CN112679434B

CN112679434B - 芳氧(硫)偕二氟类hppd抑制剂、制备方法及用途

Info

Publication number: CN112679434B
Application number: CN202011573737.4A
Authority: CN
Inventors: 张大永; 黄浩; 张建秋; 张梦涵
Original assignee: China Pharmaceutical University
Current assignee: China Pharmaceutical University
Priority date: 2020-12-25
Filing date: 2020-12-25
Publication date: 2023-01-31
Anticipated expiration: 2040-12-25
Also published as: CN112679434A

Abstract

本发明公开了通式(I)所示结构芳氧(硫)偕二氟类HPPD抑制剂、制备方法及用途。本发明的化合物具有优良的HPPD酶抑制作用，其可作为除草剂，主要用作预防以及除一年生和多年生草本杂草及木本杂草。

Description

芳氧(硫)偕二氟类HPPD抑制剂、制备方法及用途

技术领域

本发明涉及化工医药，特别涉及芳氧(硫)偕二氟类HPPD抑制剂、制备方法及用途。

背景技术

对羟基苯基丙酮酸双氧化酶(4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase，HPPD)存在于各种生物体中，是一种依赖二价铁离子的非血红素氧化酶，在一个单一催化循环中将对羟基丙酮酸经脱羧、取代基迁移和芳香环的氧化催化转化为尿黑酸。在植物体中，HPPD将对羟基苯基丙酮酸催化转化为尿黑酸这一过程时酪氨酸在植物体中代谢过程的一部分，催化的产物尿黑酸是指物体赖以生存的关键物质质体醌与生育酚生物合成的起始原料；此外，HPPD在酪氨酸降解中起作用，由于它具有异戊烯苯醌的芳基前体，亦即作为保护光合细胞的重要载体的质体醌与生育酚，因而具有重要的组成代谢作用。靶向除草剂抑制HPPD，导致阻碍4-羟苯基丙酮酸向尿黑酸的转变并间接抑制类胡萝卜素的合成，促使植物分生组织产生白化症状，最终导致植物死亡，具有重大农业意义。鉴于其上述重要作用和特点，使其成为继ALS、ACC以及PPO之后又一新的除草剂靶标酶。由于该酶抑制剂用于除草方面具有广谱、高效、残留低、环境相容性好、使用安全的特点，且尚未发现有关其抗性的报道，这更加引起相关研究人员对其抑制剂与构效关系研究的热情，同时开展了相关研究。

发明内容

发明目的：本发明目的是提供对羟基苯基丙酮酸双氧化酶(4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase，HPPD)具有优良抑制活性的芳氧(硫)偕二氟类HPPD抑制剂。该抑制剂区别于传统HPPD抑制剂苯环体系，构建了完全不同于市场化HPPD抑制剂的有机骨架，并且生物活性测定与硝磺草酮相当。提供具有优良的具有HPPD抑制作用的苗前、苗后母核结构新颖的靶向除草剂。

本发明另一目的是提供所述抑制剂的制备方法和用途。

技术方案：本发明提供一种芳氧(硫)偕二氟类HPPD抑制剂，

其中，

X代表氧原子、氮原子、硫原子；

R¹为氢原子、卤素、硝基、三氟甲基、氰基、砜甲基、甲氧基、1-4个碳原子烷、1-4个碳原子的烷基与取代的芳香基团；

R²为氢原子、环丙基、三氟甲基与1-4个碳原子的烷基。

所述的通式(I)所示结构的芳氧(硫)偕二氟类HPPD抑制剂的制备方法，包括如下步骤：

其中，X、R1、R2如前述，

苯酚衍生物1与氢化钠反应生成酚钠，再与二氟溴乙酸钠反应生成芳氧偕二氟乙酸衍生物2，甲基肼与乙酰乙酸乙酯3在乙醇为溶剂下反应生成吡唑衍生物4，芳氧偕二氟乙酸衍生物2与吡唑衍生物4在碱催化剂和酰胺缩合剂反应条件下，生成了芳氧(硫)偕二氟类HPPD抑制剂(I)。

一种除草剂组合物，其含有除草有效量所述的通式(I)所示结构的芳氧(硫)偕二氟类HPPD抑制剂及药学上可接受的载体。

进一步地，组合物中活性组分的重量百分含量1～99％。

所述的通式(I)所示结构的芳氧(硫)偕二氟类HPPD抑制剂在制备除草药物中的用途。

一种控制杂草的方法，向杂草或杂草生长区域上施用所述的除草剂组合物。

当化合物是盐形式时，其实例包括：金属盐、铵盐、与有机碱形成的盐、与无机酸形成的盐、与有机酸形成的盐、与碱性或酸性氨基酸形成的盐，等等。金属盐的优选例子包括：碱金属盐，例如钠盐、钾盐等等；碱土金属盐，例如钙盐、镁盐、钡盐等等；招盐，等等。与有机碱形成的盐的优选例子包括与下列有机碱形成的盐：三甲胺、三乙胺、吡啶、甲基吡啶、2，6-二甲基吡啶、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、环己胺、二环己基胺、N，N’-二苄基乙二胺，等等。

有益效果：本发明的化合物具有优良的HPPD酶抑制作用，其可作为除草剂，主要用作预防以及除一年生和多年生草本杂草及木本杂草。

具体实施方式

在下面的实施例中，“室温”通常是指大约10℃至大约35℃。混合溶剂表示的比例是体积混合比例，除非另作说明。

利用Fourier变换类型NMR，测定¹H-NMR(质子核磁共振波谱)。对于分析，使用ACD/SpecManager等。不描述很轻的质子(例如羟基、氨基等等)的峰。

利用LC/MS(液相色谱质谱仪)测定MS(质谱)。作为电离法，使用ESI(电喷射离子化)方法等。数据表示那些实测值。通常，观察分子离子峰。在盐的情况下，通常观察到游离形式的分子离子峰或碎片离子峰。

实施例1

中间体A1制备通法：

具体实施例：2-(4-氯苯氧基)-2，2-二氟乙酸的制备

将4-氯苯酚(1.28g)，60％氢化钠(0.60g)，二氟溴乙酸钠(3.94g)和60mL无水1，4-二氧六环，于100mL三口反应瓶中回流反应12h。TLC监控反应完全后，脱溶除去反应溶剂，3N盐酸调节pH至1，析出黄色固体，抽滤真空干燥至恒重，得2-(4-氯苯氧基)-2，2-二氟乙酸(1.65g)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ11.25(s，1H)，7.35(d，J＝8.8Hz，2H)，7.19(d，J＝8.7Hz，2H).

实施例2

中间体B1制备通法：

具体实施例：1，3-二甲基-1H-吡唑醇的制备

向100mL三口反应瓶中加入乙酰乙酸乙酯(13.00g)和50mL乙醇冷肼降温至-10℃，缓慢滴加40％甲基肼水溶液(11.50g)，保持体系温度不高于-5℃。滴加完毕后，常温搅拌2h，油浴升温至回流反应3h。脱溶，得米黄色固体(15.4g)。30mL EA重结晶，得白色固体(11.2g)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ3.28(s，3H)，3.19(s，2H)，2.10(s，3H).

实施例3

终产C1制备通法：

具体实施例：3-甲基苯并呋喃-2-甲酸的制备

将实施例1中所得2-(4-氯苯氧基)-2，2-二氟乙酸(0.56g)，1，3-二甲基-1H-吡唑醇(0.28g)，4-二甲氨基吡啶(DMAP 0.05g)，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI 0.59g)和50mL无水二氯乙烷加入100mL单口瓶中，开启氮气保护系统，回流反应，TLC中控直至反应完全。产物脱溶，经硅胶柱色谱分离纯化得上述化合物(0.18g)。

¹H NMR(300MHz，DMSO)δ11.39(s，1H)，7.49(d，J＝8.9Hz，1H)，7.40(d，J＝8.8Hz，1H)，3.44(s，1H)，2.33(s，1H).¹³C NMR(75MHz，DMSO)δ176.37，158.03，150.02，148.76，130.88，130.04，124.13，115.64，99.72，32.26，15.10.MS(ESI⁺)：[M+H]⁺317.2

本发明还可以用表1所示化合物来说明，但不仅限于表1。

表1：部分如通式所示的本发明化合物

实验实施例(化合物温室除草活性试验)

实验步骤：

温室盆栽除草活性测试：

样品配置：用分析天平(0.0001g)称取一定质量的原药，用含1％吐温-80乳化剂的DMF溶解配制成1.0％母液，然后用蒸馏水稀释备用。

实验方法：活性普筛(盆栽法，苗后茎叶喷雾处理)：供试靶标为苘麻、鳢肠、反枝苋、稗草、狗尾、马唐。取直径6cm花盆，装复合土基(V菜园土：V育苗基质＝1/2)至3/4处，将待测杂草(茼麻、鳢肠、反枝苋、稗草、马唐和狗尾草种子均匀的播入花盆中，直接播种上述六种杂草靶标出芽率≥85％)，覆土0.2cm，底部加水方式使土壤吸水饱和后置于温室内培养生长，土壤含水量保持适宜，待杂草长至3叶期左右备用。待杂草生长至4叶期左右时，在自动喷雾装置上进行芽后茎叶喷雾处理。每个处理重复2-3次并设空白对照。处理后静置4-5小时，杂草叶片上药液吸收后，移入温室内培养。每天定时观察杂草生长情况定期记录受害症状，施药后15天左右目测调查化合物的除草活性并计算抑制率。

作物安全性测试：

取内径12cm花盆，装复合土基(V_菜园土：V_育苗基质＝1/2)至3/4处将待测作物(小麦、玉米、水稻、大豆、棉花、油菜)种子均匀的播入花盆中，覆土0.2cm，于恒温温室中培养。待植株长至4-5叶左右时，各化合物按照150g ai/ha剂量在自动喷雾塔施药后，待杂草叶面药液吸收后移入温室培养，1 5天后测其鲜重抑制率，以喷施无菌水为空白对照。

田间除草活性测试：

田间测试时主要针对的作物是玉米，品种为郑单958。试验地以阔叶杂草为优势种，主要阔叶杂草为反枝苋、马齿苋、铁苋菜、黎、打碗花及少量苍耳等；主要禾本科杂草为马唐和牛筋草。基本代表北方一年两熟地区夏玉米田杂草的种类及群落组成。

实验田地旋耕后机械条播夏玉米，密度5000株/亩。播种前施有机肥，并随机器播种时施入复合肥50Kg/亩。待测化合物制剂配置为乳油，实验中所用的对照药剂为10％硝磺草酮，由先正达(中国)投资有限公司生产。

实验过程时，田间小区采用随机区组设计，田间小区面积为24m²。喷雾器械为新加坡利农背负式喷雾器，扇形喷头。施药时间在玉米4-5叶期，阔叶杂草3-5叶期，禾本科杂草4-6叶期进行茎叶喷雾处理，施药一次，喷液量设置为450L/ha。实验的过程中除喷洒待测的化合物外，无其它试剂。

试验地土质为沙壤，需测定土壤有机质含量、碱解氮、有效磷、有效钾和土壤pH值。试验期间采用喷灌浇水2次。播种前撒施有机肥，播种时使用复合肥50Kg为底肥。玉米施药前间苗，每亩留5000株左右，未进行其它田间作业。施药前，每小区对角线定3个0.25m²样点，分草种调查点内杂草基数。施药后5天，目测观察待测化合物的速效性，记录杂草典型的中毒症状；施药后10天目测观察杂草防效，施药后15天，调查样点内残存杂草种类及株数，计算防效。

部分化合物生测活性如下(％，生长抑制率)(药后20d)，见表2

表2：部分化合物生测活性

化合物编号	剂量(gai/ha)	稗草	马唐	狗尾	苘麻	反枝苋	鳢肠
								1	150	0	0	0	50	0	0
2	150	0	0	0	20	10	0
								3	150	0	0	0	30	0	0
4	150	0	0	10	10	0	0
								5	150	0	0	0	0	10	0
6	150	0	0	20	20	10	0
								7	150	0	20	0	10	0	50
8	150	0	0	0	10	20	10
								9	150	0	0	0	20	0	0
10	150	80	100	40	90	90	90
								11	150	0	0	0	70	10	10
12	150	60	80	0	90	0	10
								13	150	0	0	0	80	10	0
14	150	0	0	0	60	10	0
								15	150	0	0	0	60	20	0
16	150	0	0	0	40	10	0
								17	150	0	0	0	20	10	10
18	150	0	0	0	10	10	10
								19	150	0	20	0	90	40	30
20	150	0	0	0	40	10	0
								21	150	100	90	50	90	80	90
22	150	100	90	60	90	90	90
								23	150	70	60	70	80	80	10
24	150	0	20	0	70	10	10
								25	150	0	0	10	90	20	10

供试化合物除草活性筛选试验结果见表2。结果表明，在150gai/ha剂量下苗后茎叶喷雾处理，编号为10、21、22、23的化合物对供试阔叶杂草靶标及禾本科杂草靶标稗草、马唐等五种靶标均具有较高活性，生长抑制率70％-100％，靶标植株表现白化，直至死亡，与硝磺草酮活性相当，其他化合物除草活性一般或活性不明显。

Claims

1.一种芳氧(硫)偕二氟类HPPD抑制剂，为如下任一种化合物：

2.一种除草剂组合物，其含有除草有效量的如权利要求1所述的芳氧(硫)偕二氟类HPPD抑制剂及药学上可接受的载体。

3.根据权利要求2所述的除草剂组合物，其特征在于：组合物中活性组分的重量百分含量1～99％。

4.权利要求1所述的芳氧(硫)偕二氟类HPPD抑制剂在制备除草药物中的用途。

5.一种控制杂草的方法，其特征在于：向杂草或杂草生长区域上施用如权利要求2所述的除草剂组合物。