400ml)	EG I(100 s-CEVU/400ml)+EG V(100 s-CEVU/400ml)

实施例III到XIX

制备下列组合物，其中存在或向其中加入第一和第二纤维素酶成分。

a)紧密粒状洗涤剂：实施例III和IV。

实例 III IV牛脂烷基硫酸盐 1.80 2.40C₄₅烷基硫酸盐 14.00 13.107倍乙氧基化C₄₅醇 4.00 4.0011倍乙氧基化牛脂醇 1.80 1.80分散剂 0.07 0.1硅氧烷液 0.80 0.80柠檬酸三钠 14.00 15.00柠檬酸 3.00 3.00沸石 32.50 32.10马来酸丙烯酸共聚物 5.00 5.00二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DETMPA) 1.00 0.20蛋白酶(4 KNPU) 0.60 0.60脂酶(100 KLU) 0.36 0.40淀粉酶(60 KNU) 0.30 0.30硅酸钠 2.00 2.50硫酸钠 3.50 5.20PVP 0.30 0.50小成分达 100

b)常规粒状洗涤剂：实施例V和VI实例 V VI烷基硫酸盐 6.50 8.0硫酸钠 15.0 18.0沸石A 26.0 22.0次氮基三乙酸钠 5.0 5.0PVP 0.5 0.7TAED 3.0 3.0过硼酸盐 15.0 -小成分达 100

c)液体洗涤剂：实施例VII和VIII

本发明的液体洗涤剂组合物含有有效量的第一和第二纤维素酶成分，优选为组合物中纤维素酶蛋白重的0.0001％—10％，更优选0.001％—1％，最优选0.001％—0.1％。实例 VII VIIIC_12-14链烯基琥珀酸 3.0 8.0柠檬酸单水合物 10.0 15.0C_12-15烷基硫酸钠 8.0 8.02倍乙氧基化C_12-15醇的硫酸酯钠盐 - 3.07倍乙氧基化C_12-15醇 - 8.05倍乙氧基化C_12-15醇 8.0 -二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DETMPA) 0.2 -油酸 1.8 -乙醇 4.0 4.0

丙二醇 2.0 2.0

蛋白酶(4KNPU) 0.2 0.2

PVP 1.0 2.0

抑泡剂 0.15 0.15

NaOH 达 PH7.5

水和小成分达 100份

d)粒状洗涤剂组合物：实施例IX—XIII

本发明的粒状洗涤剂组合物含有有效量的第一和第二纤维素酶成分，优选为组合物中总纤维素酶蛋白重的0.001％—10％，更优选0.005％—5％，最优选0.01％—1％。

实例 IX X XI XII XIII

烷基硫酸盐 8.0 20.0 7 4.5 -

烷基乙氧基硫酸盐 2.0 6.0 5 5.5 9.5

3倍和7倍乙氧基化

C₂₅和C₄₅醇的混合物 6.0 3.0 5 - -

多羟基脂肪酸酰胺 2.5 - - - -

线性烷基苯磺酸盐 - - - 4.0 100

沸石 17.0 20.0 10.0 4.0 0.3

层状硅酸盐/柠檬酸盐 16.0 12.5 10.0 4.0 0.3

碳酸盐 7.0 23.5 5.0 10.0 240

壬酰基己内酰胺 - - 5.0 - -

马来酸丙烯酸共聚物 5.0 - 4.0 5.0 5.0

污物释放聚合物 0.4 - 0.2 - -

蛋白酶(4 KNPU) 2.5 1.5 0.3 1.0 1.5脂酶(100 KLU) 0.2 - 0.3 0.2 0.2过硼酸盐 - 3.0 - 22.0 -TAED 6.0 - - 6.0 -过碳酸盐 22.0 - 15.0 - -EDDS 0.3 - 0.4 - -抑泡剂 3.5 0.32 2.0 0.7 1.5水、香料和小成分达 100 份

e)液体洗涤剂组合物：实施例XIV—XVII实例 XIV XV XVI XVIIC_12-14烷基硫酸盐(钠) 20.0 12.0 10.0 11.52-丁醇辛酸 5.0 7.0 - -柠檬酸钠 1.0 2.5 - 3.0C₁₀醇乙氧化物(3) 13.0 3.5 25.0 9.5单乙醇胺 2.5 6.0 - -脂肪酸 - 10.0 14.0 0.1丙二醇 8.0 15.0 8.0 4.5脂酶(100 KLU) - 0.15 - 0.9淀粉酶(66 KNU) - 0.10 - -蛋白酶(4 KNPU) - 0.50 1.2 0.5污物释放剂 - 0.50 - -水/丙二醇/乙醇达 100 份

f)条形织物清洁组合物

按标准的挤出加工方法制备适于手洗污染织物的洗衣条。该洗衣条含有有效量的第一和第二纤维素酶成分，优选为组合物重的0.001％—10％，更优选0.01％—1％，并含有下列成分。实施例XVIII成分重量百分比烷基硫酸盐 30磷酸盐(按三聚磷酸钠计) 7碳酸钠 25焦磷酸钠 7可可单乙醇酰胺 2沸石A(0.1—10μm) 5羧甲基纤维素 0.2聚丙烯酸(分子量1400) 0.2(6-壬酰氨基己酰)氧基苯磺酸盐 5过碳酸钠 0.2蛋白酶 0.3^**脂酶(100 KNU) 0.3CaSO₄ 1MgSO₄ 1水 4填料平衡至100％*可选自方便的材料如CaCO₃、滑石、粘土、硅酸盐等。

**指每克组合物的活性酶mg数。

用本领域中普通采用的制备常规皂条或洗涤条的设备加工本发明的洗衣条。实施例XIX

紧密粒状洗涤剂

w/w％烷基硫酸盐 8.0烷基乙氧基硫酸盐 2.03倍和7倍乙氧基化的C₂₅和C₄₅醇的混合物 6.0多羟基脂肪酸酰胺 2.5沸石 17.0层状硅酸盐/柠檬酸盐 16.0碳酸盐 7.0马来酸丙烯酸共聚物 5.0污物释放共聚物 0.4CMC 0.4聚(4-乙烯基吡啶)-N-氧化物 0.1PEG2000 0.2蛋白酶(4 KNPU) 2.5脂酶(100KLU) 0.2EG V(1000 S-CEVU) 0.2EG I(1250 S-CEVU) 1.0TAED 6.0过碳酸盐 22.0乙二胺二琥珀酸(EDDS) 0.3抑泡剂 3.54，4’-二(2-吗啉代-4-苯胺基-S-三嗪-6-基氨基)茋-2，2’-二磺酸二钠 0.254，4’-二(2-磺基苯乙烯基)联苯 0.05水，香料(Encaps)和小成分达 100份

序列表

(1)一般信息：

(i)请人：

(A)名称：Novo Nordisk A/S

(B)街道：Novo Alle

(C)城市：Bagsvaerd

(E)国家：丹表

(F)邮编(ZIF)：DK-2880

(G)电话：+45 4444 8888

(H)传真：+45 4449 3256

(I)电传：37173

(A)名称：The Procter & Gamble Company

(B)街道：One Procter & Gamble plaza

(C)城市：Cincinnati

(D)州：OHIO

(E)国家：美国

(F)邮编(ZIP)：45 202

(ii)题目：含纤维素酶的洗涤剂组合物

(iii)序列数目：6

(iv)计算机可读形式：

(A)媒介类型：软盘

(B)计算机：IBM PC兼容机

(C)操作系统：PC-DOS/MS-DOS

(D)软件：PatenIn Release #1.0，Version #1.25(EPO)(2)SEQ ID NO：1的信息

(i)序列特征：

(A)长度：507个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑：线性

(ii)分子类型：蛋白质

(vi)原始来源：

(A)生物体：灰腐质霉H.griseus

(X)出版信息

(A)作者：de Oliviera Azevedo，M.

Radford，A.

(C)杂志：Nucleic Acids Res

(D)卷：18

(F)页：668

(G)日期：1990

(xi)序列描述：SEQ ID NO：1Gln Gln Ala Cys Ser Leu Thr Thr Glu ARg His Pro Ser Leu Ser Trp1 5 10 15Asn Lys Cys Thr Ala Gly Cys Gln Cys Gln Thr Val Gln Ala Ser Ile

20 25 30Thr Leu Asp Ser Asn Trp Arg Trp Thr His Gln Val Ser Gly Ser Thr

35 40 45Asn Cys Tyr Thr Gly Asn Lys Trp Asp Thr Ser Ile Cys Thr Asp Ala

50 55 60Lys Ser Cys Ala His Asn Cys Cys Val Asp Gly Ala Tyr Thr Ser Thr65 70 75 80Tyr Gly Ile Thr Thr Asn Gly Asp Ser Leu Ser Ser Leu Lys Phe Val

85 90 95TAr Lys Gly Gln His Ser Thr Asn Val Gly Ser His Thr Tyr Leu Met

100 105 110Asp Gly Glu Asp Lys Tyr Gln Thr Phe Glu Leu Leu Gly Asn Glu Phe

115 120 125Thr Thr Asp Val Asp Val Ser Asn Ile Gly Cys Gly Leu Asn Gly Ala

130 135 140Thr Tyr Phe Val Ser Met Asp Ala Asp Gly Gly Leu Ser Arg Tyr Pro145 150 155 160Cys Asn Lys Ala Gly Ala Lys Tyr Gly Thr Gly Tyr Cys Asp Ala Gln

165 170 175Cys Pro Arg Asp Ile Lys Phe Ile Asn Gly Glu Ala Asn Ile Glu Gly

180 185 190Trp Thr Gly Ser Thr Asn Asp Pro Asn Ala Gly Ala Cys Ser Arg Tyr

195 100 205Gly Thr Cys Cys Ser Glu Met Asp Ile Trp Glu Ala Gln Gln His Ala

210 215 220Thr Ala Phe Pro His Pro Cys Thr Ile Ile Ala Gln Ser Arg Cys Glu225 230 235 240Gly Asp Ser Cys Gly Gly Thr Tyr Ser Asn Glu Arg Tyr Ala Gly Val

245 250 255Cys Asp Pro Asp Gly Cys Asp Phe Asn Ser Tyr Arg Gln Gly Asn Lys

260 265 270Thr Phe Tyr Gly Lys Gly Met Thr Val His Thr Thr Lys Lys Ile Thr

275 280 285Val Val Thr Pro Phe Leu Lys Asp Ala Asn Gly Asp Leu Gly Glu Ile

190 295 300Lys Arg Phe Tyr Val Gln Asp Gly Lys Ile Ile Pro Asn Ser Glu Ser305 310 315 320Thr Ile Pro Gly Val Glu Gly Asn Ser Ile Thr Gln Asp Trp Cys Asp

325 330 335Arg Gln Lys Val Ala Phe gly Asp Ile Asp Asp Phe Asn Arg Lys Gly

340 345 350Gly Ala Met Lys Gln Met Gly Lys Ala Leu Ala Gly Pro Met Val Leu

355 360 365Met Ser Ile Trp Asp Asp His Ala Ser Asn Met Leu Trp Leu Asp Ser

370 375 380Thr Phe Pro Val Asp Ala Ala Gly Lys Pro Gly Ala Glu Arg Gly Ala385 390 395 400Cys Pro Thr Thr Ser Gly Val Pro Ala Glu Val Glu Ala Glu Ala Pro

405 410 415Asn Ser Asn Val Val Phe Ser Asn Ile Arg Pro Gly Pro Ile Gly Ser

420 425 430Thr Val Ala Gly Leu Pro Gly Ala Gly Asn Gly Gly Asn Asn Gly Gly

435 440 445Asn Pro Pro Pro Pro Thr Thr Thr Thr Ser Ser Ala Pro Ala Thr Thr

450 455 450Thr Thr Ala Ser Ala Gly Pro Lys Ala Gly Arg Trp Gln Gln Cys Gly465 470 475 480Gly Ile Gly Phs Thr Gly Pro Thr Gln Cys Glu Glu Pro Tyr Ile Cys

485 490 495Thr Lys Leu Asn Asp Trp Tyr Ser Gln Cys Leu

500 505(2)SEQ ID NO：2的信息

(i)序列特征：

(A)长度：415个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑：线性

(ii)分子类型：蛋白质

(vi)原始来源

(A)生物体：腐质霉H.insolens

(B)菌株：DSM 1800

(xi)序列描述：SEQ ID NO：2Gln Lys Pro Gly Glu Thr Lys Glu Val His Pro Gln Leu Thr Thr Phe1 5 10 15Arg Cys Thr Lys Arg Gly Gly Cys Lys Pro Ala Thr Asn Phe Ile Val

20 25 30Leu Asp Ser Leu Ser His Pro Ile His Arg Ala Glu Gly Leu Gly Pro

35 40 45Gly Gly Cys Gly Asp Trp Gly Asn Pro Pro Pro Lys Asp Val Cys Pro

50 55 60Asp Val Glu Ser Cys Ala Lys Asn Cys Ile Met Glu Gly Ile Pro Asp65 70 75 80Tyr Ser Gln Tyr Gly Val Thr Thr Asn Gly Thr Ser Leu Arg Leu Gln

85 90 95His Ile Leu Pro Asp Gly Arg Val Pro Ser Pro Arg Val Tyr Leu Leu

100 105 110Asp Lys Thr Lys Arg Arg Tyr Glu Met Leu His Leu Thr Gly Phe Glu

115 120 125Phe Thr Phs Asp Val Asp Ala Thr Lys Leu Pro Cys Gly Met Asn Ser

130 135 140Ala Leu Tyr Leu Ser Glu Met His Pro Thr Gly Ala Lys Ser Lys Tyr145 150 155 160Asn Pro Gly Gly Ala Tyr Tyr Gly Thr Gly Tyr Cys Asp Ala Gln Cys

165 170 175Phe Val Thr Pro Phe Ile Asn Gly Leu Gly Asn Ile Glu Gly Lys Gly

180 185 190Ser Cys Cys Asn Glu Met Asp Ile Trp Glu Ala Asn Ser Arg Ala Ser

195 200 205His Val Als Pro His Thr Cys Asn Lys Lys Gly Leu Tyr Leu Cys Glu

210 215 220Gly Glu Glu Cys Ala Phe Glu Gly Val Cys Asp Lys Asn Gly Cys Gly225 230 235 240Trp Asn Asn Tyr Arg Val Asn Val Thr Asp Tyr Tyr Gly Arg Gly Glu

245 250 255Glu Phe Lys Val Asn Thr Leu Lys Pro Phe Thr Val Val Thr Gln Phe

260 265 270Leu Ala Asn Arg Arg Gly Lys Leu Glu Lys Ile His Arg Phe Tyr Val

275 280 285Gln Asp Gly Lys Val Ile Glu Ser Phe Tyr Thr Asn Lys Glu Gly Val

290 295 300Pro Tyr Thr Asn Met Ile Asp Asp Glu Phe Cys Glu Ala Thr Gly Ser305 310 315 320Arg Lys Tyr Met Glu Leu Gly Ala Thr Gln Gly Met Gly Glu Ala Leu

325 330 335Thr Arg Gly Met Val Leu Ala Met Ser Ile Trp Trp Asp Gln Gly Gly

340 345 350Asn Net Glu Trp Leu Asp His Gly Glu Ala Gly Pro Cys Ala Lys Gly

355 360 365Glu Gly Ala Pro Ser Asn Ile Val Gln Val Glu Pro Phe Pro Glu Val

370 375 380Thr Tyr Thr Asn Leu Arg Trp Gly Glu Ile Gly Ser Thr Tyr Gln Glu385 390 395 400Val Gln Lys Pro Lys Pro Lys Pro Gly His Gly Pro Arg Ser Asp

405 410 415(2)SEQ ID NO：3的信息

(i)序列特征：

(A)长度：409个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑：线性

(ii)分子类型：蛋白质

(vi)原始来源

(A)生物体：尖镰孢

(B)菌株：DSM 2672

(xi)序列描述：SEQ ID NO：3Gln Thr Pro Asp Lys Ala Lys Glu Gln His Pro Lys Leu Glu Thr Tyr1 5 10 15Arg Cys Thr Lys Ala Ser Gly Cys Lys Lys Gln Thr Asn Tyr Ile Val

20 25 30Ala Asp Ala Gly Ile His Gly Ile Arg Arg Ser Als Gly Cys Gly Asp

35 40 45Trp Gly Gln Lys Pro Asn Ala Thr Ala Cys Pro Asp Glu Ala Ser Cys

50 55 60Ala Lys Asn Cys Ile Leu Ser Gly Met Asp Ser Asn Ala Tyr Lys Asn65 70 75 80Ala Gly Ile Thr Thr Ser Gly Asn Lys Leu Arg Leu Gln Gln Leu Ile

85 90 95Asn Asn Gln Leu Val Ser Pro Arg Val Tyr Leu Leu Glu Glu Asn Lys

100 105 110Lys Lys Tyr Glu Met Leu His Leu Thr Gly Thr Glu Phe Ser Phe Asp

115 120 125Val Glu Met Glu Lys Leu Pro Cys Gly Met Asn Gly Ala Leu Tyr Leu

130 135 140Ser Glu Met Pro Gln Asp Gly Gly Lys Ser Thr Ser Arg Asn Ser Lys145 150 155 160Ala Gly Ala Tyr Tyr Gly Ala Gly Tyr Cys Asp Ala Gln Cys Tyr Val

165 170 175Thr Pro Phe Ile Asn Gly Val Gly Asn Ile Lys GLy Gln Gly Val Cys

180 185 190Cys Asn Glu Leu Asp Ile Trp Glu Ala Asn Ser Arg Ala Thr His Ile

195 200 205Ala Pro His Pro Cys Ser Lys Pro Gly Leu Tyr Gly Cys Thr Gly Asp

210 215 220Glu Cys Gly Ser ser Gly Ile Cys Asp Lys Ala Gly Cys Gly Trp Asn225 230 235 240His Asn Arg lle Asn Val TAr Asp Phe Tyr Gly Arg Gly Lys Gln Tyr

245 250 255Lys Val Asp Ser Thr Arg Lys Phe Thr Val Thr Ser Gln Phe Val Ala

260 265 270Asn Lys Gln Gly Asp Leu Ile Glu Leu His Arg His Tyr Ile Gln Asp

275 280 285Asn Lys Val Ile Glu Ser Ala Val ValAsn Ile Ser Gly Pro Pro Lys

290 295 300Ile Asn Phe Ile Asn Asp Lys Tyr Cys Ala Ala Thr GLy Ala Asn Glu305 310 315 320Tyr Met Arg Leu Gly Gly Thr Lys Gln Met Gly Asp Ala Met Ser Arg

325 330 335Gly Met Val Leu Ala Met Ser Val Trp Trp Ser Glu Gly Asp Phe Met

340 345 350Ala Trp Leu Asp Gln Gly Val Ala Gly Pro Cys Asp Ala Thr Glu Gly

355 360 365Asp Pro Lys Asn Ile Val Lys Val Gln Pro Asn Pro Glu Val Thr Phe

370 375 380Ser Asn Ile Arg Ile Gly Glu Ile Gly Ser Thr Ser Ser Val Lys Ala385 390 395 400Pro Ala Tyr Pro Gly Pro His Arg Leu

405(2)SEQ ID NO：4的信息

(i)序列特征：

(A)长度：305个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)拓扑：线性

(ii)分子类型：蛋白质

(vi)原始来源：

(A)生物体：腐质霉H.insolens

(xi)序列描述：SEQ ID NO：4Met Arg Ser Ser Pro Leu Leu Pro Ser Ala Val Val Ala Ala Leu Pro-21 -20 -15 -10Val Leu Ala Leu Ala Ala Asp Gly Arg Ser TAr Arg Tyr Trp Asp Cys-5 1 5 10Cys Lys Pro Ser Cys Gly Trp Ala Lys Lys Ala Pro Val Asn Gln Pro

15 20 25Val Phe Ser Cys Asn Ala Asn Phe Gln Arg Ile Thr Asp Phe Asp Ala

30 35 40Lys Ser Gly Cys Glu Pro Gly Gly Val Ala Tyr Ser Cys Ala Asp Gln

45 50 55Thr Pro Trp Ala Val Asn Asp Asp Phe Ala Leu Gly Phe Ala Ala Thr60 65 70 75Ser Ile Ala Gly Ser Asn Glu Ala Gly Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Glu

80 85 90Leu Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lye Lys Met Val ual Gln

95 100 105Ser Thr Ser Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn His Phe Asp Leu Asn

110 115 120Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asp Gly Cys Thr Pro Gln Phe

125 130 135Gly Gly Leu Pro Gly Gln Arg Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Arg Asn Glu140 145 150 155Cys Asp Arg Phe Pro Asp Ala Leu Lys Pro Gly Cys Tyr Trp Arg Phe

160 165 170Asp Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Ser Phe Ser Phe Arg Gln Val

175 180 185Gln Cys Pro Ala Glu Leu Val Ala Arg Thr Gly Cys Arg Arg Asn Asp

190 195 200Asp Gly Asn Phe Pro Ala Val Gln Ile Pro Ser Ser Ser Thr Ser Ser

205 210 215Pro Val Asn Gln Pro Thr Ser Thr Ser Thr Thr Ser Thr Ser Thr TAr220 225 230 235Ser Ser Pro Pro Val Gln Pro Thr Thr Pro Ser Gly Cys Thr Ala Glu

240 245 250Arg Trp Ala Gln Cys Gly Gly Asn Gly Trp Ser Gly Cys Thr Thr Cys

255 260 265Val Ala Gly Ser Thr Cys Thr Lys Ile Asn Asp Trp Tyr His Gln Cys

270 275 280Leu(2)SEQ ID NO：5的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：724碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单链

(D)拓扑：线性

(ii)分子类型：cDNA

(vi)原始来源：

(A)生物体：腐质霉H.insolens

(xi)序列描述：SEQ D NO：5CCTAGGTCGC CCACCATGCG CGTTTCTCTT GCTCTCCTCG CCTACCTGCT CAGCGCCGCC 60CCGGCCTCGC CCGTCCCGGA GCTCGAGCCC CGGCAGTCCG GCAACCCCTT CTCCGGCCGC 120ACCCTGCTGG TCAACTCGGA CTATAGCAGC AAGCTCGACC AGACGCGCCA GGCCTTTCCT 180GTCCCGCGGC GACCAGACCA ACGCTGCCAA GGTCAAGTAC GTCCAGGAGA AGGTTGGCAC 240CTTTCTATTG GACTTCCAAC ATCTTCCTCC TGCGCAGCAC TGACGTTGCC ATCCAGAATG 300CGCGCCGCCA AGGCCGCGCG AGAACCCCAT CGTCGGTCTC GTCCTGTACA ACCTCCCCGA 360CCGCGACTGC AGCGACGCGG CAGTACCTCT GGCGACGTTA AGCTCTCCCA GAACGGCCTG 420AACCGGTACA AGAACGAGTA CGTCAACCCG TTCGCCCAGA AGCTCAAGGC CGCGTCCGAC 480GTGCAGTTCG CCGTCATCCT CGAGCCCGAT GCCATCGGCA ACATGGTCAC GGGCACCACC 540GCCTTCTGCC GCAACGCCCG CGGCCCTCAG AGGAGGCCAT CGGCTATGCT ATCTCTCCTC 600GGCTGGGCCG ATAAGCTCGA GCCAACTGCC CAGCAGGTGC CACCATCCTC CAAAAGGCCG 660GTAACAACGC AAGATCGCGG CTTCTCAGCA ACGTTCCAAC TACAACCTAT TCACGACAAC 720CGCG724(2)SEQ ID NO：6的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：526个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)拓扑：线性

(ii)分子类型：蛋白质

(vi)原始来源：

(A)生物体：芽孢杆菌B.lautus

(xi)序列描述：SEQ ID NO：6Met Arg Ile His Ala Ile Arg Gln Ser Cys Arg Leu Val Leu Thr Met1 5 10 15Val Leu Met Leu Gly Leu Leu Leu Pro Val Gly Ala Pro Lys Gly Tyr

20 25 30Ala Ala Pro Ala Val Pro Phe Gly Gln Leu Lys Val Gln Gly Asn Gln

35 40 45Leu Val Gly Gln Ser Gly Gln Ala Val Gln Leu Val Gly Met Ser Ser

50 55 60His Gly Leu Gln Trp Tyr Gly Asn Pha Val Asn Lys Ser Ser Leu Gln65 70 75 80Trp Met Arg Asp Asn Trp Gly Ile Asn Val Phe Arg Ala Ala Met Tyr

85 90 95Thr Ser Glu Asp Gly Tyr Ile Thr Asp Pro Ser Val Lys Asn Lys Val

100 105 110Lys Glu Ala Val Gln Ala Ser Ile Asp Leu Ala Leu Tyr Val Ile Ile

115 120 125Asp Trp His Ile Leu Ser Asp Gly Asn Pro Asn Thr Tyr Lys Ala Gln

130 135 140Ser Lys Ala Phe Phe Gln Glu Met Ala Thr Leu Tyr Gly Asn Thr Pro145 150 155 160Asn Val Ile Tyr Glu Ile Ala Thr Ser Pro Thr Glu Cys Val Leu Gly

165 170 175Arg Cys Gln Ser Ser Glu Glu Val Ile Thr Ala Ile Arg Ser Ile Asp

180 185 190Pro Asp Gly Val Val Ile Val Gly Ser Pro Thr Trp Ser Gln Asp Ile

195 200 205His Leu Ala Ala Asp Asn Pro Val ser His Ser Asn Val Met Tyr Ala

210 215 220Leu His Phe Tyr Ser Gly Thr His Gly Gln Phe Leu Arg Asp Arg Ile225 230 235 240Thr Tyr Ala Met Asn Lys Gly Ala Ala Ile Phe Val TAr Glu Trp Gly

245 250 255Thr Ser Asp Ala Ser Gly Asn Gly Gly Pro Tyr Leu Pro Gln Ser Lys

260 265 270Glu Trp Ile Asp Phe Leu Asn Ala Arg Lys Ile Ser Trp Val Asn Trp

275 280 285Ser Leu Ala Asp Lys Val Glu Thr Ser Ala Ala Leu Met Pro Gly Ala

290 295 300Ser Pro Thr Gly Ala Gly Pro Met Pro Asn Cys Arg Met Gly Lys Ser305 310 315 320Gly Ser Arg Ser Asn Pro ALa Ser Asn Trp Arg Arg Gln Gly Asn Pro

325 330 335Thr Ala Pro Ala Ala Pro Thr Asn Leu Ser Ala Asn Gly Gly Asn Ala

340 345 350Gln Val Ser Leu Thr Trp Asn Ala Val Ser Gly Ala Thr Ser Tyr Thr

355 360 365Val Lys Arg Ala Thr Thr Ser Gly Gly Pro Tyr Thr Asn Val Asp Arg

370 375 380Gly Val TAr Ala Thr Ser Tyr Thr Asn Thr Gly Leu Thr Asn Gly Thr385 390 395 400Thr Tyr Tyr Tyr Val Val Arg Ala Ser Asn Ser Ala Gly Ser Ser Ala

405 410 415Asn Ser Ala Gln Ala Ser Ala Thr Pro Ala Ser Gly Gly Ala Ser Thr

420 425 430Gly Asn Leu Val Val Gln Tyr Lys Val Gly Asp Thr Ser Ala Thr Asp

435 440 445Asn Gln Met Lys Pro Ser Phe Asn Ile Lys Asn Asn Gly Thr Thr Pro

450 455 460Val Asn Leu Ser Gly Leu Lys Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Lys Asp Gly465 470 475 480Pro Ala Asp Met Ser Cye Ser Ile Asp Trp Ala Gln Ile Gly Arg Thr

485 490 495Asn Val Leu Leu Ala Phe Ala Asn Phe Thr Gly Ser Asn Thr Asp Thr

500 505 510Tyr Cys Cys Glu Leu Ser Phe Ser Cys Thr Ala Gly Ser Tyr Pro Gly

515 520 525Tyr Ala Trp

530

Claims

1.一种洗涤剂组合物，它含有具有保持型活性并能去除颗粒污物的第一纤维素酶成分，和具有包括与催化区结合的至少一个非催化区的多功能区、具有清色能力的第二纤维素酶成分，其中至少一种纤维素酶成分是单一(重组)成分。

2.要求1的洗涤剂组合物，其中单一成分存在的量为组合物中纤维素酶蛋白总重的至少5％。

3.权利要求1或2的洗涤剂组合物，其中第一和第二成分均为单一成分。

4.权利要求1—3的任一洗涤剂组合物，其中第一和第二纤维素酶成分各自存在的浓度相当于每升洗涤溶液0.001—100mg纤维素酶蛋白的洗液中的浓度。

5.权利要求1洗涤剂组合，其中存在的第一和第二纤维素酶成分的纤维素酶蛋白重量比在约30∶1到约1∶30范围内。

6.权利要求5的洗涤剂组合物，其中存在的第一和第二纤维素酶成分的纤维素酶蛋白重量比在约10∶1到约1∶10范围内。

7.权利要求6的洗涤剂组合物，其中存在的第一和第二纤维素酶成分的纤维素酶蛋白重量比在约2∶1到约1∶2范围内。

8.权利要求1—7中任一项的洗涤剂组合物，其中第一和第二纤维纱酶成分各自为真菌或细菌纤维素酶成分。

9.权利要求8的洗涤剂组合物，其中第一和第二纤维素酶成分各自来自腐质霉属、芽孢杆菌属、木霉属、镰孢霉属、毁丝霉属、Phanerochaete、Schizophyllum、青霉属、曲霉属或地霉属(Geotricum)的菌株。

10.权利要求1—9中任一项的洗涤剂组合物，其中第一纤维素酶成分对低子量碳水化合物底物显示催化活性。

11.权利要求10的洗涤剂组合物，其中第一纤维素酶成分在PH8.5时对纤维三糖的催化活性相当于Kcat至少为0.01S^-1。

12.权利要求1—11中任一项的洗涤剂组合物，其中第一纤维素酶成分为核心酶或单功能区蛋白。

13.权利要求1—12中任一项的洗涤剂组合物，其中第一纤维素酶成分对染色微晶纤维素显示低催化活性，不足以或不能提供清色作用。

14.权利要求1—13中任一项的洗涤剂组合物，其中第一纤维素酶成分是能与针对腐质霉H.insolens、DSM 1800的高纯化～70KD纤维生物水解酶(EC3.2.1.91)之抗体发生免疫反应的纤维生物水解酶，或为该～70KD纤维生物水解酶显示纤维素酶活性的衍生物。

15.权利要求14的洗涤剂组合物，其中纤维生物水解酶成分具有SEQ ID No：1所列的氨基酸序列，或所述纤维生物水解酶的变体具有与所述序列至少60％同源的氨基酸序列。

16.权利要求1—13中任一项的洗涤剂组合物，其中第一纤维素酶成分是能与针对腐质霉H.insolens DSM 1800的高纯化～50KD内切葡聚糖酶的抗体发生免疫反应的内切葡聚糖酶成分，或为该～50KD内切葡聚糖酶的显示纤维素酶活性的衍生物。

17.权利要求16的洗涤剂组合物，其中内切葡聚糖酶成分具有SEQ ID No：2所列的氨基酸序列，或所述内切葡聚糖酶的变体具有与所述序列至少60％同源的氨基酸序列。

18.权利要求1—13中任一项的洗涤剂组合物，其中第一纤维素酶成分是能与针对尖镰孢DSM 2672的高纯化～58KD内切葡聚糖酶的抗体发生免疫反应的内切葡聚糖酶成分，或为该～58KD内切葡聚糖酶的显示纤维素酶活性的衍生物。

19.权利要求18的洗涤剂组合物，其中内切葡聚糖酶成分具有SEQ ID No：3所列的氨基酸序列，或所述内切葡聚糖酶的变体具有与所述序列至少60％同源的氨基酸序列。

20.权利要求1—13中任一种的洗涤剂组合物，其中第二纤维素酶成分对具有6个葡萄糖单位(DP6)的纤维糊精显示高催化活性。

21.权利要求20的洗涤剂组合物，其中第二纤维素酶成分对染色微晶纤维素显示高催化活性。

22.权利要求21的洗涤剂组合物，其中第二纤维素酶成分对Red Avicel的催化活性为每1mg纤维素酶蛋白高于10^-4IU。

23.权利要求20—22中任一项的洗涤剂组合物，其中第二纤维素酶成分在PH8.5对纤维三糖的催化活性相当于Kcat小于0.01s^-1。

24.权利要求20—23中任一项的洗涤剂组合物，其中第二纤维素酶成分是能与针对腐质霉H.insolens DSM 1800的高纯化～43KD内切葡聚糖酶的抗体发生免疫反应的内切葡聚糖酶成分，或为该～43KD内切葡聚糖酶的显示纤维素酶活性的衍生物。

25.权利要求24的洗涤剂组合物，其中内切葡聚糖酶成分具有SEQ ID No：4所列的氨基酸序列，或所述内切葡聚糖酶的变体具有与所述序列至少60％同源的氨基酸序列。

26.权利要求25的洗涤剂组合物，其中内切葡聚糖酶成分具有SEQ IDNo：5所列部分DNA序列编码的氨基酸序列，或所述内切葡聚糖酶变体具有与所述氨基酸序列至少60％同源的氨基酸序列。

27.权利要求20的洗涤剂组合物，其中第二纤维素酶成分是能与针对芽孢杆菌B.lautus NCIMB 40250的高纯化～60KD内切葡聚糖酶的抗体发生免疫反应的内切葡聚糖酶成分，或为该～60KD内切葡聚糖酶的显示纤维素酶活性的衍生物。

28.权利要求27的洗涤剂组合物，其中内切葡聚糖酶成分具有SEQ ID No：6所列的氨基酸序列，或所述内切葡聚糖酶的变体具有与所述序列至少60％同源的氨基酸序列。

29.权利要求1—28中任一项的洗涤剂组合物，其中该洗涤剂组合物为粒状组合物。

30.权利要求29的洗涤剂组合物，其中该粒状洗涤剂组合物为紧密粒状组合物。

31.权利要求1—28中任一项的洗涤剂组合物，其中该洗涤剂组合物为液体组合物。

32.权利要求31的洗涤剂组合物，其中该液体组合物为重负液体组合物。

33.权利要求1—32中任一项的洗涤剂组合物，它另外还含有一种或多种选自蛋白酶、脂酶、酯酶、氧化酶、过氧化物酶和淀粉酶的酶。

34.权利要求31或32的洗涤剂组合物，其中第一纤维素酶成分在蛋白酶存在下具有改进的稳定性。

35.一种洗涤剂添加剂，它包括具有保持型活性并能去除颗粒污物的第一纤维素酶成分，和具有包括与催化区结合的至少一个非催化区的多功能区、具有清色能力的第二纤维素酶成分，其中至少一种纤维素酶成分是单一(重组)成分。

36.一种在洗涤机中处理织物的方法，其中织物用一洗涤液处理，该洗涤液含有具有保持型活性并能去除颗粒污物的第一纤维素酶成分，和具有包括与催化区结合的至少一个非催化区的多功能区、具有清色能力的第二纤维素酶成分，其中至少一种纤维素酶成分是单一(重组)成分。