CN112673957A - 一种三角梅组培植株的快速繁育方法 - Google Patents

一种三角梅组培植株的快速繁育方法 Download PDF

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CN112673957A CN202011527988.9A CN202011527988A CN112673957A CN 112673957 A CN112673957 A CN 112673957A CN 202011527988 A CN202011527988 A CN 202011527988A CN 112673957 A CN112673957 A CN 112673957A
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冷青云
陆锦萍
牛俊海
徐世松
赵彤
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Abstract

本发明涉及一种三角梅组培植株的快速繁育方法,其包括以下操作步骤:S1、种子收集与处理;S2、种子萌发;S3、外植体表面消毒灭菌;S4、下胚轴愈伤组织诱导分化;S5、不定芽增殖;S6、壮苗;S7、生根培养。本发明所述的三角梅组培植株的快速繁育方法,其以三角梅种子萌发生成的下胚轴为材料,利用下胚轴再生能力强,并可以直接诱导分化出不定芽,进而获得稳定高效的组培再生体系的特点,极大地缩短了培养周期,且方法设计合理,培养方式及操作简便,同时可以有效保持母本的优良特性,对三角梅品种的规模化繁殖以及其他方面的研究具有重要意义。

Description

一种三角梅组培植株的快速繁育方法
技术领域
本发明涉及植物组培繁殖技术领域,特别是涉及一种三角梅组培植株的快速繁育方法。
背景技术
三角梅又名叶子花、宝巾花、勒杜鹃、九重葛等,为紫茉莉科(Nyctaginacea)三角梅属(Bougainvillea)观赏植物的总称,其以绚丽多彩的苞片、多变的造型、容易繁殖、耐贫瘠干旱等优点,经过不断引种驯化,得以在世界范围内的宜栽地区迅速地传播,深受世界各地人们的喜爱。据统计,三角梅属有18个种。在这18个种中,观赏价值较高的是三角梅的三个原种和一个变种,为毛叶种(B.spectabilis)、光叶种(B.glabra)、秘鲁种(B.peruviana)和巴特种(B.×buttiana),三角梅的三个原种是主要园艺品种的育种亲本。截止2017年3月,英国皇家园艺协会登录的三角梅栽培种已达294种。
新品种选育一直是观赏植物的重点研究领域,可以不断满足人们对于观赏植物品质方面的需求。近年来,随着分子生物技术和基因工程的的不断发展,将所需特定基因导入受体细胞,获得定向改良的植物新品种,已经成为对常规育种手段进行补充的新型育种方式。而建立稳定高效的三角梅组织培养再生体系是对其进行转基因育种的关键。
发明内容
基于此,本发明的目的在于,提供一种三角梅组培植株的快速繁育方法,其具有培养周期短、培养方式简单的优点。
一种三角梅组培植株的快速繁育方法,其包括以下具体操作步骤:
S1、种子收集与处理:于每年的11月至次年的3月收集宿存于树上的三角梅种子,荫干后挑选饱满的种子备用;
S2、种子萌发:对步骤S1中挑选好的种子先用清洁剂清洗,随后使用新结尔灭水溶液浸泡消毒1~2min,并用无菌水冲洗若干遍,随后将其按照一定间隔平铺在铺满纸巾并用无菌水充分润湿的培养盒中,在温度条件为22~24℃的黑暗环境中培养,诱导种子萌发;
S3、外植体表面消毒灭菌:待步骤S2中所述种子萌发出根毛、下胚轴长至5~6cm左右且2片子叶完全展开时取出;切除胚根及子叶,将下胚轴先用洗涤剂清洗并用流水冲洗20~30min,随后使用新结尔灭水溶液浸泡消毒1~2min,将其转移至超净工作台使用75%酒精浸泡20~40s并用无菌水冲洗若干遍,再使用质量浓度为0.1%的氯化汞溶液浸泡8~10min,并用无菌水冲洗若干遍后备用;
S4、下胚轴愈伤组织诱导分化:将步骤S3中获得的无菌下胚轴切至长度为0.5~1cm,并将其平躺接种于愈伤诱导分化培养基上生长,40d后分化出不定芽;所述愈伤诱导分化培养基为MS+IBA 0.05~0.2mg/L+6-BA 1.00~3.00mg/L+白糖25.00~35.00g/L+卡拉胶6.50~7.00g/L;
S5、不定芽增殖:将步骤S4获得的不定芽接种于增殖培养基中继续培养,30d后获得无菌增殖芽苗;所述增殖培养基为MS+NAA 0.05~0.1mg/L+6-BA 3.00~4.00mg/L+白糖25.00~35.00g/L+卡拉胶6.50~7.00g/L;
S6、壮苗:将步骤S5获得的无菌增殖芽苗接种于壮苗培养基中继续培养30d,获得无菌苗;所述壮苗培养基为MS+NAA 0.05~0.20mg/L+6-BA 0.50~2.00mg/L+白糖25.00~35.00g/L+卡拉胶6.50~7.00g/L;
S7、生根培养:将步骤S6获得的无菌苗接种于生根培养基中继续培养40d,所述生根培养基为1/2MS+NAA 0.10~0.30mg/L+白糖25.00~35.00g/L+卡拉胶6.50~7.00g/L,即得所述三角梅组培植株。
本发明所述的三角梅组培植株的快速繁育方法,其以三角梅种子萌发生成的下胚轴为材料,利用下胚轴再生能力强,并可以直接诱导分化出不定芽,进而获得稳定高效的组培再生体系的特点,极大地缩短了培养周期,且方法设计合理,培养方式及操作简便,同时可以有效保持母本的优良特性,对三角梅品种的规模化繁殖以及其他方面的研究具有重要意义。
进一步地,步骤S2中所述种子的清洗并消毒处理为:先用洗涤剂清洗,随后使用新洁尔灭水溶液浸泡消毒1~2min,并用无菌水冲洗若干遍即得。
进一步地,步骤S3中所述下胚轴的清洗并消毒处理为:先用洗涤剂清洗并用流水冲洗20~30min,随后使用新结尔灭水溶液浸泡消毒1~2min,将其转移至超净工作台使用75%酒精浸泡20~40s并用无菌水冲洗若干遍,再使用质量浓度为0.1%的氯化汞溶液浸泡8~10min,并用无菌水冲洗若干遍,即得。
进一步地,步骤S4中下胚轴接种于愈伤诱导分化培养基后先在黑暗环境培养2~3d,以促进伤口愈合,再开始光照培养。
进一步地,培养温度为23~27℃,光照时间为15~18h/d,光照强度为1500~2000Lx,培养基的pH为5.8~6.0。
进一步地,步骤S4中所述愈伤诱导分化培养基为MS+IBA 0.1mg/L+6-BA 2.0mg/L+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L。
进一步地,步骤S5中所述增殖培养基为MS+NAA 0.05mg/L+6-BA 3.0mg/L+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L。
进一步地,步骤S6中所述壮苗培养基为MS+NAA 0.1mg/L+6-BA 1.0mg/L+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L。
进一步地,步骤S7中生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L。
本发明所述的三角梅组培植株的快速繁育方法,其以三角梅种子萌发生成的下胚轴为材料,利用下胚轴再生能力强,并可以直接诱导分化出不定芽,进而获得稳定高效的组培再生体系的特点,极大地缩短了培养周期,且方法设计合理,培养方式及操作简便,同时可以有效保持母本的优良特性,对三角梅品种的规模化繁殖以及其他方面的研究具有重要意义。并在进一步可选实施方式中,通过对相应培养基的成分进行优选限定,通过激素种类以及使用量的优选使用,有效提高植株在相应步骤中的各项生长参数,进一步缩短所述组培植株的繁育周期,且培养得到生长势较好且健康情况优良的高品质植株。
为了更好地理解和实施,下面结合附图详细说明本发明。
附图说明
图1为本发明实施例1所述下胚轴培养15d的照片;
图2为本发明实施例1所述下胚轴培养20d的照片;
图3为本发明实施例1所述下胚轴培养40d的照片;
图4为本发明实施例1中所述不定芽增殖的照片;
图5为本发明实施例1所述无菌增殖芽苗壮苗的照片;
图6为本发明实施例1所述无菌苗生根的照片。
具体实施方式
为了使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面通过本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明,但是本发明还可以采用其他不同于本发明在此描述的其他方式来实施,本领域技术人员可以在不为违背本发明内涵的情况下做类似推广,因此本发明不受以下公开的实施例的限制。
实施例1
请参照图1~6,图1为本发明实施例1所述下胚轴培养15d的照片,图2为本发明实施例1所述下胚轴培养20d的照片,图3为本发明实施例1所述下胚轴培养40d的照片,图4为本发明实施例1中所述不定芽增殖的照片,图5为本发明实施例1所述无菌增殖芽苗壮苗的照片,图6为本发明实施例1所述无菌苗生根的照片。
本发明实施例1提供一种三角梅组培植株的快速繁育方法,其包括以下具体操作步骤:
S1、种子收集与处理:于每年的11月至次年的3月收集宿存于树上的三角梅种子,荫干后挑选饱满的种子备用;
S2、种子萌发:对步骤S1中挑选好的种子进行清洗并消毒处理,随后将其按照一定间隔平铺在铺满纸巾并用无菌水充分润湿的培养盒中,在温度条件为22~24℃的黑暗环境中培养,诱导种子萌发;
S3、外植体表面消毒灭菌:待步骤S2中所述种子萌发出根毛、下胚轴长至5~6cm左右且2片子叶完全展开时取出;切除胚根及子叶,将下胚轴清洗并消毒处理后备用;
S4、下胚轴愈伤组织诱导分化:将步骤S3中获得的无菌下胚轴切至长度为0.5~1cm,并将其平躺接种于愈伤诱导分化培养基上生长,先在黑暗环境中培养1~2d,以促进伤口愈合,再开始光照培养,光照培养3~4d后下胚轴两端切口开始膨大,7d左右后两端膨大明显,15d左右后切口处形成淡黄绿色瘤状物,如图1所示,20d左右后膨大处开始出现芽点,如图2所示,30d左右后逐渐形成小芽,40d后分化出不定芽,如图3所示;所述愈伤诱导分化培养基为MS+IBA 0.05mg/L+6-BA 1.00mg/L+白糖25.00g/L+卡拉胶6.50g/L;
S5、不定芽增殖:将步骤S4获得的不定芽接种于增殖培养基中继续培养,30d后获得无菌增殖芽苗,如图4所示;所述增殖培养基为MS+NAA 0.05mg/L+6-BA 3.00mg/L+白糖25.00g/L+卡拉胶6.50g/L;
S6、壮苗:将步骤S5获得的无菌增殖芽苗接种于壮苗培养基中继续培养30d,获得无菌苗,如图5所示;所述壮苗培养基为MS+NAA 0.05mg/L+6-BA 0.50mg/L+白糖25.00g/L+卡拉胶6.50g/L;
S7、生根培养:将步骤S6获得的无菌苗接种于生根培养基中继续培养40d,所述生根培养基为1/2MS+NAA 0.10mg/L+白糖25.00g/L+卡拉胶6.50g/L,即得如图6所示的所述三角梅组培植株。
培养温度为23℃,光照时间为15h/d,光照强度为1500Lx,培养基的pH为5.8。
实施例2
本发明实施例2提供一种三角梅组培植株的快速繁育方法,其包括以下具体操作步骤:
S1、种子收集与处理:于每年的11月至次年的3月收集宿存于树上的三角梅种子,荫干后挑选饱满的种子备用;
S2、种子萌发:对步骤S1中挑选好的种子进行清洗并消毒处理,随后将其按照一定间隔平铺在铺满纸巾并用无菌水充分润湿的培养盒中,在温度条件为22~24℃的黑暗环境中培养,诱导种子萌发;
S3、外植体表面消毒灭菌:待步骤S2中所述种子萌发出根毛、下胚轴长至5~6cm左右且2片子叶完全展开时取出;切除胚根及子叶,将下胚轴清洗并消毒处理后备用;
S4、下胚轴愈伤组织诱导分化:将步骤S3中获得的无菌下胚轴切至长度为0.5~1cm,并将其平躺接种于愈伤诱导分化培养基上生长,先在黑暗环境中培养1~2d,以促进伤口愈合,再开始光照培养,光照培养3~4d后下胚轴两端切口开始膨大,7d左右后两端膨大明显,15d左右后切口处形成淡黄绿色瘤状物,20d左右后膨大处开始出现芽点,30d左右后逐渐形成小芽,40d后分化出不定芽;所述愈伤诱导分化培养基为MS+IBA 0.2mg/L+6-BA3.00mg/L+白糖35.00g/L+卡拉胶7.00g/L;
S5、不定芽增殖:将步骤S4获得的不定芽接种于增殖培养基中继续培养,30d后获得无菌增殖芽苗;所述增殖培养基为MS+NAA 0.1mg/L+6-BA 4.00mg/L+白糖35.00g/L+卡拉胶7.00g/L;
S6、壮苗:将步骤S5获得的无菌增殖芽苗接种于壮苗培养基中继续培养30d,获得无菌苗;所述壮苗培养基为MS+NAA 0.20mg/L+6-BA 2.00mg/L+白糖35.00g/L+卡拉胶7.00g/L;
S7、生根培养:将步骤S6获得的无菌苗接种于生根培养基中继续培养40d,所述生根培养基为1/2MS+NAA 0.30mg/L+白糖35.00g/L+卡拉胶7.00g/L,即得所述三角梅组培植株。
培养温度为27℃,光照时间为18h/d,光照强度为2000Lx,培养基的pH为6.0。
实施例3
本发明实施例3提供一种三角梅组培植株的快速繁育方法,其包括以下具体操作步骤:
S1、种子收集与处理:于每年的11月至次年的3月收集宿存于树上的三角梅种子,荫干后挑选饱满的种子备用;
S2、种子萌发:对步骤S1中挑选好的种子进行清洗并消毒处理,随后将其按照一定间隔平铺在铺满纸巾并用无菌水充分润湿的培养盒中,在温度条件为22~24℃的黑暗环境中培养,诱导种子萌发;
S3、外植体表面消毒灭菌:待步骤S2中所述种子萌发出根毛、下胚轴长至5~6cm左右且2片子叶完全展开时取出;切除胚根及子叶,将下胚轴清洗并消毒处理后备用;
S4、下胚轴愈伤组织诱导分化:将步骤S3中获得的无菌下胚轴切至长度为0.5~1cm,并将其平躺接种于愈伤诱导分化培养基上生长,先在黑暗环境中培养1~2d,以促进伤口愈合,再开始光照培养,光照培养3~4d后下胚轴两端切口开始膨大,7d左右后两端膨大明显,15d左右后切口处形成淡黄绿色瘤状物,20d左右后膨大处开始出现芽点,30d左右后逐渐形成小芽,40d后分化出不定芽;所述愈伤诱导分化培养基为MS+IBA 0.05mg/L+6-BA2.0mg/L+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L;
S5、不定芽增殖:将步骤S4获得的不定芽接种于增殖培养基中继续培养,30d后获得无菌增殖芽苗;所述增殖培养基为MS+NAA 0.05mg/L+6-BA 3.00mg/L+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L;
S6、壮苗:将步骤S5获得的无菌增殖芽苗接种于壮苗培养基中继续培养30d,获得无菌苗;所述壮苗培养基为MS+NAA 0.1mg/L+6-BA 1.0mg/L+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L;
S7、生根培养:将步骤S6获得的无菌苗接种于生根培养基中继续培养40d,所述生根培养基为1/2MS+NAA 0.20mg/L+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L,即得所述三角梅组培植株。
培养温度为25℃,光照时间为16h/d,光照强度为1800Lx,培养基的pH为6.0。
1.关于所述愈伤诱导分化培养基的筛选:
以MS+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L为基本培养基,分别添加不同配比量的激素,各个处理依次标记为1~9,每个处理中每个培养容器中放置1个下胚轴,每10个培养容器一个重复,3次重复,40d后记录并统计其生长情况,并计算愈伤分化率以及平均分化芽数,其中:
分化率=(分化下胚轴数/接种下胚轴数)×100%;
平均分化芽数=分化芽总数/接种下胚轴数;
各个处理对应的激素配比及其相应的数据记录如表1所示:
Figure BDA0002851219940000061
其中同列数据后不同字母表示显著差异(P<0.05)。
由表1可以看出,IBA和6-BA不同浓度的配比均可以诱导三角梅下胚轴分化出不定芽,且下胚轴40天的分化率和平均分化芽数总体上呈现先增高后降低的趋势。在处理5中,下胚轴的分化率和平均分化芽数显著高于其他处理,为81.35%、7.04个;而处理4仅次于处理5,分化率为67.62%,平均每个下胚轴分化芽数为4.18个。所以,可以确定处理5,即IBA0.1mg/L和6-BA 2.0mg/L的配比组合为下胚轴愈伤诱导分化培养基激素配比的较佳组合。
2.关于所述增殖培养基的筛选:
以MS+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L为基本培养基,分别添加不同配比量的激素,各个处理依次标记为1~9,每个处理中每个培养容器中放置3个分化芽,每4个培养容器一个重复,3次重复,30d后记录并统计增殖芽数,并计算芽的增殖系数,其中:
增殖系数=增殖芽数/接种芽数;
各个处理对应的激素配比及其相应的数据记录如表2所示:
Figure BDA0002851219940000071
其中,同列数据后不同字母表示显著差异(P<0.05);
+表示植株较矮小,丛生芽一般;
++表示植株高度一般,丛生芽一般,少许玻璃化;
+++表示植株高度一般,丛生芽较多,植株健壮且叶片翠绿。
由表2可以看出不同植物激素的组合,比单一激素更有利于下胚轴不定芽的增殖。当NAA浓度一定时,增殖系数随着6-BA浓度的增加而降低,且增殖苗会出现一定的玻璃化现象,证明一定浓度的6-BA可以促进不定芽的增殖,但浓度过高则会影响植物的正常生长;当6-BA浓度一定时,增殖率随着NAA浓度的先增加后降低,其中,NAA 0.05mg/L和6-BA 3.0mg/L配比时,增殖系数达到最高,为5.22,与其他处理差异显著。
3.关于壮苗培养基的筛选:
以MS+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L为基本培养基,分别添加不同配比量的激素,各个处理依次标记为1~9,每个处理中每个培养容器放置3个增殖芽苗,每7个培养容器一个重复,3次重复,30d后记录并统计苗高、苗的生长状况,各个处理对应的激素配比及其相应的数据记录如表3所示:
Figure BDA0002851219940000081
其中,同列数据后不同字母者表示显著差异(P<0.05);
+表示生长状况一般;
++表示生长状况良好。
从表3可以看出,经过壮苗培养后的植株平均苗高能达到4.5cm以上,且生长状况较好。随着NAA、6-BA浓度的增加,植株苗高出现先升高后降低的趋势,其中,NAA 0.1mg/L和6-BA 1.0mg/L配比时,平均苗高达到5.59cm,有效苗数较多,是较佳的壮苗培养基。
4.关于所述生根培养基的筛选:
以1/2MS+白糖15g/L+5g/L为基本培养基,不添加激素,标记为处理1,以MS+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L为基本培养基,分别添加不同配比量的激素,依次标记为2~7;每个处理中每个培养容器中放置3株无菌苗,每7个培养容器一个重复,3次重复,40d后记录并统计生根苗数、根数及根势,并计算生根率及平均生根数,其中:
生根率(%)-=生根苗数/接种苗数×100%;
平均生根数=生根总数/接种苗数。
各个处理对应的激素配比及相应的数据记录如表4所示:
Figure BDA0002851219940000082
Figure BDA0002851219940000091
其中,同列数据后不同字母者表示显著差异(P<0.05);
+表示生根数少,主根细长,须根少且短;
++表示生根数较少,主根细长,须根较多,叶势一般;
+++表示生根数较多,主根粗壮、长,呈放射状生长,须根较多,叶势健康。
从表4可以看出,在添加活性炭(AC)时,各个处理间生根率、平均生根数相差不大,且主根、须根细长。而不添加活性炭(AC)时,随着NAA浓度的增加,有效苗的生根率和平均生根数较高,且呈先升高后降低的趋势。当NAA 0.2mg/L,AC 0g/L时,生根率和平均生根数最高,分别为82.54%、4.38条,主根粗壮、长,呈放射状生长,须根较多,植株生长势较好,叶片翠绿,为较佳的生根培养基。
本发明实施例所述的三角梅组培植株的快速繁育方法,其以三角梅种子萌发生成的下胚轴为材料,利用下胚轴再生能力强,并可以直接诱导分化出不定芽,进而获得稳定高效的组培再生体系的特点,极大地缩短了培养周期,且方法设计合理,培养方式及操作简便,同时可以有效保持母本的优良特性,对三角梅品种的规模化繁殖以及其他方面的研究具有重要意义。并在进一步可选实施方式中,通过对相应培养基的成分进行优选限定,通过激素种类以及使用量的优选使用,有效提高植株在相应步骤中的各项生长参数,进一步缩短所述组培植株的繁育周期,且培养得到生长势较好且健康情况优良的高品质植株。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种三角梅组培植株的快速繁育方法,其特征在于,包括以下具体操作步骤:
S1、种子收集与处理:于每年的11月至次年的3月收集宿存于树上的三角梅种子,荫干后挑选饱满的种子备用;
S2、种子萌发:对步骤S1中挑选好的种子进行清洗并消毒处理,随后将其按照一定间隔平铺在铺满纸巾并用无菌水充分润湿的培养盒中,在温度条件为22~24℃的黑暗环境中培养,诱导种子萌发;
S3、外植体表面消毒灭菌:待步骤S2中所述种子萌发出根毛、下胚轴长至5~6cm左右且2片子叶完全展开时取出,切除胚根及子叶,将下胚轴清洗并消毒处理后备用;
S4、下胚轴愈伤组织诱导分化:将步骤S3中获得的无菌下胚轴切至长度为0.5~1cm,并将其平躺接种于愈伤诱导分化培养基上生长,40d后分化出不定芽;所述愈伤诱导分化培养基为MS+IBA 0.05~0.2mg/L+6-BA 1.00~3.00mg/L+白糖25.00~35.00g/L+卡拉胶6.50~7.00g/L;
S5、不定芽增殖:将步骤S4获得的不定芽接种于增殖培养基中继续培养,30d后获得无菌增殖芽苗;所述增殖培养基为MS+NAA 0.05~0.1mg/L+6-BA 3.00~4.00mg/L+白糖25.00~35.00g/L+卡拉胶6.50~7.00g/L;
S6、壮苗:将步骤S5获得的无菌增殖芽苗接种于壮苗培养基中继续培养30d,获得无菌苗;所述壮苗培养基为MS+NAA 0.05~0.20mg/L+6-BA 0.50~2.00mg/L+白糖25.00~35.00g/L+卡拉胶6.50~7.00g/L;
S7、生根培养:将步骤S6获得的无菌苗接种于生根培养基中继续培养40d,所述生根培养基为1/2MS+NAA 0.10~0.30mg/L+白糖25.00~35.00g/L+卡拉胶6.50~7.00g/L,即得所述三角梅组培植株。
2.根据权利要求1所述的三角梅组培植株的快速繁育方法,其特征在于:步骤S2中所述种子的清洗并消毒处理为:先用洗涤剂清洗,随后使用新洁尔灭水溶液浸泡消毒1~2min,并用无菌水冲洗若干遍即得。
3.根据权利要求1所述的三角梅组培植株的快速繁育方法,其特征在于:步骤S3中所述下胚轴的清洗并消毒处理为:先用洗涤剂清洗并用流水冲洗20~30min,随后使用新结尔灭水溶液浸泡消毒1~2min,将其转移至超净工作台使用75%酒精浸泡20~40s并用无菌水冲洗若干遍,再使用质量浓度为0.1%的氯化汞溶液浸泡8~10min,并用无菌水冲洗若干遍,即得。
4.根据权利要求1所述的三角梅组培植株的快速繁育方法,其特征在于:步骤S4中下胚轴接种于愈伤诱导分化培养基后先在黑暗环境培养2~3d,再开始光照培养。
5.根据权利要求1所述的三角梅组培植株的快速繁育方法,其特征在于:培养温度为23~27℃,光照时间为15~18h/d,光照强度为1500~2000Lx,培养基的pH为5.8~6.0。
6.根据权利要求1所述的三角梅组培植株的快速繁育方法,其特征在于:步骤S4中所述愈伤诱导分化培养基为MS+IBA 0.1mg/L+6-BA 2.0mg/L+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L。
7.根据权利要求1所述的三角梅组培植株的快速繁育方法,其特征在于:步骤S5中所述增殖培养基为MS+NAA 0.05mg/L+6-BA 3.0mg/L+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L。
8.根据权利要求1所述的三角梅组培植株的快速繁育方法,其特征在于:步骤S6中所述壮苗培养基为MS+NAA 0.1mg/L+6-BA 1.0mg/L+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L。
9.根据权利要求1所述的三角梅组培植株的快速繁育方法,其特征在于:步骤S7中生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L+白糖30.00g/L+卡拉胶6.80g/L。
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