CN112730851A - 一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒 - Google Patents

一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒 Download PDF

Info

Publication number
CN112730851A
CN112730851A CN202110344480.3A CN202110344480A CN112730851A CN 112730851 A CN112730851 A CN 112730851A CN 202110344480 A CN202110344480 A CN 202110344480A CN 112730851 A CN112730851 A CN 112730851A
Authority
CN
China
Prior art keywords
detection
line
neutralizing antibody
cov
sars
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202110344480.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112730851B (zh
Inventor
张玉基
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing Liding Medical Technology Co Ltd
Original Assignee
Nanjing Liding Medical Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing Liding Medical Technology Co Ltd filed Critical Nanjing Liding Medical Technology Co Ltd
Priority to CN202110344480.3A priority Critical patent/CN112730851B/zh
Publication of CN112730851A publication Critical patent/CN112730851A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112730851B publication Critical patent/CN112730851B/zh
Priority to PCT/CN2021/101904 priority patent/WO2022205629A1/zh
Priority to PCT/CN2022/081424 priority patent/WO2022206401A1/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6854—Immunoglobulins
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56983—Viruses
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
    • G01N2333/08—RNA viruses
    • G01N2333/165—Coronaviridae, e.g. avian infectious bronchitis virus
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2469/00—Immunoassays for the detection of microorganisms
    • G01N2469/20—Detection of antibodies in sample from host which are directed against antigens from microorganisms

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明公开了一种高灵敏SARS‑CoV‑2中和抗体的检测方法、检测试剂盒，属于生物医学检测技术领域，本发明试剂盒包括层析试纸、卡壳和样本稀释液，所述层析试纸包括底板、样品垫、结合垫、NC膜和吸水垫，所述NC膜上依次设置有捕获线、检测线和质控线，所述捕获线包被有ACE2蛋白，所述检测线包被有RBD蛋白，所述结合垫设置有RBD蛋白标记物；本发明采用阻断法加夹心法原理提高检测中和抗体的灵敏度，通过添加捕获线的方式，将靶向RBD的非中和抗体提前捕获，保证后续通过夹心法检测中和抗体的特异性。

Description

一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒
技术领域
本发明属于生物医学检测技术领域，尤其涉及一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒。
背景技术
新型冠状病毒肺炎（新冠肺炎，COVID-19）的病原为新型冠状病毒，属于β属的冠状病毒，有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，直径60～140nm。具有5个必需基因，分别针对核蛋白（N）、病毒包膜（E）、基质蛋白（M）和刺突蛋白（S）4种结构蛋白及RNA依赖性的RNA聚合酶（RdRp）。核蛋白（N）包裹RNA基因组构成核衣壳，外面围绕着病毒包膜（E），病毒包膜包埋有基质蛋白（M）和刺突蛋白（S）等蛋白。刺突蛋白（S）通过受体结合位点（RBD）结合宿主的血管紧张素转化酶2（ACE-2）进入细胞。S蛋白是病毒进入人体的关键，是疫苗和治疗性中和抗体的主要靶点。S蛋白的受体结合（RBD）结构域可与宿主ACE2受体结合，介导病毒入侵宿主细胞，也是大多数有效的中和抗体的结合部位。
中和抗体与RBD结构域结合后，可使病毒失去吸附、入侵宿主细胞能力，从而抑制病毒在宿主体内复制传播的抗体，病毒中和抗体在清除宿主体内的病毒中起着重要作用。
传统中和抗体检测的“金标准”是感染抑制试验，主要是先将病毒与待检测抗体进行混合，再将混合物接种到敏感动物、胚胎或细胞，通过敏感动物、胚胎或细胞的病变情况来测定残存的病毒感染力，从而间接确定待检测抗体对病毒的中和效果。其中在体外进行利用活病毒进行蚀斑减少中和试验（plaque reduction neutralizationtest，PRNT）和通过检测细胞病变（cytopathic effct，CPE）量来进行分析的微量细胞中和试验是常用方法。
对于新型冠状病毒烈性病毒性传染病来讲，即使是体外实验也面临活病毒株来源和需要在高等级生物安全实验室操作的限制，杜克-新加坡国立大学医学院新发传染病重点研究项目主任王林发教授带领的研究团队，基于中和抗体可阻断RBD和ACE2结合的原理开发了阻断ELISA的cPass血清检测盒，由金斯瑞生物进行商业化推广，并获FDA授权用于恢复期血浆筛查。但仍存在检测操作繁琐、耗时长的缺点。之后，多家公司基于此原理开发了侧向层析试纸条，主要方法是将ACE2划到膜上，并用胶体金标记RBD蛋白。当样本中无中和抗体时候，胶体金标记的RBD和ACE2结合形成检测线。样本中有中和抗体时，中和抗体阻断RBD和ACE2的结合，从而降低检测线的显色强度。通过机器判读，或者检测线显色强度的深浅变化来判断中和抗体存在情况。肉眼判读时候需要检测线深浅有较大变化才能做判定，此形式检测卡的灵敏度有待提高。
发明内容
本发明的目的在于解决现有技术中SARS-CoV-2中和抗体检测操作繁琐、耗时长，灵敏度低的技术问题，提供一种简便、快速、灵敏度高的SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒。本发明的技术方案如下：
一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法，其特征在于，基于夹心法结合阻断法实现SARS-CoV-2中和抗体的检测。
优选的，高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法通过提前捕获非中和抗体，增强后续通过夹心法检测中和抗体的特异性。
优选的，高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法以ACE2蛋白为捕获物，阻断非中和抗体，通过形成包被RBD蛋白-中和抗体-RBD蛋白-标记载体复合物，实现SARS-CoV-2中和抗体的检测。
一种基于上述检测方法的高灵敏SARS-CoV-2中和抗体检测试剂盒，包括捕获线，所述捕获线包被有ACE2蛋白。
优选的，在所述捕获线的一侧依次设有检测线、质控线、吸水垫，在所述捕获线的另一侧依次设有结合垫、样品垫；
所述捕获线、检测线、质控线均设置在NC膜上；
所述检测线上包被有RBD蛋白，所述结合垫设置有RBD蛋白标记物，所述RBD蛋白标记物包括标记载体和结合于所述标记载体上的RBD蛋白。
优选的，所述标记载体包括胶体金、乳胶微球、纳米碳、磁微球或荧光微球中的一种或多种。
优选的，所述样品垫上还设有滤血垫或抗RBC抗体。
优选的，所述检测试剂盒，其检测结果判定方法通过直接观测捕获线、检测线和质控线的反应结果，来判断SARS-CoV-2中和抗体含量。
优选的，所述检测试剂盒，其检测结果判定方法通过采用仪器读取捕获线、检测线和质控线的反应结果，并通过检测线和质控线的比值判断SARS-CoV-2中和抗体含量。
本发明的检测原理为：本发明通过采用阻断法加夹心法原理检测中和抗体，通过添加捕获线的方式，将靶向RBD的非中和抗体提前捕获，保证后续通过夹心法检测中和抗体的特异性：通过捕获线、检测线和RBD蛋白标记物的设计，利用RBD蛋白标记物捕获样品中靶向RBD的非中和抗体，形成抗体-RBD蛋白-标记载体复合物，并通过捕获线中的ACE2蛋白捕捉RBD蛋白，从而将靶向RBD的非中和抗体固定在捕获线上。而中和抗体被RBD蛋白标记物捕获后形成的中和抗体-RBD蛋白-标记载体复合物不能被捕获线被捕获，随着层析到达检测线处，被检测线处的RBD捕获，形成包被RBD蛋白-中和抗体-RBD蛋白-标记载体复合物，使检测线出现相应的信号，并通过此信号判断样本中的中和抗体浓度。
通过采用上述技术方案，达到的技术效果如下：
（1）本发明通过添加捕获线的方式，将靶向RBD的非中和抗体提前捕获，保证后续通过夹心法检测中和抗体的特异性，通过检测线的有无来判定样本中是否有中和抗体，灵敏度较通过阻断式竞争法的更好。
（2）条带有无的判读方式，较常规通过对比条带显色深浅的方式，判读方法更加直观、容易一些。
（3）除了通过检测线出现与否来判定样品中和抗体存在情况，还能通过检测线和捕获线颜色深浅对比形成第二个浓度判定点：在中和抗体超过特定浓度的时候，检测线的颜色较捕获线浅。当中和抗体浓度更高时，捕获线消失。
（4）本发明采用免疫层析的方法，操作简单，检测速度快。
（5）本发明在样本中的中和抗体浓度极低时，通过捕获线、检测线的系统设计，增加了ACE2的筛选，保证了检测的特异性；在样本中的中和抗体浓度较高时，还可以通过捕获线的抑制信号判断中和抗体的浓度，极大的提升了检测范围。
附图说明
图1是本发明试剂盒的结构示意图；
图中：1、样品垫；2、结合垫；3、NC膜；4、吸水垫；5、捕获线；6、检测线；7、质控线。
具体实施方式
下面结合附图对本发明作进一步的说明。
下述的实施例是为了进一步说明本发明的一些优选实施例，并非全部实施例。本领域专业人员在没有进行创造性劳动的前提下做出的基于本发明的其他实施例，都属于本发明的权利保护范围。
本发明的检测原理为：本发明通过采用阻断法加夹心法原理检测中和抗体，通过添加捕获线的方式，将靶向RBD的非中和抗体提前捕获，保证后续通过夹心法检测中和抗体的特异性：通过捕获线、检测线和RBD蛋白标记物的设计，利用RBD蛋白标记物捕获样品中靶向RBD的非中和抗体，形成抗体-RBD蛋白-标记载体复合物，并通过捕获线中的ACE2蛋白捕捉RBD蛋白，从而将靶向RBD的非中和抗体固定在捕获线上。而中和抗体被RBD蛋白标记物捕获后形成的中和抗体-RBD蛋白-标记载体复合物不能被捕获线被捕获，随着层析到达检测线处，被检测线处的RBD捕获，形成包被RBD蛋白-中和抗体-RBD蛋白-标记载体复合物，使检测线出现相应的信号，并通过此信号判断样本中的中和抗体浓度。
实施例1 胶体金检测试剂盒
一种SARS-CoV-2中和抗体的检测试剂盒，包括层析试纸、卡壳和样本稀释液，所述层析试纸包括底板、样品垫1、结合垫2、NC膜3和吸水垫4，所述样品垫1、结合垫2、NC膜3和吸水垫4依次黏贴与底板一侧；所述NC膜3上依次设置有捕获线5、检测线6和质控线7，所述捕获线5靠近结合垫2，所述质控线7靠近吸水垫4，所述捕获线5包被有ACE2蛋白，所述检测线6包被有RBD蛋白；所述结合垫设置有RBD蛋白标记物和抗鸡IgY标记物，所述标记载体为胶体金，所述质控线包被有质控检测物，所述质控检测物为鸡IgY。
本实施例胶体金测试试剂盒的制备方法：
（1）胶体金标记，采用万分之一浓度的胶体金分别标记RBD蛋白和抗鸡IgY，离心去上清，浓缩十倍得到RBD蛋白标记物和抗鸡IgY标记物；
（2）结合垫制备，将（1）得到的RBD蛋白标记物和抗鸡IgY标记物按照1：1比例混合后，再稀释3倍后均匀涂抹于玻璃纤维垫片上，35℃烘干30分钟，然后采用斩切机，切割成5mm宽，得到结合垫；
（3）NC膜包被，采用1XPBS+4%蔗糖作为溶剂，分别配制0.2mg/mL的ACE2蛋白浓度的捕获线包被液、0.2mg/mL的RBD蛋白浓度的检测线包被液、0.5mg/mL的鸡IgY蛋白浓度质控线包被液，采用喷金划膜仪器将上述配制的包被液划在NC膜上，35℃烘干12小时，包被NC膜；
（4）大板组装，底板采用PVC材质底板，样品垫1为切割成宽度18mm的玻璃纤维，吸水垫为切割成宽度25mm的吸水纸，将样品垫1、结合垫2、NC膜3和吸水垫4依次重叠，黏贴于底板一侧，得到大板；
（5）样本稀释液配制，本发明样本稀释液采用超纯水配制，配方为 0.02moL/L PB+0.3%曲拉通100。
（6）切条、组装，封装，采用切条机将步骤（4）得到的大板切成3mm宽度的试纸条，放置于所述卡壳的内部完成组装，然后同干燥剂一起封装于铝箔袋内，再同配套的样本稀释液一起放置于包装盒内，完成本发明试剂盒的制备。
使用时，收集待检测的血清并滴加在所述卡壳的加样孔，然后向加样孔滴加稀释液，反应15分钟；通过直接观测捕获线、检测线和质控线的反应结果，并与配套使用的浓度显色卡进行比对，来判断SARS-CoV-2中和抗体含量。
实施例2 乳胶微球检测试剂盒
一种SARS-CoV-2中和抗体的检测试剂盒，包括层析试纸、卡壳和样本稀释液，所述层析试纸包括底板、样品垫、结合垫、NC膜和吸水垫，所述样品垫、结合垫、NC膜和吸水垫依次黏贴与底板一侧；所述NC膜上依次设置有捕获线、检测线和质控线，所述捕获线靠近结合垫，所述质控线靠近吸水垫，所述捕获线包被有ACE2蛋白，所述检测线包被有RBD蛋白；所述结合垫设置有RBD蛋白标记物，所述RBD蛋白标记物包括标记载体和结合于标记载体的RBD蛋白，所述标记载体为红色乳胶微球。所述质控线包被有质控检测物，所述质控检测物为抗RBD抗体。
本发明试剂盒的制备方法与实施例1的不同之处在于，所述标记载体为红色乳胶微球，标记蛋白只有RBD蛋白，质控线包被液为0.5mg/mL的抗RBD单克隆抗体，另外，卡壳上设置加样孔和稀释液孔，分别用于添加样本和稀释液。
使用时，收集待检测的血清并滴加在所述卡壳的加样孔，然后向稀释液孔滴加稀释液，反应15分钟；通过直接观测捕获线、检测线和质控线的反应结果，并与配套使用的浓度显色卡进行比对，来判断SARS-CoV-2中和抗体含量。
实施例3 荧光检测试剂盒
一种SARS-CoV-2中和抗体的检测试剂盒，包括层析试纸、卡壳和样本稀释液，所述层析试纸包括底板、样品垫、结合垫、NC膜和吸水垫，所述样品垫、结合垫、NC膜和吸水垫依次黏贴与底板一侧；所述NC膜上依次设置有捕获线、检测线和质控线，所述捕获线靠近结合垫，所述质控线靠近吸水垫，所述捕获线包被有ACE2蛋白，所述检测线包被有RBD蛋白；所述结合垫设置有RBD蛋白标记物，所述RBD蛋白标记物包括标记载体和结合于标记载体的RBD蛋白，所述标记载体时间分辨荧光微球。所述质控线包被有质控检测物，所述质控检测物为抗RBD抗体。
本发明试剂盒的制备方法与实施例1的不同之处在于，所述标记载体为时间分辨荧光微球，标记蛋白只有RBD蛋白，质控线包被液为0.5mg/mL的抗RBD单克隆抗体。
使用时，收集待检测的血清并滴加在所述卡壳的加样孔，然后向加样孔滴加稀释液，反应15分钟；然后采用仪器读取捕获线、检测线和质控线的反应结果，并通过检测线和质控线的比值判断SARS-CoV-2中和抗体含量。
实施例4
本实施例与实施例1、实施例2、实施例3不同之处在于所述样品垫包括滤血垫或所述样品垫上添加有抗RBC抗体，能够直接检测指尖血和全血样本。
实施例5 中和抗体检测
收集受测试者注射疫苗前血清及注射疫苗后第1周、第2周、第3周、第4周、第5周和第6周的血清样本，采用实施例3检测试剂盒进行检测，将收集的血清并滴加在本发明检测卡的加样孔，然后向稀释液孔滴加稀释液，反应15分钟；然后采用配套荧光检测仪读取捕获线、检测线和质控线的反应结果，并通过检测线和捕获线的比值判断SARS-CoV-2中和抗体含量。
检测结果如下表：
Figure 253872DEST_PATH_IMAGE001
从以实施例可以看出，本发明检测试剂盒灵敏度高，特异性强，检测操作简单，检测速度快；适合于SARS-CoV-2中和抗体的检测。
以上所述仅为本发明的优选实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的简单修改或变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。以上实施例仅用以说明本发明而并非限制本发明所描述的技术方案；因此，尽管本说明书参照上述的实施例对本发明已进行了详细的说明，但是，本领域的普通技术人员应当理解，仍然可以对本发明进行修改或等同替换；而一切不脱离本发明的精神和范围的技术方案及其改进，其均应涵盖在本发明的权利要求范围中。

Claims (8)

1.一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法，其特征在于，基于夹心法结合阻断法实现SARS-CoV-2中和抗体的检测，通过提前捕获非中和抗体，增强后续通过夹心法检测中和抗体的特异性。
2.根据权利要求1所述的高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法，其特征在于，以ACE2蛋白为捕获物，阻断非中和抗体，通过形成包被RBD蛋白-中和抗体-RBD蛋白-标记载体复合物，实现SARS-CoV-2中和抗体的检测。
3.一种基于权利要求1所述的检测方法的高灵敏SARS-CoV-2中和抗体检测试剂盒，其特征在于，包括捕获线，所述捕获线包被有ACE2蛋白。
4.根据权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于，在所述捕获线的一侧依次设有检测线、质控线、吸水垫，在所述捕获线的另一侧依次设有结合垫、样品垫；
所述捕获线、检测线、质控线均设置在NC膜上；
所述检测线上包被有RBD蛋白，所述结合垫设置有RBD蛋白标记物，所述RBD蛋白标记物包括标记载体和结合于所述标记载体上的RBD蛋白。
5.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述标记载体包括胶体金、乳胶微球、纳米碳、磁微球或荧光微球中的一种或多种。
6.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述样品垫上还设有滤血垫或抗RBC抗体。
7.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，其检测结果判定方法通过直接观测捕获线、检测线和质控线的反应结果，来判断SARS-CoV-2中和抗体含量。
8.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，其检测结果判定方法通过采用仪器读取捕获线、检测线和质控线的反应结果，并通过检测线和质控线的比值判断SARS-CoV-2中和抗体含量。
CN202110344480.3A 2021-03-31 2021-03-31 一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒 Active CN112730851B (zh)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110344480.3A CN112730851B (zh) 2021-03-31 2021-03-31 一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒
PCT/CN2021/101904 WO2022205629A1 (zh) 2021-03-31 2021-06-23 一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒
PCT/CN2022/081424 WO2022206401A1 (zh) 2021-03-31 2022-03-17 一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110344480.3A CN112730851B (zh) 2021-03-31 2021-03-31 一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112730851A true CN112730851A (zh) 2021-04-30
CN112730851B CN112730851B (zh) 2021-06-22

Family

ID=75596191

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110344480.3A Active CN112730851B (zh) 2021-03-31 2021-03-31 一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN112730851B (zh)
WO (2) WO2022205629A1 (zh)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113281523A (zh) * 2021-07-21 2021-08-20 南京申基医药科技有限公司 一种SARS-CoV-2中和抗体试纸条及其制备方法、试剂盒
CN113567666A (zh) * 2021-07-27 2021-10-29 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 一种荧光微球标记的免疫层析法新型冠状病毒检测试纸条及其制备方法和应用
CN113985037A (zh) * 2021-12-23 2022-01-28 广东忠信生物科技有限公司 新型冠状病毒中和抗体的检测方法、检测试纸条及试剂盒
WO2022205629A1 (zh) * 2021-03-31 2022-10-06 南京立顶医疗科技有限公司 一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒
WO2023080535A1 (ko) * 2021-11-05 2023-05-11 바디텍메드(주) Sars-cov-2에 대한 중화 항체를 검출하기 위한 측방 유동 분석 스트립 및 이를 포함하는 키트
KR20230161304A (ko) * 2022-05-18 2023-11-27 주식회사 디아비전 촬영 기반 생체 정보 분석을 위한 체외 진단 기기
WO2023043213A3 (ko) * 2021-09-16 2023-12-07 한장현 안지오텐신전환효소 2 수용체 및 이의 용도

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101563362A (zh) * 2006-08-25 2009-10-21 麦克法兰布奈特医疗研究与公共健康研究所有限公司 重组hcv e2糖蛋白
CN103476929A (zh) * 2010-09-03 2013-12-25 学校法人藤田学园 抗流感病毒中和抗体及其筛选方法
CN109089419A (zh) * 2015-11-25 2018-12-25 威特拉公司 April的抗体分子及其应用
CN111051333A (zh) * 2017-08-30 2020-04-21 Km生物医薬股份公司 修饰型HSV gD蛋白及包含其的疫苗
CN211905393U (zh) * 2020-09-22 2020-11-10 正元盛邦(天津)生物科技有限公司 新型冠状病毒特异性抗体和中和抗体联合检测试纸及装置
CN112051400A (zh) * 2020-09-03 2020-12-08 江苏美克医学技术有限公司 检测新型冠状病毒中和抗体的免疫层析试剂盒及检测方法
CN112485436A (zh) * 2020-11-09 2021-03-12 桂林电子科技大学 检测新冠疫苗注射后体内中和抗体的胶体金免疫层析试纸条及其制备方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4990692B2 (ja) * 2007-06-22 2012-08-01 株式会社ビーエル イムノクロマトグラフィー測定法及びキット
CN111562368A (zh) * 2020-06-18 2020-08-21 威海威高生物科技有限公司 SARS-CoV-2中和抗体检测试剂盒
CN111879933B (zh) * 2020-07-30 2023-10-03 广州德成生物科技有限公司 检测新型冠状病毒的免疫层析试纸
CN112730851B (zh) * 2021-03-31 2021-06-22 南京立顶医疗科技有限公司 一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101563362A (zh) * 2006-08-25 2009-10-21 麦克法兰布奈特医疗研究与公共健康研究所有限公司 重组hcv e2糖蛋白
CN103476929A (zh) * 2010-09-03 2013-12-25 学校法人藤田学园 抗流感病毒中和抗体及其筛选方法
CN109089419A (zh) * 2015-11-25 2018-12-25 威特拉公司 April的抗体分子及其应用
CN111051333A (zh) * 2017-08-30 2020-04-21 Km生物医薬股份公司 修饰型HSV gD蛋白及包含其的疫苗
CN112051400A (zh) * 2020-09-03 2020-12-08 江苏美克医学技术有限公司 检测新型冠状病毒中和抗体的免疫层析试剂盒及检测方法
CN211905393U (zh) * 2020-09-22 2020-11-10 正元盛邦(天津)生物科技有限公司 新型冠状病毒特异性抗体和中和抗体联合检测试纸及装置
CN112485436A (zh) * 2020-11-09 2021-03-12 桂林电子科技大学 检测新冠疫苗注射后体内中和抗体的胶体金免疫层析试纸条及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
EMILIE SEYDOUX ET AL: "Characterization of neutralizing antibodies from a SARS-CoV-2 infected individual", 《RESEARCHGATE》 *

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022205629A1 (zh) * 2021-03-31 2022-10-06 南京立顶医疗科技有限公司 一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒
WO2022206401A1 (zh) * 2021-03-31 2022-10-06 南京立顶医疗科技有限公司 一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒
CN113281523A (zh) * 2021-07-21 2021-08-20 南京申基医药科技有限公司 一种SARS-CoV-2中和抗体试纸条及其制备方法、试剂盒
CN113281523B (zh) * 2021-07-21 2021-10-08 南京申基医药科技有限公司 一种SARS-CoV-2中和抗体试纸条及其制备方法、试剂盒
CN113567666A (zh) * 2021-07-27 2021-10-29 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 一种荧光微球标记的免疫层析法新型冠状病毒检测试纸条及其制备方法和应用
WO2023043213A3 (ko) * 2021-09-16 2023-12-07 한장현 안지오텐신전환효소 2 수용체 및 이의 용도
WO2023080535A1 (ko) * 2021-11-05 2023-05-11 바디텍메드(주) Sars-cov-2에 대한 중화 항체를 검출하기 위한 측방 유동 분석 스트립 및 이를 포함하는 키트
CN113985037A (zh) * 2021-12-23 2022-01-28 广东忠信生物科技有限公司 新型冠状病毒中和抗体的检测方法、检测试纸条及试剂盒
KR20230161304A (ko) * 2022-05-18 2023-11-27 주식회사 디아비전 촬영 기반 생체 정보 분석을 위한 체외 진단 기기
KR102636028B1 (ko) 2022-05-18 2024-02-13 주식회사 디아비전 촬영 기반 생체 정보 분석을 위한 체외 진단 기기

Also Published As

Publication number Publication date
WO2022205629A1 (zh) 2022-10-06
WO2022206401A1 (zh) 2022-10-06
CN112730851B (zh) 2021-06-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112730851B (zh) 一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒
Bai et al. Rapid enrichment and ultrasensitive detection of influenza A virus in human specimen using magnetic quantum dot nanobeads based test strips
CN109765384B (zh) 一种犬冠状病毒抗体荧光检测试纸条及其制备方法和应用
AU2010236270B9 (en) Direct fluorescene immunoassay for viral antigens
CN111426840A (zh) 一种新型冠状病毒检测试纸条及其制备方法和应用
EP3896447A1 (en) A lateral flow detection device for detecting a coronavirus by immunoassay
US20130309656A1 (en) Antibody detection method and device for a saliva sample from a non-human animal
CN211148669U (zh) 一种基于S抗原的新型冠状病毒2019-nCoV抗体快速检测试剂盒
CN111999507B (zh) 一种检测新型冠状病毒抗体的荧光免疫层析试纸
CN113533721B (zh) 甲型/乙型流感病毒抗原胶体金法检测试纸条及其制备方法
Jiang et al. A simple and rapid colloidal gold-based immunochromatogarpic strip test for detection of FMDV serotype A
CN112305218A (zh) 一种新型冠状病毒抗体胶体金免疫侧向层析检测方法及其应用
CN111007257A (zh) 一种猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体检测免疫阻断层析试剂盒及其应用
CN113321715B (zh) 新型冠状病毒抗原及其检测用途
Zhang et al. A rapid immunochromatographic test to detect the lily mottle virus
CN105181964B (zh) 水貂阿留申病毒抗体胶体金检测试纸条及其制备方法
CN108101968B (zh) 一种小反刍兽疫疫苗株和野毒株差异性合成肽及其应用
CN211043409U (zh) 新型冠状病毒和流感病毒检测试剂盒
CN102539755A (zh) 一种检测分泌物中甲型流感病毒抗原的试纸条及其制备方法
CN103969451A (zh) 猪圆环病毒2型IgM抗体胶体金免疫层析检测试纸卡及其制备方法和应用
CN204028084U (zh) 人肺炎衣原体量子点免疫层析检测卡
CN113433328B (zh) 病毒中和抗体与非中和抗体联合检测方法、检测卡及应用
CN113985037A (zh) 新型冠状病毒中和抗体的检测方法、检测试纸条及试剂盒
CN114460287A (zh) 一种中和抗体的检测方法和试剂盒
CN114397458A (zh) 一种用于肺炎支原体抗原检测的检测盒

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant