CN112679572A - 一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种利用模拟移动床色谱从禽畜类胆汁皂化粗品中分离纯化鹅去氧胆酸的方法，包括以下步骤：(1)溶解，将胆酸粗品溶解在一定浓度的氢氧化钠溶液中；(2)沉淀，用沉淀剂絮凝沉淀；(3)过滤，除去不溶物；(4)模拟移动床色谱分离：将过滤后的溶液按照设定的参数进行分离，得到含有鹅去氧胆酸的萃取液和含有其他物质如猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、石胆酸及色素、蛋白等的萃余液；(5)后处理：萃取液经过浓缩、酸沉、烘干，最终得到纯度大于99.0％，回收率大于95％的鹅去氧胆酸精品。本发明摒弃了传统工艺中的溶剂萃取、硅胶柱层析等工艺，采用模拟移动床色谱分离工艺，产品纯度高，回收率高，实现了连续生产。

Description

一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺

技术领域

本发明属于医药用化合物分离纯化领域，具体地，涉及一种鹅去氧胆酸的提取方法，特别涉及一种用模拟移动床色谱分离工艺制备高纯度鹅去氧胆酸的方法。

背景技术

鹅去氧胆酸(简称CDCA)是动物胆汁的主要有效成分之一，被广泛的应用在医药行业。鹅去氧胆酸临床上药理作用有以下几个方面：

1、治疗胆固醇结石。CDCA能够抑制HMG-COA还原酶的活性，刺激胆酸合成、限制酶的活性，从而扩大胆汁酸池以利于胆固醇以微胶粒状态溶解。

2、抗菌作用。CDCA的体外抗菌试验结果表明CDCA对革兰氏阳性菌、金黄色葡萄球菌具有显著的抗菌作用。

3、抗炎作用。

4、解热作用。

CDCA是世界上用量最大的治疗胆结石药物，同时又是合成熊去氧胆酸和其它甾体化合物的原料，因此近年来对鹅去氧胆酸的提纯工艺研究的报道不少。CDCA传统的提取工艺是经过去除脂肪、加碱皂化、氯化钙沉淀、酸化，乙酸乙酯重结晶等步骤达到去除胆汁中的杂质与色素，从而得到较高纯度的CDCA。

2011年01月19日中国专利CN101948496A公开的“一种从家禽胆汁中萃取鹅去氧胆酸的方法”，是从新鲜或冷冻家禽胆汁中，利用皂化反应得到粗胆汁酸或粗胆汁酸钙盐，再将粗胆汁酸酯溶液与有机含氮化合物A水溶液共热，利用有机含氮化合物A来除去粗胆汁酸中的大部分亲水性杂质，得到的粗胆汁酸酯溶液与有机含氮化合物B反应，析出沉淀，过滤并进行脱色、精制等步骤后，可得纯度95％左右的鹅去氧胆酸。

专利CN201210175306.1公开的“大孔吸附树脂分离鸭胆汁中鹅去氧胆酸的方法”，其特征在于：第一步为微生物溶液制作：取动物回肠及大肠，刮出内容物；添加水稀释过滤得到滤液；滤液加入MRS培养基得培养液；分离培养液得沉淀物；加生理盐水混悬得微生物溶液；第二步为分离鸭胆汁中鹅去氧胆酸；取鸭胆汁，添加微生物溶液得混合液；混合液反应过滤出湿游离型胆汁酸；添加水稀释成稀释液，加入水饱和的硫酸镁或氯化钙反应得过滤得到游离型胆汁酸盐；加入甲醇或乙醇回流溶解游离型胆汁酸盐得溶解液，将溶解液置于装有大孔树脂的层析柱中，洗脱层析柱的鹅去氧胆酸溶液；鹅去氧胆酸溶液加入碳酸钠或氢氧化钠加热过滤，滤饼滤水洗至pH值中性，低温烘干就得到鹅去氧胆酸。该发明具有操作简单，生产设备通用性高，所用化学物质低毒的特点；但是不能实现连续生产。

专利CN201911111097.2,公开的“一种从猪胆膏中萃取鹅去氧胆酸的方法”，此方法包括了皂化、络合析晶、萃取酯化、乙酰化等步骤，达到了一次性分离猪胆膏中猪去氧胆酸、猪胆酸、鹅去氧胆酸的目的。该申请得到的三种产物的纯度高，试剂均为廉价易得，且大部分溶剂均可以回收套用，产生的废水较少。

但是，目前纯化鹅去氧胆酸的常规方法中，使用不同的有机溶剂萃取或重结晶，母液需要反复分离结晶，生产周期长。而且有的方法中得到的产品鹅去氧胆酸的纯度不够高，有的虽然生产工艺中使用的废水少，溶剂可以套用，但本发明使用SMB纯化得到高纯度的鹅去氧胆酸，适用于鹅去氧胆酸工业化的连续生产。我们去年申请的“一种层析填料、制备方法及其在鹅去氧胆酸分离纯化中的应用”专利中，在纯化鹅去氧胆酸时，该工艺成本低，但需要使用两个梯度的醇洗脱，洗脱体积大。

发明内容

鉴于上述问题，本发明提供一种用模拟移动床分离得到高纯度鹅去氧胆酸的新方法。模拟移动床(simulated moving bed，SMB)是UOP公司于1961年提出的一种吸附分离技术，它实现了色谱分离的连续操作，在产品浓度、产率、溶剂消耗等诸多方面明显优于间歇洗脱式制备色谱。SMB最初用于石油化工和制糖工业，随后被成功引入到制药行业，用于分离手性药物和生物制品，因此获得广泛关注。但目前用SMB技术分离纯化鹅去氧胆酸的应用还未见报道。

本发明是通过如下技术方案实现的：

(1)溶解，将由禽畜胆汁的胆酸粗品溶解在一定浓度的氢氧化钠溶液中；(2)沉淀，用沉淀剂(甲醇,乙醇)絮凝沉淀；(3)过滤，除去不溶物；(4)用模拟移动床(SMB)色谱分离提纯，将过滤后的溶液按照设定的参数进行分离，得到含有鹅去氧胆酸的萃取液和含有其他物质(如猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、石胆酸及色素、蛋白等)的萃余液；(5)后处理，萃取液经过浓缩、酸沉、烘干，最终得到纯度大于99.0％、回收率大于95％的鹅去氧胆酸精品。

进一步地，所述步骤(4)中，用SMB分离纯化鹅去氧胆酸，清除溶液中的杂质(如猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、石胆酸及色素、蛋白等)，得到高纯度的鹅去氧胆酸。SMB中的填料用的是西安蓝晓科技新材料股份有限公司自制的弱极性吸附树脂，来源于专利CN111111261A中所描述的层析填料。

其中中间控制采用薄层层析(TLC)方法。通过TLC，可以对萃取液及SMB洗脱液中主要活性成分进行控制。TLC条件：展开剂为二氯甲烷：丙酮：冰醋酸＝60:30:3，用4.5％磷钼酸的硫酸-冰醋酸(1:20)溶液显色。

产品纯度测定采用高效液相色谱(HPLC)法。

HPLC条件：设备：Agilent 1260

检测器：示差折光检测器

色谱柱：十八烷基键合硅胶为填充剂(5微米，4.6*250mm)

柱温：40℃

流动相：乙腈：磷酸二氢钠溶液(取磷酸二氢钠0.78g，加水溶液并稀释至1000ml，用磷酸调节pH值至3.0)：甲醇(30:37:40)

流速：0.8ml/min

进样量：100微升。

本发明中使用的SMB是四区结构，该系统包括4台恒流柱塞计量泵，一个多口的中央旋转阀，一台中央控制器，一个柱温箱。物料进/出口，洗脱液、萃取液、进料液和萃余液，将之分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ共4个区。Ⅰ区的作用在于解吸固相上的强保留组分以再生固相，故也称为固相再生区；Ⅱ和Ⅲ两个区的功能相同，强保留组分在这两区均被固相吸附而跟随柱子切换往后移动，弱保留组分则被液相解吸而跟随液相往前移动，两个组分由此获得分离，故又称为分离区；Ⅳ区的作用在于吸附液相中的弱保留组分而再生液相，故称液相再生区。只要合理控制四个区的流量以及切换时间，即可在两个出口同时得到高纯度的强保留组分和弱保留组分。分离柱共计7-25根色谱树脂柱，分为4个区，6个单元，每个单元包含1-7根树脂柱不等。SMB的工作原理示意图如附图1所示。

本系统流动相与固定相通过逆流操作对样品进行分离纯化，分别得到鹅去氧胆酸(强保留组分)和杂质，每单元色谱柱的分离过程包括以下3个步骤：

S1：精馏阶段，由1-6单元串联成一个环形运行，洗脱液从Desorbent口进入第1单元子中，再注入第2单元中，再注入第3单元中，依次循环至第6单元，使得鹅去氧胆酸和杂质在六柱中分离展开。控制流速为2.0-2.4ml/min，时间为1000-1200s；

S2：解吸阶段，由第1-5单元串联运行，料液流向：Desorbent口→Raffinate口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元子中，鹅去氧胆酸和杂质在五单元中进一步分离展开，当循环至第5单元时，由于杂质(猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、石胆酸及色素、蛋白等)吸附能力弱，会随着洗脱液从第三单元子底部出口流出，而吸附能力较强的鹅去氧胆酸仍然留在柱中。控制流速为2.0-2.4ml/min，时间为218-240s；

S3：产物萃取/进料阶段，分为洗脱和进料两部分，两部分同时运行；

产物萃取阶段，随着系统运行，由第1单元运行，料液流向：Desorbent口→Extract口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元柱中，再由第1单元柱底部Extract口排出强吸附组分鹅去氧胆酸。控制流速为2.0-2.4ml/min，时间为948-960s；

进料阶段，由第5单元柱和第4单元柱串联运行，料液流向Feed口→Raffinate口，均相混合原料经Feed口进入第4单元子中，第5单元底部Raffinate口排出吸附较弱的杂质。控制流速为0.5-0.8ml/min，时间为948-960s。

进一步地，所述步骤(4)中色谱柱的参数为：径高比为35-40:1，填料为西安蓝晓科技新材料股份有限公司生产的弱极性吸附树脂，来源于专利CN111111261A中所描述的层析填料，柱温是30-55℃。

进一步地，所述步骤(4)中固定相模拟逆时针旋转，重复几个周期直至分离过程达到稳态，得到高纯度的鹅去氧胆酸萃取液。萃取液经过浓缩、酸沉、烘干，最终得到纯度大于99.0％，回收率大于95％的鹅去氧胆酸精品。

本发明摒弃了传统工艺中的溶剂萃取、硅胶柱层析等工艺，采用模拟移动床通过调节分离参数分离纯化，得到纯度大于99.0％，回收率大于95％的鹅去氧胆酸精品。本发明具有产品纯度高，回收率高，可实现连续生产。

附图说明

图1为SMB结构示意图。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明作进一步的说明。但它们不是对本发明的限定。

SMB中装入弱极性吸附树脂来源于专利CN111111261A中所描述的层析填料。

实施例1

取猪胆膏80g，加入400g的0.5mol/L的氢氧化钠水溶液；溶解后，加入300ml的甲醇，搅拌，絮凝沉淀，静置；用0.45μm的有机滤膜过滤，得均相的粗胆酸溶液480ml；SMB中装入弱极性吸附树脂，将粗胆酸溶液在SMB的Feed口进入，50％的甲醇作为洗脱液从Desorbent口入，在整个模拟移动床运行过程中，固定相和流动相通过逆流操作对样品进行分离纯化，分别得到鹅去氧胆酸(强保留组分)和杂质，每单元色谱柱的分离过程包括以下3个步骤：

S1：精馏阶段，由1-6单元串联成一个环形运行，洗脱液从Desorbent口进入第1单元子中，再注入第2单元中，再注入第3单元中，依次循环至第6单元，使得鹅去氧胆酸和杂质在六柱中分离展开。控制流速为2.0ml/min，时间为1200s；

S2：解吸阶段，由第1-5单元串联运行，料液流向：Desorbent口→Raffinate口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元中，鹅去氧胆酸和杂质在五单元中进一步分离展开，当循环至第5单元子时，由于杂质(猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、石胆酸及色素、蛋白等)吸附能力弱，会随着洗脱液从第5单元子底部出口流出，而吸附能力较强的鹅去氧胆酸仍然留在柱中。控制流速为2.0ml/min，时间为240s；

S3：产物萃取/进料阶段，分为洗脱和进料两部分，两部分同时运行；

产物萃取阶段，随着系统运行，由第1单元单柱运行，料液流向：Desorbent口→Extract口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元柱中，再由第1单元柱底部Extract口排出强吸附组分鹅去氧胆酸。控制流速为2.0ml/min，时间为960s；

进料阶段，由第5单元子和第4单元子串联运行，料液流向Feed口→Raffinate口，均相混合原料经Feed口进入第4单元子中，第5单元底部Raffinate口排出吸附较弱的杂质。控制流速为0.5ml/min，时间为960s；

固定相模拟逆时针旋转，重复几个周期直至分离过程达到稳态，得到高纯度的鹅去氧胆酸分离液。最后经过浓缩，再用1M稀酸调至pH＝3，静置，离心过滤，烘干，得纯度为99.8％(HPLC)的鹅去氧胆酸，鹅去氧胆酸回收率96.5％。

实施例2

取猪胆膏60g，加入300g的0.5mol/L的氢氧化钠水溶液；溶解后，加入225ml的甲醇，搅拌，絮凝沉淀，静置；用0.45μm的有机滤膜过滤，得均相的粗胆酸溶液350ml；SMB中装入弱极性吸附树脂，将粗胆酸溶液在SMB的Feed口进入，25％的甲醇作为洗脱液从Desorbent口入，在整个模拟移动床运行过程中，固定相和流动相通过逆流操作对样品进行分离纯化，分别得到鹅去氧胆酸(强保留组分)和杂质，每单元色谱柱的分离过程包括以下3个步骤：

S1：精馏阶段，由1-6单元串联成一个环形运行，洗脱液从Desorbent口进入第1单元子中，再注入第2单元中，再注入第3单元中，依次循环至第6单元，使得鹅去氧胆酸和杂质在六柱中分离展开。控制流速为2.4ml/min，时间为1100s。

S2：解吸阶段，由第1-5单元串联运行，料液流向：Desorbent口→Raffinate口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元子中，鹅去氧胆酸和杂质在五单元中进一步分离展开，当循环至第5单元子时，由于杂质(猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、石胆酸及色素、蛋白等)吸附能力弱，会随着洗脱液从第5单元底部出口流出，而吸附能力较强的鹅去氧胆酸仍然留在柱中。控制流速为2.4ml/min，时间为220s。

S3：产物萃取/进料阶段，分为洗脱和进料两部分，两部分同时运行。

产物萃取阶段，随着系统运行，由第1单元单柱运行，料液流向：Desorbent口→Extract口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元子中，再由第1单元子底部Extract口排出强吸附组分鹅去氧胆酸。控制流速为2.4ml/min，时间为950s。

进料阶段，由第5单元子和第4单元子串联运行，料液流向Feed口→Raffinate口，均相混合原料经Feed口进入第4单元子中，第5根底部Raffinate口排出吸附较弱的杂质。控制流速为0.8ml/min，时间为950s。

固定相模拟逆时针旋转，重复几个周期直至分离过程达到稳态，得到高纯度的鹅去氧胆酸分离液。最后经过浓缩，再用1M稀酸调至PH＝3，静置，离心过滤，烘干，得纯度为99.2％(HPLC)的鹅去氧胆酸，鹅去氧胆酸回收率95.2％。

实施例3

取猪胆膏60g，加入300g的0.5mol/L的氢氧化钠水溶液；溶解后，加入225ml的甲醇，搅拌，絮凝沉淀，静置；用0.45μm的有机滤膜过滤，得均相的粗胆酸溶液350ml；SMB中装入弱极性吸附树脂，将粗胆酸溶液在SMB的Feed口进入，50％的丙酮作为洗脱液从Desorbent口入，在整个模拟移动床运行过程中，固定相和流动相通过逆流操作对样品进行分离纯化，分别得到鹅去氧胆酸(强保留组分)和杂质，每单元色谱柱的分离过程包括以下3个步骤：

S1：精馏阶段，由1-6单元串联成一个环形运行，洗脱液从Desorbent口进入第1单元子中，再注入第2单元中，再注入第3单元中，依次循环至第6单元，使得鹅去氧胆酸和杂质在六柱中分离展开。控制流速为2.0ml/min，时间为1120s。

S2：解吸阶段，由第1-5单元串联运行，料液流向：Desorbent口→Raffinate口，洗脱液从D口进入第1单元子中，鹅去氧胆酸和杂质在五柱中进一步分离展开，当循环至第5单元子时，由于杂质(猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、石胆酸及色素、蛋白等)吸附能力弱，会随着洗脱液从第5单元底部出口流出，而吸附能力较强的鹅去氧胆酸仍然留在柱中。控制流速为2.0ml/min，时间为230s。

S3：产物萃取/进料阶段，分为洗脱和进料两部分，两部分同时运行。

产物萃取阶段，随着系统运行，由第1单元单柱运行，料液流向：Desorbent口→Extract口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元子中，再由第1单元子底部Extract口排出强吸附组分鹅去氧胆酸。控制流速为2.0ml/min，时间为960s。

进料阶段，由第5单元子和第4单元子串联运行，料液流向Feed口→Raffinate口，均相混合原料经Feed口进入第4单元子中，第5单元底部Raffinate口排出吸附较弱的杂质。控制流速为0.5ml/min，时间为960s。

固定相模拟逆时针旋转，重复几个周期直至分离过程达到稳态，得到高纯度的鹅去氧胆酸分离液。最后经过浓缩，再用1M稀酸调至PH＝3，静置，离心过滤，烘干，得纯度为99.3％(HPLC)的鹅去氧胆酸，鹅去氧胆酸回收率95.0％。。

实施例4

取猪胆膏80g，加入400g的0.5mol/L的氢氧化钠水溶液；溶解后，加入300ml的乙醇，搅拌，絮凝沉淀，静置；用0.45μm的有机滤膜过滤，得均相的粗胆酸溶液500ml；SMB中装入弱极性吸附树脂，将粗胆酸溶液在SMB的Feed口进入，50％的甲醇作为洗脱液从Desorbent口入，在整个模拟移动床运行过程中，固定相和流动相通过逆流操作对样品进行分离纯化，分别得到鹅去氧胆酸(强保留组分)和杂质，每单元色谱柱的分离过程包括以下3个步骤：

S1：精馏阶段，由1-6单元串联成一个环形运行，洗脱液从Desorbent口进入第1单元子中，再注入第2单元中，再注入第3单元中，依次循环至第6单元，使得鹅去氧胆酸和杂质在六柱中分离展开。控制流速为2.25ml/min，时间为1200s；

S2：解吸阶段，由第1-5单元串联运行，料液流向：Desorbent口→Raffinate口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元子中，鹅去氧胆酸和杂质在五单元中进一步分离展开，当循环至第5单元子时，由于杂质(猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、石胆酸及色素、蛋白等)吸附能力弱，会随着洗脱液从第5单元子底部出口流出，而吸附能力较强的鹅去氧胆酸仍然留在柱中。控制流速为2.25ml/min，时间为240s；

S3：产物萃取/进料阶段，分为洗脱和进料两部分，两部分同时运行；

产物萃取阶段，随着系统运行，由第1单元单柱运行，料液流向：Desorbent口→Extract口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元中，再由第1单元底部Extract口排出强吸附组分鹅去氧胆酸。控制流速为2.0ml/min，时间为960s；

进料阶段，由第5单元柱和第4单元柱串联运行，料液流向Feed口→Raffinate口，均相混合原料经Feed口进入第4单元柱中，第5单元底部Raffinate口排出吸附较弱的杂质。控制流速为0.5ml/min，时间为960s；

固定相模拟逆时针旋转，重复几个周期直至分离过程达到稳态，得到高纯度的鹅去氧胆酸分离液。最后经过浓缩，再用1M稀酸调至pH＝3，静置，离心过滤，烘干，得纯度为99.0％(HPLC)的鹅去氧胆酸，鹅去氧胆酸回收率97.5％，鹅去氧胆酸回收率95.1％。

实施例5

本实施例与实施例1基本相同，不同之处在于用与分离鸭胆膏中的鹅去氧胆酸。SMB中装入弱极性吸附树脂，将粗胆酸溶液在SMB的Feed口进入,50％的乙醇作为洗脱液从Desorbent口入，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个区的设定流速分别为2.3ml/min,2.3ml/min,0.6ml/min,2.4ml/min，S1，S2，S3的设定时间分别是1000s，948s，218s，用薄层层析(TLC)检测萃取口和萃余口的收集情况，初步判断鹅去氧胆酸的纯度。SMB经过几个周期运行后，产品口即萃取口溶液经过TLC检测，基本均为鹅去氧胆酸洗脱液。最后经过浓缩，再用1M稀酸调至pH＝3，静置，离心过滤，烘干，得纯度为99.4％(HPLC)的鹅去氧胆酸，鹅去氧胆酸回收率96.6％。

实施例6

本实施例与实施例1基本相同，不同之处在于用与分离鸡胆膏中的鹅去氧胆酸。SMB中装入弱极性吸附树脂，将粗胆酸溶液在SMB的Feed口进入,45％的甲醇作为洗脱液从Desorbent口入，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个区的设定流速分别为2.0ml/min,2.0ml/min,0.8ml/min,2.4ml/min，S1，S2，S3的设定时间分别是1200s，960s，240s，用薄层层析(TLC)检测萃取口和萃余口的收集情况，初步判断鹅去氧胆酸的纯度。SMB经过几个周期运行后，产品口即萃取口溶液经过TLC检测，基本均为鹅去氧胆酸洗脱液。最后经过浓缩，再用1M稀酸调至pH＝3，静置，离心过滤，烘干，得纯度为99.5％(HPLC)的鹅去氧胆酸，鹅去氧胆酸回收率97.1％。

Claims (9)

1.一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于包括如下步骤：(1)溶解：将禽畜胆汁的胆酸粗品溶解在一定浓度的碱性溶液中；(2)沉淀：用沉淀剂絮凝沉淀；(3)过滤，除去不溶物；(4)用模拟移动床色谱分离提纯，将过滤后的溶液按照设定的参数进行分离，得到含有鹅去氧胆酸的萃取液和含有其他物质的萃余液；(5)后处理：萃取液经过浓缩、酸沉、烘干，最终得到纯度大于99.0％、回收率大于95％的鹅去氧胆酸精品。

2.根据权利要求1所述的一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于，其中禽畜胆汁来源于家禽、家畜；优选鸡胆膏、猪胆膏、鸭胆膏中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于，用模拟移动床SMB色谱分离，分离柱共计7-25根树脂柱，可分为6个单元，每个单元包含1-7根树脂柱不等，每个单元分离过程包括以下3个步骤：

S1：精馏阶段，由第1到第6单元串联成一个环形运行，洗脱液从Desorbent口进入第1单元中，再注入第2单元中，再注入第3单元中，依次循环至第6单元，使得鹅去氧胆酸和杂质在六单元中分离展开，控制流速为2.0-2.4ml/min，时间为1000-1200s；

S2：解吸阶段，由第1-5单元串联运行，料液流向：Desorbent口→Raffinate口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元中，鹅去氧胆酸和杂质在五柱中进一步分离展开，当循环至第5单元时，由于猪去氧胆酸，熊去氧胆酸，胆石酸等杂质吸附能力弱，会随着洗脱液从第5单元柱子底部出口流出，而吸附能力较强的鹅去氧胆酸仍然留在柱中，控制流速为2.0-2.4ml/min，时间为218-240s；

S3：产物萃取/进料阶段，分为洗脱和进料两部分，两部分同时运行；

产物萃取阶段，随着系统运行，由第1单元运行，料液流向：Desorbent口→Extract口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元中，再由第1单元柱子底部Extract口排出强吸附组分鹅去氧胆酸，控制流速为2.0-2.4ml/min，时间为948-960s；

进料阶段，由第5单元柱子和第4单元柱子串联运行，料液流向Feed口→Raffinate口，均相混合原料经Feed口进入第4单元柱子中，第5单元底部Raffinate口排出吸附较弱的杂质，控制流速为0.5-0.8ml/min，时间为948-960s；

固定相模拟逆时针旋转，重复几个周期直至分离过程达到稳态，得到高纯度的鹅去氧胆酸萃取液。

4.根据权利要求1所述的一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于，其中步骤(2)中沉淀剂是甲醇、乙醇中的一种或者几种的混合溶液。

5.根据权利要求1所述的一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于，其中步骤(4)中SMB中所用的洗脱液选自甲醇、乙醇、丙酮中的一种或者几种的混合溶液。

6.根据权利要求3所述的一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于，其中步骤(4)中SMB中所用的填料为西安蓝晓科技新材料股份有限公司生产的弱极性吸附树脂，来源于专利CN111111261A中所描述的层析填料。

7.根据权利要求3所述的一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于，其中步骤(4)中SMB中所用的色谱柱的参数为：径高比为35-40:1，柱温为30-55℃。

8.根据权利要求3所述的一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于，其中步骤(4)中SMB中所用的洗脱液的浓度是25-50％。

9.一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，包括：取猪胆膏80g，加入400g的0.5mol/L的氢氧化钠水溶液；溶解后，加入300ml的甲醇，搅拌，絮凝沉淀，静置；用0.45μm的有机滤膜过滤，得均相的粗胆酸溶液480ml；SMB中装入弱极性吸附树脂，将粗胆酸溶液在SMB的Feed口进入，50％的甲醇作为洗脱液从Desorbent口入，在整个模拟移动床运行过程中，固定相和流动相通过逆流操作对样品进行分离纯化，分别得到鹅去氧胆酸(强保留组分)和杂质，每单元色谱柱的分离过程包括以下3个步骤：

S1：精馏阶段，由1-6单元串联成一个环形运行，洗脱液从Desorbent口进入第1单元中，再注入第2单元中，再注入第3单元中，依次循环至第6单元，使得鹅去氧胆酸和杂质在六柱中分离展开，控制流速为2.0ml/min，时间为1200s；

S2：解吸阶段，由第1-5单元串联运行，料液流向：Desorbent口→Raffinate口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元柱中，鹅去氧胆酸和杂质在五单元中进一步分离展开，当循环至第5单元时，由于杂质(猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、石胆酸及色素、蛋白等)吸附能力弱，会随着洗脱液从第5单元柱底部出口流出，而吸附能力较强的鹅去氧胆酸仍然留在柱中，控制流速为2.0ml/min，时间为240s；

S3：产物萃取/进料阶段，分为洗脱和进料两部分，两部分同时运行；

产物萃取阶段，随着系统运行，由第1单元运行，料液流向：Desorbent口→Extract口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元柱中，再由第1单元柱底部Extract口排出强吸附组分鹅去氧胆酸，控制流速为2.0ml/min，时间为960s；

进料阶段，由第5单元柱和第4单元柱串联运行，料液流向Feed口→Raffinate口，均相混合原料经Feed口进入第4单元柱中，第5单元柱底部Raffinate口排出吸附较弱的杂质，控制流速为0.5ml/min，时间为960s；

固定相模拟逆时针旋转，重复几个周期直至分离过程达到稳态，得到高纯度的鹅去氧胆酸分离液，最后经过浓缩，再用1M稀酸调至pH＝3，静置，离心过滤，烘干，得纯度为99.8％(HPLC)的鹅去氧胆酸，鹅去氧胆酸回收率96.5％。

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