CN112546107A - 佛手柑发酵汁液用于制备改善皮肤老化组合物的用途 - Google Patents

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Abstract

一种佛手柑发酵汁液的用途，其用于制备一组合物。此组合物具有下列一种或多种功能：抑制黑色素、抗醣化以及减少胶原蛋白分解。并且，此佛手柑发酵汁液是由一佛手柑浸提液与及多个菌种进行一发酵所得。

Description

佛手柑发酵汁液用于制备改善皮肤老化组合物的用途
技术领域
本发明是关于佛手柑发酵汁液，特别是关于佛手柑发酵汁液用于制备改善皮肤老化组合物的用途。
背景技术
紫外线(UV)是造成皮肤老化的因素之一，其依波长可分为长波紫外线 (UVA)、中波紫外线(UVB)、及短波紫外线(UVC)。已知，长波紫外线(UVA)、中波紫外线(UVB)可穿透皮肤的真皮层而对皮肤造成伤害，经常暴露于这些UV 辐射下将引起皮肤黑色素生成、胶原蛋白流失而造成皮肤老化。
另一种造成皮肤老化的因素为醣化作用，其系指在无酵素的情况下，糖分子附加至蛋白质或脂质的缓慢化学反应，其最终生成醣化终产物(advanced glycated endproducts，AGEs)。醣化作用会影响胶原蛋白聚集形成纤维，而且醣化的胶原蛋白纤维变得僵硬而易脆，这些因素最终促成皮肤老化。
自有机及天然的饮食概念兴起后，生技公司及食品业者积极投入关于天然植物的相关产品的研发。为使植物相关产品对身体健康帮助有科学验证的基础，植物的活性成分分析及功效评估成为产品开发的重点项目。
有鉴于此，开发一种既提升多方改善皮肤老化的天然植物性新颖组合物，实有其必要。
发明内容
本发明的目的为提供一种佛手柑发酵汁液的用途，其是用于制备用以改善肌肤老化的组合物，其中该佛手柑发酵汁液是由一佛手柑浸提液经由啤酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)及乙酸醋酸菌 (Acetobacter aceti)进行一发酵所得。
在本发明的一实施例中，该改善肌肤老化为抑制黑色素、抗醣化或减少胶原蛋白分解或其组合。
在本发明的一实施例中，该抑制黑色素为减少黑色素瘤细胞株的自生黑色素及/或减少紫外光诱导黑色素瘤细胞株生成的黑色素。
在本发明的一实施例中，该紫外光为UVA。
在本发明的一实施例中，该减少胶原蛋白分解为抑制基质金属蛋白酵素 9(MMP9)的含量。
在本发明的一实施例中，该啤酒酵母相对于该佛手柑浸提液的添加量为 0.01％-0.5％(v/v)，该干酪乳杆菌相对于该佛手柑浸提液的添加量为 0.01％-0.25％(v/v)，该乙酸醋酸菌相对于该佛手柑浸提液的添加量为 1％-15％(v/v)。
在本发明的一实施例中，该发酵的时间为4-8天。
在本发明的一实施例中，该佛手柑发酵汁液的有效浓度为至少为 2.5％(v/v)。
在本发明的一实施例中，该佛手柑发酵汁液的糖度为40±2。
综上所述，根据本发明任一实施例的佛手柑发酵汁液，其可制备改善肌肤老化的组合物。换言之，前述的组合物具有下列一种或多种功能：抑制黑色素、抗醣化以及减少胶原蛋白分解。
以下将进一步说明本发明的实施方式，下述所列举的实施例系用以阐明本发明，并非用以限定本发明的范围，任何熟习此技艺者，在不脱离本发明的精神和范围内，当可做些许更动与润饰，因此本发明的保护范围当视后附的申请专利范围所界定者为准。
附图说明
图1是绘示各组别的自生黑色素含量变化的直方图。
图2是绘示各组别的紫外线诱导黑色素生成变化的直方图。
图3是绘示各组别的相对醣化终产物形成量的直方图。
图4是绘示各组别的MMP9表现量的直方图。
具体实施方式
以下将描述本案的部分具体实施态样。在不背离本案精神下，本案尚可以多种不同形式的态样来实践，不应将保护范围限于说明书所具体陈述的条件。
本案使用Excel软件进行统计分析。数据以平均值±标准偏差(SD)表示，各组之间的差异以学生t检验(student's t-test)进行分析。
本文中所使用数值为近似值，所有实验数据皆表示在正负10％的范围内，最佳为在正负5％的范围内。
关于本文中所使用的浓度符号「％」通常是指重量百分浓度，而浓度符号「vol％」通常是指体积百分浓度。
关于本文中所使用的「佛手柑」通常是指佛手柑果实。
佛手柑(Citrus medica var.sarcodactylis)，又名佛手果、佛手、五指柑，是柑橘属枸橼种的变种。佛手柑原产于中国、印度等亚洲地区。
依据本发明，有关微生物发酵反应的操作程序与参数条件等是落在熟习此项技术的人士的专业素养与例行技术范畴内。
在一些实施例中，佛手柑发酵汁液是由佛手柑浸提液与及多个菌种进行一发酵所得。其中，在发酵过程中，相对于佛手柑浸提液，此些菌种包括 0.01％-0.5％(v/v)的啤酒酵母、0.01％-0.25％(v/v)的干酪乳杆菌及1％-15％的乙酸醋酸菌。
在一些实施例中，啤酒酵母可以是Saccharomyces cerevisiae，购自BCRC，寄存编号BCRC20271。在一些实施例中，干酪乳杆菌可以Lactobacillus casei，购自BCRC，寄存编号BCRC910882。在一些实施例中，乙酸醋酸菌可以是 Acetobacter aceti，购自BCRC，寄存编号BCRC11688。
在一些实施例中，在发酵程序中，先添加0.01％-0.5％(v/v)的啤酒酵母以及0.01％-0.25％(v/v)的干酪乳杆菌至佛手柑浸提液内，并将佛手柑浸提液与啤酒酵母与干酪乳杆菌进行发酵2日至5日以形成第一初发酵汁液。换言之， 0.01％-0.5％的啤酒酵母以及0.01％-0.25％(v/v)的干酪乳杆菌与佛手柑浸提液混合成的第一混合液进行发酵2日至5日以形成第一初发酵汁液。在一些实施例中，第一混合液是在28℃-37℃下进行发酵。
于第一初发酵汁液形成后，再添加1％-15％(v/v)乙酸醋酸菌至第一初发酵汁液内，并将第一初发酵汁液与乙酸醋酸菌进行发酵2日至5日以形成第二初发酵汁液。换言之，1％-15％(v/v)乙酸醋酸菌与第一初发酵汁液混合成的第二混合液进行发酵2日至5日以形成第二初发酵汁液。在一些实施例中，第二混合液是在28℃-37℃下进行发酵。
于第二初发酵汁液形成后，过滤第二初发酵汁液以得到佛手柑发酵汁液。在第一示范例中，第二初发酵汁液的过滤步骤包括以200目数至400目数的网孔的滤网过滤第二初发酵汁液。在第二示范例中，第二初发酵汁液的过滤步骤包括在40℃至70℃下减压浓缩及以200目数至400目数的网孔的滤网过滤第二初发酵汁液。在第三示范例中，第二初发酵汁液的过滤步骤包括在40℃至70 ℃下减压浓缩及以200目数至400目数的网孔的滤网过滤第二初发酵汁液以得到一发酵原液，以及调整发酵原液的糖度(Degrees Brix)以形成佛手柑发酵汁液。
在一些实施例中，可透过添加55％-70％的赋形剂(excipient)来调整发酵原液的糖度。在一些实施例中，用以调整糖度的赋形剂可为异麦芽寡糖。
在一些实施例中，佛手柑发酵汁液的pH值为3.7±1.0，且佛手柑发酵汁液的糖度为40±2。
在一些实施例中，佛手柑浸提液是将敲碎后的佛手柑颗粒佛手柑与水以1： 8-15的重量比例混合，再于80℃-95℃下浸提1小时以得到。在第一示范例中，佛手柑浸提液是由选自于中国台湾来源之佛手柑与水以1：8-15的重量比例混合，添加葡萄糖溶液将糖度调整为9，再于80℃-95℃下浸提1小时所得到
在一些实施例中，原料混合液的灭菌程序可为将原料混合液在80℃至100 ℃下灭菌0.2小时至1小时，并将灭菌后的原料混合液冷却至室温(即25℃至 30℃)以形成佛手柑发酵汁液。在一些实施例中，灭菌后的原料混合液可采取自然降温的方式冷却至室温。
在一些实施例中，佛手柑发酵汁液具有改善肌肤老化之作用。在一些实施例中，改善肌肤老化可为抑制黑色素、抗醣化以及减少胶原蛋白分解或其组合。
除非文中有另外说明，于本说明书中所谓「肌肤」，系指一个体的肌肤，例如脸部肌肤或脸部之外部位的肌肤；所谓「肌肤老化」系指一个体受到外界因子或内在因子所导致的肌肤老化，外界因子可为紫外光、饮食习惯、作息习惯；内在因子可为压力，肌肤老化可指任何型态的肌肤机能下降，包括肌肤暗沉、肌肤胶原蛋白流失；所谓「个体」系指哺乳动物，该哺乳动物可以系人类或非人动物(例如：狗、猫)。
在一些实施例中，前述之任一组合物可为医药品。换言之，此医药品包含有效含量的佛手柑发酵汁液。
在一些实施例中，前述之医药品可利用熟习此技艺者所详知的技术而被制造成适合于经肠地道、非经肠地道(parenterally)、口服地、或局部地(topically) 投药剂型。
在一些实施例中，经肠道或口服的投药剂型可为，但不限于，锭剂(tablet)、片剂(troche)、口含锭(lozenge)、丸剂(pill)、胶囊(capsule)、分散性粉末(dispersiblepowder)或细颗粒(granule)、溶液、悬浮液(suspension)、乳剂(emulsion)、糖浆(syrup)、酏剂(elixir)、浓浆(slurry)或类似之物。在一些实施例中，非经肠地道或局部地投药剂型可为，但不限于，注射品 (injection)、无菌的粉末(sterile powder)、外部制剂(externalpreparation) 或类似之物。在一些实施例中，注射品的投药方式可为皮下注射(subcutaneous injection)、表皮内注射(intraepidermal injection)、皮内注射(intradermal injection) 或病灶内注射(intralesional injection)。
在一些实施例中，前述之医药品可包含被广泛地使用于药物制造技术之医药上可接受的载剂(pharmaceutically acceptable carrier)。在一些实施例中，医药上可接受的载剂可为下列载剂中一种或多种：溶剂(solvent)、缓冲液(buffer)、乳化剂(emulsifier)、悬浮剂(suspending agent)、分解剂(decomposer)、崩解剂(disintegrating agent)、分散剂(dispersing agent)、黏结剂(binding agent)、赋形剂、安定剂(stabilizing agent)、螯合剂(chelating agent)、稀释剂(diluent)、胶凝剂(gelling agent)、防腐剂(preservative)、润湿剂(wetting agent)、润滑剂(lubricant)、吸收延迟剂(absorptiondelaying agent)、脂质体(liposome) 以及类似之物。关于选用之载剂的种类与数量是落在熟习此项技术之人士的专业素养与例行技术范畴内。在一些实施例中，作为医药上可接受的载剂的溶剂可为水、生理盐水(normal saline)、磷酸盐缓冲液(phosphate bufferedsaline， PBS)、或含有醇的水性溶液(alcohol containing aqueous solution)。
在一些实施例中，前述之任一组合物可为食用组合物。换言之，食用组合物包含特定含量的佛手柑发酵汁液。在一些实施例中，前述之食用组合物可为食品产品或食品添加物(food additive)。在一些实施例中，食品产品可为但不限于：饮料(beverages)、发酵食品(fermented foods)、烘培产品(bakery products)、健康食品(health foods)或膳食补充品(dietary supplements)。
在一些实施例中，前述之食用组合物可以口服方式施予受体。其中，食用组合物的型态可为粉末、颗粒、溶液、胶体或膏体。
在一些实施例中，前述之任一组合物可为化妆品或保养品。换言之，化妆品或保养品包含特定含量的佛手柑发酵汁液。
在一些实施例中，前述之化妆品或保养品可为下列任一种型态：化妆水、凝胶、冻膜、泥膜、乳液、乳霜、唇膏、粉底、粉饼、蜜粉、卸妆油、卸妆乳、洗面奶、沐浴乳、洗发精、护发乳、防晒乳、护手霜、指甲油、香水、精华液及面膜。在一些实施例中，前述之化妆品或保养品可视需要更包含外用品可接受成分。在一些实施例中，外用品可接受成分可例如为乳化剂、渗透促进剂、软化剂、溶剂、赋型剂、抗氧化剂、或其组合。
实施例一：佛手柑发酵汁液的制备
首先，将采购自中国台湾嘉义的的佛手柑敲碎成佛手柑颗粒后与水以1:10的重量比(即，佛手柑为一倍重量，水为十倍重量)的比例混合均匀成佛手柑基液。接着，添加葡萄糖溶液将佛手柑基液的糖度调整为9.0°Bx，接着，将佛手柑基液于95℃下浸提1小时，得到佛手柑浸提液。
接着，于佛手柑浸提液中同时殖入0.1％啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)(购自食品工业发展研究所生物资源保存及研究中心(BCRC，寄存编号BCRC20271)，以及0.05％的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)(购自 BCRC，寄存编号BCRC910882)，并在约30℃下发酵3天，以得到第一初发酵汁液。接着，于第一初发酵汁液中殖入10％乙酸醋酸菌(Acetobacter aceti) (购自BCRC，寄存编号BCRC11688)并在约30℃下发酵3天，以得到第二初发酵汁液。
再将第二初发酵汁液在约60℃下进行减压浓缩，并以目数200的网孔的滤网过滤，以得到发酵原液。最后，添加60％异麦芽寡糖至发酵原液后在约100 ℃下灭菌2小时，以得到佛手柑发酵汁液。
于此，分别对佛手柑浸提液、发酵原液以及佛手柑发酵汁液进行糖度检测。其中，佛手柑原料混合液的糖度约为9.0°Bx，发酵原液的糖度约为3.5°Bx，以及佛手柑发酵汁液的糖度约为40°Bx。
实施例二：佛手柑浸提液(无发酵)的制备
将佛手柑敲碎成佛手柑颗粒后，取1重量份的佛手柑颗粒及10重量份的水混合成佛手柑基液。接着，添加葡萄糖溶液将佛手柑浸提原液的糖度调整为9.0 °Bx，接着，将佛手柑浸提原液于95℃下浸提1小时，得到佛手柑浸提液。于此实施例所致制备的佛手柑浸提液与实施例一所述的佛手柑浸提液本质上相同，皆未经过发酵处理。
实施例三：评估佛手柑发酵汁液对于自生黑色素累积的调控
于此，所使用培养基为添加有10体积％胎牛血清蛋白(fetal bovine serum，FBS；品牌：Gibco)及1体积％盘尼西林-链霉素(penicillin/streptomycin，品牌：Gibco)的DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle Medium；品牌：Gibco)，以下称基础培养基。所使用的细胞株为小鼠黑色素瘤细胞株B16F10(购自美国典型培养物保存中心(ATCC)，编号CRL-6475)，以下称B16F10细胞。
将B16F10细胞以每孔1.5×105个细胞的细胞数接种于含有3mL基础培养基的6孔培养盘的各孔中，并置于37℃下培养24小时。
在培养24小时后，将B16F10细胞分成4个组别：二个实验组(实验组A、实验组B)、一个对照组以及一个控制组。移除各组别的基础培养基，并更换成每孔3mL实验培养基，然后置于37℃下接续培养48小时。其中，实验组 A的实验培养基为含有0.25体积％实施例二所制备的佛手柑浸提液(未发酵处理)的基础培养基。实验组B的实验培养基为含有0.25体积％实施例一所制备的佛手柑发酵汁液的基础培养基。对照组的实验培养基为含有0.25体积％曲酸 (kojic acid)的基础培养基。控制组的实验培养基为单纯的基础培养基(即不含佛手柑浸提液，不含佛手柑发酵汁液，也不含曲酸)。
于培养48小时后，移除各孔中的实验培养基并以1倍(1x)的磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline，PBS，品牌：Gibco)润洗二次。于冲洗后，将胰蛋白酶(trypsin)加入至各孔中以处理细胞3分钟。于3分钟处理后，将各孔的悬浮的细胞个别收集于15mL离心管中，接而以400xg离心5分钟以分离细胞沉淀物(cell pellet)与上清液。透过1xPBS再悬浮细胞沉淀物及离心反复进行二次后，以200μL的1xPBS再悬浮细胞沉淀物，以得到细胞溶液。接着，将细胞溶液于液态氮中放置10分钟，接而于室温下静置30分钟进行解冻。在解冻完全之后，各离心管以12,000xg离心30分钟。于30分钟离心后，移除各离心管中上清液并添加入120μL 1N NaOH(配于ddH2O)以与各离心管中的沉淀物进行混合。在混合均匀之后，将含有混合溶液的各离心管于60℃干浴槽中静置1小时。之后，从各离心管中取100μL混合溶液至96孔培养盘中并于405nm的波长下以ELISA(enzyme-linked immunosorbentassay，酵素结合免疫吸附法)读取仪(厂牌：BioTek)来读取96孔培养盘中各孔的吸光值(OD405)。
于量测后，将所测得的吸光值代入下列公式(1)计算出黑色素含量相对百分比(％)。换言之，于此，是将控制组的黑色素含量视为1(即控制组的黑色素含量相对百分比为100％)来计算各组别的相对黑色素含相对百分比(％)。并且，各组之间的统计学显著差异是藉由学生t-试验(student t-test)来统计分析，如图1所示。在图1中，「*」代表在与控制组比较下其p值小于0.05，「**」代表在与控制组比较下其p值小于0.01，「###」代表在与实验组A比较下其p 值小于0.001。
公式(1)
黑色素含量相对百分比(％)＝(OD405sample/OD405control)×100％(1)
请参照图1。相较于控制组，实验组A的黑色素含量相对百分比为106.16％，实验组B的黑色素含量相对百分比为82.79％，而对照组的黑色素含量相对百分比为90.58％。换言之，实验组A的黑色素含量增加了6.16％，实验组B降低 17.71％的黑色素生成，而对照组降低9.42％的黑色素生成。于此，相较于控制组，实验组A的黑色素含量反而上升，相较于控制组及对照组，以佛手柑发酵汁液作为实验样品的实验组B的黑色素含量相对百分比均有显著地降低。由此可知，相较于曲酸，佛手柑发酵汁液能更有效抑制自生黑色素生成。
基于此，佛手柑发酵汁液能用以抑制细胞自生黑色素生成，进而具有改善肌肤状况、改善肌肤老化的作用。
实施例四：评估佛手柑发酵汁液对于UV所致的黑色素的累积调控
除了实施例三测试佛手柑发酵汁对于自生黑色素的调控外，此处更进一步测试佛手柑发酵汁对于UV光(紫外线)诱发黑色素的作用。
于此，所使用培养基为添加有10体积％胎牛血清蛋白(fetal bovine serum，FBS；品牌：Gibco)及1体积％盘尼西林-链霉素(penicillin/streptomycin，品牌：Gibco)的DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle Medium；品牌：Gibco)，以下称基础培养基。所使用的细胞株为小鼠黑色素瘤细胞株B16F10(购自美国典型培养物保存中心(ATCC)，编号CRL-6475)，以下称B16F10细胞。
将B16F10细胞以每孔1.5×105个细胞的细胞数接种于含有3mL基础培养基的6孔培养盘的各孔中，并置于37℃下培养24小时。
在培养24小时后，将B16F10细胞分成4个组别：二个实验组(实验组A、实验组B)、一个对照组以及一个控制组。移除各组别的基础培养基，并更换成每孔3mL实验培养基，然后将对照组及二个实验组置于紫外线链结箱 (Cleaver Scientific；Cat.CL-508)以UVA照射(剂量8J/cm2)(控制组并未以 UVA照射)，接着将各组于37℃下接续培养48小时。其中，实验组A的实验培养基为含有0.25体积％实施例二所制备的佛手柑浸提液(未发酵处理)的基础培养基。实验组B的实验培养基为含有0.25体积％实施例一所制备的佛手柑发酵汁液的基础培养基。对照组及控制组的实验培养基为单纯的基础培养基 (即不含佛手柑浸提液，不含佛手柑发酵汁液)。
于培养24小时后，移除各孔中的实验培养基并以1倍(1x)的磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline，PBS，品牌：Gibco)润洗二次。于冲洗后，将胰蛋白酶(trypsin)加入至各孔中以处理细胞3分钟。于3分钟处理后，将各孔的悬浮的细胞个别收集于15mL离心管中，接而以400xg离心5分钟以分离细胞沉淀物(cell pellet)与上清液。透过1xPBS再悬浮细胞沉淀物及离心反复进行二次后，以200μL的1xPBS再悬浮细胞沉淀物，以得到细胞溶液。接着，将细胞溶液于液态氮中急冻30秒后，接而于室温下静置30分钟进行解冻。在解冻完全之后，各离心管以14,000xg离心30分钟。于30分钟离心后，移除各离心管中上清液并添加入120μL 1N NaOH(配于ddH2O)以与各离心管中的沉淀物进行混合。在混合均匀之后，将含有混合溶液的各离心管于60℃干浴槽中静置1小时。之后，从各离心管中取100μL混合溶液至96孔培养盘中并于 405nm的波长下以ELISA(enzyme-linked immunosorbentassay，酵素结合免疫吸附法)读取仪(厂牌：BioTek)来读取96孔培养盘中各孔的吸光值(OD405)。
于量测后，将所测得的吸光值代入下列公式(2)计算出UVA造成的黑色素含量相对百分比(％)，如图2所示(图2及公式(2)标示为「黑色素含量相对百分比」)。换言之，于此，是将控制组的黑色素含量视为1(即控制组的黑色素含量相对百分比为100％)来计算各组别的相对黑色素含相对百分比 (％)。并且，各组之间的统计学显著差异是藉由学生t-试验(student t-test) 来统计分析。在图2中，「###」代表在与控制组比较下其p值小于0.001，「**」代表在与对照组比较下其p值小于0.01，「***」代表在与对照组比较下其p 值小于0.001，「※」代表在与实验组A比较下其p值小于0.05。
公式(2)
黑色素含量相对百分比(％)＝(OD405sample/OD405control)×100％(2)
请参照图2。相较于控制组，实验组A的黑色素含量相对百分比为110.16％，实验组B的黑色素含量相对百分比为100.00％，而对照组的黑色素含量相对百分比为120.85％。换言之，当以UVA处理后，对照组的黑色素含量相对百分比相较于控制组提高了20.85％，而实验组A以UVA及佛手柑浸提液(未发酵处理)作共同处理后，实验组A的黑色素含量相对百分比相较于控制组仅提高了 10.16％，而实验组以UVA及佛手柑发酵汁液共同处理后，实验组B的黑色素含量相对百分比相较于控制组并无提高。由此可知，相较于对照组，实验组A 的UVA造成的黑色素生成有显著地被抑制20.85％，代表佛手柑发酵汁液能有效抑制UVA造成的黑色素生成。
基此，佛手柑发酵汁液能用以抑制UVA造成的黑色素生成，进而具有改善肌肤状况的作用及改善肌肤老化的作用。
实施例五：佛手柑发酵汁液抗醣化功效的测试
以200mM磷酸钠缓冲液(Sodium phosphate buffer，pH7.4)、迭氮化钠(Sodiumazide，NaN3)与牛血清白蛋白(Bovine serum albumin，BSA，品牌： Gibco)配置含有0.06％NaN3的60mg/mL BSA溶液。
以200mM磷酸钠缓冲液与D果糖(D-(-)-Fructose，C6H12O6)配置1.5M D-fructose溶液。
以200mM磷酸钠缓冲液与氨基胍盐酸盐(Aminoguanidine hydrochloride， AG，CH6N4·HCl)配置3mM AG溶液。
取0.25mL实施例二中所得到的佛手柑浸提液加入0.25mL BSA溶液与 D-fructose溶液并均匀混合以得到实验组A的待测溶液。
取0.25mL实施例一中所得到的佛手柑发酵汁液加入0.25mL BSA溶液与 D-fructose溶液并均匀混合以得到实验组B的待测溶液。
取0.25mL之3mM AG溶液加入0.25mL BSA溶液与D-fructose溶液并均匀混合以得到空白组的待测溶液。
取0.1mL各组别的待测溶液作为各组别的零点溶液。使用荧光分光亮度计(Thermo Fisher Scientific)对0.1mL各组别的零点溶液以360nm之激发光以及 460nm之放射光测定其荧光值，以得到反应前之零点之荧光值。
取0.45mL各组别的待测溶液于50℃下培养24小时，以得到各组别的终点溶液。取0.1mL各组别的终点溶液并使用荧光分光亮度计对0.1mL各组别的终点溶液以360nm之激发光以及460nm之放射光测定其荧光值，以得到反应之终点之荧光值。
然后根据下列公式(3)计算各组别的相对醣化终产物(Advanced Glycation Endproducts，AGEs)的形成量(％)，以得知其抗醣化活性(Antiglycative activity)。换言之，于此，是将空白组的AGEs形成量视为1(即空白组的相对AGEs形成量为100％)来计算各组别的相对AGEs形成量(％)。
Figure BDA0002675696220000111
其中，Fluorescence sample 24hr代表实验组的终点之荧光值，Fluorescencesample 0hr代表实验组的零点之荧光值，Fluorescence control 24hr代表空白组的终点之荧光值，Fluorescence control 0hr代表空白组的零点之荧光值。
参照图3，相较于空白组，实验组A(佛手柑浸提液(未发酵处理))明显减少69％的醣化终产物的形成量，而实验组B(佛手柑发酵汁液)明显减少 91％的醣化终产物的形成量。由此可知，佛手柑发酵汁液能有效抑制醣化终产物的形成，即具有抗醣化的作用。
实施例六：抗UVB所致基质金属蛋白酵素9(MMP9)生成检测
MMP-9基因属于基质金属蛋白酶(matrix metalloprotein，MMPs)家族，其主要功能是降解和重塑细胞外基质(extracellular matris)的动态平衡。目前已分离出廿八种MMPs，包括：胶原蛋白酶(collagenase)、胶质酶(gelatinase)、基质酶 (stromelycin)、基酶(matrilysin)、与膜型MMP(transmembrane type-MMP)。MMP-9 系属于胶质酶，亦称为明胶蛋白酶。
细胞外基质(Extra cellular Matrix)主要由胶原蛋白、弹性蛋白、糖蛋白和蛋白多糖4种组成分子组成，不同组织器官，各种组成成分比例不同。较为人知的是，若皮肤少了胶原蛋白的支撑，则皮肤外观会变得松弛且缺乏弹性。UV 照射或发炎反应都会促使MMPs过度表现，在这种情况下，MMPs几乎可分解所有细胞外间质、降解结缔组织中的蛋白质结构；其中，细胞外间质之中的胶原蛋白便系由MMP-9所分解、破坏。
因此本案之发明人系藉由实施例六来研究佛手柑发酵汁液对于MMP-9表现量之抑制效果。
于此，所使用培养基为含10％(v/v)的胎牛血清(fetal calf serum，FBS)、0.37％(w/v)的NaHCO3、100units/ml的盘尼西林(penicillin)、100units/ml的链霉素(streptomycin)、0.1mM的NEAA(non-essential amino acid solution，非必需氨基酸溶液)、1Mm的丙酮酸钠(sodium pyruvate)、以及0.03％的L-谷氨酰胺 (L-glutamine)的MEM(minimum essential medium)培养液，以下称基础培养基。所使用的细胞株为附着性人类纤维母细胞CCD-966sk(human normal skin fibroblasts)(购自BCRC，编号60153)，以下称人类纤维母细胞。
将CCD-966sk细胞以每孔2.0×105个细胞的细胞数接种于含有2mL基础培养基的6孔培养盘的各孔中，并置于37℃下培养24小时。
在培养24小时后，将CCD-966sk细胞分成4个组别：二个实验组(实验组A、实验组B)、一个对照组以及一个控制组。移除各组别的基础培养基，并更换成每孔3mL实验培养基，然后将对照组及二个实验组置于紫外线链结箱 (Cleaver Scientific；Cat.CL-508)以UVB照射(剂量50J/cm2)(控制组并未以UVB照射)，接着将各组于37℃下接续培养48小时。其中，实验组A的实验培养基为含有0.25体积％实施例二所制备的佛手柑浸提液(未发酵处理)的基础培养基。实验组B的实验培养基为含有0.25体积％实施例一所制备的佛手柑发酵汁液的基础培养基。对照组及控制组的实验培养基为单纯的基础培养基(即不含佛手柑浸提液，不含佛手柑发酵汁液)。
于培养24小时后，移除各孔中的实验培养基并以1倍(1x)的磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline，PBS，品牌：Gibco)润洗二次。于冲洗后，将胰蛋白酶(trypsin)加入至各孔中以处理细胞3分钟。于3分钟处理后，将各孔的悬浮的细胞个别收集于1.5mL离心管中，接而以400xg离心5分钟以分离细胞沉淀物(cell pellet)与上清液。透过1xPBS再悬浮细胞沉淀物及离心反复进行二次后，以200μL的1xPBS再悬浮细胞沉淀物，以得到细胞溶液。接着，将50μL的RIPA裂解液添加进细胞溶液中，以14,000xg离心30分钟。于30 分钟离心后，收集离心管中上清液，并以MMP9 ELISA套组(厂牌USCN，型号SEA553Hu)依照其使用手册的标准程序进行检测，检测最终是以450nm的波长下以ELISA(enzyme-linkedimmunosorbent assay，酵素结合免疫吸附法)读取仪(厂牌：BioTek)来读取96孔培养盘中各孔的吸光值(OD450)。
于量测后，将所测得的吸光值代入下列公式(4)计算出UVB造成的MMP9 生成相对百分比(％)，如图4所示(图4及公式(4)标示为「MMP9生成相对百分比」)。换言之，于此，是将控制组的MMP9含量视为1(即控制组的 MMP9含量相对百分比为100％)来计算各组别的相对MMP9含量相对百分比 (％)。并且，各组之间的统计学显著差异是藉由学生t-试验(studentt-test) 来统计分析。在图4中，「**」代表在与控制组比较下其p值小于0.01、「#」代表在与对照组比较下其p值小于0.05、「###」代表在与对照组比较下其p 值小于0.001、「※」代表在与实验组A比较下其p值小于0.05。。
公式(4)
MMP9含量相对百分比(％)＝(OD450sample/OD450control)×100％(4)
请参照图4。相较于控制组，实验组A的MMP9含量相对百分比为105.52％，实验组B的MMP9含量相对百分比为93.45％，而对照组的黑色素含量相对百分比为122.07％。换言之，当以UVB处理后，对照组的MMP9含量相对百分比相较于控制组提高了22.07％，而实验组A以UVB及佛手柑浸提液共同处理后，实验组A的MMP9含量相对百分比相较于对照组下降16.55％，而实验组 B以UVB及佛手柑发酵汁液共同处理后，实验组B的MMP9含量相对百分比相较于对照组下降28.62％。由此可知，相较于对照组，实验组B的UVB造成的MMP9生成有显著地被抑制28.62％，代表佛手柑浸提液能有效抑制UVB造成的MMP9生成。
由于UVB的刺激下会造成MMP9的生成，进而分解胶原蛋白，基此，佛手柑发酵汁液能用以抑制UVB造成的MMP9生成，进而减少胶原蛋白的分解，具有改善肌肤状况，改善肌肤老化的作用。
综上所述，根据本发明任一实施例的佛手柑发酵汁液，其可制备改善改善肌肤老化的组合物。换言之，前述之组合物具有下列一种或多种功能：抑制黑色素、抗醣化以及减少胶原蛋白分解。
当然，本发明还可有其它多种实施例，在不背离本发明精神及其实质的情况下，熟悉本领域的技术人员可根据本发明作出各种相应的改变和变形，但这些相应的改变和变形都应属于本发明权利要求的保护范围。

Claims (9)

1.一种佛手柑发酵汁液的用途，其特征在于，其是用于制备用以改善肌肤老化的组合物，其中该佛手柑发酵汁液是由一佛手柑浸提液经由啤酒酵母、干酪乳杆菌及乙酸醋酸菌进行一发酵所得。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，该改善肌肤老化为抑制黑色素、抗醣化或减少胶原蛋白分解或其组合。
3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，该抑制黑色素为减少黑色素瘤细胞株的自生黑色素及/或减少紫外光诱导黑色素瘤细胞株生成的黑色素。
4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，该紫外光为UVA。
5.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，该减少胶原蛋白分解为抑制基质金属蛋白酵素9的含量。
6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，该啤酒酵母相对于该佛手柑浸提液的添加量为0.01％-0.5％(v/v)，该干酪乳杆菌相对于该佛手柑浸提液的添加量为0.01％-0.25％(v/v)，该乙酸醋酸菌相对于该佛手柑浸提液的添加量为1％-15％(v/v)。
7.根据权利要求1至6所述的用途，其特征在于，该发酵的时间为4-8天。
8.根据权利要求1至6所述的用途，其特征在于，该佛手柑发酵汁液的有效浓度至少为0.25％(v/v)。
9.根据权利要求1至6所述的用途，其特征在于，该佛手柑发酵汁液的糖度为40±2。
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI830382B (zh) * 2021-09-15 2024-01-21 大江生醫股份有限公司 秋姬李發酵物、其製作方法和其用途

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1992322A1 (en) * 2007-05-11 2008-11-19 Dr. Scheller Cosmetics AG Composition for percutaneous application
CN109394850A (zh) * 2018-12-17 2019-03-01 温州古木生物科技有限公司 一种具有延缓皮肤老化功效的中药组合物及其水提物和发酵物及应用

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100531472B1 (ko) * 2002-08-09 2005-11-28 주식회사 이롬 항산화 활성을 가지는 찔레나무 추출물을 포함하는 화장품 조성물 및 상기 추출물의 제조방법
CN101002841B (zh) * 2006-12-27 2010-09-15 中国科学院新疆理化技术研究所 玫瑰花有效部位及其制备方法
CN100572515C (zh) * 2008-11-16 2009-12-23 兰州大学 一种从苦水玫瑰花中提取玫瑰精油及系列产品的方法
KR20110072153A (ko) * 2009-12-22 2011-06-29 충북대학교 산학협력단 백장미 꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물
TW201129325A (en) * 2010-02-23 2011-09-01 Yong-Zhen Chen Method for making herbal enzyme
CN101831354A (zh) * 2010-04-22 2010-09-15 云南玫瑰庄园酒业有限责任公司 鲜玫瑰萃取液的提取方法
TW201509438A (zh) * 2013-09-06 2015-03-16 Li-Ren Wang 促進毛髮增生之植物組成物
CN104367527A (zh) * 2014-10-23 2015-02-25 青岛克立克信息技术有限公司 一种高效去角质面膜
CN105154278A (zh) * 2015-07-23 2015-12-16 金华职业技术学院 一种佛手柑橘酒及其发酵方法
CN105250180B (zh) * 2015-11-09 2018-11-27 北京工商大学 一种玫瑰鲜活水及其制备方法与应用
CN106306934A (zh) * 2016-08-13 2017-01-11 安庆市老杨埠农业科技有限公司 一种发酵型佛手柑金珠果复合饮料及其制备工艺
CN106474016A (zh) * 2016-12-16 2017-03-08 深圳市聚华太科技有限公司 一种头皮外用组合物及头皮滋养液
CN108175723A (zh) * 2017-12-11 2018-06-19 百朗德生物化学(海门)有限公司 具有美白和防止皮肤老化的组合物及其在化妆品中的应用
CN108485846A (zh) * 2018-03-22 2018-09-04 辽宁法奈迪生物工程有限公司 一种天然保湿抗氧化的洗脸皂及制备方法
CN110592151B (zh) * 2019-09-16 2020-06-30 哈尔滨美华生物技术股份有限公司 乳酸菌生产高含γ-氨基丁酸发酵液及其在化妆品中的应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1992322A1 (en) * 2007-05-11 2008-11-19 Dr. Scheller Cosmetics AG Composition for percutaneous application
CN109394850A (zh) * 2018-12-17 2019-03-01 温州古木生物科技有限公司 一种具有延缓皮肤老化功效的中药组合物及其水提物和发酵物及应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
邵邻相等: "佛手提取液对小鼠皮肤胶原蛋白含量影响的研究", 《日用化学工业》 *

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