CN112684056A - 一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法 - Google Patents
一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112684056A CN112684056A CN202011612933.8A CN202011612933A CN112684056A CN 112684056 A CN112684056 A CN 112684056A CN 202011612933 A CN202011612933 A CN 202011612933A CN 112684056 A CN112684056 A CN 112684056A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mobile phase
- clindamycin phosphate
- content
- acid
- measuring
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
Landscapes
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明提供一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法,采用高效液相色谱法检测,选择流动相组分,科学配比,采用梯度洗脱,设定洗脱条件,能快速、精确检测注射用盐酸克林霉素中的含量,以实现简便、快速、精确控制产品质量的目的。
Description
技术领域
本发明涉及药物分析领域,特别涉及一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法。
背景技术
克林霉素磷酸酯(clindamycin phosphate)是广泛应用于革兰阳性球菌及厌氧菌所致严重感染的半合成抗菌药物,为半合成抗生素,是林可霉素的衍生物。克林霉素磷酸酯在体外无效,在体内可以迅速转化成抗菌有效的克林霉素。克林霉素磷酸酯阴道片治疗细菌性阴道炎治愈率高且疗程短,具有生产、使用方便和起效快的特点。
专利CN103487518B,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;磷酸二氢钾溶液-甲醇为流动相,采用高效液相色谱法进行检测,关键控制检测条件,但含量测定中主峰分离不明显,主峰含量下降较大,主峰保留时间偏长。
发明内容
鉴以此,本发明提出一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法,以实现快速、精确检测克林霉素磷酸酯片剂中克林霉素磷酸酯的含量。
本发明的技术方案是这样实现的:一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法:其中,高效液相色谱法的色谱条件如下:
固定相:辛烷基硅烷键合硅胶
流动相A:磷酸二氢钾-乙腈-水-氟代有机酸-氯化铁
流动相B:甲酸水溶液
流速:1.3~1.5ml/min
柱温:50~70℃
检测波长:200~400nm;
洗脱条件为:
(1)第0~5.0min,流动相A与流动相B的体积比为40~45:55~60;
(2)第5.01~9min,流动相A与流动相B的体积比为55~60:40~45;
(3)第9.01~25min,流动相A与流动相B的体积比为75~80:20~25;
该方法包括以下步骤:
S1、取克林霉素磷酸酯阴道片,研磨后溶解于乙醇中,过滤,
S2、量取步骤S1过滤后的上清液0.3~1.5ml置量瓶中,用流动相稀释,作为供试品溶液,
S3、将供试品溶液注入到高效液相色谱仪中进行高效液相色谱法检测,对克林霉素磷酸酯阴道片剂中克林霉素磷酸酯含量的检测。
进一步的,所述流动相B为质量分数0.1~1.3%的甲酸水溶液。
进一步的,所述流动相中磷酸二氢钾-乙腈-水-氟代有机酸-氯化铁的体积比为(10~15):(3~8):(11~15):(2~4):(1~3)。
进一步的,所述的氟代有机酸选自三氟乙酸、五氟丙酸、七氟丁酸、九氟戊酸、十一氟己酸、十三氟庚酸、十五氟辛酸中的任一种。
进一步的,所述检测条件中流速为1.4ml/min。
进一步的,所述检测条件中柱温为60℃。
进一步的,所述步骤S2中用流动相稀释至每毫升含克林霉素3.2~5.2mg的溶液。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
本发明提供的克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法,采用辛烷基硅烷键合硅胶为固定相,磷酸二氢钾-乙腈-水-氟代有机酸-氯化铁为流动相A,甲酸水溶液为流动相B,选择梯度洗脱,按照HPLC检测的条件,检测结果显示保留时间为11min,理论塔板数大部分在2000以上,拖尾因子在0.8~1.1范围内,分离度0.1~7.2,说明本发明方法检测迅速,主峰保留时间适中,峰形较稳定,拖尾现象和分离度较好,从而可以说明本方法符合要求,色谱分离效果和测量精度较高,提高了检测的准确率,为克林霉素磷酸酯片的质量控制提供了可参考依据。
其中,改进流动相A,限定磷酸二氢钾-乙腈-水-氟代有机酸-氯化铁的体积比,协同洗脱条件,有效改善拖尾现象,拖尾因子和分离度较好,理论塔板数更高,缩短主峰保留时间。
附图说明
图1为本发明实施例3克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定的HPLC图谱。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容,下面提供具体实施例,对本发明做进一步的说明。
本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
本发明实施例所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
实施例1克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定
HPLC检测条件如下:
固定相:辛烷基硅烷键合硅胶;
流动相A:磷酸二氢钾-乙腈-水-七氟丁酸-氯化铁,体积比为10:3:11:2:1;
流动相B:质量分数为0.1%的甲酸水溶液;
流速:1.3ml/min;
柱温:50℃;
检测波长:200nm;
洗脱条件为:
(1)第0~5.0min,流动相A与流动相B的体积比为40:60;
(2)第5.01~9min,流动相A与流动相B的体积比为55:45;
(3)第9.01~25min,流动相A与流动相B的体积比为75:25;
S1、取克林霉素磷酸酯阴道片8片(32mg),研磨后溶解于乙醇中,过滤,
S2、量取步骤S1过滤后的上清液0.3ml置量瓶中,用流动相稀释至每毫升含克林霉素3.2mg的溶液,摇匀,作为供试品溶液,
S3、将供试品溶液注入到高效液相色谱仪中进行高效液相色谱法检测,对克林霉素磷酸酯阴道片剂中克林霉素磷酸酯含量的检测。
实施例2克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定
HPLC检测条件如下:
固定相:辛烷基硅烷键合硅胶;
流动相A:磷酸二氢钾-乙腈-水-五氟丙酸-氯化铁,体积比为15:8:15:4:3;
流动相B:质量分数为1.3%的甲酸水溶液;
流速:1.5ml/min;
柱温:70℃;
检测波长:400nm;
洗脱条件为:
(1)第0~5.0min,流动相A与流动相B的体积比为45:55;
(2)第5.01~9min,流动相A与流动相B的体积比为60:40;
(3)第9.01~25min,流动相A与流动相B的体积比为80:20;
S1、取克林霉素磷酸酯阴道片13片(52mg),研磨后溶解于乙醇中,摇匀,过滤,
S2、量取步骤S1过滤后的上清液1.5ml置量瓶中,用流动相稀释至每毫升含克林霉素5.2mg的溶液,摇匀,作为供试品溶液,
S3、将供试品溶液注入到高效液相色谱仪中进行高效液相色谱法检测,对克林霉素磷酸酯阴道片剂中克林霉素磷酸酯含量的检测。
实施例3克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定
HPLC检测条件如下:
固定相:辛烷基硅烷键合硅胶
流动相A:磷酸二氢钾-乙腈-水-三氟乙酸-氯化铁,体积比为13:5:12:3:2;
流动相B:质量分数为1.0%的甲酸水溶液;
流速:1.4ml/min;
柱温:60℃;
检测波长:210nm。
洗脱条件为:
(1)第0~5.0min,流动相A与流动相B的体积比为42:58;
(2)第5.01~9min,流动相A与流动相B的体积比为57:43;
(3)第9.01~25min,流动相A与流动相B的体积比为78:22;
S1、取克林霉素磷酸酯阴道片10片(40mg),研磨后溶解于乙醇中,过滤,
S2、量取步骤S1过滤后的上清液0.8ml置量瓶中,流动相稀释至每毫升含克林霉素4.0mg的溶液,摇匀,作为供试品溶液,
S3、将供试品溶液注入到高效液相色谱仪中进行高效液相色谱法检测,对克林霉素磷酸酯阴道片剂中克林霉素磷酸酯含量的检测。
采用实施例3的方法测定克林霉素磷酸酯阴道片后,进行方法学考察,具体分析如下:
实施例4
本实施例与实施例3的区别在于流动相中磷酸二氢钾-乙腈-水-三氟乙酸-氯化铁的体积比为18:2:16:5:5。
采用实施例4的方法测定克林霉素磷酸酯阴道片后,进行方法学考察,具体分析如下:
峰号 | 保留时间 | 面积 | 高度 | 理论塔板数(USP) | 拖尾因子 | 分离度(USP) |
1 | 2.513 | 2652 | 397 | 68 | - | - |
5 | 3.618 | 3617 | 516 | 1030 | 1.218 | 1.234 |
10 | 8.833 | 6937 | 1345 | 4054 | 1.236 | 8.364 |
15 | 12.367 | 2903 | 323 | 193 | 1.978 | 7.210 |
结果显示拖尾因子在12min时为1.978,拖尾现象较实施例3明显,分离度较实施例3高。
对比例1
本对比例与实施例3的区别在于洗脱条件为等度洗脱,在0~25min中流动相A与流动相B的体积比为57:43。
采用对比例1的方法测定克林霉素磷酸酯阴道片后,进行方法学考察,具体分析如下:
结果显示保留时间过长,达到23min,拖尾现象和分离度较实施例3更明显,含量检测不够精准。
对比例2
本对比例与实施例3的区别在于流动相为磷酸二氢钾-乙腈。
采用对比例2的方法测定克林霉素磷酸酯阴道片后,进行方法学考察,具体分析如下:
峰号 | 保留时间 | 面积 | 高度 | 理论塔板数(USP) | 拖尾因子 | 分离度(USP) |
1 | 4.065 | 2052 | 357 | 54 | 1.969 | - |
5 | 6.218 | 4967 | 516 | 1029 | 1.993 | 0.114 |
10 | 11.603 | 10137 | 1755 | 4035 | 1.990 | 1.200 |
15 | 18.997 | 2903 | 3931 | 93 | - | 0.219 |
20 | 22.149 | 15402 | 1402 | 2945 | - | 0.303 |
结果显示,保留时间过长,达到22min,拖尾现象和分离度较实施例3更明显,含量检测不够精准。
由上述测定结果可知,本发明采用了磷酸二氢钾-乙腈-水-氟代有机酸-氯化铁为流动相A,甲酸水溶液为流动相B,调整洗脱条件,改善分离效果;梯度洗脱显著改善克林霉素磷酸酯的拖尾现象,拖尾因子在0.8~1.1的范围内,符合要求,说明色谱分离效果和测量精度较高,在11min能精准测出,缩短运行时间,结果证明,在此检测下,目标成分相应良好,分离度符合要求。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法,其特征在于:采用高效液相色谱法检测,其中,高效液相色谱法的色谱条件如下:
固定相:辛烷基硅烷键合硅胶,
流动相A:磷酸二氢钾-乙腈-水-氟代有机酸-氯化铁,
流动相B:甲酸水溶液,
流速:1.3~1.5ml/min,
柱温:50~70℃,
检测波长:200~400nm;
洗脱条件为:
(1)第0~5.0min,流动相A与流动相B的体积比为40~45:55~60;
(2)第5.01~9min,流动相A与流动相B的体积比为55~60:40~45;
(3)第9.01~25min,流动相A与流动相B的体积比为75~80:20~25;
该方法包括以下步骤:
S1、取克林霉素磷酸酯阴道片,研磨后溶解于乙醇中,过滤,
S2、量取步骤S1过滤后的上清液0.3~1.5ml置量瓶中,用流动相稀释,作为供试品溶液,
S3、将供试品溶液注入到高效液相色谱仪中进行高效液相色谱法检测,确定克林霉素磷酸酯阴道片剂中克林霉素磷酸酯的含量。
2.如权利要求1所述的一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法,其特征在于:所述流动相B为质量分数0.1~1.3%的甲酸水溶液。
3.如权利要求1所述的一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法,其特征在于:所述流动相中磷酸二氢钾-乙腈-水-氟代有机酸-氯化铁的体积比为(10~15):(3~8):(11~15):(2~4):(1~3)。
4.如权利要求1所述的一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法,其特征在于:所述的氟代有机酸选自三氟乙酸、五氟丙酸、七氟丁酸、九氟戊酸、十一氟己酸、十三氟庚酸、十五氟辛酸中的任一种。
5.如权利要求1所述的一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法,其特征在于:所述检测条件中流速为1.4ml/min。
6.如权利要求1所述的一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法,其特征在于:所述检测条件中柱温为60℃。
7.如权利要求1所述的一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法,其特征在于:所述步骤S2中用流动相稀释至每毫升含克林霉素3.2~5.2mg的溶液。
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202011612933.8A CN112684056B (zh) | 2020-12-30 | 2020-12-30 | 一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法 |
PCT/CN2021/099456 WO2022142152A1 (zh) | 2020-12-30 | 2021-06-10 | 一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202011612933.8A CN112684056B (zh) | 2020-12-30 | 2020-12-30 | 一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN112684056A true CN112684056A (zh) | 2021-04-20 |
CN112684056B CN112684056B (zh) | 2022-04-29 |
Family
ID=75455408
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202011612933.8A Active CN112684056B (zh) | 2020-12-30 | 2020-12-30 | 一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN112684056B (zh) |
WO (1) | WO2022142152A1 (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113640411A (zh) * | 2021-07-30 | 2021-11-12 | 海南海神同洲制药有限公司 | 克林霉素磷酸酯阴道片的有关物质检测方法 |
WO2022142152A1 (zh) * | 2020-12-30 | 2022-07-07 | 海南海神同洲制药有限公司 | 一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法 |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101169394A (zh) * | 2007-02-09 | 2008-04-30 | 广东省保化检测中心有限公司 | 化妆品中克林霉素的高效液相色谱检测方法 |
CN101292991A (zh) * | 2008-06-20 | 2008-10-29 | 重庆医药工业研究院有限责任公司 | 一种含有克林霉素的复方凝胶剂 |
CN102062758A (zh) * | 2009-11-18 | 2011-05-18 | 上海医药工业研究院 | 克林霉素磷酸酯的杂质分析制备方法 |
CN103487518A (zh) * | 2013-09-02 | 2014-01-01 | 成都百裕科技制药有限公司 | 注射用盐酸克林霉素杂质的检测方法及含量测定方法 |
CN105092757A (zh) * | 2015-08-06 | 2015-11-25 | 苏州二叶制药有限公司 | 一种克林霉素磷酸酯的分析方法 |
CN106950290A (zh) * | 2016-12-20 | 2017-07-14 | 宁夏多维药业有限公司 | 克林霉素磷酸酯凝胶中有关物质的检测方法 |
CN108226324A (zh) * | 2017-12-14 | 2018-06-29 | 兆科药业(广州)有限公司 | 一种盐酸克林霉素的杂质控制方法 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110327361A (zh) * | 2019-08-11 | 2019-10-15 | 天津乾丰瑞科技有限公司 | 一种克林霉素磷酸酯的药物组合物及其制备方法 |
CN112684056B (zh) * | 2020-12-30 | 2022-04-29 | 海南海神同洲制药有限公司 | 一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法 |
-
2020
- 2020-12-30 CN CN202011612933.8A patent/CN112684056B/zh active Active
-
2021
- 2021-06-10 WO PCT/CN2021/099456 patent/WO2022142152A1/zh active Application Filing
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101169394A (zh) * | 2007-02-09 | 2008-04-30 | 广东省保化检测中心有限公司 | 化妆品中克林霉素的高效液相色谱检测方法 |
CN101292991A (zh) * | 2008-06-20 | 2008-10-29 | 重庆医药工业研究院有限责任公司 | 一种含有克林霉素的复方凝胶剂 |
CN102062758A (zh) * | 2009-11-18 | 2011-05-18 | 上海医药工业研究院 | 克林霉素磷酸酯的杂质分析制备方法 |
CN103487518A (zh) * | 2013-09-02 | 2014-01-01 | 成都百裕科技制药有限公司 | 注射用盐酸克林霉素杂质的检测方法及含量测定方法 |
CN105092757A (zh) * | 2015-08-06 | 2015-11-25 | 苏州二叶制药有限公司 | 一种克林霉素磷酸酯的分析方法 |
CN106950290A (zh) * | 2016-12-20 | 2017-07-14 | 宁夏多维药业有限公司 | 克林霉素磷酸酯凝胶中有关物质的检测方法 |
CN108226324A (zh) * | 2017-12-14 | 2018-06-29 | 兆科药业(广州)有限公司 | 一种盐酸克林霉素的杂质控制方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
DANIEL J. PLATZER等: "Development and validation of a gradient HPLC method for", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL AND BIOMEDICAL ANALYSIS》 * |
王建等: "梯度洗脱HPLC法测定盐酸克林霉素棕榈酸酯及制剂的有关物质", 《药物分析杂志》 * |
陈燕等: "高效液相色谱法测定克林霉素磷酸酯片的含量", 《药学研究》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2022142152A1 (zh) * | 2020-12-30 | 2022-07-07 | 海南海神同洲制药有限公司 | 一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法 |
CN113640411A (zh) * | 2021-07-30 | 2021-11-12 | 海南海神同洲制药有限公司 | 克林霉素磷酸酯阴道片的有关物质检测方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2022142152A1 (zh) | 2022-07-07 |
CN112684056B (zh) | 2022-04-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN112684056B (zh) | 一种克林霉素磷酸酯阴道片的含量测定方法 | |
CN107941970A (zh) | D‑对羟基苯甘氨酸及其对映异构体的分离检测方法 | |
CN109374781B (zh) | 一种注射用美洛西林钠舒巴坦钠中有关物质的检测方法 | |
CN101929985A (zh) | 一种用高效液相色谱法测定阿托伐他汀钙有关物质的方法 | |
CN111239265B (zh) | 一种测定阿莫西林克拉维酸钾药物组合物中克拉维酸有关物质的液相色谱方法 | |
CN108072710B (zh) | 一种依达拉奉氯化钠注射液有关物质检测方法 | |
Ling et al. | Simple liquid chromatographic method for the determination of cefotaxime in human and rat plasma | |
CN114354810A (zh) | 克林霉素磷酸酯中杂质n的检测方法、及杂质的分离方法 | |
CN114047279B (zh) | 一种高效液相色谱-质谱联用测定药物中间体及原料药中n-甲基哌嗪残留量的方法 | |
CN114166960B (zh) | 一种依匹哌唑有关物质的检测方法 | |
CN114002352B (zh) | 叶酸与其光学异构体的分离检测方法 | |
CN112834637B (zh) | 反相高效液相色谱检测帕拉米韦中间体i的方法 | |
CN104829660B (zh) | 一种克林霉素磷酸酯的同分异构体 | |
CN111307994B (zh) | 一种异噁唑啉类化合物的高效液相色谱分析方法 | |
CN113049687B (zh) | 一种盐酸氨溴索原料和注射液有关物质的检测方法 | |
CN109358140B (zh) | 一种利福昔明原料及其制剂组分的检测方法 | |
CN110672765A (zh) | 一种定量检测硝呋太尔中顺式异构体杂质的方法 | |
CN114224904B (zh) | 一种克林霉素磷酸酯及质量控制方法 | |
CN111089906B (zh) | 一种莫西沙星盐酸盐与莫西沙星酒石酸盐的分离方法 | |
CN112505196B (zh) | 一种人血浆中硝酸异山梨酯、2-单硝酸异山梨酯和5-单硝酸异山梨酯的定量分析方法 | |
CN116297889A (zh) | 一种阿莫西林原料药有关物质的检测方法 | |
CN108107120B (zh) | 采用高效液相法测定中间产物6,6-二溴青霉烷酸的方法 | |
CN113984933A (zh) | 一种kpt-330中间体的检测方法 | |
CN110702830A (zh) | 一种盐酸伊立替康注射液中异构体的高效液相色谱检测方法 | |
CN112834627A (zh) | 高效液相色谱法分离测定注射用兰索拉唑有关物质的方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |