CN112741241B - 一种富含吡咯喹啉醌的杭白菊发酵饮品及其制造方法 - Google Patents
一种富含吡咯喹啉醌的杭白菊发酵饮品及其制造方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种富含吡咯喹啉醌的杭白菊发酵饮品及其制造方法，该方法包括将干制杭白菊、红茶茶叶、蔗糖与水混合后煮沸3～5分钟，冷却至室温，得杭白菊糖液；将酿酒酵母、巴氏醋杆菌、植物乳杆菌和纳豆芽孢杆菌分别制成菌悬液；将酿酒酵母菌悬液、巴氏醋杆菌菌悬液、植物乳杆菌菌悬液和纳豆芽孢杆菌菌悬液混合加入杭白菊糖液中，33℃～39℃振荡培养24～48h，待发酵成熟，过滤后得杭白菊发酵饮品。本发明将食品级微生物如酵母、乳酸菌、醋酸菌和纳豆芽孢杆菌共培养，发酵杭白菊，一方面使得杭白菊饮品滋味丰富，另一方面，纳豆芽孢杆菌的PQQ合成途径得到来自酵母、乳酸菌、醋酸菌的功能基因补充从而完整，能够高效合成PQQ。
Description
技术领域
本发明涉及食品加工技术领域，尤其涉及一种富含吡咯喹啉醌(Pyrroloquinoline Quinone，PQQ)的杭白菊发酵饮品及其制造方法。
背景技术
吡咯喹啉醌(Pyrroloquinoline Quinone，PQQ)是继黄素核苷酸(FMN，FAD)和烟酰胺核苷酸(NAD，NADP)之后，在膜束缚的细菌脱氢酶中发现的第3种辅基。PQQ虽然在生物体内含量非常低，但作用重要，不仅是新发现的一种线粒体呼吸链组分，参与催化生物体内氧化还原反应，还具有非常多样的生物活性，缺乏时会引起哺乳动物诸多代谢障碍。欧洲食品监管部门(EFSA Panelon Dietetic Products,Nutrition and Allergies)经过严谨详尽评估，已充分认定PQQ的安全性，批准其作为功能性物质在食品中添加，批准号为Regulation(EC)No 258/97(Turck D,et al.Safety of pyrroloquinoline quinonedisodium salt as a novel food pursuant to Regulation(EC)No 258/97[J].EFSA J,2017,15(11):UNSP 5058.)
浙江工商大学申报的发明专利“一种微生物共培养发酵生产含有吡咯喹啉醌食醋的方法(CN 201910796795.4)”，利用酿酒酵母、生丝微菌和巴氏醋杆菌构建共培养体系，生产富含PQQ的食醋，其中含有微量PQQ。吴银娣申报的发明专利“一种提高吡咯喹啉醌产量的方法”(CN 201611152572.7)，通过对浅绿黄假单胞菌产PQQ的营养因子进行分析，控制培养基中特定氨基酸含量以及维生素含量，有效提高PQQ产量。福建师范大学申报的发明专利“定向驯化选育高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌”(CN 201610059296.3)，提供了一种定向驯化选育高产PQQ的甲基营养菌突变株的方法，通过逐步提高培养基中的甲醇浓度对甲基营养菌进行应激驯化，提高了选育正突变率以及PQQ产量增加幅度。海正药业申报的发明专利“一种生丝微菌和吡咯喹啉醌的制备方法(CN 201510262476.7)”，其PQQ产率达到1783mg/L，但该菌属于甲基营养菌，发酵时需要甲醇。目前进行PQQ发酵的微生物均不属于常用的食品发酵微生物。
杭白菊具有散风清热、平肝明目等功效，冲泡饮用风味清新，但滋味偏淡，通过功能微生物发酵是丰富杭白菊饮品滋味、提升其饮用品质的有效途径。纳豆是一种以纳豆芽孢杆菌为主、多种微生物参与共同发酵的健康食品，富含PQQ，但纳豆芽孢杆菌纯菌发酵时，产物中PQQ含量很低，这是因为纳豆芽孢杆菌虽然具有与PQQ合成相关的关键酶，但代谢途径并不完整，需要其它微生物提供相关功能基因。
基于此，将食品级微生物如酵母、乳酸菌、醋酸菌和纳豆芽孢杆菌共培养，发酵杭白菊，可望获得富含PQQ、并且风味浓郁丰富的杭白菊发酵饮品。
发明内容
本发明提供了一种富含吡咯喹啉醌(Pyrroloquinoline Quinone，PQQ)的杭白菊发酵饮品及其制造方法，该杭白菊发酵饮品的吡咯喹啉醌高达125μg/mL以上。
具体技术方案如下：
本发明提供了一种富含PQQ的杭白菊发酵饮品的制造方法，包括以下步骤：
(1)将干制杭白菊、红茶茶叶、蔗糖与水混合后煮沸3～5分钟，冷却至室温，得杭白菊糖液；
(2)将酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae、巴氏醋杆菌Acetobacterpasteurianus、植物乳杆菌Lactobacillus plantarum和纳豆芽孢杆菌Bacillus subtilisnatto分别制成菌悬液；
(3)将酿酒酵母菌悬液、巴氏醋杆菌菌悬液、植物乳杆菌菌悬液和纳豆芽孢杆菌菌悬液混合加入杭白菊糖液中，33℃～39℃振荡培养24～48h，形成菌膜后即为发酵成熟，过滤后，即得富含PQQ的杭白菊发酵饮品。
将食品级微生物如酵母、乳酸菌、醋酸菌和纳豆芽孢杆菌共培养，发酵杭白菊，一方面使得杭白菊饮品滋味丰富，另一方面，纳豆芽孢杆菌的PQQ合成途径得到来自酵母、乳酸菌、醋酸菌的功能基因补充从而完整，能够高效合成PQQ。
进一步地，步骤(1)中，所述干制杭白菊与水的重量比为1～3:100；所述红茶茶叶与水的重量比为1～3:100；所述蔗糖与水的重量比为3～8:100。
进一步优选地，步骤(1)中，所述蔗糖与水的重量比为5～6:100。
进一步地，步骤(2)中，所述菌悬液的制备方法包括：将斜面菌种接到液体培养基中，酿酒酵母接种至YPD液体培养基，巴氏醋杆菌接种至AC液体培养基，植物乳杆菌接种至MRS液体培养基，纳豆芽孢杆菌接种至FB液体培养基，均在33℃～39℃振荡培养20～36h，至菌液密度为108～109cfu/mL的菌悬液。
进一步地，步骤(2)中，所述酿酒酵母为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC 2.1543，保藏于中国普通微生物菌种保藏中心；所述巴氏醋杆菌为巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)CGMCC 1.4546，保藏于中国普通微生物菌种保藏中心；所述植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CGMCC 1.511，保藏于中国普通微生物菌种保藏中心；所述纳豆芽孢杆菌为纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)ACCC19833，保藏于中国农业微生物菌种保藏管理中心。
进一步地，步骤(3)中，以体积百分数计，四种菌悬液接种至杭白菊糖液中的接种量均为1％～4％。
进一步优选地，步骤(3)中，以体积百分数计，四种菌悬液接种至杭白菊糖液中的接种量均为2％～3％。
进一步地，所述的YPD液体培养基，以1L计，包括以下组分：
该培养基的pH值调节至6.8～7.2；
所述的AC液体培养基，以1L计，包括以下组分：
该培养基的pH值调节至6.4～7.0。
进一步地，所述的MRS培养基，以1L计，包括以下组分：
该培养基的pH值调节至6.0～6.8；
所述的FB培养基，以1L计，包括以下组分：
该培养基的pH值调节至pH 7.2～7.4。
本发明还提供了一种如上所述的制造方法制得的富含PQQ的杭白菊发酵饮品。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明将食品级微生物如酵母、乳酸菌、醋酸菌和纳豆芽孢杆菌共培养，发酵杭白菊，一方面使得杭白菊饮品滋味丰富，另一方面，纳豆芽孢杆菌的PQQ合成途径得到来自酵母、乳酸菌、醋酸菌的功能基因补充从而完整，能够高效合成PQQ。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步描述，以下列举的仅是本发明的具体实施例，但本发明的保护范围不仅限于此。
下列实施例中涉及酿酒酵母的菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC 2.1543，保藏于中国普通微生物菌种保藏中心；巴氏醋杆菌的菌株为巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)CGMCC 1.4546，保藏于中国普通微生物菌种保藏中心；植物乳杆菌的菌株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CGMCC 1.511，保藏于中国普通微生物菌种保藏中心；纳豆芽孢杆菌的菌株为纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)ACCC 19833，保藏于中国农业微生物菌种保藏管理中心。
吡咯喹啉醌(PQQ)测定方法：采用高效液相色谱法，进样量10μl，温度40℃，保留时间10min，流动相为甲醇-水(含0.06M磷酸)混合液，梯度洗脱(甲醇:水＝1:9，至甲醇:水＝9:1)，流速1mL/min，在250nm处测定。以蒸馏水为对照，将PQQ标准品梯度稀释(15.625μg/ml,31.25μg/ml,62.5μg/ml,125μg/ml,250μg/ml)，以浓度为横坐标，色谱面积为纵坐标，制作标准曲线。
线性关系为y＝27.139x-16.976，相关系数R2＝0.99924，说明在该范围内线性关系良好，可作为PQQ含量计算的标准曲线。
感官品质评价方法：按照“GBT 10220-2012-感官分析方法学总论”所规定的原则，设置滋味、香气和色泽等3个感官品质子项，分别占权重50％、25％和25％，进行评价并计算综合得分。
实施例1
(1)将市售干制杭白菊1份、红茶茶叶1份、蔗糖3份与水100份混合后煮沸3分钟，冷却至室温，得杭白菊糖液；
(2)将酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CGMCC 2.1543、巴氏醋杆菌Acetobacter pasteurianus CGMCC 1.4546、植物乳杆菌Lactobacillus plantarum CGMCC1.511和纳豆芽孢杆菌Bacillus subtilis nattoACCC 19833分别接种至YPD、AC、MRS和FB液体培养基中，均在36±1℃振荡培养24±1h，至菌液密度为5×109cfu/mL的菌悬液；
培养基组成为：
YPD液体培养基，以1L计，包括以下组分：蛋白胨20g，酵母膏10g，葡萄糖20g，余量为水；该培养基的pH值调节至6.8～7.2。
AC液体培养基，以1L计，包括以下组分：酵母膏10g，葡萄糖10g，碳酸钙20g，余量为水；该培养基的pH值调节至6.4～7.0。
MRS培养基，以1L计，包括以下组分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g；柠檬酸氢二铵2g，葡萄糖20g；乙酸钠5g；磷酸氢二钾2g，硫酸镁0.5g；硫酸锰0.2g；吐温80 1.5mL，余量为水；该培养基的pH值调节至6.0～6.8。
FB培养基，以1L计，包括以下组分：葡萄糖15g，蛋白胨15g，Na2HPO4 2g，NaH2PO42g，MgSO4 0.5g，CaCl2 0.2g，余量为水；该培养基的pH值调节至pH 7.2～7.4。
(3)将酿酒酵母菌悬液、巴氏醋杆菌菌悬液、植物乳杆菌菌悬液和纳豆芽孢杆菌菌悬液各1份混合加入杭白菊糖液100份中(体积比)，36±1℃振荡培养24±1h，形成菌膜后即为发酵成熟，过滤后，即得富含PQQ的杭白菊发酵饮品。
表1
PQQ测定和感官品质评价(表1)显示，杭白菊发酵饮品感官品质较佳，综合评分达到84分，并富含PQQ，含量达到136.3μg/mL。
实施例2
(1)将市售干制杭白菊3份、红茶茶叶3份、蔗糖8份与水100份混合后煮沸3分钟，冷却至室温，得杭白菊糖液；
(2)将酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CGMCC 2.1543、巴氏醋杆菌Acetobacter pasteurianus CGMCC 1.4546、植物乳杆菌Lactobacillus plantarum CGMCC1.511和纳豆芽孢杆菌Bacillus subtilis nattoACCC 19833分别接种至YPD、AC、MRS和FB液体培养基中，均在36±1℃振荡培养24±1h，至菌液密度为5×109cfu/mL的菌悬液；
培养基组成为：
YPD液体培养基，以1L计，包括以下组分：蛋白胨20g，酵母膏10g，葡萄糖20g，余量为水；该培养基的pH值调节至6.8～7.2。
AC液体培养基，以1L计，包括以下组分：酵母膏10g，葡萄糖10g，碳酸钙20g，余量为水；该培养基的pH值调节至6.4～7.0。
MRS培养基，以1L计，包括以下组分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g；柠檬酸氢二铵2g，葡萄糖20g；乙酸钠5g；磷酸氢二钾2g，硫酸镁0.5g；硫酸锰0.2g；吐温80 1.5mL，余量为水；该培养基的pH值调节至6.0～6.8。
FB培养基，以1L计，包括以下组分：葡萄糖15g，蛋白胨15g，Na2HPO4 2g，NaH2PO42g，MgSO4 0.5g，CaCl2 0.2g，余量为水；该培养基的pH值调节至pH 7.2～7.4。
(3)将酿酒酵母菌悬液、巴氏醋杆菌菌悬液、植物乳杆菌菌悬液和纳豆芽孢杆菌菌悬液各4份混合加入杭白菊糖液100份中(体积比)，36±1℃振荡培养24±1h，形成菌膜后即为发酵成熟，过滤后，即得富含PQQ的杭白菊发酵饮品。
表2
PQQ测定和感官品质评价(表2)显示，杭白菊发酵饮品感官品质较佳，综合评分达到80分，并富含PQQ，含量达到125.0μg/mL。
实施例3
(1)将市售干制杭白菊2份、红茶茶叶2份、蔗糖5份与水100份混合后煮沸3分钟，冷却至室温，得杭白菊糖液；
(2)将酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CGMCC 2.1543、巴氏醋杆菌Acetobacter pasteurianus CGMCC 1.4546、植物乳杆菌Lactobacillus plantarum CGMCC1.511和纳豆芽孢杆菌Bacillus subtilis nattoACCC 19833分别接种至YPD、AC、MRS和FB液体培养基中，均在36±1℃振荡培养24±1h，至菌液密度为5×109cfu/mL的菌悬液；
培养基组成为：
YPD液体培养基，以1L计，包括以下组分：蛋白胨20g，酵母膏10g，葡萄糖20g，余量为水；该培养基的pH值调节至6.8～7.2。
AC液体培养基，以1L计，包括以下组分：酵母膏10g，葡萄糖10g，碳酸钙20g，余量为水；该培养基的pH值调节至6.4～7.0。
MRS培养基，以1L计，包括以下组分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g；柠檬酸氢二铵2g，葡萄糖20g；乙酸钠5g；磷酸氢二钾2g，硫酸镁0.5g；硫酸锰0.2g；吐温80 1.5mL，余量为水；该培养基的pH值调节至6.0～6.8。
FB培养基，以1L计，包括以下组分：葡萄糖15g，蛋白胨15g，Na2HPO4 2g，NaH2PO42g，MgSO4 0.5g，CaCl2 0.2g，余量为水；该培养基的pH值调节至pH 7.2～7.4。
(3)将酿酒酵母菌悬液、巴氏醋杆菌菌悬液、植物乳杆菌菌悬液和纳豆芽孢杆菌菌悬液各2份混合加入杭白菊糖液100份中(体积比)，36±1℃振荡培养24±1h，形成菌膜后即为发酵成熟，过滤后，即得富含PQQ的杭白菊发酵饮品。
表3
PQQ测定和感官品质评价(表3)显示，杭白菊发酵饮品感官品质较佳，综合评分达到89分，并富含PQQ，含量达到193.5μg/mL。
实施例4
(1)将市售干制杭白菊2份、红茶茶叶2份、蔗糖6份与水100份混合后煮沸3分钟，冷却至室温，得杭白菊糖液；
(2)将酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CGMCC 2.1543、巴氏醋杆菌Acetobacter pasteurianus CGMCC 1.4546、植物乳杆菌Lactobacillus plantarum CGMCC1.511和纳豆芽孢杆菌Bacillus subtilis nattoACCC 19833分别接种至YPD、AC、MRS和FB液体培养基中，均在36±1℃振荡培养24±1h，至菌液密度为5×109cfu/mL的菌悬液；
培养基组成为：
YPD液体培养基，以1L计，包括以下组分：蛋白胨20g，酵母膏10g，葡萄糖20g，余量为水；该培养基的pH值调节至6.8～7.2。
AC液体培养基，以1L计，包括以下组分：酵母膏10g，葡萄糖10g，碳酸钙20g，余量为水；该培养基的pH值调节至6.4～7.0。
MRS培养基，以1L计，包括以下组分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g；柠檬酸氢二铵2g，葡萄糖20g；乙酸钠5g；磷酸氢二钾2g，硫酸镁0.5g；硫酸锰0.2g；吐温80 1.5mL，余量为水；该培养基的pH值调节至6.0～6.8。
FB培养基，以1L计，包括以下组分：葡萄糖15g，蛋白胨15g，Na2HPO4 2g，NaH2PO42g，MgSO4 0.5g，CaCl2 0.2g，余量为水；该培养基的pH值调节至pH 7.2～7.4。
(3)将酿酒酵母菌悬液、巴氏醋杆菌菌悬液、植物乳杆菌菌悬液和纳豆芽孢杆菌菌悬液各3份混合加入杭白菊糖液100份中(体积比)，36±1℃振荡培养24±1h，形成菌膜后即为发酵成熟，过滤后，即得富含PQQ的杭白菊发酵饮品。
表4
PQQ测定和感官品质评价(表4)显示，杭白菊发酵饮品感官品质较佳，综合评分达到87分，并富含PQQ，含量达到186.0μg/mL。
对比例1
(1)将市售干制杭白菊2份、红茶茶叶2份、蔗糖5份与水100份(重量比)混合后煮沸3分钟，冷却至室温，得杭白菊糖液。
(2)将酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CGMCC 2.1543、巴氏醋杆菌Acetobacter pasteurianus CGMCC 1.4546和植物乳杆菌Lactobacillus plantarumCGMCC 1.511分别接种至YPD、AC和MRS液体培养基中，均在36±1℃振荡培养24±1h，至菌液密度为5×109cfu/mL的菌悬液。
培养基组成同实施例1。
(3)将酿酒酵母菌悬液、巴氏醋杆菌菌悬液和植物乳杆菌菌悬液各2份混合加入杭白菊糖液100份中(体积比)，36±1℃振荡培养24±1h，形成菌膜后即为发酵成熟，过滤后，即得杭白菊发酵饮品。
表5
PQQ测定和感官品质评价(表5)显示，杭白菊发酵饮品感官品质较佳，综合评分达到86分，不含PQQ。
对比例2
(1)将市售干制杭白菊2份、红茶茶叶2份、蔗糖6份与水100份(重量比)混合后煮沸3分钟，冷却至室温，得杭白菊糖液。
(2)将酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CGMCC 2.1543、巴氏醋杆菌Acetobacter pasteurianus CGMCC 1.4546和植物乳杆菌Lactobacillus plantarumCGMCC 1.511分别接种至YPD、AC和MRS液体培养基中，均在36±1℃振荡培养24±1h，至菌液密度为5×109cfu/mL的菌悬液。
培养基组成同实施例1。
(3)将酿酒酵母菌悬液、巴氏醋杆菌菌悬液和植物乳杆菌菌悬液各3份混合加入杭白菊糖液100份中(体积比)，36±1℃振荡培养24±1h，形成菌膜后即为发酵成熟，过滤后，即得杭白菊发酵饮品。
表6
PQQ测定和感官品质评价(表6)显示，杭白菊发酵饮品感官品质较佳，综合评分达到82分，不含PQQ。
对比例3
(1)将市售干制杭白菊2份、红茶茶叶2份、蔗糖5份与水100份(重量比)混合后煮沸3分钟，冷却至室温，得杭白菊糖液。
(2)将纳豆芽孢杆菌Bacillus subtilis nattoACCC 19833接种至FB液体培养基中，在36±1℃振荡培养24±1h，至菌液密度为5×109cfu/mL的菌悬液。
培养基组成同实施例1。
(3)将纳豆芽孢杆菌菌悬液2份混合加入杭白菊糖液100份中(体积比)，36±1℃振荡培养36h，过滤后，即得杭白菊发酵饮品。
表7
PQQ测定和感官品质评价(表7)显示，杭白菊发酵饮品感官品质不佳，综合评分为59分，PQQ含量很低。
对比例4
(1)将市售干制杭白菊2份、红茶茶叶2份、蔗糖6份与水100份(重量比)混合后煮沸3分钟，冷却至室温，得杭白菊糖液。
(2)将纳豆芽孢杆菌Bacillus subtilis nattoACCC 19833接种至FB液体培养基中，在36±1℃振荡培养24±1h，至菌液密度为5×109cfu/mL的菌悬液。
培养基组成同实施例1。
(3)将纳豆芽孢杆菌菌悬液3份混合加入杭白菊糖液100份中(体积比)，36±1℃振荡培养36h，过滤后，即得杭白菊发酵饮品。
表8
PQQ测定和感官品质评价(表8)显示，杭白菊发酵饮品感官品质不佳，综合评分为54分，PQQ含量很低。
总结以上案例，酿酒酵母、巴氏醋杆菌、植物乳杆菌和纳豆芽孢杆菌共同发酵制造的杭白菊发酵饮品感官品质优良并富含PQQ，酿酒酵母、巴氏醋杆菌和植物乳杆菌共同发酵也能制造感官品质优良的杭白菊发酵饮品，但基本不能合成PQQ，当纳豆芽孢杆菌单独发酵时，PQQ合成量很低，且杭白菊发酵饮品的感官品质不佳。说明纳豆芽孢杆菌发酵是合成PQQ的关键，其PQQ合成途径只有得到其它微生物的功能基因予以补充后，方才高效和完整，只有当酿酒酵母、巴氏醋杆菌、植物乳杆菌和纳豆芽孢杆菌共同发酵，才能使制造出的杭白菊发酵饮品不仅感官品质优良，而且富含PQQ。
Claims (7)
1.一种富含吡咯喹啉醌的杭白菊发酵饮品的制造方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将干制杭白菊、红茶茶叶、蔗糖与水混合后煮沸3～5分钟，冷却至室温，得杭白菊糖液；
(2)将酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae、巴氏醋杆菌Acetobacter pasteurianus、植物乳杆菌Lactobacillus plantarum和纳豆芽孢杆菌Bacillus subtilis natto分别制成菌悬液；
所述菌悬液的制备方法包括：将斜面菌种接到液体培养基中，酿酒酵母接种至YPD液体培养基，巴氏醋杆菌接种至AC液体培养基，植物乳杆菌接种至MRS液体培养基，纳豆芽孢杆菌接种至FB液体培养基，均在33℃～39℃振荡培养20～36h，至菌液密度为108～109cfu/mL的菌悬液；
所述酿酒酵母为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC 2.1543，保藏于中国普通微生物菌种保藏中心；所述巴氏醋杆菌为巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)CGMCC 1.4546，保藏于中国普通微生物菌种保藏中心；所述植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CGMCC 1.511，保藏于中国普通微生物菌种保藏中心；所述纳豆芽孢杆菌为纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)ACCC 19833，保藏于中国农业微生物菌种保藏管理中心；
(3)将酿酒酵母菌悬液、巴氏醋杆菌菌悬液、植物乳杆菌菌悬液和纳豆芽孢杆菌菌悬液混合加入杭白菊糖液中，以体积百分数计，四种菌悬液接种至杭白菊糖液中的接种量均为1％～4％；33℃～39℃振荡培养24～48h，形成菌膜后即为发酵成熟，过滤后，即得富含吡咯喹啉醌的杭白菊发酵饮品。
2.如权利要求1所述的制造方法，其特征在于，步骤(1)中，所述干制杭白菊与水的重量比为1～3:100；所述红茶茶叶与水的重量比为1～3:100；所述蔗糖与水的重量比为3～8:100。
3.如权利要求1所述的制造方法，其特征在于，步骤(1)中，所述蔗糖与水的重量比为5～6:100。
4.如权利要求1所述的制造方法，其特征在于，步骤(3)中，以体积百分数计，四种菌悬液接种至杭白菊糖液中的接种量均为2％～3％。
5.如权利要求1所述的制造方法，其特征在于，所述的YPD液体培养基，以1L计，包括以下组分：
该培养基的pH值调节至6.8～7.2；
所述的AC液体培养基，以1L计，包括以下组分：
该培养基的pH值调节至6.4～7.0。
6.如权利要求1所述的制造方法，其特征在于，所述的MRS培养基，以1L计，包括以下组分：
该培养基的pH值调节至6.0～6.8；
所述的FB培养基，以1L计，包括以下组分：
该培养基的pH值调节至pH 7.2～7.4。
7.一种如权利要求1～6任一项所述的制造方法制得的富含吡咯喹啉醌的杭白菊发酵饮品。
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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